Guia Osmosis Biofisica

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BAJA CALIFORNIA FACULTAD DE MEDICINA Y PSICOLOGIA

MANUAL DE BIOFISICA

Cdigo: L2M-N3-001 No. de Revisin: 1 Efectividad: 2008-1

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Facultad de Medicina y Psicologa

Manual de Laboratorio de Biofsica

Laboratorio 2 Autor(es): Dr. Jose Luis Osuna Firma: Fecha: Julio 2007

Revis: Dra. Laura Valencia Firma: Fecha: Julio 2007

Autoriz: Dra. Sara Corts Bargall Firma: Fecha: Julio 2007


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NOMBRE DE LA PRCTICA: Manejo de animales NUMERO DE LA SESION: 1 TEMA DE APOYO: Fisiologa comparada de los animales 1. -OBJETIVO

El alumno conocer la manera correcta de transportar a los animales en sus respectivas jaulas

El alumno sabr manejar a los animales de laboratorio para su pesaje El alumno aprender el manejo de los animales en el laboratorio, para poder

anestesiarlos y minimizar los accidentes. El alumno con un mejor manejo eliminara el abuso innecesario que a veces se da

en las prcticas. El alumno aprender las diferentes tcnicas existentes para el adecuado manejo de

animales segn la tcnica de la prctica.. 2. -FUNDAMENTO

Consideraciones ticas y de sentido comn restringen la investigacin en humanos. Por esta razn el uso de modelos animales para el estudio de desrdenes humanos ha jugado un rol crtico en entender los procesos de enfermedades y, de hecho, han sido de gran valor para el diseo y test de regmenes de tratamiento. Una gran variedad de especies, vertebrados e invertebrados, han sido utilizados con estos fines. Animal de laboratorio es cualquier especie animal utilizada en experimentacin con fines cientficos.

Uso de animales de Laboratorio: Materia Prima: En la produccin de ascitis tumoral o produccin de parsitos por ejemplo Reactivo Biolgico: Sustrato (animal) al que se le aade otro reactivo (tratamiento) y se observa el producto de la reaccin (cambio en parmetros biolgicos), es capaz de dar una respuesta confiable, reproducible y comparable. Su pureza debe ser vigilada, controlada y comparada al igual que otro reactivo qumico o fsico, sin olvidar su posible contaminacin bitica. Por ejemplo: cuando se utiliza un animal para ver potencia de drogas expresadas en unidades internacionales como la insulina Modelo Biolgico: Debe reproducir un efecto proveniente del sujeto original, poseer una estructura, una lgica propia y realizar actos determinados. Cuando se utiliza para extrapolar resultados de una especie animal al hombre.

Requerimientos: Calidad adecuada gentica y ambiental (microorganismos, climticos, fsico-qumicos, habitacional, nutricional) segn el experimento. Situacin experimental Principios ticos: evite sufrimiento innecesario; Sustituir por alternativas validadas.

Experimentacin Animal: Todo acto experimental que entrae un ataque al estado de bienestar animal, susceptible de causarle dolor, sufrimiento, angustia o agravio. Tiene como misin evidenciar o aclara fenmenos biolgicos sobre especies animales determinadas.


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La importancia de la interpretacin de los resultados y la apreciacin de la extrapolacin de estos de una especie a otra depende del modelo experimental utilizado. No existe un modelo perfecto extraplable al hombre, pero existen una infinidad de modelos experimentales, cuyas respuestas fragmentarias incrementan el significado biolgico del fenmeno observado.

Mantener los animales en condiciones adecuadas durante los experimentos puede ser intil si los mismos fueron sometidos previamente a agentes infecciosos, mala nutricin, estuvieron en contacto con agentes qumicos perjudiciales o albergados en condiciones que alteraron sus caractersticas comporta mentales y fisiolgicas. Todo lo que le suceda al animal desde su nacimiento hasta su muerte debe ser preocupacin del investigador, ya que a lo largo de este intervalo pueden introducirse variables que afecten los resultados experimentales. Minimizar las variables no-experimentales optimiza el uso de animales en un estudio determinado. Las condiciones ambientales en que se cran y experimentan los animales influyen decisivamente en las respuestas a los distintos tratamientos.

Los principales factores ambientales que afectan a los animales pueden clasificarse en: climticos: temperatura, humedad, ventilacin, etc. fisicoqumicos: iluminacin, ruido, composicin del aire, cama, etc. habitacionales: forma, tamao, tipo y poblacin de las jaulas, etc. nutricionales: dieta, agua, esquema de administracin microorganismos y parsitos situacin experimental

Alternativas al Uso de Animales de Laboratorio

Desde que el concepto de alternativas fue introducido recibi nombres variados segn quienes lo emplearan. Hay quienes lo interpretan como un programa para eliminar totalmente al animal experimental. El concepto ms generalizado actualmente parte de Russel y Burch, quienes definieron Alternativas como cualquier tcnica que: Reemplace el uso de animales Reduzca su nmero en un trabajo en particular Refine un mtodo existente para disminuir el dolor o el malestar de los animales Esto se conoce como el principio de las 3 Rs (Reemplazo, Reduccin y Refinamiento)


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3. -MATERIAL

Bata Guantes de proteccin Lentes de proteccin Animales de prctica (ratas, ratones y conejos)

4.-PROCEDIMIENTO

El alumno manejara a los animales, los transportara varias veces con los diferentes tipos de contenedor de animales, previa demostracin del instructor y siempre con material de proteccin que deben ser solicitados al auxiliar de laboratorio. Siempre que maneje un animal hgalo bajo la supervisin del profesor y en caso de alguna contingencia avisar inmediatamente al profesor o al auxiliar de laboratorio.

RESPONSABILIDADES: El alumno separar y envasar adecuadamente los RPBI de acuerdo a la practica No. 1. Ser responsable del transporte al almacn temporal de la FMT de los especimenes biolgicos que se utilicen en las practicas de laboratorio ( residuos patolgicos) Anotara todos los datos que aparecen en la Bitcora de almacn temporal. Cdigo LC-N4017. Ser responsable de la limpieza cuando se requiera en el transporte al almacn temporal de la FMT.


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5-RESULTADOS 6.-CONCLUSION 7. BIBLIOGRAFIA


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NOMBRE DE LA PRCTICA. MANEJO DE RPBI NUMERO DE SESION. 2 TEMA DE APOYO. SEGURIDAD EN EL MANEJO DE RESIDUOS PELIGROSOS BIOLOGICOS E INFECCIOSOS 1. -OBJETIVO:

Que el alumno se familiarice con los productos de RPBI del laboratorio. Que el alumno conozca otros tipos de material de RPBI que no se produzcan en

el laboratorio. Que el alumno identifique el material de RPBI del laboratorio Que separe y envase adecuadamente el material de RPBI del laboratorio en sus

respectivos recipientes o bolsas Que el alumno recolecte el material en forma adecuada y lo deposite en el

almacenamiento provisional para su transporte al almacn general. Que el alumno sepa que hacer en caso de un accidente

2.-FUNDAMENTO:

Residuos txicos biolgicos e infecciosos, se aplica a aquellos materiales slidos, lquidos biolgicos que representan un riesgo para la salud humana, segn la Norma oficial mexicana BOM-052-SEMARNAT-1993, establece las caractersticas de los residuos peligrosos el listado de los mismos y los limites que hacen a un residuo peligroso por su toxicidad a al ambiente . El cdigo CRETIB es el cdigo de la clasificacin de las caractersticas que contienen los residuos peligrosos y que significa C de corrosivo, R de reactivo, E de explosivo, T de toxico, I de inflamable, B de biolgico infecciosos. Segn la NORMA mencionada, la mezcla de un residuo peligroso con un residuo no peligroso ser considerada residuo peligroso.

