helocbacter pylori

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1 CAPITULO I PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 1.1 Antecedentes del Problema El Salvador cuenta con 14 departamentos uno de ellos La Libertad, con 22 Municipios de los cuales el que pertenece como objeto de estudio de la investigación es el Municipio de Colón con una población de 96,989 habitantes, en el cual se encuentra ubicado el Hospital Centro Médico Lourdes que inició desde 1985 en dicha área geográfica, desde esa fecha se fue incorporando la Farmacia Lourdes, el Laboratorio Santa Isabel, sala de radiología y ultrasonografía y progresivamente las distintas dependencias hasta llegar a todo el establecimiento hospitalario que existe hasta la fecha. Este Centro Médico cuenta con dos quirófanos con la más alta tecnología para la seguridad del paciente, una unidad de cuidados intensivos completos, 10 habitaciones, rayos x, ultrasonografía, laboratorio clínico, odontología, farmacia, óptica, mamografía, sala de partos, médicos especialistas, médicos familiares y fisioterapia. El Hospital Centro Médico Lourdes es un hospital privado con una sólida trayectoria de más de 25 años de llevar salud a todo el valle de San Andrés.

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CAPITULO I

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1 Antecedentes del Problema

El Salvador cuenta con 14 departamentos uno de ellos La Libertad, con 22

Municipios de los cuales el que pertenece como objeto de estudio de la

investigación es el Municipio de Colón con una población de 96,989 habitantes,

en el cual se encuentra ubicado el Hospital Centro Médico Lourdes que inició

desde 1985 en dicha área geográfica, desde esa fecha se fue incorporando la

Farmacia Lourdes, el Laboratorio Santa Isabel, sala de radiología y ultrasonografía

y progresivamente las distintas dependencias hasta llegar a todo el

establecimiento hospitalario que existe hasta la fecha.

Este Centro Médico cuenta con dos quirófanos con la más alta tecnología para la

seguridad del paciente, una unidad de cuidados intensivos completos, 10

habitaciones, rayos x, ultrasonografía, laboratorio clínico, odontología, farmacia,

óptica, mamografía, sala de partos, médicos especialistas, médicos familiares y

fisioterapia.

El Hospital Centro Médico Lourdes es un hospital privado con una sólida

trayectoria de más de 25 años de llevar salud a todo el valle de San Andrés.

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En El Salvador el 14% de los habitantes padecen de dispepsia no ulcerante, un

15% de ulceras pépticas gastroduodenales, el 51 % de gastritis tipo “b” activa

crónica y un 20 % de adenocarcinoma gástrico.

El diagnóstico de infección con Helicobacter pylori se realizó por métodos no

invasivos serológicos para la detección de anticuerpos contra dicha bacteria.

Toda la investigación se realizó en el Hospital Centro Médico Lourdes, en el

período que comprende de Enero a Diciembre de 2014, debidoa que los casos

detectados por especialistas del lugar demuestran un alto porcentaje estadístico a

la presencia de anticuerpos en pacientes asintomáticos atendidos por

sintomatología relacionada a Helicobacter pylori, es así que para el 2013 hubo 69

% de casos positivos en el lugar de estudio.

La importancia de la infección por Helicobacter pylori como problema de salud se

acrecienta al acumularse datos que indican que desempeña un papel patógeno

esencial en la enfermedad ulcerosa péptica, ciertas formas de cáncer gástrico

recientemente ha sido considerado por la Organización Mundial para la Salud

(OMS) como un agente carcinógeno tipo I.

Hasta finales del siglo XX los científicos consideraron al estómago como un

ambiente hostil para el crecimiento bacteriano.

Por primera vez en 1975, la gastritis se asoció con la presencia en la mucosa

gástrica, de una bacteria Gram negativa.

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En 1983, Warren un patólogo australiano, describió la asociación entre la

colonización del estómago por bacilos curvos y la presencia de gastritis crónica

activa. Parcialmente, cultivó la bacteria, en agar chocolate humedecido y a 37°C,

entre 3 a 5 días posteriormente ingirió la mezcla con Helicobacter pylori,

desarrollando gastritis, lo que señalaría un potencial patogénico en los humanos.

Hasta 1989 esta bacteria era conocida como Campylobacter, pero se determinó

que la estructura y composición eran diferentes a la secuencia de ARN que posee

el género Campylobacter, así surge el nuevo nombre y género Helicobacter

pylori.

Desde el descubrimiento de la bacteria por Warren y Marshall en 1983, se ha

evidenciado el rol importante que esta juega en la patogénesis de la gastritis

crónica y la úlcera péptica. Está relacionado con el desarrollo del 90% de los

casos de úlcera duodenal, úlcera gástrica y es un factor de riesgo en carcinoma

gástrico y linfomas asociados al tejido linfoide de la mucosa (MALTOMAS).

1.2 Situación Problemática

El Salvador es un país en vías de desarrollo, en el que gran parte de la población

es de escasos recursos y por consiguiente la educación, culturización,

alimentación y estilo de vida no son los adecuados para contribuir a mantener un

organismo saludable.

En general existen varios tipos de bacterias resistentes que se han distribuido

alrededor del mundo, especialmente en países como el nuestro; tal es el caso, del

Helicobacter pylori que ha venido evolucionando junto con toda la población y se

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adapta a nuestro organismo. Esta bacteria puede permanecer años sin causar

alguna alteración o signo aparente o alguna sintomatología específica y

posteriormente causar grandes cambios degenerativos en nuestro sistema

digestivo, con tan solo tener alguna deficiencia inmunológica, ya sea está causada

por nuestro estilo de vida o por otros factores ambientales o sociales que

contribuyen a que nuestro sistema inmunológico decaiga.

Por consiguiente es importante la necesidad de investigar hasta qué punto se

encuentra albergado este microorganismo (Helicobacter pylori) en nuestra

población y de esta forma prevenir futuras alteraciones.

Una de los varios padecimientos que puede causar esta bacteria es el cáncer

gástrico; siendo este uno de los tipos de cáncer que produce más muertes en el

mundo cada año.

Geográficamente El Salvador está dividido en 14 departamentos, uno de ellos es

La Libertad donde se encuentra el Municipio de Lourdes Colón, que es la

ubicación desde hace 25 años del Hospital Centro Médico Lourdes, llevando salud

a todo el Valle de San Andrés, que es el lugar donde se han obtenido todos los

datos estadísticos para llevar a cabo nuestra investigación.

Durante el 2014 este Centro Hospitalario atendió alrededor de 9881 pacientes, en

sus diferentes servicios de salud.

Dentro de esos 9881 pacientes, más del 10% de toda la población antes

mencionada; se les realizó la prueba serológica de detección indirecta de

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Anticuerpos a Helicobacter pylori, dando como resultado un alto número de casos

positivos a la presencia de anticuerpos a Helicobacter pylori.

De este modo la problemática de dicha investigación es identificar la

susceptibilidad de los pacientes a anticuerpos a Helicobacter pylori; verificando

con datos estadísticos que parte de la población que consulta el Hospital Centro

Médico de Lourdes se ven más afectados y en que edades se manifiesta más.

Evidenciando un riesgo grande; con tan solo ser un simple portador de esta

bacteria,lo cual supondría un riesgo mesurable a padecer diferentes anomalías

gástricas incluyendo la más peligrosa, cáncer gástrico; causado por Helicobacter

pylori; que junto con la mala alimentación y los factores externos podría causar la

muerte.

1.3 Enunciado del problema

Tomando en cuenta lo antes descrito se enuncia el problema que guía la presente

investigación, planteándose de la siguiente manera:

¿Cuál es la seropositividad a anticuerpos para Helicobacter pylori en usuarios

asintomáticos de 18 a 60 años que consultan en el Hospital Centro Médico

Lourdes, Municipio de Colón, Departamento de La Libertad de Enero a Diciembre

de 2014?

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1.4 Justificación

La investigación científica en muchas ocasiones está ligada al desarrollo de

fármacos para diversas enfermedades o para entender la complejidad del cuerpo

humano.

Hay perspectivas que le dan un giro de 180 grados, sobre todo cuando se trata de

definir con mayor precisión que hay detrás de microorganismos unicelulares como

las bacterias y como estos afectan la salud humana.

Una evidencia al respecto es la Helicobacter pylori. Un bacilo que al compás de la

evolución del hombre ha logrado permanecer en el sistema digestivo a tal punto

de ser causa de úlceras, gastritis y hasta cáncer.

Hoy en día existe alta probabilidad, de que la infección por el Helicobacter pylori

se produzca en la edad infantil, ya que la mitad de la población mundial está

infectada con el Helicobacter pylori. Aún más las personas que viven en países en

desarrollo o en condiciones de hacinamiento o insalubridad tienen la mayor

probabilidad de contraer la bacteria, que se transmite de una persona a otra.

Muchas personas tienen este microorganismo en el estómago pero no desarrollan

úlcera ni gastritis. Pero podrían desarrollarla en caso de no mantener una dieta

saludable, tomar café, fumar y consumir alcohol todo esto hace incrementar el

riesgo de una úlcera a causa de Helicobacter pylori.

Teniendo muy en cuenta lo antes dicho; esta investigación tiene como principales

bases justificantes

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Alertar a la población de esta bacteria y cuáles son los riesgos que tiene.

Es necesario prestar la debida atención a la gran evolución de casos que está

teniendo la Helicobacter pylori y lo peligroso y consecuente que podría ser no

atender estos pequeños hallazgos a tempranas horas; y permitir que las

alteraciones degenerativas sean mortales.

Es por ello que esta investigación tiene que alertar la presencia y evolución de

este padecimiento producido por la Helicobacter pylori.

Crear conciencia en las autoridades de salud pública.

Es necesario crear conciencia de la situación actual de salud de la población, a la

red pública de salud, a sabiendas que es mejor prevenir que lamentar, porqué se

dice esto; porque sería mucho más barato realizar campañas que indiquen

información sobre esta bacteria, el cuido de la alimentación y la mejora en las

medidas higiénicas; y de esta forma evitar la transmisión y la evolución de los

casos ya positivos a Helicobacter pylori. A la demás población, que gastar millones

en realizar procedimientos curativos sabiendo que en la mayoría de los casos la

solución será inalcanzable.

La investigación sé realizó a partir del análisis estadístico de los resultados que

brinda el Hospital Centro Médico Lourdes, en el período de Enero a Diciembre del

2014, donde se plantea conocer la cantidad estimado de casos positivos, así

mismo, qué género afecta más y qué edad es más vulnerable a tener anticuerpos

a Helicobacter pylori.

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Conscientes de la realidad, se espera conocer la evolución de esta bacteria y de

igual forma brindar información, conocimiento y consejos sobre cómo minimizar el

daño que nos puede producir esta bacteria por medio de dicha investigación.

Será factible ya que cuenta con el apoyo técnico administrativo de la dirección y

jefatura del Hospital Centro Médico Lourdes, Municipio de Colón, Departamento

de La Libertad.

1.5 Objetivos de la investigación

1.5.1 Objetivo general:

Investigar la frecuencia de pacientes asintomáticos de 18 a 60 años de edad que

son susceptibles a anticuerpos para Helicobacter pylori que consultan en el

Hospital Centro Médico Lourdes, Municipio de Colón, Departamento de La

Libertad de Enero a Diciembre del 2014.

1.5.2 Objetivos específicos:

Determinar la incidencia de casos positivos a anticuerpos de Helicobacter pylori en

pacientes asintomáticos de 18 a 60 años de edad que consultan el Hospital Centro

Médico Lourdes, durante el período de Enero a Diciembre del 2014.

Identificar el género de los pacientes en el que predomina la presencia de

anticuerpos para Helicobacter pylori, durante el período de Enero a Diciembre del

2014.

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Clasificar según la edad de los pacientes, la frecuencia de casos positivo a

anticuerpos para Helicobacter pylori.

1.6. Alcances y Limitaciones

1.6.1. Alcances.

La investigación pretende fortalecer conocimientos en la problemática de estudio

científico en la aplicación de la metodología y la resolución de problemas de la

salud.

Con los datos obtenidos analizaremos las posibles causas de la presencia del

Helicobacter pylori en los pacientes asintomáticos a estudio.

El presente estudio exploro datos demográficos de la población para demostrar

porcentajes de edades y sexo que corren con mayor riesgo de casos positivos.

1.6.2. Limitaciones.

Los horarios de los integrantes de grupo para coordinar reuniones puntuales y

poder cumplir objetivos establecidos.

El período de tiempo de la recolección de la información estadística que

comprende un año de duración a partir de Enero a Diciembre del 2014.

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La actitud negativa de los brindadores de la información para obtener datos

necesarios y relevantes para la investigación a realizar.

Debido a la complejidad de realizar un muestreo y el tiempo de lograr que las

muestras sean representativas.

CAPÍTULO II

MARCO REFERENCIAL

2.1 Marco Histórico

Helicobacter pylori es un género de bacterias Gram negativa de forma espiral, de

3 micras de largo con diámetro aproximado de 0,5 micras. Tiene de 4 a 6

flagelos. Es microaerófila, es decir, requiere de oxígeno, usa hidrógeno y

metanogénesis como fuente de energía. Además es oxidasa y catalasa positiva.1

Con su flagelo y su forma espiral, la bacteria "taladra" literalmente la capa de

mucus del estómago, y después puede quedarse suspendida en la mucosa

gástrica o adherirse a células epiteliales ya que produce adhesinas, (que son

proteínas fijantes). Helicobacter pylori produce una enzima llamada "ureasa" que

transforma la urea en amoniaco y en dióxido de carbono mediante la reacción: CO

1Facultad De Medicina Unam Seminario Helicobacter Pylori, Fernando Torres Valadez Alberto García

Menéndez Alejandra Zárate Osorno, Hospital De La Beneficencia Española enero 2011,

http://www.facmed.unam.mx/sms/seam2k1/2008/ene_01_ponencia.htmlMiércoles 11:00 Pm 24/02/2015.

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(NH2)2 ---> 2NH3 + CO2, y es el amoniaco que va neutralizar parcialmente la

acidez gástrica (que sirve para disolver los alimentos y matar la mayor parte de

bacterias digeridas). Lamentablemente el amoniaco es tóxico y va a maltratar la

superficie de las células epiteliales y provocar el proceso de formación de las

úlceras. Helicobacter pylori es un germen común e infecta a la mitad de la

población mundial.

La bacteria fue llamada inicialmente Campylobacter pyloridis,

luego Campylobacter pylori y en 1989, después de secuenciar su ácido

desoxirribonucleico (ADN) , se vio que no pertenecía al género Campylobacter, y

se la reemplazó dentro del género Helicobacter. El nombre pylori viene

del latín pylorus, que significa ‘guardabarrera’, y hace referencia al píloro que es la

apertura circular del estómago que conduce al duodeno.

En 1892, el investigador italiano Giulio Bizzozero describió una serie de bacterias

espirales que vivían en el ambiente ácido del estómago de perros.2

1893 Bizzozero descubre Helicobacter pylori en el estómago de perros y gatos.

En 1906, Kreintz y Coll, comunican el hallazgo de estos microorganismos en

enfermos de cáncer gástrico y en 1940 Freedberg y Barron detectan la presencia

de estas bacterias en el 40% de los muestras de gastrectomías.2

En 1875, científicos alemanes descubrieron bacterias espirales en

el epitelio del estómago humano. Estas bacterias no podían ser cultivadas, y por

consiguiente este descubrimiento se olvidó en aquel momento.

2Gastroenterologiahelicobacterpylory.http://www.iqb.es/digestivo/patologia/helicobacter/cap1_01.htm

11: 58 pm 26 / 02 / 2014

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El profesor Walery Jaworski, de la Universidad Jaguelónica en Cracovia, investigó

sedimentos de lavados gástricos obtenidos de humanos en 1899. Además de

unas bacterias alargadas, también encontró bacterias con una característica forma

de espiral, a las cuales llamó Vibrio rugula.

Este investigador fué el primero en sugerir la participación de este microorganismo

en enfermedades gástricas. Aunque este trabajo fué incluido en el Manual de

enfermedades gástricas, no tuvo mucho impacto, debido a que estaba escrito en

polaco.

