Ficha Cromo ID Ottaviani

bioMérieux SA Español - 1

REF 43 641 / 43 649 12695 H - es - 2011/06

Medio chromID™ Ottaviani Agosti (OAA) Para control microbiológico exclusivamente Medio cromogénico para el aislamiento selectivo, recuento e identificación presuntiva de Listeria monocytogenes y otras Listeria spp en productos alimenticios y muestras de ambientes de producción agroalimentaria.

RESUMEN Y EXPLICACIÓN El medio chromID™ Ottaviani Agosti (1) es un medio cromógeno destinado al aislamiento selectivo, al recuento y a la identificación presuntiva de Listeria monocytogenes y otras Listeria spp. en productos alimenticios y en muestras medio-ambientales de producción agro-alimentaria (2). Cumple las normas EN ISO 11290-1/A1 y 11290-2/A1 (3, 4, 5, 6) y está descrito en el Manual Analítico de Bacteriología (7). Además se puede usar siguiendo varios protocolos certificados NF VALIDATION y AOAC RI:

- protocolo corto para la detección de Listeria monocytogenes.

- protocolo simplificado para recuento de Listeria monocytogenes.

- protocolo corto para la detección de Listeria spp.

PRINCIPIO El medio chromID™ Ottaviani Agosti contiene una base nutritiva que asocia diferentes peptonas y dos substratos, uno de ellos cromógeno. Esto favorece el crecimiento de todas las Listeria spp. y revela la presencia de ciertas actividades enzimáticas. Todas las especies de Listeria se desarrollan en el medio, dando colonias azul-turquesa (actividad glucosidasa). La diferenciación de Listeria monocytogenes se basa en la aparición de un halo opaco alrededor de la colonia (actividad fosfolipasa C) (1, 8). La mezcla selectiva permite inhibir a la mayoría del resto de las bacterias y levaduras.

CONTENIDO DEL KIT

Medio listo al empleo REF 43 641 2 x 10 placas (90 mm) REF 43 649 10 x 10 placas (90 mm) OAA *

* Distintivo impreso en cada placa

COMPOSICIÓN Fórmula teórica (3, 5). Este medio puede ser ajustado y/o suplementado en función de los criterios de prestaciones requeridas (9): Peptona de caseína y de carne (bovina y porcina) ............................24 g Extracto de levadura .........................................................................10 g Piruvato sódico ....................................................................................2 g Glucosa ...............................................................................................2 g Glicerofosfato de magnesio .................................................................1 g Sulfato de magnesio .........................................................................0,5 g Cloruro sódico .....................................................................................5 g Cloruro de litio ...................................................................................10 g Hidrogenofosfato disódico ................................................................2,5 g 5-bromo-4-cloro-3- indol-β-D-glucopiranósido ................................0,05 g L- α- fosfatidil-inositol...........................................................................2 g Ácido nalidíxico...............................................................................0,02 g Ceftazidima.....................................................................................0,02 g Sulfato de polimixina B ............................................................... 76700 U Cicloheximida ................................................................................0,05 g Agar...................................................................................................13 g Agua purificada .....................................................................................1l

pH 7,2

Agar de color amarillo pálido, opaco

REACTIVOS Y MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO Reactivos:

Los siguientes reactivos se indican a modo de orientación: • Caldo Fraser-Semi (frascos ref. 42 048 y 42 615,

tubos ref. 42 112, bolsas ref. 42 627 y minibolsas ref. 42 727).

• Caldo Fraser (ref. 42 072). • Agua de peptona tamponada (frascos ref. 42 042, 42 043, bolsas ref. 42 629 y minibolsas ref. 42 729). • Agar PALCAM (ref. 43 559). • Agar Oxford (ref. 43 560). • Agar Tripticasa Soja (ref. 43 011). • Agar Tripticasa Soja + sangre de cordero (ref. 43

001). • Solución salina de peptona o Triptona Sal (ref. 42

076).

Material: • Estufa bacteriológica para incubación a 30 ºC, 35 ºC

y 37 ºC.