En la realizacin de las practicas del laboratorio, se generan RPBI por lo que es importante conocer y aplicar las normas oficiales mexicanas en especial la Nom 087- Ecol 1993. Para el manejo de los RPBIs se debern utilizar los implementos de proteccin personal e identificar los sitios designados en le laboratorio para depositarlos. El deposito y envasado de RPBI se realizara llenando los recipientes hasta las partes de su capacidad. Los depsitos se etiquetaran con la leyenda PELIGRO: RESIDUO PELIGROSO (SLIDO O LQUIDO) BIOLGICO INFECCIOSO. El rea de depsito se encuentra previamente sealado en el laboratorio por el smbolo universal que lo identifica y todos los recipientes que contiene RPBI deben ser colocados en estos sitios. El personal responsable del manejo de los RPBI de acuerdo con la norma de Nom 087 Ecol 1993, tambin es responsable de la recolectacin y transporte al almacn general de almacenamiento y entrega a la empresa tratadora, registro y elaboracin de bitcoras y reportes, disposicin y tratamiento interno y externo, as como su capacitacin y monitoreo


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MARCO TEORICO Y ANTECEDENTES:

1891 Instalan un incinerador en un hospital de Estados Unidos. 1908 Primeros estudios sobre los riesgos de Residuos mdicos. 40s Se validan mtodos de incineracin para residuos mdicos. 50s Inicia preocupacin de residuos radiactivos. 60s Uso de bolsas rojas y necesidad de esterilizar. 70s Registra el incremento de residuos (material de desperdicios).

80s Primeros esfuerzos en Norteamrica para la regularizacin de desechos. 90s Se hace esfuerzo por regular en Mxico el desecho de RPBI. 1986 Flotan bolsas conteniendo agujas y materiales quirrgicos en el ocano Atlntico y Golfo de Mxico. 1988 Se publica Diario Oficial proyecto de norma de manejo de RPBI. 1995 Se publica la norma NomD87-Ecol-1993

la ley general del equilibrio ecolgico entra en vigor el Primero de marzo de 1988 y se refiere a:

Aquellos residuos que por sus caractersticas corrosivas, toxicas, venenosas, reactivas, inflamables, biolgicas presentan un peligro para el equilibrio ecolgico... Estudios en

cualquier estado fsico, debern ser tratados.

TABLA 1.- CLASIFICACIN DE ESTABLECIMIENTOS GENERADORES DE RPBI: NIVEL I NIVEL II NIVEL III

Unidades hospitalarias de 1 a 5 camas e instituciones de investigacin con excepcin de los sealados en el Nivel III.

Laboratorios clnicos y bancos de sangre que realicen anlisis de 1 a 50 muestras al da.

Unidades hospitalarias psiquitricas.

Centros de toma de muestras para anlisis clnicos.

Unidades hospitalarias de 6 hasta 60 camas;

Laboratorios clnicos y bancos de sangre que realicen anlisis de 51 a 200 muestras al da;

Bioterios que se dediquen a la investigacin con agentes biolgico-infecciosos, o

Establecimientos que generen de 25 a 100 kilogramos al mes de RPBI.

Unidades hospitalarias de ms de 60 camas;

Centros de produccin e investigacin experimental en enfermedades infecciosas;

Laboratorios clnicos y bancos de sangre que realicen anlisis a ms de 200 muestras al da, o

Establecimientos que generen ms de 100 kilogramos al mes de RPBI.


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TABLA 2. - CLASIFICACIN DE LOS RESIDUOS PELIGROSOS:

TIPO DE RESIDUOS ESTADO FISICO

ENVASADO COLOR

4.1 Sangre Lquidos Recipientes hermticos Rojo 4.2 Cultivos y cepas de agentes infecciosos

Slidos Bolsas de polietileno Rojo

Slidos Bolsas de polietileno Amarillo 4.3 Patolgicos Lquidos Recipientes hermticos Amarillo Slidos Bolsas de polietileno Rojo 4.4 Residuos no anatmicos

Lquidos Recipientes hermticos Rojo 4.5 Objetos punzo cortantes Slidos Recipientes rgidos

polipropileno Rojo

TABLA 3.- FASES DEL MANEJO DE RESIDUOS PELIGROSOS BIOLOGICO-INFECCIOSOS.

MANEJO INTERNO MANEJO EXTERNO

-Identificacin -Separacin y envasado -Recoleccin interna -Almacenamiento temporal

-Recoleccin y transporte -Tratamiento -Disposicin final -Control administrativo legal

ENVASADO DE RPBI

Recolectores para Punzocortantes, color rojo en capacidades desde 0.94 lts hasta 30 lts. Recolectores para sangre, color rojo en capacidades de 1.7 lts, 3 lts y 12 lts Recolectores para lquidos Patolgicos color amarillo en capacidades de 1.7 lts, 3 lts y 12 lts.


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Contenedores de polietileno con ruedas, en color rojo y amarillo en capacidades de 100 lts., 120 lts, 140 lts, 240 lts, 360 lts, 1000 lts y 2000 lts.

Botes de metal de pedal en varias medidas en color rojo con etiqueta de RPBI.


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MEDIDAS DE PREVENCION DE ACCIDENTES CON RESIDUOS BIOLOGICO-INFECCIOSOS. -Lavarse las manos antes y despus de tener contacto con cualquier paciente. -Restringir comer, beber, fumar, aplicar maquillajes o cremas en reas de trabajo. -No almacenar alimentos y bebidas en refrigeradores donde se encuentre sangre u otros materiales potencialmente infecciosos. -Considerar a todos los residuos como biolgico-infecciosos. -Considerar a todos los residuos biolgico-infecciosos como potencialmente infecciosos. -Usar guantes siempre que exista la posibilidad de tener contacto con lquidos de alto riesgo. -Usar bata, delantales y ropa impermeable, cuando exista la posibilidad de contaminar la ropa con lquidos de alto riesgo. -Usar mascarilla o lentes de proteccin -Desechar agujas y otros objetos punz cortantes en contenedores rgidos para este fin. -Nunca reencauchar las agujas. NOM 087-ECOL-SSA1-2002

El Comit Constitutivo Nacional de Normalizacin para la Proteccin Ambiental aprob la NOM-087-ECOL-1995 el 12 de Junio de 1996 bajo una denominacin ampliada que establece los requisitos para la separacin, envasado, almacenamiento, recoleccin, tratamiento y disposicin final de los residuos peligrosos biolgicos-infecciosos que se generen en establecimientos que presten atencin mdica. Esta NOM fue publicada en el Diario Oficial de la Federacin el 7 de noviembre de 1995.

Esta NOM establece los requisitos para la separacin, envasado, almacenamiento,

recoleccin, transporte, tratamiento y disposicin final de los residuos peligrosos biolgico infecciosos que se generen en establecimientos que presten atencin mdica (ya sea ambulatorio o para internamiento de seres humanos y animales), tales como clnicas y hospitales, as como laboratorios clnicos, laboratorios de produccin de agentes biolgicos, de enseanza e investigacin, tanto humanos como veterinarios de pequeas especies y centros antirrbicos y es de enseanza obligatoria en dichos establecimientos, cuando estos generen ms de 25 Kg. al mes o 1 Kg. al da de los residuos peligrosos contemplados en esta Norma.

Esta Norma revisada y se publicada en el diario oficial de la federacin y se publica la NOM-087-ECOL-SSA1-2002, que abroga a la anterior. 3. -MATERIAL

Bolsas de diferentes tipos para recoleccin Recipientes de diferentes tipos Productos para recoleccin Lugar de recoleccin provisional

4. - PROCEDIMIENTO Se presentara en forma breve una exposicin por el instructor de la clase de los

diferentes materiales que se producen en el laboratorio y se harn varios ejemplos para que los identifiquen y los recoleccionen en las bolsas adecuadas y el lugar de almacenamiento adecuado.

Se harn varios ejemplos del mal manejo y que medidas adoptar en caso de alguna contingencia.


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RESPONSABILIDADES: El alumno separar y envasar adecuadamente los RPBI de acuerdo a la tabla de Clasificacin de RPBI. Ser responsable del transporte al almacn temporal de la FMT de los especimenes biolgicos que se utilicen en las practicas de laboratorio (residuos patolgicos) Anotara todos los datos que aparecen en la Bitcora de almacn temporal. Cdigo LC-N4017. Ser responsable de la limpieza cuando se requiera en el transporte al almacn temporal de la FMT. 5. -RESULTADOS 6. -CONCLUSIONES: 7. - BIBLIOGRAFA NORMA OFICIAL MEXICANA NOM087-ECOL-1995 La norma oficial mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002


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NOMBBRE DE LA PRACTICA: Principios generales de instrumentacin a en Biofsica NUMERO DE SESION: 3 TEMA DE APOYO: Bioelectricidad Instrumentos de registro 1. -OBJETIVOS

El alumno conocer los principios tericos esenciales que fundamentan la instrumentacin Biofsica

El alumno se familiarice con el instrumental y equipo de nuestro laboratorio de Biofsica .Que el alumno adquiera la habilidad y destreza necesarias para operar, calibrar y

manipular adecuadamente el equipo electrnico de registro de eventos Biofsica (Oscilgrafo, transductores, amplificadores, electrodos, etc.)