Esta bacteria fué redescubierta en 1979 por el patólogo australiano Robín Warren,

quien en investigaciones posteriores a partir de 1981, junto a Barry Marshall, aisló

este microorganismo de las mucosas de estómagos humanos y fué el primero que

consiguió cultivarla.

Warren y Marshall afirmaron que muchas de las úlceras estomacales y gastritis

eran causadas por la colonización del estómago por esta bacteria, y no

por estrés o comida picante, como se sostenía hasta entonces.

El descubrimiento del Helicobacter pylori en 1983 y su implicación clínica en las

enfermedades gastrointestinales ha sido considerado uno de los principales

hallazgos de la gastroenterología. Hoy en día, su implicación en la gastritis crónica

activa, su asociación con la úlcera gastroduodenal y su inclusión entre los agentes

carcinógenos del grupo, ha convertido al Helicobacter pylori en uno de los

microorganismos de mayor interés en patología humana. La infección por

Helicobacter pylori se da en todo el mundo y en individuos de todas las edades.

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La comunidad médica reconoció muy recientemente el hecho de que esta bacteria

fuese la causante tanto de úlceras estomacales como de gastritis, ya que se creía

que las bacterias no podían sobrevivir por mucho tiempo en el medio ácido del

estómago. La comunidad empezó a cambiar de idea con base en estudios

posteriores que reafirmaron esta idea, incluyendo uno en el que Marshall bebió un

cultivo de Helicobacter pylori, desarrollando una gastritis y recobrando la bacteria

de su propio revestimiento estomacal; con esto, satisfació 3 de los

cinco postulados de Koch. La gastritis de Marshall se curó sin ningún tratamiento.

Marshall y Warren posteriormente descubrieron que los antibióticos eran efectivos

para el tratamiento de la gastritis. En 1994, los Institutos Nacionales de Salud de

los Estados Unidos informaron que las úlceras gástricas más comunes eran

causadas por Helicobacter pylori y recomendaron el uso de antibióticos, siendo

incluidos en el régimen de tratamiento.En 2005, Warren y Marshall fuerón

galardonados con el Premio Nobel de Medicina por sus trabajos acerca

de Helicobacter pylori.

Antes de comprobarse la implicación de Helicobacter pylori en enfermedades

estomacales, las úlceras estomacales eran tratadas con medicamentos que

neutralizaban la acidez. Esto hacía muchas veces que las úlceras reaparecieran

después de dejar el tratamiento. La medicación tradicional frente a la gastritis eran

las sales de bismuto.

Este tratamiento a menudo era efectivo, pero su efectividad disminuía con un uso

prolongado, además de desconocerse el mecanismo de acción de este fármaco.

Mientras Helicobacter pylori sigue siendo la bacteria más importante conocida

que habita en el estómago humano, algunas especies más del

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Género Helicobacter han sido identificadas ahora en otros mamíferos y en

algunas aves. Se ha comprobado que algunas de éstas pueden infectar a

humanos.

Existen especies de Helicobacter que son capaces de infectar el hígado de ciertos

mamíferos, causando, por tanto, diversas enfermedades hepáticas.

El descubrimiento de Helicobacter representa un moderno ejemplo de serendipia,

pues luego de infortunados intentos de aislamiento, el olvido de unos platos de

cultivo en la incubadora durante las vacaciones de Semana Santa, llevaron a su

aislamiento. 3

Aunque originalmente se describió como un organismo similar a Campylobacter y

luego como Campylobacter pyloridis; nombre de la especie que no se ajustó a las

normas de nomenclatura, lo que fue enmendado como Campylobacter pylori.

No obstante, las diferencias morfológicas de la nueva especie con las

preexistentes, su patrón de ácidos grasos y diferencias genéticas, ponía en duda

su inclusión en el género Campylobacter, lo que llevó a la propuesta del nuevo

género Helicobactery ello motivó la re descripción del género Campylobacter.

Esto condujo a la reubicación de dos especies anteriormente incluidas en el

género Campylobacter, cuya nueva ubicación es Helicobacter cinaediy,

Helicobacter fennelliae. Actualmente el género Helicobacter alberga a más de 15 3. Facultad De Microbiología, unidad De Microscopía Electrónica, Universidad De Costa Rica. San José,

Costa Rica. , Francisco Rivas-Traverso, Francisco Hernández, Helicobacter Pylori, Factores De Virulencia,

Patología Y Diagnóstico Septiembre 2000. http://www.revbiomed.uady.mx/pdf/rb001136.pdfMiércoles 10:20

Pm 24/02/2015.

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especies, la mayoría aisladas a partir de mucosa gástrica de diferentes mamíferos;

sin embargo, las especies descritas más recientemente se han aislado de vías

hepáticas e intestinales de diversos animales.

También esta definición taxonómica permitió la creación de otro nuevo género:

Arcobacter, que alojó a dos especies anteriormente denominadas como

Campylobacter atípicos, hoy conocidos como Arcobacter nitrofigilis y Arcobacter

crioaerophilicus, que junto con Arcobacter skirrowiiy Arcobacter butzleri con

forman el nuevo género. Morfológicamente los miembros de los géneros

Campylobactery Arcobacter son similares, ambos presentan extremos

puntiagudos con un flagelo desnudo en cada extremo; en el caso de

Campylobacter el flagelo nace de una esquina superior.

Los primeros años de la historia de Helicobacter estuvieron matizados de

controversias, pues unos investigadores le atribuían un papel protagónico en la

patología gastroduodenal, mientras otros asumían que sólo se trataba de un

saprófito. El acumulo de pruebas incriminatorias favorecería a los primeros; una de

esas pruebas fue la asociación estadística entre la presencia de Helicobacter

pylori y patología como gastritis antral de tipo B o úlceras pépticas, ya fuesen

gástricas o duodenales.

Esa relación estadística arrojaba resultados altamente significativos y cuya

confirmación se repetía en distintos países. También, la respuesta efectiva del

tratamiento antimicrobiano ante esas patologías, respaldaba su papel etiológico,

pues la erradicación del microorganismo resulta en una remisión de los síntomas y

su reaparición se asocia con el recrudecimiento de la sintomatología. Otros

factores importantes, fueron los resultados de infecciones experimentales en

animales, que confirmaron clínica e histológicamente la localización de la bacteria

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en la vecindad de las zonas afectadas. Finalmente, la demostración parcial de los

postulados de Koch por Marshall y por Morris confirmó el potencial.4

El Salvador es un país subdesarrollado, en la actualidad se está manifestando un

fenómeno muy común a nivel nacional, y son las enfermedades

gastrointestinales, en donde la mayor parte de ellas son causadas directamente

por la presencia de parásitos y/o bacterias, las cuales son producto de diferentes

factores.

Los estudios muestran que la mayoría de las úlceras gastrointestinales se

desarrollan como resultado de la infección con la bacteria llamada Helicobacter

pylori. La bacteria produce sustancias que debilitan la mucosidad protectora del

estómago y lo hacen más susceptible a los efectos dañinos del ácido y de la

pepsina, así como se produce más ácido.

La distribución de la infección por Helicobacter pylori es mundial. Diversos

estudios epidemiológicos han revelado la asociación con necesidades básicas

insatisfechas y bajo nivel socioeconómico.

La historia natural de Helicobacter pylori ha evolucionado de forma diferente en

las distintas partes del mundo. Además de factores genéticos del huésped y de la

cepa de Helicobacter pylori intervienen a factores ambientales, y todos los sujetos

infectados tienen una gastritis activa crónica. Ciertas cepas han sobrevivido más

en la evolución epidemiológica. La mayoría de los sujetos infectados con

Helicobacter pylori nunca padece ningún síntoma relacionado con su infección.

4. Facultad De Microbiología, 2unidad De Microscopía Electrónica, Universidad De Costa Rica. San José,

Costa Rica. , Francisco Rivas-Traverso1, Francisco Hernández, Helicobacter Pylori, Factores De Virulencia,

Patología Y Diagnóstico Septiembre 2000. http://www.revbiomed.uady.mx/pdf/rb001136.pdfMiércoles 10:20

Pm 24/02/2015

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El genoma de la cepa salvadoreña de Helicobacter pylori ELS37

Investigadores de la Universidad Dr. José Matías Delgado (UJMD) y Universidad

de Washington en San Luis Missouri (Washington University Saint Louis,

Missouri, WUSTL) determinaron la secuencia completa del genoma de la

bacteria patógena Helicobacter pylori que infectaba un paciente Salvadoreño de

cáncer gástrico procedente del departamento de Ahuachapán (ELS37).

Este constituye el primer genoma secuenciado de esta bacteria en

Centroamérica, y el primer genoma secuenciado de un organismo vivo en

El Salvador y posiciona al país como el tercero en Latinoamérica en tener un

privilegio que hasta la fecha solo habían tenido Perú y Venezuela.

Este logro es el resultado de investigaciones colaborativas que ya llevan más de

diez años entre investigadores de los Estados Unidos y El Salvador en las

Escuelas de Medicina de WUSTL y la UJMD (y la colaboración de médicos del

servicio de gastroenterología del Hospital Nacional Rosales HNR).

Los investigadores de WUSTL, cuya ayuda ha sido invaluable en la obtención de

este logro, son el Profesor Douglas E. Berg y la Dra. Dangeruta Kersulyte, el

principal colaborador en el HNR (Hospital Nacional Rosales) ha sido el Dr. Mario

Alberto Pascasio y en la UJMD (Universidad José Matías Delgado) la Licda. María

Teresita Bertoli de Masferrer, Investigadora y primera autora del proyecto.

Las piezas que conforman el genoma, se generaron por una nueva y poderosa

tecnología, que se conoce como pirosecuenciación o “454”. La compañía MO

Gene (compañía de servicios genéticos) ofrece una gama completa de servicios

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de genómica para la investigación, aplicaciones clínicas y que se especializa en la

secuenciación fue la contratada en esta oportunidad para la ejecución de esta

etapa del proyecto. Posteriormente estas piezas se ensamblaron una a una, de la

misma forma que se arma un rompecabezas.

Con la ayuda de programas de computación especializados como Geneious

(Sistema operativo utilizado por biólogos para estudiar genes), cuya licencia fue

donada por la compañía Biomatters de Nueva Zelanda. Los espacios entre las

piezas del rompecabezas, que son conocidos técnicamente como

"gaps" fueron completados en el laboratorio del Dr. Berg, de la forma mediante

la cual se secuenciaban los genomas en el pasado y que es conocida como

secuenciación de “Sanger”. Este paso permitió completar el 100 % de la secuencia

del genoma.

Las secuencias ahora ordenadas en un genoma de aproximadamente 1.7

millones de bases, de forma circular han sido depositadas en una base de datos

pública, en la Biblioteca Nacional de Medicina y el Centro Nacional de

Biotecnología de los Estados Unidos (NLM y NCBI) con la idea de que su

disponibilidad contribuya a los esfuerzos realizados en diversas partes del mundo

encaminados a entender y combatir las enfermedades infecciosas y también el

cáncer gástrico, una de las consecuencias de esta infección y mejorar la Salud

Pública en El Salvador, América Latina y el mundo.

Esta bacteria fue descubierta hace apenas 30 años y desde este momento ha sido

el foco de atención en materia de investigación de cientos de grupos de

investigación en el mundo. Su descubrimiento por Barry Marshall y Robín Warren

en Perth Western, en Australia, los hizo acreedores del prestigioso “Premio

Nobel en Fisiología o Medicina" en el año 2005.

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La bacteria es responsable de la mayor parte de las úlceras gástricas y del cáncer

de estómago (uno de los tipos de cáncer más frecuentes y letales en El Salvador

y en la población mundial), de las úlceras duodenales, y de la anemia por

deficiencia de hierro e incrementa la susceptibilidad a otros microbios patógenos

causantes de diarrea, incluyendo a la bacteria causante del cólera.

A pesar de su rol importante en estas patologías, muchas infecciones son

benignas y en algunos casos hasta se ha argumentado que es beneficiosa aunque

esta última opinión se mantiene aún de forma controversial.

El genoma de Helicobacter pylori HP ELS37 es particularmente importante por

tratarse de una cepa aislada de un paciente con cáncer gástrico, una patología

crónica con tasas de incidencia muy elevadas en la región Centroamericana. 5

2.2 Marco Teórico

Helicobacter pylori es una bacteria que infecta el epitelio gástrico humano. Muchas

úlceras y algunos tipos de gastritis se deben a infecciones por Helicobacter pylori.

En muchos casos, los sujetos infectados nunca llegan a desarrollar ningún tipo de

síntoma. Esta bacteria vive exclusivamente en el estómago humano, siendo el

único organismo conocido que puede subsistir en un ambiente tan

extremadamente ácido. Es una bacteria espiral (de esta característica morfológica

deriva el nombre de la Helicobacter) y puede «atornillarse» literalmente por sí

misma para colonizar el epitelio estomacal.

5Bertolli de Masferrer, María Teresita, Ciencia en El Salvador, Recopilación de artículos periodísticos con

enfoque científico de El Salvador, Lunes 23 de Julio de 2012, El genoma de la cepa salvadoreña de

Helicobacter pylori ELS37,http://cienciaenelsalvador.blogspot.com/2012/07/el-genoma-de-la-cepa-

salvadorena-de.html

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Anatomía del sistema digestivo

El sistema digestivo está formado por el tracto gastrointestinal que incluye la boca,

faringe, esófago, estómago, intestino delgado, intestino grueso y recto.

La misión principal del sistema digestivo es procesar diversas sustancias

presentes en los alimentos denominados nutrientes (sustancias orgánicas,

inorgánicas y agua), para que puedan de forma adecuada, ser incorporadas al

medio interno y ofertadas a través de la circulación a todas y cada una de las

células que forman parte del organismo para su correcto funcionalismo.

Para facilitar los procesos de digestión y absorción así como el transporte y

eliminación de los residuos no digeribles presentes en los alimentos, la

musculatura lisa del tracto gastrointestinal, a través de movimientos coordinados

de contracción y relajación, favorece la mezcla de las moléculas de los nutrientes

con las secreciones digestivas para obtener una eficacia óptima en la digestión.

La pared gastrointestinal está formada por una serie de componentes comunes

que intervienen en la estructura general de la pared gastrointestinal. La mucosa es

la capa más interna en contacto directo con la luz del tracto gastrointestinal. Está

formada, a su vez, por tres estructuras diferenciadas: el epitelio, la lámina propia y

la mucolaris mucosae.

La naturaleza del epitelio es muy variable en los distintos segmentos del tubo

digestivo, la lámina propia está formada por tejido conectivo laxo que contienen

fibras de colágeno y elastina. En ella se encuentran abundantes glándulas,

además de capilares (linfáticos y sanguíneos) y nódulos linfáticos.

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21

La muscularis mucosae es una delgada capa de fibras musculares lisas, que al

contraerse provocan pliegues y crestas en la mucosa. La submucosa es la capa

que sigue a la mucosa y está formada en su mayor parte de tejido conectivo laxo

con fibras de colágeno y elastina. En ella se encuentran los grandes vasos

sanguíneos de la pared gastrointestinal así como los linfáticos. (Ver Anexo Nº1).

La serosa, también denominada adventicia, es la capa más externa, y está en

contacto con la cavidad abdominal. Está formada fundamentalmente por tejido

conectivo con una cubierta de células mesoteliales escamosas, esta capa se

continúa con el mesenterio, que une el tracto gastrointestinal con la pared

abdominal y a través del cual viajan los vasos sanguíneos y linfáticos, y los nervios

que llegan al tubo digestivo.

Secreciones digestivas

La mayoría de los alimentos que son ingeridos contienen grandes moléculas

(macromoléculas) de sustancias denominadas nutrientes. Así, se encuentran

hidratos de carbono que están en forma de polisacáridos, grasas en forma de

triglicéridos, fosfolípidos y esteres de colesterol y proteínas que se componen de

polímeros de aminoácidos de alto peso molecular.

Todas las macromoléculas citadas no pueden penetrar en el medio interno, al no

poder ser absorbidas en esa forma. Esto hace que sea necesaria que estas

moléculas sean degradadas a otras más pequeñas que puedan ser absorbidas por

epitelio gastrointestinal.