OTROS REACTIVOS Y MATERIALES POSIBLES • RAPIDEC® Lmono (ref. 03 700). • API® Suspension Medium 2 ml (ref. 70 700). • Varillas agitadoras desechables. • API® Listeria (ref. 10 300). • AccuProbe Listeria monocytogenes (ref. 39 500). • ID Color Catalasa (ref. 55 561). • VIDAS® LMO2 (ref. 30 704)

ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES • Para control microbiológico exclusivamente. • Únicamente para uso profesional. • Este kit contiene productos de origen animal. Aunque

se conozcan la procedencia o el estado sanitario de los animales por los correspondientes certificados, la ausencia de agentes patógenos transmisibles no está totalmente garantizada. Así pues, se recomienda tratar estos productos como potencialmente infecciosos y manipularlos con las precauciones de seguridad habituales (no ingerir ni inhalar).

• Todas las muestras, cultivos microbianos y productos inoculados deben considerarse infecciosos y manipularse adecuadamente. Deben seguirse durante todo el procedimiento la técnica aséptica y las precauciones habituales de manipulación del grupo bacteriano objeto de estudio. Consulte la última actualización de "CLSI® M29-A, Protection of Laboratory Workers From Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline". Para obtener más información sobre precauciones de manipulación, consulte la última edición de "Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories – CDC/NIH" o la normativa vigente en el país correspondiente.

• Deben seguirse las Buenas Prácticas de Laboratorio (p. ej. la norma ISO 7218) (10).

Medio chromID™ Ottaviani Agosti (OAA) 12695 H - es - 2011/06


• Listeria monocytogenes puede causar enfermedades

graves en los grupos de riesgo, como son las mujeres embarazadas, las personas inmunodeprimidas y los ancianos.

• Es fundamental tener en cuenta el tiempo necesario para que las soluciones alcancen la temperatura, especialmente si las matrices están congeladas, y emplear caldos que hayan alcanzado la temperatura ambiente. Los tiempos de incubación deberían calcularse desde el momento en que la temperatura se acerca a la temperatura ambiente.

• Los medios de cultivo no deben utilizarse como materiales o componentes de fabricación.

• No utilice las placas después de la fecha de caducidad. • No utilice las placas si su envase está dañado. • No utilice placas contaminadas o placas que exuden humedad. • El uso de este medio puede ser complicado para

aquellas personas que tengan dificultades en la apreciación de colores.

• Este medio debe utilizarse según el procedimiento detallado en este prospecto. Toda modificación del procedimiento puede afectar a los resultados.

CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO • Almacene las placas en su envase a 2-8 °C hasta

la fecha de caducidad. • Conservar protegido de la luz. • Los medios no se alteran si se mantienen a

temperatura ambiente y expuestos a la luz, durante no más de 24 horas antes de ser utilizados.

• La duración de conservación de las placas fuera de su envase, en bolsa de celofán, es de 2 semanas a 2-8°C.

MUESTRAS Seguir las recomendaciones de las normas en vigor para la realización de la recogida de muestras y la preparación de las muestras. Conviene respetar las correctas prácticas de laboratorio en términos de recogida de muestras y de transporte, adaptadas a cada tipo de muestra.

MODO DE EMPLEO Espere a que las placas de agar, caldos de enriquecimiento y los diluyentes alcancen la temperatura ambiente.

I- Método normalizado ISO: a) Para la detección de Listeria monocytogenes según la metodología descrita en la norma EN ISO 11290-1/A1:2005 (3, 4) :

Enriquecimiento primario: 1. Proceder al enriquecimiento selectivo primario en

un caldo Fraser-Semi (dilución al 1/10). 2. Incubar 24 ± 2 horas a 30 ± 1°C. 3. Sembrar una placa de agar chromID™ Ottaviani

Agosti y una placa de otro agar selectivo (Agar PALCAM, Oxford….).

4. Incubar el agar OAA a 37 ± 1°C durante 24 ± 3 horas y 24 ± 3 horas suplementarias si es necesario. Incubar el segundo medio según las recomendaciones del fabricante.

Enriquecimiento secundario: 5. Proceder al enriquecimiento selectivo secundario

en 10 ml de caldo Fraser a partir de 0,1 ml del enriquecimiento primario.