2.- FUNDAMENTO Es indiscutible la utilidad del laboratorio como fundamento slido de las clases tericas de Biofsica Mdica, adems la prctica clnica requiere de una mayor comprensin de los sistemas fisiolgicos fundamentales. Las prcticas de laboratorio ofrecen al estudiante de medicina la posibilidad de adquirir un pensamiento y filosofa cientfica que les garanticen una prctica profesional de alta calidad. Para cumplir adecuadamente lo anterior y aprovechar al mximo las oportunidades que ofrece el Laboratorio de Biofsica, son esenciales las mediciones cuantitativas en forma de registro grfico, para lo cual es indispensable a su vez el contar con un instrumental y equipo capaz de registrar grficamente el amplio espectro de los eventos fisiolgicos, los cuales han de registrarse meticulosamente y analizarse con cuidado para obtener las conclusiones del trabajo de experimentacin, y as fundamentar slidamente el aprendizaje de la Biofsica De todo lo anterior nace la importancia de que el alumno de medicina conozca y opere el instrumental y equipo de experimentacin en la forma ms familiar y adecuada posible, que le permita incluso proyectar y realizar trabajos de experimentacin fisiolgica que consoliden para siempre sus conocimientos de la Biofsica 3.-MATERIAL Y PROCEDIMIENTO: OSCILGRAFO

Se llenan los tinteros de los canales que se ocuparn marcado como U. Se coloca el papel para la impresin de registro retirando los tornillos marcados como Q Por gravedad y por presin se hace llegar la tinta a travs de la plumilla hasta el papel. Se conecta a la corriente por medio del cable apropiado en la parte posterior del

Oscilgrafo, donde se seala "L". Se enciende con el botn marcado J e inmediatamente se prende el foco verde en la

parte superior C. Se selecciona la velocidad del papel con el selector marcado CHART SPEED

CONTROL T. Se selecciona el marcador de tiempo TIME CONTROL D. Cada vez que se requiera correr el papel se accionar el dispositivo marcado como

"CHART DRIVE" M.


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Se selecciona el tipo de interfase o aditamento que se utilizara de acuerdo a la medicin que se programe (Traducer Interface) o AC/DC Preamplificado) y se coloca en la posicin H verificando que se ajuste adecuadamente.

Observaciones: La seleccin de estos aditamentos es parte esencial del Oscilgrafo (y no pueden ser programados ninguna medicin sin ellos)

Encender el canal con el botn indicado como AC ( direct-off-interface), colocar en las siguientes posiciones:

I botn en posicin en interfase AC II polaridad Y en positivo + III Ac-DC AA en la posicin DC. IV Botn de ganancia W en cero.

Se observa que las plumillas realizan movimientos hacia arriba o abajo. Cuando la plumilla se queda esttica se coloca en la lnea basal con el botn S.

Se ajusta la amplitud del registro sosteniendo el botn Z y con el botn W se da la amplitud del tamao del registro.Se suelta el botn Z y la aguja tiene que volver a la posicin basal

En este momento se completa la calibracin del canal. CALIBRACIN DE LOS TRANSDUCTORES. (Traducer Interface) o (AC/DC Preamplificador)

En el transductor se selecciona la medicin (Potencimetro, Isomtrico, Presin, Neumgrafo, pulso), Encender el canal con el botn indicado como AC (direct-off-interface), colocar en las siguientes posiciones:

I botn en posicin en interfase AC II polaridad Y en positivo + III Ac-DC AA en la posicin DC. IV Botn de ganancia W en cero.

Se observa que las plumillas realizan movimientos hacia arriba o abajo. Cuando la plumilla se queda esttica se coloca en la lnea basal con el botn S

Se ajusta la amplitud del registro sosteniendo el botn Z y con el botn W se da la amplitud del tamao del registro.Se suelta el botn Z y la aguja tiene que volver a la posicin basal En este momento se completa la calibracin del canal.

MEDICIONES Y ADITAMENTOS DEL OSCILOGRAFO Los aditamentos de medicin de anexan al Oscilgrafo siguiendo la operacin central del

Oscilgrafo y la seleccin de los transductores es de acuerdo a la medicin deseada. A continuacin se describen los aditamentos ms comunes. Para algunos transductores se requiere el uso de otros elementos como electrodos, cables,

gel, etc. que se describen en cada uno de los aparatos.


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FIG. 1

PREPARACIN DEL MIGRAFO ISOMTRICO (figura 2)

11.. Conectar el cable al migrafo y colocarlo en el Tensiometro y ajustar la altura .(ver

figura 2)Conecte el migrafo en el transducer interfase (ver operacin central del Oscilgrafo) (H), y seleccionar el transductor ISOMETRIC.

22.. Una vez conectado el transductor, se procede a calibrar el canal ( ver calibracin de Transductores)

33.. Se procede a colocar la preparacin biolgica ( msculos y corazn de rana) en el migrafo


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FIG. 2 TRANSDUCTOR DE PRESIN (figura 3) Conectar el transductor de presin en el transducer Interfase

1. Seleccionar pressure. 2. Colocar la extensin en una de las entradas del transductor, y en la otra entrada se coloca

una jeringa con anticoagulante y se purga el sistema. 3. Se procede a la calibracin del canal. (Ver puntos 11 y 12 del manejo del Oscilgrafo). 4. Se coloca el transductor en el soporte (ver figura). 5. Una vez localizada la arteria se procede a la colocacin del transductor.


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ISOLATED PREAMPLIFIER

1. Seleccionar en el transducer interfase POTENTIOMETRIC, conectar el preamplificador y verificar que el indicador de batera (1) este en el lado derecho o verde, de lo contrario cambiar de bateras. Ver figura (1).

2. Para tomar electrocardiograma, usar los cables indicados y placas, conectarlos guindose por el color y la abreviatura (7), R.A (brazo derecho); L.A (brazo izquierdo); R.L (pierna derecha); L.L (pierna izquierda); y V si se van a tomar precordiales.

3. Seguir procedimiento de operacin del Oscilgrafo para tomar registros. 4. Aumente o disminuir la amplitud del registro con el botn indicado (5). 5. En caso de trabajar con animales (perro o conejo) preguntar al maestro el

procedimiento a seguir para tomar el registro.


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ESTIMULADOR DE PULSOS.

1. Conectar el estimulador a la corriente. 2. Conectar los electrodos al estimulador (para msculo o nervio, se indica en la

prctica). 3. Seleccionar la frecuencia del estimulo. 4. Seleccionar el voltaje del estimulo. 5. En la realizacin de la prctica se indicara el tipo de estmulos (continuos o

sencillos, segn lo requiera la prctica). 6. Al finalizar la prctica deber desconectar los electrodos, as como el estimulador y

limpiar el o los electrodos que utilizaron.

AMPLIFICADOR

Esta unidad tiene los siguientes controles y se operan as: 11.. Botn de encendido indicado como "AC", al prenderlo, la unidad est lista para tomar

registros. El botn "DIREC-OFF-INTERFASE" solo se utilizar al momento de tomar registros del fenmeno fisiolgico en estudio.


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22.. Control de posicin "PEN ZERO CONTROL" S, se utiliza para colocar la plumilla inscriptota en un nivel adecuado para el registro. Movindolo en el sentido de las manecillas del reloj, la plumilla se desplaza hacia arriba y en sentido contrario hacia abajo.

33.. Control de amplitud (GAIN CONTROL) W, amplifica o disminuye la seal proveniente del transductor sin distorsionarlo. La variacin de esta amplitud se realiza moviendo el botn W en sentido de las manecillas del reloj o al contrario.

