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TCNICA DE
MANABIFACULTA DE CIENCIAS DE LA SALUDCARRERA LABORATORIO CLINICO
catedra: BIOLOGIA MOLECULAR IIDocente: Dra. Mayra Parraga
Aula: 2do NIVEL Paralelo APerid acad. Oct. 2!"#$e% 2!&
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TEMA:
Integrantes: Yadira Arana Z.Alexandra Santana Rosa Guanoluisa R Vinicio Cedeo M. Liz Castro PNatacha Lez A. !essica "ern#ndez $e%in Za&'rano V.
RU!
"#
$%&r%dac%'n de (c%dosnucle%cos)
Sondas de ant%cuer*o*ara *rote+nas)
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!ALABRAS
CLAVES:$%&r%dac%'n ant%genos
In,uno*rec%*%tac%'n Sondas
Frag,entos deADN
ADN clonado
eno,a $u,ano!lacas de -ago
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trans-erenc%a .estern: es una tcnica analtica usada paradetectar protenas especfcas en una muestra determinada Mediante
una electrooresis en gel se separan las protenas
In,uno*rec%*%tac%'n: Este mtodo detecta interaccin entreprotenas endgenas sin marcar), de modo que tiene la misma fabilidadque la coinmunoprecipitacin, aunque depende tambin de ladisponibilidad de anticuerpos adecuados.
$%&r%dac%'n: La hibridacin de cidos nucleicos es un proceso por elcual se combinan dos cadenas de cidos nucleicos antiparalelas ! consecuencias de bases complementarias en una "nica molcula de doblecadena, que toma la estructura de doble hlice, donde las bases
nitrogenadas quedan ocultas en el interior.
LOSARIO:
ADN clonado: son un con#unto de mtodos e$perimentalesutili%ados en biologa molecular que se utili%an para ensamblar
molculas de &'( ! lograr su copiado dentro de organismosreceptores.n un e$perimento conencional de clonado molecular, el&'( que se desea clonar se obtiene del organismo ob#eto del traba#o,luego se lo trata con en%imas en un tubo de ensa!o para producirragmentos ms peque*os de &'(.
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$%&r%dac%'n de (c%dos
nucle%cos)
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La clae para la deteccion desecuencias especifcas de cidosnucleicos es el apareamiento de
bases entre hebrascomplementarias de &+( o &'(
Las hebras complementarias de&'( se separan
desnaturali%acin) dandomolculas de cadenas simple
-i dichas hebras desnaturali%adasde &'( se incuban en
condiciones adecuadas /0c), renaturali%an para ormar
molculas de doble cadena porapareamiento complementario debases 1 un proceso denominado
/%&r%dac%'n de (c%dosnucle%cos)
2omo se ha descritoanteriormente, la hibridacin ente
cebadores ! &'( moldeproporciona la especifcidad a la
ampliacin por 32+
El &'( clonado es marcado connucletidos radioactios o connucletidos modifcados que
puede detectarse por4uorescencia o
quimioluminiscencia.
Este &'( marcado es marcado esdespus empleado como sondapara la hibridacin con
secuencias de &'( o &+(complementario, que se son
detectadas medianteradioactiidad, 4uorescencia o
luminiscencia de los hbridos dedoble cadena resultantes
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EL *r%,er *aso en el a%sla,%entotanto de ADN gen',%co o declones de ADNc es-recuente,ente la *re*arac%'n
de &%&l%otecas de ADNreco,&%nante0 colecc%ones declones 1ue cont%enen todas lassecuenc%as gen',%cas o de ARN, de un t%*o celular concreto2)!or e3e,*lo4 una &%&l%oteca de
ADN /u,ano gen',%co *uede*re*ararse clonando -rag,entosaleator%os de ADN de unas 567&en un 8ector A9
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Microarra!s de &'(
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SONDAS DE ANTICUER!OS !ARA!ROTENAS
Los anticuerpos sonprotenas sinteti%adas
por determinadasclulas del sistemainmune linocitos 5)que reaccionan conmolculas que el
organismo husped hareconocido comoe$genasantgenos).
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La ariacin da unresultado de
linocitos
6enes distintos
2odifcantes de
anticuerpo segeneran medianteinoculacin de unaprotena animal)
+esponden a
distintos antgenos
3roporciona un reactante inmunolgico de alta
especifdad.
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(atacha
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Une a ,uc/as ,ol;culas deldetergentes4 1ue desnatural%
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El inhibidor de la ribonucleasa enorma de herradura orma unainteraccin protena7protena conla protena de la propiaribonucleasa. Los contactos de lasdos protenas se muestran como
manchas coloreadas
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