Page 22: helocbacter pylori

22

Esta función del tracto se denomina digestión y es llevada a cabo por una serie de

secesiones, bien de las glándulas de la propia pared gastrointestinal o bien de las

glándulas anexas al tubo digestivo que se desembocan en la luz gastrointestinal.

Estas secreciones digestivas son: saliva, gástrica, intestinal, pancreática y biliar.

Todas las secreciones citadas, con la colaboración de los procesos de motilidad

ya estudiados, convierten esas macromoléculas presentes en los alimentos en

componentes más simples que ya pueden ser incorporados al medio interno a

través de la absorción y participar en todos los procesos metabólicos corporales.

Secreción gástrica

Desde un punto de vista macroscópico el estómago se divide en diversas regiones

que son:

Región cardiaca. Situada a la unión gastroesofágica.

Fondo (región fundida) que ocupa la parte superior de la curvatura mayor del

estómago.

Cuerpo, que es la región de mayor tamaño y ocupa unas dos terceras partes del

órgano. Antro pilórico, que se sitúa en el último tercio cerca del píloro (unión

gastroduodenal).

En las tres regiones ocupan prácticamente todo el cuerpo del estómago, y la

región glandular pilórica, que coincide con el antro pilórico. En estas regiones se

encuentran distintos tipos de glándulas:

Page 23: helocbacter pylori

23

Glándulas cardiacas y pilóricos: Así llamadas por su localización, son glándulas

que secretan moco. En la mitad superior de las glándulas pilóricas existen células

heterocromatinas llamadas glándulas G, en las que se sintetiza la hormona

gastrina, que va a influir en la producción de ácido clorhídrico; pequeñas

cantidades de gastrina se producen asimismo en la mucosa duodenal y en los

islotes pancreáticos.

Glándulas fundidas: Se localizan en cuerpo y fondo del estómago y son las que

presentan en mayor número. Estas glándulas están compuestas de tres tipos de

células: mucosas del cuello, parentales y principales.

Protección de la mucosa gástrica

Se lleva a cabo fundamentalmente por el mucus y el bicarbonato, los cuales

recubren la superficie de la mucosa gástrica de una cubierta viscosa, pegajosa y

alcalina.

El mucus, por encima de ciertas concentraciones, forma un gel y protege la

mucosa de agresiones mecánicas de los trozos de alimentos, mientras que la

secreción alcalina evita los daños químicos que podrían producir el ácido

clorhídrico y la pepsina. Ambas secreciones, por tanto, constituyen la barrera de la

mucosa gástrica, que tiene como objetivo evitar el daño de ésta por su propio

contenido, siendo necesario que ambos estén presentes.

La secreción mucosa alcalina, producida por células mucosas del cuello de las

glándulas fundidas, tienen un doble papel, enlentecer el paso de ácido desde la

Page 24: helocbacter pylori

24

lúz gástrica hacia la mucosa y neutralizar este ácido para que no pueda afectar el

enterocito.

Por otra parte el mucus enlentece la difusión de hidrogeniones desde la luz hacia

el epitelio, y además cuando llegan cerca de las células epiteliales, son

neutralizados por el bicarbonato del fluido que las baña.

Fases gástricas

Fase cefálica: esta fase ocurre antes que los alimentos entren al estómago e

involucra la preparación del organismo para el consumo y la digestión. La vista y el

pensamiento, estimulan la corteza cerebral. Los estímulos al gusto y al olor son

enviados al hipotálamo y la médula espinal. Después de esto, son enviados a

través del nervio vago.

Fase gástrica: Esta fase toma de 3 a 4 horas. Es estimulada por la distensión del

estómago y el pH ácido. La distensión activa los reflejos largos y entéricos. Esto

activa la liberación de acetilcolina la cual estimula la liberación de más jugos

gástricos. Cuando las proteínas entran al estómago, unen iones hidrógeno, lo cual

disminuye el pH del estómago hasta un nivel ácido.

Esto dispara las células G para que liberen gastrina, la cual por su parte estimula

las células parietales para que secreten ácido clorhídrico (HCl). La producción de

HCl también es desencadenada por la acetilcolina y la histamina.

Fase intestinal: Esta fase tiene dos partes, la excitatoria y la inhibitoria. Los

alimentos parcialmente digeridos, llenan el duodeno. Esto desencadena la

Page 25: helocbacter pylori

25

liberación de gastrina intestinal. El reflejo entero gástrico inhibe el núcleo vago,

activando las fibras simpáticas causando que el esfínter pilórico se apriete para

prevenir la entrada de más comida e inhibiendo los reflejos.(Ver Anexo Nº 2)

Género Helicobacter

El género Helicobacter comprende 23 especies validadas formalmente. Las

especies de Helicobacter son microaerófilas estrictas con una morfología espiral o

helicoidal. Muchas especies muestran una actividad de ureasa fuerte. Las

especies incluidas en este género tienen flagelos con vainas, ninguna especie de

Campylobacter o de Wolinellalos tiene.

Entre las especies de importancia clínica con las que cuenta este género se

encuentran:

Helicobacter pylori; cuyas características que lo distinguen de las Campylobacter

iasson sus múltiples flagelos con vaina, su fuerte hidrólisis de urea, y su perfil

singular de ácidos grasos.

Helicobacter cinaedi

Helicobacter fennelliae

Helicobacter canadensis

Helicobacter canis

Helicobacter winghamensis

Helicobacter pullorum

Y otras cepas de Helicobacter sin nombre.

Page 26: helocbacter pylori

26

Etiología de Helicobacter pylori

Helicobacter pylori, es una bacteria Gram negativa, que infecta el epitelio gástrico

humano; microaerófílica con forma de espiral que mide aproximadamente 0.5 por

3 micrómetros en tamaño y posee 2-7 flagelos que se extienden desde uno de los

polos, los cuales le brindan la habilidad de combatir las contracciones gástricas y

colonizar el epitelio. (Ver Anexo Nº 3)

La bacteria fue llamada inicialmente Campylobacter pyloridis Pero, cuando se hizo

notorio que la bacteria aislada no pertenecía a este género, después

Campylobacter pylori (al corregirse la gramática latina), después de secuenciar su

ADN, se vio que no pertenecía al género Campylobacter, y se la reemplazó dentro

del género Helicobacter. Se creó uno nuevo, Helicobacter. Helicobacter pylori fue

la primera bacteria en ser incluida en este género.Pero hasta este día se conocen

alrededor de 18-30 nuevas especies, incluyendo la cepa Salvadoreña de

Helicobacter pylori ELS37.6

Se han encontrado múltiples factores de virulencia incluyendo adhesinas (BabA,

OipA, SabA, HopQ) que ayudan a la unión del Helicobacter pylori al epitelio

gástrico, que también se ha descubierto que juegan un papel importante en la

primera colonización; una citotoxina vacuolizante (VacA S1) que causa daño

celular e inflamación resultando en apoptosis, y una proteína CagA que puede

aumentar la displasia de las células epiteliales, ambas se han asociado a la

formación de úlcera péptica y el adenocarcinoma gástrico.

6Bertolli de Masferrer, María Teresita, Ciencia en El Salvador, Recopilación de artículos periodísticos con

enfoque científico de El Salvador, Lunes 23 de Julio de 2012, El genoma de la cepa salvadoreña de

Helicobacter pylori ELS37

,http://cienciaenelsalvador.blogspot.com/2012/07/el-genoma-de-la-cepa-salvadorena-de.html

Page 27: helocbacter pylori

27

Las cepas CagA positivas son las más proclives a afectar las células epiteliales

por lo que se consideran las más virulentas y estudios enfatizan que aumenta el

riesgo de malignidad gástricas al doble. La sobrevivencia del Helicobacter pylori

en el ambiente gástrico se ve determinado por la presencia de los flagelos, los

cuales permiten a la bacteria movilizarse hacia ambientes más favorables, y

también por su capacidad de producir amonio (a partir de la urea) por medio de su

enzima ureasa.

Todos los microorganismos Helicobacter, incluido el pylori, son muy móviles

(movilidad en sacacorchos) gracias a los flagelos polares. Se cree que estas

propiedades son importantes para la supervivencia en los ácidos gástricos y el

movimiento rápido a través de la capa de moco viscoso hacia un entorno de pH

neutro.

La mayor parte de Helicobacter es positivo a catalasa y oxidasa y no fermentan ni

oxidan los carbohidratos, aunque pueden metabolizar los aminoácidos por vías de

fermentación.

En la membrana externa se en cuentran lipopolisacaridos que incluyen un lípido A,

un oligosacárido central y una cadena lateral O. El lípido de Helicobacter pylori

muestra una baja actividad de endotoxina en comparación con otras bacterias

Gramnegativos y la cadena lateral O se parece a nivel antigénico a los antígenos

del grupo Lewis de la sangre, que puede proteger a las bacterias de la eliminación

inmunitaria.

En crecimiento de Helicobacter pylori de otros necesita un medio completo

complementando con sangre, suero, carbón, almidón o yema de huevo,

condiciones microaerófilas (oxígeno bajo y dióxido de carbono aumentado) y un

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28

intervalo de temperatura de 30-37 °C, como resulta relativamente difícil aislarlo en

cultivo e identificarlos mediante pruebas bioquímicas, la mayor parte de las

enfermedades se confirmar con técnicas diferentes al cultivo.

Aspectos Epidemiológicos

La prevalencia de la colonización por Helicobacter pylori es geográfico-

dependiente, siendo ésta mayor en los países en vías de desarrollo (del 70-90%

en Asia, África, Sur América, Europa del Este, Centroamérica) y menor en los

países desarrollados (apenas 30% en Europa y América del Norte).

Se ha demostrado que puede existir una disminución en la prevalencia por rangos

de edad en la misma localización geográfica, el 57% de la población

Estadounidense mayor de 70 años era positiva a anticuerpos IgG contra

Helicobacter pylori, mientras que únicamente un 17% de positividad se encontró

en la población de 20-29 años y solamente un 5% en niños menores de 10 años.

Sin embargo en países en vías de desarrollo este fenómeno no se ha observado.

Se prevé que el número de nuevos casos aumente en aproximadamente un 70%

en los próximos 20 años. En 2012, los cánceres diagnosticados con más

frecuencia en el hombre fueron los de pulmón, próstata, colon y recto, estómago e

hígado. En la mujer fueron los de mama, colon y recto, pulmón, cuello uterino y

estómago.

Aproximadamente un 30% de las muertes por cáncer son debidas a cinco factores

de riesgo conductuales y dietéticos: índice de masa corporal elevado, ingesta

Page 29: helocbacter pylori

29

reducida de frutas y verduras, falta de actividad física, consumo de tabaco y

consumo de alcohol.

En el Salvador un estudio realizado en el año 2004 en el Servicio de

Gastroenterología del Hospital Nacional Rosales con una población de 100

pacientes se determinó que 61% fueron positivos a Helicobacter pylori por cultivo.

Además el 14% de los habitantes padecían de dispepsia no ulcerante, un 15% de

úlceras gastroduodenales y el 1% de gastritis tipo B activa crónica.7

En El Salvador los tipos más virulentos de la bacteria están presentes en muchas

regiones, como por ejemplo Ahuachapán y Sonsonate, donde incluso hay un alto

índice de cáncer gástrico y de otras enfermedades secundarias del aparato

digestivo.8

Fuente de infección y transmisión

El reservorio principal de este microorganismo es el ser humano; por lo que se

cree que la ruta más importante de transmisión es: de humano a humano y de

forma fecal-oral y oral-oral. Las secreciones que permiten la transmisión oral- oral,

que son más comunes en países desarrollados, son saliva, placa dental y el

contenido gástrico por reflujo o vómito. Mientras que se vincula la vía fecal-oral a

países en vías de desarrollo, pues los estándares de higiene son menores.

7M. Crespin, R. Hernandez, C. Sanchez. «Determinación del valor diagnóstico de los métodos utilizados para

la detección de Helicobacter pylori en pacientes sintomáticos y asintomáticos del servicio de gastroenterología del Hospital Nacional Rosales, año 2004». 2006. 8Morales, Juan José, El Inicio de la gastritis y el cáncer es la Helicobacter pylori, El Salvador. Com, 2012-

Junio-02, Tendencias. http://www.elsalvador.com/mwedh/nota/nota_completa.asp?idCat=47976&idArt=6952796 19-02-2015 17:00pm

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30

Se han identificado algunos factores de riesgo relacionados con la aparición de

esta bacteria, de los cuales los más significativos rodean el bajo nivel

socioeconómico, que se puede reflejar como un pobre nivel académico, el

hacinamiento en el hogar, inadecuada higiene, falta de agua potable, la ingesta de

alimentos como vegetales crudos, un alto consumo de sal, las dietas con

alimentos bajos en antioxidante y el tabaquismo.

Por otra parte, los países en vías de desarrollo, en donde la tasa de infección por

Helicobacter pylori se encuentra elevada, puede facilitarse la transmisibilidad ya

que hay evidencia que la infección puede provenir del ambiente, pues se ha

encontrado que la bacteria puede sobrevivir en el agua de la red de

abastecimiento y en ríos por días hasta meses, que frecuentemente son el origen

del agua que las personas consumen.

De igual forma, se han evidenciado casos de infección introgénica (por

endoscopia) y se encontró un mayor riesgo de infección en adultos con historia

familiar de cáncer gástrico.

El consumo de tabaco es el factor de riesgo más importante, y es la causa más del

20% de las muertes mundiales por cáncer en general, y alrededor del 70% de las

muertes mundiales por cáncer de pulmón. Los cánceres causados por infecciones

víricas, tales como las infecciones por virus de las hepatitis B (VHB) y C (VHC) o

por papiloma virus humanos (PVH), son responsables de hasta un 20% de las

muertes por cáncer en los países de ingresos bajos y medios.

Más del 60% de los nuevos casos anuales totales del mundo se producen en

África, Asia, América Central y Sudamérica. Estas regiones representan el 70% de

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31

las muertes por cáncer en el mundo. Se prevé que los casos anuales de cáncer

aumentarán de 14 millones en 2012 a 22 millones en las próximas dos décadas. 9

Fisiopatogenia

Helicobacter pylori es una bacteria que infecta el epitelio gástrico humano. Muchas

úlceras y algunos tipos de gastritis se deben a infecciones por Helicobacter pylori.

En muchos casos, los sujetos infectados nunca llegan a desarrollar ningún tipo de

síntoma. Esta bacteria vive exclusivamente en el estómago humano, siendo el

único organismo conocido que puede subsistir en un ambiente tan

extremadamente ácido.

Tiene la capacidad de colonizar de por vida el estómago de las personas no

tratadas, la mayor parte de las investigaciones sobre los factores de virulencia se

han centrado en múltiples factores de colonización gástrica, inflamación, alteración

de la producción de ácido gástrico y la destrucción tisular.

La colonización inicial se facilita por:

Bloqueo de la producción de ácidos gracias a la proteína inhibidora del ácido de la

bacteria.

Neutralización de los ácidos gástricos por el amoniaco generado mediante la

actividad de la ureasa de la bacteria.

9Informe mundial sobre el cáncer 2014, IARC, Nota descriptiva N°297 Febrero de 2015 OMS.

Page 32: helocbacter pylori

32

La bacteria con capacidad de movimiento activo pueden atravesar el moco

gástrico y adherirse a las células epiteliales gástricas gracias a múltiples proteínas

de adhesión a la superficie.

Las proteínas de superficie se pueden unir también a proteínas del anfitrión y esto

ayuda a las bacterias a evitar la detección inmunitaria. Las lesiones tisulares

localizadas vienen mediadas por productos generados por las ureasas, mucosina,

fosfolipasas y la actividad de la citotoxina vacuolizante A, una proteína que tras

sufrir endocitosis por las células epiteliales, causa lesiones en las células mediante

la formación de vacuolas.

Otro factor de virulencia importante es asociado a la citotoxina (cagA) que se

localiza en una islote de patogenicidad que contiene unos 30 genes

Aproximadamente. Estos genes codifican una estructura (sistema de secreción del

tipo IV) que actúa como una jeringa para inyectar la proteína cagA en las células

epiteliales del anfitrión, donde interfiere con la estructura del cito esqueleto normal

de las células epiteliales. (Ver Anexo Nº 4).