6. Incubar 48 ± 2 horas a 37 ± 1°C. 7. Sembrar una placa de agar OAA y una placa de

otro agar selectivo (Medio PALCAM, Oxford….) a partir del enriquecimiento secundario.

8. Incubar el agar OAA a 37 ± 1°C durante 24 ± 3 horas y 24 ± 3 horas suplementarias si es necesario. Incubar el segundo medio según las recomendaciones del fabricante.

b) Para el recuento de Listeria monocytogenes según la metodología descrita en la norma EN ISO 11290-2/A1:2005 (5, 6) : 1. Preparar la dilución 1/10 de la muestra en Agua de

peptona tamponada o Caldo Fraser sin antibióticos.

2. Dejar reposar durante 1 hora a 20°C, conforme la ISO 11290-2.

3. Sembrar 0,1 ml en dos placas de agar chromID™ Ottaviani Agosti por extensión en superficie. Repetir la operación con las diluciones decimales siguientes si es necesario. Conforme la norma ISO 7218 (9), es suficiente una placa por dilución, si se analizan dos diluciones sucesivas.

4. Dejar las placas aproximadamente 15 minutos a temperatura ambiente para que el inóculo se absorba.

5. Incubar a 37 ± 1°C durante 24 ± 3 horas y 24 ± 3 horas suplementarias si es necesario.

II- Método certificado NF VALIDATION y AOAC RI según las recomendaciones de la norma EN ISO 16140 (6):

a) Protocolo corto para la detección de Listeria monocytogenes y Listeria spp.: 1. Proceder al enriquecimiento de la muestra en

caldo Fraser-Semi (dilución al 1/10). 2. Incubar 24 ± 2 horas a 30 ± 1°C. 3. Sembrar 100 μl en una placa de medio chromID™

Ottaviani Agosti según el método descrito anteriormente.

4. Incubar el agar OAA a 37 ± 1°C (NF VALIDATION) o 35-37 °C (AOAC) durante 22 -26 horas.

Nota: Durante el procedimiento de obtención del certificado NF VALIDATION, no se realizaron ensayos de muestras con volúmenes mayores de 25 g. Nota: Para recoger muestras ambientales de superficies, el dispositivo de toma de muestras debe humedecerse con un diluyente estéril (p. ej. agua de peptona tamponada) que contenga, si fuera necesario, un agente neutralizante adecuado (p. ej. mezcla de lecitina-polisorbato-L-histidina-tiosulfato de sodio o Dey-Engley para protocolo AOAC). Tras recoger la muestra, introduzca el dispositivo en un volumen adecuado de caldo de enriquecimiento o diluyente (p. ej. hisopo en 10 ml, esponja en 100 ml)



Método de siembra: 1. Depositar 100 μl sobre la sección 1 del agar. 2. Extender la siembra sobre la sección 1 mediante el

uso de un asa estéril. 3. Cambiar de asa. 4. Sembrar la sección 2 mediante 10 estrías utilizando

la siembra extendida sobre la sección 1.

Nota: El método de aislamiento estándar (4 cuadrantes) realizado con cuidado, también ofrece buenos resultados. b) Protocolo simple para el recuento de Listeria monocytogenes: 1. Preparar la dilución inicial 1/10 de la muestra en

Agua de peptona tamponada o Caldo Fraser sin antibióticos.

2. Dejar reposar durante 1 hora a 20°C, conforme la ISO 11290-2 (9).

3. Sembrar 0,1 ml en una placa de agar chromID™ Ottaviani Agosti por extensión en superficie. Repetir el procedimiento con diluciones sucesivas si fuera necesario.

4. Dejar las placas aproximadamente 15 minutos a temperatura ambiente para que el inóculo se absorba.

5. Incubar las placas a 37 ± 1°C (NF VALIDATION) o 35-37 °C (AOAC). El recuento final se obtiene a las 48 ± 2 horas. No obstante, puede realizarse una lectura preliminar a las 24 ± 2 horas para detectar muestras muy contaminadas más rápidamente.