TRANSDUCTOR DE PULSO

1. Seleccionar en el transducer interfase la opcin plethysmograph, conectarlo, y cerciorarse que encienda el foco rojo, en la parte interior del transductor

2. Siga el procedimiento de manejo del Oscilgrafo.

5.-RESULTADOS 6.-CONCLUSION

7-BIBLIOGRAFIA. 1.- Manuales del fabricante del Oscilgrafo universal Harvard (Oscilgrafo)


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NOMBRE DE LA PRCTICA: DETERMINACION DE PH NUMERO DE SESION:4 Y 5 TEMA QUE APOYA: PH, PKA.ECUACIN DE HENDERSON-HASSELBACH 1.-OBJETIVOS:

Que el alumno aprenda y maneje los siguientes conceptos ( Ph, y Buffer). Que el alumno describa lo que es un potencimetro su utilidad, forma de emplearse y

aplicaciones. Que el alumno identifique lo que es una solucin estndar de calibracin. Que conozca la composicin en Ph de las soluciones y de los lquidos corporales. Que el alumno entienda lo que es una solucin salina y Hartman. Que el alumno entienda la ecuacin de Henderson-Hasselbach Que el alumno mida el Ph de distintas soluciones. Que el alumno lleve una solucin a un Ph determinado. El alumno explicara que el medio lquido debe mantener un Ph determinado..

2.-FUNDAMENTO La habilidad del cuerpo humano para llevar a cabo sus procesos metablicos requiere no solo el mantenimiento de la concentracin de electrolitos y el equilibrio del agua corporal dentro de rangos estrechos, sino tambin del equilibrio de cidos y bases sricos. El metabolismo normal genera iones hidrogeno en forma de cidos dbiles y cidos fuertes que deben excretarse todos los das para prevenir la acidosis. Los cidos y bases que se ingieren con la dieta tambin se metabolizan y excretan para prevenir los cambios del estado cido base. Una sustancia se denomina cido o base de acuerdo con su habilidad para perder o ganar un ion hidrogeno (un protn). Los cidos fuertes se disocian con libertad en solucin al liberar un ion hidrogeno y contribuir con el desarrollo de acidosis progresiva. Los cidos dbiles solo se disocian en parte en solucin y esta contendr un cido y una base y no contribuir con cambios en la acidez. Las bases son sustancias que aceptarn un ion hidrogeno libre, reducirn su concentracin y aumentarn el Ph. De esta manera si la concentracin de iones hidrogeno se eleva el Ph caer (mas cido) y viceversa. El rango normal de Ph es de 7.35 a 7.45. Los sistemas Buffers amortiguadores son compuestos que se combinan con un cido o con una base de manera que ese cido o esa base no pueden alterar el pH en grado significativo


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3.-MATERIAL: Solucin fisiolgica. Solucin Harttman Ringer preparado en ese momento potencimetro Agitadores magnticos Soluciones amortiguadoras Soluciones Standard.

4.- PROCEDIMIENTO:

a) Se tomaran 50 ml de solucin fisiolgica y se medir Ph. b) .Se tomaran 50 ml de solucin fisiolgica y se medir Ph. c) Preparar una solucin de Ringer d) Las 3 soluciones llevarlas a Ph 7.4 e) De ah la sol fisiol. Llevarla a un Ph de 6.5 f) De ah la sol Hartman Llevarla a un Ph de 8 g) De ah la sol Ringer Llevarla a un Ph de 4.5

5.-RESULTADOS: RESUELVA LAS SIGUIENTES PREGUNTAS:

1. Aplique la ecuacin de Hendersson Hasselbach en su experimento

2. Para que sirven las soluciones Standard.

3. Que pasa si Usted coloca clulas en su Ringer a Ph de 4.5

4. Que pasa si Usted coloca clulas en su Ringer a Ph de 8

6.-CONCLUSIONES

7.-BIBLIOGRAFIA

1. Tratado de fisiologa medica. A. Guyton. 17 ed. Interamaericana 2. Bases Fisiolgicas de la practica medica. Best y Taylor . 13 ed. Espaol. Panamericana 3. Fisiologa medica. Ganong, William F. Edir Manual moderno 16 ed. Mxico 4. Physiologia. Mattew N. Levy. Robert M. ,Berne .Mosby 2001 5. Medical physiology. Vernon Moncastle. Vol II. Mosby 1992 17 ed.


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NOMBRE DE LA PRACTICA: Elaboracin de grficas y su lectura bsica. Importancia del Mtodo Cientfico.

Numero de Sesiones.- 6,7, 8 Tema que apoya.:Bases fsicas aplicadas a la fisiologa. 1. Objetivos

Que el alumno comprenda la importancia del mtodo cientfico en la generacin de conocimientos, en la bsqueda de nuevas aplicaciones del conocimiento y en la prctica de la medicina.

Que el alumno practique el planteamiento de problemas en forma cientfica. Que el alumno practique la resolucin de un problema. Que el alumno aprenda, practicndolo, el mtodo cientfico bsico. Que el alumno recolecte datos reales. Que el alumno elabore tablas de valores con los datos obtenidos. Que el alumno elabore grficas con los resultados de las tablas. Que el alumno grafique dos variables y analice su relacin y, de existir, lo plantee como

un problema a solucionar a travs de elaborar una hiptesis, lo investigue y llegue a conclusiones.

Que el alumno utilice el lenguaje cientfico bsico. Que el alumno haga propio y utilice un mtodo de lectura de grficas bsico y til. Que el alumno haga propio y utilice un mtodo bsico de anlisis de la utilidad de un

reporte o artculo cientfico. 2. Fundamentos Es necesario sensibilizar al alumno de la importancia de basar la prctica profesional en un ejercicio estrictamente cientfico y humanista y conducirlo en la adquisicin de los conocimientos necesarios para tal fin. 3.MATERIAL

1. 1 electrocardigrafo y sus accesorios por equipo. 2. 1 bscula con estadmetro por equipo. 3. Pizarrn y gis. 4. Utiles escolares de cada alumno (cuaderno, lpiz, pluma, borrador, regla, transportador y

comps). (En este manual se propone el electrocardiograma y el ndice de masa corporal para la obtencin de datos y relacin de variables prcticas y planteamiento de una hiptesis en funcin de la disponibilidad de equipo en el laboratorio, pero pudieran ser otras las actividades para la obtencin de datos siempre y cuando se busque interesar al alumno). 4. PROCEDIMIENTO


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1.- Todos los miembros del equipo debern pesarse y medirse tratando de obtener su peso y estatura lo ms cercano a la realidad posible, en las condiciones del Laboratorio #2, y bajo la asesora del profesor. 2.-Con la participacin de todos los miembros del equipo, se tomar un electrocardiograma a cada uno para el registro nicamente de las derivadas bipolares estndar (DI, DII y DIII) bajo la gua y asesora del profesor. 3.- Siguiendo las instrucciones del profesor con ejemplo desde el pizarrn, cada alumno determinar su ndice de masa corporal (IMC) y cada alumno determinar su eje elctrico cardiaco (EEC). 4.- Con los datos obtenidos elaborarn una tabla de valores (nombre, peso, estatura, IMC, EEC) que se ir incrementando con el avance de las sesiones (primero por equipo, despus por subgrupo y sucesivamente por grupo y grupos). 5.- Con los datos de la tabla elaborarn una grfica de distribucin para cada valor y una grfica que relacione las dos variables (IMC-EEC). 6.- Elaboracin del reporte (en apartados subtitulados de acuerdo a lo remarcado) por equipo conteniendo lo siguiente: 5. RESULTADOS Breve descripcin de las actividades y una introduccin que responda las siguientes preguntas: Existe relacin entre las variables? De existir cul es la dependiente y cul la independiente? Describir la relacin y plantearla como una hiptesis a investigar. La metodologa para esta investigacin ser bibliogrfica (con un mnimo de tres referencias) y as se plantear en el reporte. En los resultados se comentar lo ledo, apartadamente, en cada referencia. En funcin de los resultados se plantear la conclusin y declaracin de hiptesis nula o verdadera y en seguida la bibliografa. El examen se centrar en los siguientes tpicos: Manejo conceptual de los apartados del reporte. Entendimiento y memorizacin de una gua de lectura e interpretacin bsica de los resultados. Capacidad para hacer interpolaciones y extrapolaciones e interpretarlas. Como gua para determinar la utilidad de los resultados, repeticin de las preguntas Cules fueron los resultados? Son vlidos los resultados? Los resultados son tiles para mis propsitos profesionales? Entendimiento y memorizacin de una gua para decidir sobre el valor de los resultados. . Evaluacin Inters y actitud mostrada.- De obtener de 0 a 4 la ponderacin ser100%. De obtener de 5 a 10 la ponderacin ser de 20%. Calidad del reporte.- del 1 al 10 (ponderacin 40%) Examen.- del 0 al 10 (ponderacin 40%)6,


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6. Conclusion

7. Bibliografa

1. Montesano, Manual de Protocolo de Investigacin. Editorial Auroch. 2. Hernndez, Fernndez, Baptista, Metodologa de la Investigacin. 2da Edicin,

McGraw-Hill.