Los genes PAI (fosforribosilantranlinatoisomerasa) también introducen la

producción de interleucina 8 que atrae a los neutrófilos, se piensa que la

liberación de proteasas y moléculas reactivas del oxígeno por los neutrófilos

contribuye a la gastritis y las úlceras gástricas.

La enfermedad asociada a las Helicobacterias presentan una relación directa con

la colonización, por ejemplo la Helicobacter pylori se asocia a gastritis mientras

que especies entéricas originan gastroenteritis.

Page 33: helocbacter pylori

33

La colonización de la bacteria determina de forma invariable datos histológicos de

gastritis, es decir inflamación por neutrófilos y células mononucleares en la zona

gástrica.

La fase aguda de la gastritis se caracteriza por una sensación de plenitud,

náuseas, vómitos e hipoclorhidria, esto puede evolucionar a una gastritis crónica,

en la que la enfermedad se limita al antro gástrico, en pacientes con una secreción

de ácido normal o afecto a todo el estómago (gastritis) cuando se suprime la

secreción acida.

Un 10-15% de los pacientes con gastritis crónica desarrollan úlceras pépticas, las

úlceras suelen localizar en focos con inflamación intensa, especialmente en la

unión entre el cuerpo y el antro (úlcera gástrica) o la parte proximal del duodeno

(úlcera duodenal) la bacteria también origina hasta el 85% de las úlceras gástricas

y más del 95% de las úlceras duodenales.

El reconocimiento de la implicación de Helicobacter pylori ha modificado de forma

espectacular el tratamiento y pronóstico de la enfermedad ulcerosa péptica. La

gastritis crónica acaba sustituyendo la mucosa gástrica normal por fibrosis con

proliferación de un epitelio de tipo intestinal. Este proceso aumente el riesgo de

sufrir un carcinoma gástrico casi 100 veces.

Este riesgo viene condicionado por la cepa y la respuesta del anfitrión (cepa

positiva a cagA y elevada producción de IL-1 se asocian a un riesgo mayor de

cáncer. Las infecciones se asocian también a infiltración por tejido linfoide de la

mucosa gástrica. En un número de pacientes muy pequeños, se puede producir

una población monoclonal de linfocitos B que evolucionan a un linfoma MALT.

Page 34: helocbacter pylori

34

Helicobacter pylori y Cáncer

Catalogado por la Organización Mundial de la Salud (OMS) y la Agencia

Internacional de Investigación para el cáncer como un Carcinógeno tipo I. Se ha

visto que existe un incremento en el riesgo de aparición de adenocarcinoma

gástrico (de 2 a 3 veces) que constituye el 85% de todas las malignidades

gástricas en presencia de Helicobacter pylori.

La cascada cancerosa de Pelayo Correa provee un esquema en que

Helicobacter pylori se ve asociada en el 100% de las veces a una gastritis

superficial crónica. Esta condición luego evoluciona en el 50% de las veces a una

gastritis atrófica crónica de la cual si se continúa el daño el 40% de estos

pacientes desarrollarán metaplasia intestinal. De estos últimos el 8% de los casos

puede llegar a generar displasia del tejido lo que puede convertirse en

adenocarcinoma (1%).

Se han encontrado diversos factores asociados a Helicobacter pylori, que se

catalogan como oncogénicos entre los que encontramos la citotoxina vacuolizante

(VacA), la que es mediadora de la inflamación crónica, que induce a los neutrófilos

a la liberación de especies reactivas de oxígeno como el superóxido y los iones

hidroxilo que dañan el ADN. Así mismo la presencia de Helicobacter pylori,

disminuye la concentración local de vitamina C en el estómago.

Por la pérdida de células parietales secretoras del ácido clorhídrico (HCl), la

consecuente elevación del pH, permite la proliferación de bacterias formadoras de

nitritos los cuales en un ambiente óptimo serían bloqueados por el ácido

ascórbico. Estudios Japoneses han encontrado que posterior a la resección

endoscópica de un cáncer gástrico temprano, erradicar Helicobacter pylori tiene un

Page 35: helocbacter pylori

35

efecto inhibitorio en el aparecimiento del cáncer gástrico meta crónico; y en

aquellos pacientes que sufren de gastritis atrófica secundaria a la infección por

Helicobacter pylori la erradicación de la misma previene el aparecimiento del

cáncer gástrico.

Otra neoplasia asociada al microorganismo en discusión, es el linfoma asociado a

mucosas (MALT por sus siglas en ingles) el cual constituye 3% de todas las

neoplasias gástricas y el 10% de todos los linfomas. Se ha visto que la mucosa

gástrica normal no contiene tejido linfático, pero la colonización crónica de

Helicobacter pylori CagA positivo incrementa hasta 6 veces el riesgo que se

desarrolle. Al igua l que el cáncer gástrico, al erradicar en Helicobacter pylori en

pacientes con MALT se ha evidenciado una mejoría histológica, endoscópica y

hasta observarse reversión de la patología.

Otras patologías asociadas a la infección por Helicobacter pylori extra

gastrointestinales como la púrpura trombocitopénia idiopática (PTI), anemia por

deficiencia de hierro, síndrome cardíaco X, entre otros, se cree pueden ser

causados por Helicobacter pylori por una reacción inflamatoria a distancia

mediada por proteínas inflamatorias como la proteína C reactiva y péptidos vaso

activos como el péptido vaso activo intestinal.

Enfermedad autoinmune donde los anticuerpos producen una destrucción

plaquetaría que conlleva una mayor facilidad a equimosis y sangrados, se ha

encontrado que puede haber una elevación plaquetaría al erradicarse el

Helicobacter pylori, sugiriendo así el involucramiento de esta bacteria en la

patología.

Page 36: helocbacter pylori

36

Se presume que hay un involucramiento directo del Helicobacter pylori, en

diversas patologías como la anemia por deficiencia de hierro, urticaria crónica,

mal absorción por deficiencia de cobalamina, ya que al erradicarlo hay una mejoría

clínica.

Otras patologías como la Diabetes mellitus; enfermedad coronaria; cáncer

pulmonar; mielodisplasias; fibrosis hepática; enfermedades pancreáticas, como

pancreatitis autoinmune y el cáncer pancreático, y el Parkinsonismo se han

relacionado con la infección por Helicobacter pylori aunque haya poca evidencia

que lo respalde.

Métodos Diagnósticos.

Históricamente, la infección por Helicobacter pylori era diagnosticada por métodos

que se basaban en la toma de biopsias. En la actualidad de la práctica clínica,

este examen continúa siendo el más confiable, pero son invasivos, poseen un alto

costo y no siempre son aplicables en los pacientes.

Por ese motivo se desarrollaron técnicas no invasivas de muestreo que son las de

mayor uso por su comodidad y su gran disponibilidad. Y entre estas encontramos:

Pruebas no invasivas

Test de Urea aspirada: Se basa en la actividad de la ureasa de Helicobacter pylori,

pero en este caso con urea marcada. Como resultado de la ingestión de una

suspensión de urea marcada con C13 o C14, ocurre la hidrólisis de la urea y se

forma anhídrido carbónico que se absorbe en los tejidos, se difunde a la sangre,

Page 37: helocbacter pylori

37

es transportado a los pulmones y de allí es exhalado a través del aliento.(Ver

Anexo Nº5)

La cantidad de CO2 marcado que se exhala está en relación directa con la

intensidad de la hidrólisis de la ureasa del microorganismo y, por tanto, con la

presencia de Helicobacter pylori. La prueba del aliento es un método cualitativo

que, a diferencia de la prueba de la ureasa rápida, estudia toda la superficie del

estómago, son muy altas su sensibilidad y especificidad, tanto en pacientes que

no han sido tratados previamente, como en aquellos que sí han recibido un

tratamiento erradicador.

Hasta dos semanas antes del examen, se debe dejar de tomar cualquier

antibiótico, medicamentos que contengan bismuto, tales como Pepto-Bismol e

inhibidores de la bomba de protones (IBP).

Durante el examen, se toma una sustancia especial que contiene urea. La urea es

un producto de desecho que el cuerpo produce a medida que descompone la

proteína. La urea utilizada en este examen ha sido convertida en radiactiva pero

inocua.

Microscopía: Helicobacter pylori se detecta en el examen histológico de las

biopsias gástricas, aunque el microorganismo se puede visualizar con facilidad en

las muestras teñidas con Hematoxilina- eosina o Gram, la tinción de plata de

Warthin –Starry es el método de tinción más sensible. (Ver Anexo Nº6)

Cuando se obtiene una cantidad de muestra adecuada y la analiza un histólogo

experto, la sensibilidad y especificidad de la prueba se aproximan al 100% y se

considera la prueba diagnóstica de referencia.

Page 38: helocbacter pylori

38

Los preparados por aplastamiento (macerados) del material de biopsia pueden ser

teñidos con Gram con buenos resultados; el colorante de contraste fucsina básica

al 0.1% permite reconocer mejor la morfología de las bacterias.

Antígeno para Helicobacter pylori en heces: La detección de antígenos de

Helicobacter pylori puede realizarse a través de técnicas inmunoenzimáticas cuya

reacción de color es medida espectrofotométricamente. Es sensible 99% y

especifica 96%, no es invasiva y detecta la infección activa. Además de un

análisis inmunocromatográfico que detecta a la enzima catalasa, en su estado

nativo en heces fecales, fue desarrollado y empleado con el fin de detectar

directamente Helicobacter pylori. (Ver Anexo Nº7)

Prueba serológica Anticuerpos para Helicobacter pylori IgG: La serología es

importante herramienta para la detección selectiva en el diagnóstico de

Helicobacter pylori mediante la utilización de las distintas pruebas

comercializadas, aunque los anticuerpos IgM desaparecen con rapidez, los

anticuerpos de tipo IgA e IgG pueden persistir durante meses o años.Toma de

muestra. (Ver anexo N°8).

Como esta prueba no se puede emplear para discriminación las infecciones

actuales y antiguas, además los títulos de anticuerpos medidos no se

correlacionan con la gravedad de la enfermedad ni con la respuesta del

tratamiento, sin embargo estos estudios resultan útiles para demostrar la

exposición a las bacterias, con fines epidemiológicos o para la valoración inicial de

un paciente sintomático.

Uno de los Test comerciales basado en la inmunocromatografía es la Prueba

Rápida asegurada para Helicobacter pylori (Assure TM Helicobacter pylori Rapid

Page 39: helocbacter pylori

39

Test). Al emplear este ensayo en estudios realizados en distintas poblaciones, se

ha alcanzado una sensibilidad del 96 % y una especificidad del 94 %. (Ver Anexo

Nº9)

Las técnicas serológicas son generalmente simples, reproducibles y económicas,

pero además, son las únicas que permiten realizar estudios epidemiológicos y

determinar la prevalencia y la edad de adquisición de la infección por Helicobacter.

pylori en diferentes poblaciones.

Pruebas detección de anticuerpos en orina y cavidad oral: La detección de

anticuerpos en orina ha sido empleada con éxito en el diagnóstico de varias

enfermedades, como el cáncer de mama y la aspergilosis invasora.

Cuando ocurre la infección por Helicobacter pylori se eliminan anticuerpos de

clase IgG por la orina. Basado en este principio, fueron desarrollados en Japón 2

juegos comerciales: un Ensayo por Inmunoabsorción Ligado a Enzimas (Enzyme-

Linked Immuno Sorbent Assay ELISA) estándar denominado Urineliza y un juego

basado en inmunocromatografía, denominado Rapirum.

Varios estudios han evaluado la saliva y la placa dental como posibles muestras

no invasivas para el diagnóstico de Helicobacter pylori empleando diversas

técnicas. Juegos comerciales basados en la detección de anticuerpos anti-

Helicobacter pylori en saliva se han empleado, pero los valores de sensibilidad y

especificidad han sido inferiores al 90 %. Por otra parte, el cultivo de la bacteria a

partir de la cavidad oral pocas veces ha sido positivo.

Page 40: helocbacter pylori

40

Otras pruebas serológicas

Las técnicas más empleadas para la detección de anticuerpos son Ensayos por

Inmunoabsorción Ligado a Enzimas (ELISA), aglutinación en látex,

inmunoensayos sobre papel de nitrocelulosa o Inmunotransferencias

(immunoblotting) e Inmunocromatografías (ICM), entre otras.

Pruebas invasivas

Estudio histológico de biopsia: La evaluación histológica de Helicobacter pylori

está basada usualmente en muestras de tejido obtenidas del área afectada. La

histología no solo permite el diagnóstico de la infección, sino además proporciona

información sobre los cambios morfológicos de la mucosa gástrica evaluando la

densidad de Helicobacter pylori, la severidad de la gastritis, la presencia de

gastritis crónica atrófica, folículos linfoides, la actividad inflamatoria aguda, el daño

epitelial y la presencia de metaplasia intestinal.

Endoscopia Digestiva Superior: La endoscopia superior es el procedimiento que

permite examinar la parte superior del intestino, incluye el esófago, estómago y

la parte proximal del duodeno. Este procedimiento es realizado por un

médicoespecialista en gastroenterología utilizando un video endoscopio el cual

permite visualizar de forma precisa las diferentes estructuras pudiendo

diagnosticar cualquier alteración a este nivel.

Preparación para la endoscopia superior:

Page 41: helocbacter pylori

41

Estas instrucciones nos permiten obtener buena visualización del tracto digestivo y

evitar complicaciones durante el procedimiento. El paciente no debe comer ni

beber nada, incluyendo agua, entre 6 y 8 horas previas al procedimiento. Por

ejemplo, si el procedimiento se efectúa en horas de la mañana el paciente no debe

comer ni beber nada después de la medianoche del día anterior.

Si existe algún problema con el vaciamiento gástrico como en pacientes con

Diabetes el tiempo en ayunas debe ser mayor, esto permite que el estómago este

completamente limpio para visualizar de manera correcta todos los detalles de

estas estructuras. Los pacientes pueden ingerir ciertos medicamentos que sean

estrictamente necesarios como es el caso de medicinas para la hipertensión o la

diabetes.

Algunos medicamentos deben ser suspendidos previamente como es el caso de

los anticoagulantes o derivados de la aspirina. Puede cepillarse los dientes como

de rutina. El paciente debe ir acompañado por un familiar cercano debido a los

efectos de la sedación consiente utilizada en el procedimiento. Este procedimiento

no duele, ya que el endoscopio es un instrumento delgado y flexible.

Una semana antes del estudio el paciente no debe ingerir vitaminas que

contengan hierro o medicamentos que puedan producir daño a nivel del estómago

como: Analgésicos antiinflamatorios (diclofenaco, ibuprofeno, piroxicam, etc.),

aspirina, plavix, alka‐selzer. No tomar antiácidos ya que forman una capa que

impide la visualización de la mucosa en el momento del examen.

Si el día del estudio toma medicamentos para la tensión arterial, diabetes, tiroides

puede tomarlos con una pequeña cantidad de agua. Se debe colocar anestesia

local en la garganta para disminuir la sensación de náuseas, al pasar el equipo

Page 42: helocbacter pylori

42

por la faringe y además por vía endovenosa se colóca el midazolam cuya dosis se

calcula de acuerdo al peso del paciente. Se solicita retirar las prótesis dentales si

las utiliza. Debe vestir ropa cómoda y confortable.

El estudio dura entre 10 y 20 minutos aproximadamente. Se indica que se

acueste en la camilla y le colocan un protector bucal (boquilla) lo cual facilita la

inserción del instrumento, minimiza la posibilidad de daño al instrumento o a las

piezas dentales del paciente. Es normal la acumulación de saliva en la boca, no se

debe deglutir, deje que escurra en la toalla colocada al lado de su cabeza. La

endoscopia no debe producir ningún tipo de dolor.

El video endoscopio que se utiliza consiste en un tubo que posee lentes y una

fuente de luz y que permite obtener imágenes de alta definición en un monitor a

color. Estas imágenes magnificadas permiten la observación cuidadosa de los

detalles de la mucosa gástrica en busca de patologías como gastritis, úlceras o

tumores.