Nota: para determinados productos, si es necesario estimar recuentos bajos de Listeria monocytogenes, distribuir 1ml del inóculo en la superficie del agar en 3 placas chromID™ Ottaviani Agosti (90 mm), equivalentes a una placa de 140mm.

LECTURA E INTERPRETACIÓN: • Después de incubar, observar el crecimiento

bacteriano. • Observar y contar la presencia de colonias

características azul-turquesa rodeadas de un halo opaco: L. monocytogenes and L. ivanovii.

• Detección de Listeria: compruebe si hay colonias típicas de color azul-turquesa rodeadas o no de un halo opaco.

• La identificación de los microorganismos aislados debe ser confirmada por pruebas complementarias.

Confirmación de los resultados positivos a) Detección y recuento de Listeria monocytogenes: • En caso de usarse el protocolo normalizado de

identificación o recuento, confirmar las colonias sospechosas de Listeria monocytogenes (1 a 5 colonias típicas para identificación y 5 colonias para recuento), 24 horas después de la incubación o 48 horas después de la incubación si no apareciesen colonias típicas a las 24 horas.

• En el caso de usarse el protocolo corto de detección, o el protocolo simple de recuento certificado NF VALIDATION, confirmar de 1 a 5 colonias típicas sospechosas de Listeria monocytogenes, después de la incubación. Si la confirmación no se pudiera iniciar al término de la incubación, el agar OAA se debería almacenar a 2-8°C. La confirmación debe realizarse en el plazo de las 48 horas posteriores al término del período de incubación. Si la primera colonia diera un resultado negativo, proseguir con las otras 4.

Nota: si se identifica una colonia de Listeria monocytogenes al final del método de detección/recuento certificado según protocolo EN ISO 16140 (11), no es necesario confirmar las colonias obtenidas mediante el protocolo de detección/recuento si se realiza con la misma muestra.

Realice la confirmación siguiendo uno de los 5 métodos descritos a continuación: 1. Realización de pruebas convencionales descritas

en los métodos normalizados por CEN o ISO (incluido un paso de purificación) (4, 6).

2. RAPIDEC® L mono test Durante el procedimiento de obtención del certificado NF VALIDATION, se realizó una identificación directa de colonias sospechosas a partir de colonias típicas de Listeria monocytogenes aisladas. Si las colonias típicas no están aisladas, purifique realizando un subcultivo en un nuevo Agar chromID™ Ottaviani Agosti, un Agar Tripticasa Soja (TSA) o en una placa de agar sangre antes de la prueba de identificación. Es recomendable comprobar, en el medio de subcultivo seleccionado, que las colonias por identificar son aquellas que inicialmente eran típicas en el Agar chromID™ Ottaviani Agosti (siga las instrucciones del prospecto de RAPIDEC® L mono). Al realizar aislamientos en TSA o agar sangre, si no se obtiene un color verde tras 6h de incubación, ampliar la incubación a 24h a 37°C.

3. Galería API Listeria. Durante el procedimiento NF VALIDATION, se realizó directamente la identificación directa de colonias sospechosas a partir de colonias típicas de Listeria monocytogenes aisladas. Si las colonias típicas no están aisladas, purifique realizando un subcultivo antes de la prueba de identificación. Utilizando una colonia típica aislada de Listeria monocytogenes (azul turquesa con halo), prepare una suspensión en una ampolla de 2 ml de agua desmineralizada (API Suspension Medium) para inocular la galería API® (siga las instrucciones del prospecto de API® Listeria).

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Sin embargo es necesario volver a aislar sobre agar sangre para comprobar la pureza de la siembra, observar el tipo de hemólisis, realizar ensayos suplementarios (coloración Gram, catalasa, etc.). Si están presentes varios tipos de colonias sobre el agar sangre, repetir el test de identificación con una colonia aislada hemolítica.

4. Prueba de AccuProbe Listeria monocytogenes. La suspensión se puede preparar a partir de una colonia sospechosa aislada (aprox. 1 mm) o de varias colonias (3 ó 4) recogidas con ayuda de un asa si las colonias sospechosas no están bien aisladas.