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NOMBRE DE LA PRCTICA: OSMOLARIDAD Y SU REGULACION NUMERO DE SESION: 9 TEMA QUE APOYA: MEMBRANA PLASMATICA, AGUA, COMPARTIMENTOS Y TRANSPORTE. 1.-OBJETIVOS:

Que el alumno aprenda que el rin es el rgano por excelencia en la regulacin de la composicin de los lquidos corporales.

Que el alumno describa los efectos de la deshidratacin en la composicin de los lquidos corporales.

Que el alumno identifique y explique la diferencia entre osmolaridad y osmolalidad. Que el alumno mencione el concepto de depuracin. Que el alumno entienda el concepto de depuracin de agua libre a travs de principios

biofsicos Que el alumno aprenda el concepto de depuracin osmolar y su aplicacin. Que haga un comparativo entre un organismo bien hidratado y uno deshidratado, en

distribucin del agua.. Que el alumno explique como se moviliza el agua al haber una deshidratacin. El alumno explicara las teoras por lo cual se explican los cambios obtenidos en la

prctica. 2.-FUNDAMENTO Claude Bernard fue el creador de la palabra medio interno como un mar interior que baa a las clulas lo que en el presente se conoce como LEC (lquido extracelular). El lquido intracelular se encuentra separado por las membranas celulares, este se encuentra separado del medio externo por la piel y las membranas mucosas y a su vez dividido por el endotelio vascular en lquido intersticial (entre las clulas) e intravascular (dentro de los vasos) y por una barrera epitelial de los lquidos transcelulares (secreciones digestivas, humor acuoso, lquido sinovial, lquido en tejido conectivo denso, etc.). Las soluciones estn formadas por el soluto, sales como NaCl, NaHCO3, KCl, CaCl2 etc.) y el solvente, el agua. La cantidad de un soluto disuelto en el volumen de solucin se llama concentracin. Porque es importante definir la concentracin de una solucin en el compartimiento?. Porque si dos compartimentos contienen la misma solucin con una concentracin diferente y estn separados por una membrana permeable al soluto y al agua, de esta manera se verifica un movimiento del soluto y del agua entre ellos. En condiciones normales el individuo toma agua para reemplazar las prdidas, cualquier cambio en la composicin de los lquidos corporales determinar variaciones del volumen de los compartimentos y generar trastornos. Por eso es fundamental el balance de los lquidos y de los solutos del organismo. Una de las variantes que hablan de la prdida de agua en los compartimentos es la osmolalidad cuyos valores varan de acuerdo al contenido de agua en el plasma y este parmetros se altera


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invariablemente en un paciente deshidratado por otro lado la capacidad de compensacin renal a estas perdidas har que se reajuste la osmolaridad urinaria como se vera en los resultados de esta practica. 3.-MATERIAL:

Tubos de ensaye para la toma de muestras para osmolaridad plasmtica. Osmmetro Furosemide en tabletas de 40 mg Jeringas de 5 ml Frascos recolectores de orina Microscopio.

4.- PROCEDIMIENTO:

a) Se elegirn dos alumnos por equipo para la toma de muestras y realizacin del procedimiento.

b) Se tomarn muestras basales de sangre y orina en los que se realizarn creatinina srica y urinaria, osmolaridad srica y urinaria.

c) Un alumno dejar de beber agua por la tarde y noche d) El otro alumno tomar 1 tableta de furosemide y dejar de beber agua por la tarde y la

noche e) A la maana siguiente se tomarn los mismos parmetros de laboratorio.

. 5.-RESULTADOS:

AGUA AGUA NaCl KCl CaCl ADRE ACE FRIA CALIENTE

C E C E C E C E C E C E C E OSMOLARIDAD SERICA

OSMOLARIDAD URINARIA

CREATINIAN SERICA

CREATININA URINARIA


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1. Calcule la depuracin de agua libre en cada una de las 3 condiciones

2. Explique la variacin en los resultados.

3. Marque la diferencia entre osmolaridad y osmolalidad?

4. Calcule la depuracin osmolar en las 3 condiciones

5. Investigue la formula de la osmolaridad calculada y diga que tan confiable es:

6. Calcule el U/P de osmolaridad e investigue cual es su utilidad en la clnica

7. Investigue que es el furosemide y porque variaron sus resultados en estas

condiciones.

8. Mencione como vario el agua en los diferentes compartimentos 6.-CONCLUSIONES

7.-BIBLIOGRAFIA

1. Tratado de fisiologa medica. A. Guyton. 17 ed. Interamaericana 2. Bases Fisiolgicas de la practica medica. Best y Taylor . 13 ed. Espaol.

Panamericana 3. Fisiologa medica. Ganong, William F. Edir Manual moderno 16 ed. Mxico 4. Physiologia. Mattew N. Levy. Robert M. ,Berne .Mosby 2001 5. Medical physiology. Vernon Moncastle. Vol II. Mosby 1992 17 ed.


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Nombre de las practicas: Transporte transmembrana Numero de sesiones : 10 Marco terico que apoya.: Bases fsicas aplicadas a la fisiologa. 1. Objetivos.- Que los alumnos puedan apreciar experimentalmente el transporte de agua y electrlitos a travs de membranas biolgicas y el registro de diferencia de potencial elctrico. 2. Fundamentos.- Un proceso fundamental en las actividades biolgicas es el transporte de agua y electrlitos a travs de membranas biolgicas ya que, de ese transporte, depende el intercambio de sustancias entre los compartimentos corporales y celulares de los seres vivos. Lo anterior lo comparten prcticamente todas las funciones vitales (homeostasis, funcin renal, digestin-absorcin, excitabilidad neuromuscular, etc.). 3. Material

1 Equipo de diseccin con tijeras grandes y estilete. 1 Cmara de Ussing-Zerahn (CUZ) 1 matraz 1 Microbalanza 1 microvoltmetro Tecnologa para cuantificacin de electrlitos 1hilo de seda. 100 ml de solucin de Ringer normal 50 ml de solucin glucosada al 50% 50 ml de agua bidestilada 1 amp de KCl 1 rana

44.. PROCEDIMIENTO Se marca un nivel en ambos compartimentos de la CUZ inmediatamente arriba de sitio para la membrana, hasta ese nivel se llenarn los compartimentos en su momento.

Despus de descerebrar y desmedular la rana, se obtienen la vejiga urinaria y la vescula biliar de la misma. Con mucho cuidado y procurando no tocar la zona que se expondr a las soluciones, se abre la vejiga y se monta en la CUZ; se coloca solucin de Ringer normal del lado seroso y solucin de Ringer diluida (1:10) con 1 ml de la solucin de KCl del lado mucoso (fig #1). Se apartarn muestras de ambas soluciones adecuadamente rotuladas para que se les cuantifiquen los electrlitos. Se introducirn los electrodos del microvoltmetro y se anotar el registro. Se anotarn los cambios en los niveles de las soluciones cada 15 minutos tres veces. Al final se obtendrn muestras de las soluciones resultantes, se rotularn adecuadamente y se les cuantificarn los electrlitos.

Simultneamente, y habiendo preparado un matraz con una solucin mixta de Ringer

normal y glucosada al 50%, la vescula se llena con solucin de Ringer diluida (1:10) procurando que no quede a tensin; se anuda el orificio con hilo de seda: se pesa y se coloca


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dentro del matraz (fig #2). Cada 15 minutos, en tres ocasiones, se sacar para pesarse y anotar el peso.