El tubo pasa a través de la boca, el esófago, luego al estómago y duodeno, con

facilidad y bajo visión directa del operador por lo que la posibilidad de que vaya a

través de la vía respiratoria es nula. También de ser necesario se puede tomar

muestras de tejido (biopsias). (Ver Anexo N°10)

Es importante saber que la toma de biopsia no produce ningún tipo de dolor ni

incomodidad para el paciente. Para realizar el estudio debemos colocar aire dentro

del estómago lo que nos permite mejorar la visualización del estómago, esófago y

duodeno por lo que es posible que se produzca una sensación de distensión

abdominal que mejora al eructar o cambiar de posición, en ningún momento la

endoscopia interfiere con la respiración regular del paciente.

Page 43: helocbacter pylori

43

Instrucciones especiales:

Se aplican a pacientes en los siguientes casos:

Pacientes con diabetes tipo 1 que reciben insulina en los cuales no se debe

administrar la dosis de insulina matutina en la mañana del estudio.

Pacientes portadores de válvulas cardiacas, antecedentes de endocarditis en los

cuales se debe administrar antibióticos previos al procedimiento.

Pacientes que consumen anticoagulantes orales (anasmol, etc.).

Recuperación: La recuperación del paciente es rápida ya que se utilizan

medicamentos de acción corta, se debe recordar que pueden existir mareos,

fatiga, dificultad en la concentración, sensación de cansancio por lo que el

paciente no debe manejar después del procedimiento y descanso posterior al

estudio. El paciente puede comer media hora después del procedimiento a no ser

que exista alguna contraindicación para ello.

Test rápido de ureasa: Es posible estudiar en la muestra de biopsia si existe

actividad de la ureasa, la abundancia de la ureasa producida por Helicobacter

pylori permite la detección de su metabolismo alcalino en menos de 2 horas, la

sensibilidad de la prueba directa con muestras de biopsias oscila entre del 75 y

95%, sin embargo, la especificidad se aproxima al 100%, de forma que una

reacción positiva es un dato altamente sugestivo de infección activa.

Page 44: helocbacter pylori

44

Cultivo: El aislamiento mediante cultivo de Helicobacter pylori de muestras de

biopsia de tejidos del antro gástrico es sin duda el método más específico en el

diagnóstico del microorganismo. No obstante su sensibilidad varía notablemente

en relación con diferentes variables como: la recogida de la muestra, transporte,

los medios de cultivo utilizados, las condiciones de incubación (porcentaje de CO2

y humedad principalmente) además de que su crecimiento es lento y las primeras

colonias suelen aparecer entre el 5º y 7º día y pudiendo tardar hasta 10 días,

observándose como pequeñas colonias traslúcidas y circulares.

La identificación del Helicobacter pylori se hace por la actividad de sus enzimas

bacterianas: ureasa, catalasa y oxidasa. Para efectuar el aislamiento de H.

pylori se han utilizado varios medios de cultivo, entre los que se encuentran

diferentes formulaciones que contienen agar, como: Caldo cerebro-corazón,

Columbia, Brucella, Wilkins-Chalgren y Mueller-Hinton.

Todos estos medios son suplementados con 5-10 % de sangre de caballo, carnero

o humana u otros aditivos, como la hemina, isovitalex, ciclodextrina y almidón;

además de una combinación de al menos 4 antibióticos selectivos. De todos los

medios de cultivo, la base de agar Columbia suplementada con 7 % de sangre y

los antibióticos trimetoprima, vancomicina, cefsulodina y anfotericina B, ha sido el

más empleado para el aislamiento de Helicobacter pylori.

Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR): La PCR es un método de alta

sensibilidad y especificidad , capaz de detectar cantidades tan bajas como una

sola bacteria, cuenta con la ventaja de poderla utilizar también con muestras de

bilis, jugo gástrico, saliva, placa dentaria y heces; además de la biopsia gástrica

aportando una ayuda considerable no solo en campo del diagnóstico de la

infección sino también en la tipificación bacteriana , en la detección de los factores

Page 45: helocbacter pylori

45

genéticos responsables de la virulencia y en la resistencia a los antibióticos, ya

que la PCR nos permite la ampliación por detección de un fragmento de ADN

específico de Helicobacter pylori.

La PCR permite identificar los genes característicos de Helicobacter pylori. El

mayor interés radica en la detección del gen CagA, que identifica las cepas más

virulentas relacionadas con la úlcera péptica y el cáncer gástrico o en la

investigación del gen VacA que se ha asociado con una mayor producción de

citotoxinas. La búsqueda de estos genes se puede realizar directamente sobre la

biopsia, o a partir de cepa aisladas en el cultivo.

La PCR también posee varias limitaciones: Es costosa, el resultado no es

inmediato, requiere una solución buffer especial para depositar la muestra de

tejido y congelarla hasta su determinación y exige un laboratorio de alta

tecnología. Son técnicas laboriosas que requieren personal experimentado por no

disponer de preparados comerciales y no están estandarizadas para su utilización

como método de rutina en el diagnóstico de la infección.

Otras pruebas

Prueba del hilo o “entero-test”: Este método de diagnóstico, muestra de forma

directa la presencia de Helicobacter pylori sin necesidad de realizar una

endoscopia, ha sido propuesto por un grupo español.

Se emplea un hilo de nailon con gran capacidad de absorción unido a una cápsula

que deglute el paciente y se mantiene en la cavidad gástrica durante una hora. Al

hilo quedan adheridas secreciones gástricas que posteriormente son cultivadas o

Page 46: helocbacter pylori

46

empleadas para la detección de Helicobacter pylori mediante técnica de PCR.

Los resultados, comparados con los del cultivo de muestras obtenidas mediante

biopsia endoscópica, son buenos. Se han realizado modificaciones de la técnica

descrita inicialmente por Pérez-Trallero, algunas al parecer con menos

posibilidades de contaminarse con la flora saprófita de la cavidad oral.

Esta técnica invasiva tiene ventajas ya que los métodos para su realización son

de bajo costo, su sencillez (puede ser empleado tanto en edad pediátrica como

geriátrica), su inocuidad, buena aceptación por parte del paciente y que permite la

realización de antibiogramas e incluso la diferenciación de cepas en las muestras

obtenidas.

Como contrapartida, obtiene solo secreciones gástricas, en las cuales en

determinadas condiciones puede existir una baja concentración de

microorganismos y por tanto producir falsos negativos, que se necesitan medios

de cultivo muy selectivos por la importante contaminación del hilo con flora de la

cavidad oral y que precisa mucho tiempo para su realización, además de no

permitir el diagnóstico de la lesión histológica producida por Helicobacter pylori.

El cultivo antimicrobiano a partir de muestras obtenidas por entero test, en

pacientes con fracaso erradicador comprobado por prueba del aliento y en los que

se desee evitar la gastroscopia, puede ser una indicación a considerar.

Tratamiento

Antimicrobianos

Page 47: helocbacter pylori

47

El tratamiento de esta infección debe incluir antimicrobianos más sales de

bismuto. Entre los antimicrobianos que se pueden utilizar están: amoxicilina,

macrólidos, tetraciclinas y 5 nitroimidazoles, como el metronidazol.

Régimen de triple terapia

Uno de los métodos más aceptados en pacientes con úlceras pépticas e infección

por Helicobacter pylori, consiste en la administración de subsalicilato de bismuto,

metronidazol y amoxicilina por 14 días, además de un antiácido por 2 semanas.

La terapia cuádruple

Consiste en añadir al régimen de triple terapia un inhibidor de la bomba de

protones, como el omeprazol, lo cual ha demostrado ser más eficaz (90 – 98% de

erradicación) que la terapia triple (85%) de erradicación y con menor número de

efectos colaterales, dado la menor duración del tratamiento.

Otros regímenes

También hay otros regímenes, como el de la claritromicina- omeprazol o

raniditidina-citrato de bismuto o amoxicilina-omeprazol.

Prevención

La vacunación contra Helicobacter pylori ha sido exitosa en modelos animales

utilizando la administración orogástrica de antígenos de Helicobacter pylori. La

Page 48: helocbacter pylori

48

ureasa recombinante protege y cura infecciones en modelos animales, y ha

demostrado también ser efectiva en estudios fase 1 en humanos.

Existen también medidas muy viables que se pueden tomar en cuenta y si se

aplican de forma cotidiana pueden prevenir un gran porcentaje de casos positivos

a Helicobacter pylori.

Procurar trabajar en un área ventilada. Si no se hace, por lo menos

mantener las puertas abiertas para dejar que fluya el aire fresco.

Lavarse las manos frecuentemente y de la manera correcta.

Usar una toalla de papel o papel de baño para abrir la puerta del baño

después de lavarse las manos. Aunque parezca excesivo, si alguien antes

de ti no se lavó las manos y abrió la puerta, los gérmenes de sus manos

están todavía depositados en la manija de la puerta.

Procurar no tocarse la cara, especialmente en el área alrededor de la boca

o de la nariz.

Lavarse las manos después de cubrirse para toser o estornudar, o después

de sonarse la nariz.

Procurar no comer alimentos que han sido preparados en un ambiente

"antihigiénico", observe cómo es la preparación de la comida, qué tan limpia

parece ser el área, etc.

Page 49: helocbacter pylori

49

No comer alimentos que han estado afuera todo el día. Esto incluye

ensaladas, porciones de pizza, pasteles, sándwiches, carnes, etc.

Beber sólo agua limpia de una fuente confiable. Use filtros u otros métodos

para descontaminar el agua si viaja o está de campamento.

Lavarse las manos antes de cocinar o de preparar comida. También cuando

haya terminado la preparación, ya que la bacteria podría estar en la carne o

en la suciedad de los vegetales, etc.

Mantener las tablas de cortar limpias. Lavar las tablas de cortar en el

lavabo. Las tablas de madera deberían dejarse debajo de agua caliente por

30 segundos.

Lavarse las manos cuando visite hospitales y cuando salgas de ellos. Si

cuida a una persona enferma, mantenga todo lo más limpio posible,

incluyendo tus manos.

Lavarse las manos después de tocar a sus mascotas y otros animales. Esto

incluye granjas de mascotas, tus propios animales domésticos y los

animales que visitan. Nunca sabrá en dónde han estado y sin pensarlo

podría meter sus dedos en su boca.

Page 50: helocbacter pylori

50

CAPITULO III

OPERACIONALIZACION DE OBJETIVOS EN VARIABLES

Objetivos

Variables

Conceptualización

Indicadores

Determinar la

incidencia de

casos positivos a

anticuerpos de

Helicobacter pylori

en pacientes

asintomáticos de

18 a 60 años de

edad que

consultan el

Hospital Centro

Médico Lourdes;

durante el período

de Enero a

Diciembre del

2014.

Casos positivos a

anticuerpos de

Helicobacter

pylori.

Es una bacteria

que infecta el

epitelio gástrico,

responsable de

causar

inflamaciones en

el estómago.

Casos

positivos.

Casos

negativos

Identificar el

género de los

pacientes en el

que predomina la

presencia de

anticuerpos para

Género

Conceptos

sociales de las

funciones,

comportamientos,

actividades, y

atributos que cada

Masculino

Femenino

Page 51: helocbacter pylori

51

Helicobacter

pylori. durante el

período de Enero

a Diciembre del

2014.

Sociedad

considera

apropiado para los

hombres y

mujeres.

Estado social y

legal que nos

identifica como

hombres y

mujeres.

Clasificar según

la edad de los

pacientes, la

frecuencia de

casos positivo a

anticuerpos para

Helicobacter

pylori.

Edad

Tiempo de

existència de una

persona desde su

nacimiento

18 - 23

24 - 29

30 - 36

37 - 42

43 - 48

49 - 54

55 – 60

Page 52: helocbacter pylori

52

CAPÍTULO IV

DISEÑO METOLÓGICO

4.1 Tipo de Estudio

Esta investigación se realizó a través de los tipos de estudio: Documental

Descriptivo y Retrospectivo.

4.1.2 Documental

Porque se hizo a partir de diferentes textos, tesis, revistas, artículos y algunos

libros digitales para la base teórica e histórica del trabajo de investigación en

estudio.

4.1.3 Descriptivo

Porque se determinó la frecuencia con que ocurren las variables en estudio, en la

que se hizo referencia a la situación actual que presenta la población salvadoreña

en cuanto a seropositividad a anticuerpos de Helicobacter pylori.

Page 53: helocbacter pylori

53

4.1.4 Retrospectivo

Porque se indagó el fenómeno que está ocurriendo a través de datos anteriores

dentro del tiempo determinado.

4.2 Población y Muestra

4.2.1 Población

Para el estudio se tomó como población 146 usuarios asintomáticos de 18 a 60

años que consultaron el Hospital Centro Médico Lourdes, Municipio de Colón,

Departamento de La libertad de Enero a Diciembre de 2014.

4.2.2 Muestra

De la población anteriormente mencionada se utilizaron los datos de usuarios

asintomáticos por Helicobacter pylori de 18 a 60 años que consultarón en el

Hospital Centro Médico Lourdes, Municipio de Colón, Departamento de La

Libertad de Enero a Diciembre de 2014. Ya que la dificultad que se tuvo en

muestrear el 100 % de la población, se determinó una muestra representativa de

dicha población y para dicho cálculo se utilizó la fórmula para poblaciones finitas

que a continuación se detalla:

Page 54: helocbacter pylori

54

N = (Z) 2 P x Q x N

____________________

(N – 1) E 2 + Z 2 P x Q

Dónde:

n = Tamaño de la muestra

N = Tamaño de la población (146)

Z = Valor crítico del coeficiente de confianza (1.96)

P = Proporción de que ocurra un evento (0.5)

Q = Proporción de que no ocurra un evento (0.5)

E = Error muestra (0.05)

n = (1. 96)² (0.5) x 0.5 x 146

_____________________________

(146 - 1) (0.05)² + (1.96)² (0.5) (0.5)

n= 3.8416 (0.5) x 0.5 x 146

_____________________________

145 (0.025) + (3.8416) (0.25)

Page 55: helocbacter pylori

55

n= 1.9208 x 73

_______________

0.3625 + 0.9604

n = 140.2184

_______________

1.3229

n = 106 (Muestra).

4.3 Métodos, Técnicas e Instrumentos

4.3.1 Métodos

Para la realización de la presente investigación se utilizaron los métodos: Lógico,

Analítico, Síntesis y Estadístico.

Método Lógico: Este método permitió realizar una investigación de forma

ordenada y secuencial, desde la identificación del problema, la evolución que ha

presentado, hasta obtener las conclusiones y recomendaciones de la misma.

Método Analítico: Este método permitió hacer un análisis profundo, exhaustivo

y detallado de la problemática a investigar.

Page 56: helocbacter pylori

56

Método de Síntesis: Este método dará paso a estudiar la evolución de la

problemática, obtener información concreta del estado de la población estudiada,

además, establecer conclusiones finales y de esa forma determinar soluciones

alternativas.

Método Estadístico: El método que se utilizó es el porcentual, el que ha

facilitado el análisis de la información obtenida; de una forma más sencilla y

versátil.

4.3.2 Técnicas

Las técnicas por medio de las cuales se obtuvieron los resultados son:

Revisión y recolección de información de los expedientes de pacientes

atendidos en el Hospital Centro Médico Lourdes, Municipio de Colón,

Departamento de La Libertad.

Tabulación de datos obtenidos.

Técnica de laboratorio como:

1. Técnica de flebotomía (Ver Anexo Nº 8)

2. Técnica cualitativa de anticuerpos para Helicobacter pylori (Ver

Anexo Nº 11)

Page 57: helocbacter pylori

57

4.3.3 Instrumentos

Hoja de registro de información o Tabulador de datos de la información.

(Ver Anexo Nº 12)

4.4 Procedimientos

4.4.1 Recolección de la Información

Se recolectó la información de pacientes que consultaron de Enero a Diciembre

de 2014 en el Hospital Centro Médico Lourdes, en un calendario de actividades de

acuerdo al siguiente cronograma.

Nombre de los

integrantes del grupo

de investigación.

En

ero

Feb

rero

Ma

rzo

Ab

ril

Ma

yo

Ju

nio

Ju

lio

Ag

osto

Se

ptie

mb

re

Octu

bre

No

vie

mb

re

Dic

iem

bre

Total

De

Muestra

Auxiliadora Del

Carmen López López

21

Patricia Carolina

Ramírez Ayala

21

Yanci Ileana

Segura Funes

21

Karen Maricela

Vásquez Menjivar

21

Winderman Emilio

Hernández Alvarado

22

TOTAL 106

Page 58: helocbacter pylori

58

4.4.2 Tabulación de datos.

Los datos obtenidos en la investigación se realizó a través de cuadros estadísticos

simples elaborados de la siguiente manera.