5. VIDAS® LMO2. Prepare una suspensión en 2 ml de Solución salina de peptona o Caldo Triptona Sal con una colonia típica (aislada o no). Dosifique 0,5 ml de esta suspensión en el pocillo de la muestra del cartucho VIDAS® LMO2 y realice el test VIDAS®. Un resultado positivo confirma la presencia de Listeria monocytogenes

Nota: Si se obtuviesen resultados discrepantes (presencia de colonias azules con un halo, no confirmadas como L. monocytogenes por el método de confirmación utilizado), el laboratorio debe tomar las medidas necesarias para garantizar que los resultados obtenidos sean exactos. Por ejemplo en presencia de L.ivanovii.

b) Detección de Listeria spp: • Si se emplea el protocolo corto certificado NF

VALIDATION, confirmar de 1 a 5 colonias típicas sospechosas de Listeria spp (azules o verde-azuladas con o sin halo), tras 22-26 horas de incubación. Si la confirmación no se pudiera iniciar al término de la incubación de 24 ± 2h, el agar OAA se debería almacenar a 2-8°C. La confirmación debe realizarse en el plazo de las 48 horas posteriores al término del período de incubación. Si la primera colonia diera un resultado negativo, proseguir con las otras 4.

Realice la confirmación siguiendo uno de los métodos descritos a continuación: 1. Confirmación del género mediante los test descritos

en las normas CEN o ISO (tinción Gram, catalasa y test de la motilidad, si es necesario) incluyendo una etapa de purificación (10).

2. Confirmación del género, sin etapa de purificación mediante una tinción Gram y realizando la catalasa directamente sobre las colonias aisladas con el reactivo ID catalasa.

3. Desde una colonia aislada, sembrar una placa PALCAM en estrías (hasta 15 estrías por placa). Incubar el medio 24 ± 2 h a 37 ± 1°C. La presencia de colonias típicas confirma el género Listeria.

c) Detección de Listeria monocytogenes y Listeria spp. y recuento de Listeria monocytogenes según protocolo validado AOAC: Confirme las colonias sospechosas típicas de Listeria monocytogenes (de 1 a 5 colonias), empleando el caldo Fraser-Semi no calentado almacenado a 2-8°C. La confirmación debería iniciarse dentro de las 48 horas siguientes al final del periodo de incubación a 30 ° C.

- Para productos cárnicos y muestras ambientales, siga los test descritos en la guía USDA/FSIS Microbiology Laboratory Guidebook (12).

- Para el resto de productos, siga los test bioquímicos descritos en AOAC Official Method 993.12 (13) o en el capítulo 10 del Bacteriological Analytical Manual (7). Dentro de la validación AOAC también se contempla el uso de VITEK® 1, VITEK® 2 GP, RAPIDEC® Lmono y API® Listeria.

CONTROL DE CALIDAD El agar chromID™ Ottaviani Agosti ha sido concebido y desarrollado con el fin de responder a las exigencias de calidad más estrictas. Se realiza el control de calidad según las recomendaciones de las normas 11290-1/A1 (3) y 11290-2/A1 (4) y el procedimiento de la norma XP CEN ISO/TS 11133-2 (9). Los resultados de las cepas estudiadas durante el control de calidad lote a lote figuran en el certificado de control de calidad disponible bajo pedido.

LIMITES DEL TEST • La especie L. ivanovii se desarrolla en el medio dando colonias características (azul-turquesa rodeadas de un halo opaco). Sin embargo, el crecimiento de algunas cepas puede ser débil o polimórfico • Algunas cepas distintas de Listeria pueden desarrollarse en el medio dando colonias características (ciertos Bacillus) • El desarrollo está en función de las exigencias propias de cada microorganismo. Es por tanto posible que algunas cepas de Listeria con exigencias específicas no se desarrollen (por ejemplo L. seeligeri). • Se ha evaluado el agar chromID™ Ottaviani Agosti sobre numerosas cepas bacterianas y matrices alimenticias. Sin embargo teniendo en cuenta la diversidad de los productos alimenticios, los procesos de fabricación y la flora microbiana, puede resultar necesario verificar que el agar chromID™ Ottaviani Agosti esté bien adaptado a la especificidad de los productos a ensayar. • La calidad de preparación de la muestra resulta particularmente importante en la detección de Listeria monocytogenes. La muestra recogida debe ser representativa y homogénea. Siga las recomendaciones de las normas para la toma, almacenamiento y preparación de muestras.