55.. RESULTADOS Se har un reporte de acuerdo a las siguientes indicaciones: consulte bibliografa apropiada y responda las siguientes preguntas: qu es smosis? cul es la cintica de la smosis? qu es difusin simple? cul es difusin facilitada? qu es transporte activo? qu es potencial de membrana en reposo? cul es el principal movimiento inico durante la despolarizacin? cul es el principal movimiento inico durante la repolarizacin? Describa las observaciones ocurridas con la vejiga y explquelas. Describa las observaciones ocurridas con la vescula y explquelas. Describa los cambios en la cuantificacin de electrlitos y explquelos.


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6.-CONCLUSIONES 7. BIBLIOGRAFIA

1. Guyton-Hall, Tratado de Fisiologa Mdica. 9 edicin. Editorial Interamericana. 2. West (Best-Taylor), Bases Fisiolgicas de la Prctica Mdica. 12 edicin. Editorial

Mdica Panamericana. 3. Ganong, Fisiologa Mdica, 14 edicin. Manual Moderno. 4. Berne-Levy, Fisiologa. 2 edicin. Editorial Hartcourt-Brace. 5. Rhoades-Tanner, Fisiologa Mdica. Edicin original de 1995 versin 1997 al espaol.

Editorial Masson. 6. Schmidt-Thews, Fisiologa Mdica. 24 edicin. Editorial Interamericana-McGraw-Hill. 7. Smith- Thies, Fisiopatologa, principios biolgicos de la enfermedad. 2 edicin.

Editorial Mdica Panamericana. 8. Vick, Fisiologa Mdica Contempornea, Mc Graw-Hill.


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NOMBBRE DE LA PRCTICA: Propiedades del msculo esqueltico NUMERO DE SESION: 11 TEMA DE APOYO: 1. -OBJETIVOS

En esta prctica se comprobaran las propiedades del msculo esqueltico, cuando este es estimulado directamente; para lo cual procederemos a medir experimentalmente los siguientes parmetros del proceso contrctil. Intensidad Respuesta (Umbral, subumbral y maximal). Sacudida muscular: Efectos de la aplicacin de estmulos repetitivos (fenmenos de

sumacin y tetanizacin). Fatiga muscular (Aplicacin de estmulos continuos). Efecto de la carga sobre la fuerza de contraccin.

2. Fundamento

Lasfibrasmuscularesesquelticassecaracterizanporlapresenciadeestriacionestransversalesperidicas.(Figs.1).Estaestriacinresultadelaexistenciaensucitoplasmadelasmiofibrillas(Fig.2)estructurasresponsablesdelacontraccinmuscular.

El msculo esqueltico se une a los huesos a travs de los tendones (Fig 3),

estructuras continuas con la envoltura conjuntiva llamada epimisio, que rodeaexternamentealmsculocompleto.Eltejidoconjuntivopenetraalinteriordelmsculoformando el perimisio que corresponde a delgados septos de tejido conjuntivo queenvuelvenamanojosofascculosdefibrasmusculares.Apartirdelperimisio,seoriginaelendomisioformadopordelgadasvainasdefibrasreticularesquerodeancadaunadelasfibrasmusculares.Losvasossanguneospenetranalmsculoatravsdeestosseptosconjuntivos.

La inervacindel tejidomuscular esqueltico se relacionadirectamente con laregulacindelacontraccindecadafibramuscularyenconsecuenciaconelestadodetensindelmsculocompleto.Fibrasnerviosasefectoras

fibrasmotoneuronaalfa:inervanlasfibrasmusculares(extrafusaales)atravsdelaplacamotora.Danorigenalaunidadmotora.

fibras g: inervan las fibras intrafusales que provienen del receptor hussomuscular

3. MATERIAL Y EQUIPO

1. Rana o sapo.


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2. Fisigrafo y aditamentos. 3. Tensiometro. 4. Estimulador. 5. Pesas para calibracin del migrafo. 6. Electrodos para msculo. 7. Tabla de diseccin. 8. Seda para sutura. 9. Equipo de diseccin. 10. Solucin Ringer 11. Pipeta de plstico y vaso de precipitado.

4. PROCEDIMIENTO: 1. Operacin del canal y calibracin del migrafo.

La mitad de los miembros del equipo de trabajo, proceder a operar y calibrar el canal del Fisigrafo sobre el cual se trabajar, de acuerdo al procedimiento que a continuacin se describe: 1. Proceder a descerebrar a la rana o sapo, cortando con la tijera de un solo tajo y en forma

transversal, la cabeza de la rana, por detrs de los ojos y a travs de la boca; lavando posteriormente, con agua la regin hasta que deje de sangrar.

2. Proceda a destruir la mdula espinal, introduciendo un estilete a travs del canal medular, efectuando luego movimientos rotatorios con el estilete para destruir la mdula; asegurndose de que no exista movilidad alguna en la rana antes de continuar con la practica. Tenga la precaucin de localizar el canal medular, antes de introducir el estilete, ya que de otra manera puede destruir rganos vitales de la rana.

3. A continuacin, se trabajara en la pata de la rana, efectuando un corte de la piel (nicamente la piel) en la porcin superior del muslo de cualquiera de las ancas de la rana, utilizando para ello la pinza y la tijera: Posteriormente jale hacia abajo, arrastrando con la pinza, de tal manera que la piel se invierta, como si estuviera quitando una media o calcetn, para as dejar al descubierto los msculos y tejidos de la rana, teniendo la precaucin de no lesionar los tejidos; de este momento en adelante, hasta el final de la practica, tendr que instalar con gotero, por lo menos cada dos minutos, solucin Ringer a los msculos de la preparacin, con el fin de evitar la perdida de humedad y con ello se lesionen los tejidos. Proceda luego a disecar el msculo gastrognemio (equivalente a los gemelos en el hombre) utilizando para ello objetos no punzo cortantes (pipetas de vidrio preparadas con punta roma) teniendo la precaucin de no lesionar los vasos sanguneos subyacentes. Proceda a fijar, mediante un cabo de seda, el tendn distal del msculo disecado, haciendo un nudo lo bastante firme para que no se corra; una vez fijo, desinserte el tendn distal por fuera y lo mas lejos posible del nudo. Enseguida fije con tachuelas a la rana en posicin de decbito ventral en la tabla; de tal forma que al jalar el msculo disecado y fijo a la seda, la pierna y el msculo no se separen de la tabla, cuide los vasos sanguneos.


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El msculo suspendido se amarrar al migrafo en una posicin perpendicular a la horizontal de la tabla. Luego proceda a colocar los electrodos de estimulacin en el msculo, colocando los ganchos en la masa muscular en ambos extremos del msculo. Finalmente, ajuste la tensin de la seda con el Tensimetro 20 g. aproximadamente.

2. - INTENSIDAD-RESPUESTA: Ahora proceda a encontrar los estmulos: Umbral, subumbral y maximal, para lo cual se

efectuaran los siguientes pasos: 1. Ajuste el estimulador con los siguientes datos: Duracin 1mseg. Frecuencia de 2 est./seg.

Intensidad, variable desde 0 a 30 voltios si es necesario; el aumento de la intensidad ser graduado y progresivo en dcimas de voltio, hasta encontrar el estimulo umbral, de ah en adelante, los incrementos sern de medio voltio en cada estimulo, hasta encontrar el estimulo maximal.

2. Proceda a estimular el msculo y efectuar su registro, para lo cual se corre el papel de registro a una velocidad de 2.5 mm/seg. Enviando estmulos sencillos iniciando en .5 voltios de intensidad, observando si hay respuesta, incrementndola luego medio voltio en cada estimulo hasta encontrar el estimulo umbral y despus el estimulo maximal. NOTA: Recuerde instilar solucin Ringer, adems de permitir al msculo tiempo de recuperacin entre estmulos.

3. Registre una respuesta contrctil a alta velocidad del papel de registro y con un estimulo

maximal, para lo cual colocara la velocidad del papel a 20 mm/seg. Enviando un estimulo maximal y obteniendo su registro, en el cual observara grficamente lo siguiente: Periodo de latencia, periodo de contraccin y periodo de relajacin.