VARIABLE INDICADOR FRECUENCIA TOTAL

4.5 Análisis e interpretación de resultados.

Con la información que se obtuvo se realizó el análisis en forma individual y

posteriormente general de acuerdo a los objetivos del problema a estudiar, y para

el análisis se aplicó el estadístico porcentual de los datos de mayor referencia el

cual se presenta en cuadros elaborados de la siguiente manera.

VARIABLE INDICADOR FRECUENCIA PORCENTAJE TOTAL

Page 59: helocbacter pylori

59

Para obtener el tanto porciento se aplicó la fórmula siguiente:

% : F x

____________ X 100

100

% = Porcentaje (la cantidad encontrada del total estudiado)

F x = Número de veces que se repite el dato.

N = Número total de muestra.

100 = Constante.

Page 60: helocbacter pylori

60

CAPITULO V

ANALISIS E INTERPRETACION DE RESULTADOS

CUADRO # 1

Frecuencia de casos positivos y negativos a anticuerpos de Helicobacter pylori en

pacientes asintomáticos de 18 a 60 años de edad que consultan el Hospital Centro

Médico Lourdes, durante el período de Enero a Diciembre del 2014.

Fuente: Hospital Centro Médico Lourdes Colon

Gráfico # 1

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

57%

43% POSITIVO

NEGATIVO

CASOS POSITIVOS Y NEGATIVOS A ANTICUERPOS DE HELICOBACTER PYLORI

RESULTADO FRECUENCIA PORCRNTAJE %

POSITIVO 60 57%

NEGATIVO 46 43%

TOTAL 106 100

Page 61: helocbacter pylori

61

En el gráfico anterior se refleja la incidencia de casos positivos y negativos a

anticuerpos a Helicobacter pylori, obtenidos de los pacientes asintomáticos que

consultan el Hospital Centro Médico Lourdes, en el periodo que comprende de

Enero a Diciembre del 2014; dando como respuesta a un elevado dato de 57% de

casos positivos y un 43% de casos negativos de toda la población analizada.

La presencia elevada de anticuerpos a Helicobacter pylori se debe a la mala

higiene personal, alimenticia, hacinamiento, aguas contaminadas, y área

geográfica con riesgos en potencia, lo cual ayuda a que esta bacteria se esparza o

se active en el organismo muy fácilmente en toda la población en contacto;

generando un nivel alto de transmisión, que en algunos casos y dependiendo de

nuestro sistema inmunológico podrán ser o no ser sintomáticos en la población.

Page 62: helocbacter pylori

62

CUADRO # 2

Frecuencia género de pacientes en el que predomina la presencia de anticuerpos

para Helicobacter pylori, que consultan en el Hospital Centro Médico Lourdes,

durante el período de Enero a Diciembre del 2014.

Fuente: Hospital Centro Médico Lourdes Colon

Gráfico # 2

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

45%

55%

FEMENINO

MASCULINO

GÉNERO DE PACIENTES EN EL QUE PREDOMINA LA PRESENCIA DE ANTICUERPOS PARA HELICOBACTER PYLORI.

GENERO FRECUENCIA PORCENTAJE %

FEMENINO 48 45

MASCULINO 58 55

TOTAL 106 100

Page 63: helocbacter pylori

63

Se refleja el predominio del genero más afectado con anticuerpos positivos a

Helicobacter pylori; dando como resultado que el 55% de la población total

afectada, pertenece al género masculino y el 45% restantes son pacientes del

género femenino.

El resultado indica que la población masculina es la más afectada, comolo de

muestran los resultados establecidos, siendo la causa más relevante la ingesta de

alimentos de poco aseo consumidos en la calle o establecimientos que son

frecuentados por esta población, lo que por consiguiente hace más vulnerable no

solo a la población masculina sino a toda la población en general.

Page 64: helocbacter pylori

64

CUADRO # 3

Frecuencia de rango de edad en que se manifiesta la positividad a anticuerpos

para Helicobacter pylori, en los pacientes asintomáticos de 18 a 60 años de edad

que consultan el Hospital Centro Médico Lourdes, durante el período de Enero a

Diciembre del 2014.

Fuente: Hospital Centro Médico Lourdes Colon

Gráfico # 1

0%

2%

4%

6%

8%

10%

12%

14%

16%

18%15%

12%

15% 13%

15% 13%

17% 18 – 23

24 - 29

30 - 35

36 - 41

42 - 47

48 - 53

54 - 60

CLASIFICASION SEGUN EDAD A CASOS POSITIVOS A ANTICUERPOS A HELICOBACTER PYLORI

RANGO DE EDAD POSITIVO

FRECUENCIA PORCENTJE %

18 – 23 9 15

24 - 29 7 12

30 - 35 9 15

36 - 41 8 13

42 - 47 9 15

48 - 53 8 13

54 - 60 10 17

TOTAL 60 100

Page 65: helocbacter pylori

65

Según el análisis que se realizó en los casos positivos a Helicobacter pylori de los

pacientes que visitan el Centro Médico Lourdes, en el periodo de Enero a

Diciembre del 2014 ; se definió que el mayor porcentaje de casos positivos se

refleja en las edades de 56 a 60 años de edad con un 17% ; le siguen con un 15%

los pacientes que oscilan entre 42 a 47 años de edad; 30 a 35 años de edad; de

igual forma de 18 a 23 años de edad y luego con un 13% a los pacientes entre

48 a 53 años de edad y 36 a 41 años de edad y de último con un 12 % a

pacientes de entre 24 a 29 años de edad.

Esto indica que el Helicobacter pylori puede presentarse en la vida cotidiana;

ya que esta bacteria puede ser prevalente en distintas edades; debido a que la

mayoría de usuarios no tienen un estilo de vida sana, partiendo desde los hábitos

higiénicos, alimenticios, el nivel social, cultural, económico y educativo dependerá

mucho de su entorno de rutina, a causa del hacinamiento al que pueden estar

expuestos, lo que facilita su transmisión de persona a persona o por

contaminación fecal - oral en cualquier etapa de la vida.

Page 66: helocbacter pylori

66

CAPITULO VII

APORTE DE LA INVESTIGACION

UNIVERSIDAD DOCTOR ANDRES BELLO

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LICENCIATURA EN LABORATORIO CLÍNICO

Proyecto educativo para la prevención de Helicobacter pylori en usuarios

asintomáticos de 18 a 60 años que consultan en el Hospital Centro Médico

Lourdes, Municipio de Colón, Departamento de La Libertad.

PRESENTADO POR:

HERNANDEZ ALVARADO, WEINDERMAN EMILIO

LOPEZ LOPEZ, AUXILIADORA DEL CARMEN

RAMIREZ AYALA, PATRICIA CAROLINA

SEGURA FUNES, YANCY ILEANA

VASQUEZ MENJIVAR, KAREN MARICELA

ASESORA:

LICENCIADA ALBA PATRICIA ARTIGA DE MEJIA.

SAN SALVADOR, EL SALVADOR, CENTROAMERICA, JULIO DE 2015.

Page 67: helocbacter pylori

67

INTRODUCCION

El presente proyecto educativo es el resultado de la investigación realizada sobre

la seropositividad a anticuerpos para Helicobacter pylori, en los usuarios

asintomáticos que consultan el Hospital Centro Médico Lourdes, Municipio de

Colon, Departamento de la Libertad; El cual está dirigido a educar dicha población

sobre lo que es la bacteria de Helicobacter pylori, como detectar, prevenir y evitar

que esta llegue a causar una enfermedad grave o la muerte.

Cabe mencionar que este proyecto está enfocado en base a los resultados

obtenidos durante la investigación realizada en dicho hospital, en el periodo de

Julio de 2015; este proyecto se desarrolló con los miembros responsables del

grupo investigador y con la colaboración del Laboratorio del Hospital Centro

Médico Lourdes.

El desarrollo de dicho proyecto educativo está encaminado especialmente a

fortalecer todos los conocimientos y prácticas de protección contra la

Helicobacter pylori, en los sectores más vulnerables de la población que visitan

este hospital.

Este proyecto tiene una justificación donde se plasma la importancia y los

beneficios que se obtienen, seguidamente de los objetivos que orientan el trabajo,

luego aparecen las metas, estrategias, y los recursos donde se incluyen los

materiales financieros, y los recursos humanos seguido del plan de actividades

donde contiene el programa educativo, finalizando con un presupuesto.

Page 68: helocbacter pylori

68

JUSTIFICACION

El Helicobacter pylori es un factor importante en el desarrollo de diversos tipos de

patologías. Es una bacteria con un alto grado de prevalencia, especialmente en

países en vía de desarrollo, debido a que la bacteria es muy polimórfica en sus

genes de virulencia puede producir o no altas concentraciones de toxina,

generando un grave daño o simplemente una leve inflamación en el sistema

digestivo.

La mayoría de los pacientes suelen ser asintomáticos, aunque podrían desarrollar

enfermedades gástricas como: gastritis crónica, úlcera péptica, adenocarcinoma

tipo intestinal y linfoma.

A través del estudio realizado; se despertó el interés de los pacientes afectados en

ampliar los conocimientos para poder controlar la expansión de esta infección y

conocer más sobre el riesgo que esta tiene en la salud.

Para ello es necesario modificar el estilo de vida, hábitos higiénicos personales y

una mayor promoción de dicha bacteria a nivel nacional por parte de nuestro

sistema de salud.

Con este proyecto educativo se pretende mejorar el estado de salud y concientizar

a la población de esta bacteria y de esta manera evitar futuras muertes por cáncer

gástrico.

Page 69: helocbacter pylori

69

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Desarrollar un Proyecto educativo para la prevención de Helicobacter pylori en

usuarios asintomáticos de 18 a 60 años que consultan en el Hospital Centro

Médico Lourdes, Municipio de Colón, Departamento de La Libertad.

OBJETIVO ESPECIFICOS

Informar a la población sobre la importancia y práctica de los hábitos

higiénicos.

Enseñar a las personas el correcto lavado de manos y así que

eviten enfermedades futuras.

Dar a conocer los diferentes hábitos alimenticios, ventajas y desventajas

para una vida favorable para fortecer la salud.

Documentar a las personas sobre la definición de Helicobacter pylori,

Causas, signos y síntomas, riesgos de contraer esta infección, prevención,

diagnóstico y tratamiento.

Explicar a las personas que asistan al Centro Medico Lourdes la

importancia de la realización del examen Helicobacter pylori, ya que

puede presentarse de manera sintomática.

Page 70: helocbacter pylori

70

ESTRATEGIAS

Presentar el programa educativo al director del Hospital Centro Médico

Lourdes, y dar a conocer los resultados que se obtuvieron en la presente

investigación con el propósito de que se implemente rutinariamente en

programas de medidas preventivas para no adquirir el Helicobacter pylori.

Coordinar con todo el personal de salud del Hospital Centro Médico

Lourdes, para llevar a cabo el desarrollo del programa educativo.

Utilizar metodología participativa para involucrar a todos los pacientes.

Promover la accesibilidad de horarios que permitan la participación de todo

el personal y los pacientes.

Coordinar con el personal de salud la distribución y la calendarización de

reuniones para el desarrollo del programa educativo.

METAS

Lograr que el 85% de la población que visita el Hospital Centro Médico

Lourdes asistan al desarrollo de las charlas educativas.

Page 71: helocbacter pylori

71

Lograr que por lo menos el 90% de los asistentes a la charla tengan una

participación activa en las actividades que se realicen en el programa

educativo generando así un mejor aprendizaje.

Obtener la integración y participación del 95% del personal del Hospital

Centro Médico Lourdes en el desarrollo del programa educativo para

incentivar a la población asistente.

RECURSOS

MATERIALES:

Laptop.

Cañón.

Extensiones eléctricas.

Lápiz.

Lapiceros.

HUMANO:

Personal de salud del hospital:

Doctor gastroenterólogo.

Page 72: helocbacter pylori

72

Licenciado en laboratorio clínico.

Nutricionista.

Personal de enfermería.

Grupo investigador.

Usuarios del Centro Médico Lourdes.

FINANCIERO:

Aporte económico del grupo responsable del proyecto.

Page 73: helocbacter pylori

73

PROGRAMA DE ACTIVIDADES

Objetivos

Contenido

Metodología

Recursos

Tiempo

Responsable

Informar a la población sobre la importancia y

práctica de los hábitos higiénicos.

Hábitos higiénicos:

Concepto.

Importancia.

Charla expositiva

y participativa.

Laptop.

Cañón.

Diapositivas.

10Minutos.

Enfermera

Enseñar a las personas el correcto lavado

de manos y así que eviten enfermedades

futuras.

Practica del Lavado de

manos

Charla expositiva,

participativa y

demostrativa.

Laptop.

Cañón.

Diapositivas.

10 Minutos.

Enfermera

Dar a conocer los diferentes hábitos

alimenticios, ventajas y desventajas para una

vida favorable para fortecer la salud.

Importancia de los

hábitos alimenticios

Charla expositiva

y participativa.

Laptop.

Cañón.

Diapositivas.

10 Minutos.

Nutricionista

Documentar a las personas sobre la

definición de Helicobacter pylori,

Causas, signos y síntomas, riesgos de

contraer esta infección, prevención,

diagnóstico y tratamiento.

Infección gastrointestinal

Definición de

Helicobacter pylori?

Causas.

Signos y síntomas.

Riesgos de contraer esta

infección.

Prevención, diagnóstico y

tratamiento.

Charla expositiva,

Laptop.

Cañón.

Diapositivas.

20 minutos.

Médico

gastroenteról

ogo.

.

Explicar a las personas que asistan al

Centro Medico Lourdes la importancia de la

realización del examen h. pylori ya que

puede presentarse de manera sintomática.

Importancia de los

exámenes de laboratorio

clínico.

Charla expositiva

y participativa

Laptop.

Cañón.

Diapositivas

10 Minutos

Integrantes

del grupo

investigador.

Tiempo de duración de charla 60 Minutos

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74

PRESUPUESTO

CANTIDAD

DESCRIPCION

COSTO

UNITARIO

COSTO TOTAL

1

RESMA DE PAPEL

BOND

$ 5. 00

$ 5.00

4

PLIEGOS DE

CARTULINA

$ 0. 75

$ 3.00

8

PLUMONES

$ 1.00

$8.00

10

BOLIGRAFOS

$0.25

$ 2.50

-

TRANSPORTE

$75.0

$ 75.0

100

REFRIGERIOS

$ 1.00

$ 100.0

TOTAL

$ 193.50

Page 75: helocbacter pylori

75

INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA

Bibliografía Consultada

Libros consultados

1. Acota Henríquez, R. C. Andino Hernández, M. Franco Bonilla, Y. G.

Noviembre 2010, Detección de Helicobacter pylori a través del método de

ELISA, ureasa rápida e histología en pacientes con síntomas de gastritis

que consultan el servicio de gastroenterología del Hospital Nacional San

Juan de Dios de San Miguel durante el mes de Julio a Agosto de 2010.

Tesis para optar el grado académico de Licenciada en Laboratorio Clínico,

UES Multidisciplinaria Oriente.

2. Forbes, Betty. Bailey &Scott´s; Diagnóstico Microbiológico, 12ª Edición;

Editorial Médica Panamericana, traducido por: Rondinone, Silvia, Buenos

Aires 2009; 1160p.

3. Koneman, Elmer W.Atlas a color y textos de Koneman, Diagnóstico

Microbiológico, 6ª Edición; Editorial Médica Panamericana, traducido por:

Giovanniello, Octavio; Klanj, Diana; Preciado, María. Buenos Aires 2008;

1696p.

Page 76: helocbacter pylori

76

4. MataixVerdu, José, de Victoria Muñoz, Emilio Martínez,Nutrición y

Alimentación Humana, Capítulo I, Sistema digestivo, Bases fisiológicas, 2ª

Edición, Royce editores, Baja California,México, página 1-23.

5. Ministerio de Salud Pública y Asistencia Social, Dirección de

Vigilancia de Salud, Laboratorio Max Bloch; Manual de Procedimientos

Técnicos de Laboratorio Clínico del Primer Nivel de Atención, Primera

Edición ;Editorial MINSAL El Salvador, 2007; 158p.