PRESTACIONES a) En el procedimiento de obtención del certificado NF VALIDATION del agar chromID™ Ottaviani Agosti según el protocolo corto de detección de L.monocytogenes, el estudio preliminar dio los siguientes resultados:

Inclusividad: Se detectaron todas las 153 cepas de Listeria monocytogenes ensayadas (aspecto característico sobre el agar OAA).

Exclusividad: Ninguna de las 63 cepas que no eran Listeria tenían aspecto típico sobre el agar OAA (azul con halo). Se cultivaron la totalidad de las 62 cepas de Listeria que no eran L. monocytogenes y todas ellas crecieron produciendo colonias azules sin halo, a excepción de las 29 cepas de Listeria ivanovii (de las 29 ensayadas) que produjeron colonias típicas con halo. Exactitud relativa, sensibilidad relativa y especificidad relativa: Se han ensayado según el protocolo corto OAA, 335 muestras, de las cuales 121 se han contaminado de forma natural y 31 que se han contaminado de forma artificial, en paralelo con el método EN ISO 11290-1/A1 (3). Se obtuvieron los siguientes resultados: Resultados suplementarios positivos con el método OAA: 3 Resultados falsos negativos con el método OAA: 4 Resultados concordantes: 328

b) En el procedimiento de obtención del certificado NF VALIDATION del agar chromID™ Ottaviani Agosti según el protocolo corto de detección de Listeria spp., el estudio preliminar dio los siguientes resultados:

Inclusividad: Se detectaron la totalidad de las 215 cepas de Listeria, incluyendo 153 Listeria monocytogenes, 29 Listeria ivanovii, 14 Listeria innocua, 8 Listeria welshimeri, 7 Listeria seeligeri y 4 Listeria grayi (apariencia típica sobre agar OAA).

Exclusividad: Se detectaron 9 cepas confirmadas como no-Listeria mediante el método de confirmación, en el agar OAA (colonias azules sin halo).

Exactitud relativa, sensibilidad relativa y especificidad relativa: Se han ensayado según el protocolo corto OAA, 341 muestras, y en paralelo con el método EN ISO 11290-2/A1 (5). Se obtuvieron los siguientes resultados: Resultados suplementarios positivos con el método OAA: 2 Resultados falsos negativos con el método OAA: 5 Resultados concordantes: 334

El protocolo corto para la detección de Listeria monocytogenes y Listeria spp. usando el agar chromID™ Ottaviani Agosti está certificado NF VALIDATION como método alternativo de análisis para todos los productos alimenticios, así como las muestras medio-ambientales con respecto al método de referencia descrito en la norma internacional EN ISO 11290-1/A1 (3), EN ISO 11290-1(4), de acuerdo a la norma de referencia EN ISO 16140 (11). El certificado BIO 12/14-04/05 puede solicitarse a nuestro Departamento de Asistencia Técnica o a AFNOR Certification. La fecha de caducidad de la certificación AFNOR VALIDATION está indicada en el certificado.

BIO 12/14 – 04/05

METODOS ALTERNATIVOS DE ANALISIS AGROALIMENTARIOS Certificado por AFNOR Certification

www.afnor-validation.org www.afnor-validation.com

El protocolo simple para la detección de Listeria monocytogenes, empleando chromID™ Ottaviani Agosti tiene la certificación NF VALIDATION como método alternativo en el análisis de alimentos en comparación al método de referencia descrito en las normas internacionales EN ISO 11290-2/A1 (5), EN ISO 11290-2 (6) y conforme la norma EN ISO 16140 (11). El certificado BIO- 12/24-03/08 puede solicitarse a nuestro Departamento de Asistencia Técnica o a AFNOR Certification. La fecha de caducidad de la certificación AFNOR VALIDATION está indicada en el certificado.