3. - FENOMENO DE SUMACION Y TETANIZACION:

Ahora proceder a observar los efectos de la aplicacin de estmulos los efectos de la aplicacin de estmulos y a registrar su respuesta contrctil para lo cual realizara los siguientes pasos: Ajuste la velocidad del papel a 2.5 mm/seg. Y el estimulador con una intensidad maximal, hasta producir tetanizacin del msculo. No necesariamente se tiene que incrementar la frecuencia, se puede utilizar la misma frecuencia pero de forma continua el estimulo. Proceda a repetir el paso anterior, pero no deje periodos de descanso ( no suspenda la estimulacin) entre cada incremento de la frecuencia, variando, esta en la, misma forma cada 4 segundos, hasta obtener el fenmeno de tetanizacin en el registro, en ese momento se suspende el estimulo, registro y se da tiempo para la recuperacin del msculo.

4. - FATIGA MUSCULAR: Los efectos de estimulacin receptiva y prolongada sobre la fuerza de contraccin muscular se observaran de la siguiente forma: Ajuste la velocidad del papel a 2.5 mm/seg. Con la frecuencia a 2 estmulos/seg. Y una intensidad al maximal, aplicar el estimulo en forma continua por un minuto y as sucesivamente hasta


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obtener la fatiga muscular. En caso de no obtenerse el registro de fatiga, por fatiga previa del msculo, diseque el msculo de la pata contraria.


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5. RESULTADOS

6. CONCLUSIONES 7. BIBLIOGRAFIA 1. Tratado de fisiologa medica. A. Guyton. 17 ed. Interamaericana 2. Bases Fisiologicas de la practica medica. Best y Taylor . 13 ed. Espaol. Panamericana 3. Fisiologa medica. Ganong, William F. Edir Manual moderno 16 ed. Mxico 4. Physiologia. Mattew N. Levy. Robert M. ,Berne .Mosby 2001 5. Medical physiology. Vernon Moncastle. Vol II. Mosby 1992 17 ed. 6. Fisiopatologa medica. Una introduccin a la medicina clinica. Stephen J. Mcphee.

Vishwanath R. Lingappa. William F. Ganong 4 ed. M. Moderno 7. Text book of physiology. K.M . Bykov, G. Y. Vladimitov , V.Y. Delov. , G. P. Konradi,

A.D. slonim ed. K.M.Bykov . Moscow


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NOMBRE DE LA PRCTICA: Placa neuromuscular NUMERO DE SESION:12 TEMA DE APOYO: Neruofisiologia 1. OBJETIVOS Comprobar algunas de las propiedades fisiolgicas de la placa neuromuscular mediante la estimulacin elctrica del nervio y registrando la contraccin muscular del msculo gastrocnemio de la rana o sapo. Por lo cual se determinarn las siguientes fases experimentales:

1. Determinacin del estimulo umbral, subumbral, supraumbrales, maximales y supramaximales.

2. Determinacin del tiempo de latencia, tiempo de contraccin, tiempo de relajacin y duracin del evento.

3. Efecto de la frecuencia de estimulacin, sumacin de onda, frecuencia crtica y tetanizacin.

4. Fatiga de placa neuromuscular. 5. Bloqueo de la placa neuromuscular.

2. FUNDAMENTO

El tejido muscular esqueltico contiene terminaciones nerviosas espirales,sensibles a la distensin y a la tensin. Estas se asocian a un tipo especial de fibrasmusculares,lasfibrasintrafusales,paraformarunrganosensitivo:elhusomuscular.

Lamembranaplasmticade la clulamuscular est elctricamentepolarizada.Un estmulo apropiado despolariza la membrana y produce la contraccin.Normalmente, ladespolarizacin esproducidaporun estmulonervioso.Elmsculoestinervadoporterminalesnerviosasdeneuronasmotorasdelamdulaespinal.Enelpunto de inervacin, el nervio pierde su vaina de mielina, y se asocia a una reginespecializadadelasuperficiedelafibramuscular,paraformarlaplacamotora.Enunafibramuscularesqueltica, cada terminalaxnicomotor forma slounaplacamotora(Fig4).

Enlazonadecontacto,laterminalaxnicaformaunadilatacinquesealojaenunadepresinpocoprofundade lasuperficiede la fibra llamadahendidurasinpticaprimaria.Elsarcolemaquereviste lahendidurasinpticaprimariamuestranumerososplieguesqueconstituyenlashendidurassinpticassecundarias.Enlazonadeunin,lalmina basal de la clula de Schwann se fusiona con la lmina basal de la clulamuscular. Esta cubierta celular fusionada se extiende hacia la hendidura sinpticaprimaria,separandolafibranerviosadelafibramuscular,ypenetraalinteriordecadahendidurasinpticasecundaria.

Cuando el potencial de accin alcanza a la placa motora, el neurotransmisoracetilcolina, contenido en las vesculas sinpticas, se libera y difunde a travs de la


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hendidura.Estemediadorseuneareceptoresdeacetilcolinapresentesenlamembranapostsinptica, concentrados principalmente en la entrada de los pliegues sinpticossecundarios,einduceladespolarizacindelsarcolemaqueestransmitidaalostubosT;estoprovocauna liberacindeIONESDECALCIOdentrodelespacioquerodeaa lasmiofibrillas musculares, dando impulso a la CONTRACCION MUSCULAR, cuandodisminuyenlosiones,cesalacontraccin.

Se entiende por unidad motora (Fig 5) al conjunto de fibras musculares

esquelticas inervadas por ramificacionesdel axnde unamisma neuronamotora yque,enconsecuencia,sonestimuladassimultneamenteacontraerse.

Ramas de una misma motoneurona pueden llegar a inervar hasta 500 fibrasmusculares. Sin embargo, mientras ms fino el movimiento que debe efectuar elmsculo,menoresel tamaode launidadmotora,existiendosituacionesenquecadafibranerviosainervaslounafibramuscular. 3. MATERIAL Y EQUIPO

1. Rana o sapo. 2. Fisigrafo y aditamentos. 3. Tensiometro. 4. Estimulador. 5. Pesas para calibracin del migrafo. 6. Electrodos para msculo. 7. Tabla de diseccin. 8. Seda para sutura. 9. Equipo de diseccin. 10. Solucin Ringer 11. Pipeta de plstico y vaso de precipitado.

4.PROCEDIMIENTODestruya el encfalo de la rana y repita nuevamente todos los pasos anteriores. Procederadescerebraralaranaosapo,cortandoconlatijeradeunsolotajoyenformatransversal,lacabezadelarana,pordetrsdelosojosyatravsdelaboca;lavandoposteriormente,conagualareginhastaquedejedesangrar.

a) Procedaadestruirlamdulaespinal,introduciendounestileteatravsdelcanalmedular,efectuandoluegomovimientosrotatoriosconelestileteparadestruirlamdula;asegurndosedequenoexistamovilidadalgunaenlaranaantesdecontinuarconlaprctica.Tengalaprecaucindelocalizarelcanalmedular,antesdeintroducirelestilete,yaquedeotramanerapuededestruirrganosvitalesdelarana.


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b) Acontinuacin,setrabajaraenlapatadelarana,efectuandouncortedelapiel(nicamentelapiel)enlaporcinsuperiordelmuslodecualquieradelasancasdelarana,utilizandoparaellolapinzaylatijeraparalapreparacindeplacaneuromuscular:

Posteriormentejalehaciaabajo,arrastrandoconlapinza,detalmaneraquelapielse

invierta, como si estuviera quitando una media o calcetn, para as dejar aldescubiertolosmsculosytejidosdelarana,teniendolaprecaucindenolesionarlos tejidos;de estemomento en adelante,hasta el finalde lapractica, tendrqueinstalarcongotero,porlomenoscadadosminutos,solucinRingeralosmsculosdelapreparacin,conelfindeevitarlaperdidadehumedadyconelloselesionenlostejidos.

Proceda luegoadisecarelmsculogastrognemio (equivalentea losgemelosenelhombre) utilizando para ello objetos no punzo cortantes (pipetas de vidriopreparadas con punta roma) teniendo la precaucin de no lesionar los vasossanguneossubyacentes.

Procedaa fijar,medianteun cabode seda, el tendndistaldelmsculodisecado,haciendounnudolobastantefirmeparaquenosecorra;unavezfijo,desinserteeltendndistalporfueraylomaslejosposibledelnudo.