6. Murray, R. Patrick, Rosenthal S. Ken, Pfarell A. Michael, Microbiología

Médica, 6ª Edición;Editorial ElSierver, Barcelona, España. 2003.

7. Romero Cabello, Raúl, Microbiología y Parasitología Humana: Bases

etiológicas de las enfermedades infecciosas y parasitarias, 3ª

Edición,Editorial Médica Panamericana, México 2007, 1789p.

Sitios Web consultados

8. Bermúdez Díaz,L.Ernesto Torres Domínguez, L.N. Rodríguez

González, B.L. Centro Nacional de Investigaciones Científicas.

Departamento de Microbiología e Inmunología, Apartado Postal 6412,

Ciudad de La Habana, Cuba, 17 de noviembre de 2008, Métodos para la

detección de la infección por Helicobacter

pylori,http://www.bvs.sld.cu/revistas/med/vol48_1_09/med07109.htm; 28-

02-2015 14:00pm.

Page 77: helocbacter pylori

77

9. Bertolli de Masferrer, María Teresita, Ciencia en El Salvador,

Recopilación de artículos periodísticos con enfoque científico de El

Salvador, Lunes 23 de Julio de 2012, El genoma de la cepa salvadoreña

de Helicobacter pylori ELS37

http://cienciaenelsalvador.blogspot.com/2012/07/el-genoma-de-la-cepa-

salvadorena-de.html; 24-02-15, 15:00pm.

10. Eskualdeko, Farmakoterapi Información Farmacoterapéutica de La

Comarca, Helicobacter Pylori (Hp): Puesta Al Día

Http://Www.Osakidetza.Euskadi.Eus/R85pkfarm02/Es/Contenidos/Informaci

on/Cevime_Infac/Eu_Miez/Adjuntos/Infac_Vol_20_N_4.Pdf Miércoles 9:37

Pm 24/02/2015.

11. Francisco Hernández, Facultad De Microbiología, Unidad de Microscopía

Electrónica, Factores de Virulencia, Patología y Diagnóstico deHelicobacter

Pylori, Universidad de Costa Rica; San José, Costa Rica, Septiembre 2000.

http://www.revbiomed.uady.mx/pdf/rb001136.pdf Miércoles 10:20 Pm

24/02/2015.

12. Gastroenterología Helicobacter pylori.

http:// www.iqb.es/digestivo/patologia/helicobacter/cap1_01.htm 11: 58

pm 26 / 02 / 2014

Page 78: helocbacter pylori

78

13. Gomollón García, Fernando. Ducons García, Julio.

SantolariaPiedrafita, Santos. Métodos Diagnósticos de la Infección por

Helicobacter Pylori en Huesca, Tesis de la Universidad de Zaragoza, 2011

http:// zaguan.unizar.es/record/7017/files/TESIS-2012-016.pdf01-03-2015,

14:45 p.m.

14. Sonia Agudo Peña, Estudio Molecular de los Factores de Virulencia y de la

Resistencia a Claritromicina en la Infección por Helicobacter pylori. Tesis

Doctoral Madrid, 2010.

Http://Eprints.Ucm.Es/11520/1/T32212.PdfMiércoles 9:00 Pm 24/02/2015.

15. Valdés Torres, Fernando; García Menéndez, Alberto; Zárate, Alejandra,

UNAM, Facultad de Medicina, Seminario de Helicobacter pylori, Hospital de

la Beneficencia Española, Enero 2011.

16. http://www.facmed.unam.mx/sms/seam2k1/2008/ene01ponencia.htmlMiérc

oles 24-02-2015 11.00 pm.

Page 79: helocbacter pylori

79

CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

TIEMPO ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO JUNIO JULIO AGOSTO SEPTIEMBRE

SEMANA 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 SEMINARIO DE GRADO(1a FASE)

INICIO DE SEMINARIO

ELABORACION DEL TEMA

CONSULTA BIBLIOGRAFICA

ELABORACION DEL PERFIL

PRESENTACION DEL PERFIL

APROBACION DEL TEMA

SEMINARIO DE GRADO(2a FASE)

ELABORACION DEL ANTEPROYECTO

ELABORACION DEL MARCO TEORICO

ELABORACION DE OBJETIVOS EN VARIABLE

ELABORACION DEL DISEÑO METODOLOGICO

ELABORACION DEL CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

ELABORACION DEL PRESUPUESTO

ELABORACION DE ANEXOS

PRESENTACION DEL ANTEPROYECTO

APROBACION DEL ANTEPROYECTO

SEMINARIO DE GRADO (3a FASE)

RECOLECCION DE DATOS

ANALISIS DE DATOS

CONSTRUCCION DE CUADROS Y GRAFICOS

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

APORTE DE LA INVESTIGACION

ESTABLECER COSTOS A LA FECHA

INCORPORACION DE LAS OBSERVACIONES DE LOS MIEMBROS DEL JURADO

PRESENTACION DEL TRABAJO FINAL

DEFENSA DE TESIS DE GRADUACION

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80

PRESUPUESTO DE LA INVESTIGACION

RUBROS ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO JUNIO JULIO AGOSTO SEPTIEMBRE OCTUBRE TOTAL

ANILLADOS $3.80 $11.40 $11.40 $11.40 $11.40 $34.20 $83.60

IMPRESIONES $4.50 $5.50 $5.50 $5.50 $5.50 $16.50 $16.50 $16.50 $16.50 $16.50 $109.00

FOTOCOPIAS $3.00 $3.00 $3.00 $3.00 $3.00 $9.00 $9.00 $9.00 $9.00 $9.00 $60.00

INTERNET $5.00 $5.00 $5.00 $5.00 $5.00 $16.50 $16.50 $16.50 $16.50 $16.50 $107.50

TRANSPORTE $25.00 $25.00 $25.00 $25.00 $25.00 $25.00 $25.00 $25.00 $25.00 $25.00 $250.00

CUOTAS DE

ASESORIA DE

SEMINARIOS

DE GRADO

(UNAB)

$905 $905 $905 $905 $905 $905 $905 $905 $905 $905 $9,050.00

ALIMENTACION $15 $15 $15 $15 $15 $15 $15 $15 $15 $15 $150.00

IMPREVISTOS

(10%) $94.25 $94.25 $94.25 $94.25 $94.25 $94.25 $94.25 $94.25 $94.25 $94.25 $942.50

SUBTOTALES $612.00 $612.00 $612.00 $612.00 $612.00 $612.00 $612.00 $612.00 $612.00 $612.00 $6,120.00

TOTAL

$10,752.60

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81

ANEXOS

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Anexo Nº 1

Pared gastrointestinal

Page 83: helocbacter pylori

83

Anexo Nº 2

Fases de la digestión

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84

Anexo Nº 3

Colonización de la bacteria Helicobacter pylori

Page 85: helocbacter pylori

85

Anexo Nº 4

Factor de virulencia de la bacteria Helicobacter pylori

Page 86: helocbacter pylori

86

Anexo N°5

Principio del Test de Urea Aspirada

Page 87: helocbacter pylori

87

Anexo N°6

Tinción de plata de Warthin –Starry

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88

Anexo N°7

Técnica para antígenos de Helicobacter pylori en heces

HELICOBACTER PYLORI AG CASSETTE

FUNDAMENTO:

Helicobacter pylori Ag es una prueba cualitativa inmunocromatográfica para la

detección de Helicobacter pylori en muestras de heces. Durante la prueba, la

muestra diluida de heces reacciona con el conjugado coloreado (anticuerpos

monoclonales anti- antígenos-partículas de látex coloreadas) secado previamente

en la membrana de la tira de reacción. Este completo avanza por capilaridad a

través de la membrana. Para dar el resultado como positivo, una línea de color

rojo aparecerá en la zona de resultado de la membrana. La ausencia de esta

línea roja sugiere un resultado negativo, independientemente de que haya

presencia o no de antígenos de Helicobacter pylori, la mezcla de conjugado va

avanzando por la membrana hasta la región de control donde se han inmovilizado

anticuerpos y siempre aparecerá una línea de color verde (línea de control). La

aparición de esta línea se utiliza 1) para verificar que se ha añadido el volumen de

muestra suficiente y 2) que el flujo ha sido apropiado; y 3) como control interno de

los reactivos.

Page 89: helocbacter pylori

89

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD.

Conservar a 2-30°C. El dispositivo de ensayo es estable hasta la fecha de

caducidad impresa en el sobre, no congelar.

MUESTRAS Y PREPARACIÓN.

Las muestras (no usar muestras acuosas o

diarreicas) deben ser recogidas en un recipiente

limpio y la prueba debe realizarse lo más pronto

posible después de la recogida. Las muestras

se deben conservar en frío(solo 1 o 2 días a 2-

4° C) hasta el momento de utilizarlas. Para

conservar las muestras durante un tiempo prolongado, como máximo de un año,

deben mantenerse congeladas a -20°C. La muestra debe descongelarse

totalmente y alcanzar la temperatura ambiente para poder utilizarla en la prueba.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA.

Con la ayuda del palito se toma una muestra de las heces recogidas, para

esto se pasa el palito por la muestra recogiendo una pequeña cantidad de

heces. Se introduce el palito en el tampón cerrando el tubo.

Agitar para facilitar la dispersión de la muestra.

Page 90: helocbacter pylori

90

EQUIPO ADICIONAL.

Recipiente para la recogida de muestra de heces.

Guantes desechables.

Cronómetro.

TÉCNICA.

Previamente el dispositivo, las muestras de heces y los controles se deben

acondicionar a la temperatura ambiente (15-30°C). No abrir el envase hasta el

momento de la prueba.

1. Agitar el tubo de dilución de la

muestra para asegurar una buena

dispersión. Cortar la punta del tapón.

2. Sacar el dispositivo de reacción, de

su envase para utilizarlo

inmediatamente.

3. Para cada muestra o control se debe usar un tubo de dilución de la muestra

y un dispositivo diferente. Tomar 5 gotas o 150 ul del líquido y depositarlas

en la ventana circular marcada con una flecha o con una S en el dispositivo,

evitando añadir particular sólidas con el líquido.

4. Leer el resultado a los 10 minutos ( aparecen líneas coloreadas)

Page 91: helocbacter pylori

91

RESULTADOS

NEGATIVO: una línea de colorverde

aparece en la ventana control de

dispositivo de reacción, en la zona

marcada con la letra C (línea de

control).

POSITIVO: Además de la línea de

control verde,aparece una línea de

color rojo(línea de resultados) en la

zona marca con la letra T (zona de

resultados).

INVALIDO: cuando la línea de control no aparece independientemente de que

aparezca o no en la línea de resultados. Las causas más comunes por las que

aparecen un resultado inválido son una cantidad insuficiente de muestra, una

forma de procesar in correctamente o un deterioro en los reactivos, si ocurriera

esto, debe revisarse el procedimiento y reprocesar la prueba con un nuevo

dispositivo de reacción.

CONTROL DE CALIDAD.

El control interno de funcionamiento viene incluido en la prueba, la línea verde que

aparece en la zona de control C es el control interno del proceso, comprobando

que el volumen de la muestra es suficiente y que el procedimiento seguido ha sido

el adecuado. La cantidad del fondo de la ventana es también el control interno. Si

Page 92: helocbacter pylori

92

el test funciona correctamente este fondo estará claro y no interfiera con la lectura

del resultado

SIGNIFICADO CLÍNICO.

Helicobacter pylori es una bacteria con forma de espiral que se encuentra en la

mucosa gástrica o adherida a la capa epitelial del estómago. Se estima que esta

bacteria es el causante de más del 90% de los carcinomas gástricos.

CARACTERÍSTICAS DIAGNOSTICAS.

SENSIBILIDAD.

Límite de detección: un cultivo de Helicobacter pylori fue centrifugado y se

determinó la concentración de proteína presente. Esta preparación de antígeno de

referencia se diluyo en un tampón y se hizo la prueba siguiendo las instrucciones

de uso. Obteniendo que el límite de detección de la prueba de Helicobacter pylori

es de 4-6ng/ml.

ESPECIFICIDAD.

Se han realizado estudios y evaluaciones para comparar la eficacia del test, se

evaluó en paralelo con un test de ELISA.

Page 93: helocbacter pylori

93

La detección de Helicobacter pylori muestra un 86% de concordancia en

especificidad en comparación con la prueba de ELISA:

El uso de anticuerpos monoclonales en la elaboración de Helicobacter pylori

asegura un alto grado de especificad para los antígenos de Helicobacter pylori,

los anticuerpos utilizados para elaborar esta prueba reconocen estudios presentes

en los antígenos encontrados en las muestras de heces de los pacientes, tanto

como en las preparaciones provenientes de cultivos de la bacteria in vitro.

La posibilidad de interferencia con anticuerpos humanos anti- antígenos de razón

o con niveles elevados de las muestras, no se han evaluado, algunas muestras

podrían producir líneas de control con un color verde brillante.

NOTAS

La intensidad de la línea roja en el resultado puede variar dependiendo de la

concentración de antígenos presentes en la muestra, sin embargo esta prueba es

cualitativa por lo que ni cantidad ni la tasa de aumento de antígenos puede ser

determinada por la misma.

LIMITACIONES

1. Una vez abierto el dispositivo no debe usarse después de 2 horas.

2. Un exceso de muestra puede dar resultados negativos, dando líneas no

muy definidas de color pardo que no tienen ningún valor diagnóstico.

Page 94: helocbacter pylori

94

3. Algunas muestras de heces pueden disminuir la intensidad de la línea de

control verde.

4. Esta prueba diagnóstica una posible ulcera gástrica o presencia de

carcinoma gástrico causado por Helicobacter pylori, situación que debe

confirmarse por un especialista o médico certificado, teniendo en cuenta

pruebas clínicas adicionales.

Page 95: helocbacter pylori

95

Anexo Nº8

Toma de muestra: Técnica de punción venosa con jeringa

Materiales: Jeringa estéril, torundas de algodón, alcohol etílico (70%), marcador de

vidrio, torniquete, tubos sin anticoagulantes, gradilla para tubos, guantes

descartables.

Procedimiento:

1. Lavar y secar las manos y colocarse

los guantes.

2. Identificar el tubo de acuerdo a la

solicitud.

3. Explicar al paciente sobre el

procedimiento que se le va a

realizar.

4. Sentar cómodamente al paciente

para la extracción tomando en cuenta que el área de sangría debe contar

con suficiente iluminación.

5. Seleccionar la vena apropiada para la punción.

6. Realizar asepsia con torunda de algodón humedecida con alcohol etílico al

70% de adentro hacia fuera.

7. Colocar el torniquete firmemente alrededor del brazo, y pedir al paciente

que abra y cierre la mano varias veces para favorecer la dilatación de las

venas.

8. Proceder a puncionar la vena seleccionada.

9. Colocar la aguja con el bisel hacia arriba sobre la vena a puncionar.

10. Introducir la aguja en el centro de la vena y penetrar a lo largo de la vena de

1 a 1.5 cm.

Page 96: helocbacter pylori

96

11. Tirar hacia atrás el émbolo de la jeringa muy lentamente para que penetre

la sangre en la jeringa hasta llenar con la cantidad de sangre necesaria.

12. Retirar el torniquete, y colocar una torunda de algodón sobre la piel donde

se encuentra oculta la punta de la aguja.

13. Extraer la aguja con un movimiento rápido por debajo de la pieza de

algodón, pedir al paciente que presione firmemente la torunda durante 3

minutos con el brazo extendido.

14. Separar la aguja de la jeringa y llenar los tubos.

15. Esperar que la muestra se coagule a temperatura ambiente.

16. Centrifugar la muestra a 3000 rpm por 10 minutos.

17. Separar el suero del paquete globular

Page 97: helocbacter pylori

97

AnexoNº9

Técnica para anticuerpos de Helicobacter pylori

HELICOBACTER PYLORI AB CASSETTE CE

HELICOBACTER PYLORI Pruebarápida para la detección cualitativa de

anticuerpos de Helicobacter pylori (H. pylori) en

suero, plasma humano o sangre total.