BIO 12/24 – 03/08

METODOS ALTERNATIVOS DE ANALISIS AGROALIMENTARIOS Certificado por AFNOR Certification

www.afnor-validation.org www.afnor-validation.com

El agar chromID™ Ottaviani Agosti, ha sido validado por AOAC Research Institute como un Performance Tested Method (Certificat n°. 041102) para la detección y recuento de Listeria monocytogenes y para la detección de Listeria spp. en productos alimenticios y muestras medioambientales.

PERFORMANCE TESTED METHOD Certificado por AOAC Research Institute

www.aoac.org

Se incluyeron las siguientes matrices en la validación AOAC: carne vacuno picada cruda, salchichas Frankfurt de pollo, acero inoxidable, plástico, goma (muestreada con esponja), cerámica y hormigón.


BIOMERIEUX, el logo azul, RAPIDEC, API, VIDAS y chromID son marcas utilizadas, depositadas y/o registradas pertenecientes a CLSI es una marca comercial perteneciente a Clinical and Laboratory Standards Institute Inc. Cualquier otro nombre o marca registrada pertenece a su propietario respectivo.

bioMérieux SA RCS LYON 673 620 399

69280 Marcy-l'Etoile / France Tél. 33 (0)4 78 87 20 00 Fax 33 (0)4 78 87 20 90 www.biomerieux.com

ELIMINACIÓN DE RESIDUOS Los reactivos no utilizados pueden ser eliminados como desechos no peligrosos. Eliminar los reactivos así como los materiales de un solo uso contaminados siguiendo los procedimientos relativos a los productos infecciosos o potencialmente infecciosos. Es responsabilidad de cada laboratorio gestionar los residuos y los efluentes que produzca según su naturaleza y peligrosidad, garantizando (o haciendo garantizar) el tratamiento y la eliminación según las reglamentaciones aplicables.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Ottaviani F., Ottaviani M., Agosti M. - Esperienze su un agar

selettivo e differenziale per Listeria monocytogenes. Industrie Alimentaria. 26 (1997).

2. Norme ISO 18593 – Microbiologie des aliments – Méthodes horizontales pour les techniques de prélèvement sur des surfaces, au moyen de boîtes de contact et d’écouvillons (2004).

3. EN ISO 11290-1/A1 (2005) - Microbiologie des aliments -Méthode horizontale pour la recherche et le dénombrement de Listeria monocytogenes - Partie 1: méthode de recherche - Amendement 1.

4. EN ISO 11290-1 (1997) - Microbiologie des aliments -Méthode horizontale pour la recherche et le dénombrement de Listeria monocytogenes - Partie 1: méthode de recherche.

5. EN ISO 11290-2/A1 (2005) - Microbiologie des aliments -Méthode horizontale pour la recherche et le dénombrement de Listeria monocytogenes - Partie 2: méthode de dénombrement - Amendement 1.

6. EN ISO 11290-2 (1998) - Microbiologie des aliments -Méthode horizontale pour la recherche et le dénombrement de Listeria monocytogenes - Partie 2: méthode de dénombrement.

7. Bacteriological Analytical Manual - Chapter 10 : Detection and enumeration of Listeria monocytogenes in foods - U.S. Food and Drug Administration - 2001 - http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/BacteriologicalAnalyticalManualBAM/UCM071400.

8. Beumer R.R., Curtis G.D.W. - Culture media and methods for the isolation of Listeria monocytogenes. – Chapter 5 - Handbook of Culture Media for Food Microbiology. Corry J.E.L. et al. (Eds) 2003. Elsevier. Science.

9. XP CEN ISO/TS 11133-2 (2004) -Microbiologie des aliments. Guide pour la préparation et la production de milieux de culture. Partie 2: Guide général pour les essais de performances des milieux de culture.

10. ISO 7218 (2007) – Microbiologie des aliments – Exigences générales et recommandations.

11. EN ISO 16140 (2003) - Microbiologie des aliments. Protocole pour la validation des méthodes alternatives.

12. Isolation and identification of Listeria monocytogenes from Red Meat, Poultry, egg products and environmental samples – USDA - http://www.fsis.usda.gov/PDF/MLG_8_07.pdf.

13. AOAC Official Methods 993.12 - Listeria monocytogenes in milk and dairy products - Microbiological Methods – 2000 – AOAC.

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