Enseguidafijecontachuelasalaranaenposicindedecbitoventralenlatabla;detalformaquealjalarelmsculodisecadoyfijoalaseda,lapiernaelmsculonoseseparendelatabla,cuidelosvasossanguneos.

Elmsculosuspendidoseamarraralmigrafoenunaposicinperpendicularalahorizontaldelatabla.Luegoprocedaacolocarloselectrodosdeestimulacinenelmsculo, colocando los ganchos en la masa muscular en ambos extremos delmsculo.

Finalmente,ajustelatensindelasedaconelTensimetro20g.aproximadamente.


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5.RESULTADOS6.CONCLUSIONES7.BIBLIOGRAFIA

1. Tratado de fisiologa medica. A. Guyton. 17 ed. Interamaericana 2. Bases Fisiologicas de la practica medica. Best y Taylor . 13 ed. Espaol. Panamericana 3. Fisiologa medica. Ganong, William F. Edir Manual moderno 16 ed. Mxico 4. Physiologia. Mattew N. Levy. Robert M. ,Berne .Mosby 2001 5. Medical physiology. Vernon Moncastle. Vol II. Mosby 1992 17 ed. 6. Fisiopatologa medica. Una introduccin a la medicina clinica. Stephen J. Mcphee.

Vishwanath R. Lingappa. William F. Ganong 4 ed. M. Moderno


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NOMBRE DE LA PRCTICA: Reflejos medulares NUMERO DE SESION: 13 TEMA DE APOYO: Arco rflejo y neurofisiologia medular 1. OBJETIVOS:

Demostrar que el arco reflejo, constituye la unidad estructural y funcional de la accin integradora del sistema nervioso.

Comprobar la funcin integradora del sistema nervioso, mediante la observacin de ciertos reflejos en la rana.

Observar la unificacin de ciertas actividades funcionales de tejidos distantes entre si (receptor - efector) mediante el arco reflejo.

Demostrar que la integracin del arco reflejo a nivel medular, y que los centros nerviosos superiores solo regulan y modifican dicha funcin; todo esto mediante la observacin de los efectos de la seccin medular y su destruccin, sobre los reflejos de la rana.

2.-FUNDAMENTO La unidad funcional y anatmica del sistema nerviosos central es el arco reflejo y esto se registra en la medula espinal, formando los llamados reflejos medulares que segn la sinapsis se clasifican en monosinapticos y polisinapticos o multisinapticos. Esto en el humano tambin se integra en la medula espinal pero tiene mas integracin con funciones mas complicadas, los reflejos medulares reciben la informacin principalmente del os receptores perifricos que llevan la informacin llamad aferente y segn el receptor esta ser la principal informacin como son mecanorrecptores, quimiorreceptores, propiorreceptores. Termorreceptores, nocirreceptores, etc.

Toda esta informacin hace sinapsis en las astas posteriores que son las astas delgadas, de la medula espinal y llegan a los centros superiores por medi de 2 vas principales la va posterior o de goll y burdach o y la va espinotalamico lateral

La va posterior es la que lleva la informacin perifrica mas rpida, y que tiene mas

fidelidad, mas orientacin espacial, y mas discriminacin de las informacin La va espinotalamica lateral es la va que lleva informacin mas lenta, con menos fidelidad, menos orientacin espacial como por ejemplo temperatura, dolor, rascado et.

La respuesta se lleva a cabo por la via eferente que hace sinapsis con el msculo esqueletico por medio de la placa neuromuscular donde ocurre la liberacin de un neurotrasmisor la acetilcolina que provoca el aumento en la permeabilidad del sodio despolarizando a la fibra muscular e iniciando el potencial de accion que ase traduce en el evento llamado la contraccin ,muscular esqueletica 3. MATERIAL: 1. Una rana. 2. Un estilete. 3. Frasco de vidrio. 4. Lampara de bolsillo.


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5. Soporte metlico. 6. Tres hojas de papel filtro. 7. Cuatro vasos de precipitado de 10 ml 8. Un vaso de precipitado de 200 ml 9. Solucin de cido actico al 10 % (30 ml) 10. Solucin de cido clorhdrico al 1% (30 ml) 11. Solucin de bicarbonato de sodio al 1% (30 ml) 4. PROCEDIMIENTO: 1. Encierre a la rana dentro del frasco de vidrio y observe cuidadosamente la posicin de la

cabeza de la rana, el tronco y las extremidades (tomando nota de lo observado) 2. Observe los cambios pupilares de la rana, al iluminar sus ojos con la lampara de bolsillo (anote sus observaciones). 3. Con el estilete pique cada una de las patas de la rana, con una intensidad creciente y graduada, de tal forma que se produzcan los siguientes reflejos en la rana: 1. Contraccin de la pata pinchada. 1. Contraccin de las dos patas. 2. Contraccin de las cuatro patas. 3. Movimientos energticos y generalizados. Nota: Recuerde que la dificultad de esta parte de la practica, radica en poder graduar los estmulos, de ello dependen los errores, intntelo varias veces, es cuestin de paciencia. 4. Cuantifique y describa los movimientos respiratorios de la rana, al nivel de las narinas, el piso de la boca, el trax y el abdomen. 5. Haga girar lentamente, el frasco en el sentido de las manecillas del reloj, describiendo los cambios en el tono postural y los movimientos oculares de la rana. 6. Repita la operacin anterior, haciendo girar el frasco en sentido opuesto a las manecillas del reloj, anote sus observaciones. 7. Incline lentamente el frasco, de tal forma que la porcin del frasco donde asienta las patas delanteras de la rana, quede unos 2 cm por arriba de la porcin en que asienta las patas posteriores, observe y anote los cambios posturales. 8. Incline lentamente el frasco, en sentido inverso a la operacin anterior, de tal forma que las patas anteriores queden unos 2 cm. Por debajo de las patas posteriores, observe y describa los cambios en la postura de la rana. 9. Incline el frasco lateralmente, de tal forma que las patas derechas de la rana, queden 1-2 cm. Por arriba del lado izquierdo. Observe y anote. 10. Nuevemente incline el frasco hacia la izquierda y observe sus anotaciones. 11. Efecte la seccin medular en la rana a nivel cervical superior, anotando el tiempo en que se efecto la maniobra y midiendo cuidadosamente el tiempo de duracin del choque espinal; para ello, cada 15 segundos pique con el estilete una pata de la rana y observe la respuesta. 12. Suspenda todas las maniobras con la rana por un periodo de 10 minutos; despus repita cada uno de los 10 primeros pasos de esta practica. 13. Destruya el encfalo de la rana y repita nuevamente todos los pasos de este procedimiento. 14. Suspenda la rana (descerebrada) del soporte; de tal manera que las patas posteriores pendan unos 20 cm. De distancia de la mesa.


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15. Llene el vaso de precipitado con agua limpia, sumerja a la rana en el agua, y al sacarla, squela, con las Torundas de algodn, el flanco izquierdo, colocando en tal sitio, un fragmento de papel filtro, impregnado con cido actico al 10%. Observando las respuestas del animal durante 30 segundos, retire el papel filtro y lave la regin con una torunda impregnada con solucin de bicarbonato de sodio. 16. Prepare 10 ml de cada una de las siguientes soluciones de cido clorhdrico: al 1%, 0.5%, 0.25% y al 0.125%. 17. Repita el paso numero 15 de este procedimiento con cada una de las soluciones de cido clorhdrico que prepar el paso anterior. 5. RESULTADOS 6. CONCLUSIONES 7.BIBLIOGRAFIA

1. Tratado de fisiologa medica. A. Guyton. 17 ed. Interamaericana 2. Bases Fisiologicas de la practica medica. Best y Taylor . 13 ed. Espaol.

Panamericana 3. Fisiologa medica. Ganong, William F. Edir Manual moderno 16 ed. Mxico 4. Physiologia. Mattew N. Levy. Robert M. ,Berne .Mosby 2001 5. Medical physiology. Vernon Moncastle. Vol II. Mosby 1992 17 ed. 6. Fisiopatologa medica. Una introduccin a la medicina clinica. Stephen J. Mcphee.

Vishwanath R. Lingappa. William F. Ganong 4 ed. M. Moderno

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