PRESENTACION

H. pyloricassette 40 tests

Sólo para uso profesional de

diagnóstico in vitro

FUNDAMENTO.

La prueba LINEAR Helicobacter pylori Ab es una prueba rápida de inmunoensayo

cromatográfico de membrana para la detección cualitativa de anticuerpos de

Helicobacter pylori en suero, plasma o sangre total. En este procedimiento el IgG anti-

humano es inmovilizado en la región de prueba de la placa. Tras la adición de la

muestra, está reacciona con las partículas recubiertas de antígeno de Helicobacter

pylori ante la prueba. Esta mezcla migra cromatográficamente a través de la tira de

prueba e interactúa con el IgG anti-humano inmovilizado. Si una muestra contiene

anticuerpos de Helicobacter pylori aparece una línea de color en la región de prueba,

indicando un resultado positivo. Si la muestra no contiene anticuerpos de Helicobacter

pylori no aparece una línea de color en la región de prueba, indicando un resultado

negativo. Para controlar el procedimiento, aparecerá una línea de color en la región de

control.

Page 98: helocbacter pylori

98

COMPOSICIÓN DE LOS REACTIVOS

Helicobacter pylori test, contiene partículas recubiertas de antígeno de H. pylori y

membrana recubierta de IgG antihumano.

CONTENIDO DEL ENVASE.

40 H. pylori test.

40 goteros para la dispensación de la muestra Solución tampón.

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Conservar a 2-30ºC.

El dispositivo de ensayo es estable hasta la fecha de caducidad impresa en el sobre,

siempre que se mantenga en el sobre bien sellado hasta su uso. NO CONGELAR. No

usar una vez superada la fecha de caducidad. No utilizar en caso de que la bolsita esté

dañada, porque la prueba es sensible a la humedad.

MUESTRAS.

La prueba LINEAR Helicobacter pylori Ab puede ser utilizada en suero, plasma o

sangre total.

Page 99: helocbacter pylori

99

Separar el suero o plasma de la sangre lo más pronto posible para evitar la

hemólisis. Solo se pueden utilizar muestras claras y no hemolizadas.

Se recomienda realizar las pruebas inmediatamente después de la extracción de

las muestras. No dejar a temperatura ambiente por períodos prolongados. Las

muestras pueden ser almacenadas a 2- 8°C hasta 3 días. Para períodos

prolongados de almacenamiento, las muestras de suero o plasma deben ser

congeladas y almacenadas a temperaturas inferiores a los -20°C.

Atemperar las muestras antes de realizar la prueba. Las muestras congeladas

deben ser descongeladas completamente y mezcladas bien antes de la prueba.

Las muestras no deben ser congeladas y descongeladas repetidas veces.

EQUIPO ADICIONAL.

Recipiente para la recogida de muestras.

Centrífuga.

Cronómetro.

TÉCNICA.

Atemperar, a temperatura ambiente el dispositivo, la muestra y/o controles antes de su

uso.

1. Atemperar la bolsa del kit antes de abrirlo. Sacar el dispositivo de la bolsa sellada y

usarla lo antes posible. Leer las instrucciones cuidadosamente antes de realizar la

prueba.

2. Colocar la placa en una superficie plana y limpia. Sostener el gotero verticalmente y

adicionar 1 gota de suero, plasma o sangre total (aprox. 20μl) en el posillo marcado (S)

Page 100: helocbacter pylori

100

agregar 2 gotas de solución tampón. Empiece a medir el tiempo. Evite atrapar burbujas

de aire en el posillo (S). Ver la ilustración. 3. Esperar a que aparezca la línea(s) roja.

Leer el resultado a los 5 minutos desde la adición de la muestra. No leer el resultado

pasados 10 minutos.

POSITIVO: Aparecen dos líneas rojas distintivas. Una línea debe aparecer en el área

de control (C) y la otra línea en el área de prueba (T).

NOTA: La intensidad del color rojo en la región de prueba (T) va a variar dependiendo

de la concentración de anticuerpos de HP presentes en la muestra. Por lo tanto,

cualquier color de rojo en la región de prueba (T) debe ser considerado como positivo.

NEGATIVO: Aparece una línea roja en la región de control (C). No aparecen líneas

rojas o rosadas en la región de prueba (T).

INVALIDO: La línea de control no

aparece. Las razones más comunes

para una prueba inválida son utilizar

cantidad insuficiente de muestra o no

seguir los pasos debidos del

procedimiento. Revise el procedimiento

y repita la prueba con una placa nueva.

Si el problema persiste, no continúe

utilizando la prueba inmediatamente y

consulte a su distribuidor local.

Page 101: helocbacter pylori

101

Anexo Nº 10

Endoscopia Digestiva Superior

Page 102: helocbacter pylori

102

Anexo Nº 11

Técnica cualitativa de anticuerpos para Helicobacter pylori

Prueba Rápida del Anticuerpo para H. pylori en Cassette

(Sangre entera/suero/plasma)

Ficha Técnica

Prueba rápida para la detección cualitativa de anticuerpos para Helicobacter pylori, en

sangre total suero o plasma.

USO INDICADO

La prueba rápida del anticuerpo para Helicobacter pylori en Cassette (Sangre entera/

suero/plasma) es un inmunoensayo cromatográfico para la detección cualitativa de

anticuerpos de Helicobacter pylori sangre total, suero o plasma a fin de ayudar en el

diagnóstico de infecciones ocasionadas por Helicobacter pylori.

RESUMEN

El Helicobacter pylori es una bacteria de forma espiral que vive en la superficie del

estómago y del duodeno. Está implicada en la etiología de una variedad de

enfermedades gastrointestinales incluyendo el cáncer duodenal y gástrico, dispepsia no

RIB IHPB-

C41 ESPAÑOL

Page 103: helocbacter pylori

103

ulcerosa y gastritis crónica y activa. Muestras subordinadas y costosas a métodos de

diagnóstico invasivos incluyen biopsias gástricas o duodenales seguidas por pruebas

de ureasa (presuntivas), cultivo y/o coloraciones (teñido), histológicos. Las pruebas no

invasivas incluyen la prueba del aliento de urea la cual requiere de equipos de

laboratorio costosos y una exposición moderada a la radiación y métodos serológicos.

Los individuos infectados con Helicobacter pylori desarrollan anticuerpos, los cuales se

relacionan fuertemente con la infección de Helicobacter pylori .confirmada

histológicamente.

REACTIVOS

La placa contiene antígenos Helicobacter pylori recubiertos en partículas igG

antihumano recubriendo la membrana.

PRECAUCIONES

Solo para uso profesional in vitro. No se debe utilizar después de cumplida la

fecha de vencimiento.

No consumir ningún alimento, beber o fumar cerca del área donde los

especímenes o los kits están siendo manipulados.

No utilizar la prueba si el empaque está dañado.

Manipular la prueba como si fueran agentes infecciosos. Utilizar la ropa

adecuada tales como, la bata de laboratorio, guantes desechables y protección

para los ojos, cuando los especímenes estén siendo probados.

La prueba, una vez utilizada, debe desecharse de acuerdo con las regulaciones

locales.

Page 104: helocbacter pylori

104

Tanto la humedad como la temperatura podrían afectar los resultados

.

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Almacene de la forma como viene empacado a temperatura ambiente o refrigeradora a

una temperatura de (2-30 º C). La prueba se debe realizar siempre y cuando se cumpla

con la fecha indicada en el empaque. La Prueba debe permanecer sellada hasta su

uso. NO CONGELAR, no se debe utilizar después de la fecha de vencimiento.

OBTENCION Y PREPARACION DE LA MUESTRA

La Prueba Rápida del Anticuerpo para Helicobacter pylori en Cassette (Sangre

total/suero/plasma) se puede realizar utilizando sangre total (de venopuntura o

punción dactilar), suero o plasma.

Para la colecta de muestra de sangre total punción dactilar:

Lave la mano del paciente con jabón o agua tibia o limpie con un copo de

algodón con alcohol, dejar secar.

Masajee la mano, sin tocar el sitio de punción frotando hacia abajo con dirección

a las puntas del dedo anular o medio.

Puncione la piel con una lanceta estéril, limpie la primera muestra de sangre.

Suavemente masajee la mano desde la muñeca hasta la palma de la mano de tal

forma que se forme una gota redonda en el sitio de la punción.

Agregue la muestra de sangre total de punción dactilar en la placa usando un

tubo capilar.

Toque el final del tubo capilar a la sangre hasta llegar a 50 ul. Evite burbujas de

aire.

Page 105: helocbacter pylori

105

Coloque el bulbo sobre el extremo superior del tubo capilar, luego oprima el

bulbo para dispensar la sangre total en el pozo de la placa (S)

Agregue la muestra de la sangre total de la punción dactilar en la zona de prueba

de la placa usando gotas de sangre directa.

Coloque el dedo del paciente de tal forma que la gota de sangre este justo

encima del pozo de la placa (S).

Deje caer dos gotas de la punción dactilar de sangre total sobre el pozo de la

placa (S) de la prueba. Mueva el dedo del paciente de forma tal que la gota

toque el pozo de la placa (S). Evite que el dedo toque directamente el pozo e la

placa (S).

Separe el suero o el plasma de la sangre tan pronto como sea posible para evitar

hemolisis. Use solamente muestras claras no hemolizadas.

La prueba se debe realizar inmediatamente después de la recolección. No deje

las muestras a temperatura ambiente por largos periodos de tiempo. Muestras de

suero y plasmas pueden ser almacenadas de 2-8 ºC hasta 3 días. Para

almacenamientos más prolongados, las muestras deben ser almacenadas a

temperaturas por debajo de los -20º C. La sangre recolectada por veno punción

debe ser almacenada de 2-8 ºC, si la prueba se va realizar dentro de los dos días

siguientes a la recolección. No congelar las muestras de sangre total.

Llevar las muestras a temperatura ambiente antes de ser utilizadas .Muestras

congeladas se deben descongelar completamente y mezclarlas completamente

antes de realizar las pruebas. Las muestras no se deben congelar y descongelar

repetidamente.

Si las muestras han sido enviadas deben cumplir con las regulaciones de

embalaje y envió.

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106

MATERIALES

Placas

Cuentagotas

Buffer (para sangre total únicamente)

Ficha técnica

Recipiente para la recolección de la muestra

Centrifuga

Lancetas

Cronómetro

Tubos capilares heparinizados.

INSTRUCCIONES DE USO

Permita a la prueba, muestra, buffer y/o controles estar a temperatura ambiente (15-

30ºC) antes del examen.

1. Lleve la bolsa a temperatura ambiente antes de abrirla, retire el cassette de la

prueba de la bolsa sellada y utilícela tan pronto como sea posible.

2. Coloque el cassette en una superficie limpia y nivelada.

- Mantenga el gotero verticalmente y ponga 4 gotas del suero o plasma

(aproximadamente .100ul) al pocillo y empiece el tiempo.

- Para muestras de venopuntura entera:

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107

Mantenga el gotero verticalmente y ponga 2 gotas de sangre entera

(aproximadamente .50ul) al pocillo y una gota del buffer y empiece el tiempo.

- Usar un tubo capilar, llene el tubo capilar y transfiera aproximadamente. 50ul al

pocillo de la muestra luego 1 gota del buffer y empiece el tiempo.

3. Deje que aparezcan la(s) línea(s) coloreada(s). Lea los resultados a los 10

minutos. No interprete los resultados después de los 20 minutos.

INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS

POSITIVO: Aparición de dos líneas rojos distintas: una línea roja debe estar en la

región de la línea de control (c) y la otra línea debe estar en la región de la línea de

prueba (T).

NOTA: La intensidad de color de la línea de la región de prueba (T) variará

dependiendo de las condiciones de los anticuerpos Helicobacter pylori presentes en la

Page 108: helocbacter pylori

108

muestra. Por consiguiente cualquier oscurecimiento de la línea roja de la prueba se

debe considerar como positivo.

NEGATIVO: Una línea roja debe estar en la región de la línea de control (c): No

aparece ninguna línea aparentemente roja ni rosada en la región de la línea de la

prueba (T).

NO VALIDO: La línea de control no aparece: las razones más probables para que falte

la línea de control (c) es que el volumen de la muestra sea insuficiente o que las

técnicas de procedimientos no se realizaron en forma adecuada. Revise el

procedimiento y repita la prueba con una nueva placa. Si los problemas persisten no

siga utilizando la placa y contacte a su distribuidor local.

CONTROL DE CALIDAD

Un control de procedimientos internos se incluye en la prueba. Un aparecimiento de una

línea roja en la región de la línea de control (c). Es un control de procedimiento positivo.

Esta conforma un volumen suficiente de muestra y una técnica de procedimientos

correcta. Los estándares de control no se suministran en este estuche. Sin embargo se

recomienda que un control positivo y negativo se lleve a cabo como una buena práctica

de laboratorio para confirmar el procedimiento de la prueba y para verificar la

realización adecuada de la prueba.

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LIMITACIONES

La prueba rápida de Anticuerpos para Helicobacter pylori Cassette (sangre

entera/ suero/plasma) se utiliza únicamente para el procedimiento de

diagnóstico in vitro. La prueba se debe utilizar en la detección de anticuerpos

para Helicobacter pylori en las muestras de sangre total, suero o plasma

solamente. Ni valores cuantitativos ni incrementos en las proporciones de los

anticuerpos de Helicobacter pylori se pueden determinar a través de esta prueba

cualitativa.

La prueba rápida de Anticuerpos para Helicobacter pylori Cassette (sangre

entera/ suero/plasma) solamente indicará la presencia de anticuerpos para

Helicobacter pylori y no se debe utilizar como único criterio para diagnóstico de

infecciones por Helicobacter pylori.

Con la prueba diagnóstica los resultados deben ser interpretados junto con la

otra información clínica de los médicos.

Si la prueba resulta negativa y los síntomas clínicos persisten se debe realizar

pruebas adicionales utilizando otros métodos clínicos recomendados. Un

resultado negativo no excluye de ninguna manera la posibilidad de una infección

por Helicobacter pylori.

VALORES ESPERADOS

La prueba rápida de Anticuerpos para Helicobacter pylori Cassette (sangre entera/

suero/plasma) ha sido comparada con cultivos de tejido demostrando una precisión

total de 91.4%.

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SENSIBILIDAD. ESPECIFICAD Y PRECISIÓN CLÍNICA.

La prueba rápida del Anticuerpo Helicobacter pylori en cassette (sangre

entera/suero/plasma) es evaluada con muestras obtenidas de una población

sintomática y asintomática de individuos presentaron a una examinación endoscópica.

La biopsia (cultivo) servicio como método para la prueba rápida del Anticuerpo H.

pylori en cassette (sangre entera/suero/plasma).

Prueba rápida del anticuerpo Helicobacter pylori en cassette vs. Biopsia/histología

Método

Biòpsia/ histologia

Prueba ràpida

Helicobacter pylori

en cassette

Resultados

Positivo

negativo

Positivo

122

8

Negativo

19

166

Resultados totales

130

185

PRECISIÓN INTRA-ENSAYO

Dentro de una precisión que ha sido determinada al utilizar 10 réplicas de 4 muestras

negativo, un valor bajo positivo, un medio positivo y un valor alto positivo han sido

identificados correctamente el 99% de las veces.

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PRECISIÓN INTER-ENSAYO

Entre la precisión que ha sido determinada atraves de 10 ensayos independientes 4

muestras: un valor negativo, un bajo positivo, un medio positivo. Tres diferentes lotes

de pruebas rápidas del Anticuerpo Helicobacter pylori en cassette (sangre total/

suero/plasma) han sido utilizados analizando valores negativos, bajos positvo, un

medio positivo. Tres diferentes lotes de prueba rápida del anticuerpo Helicobacter

pylori en cassette. Entera/suero/plasma) han sido utilizados analizando valores

negativos, bajos positivos, y alto positivo de las muestras. Las muestras se identificaron

correctamente en más de veces.

REACTIVIDAD CRUZADA

Los sueros que contienen cantidades conocidas de anticuerpo contra Helicobacter

pylori con Hepatitis A,B,C.E, HIV (virus de inmuno deficiencia humana) y Sífilis . Se

observó reactividad no cruzada indicando rápida de Helicobacter pylori en placa (sangre

total/suero/plasma) tiene un alto grado de anticuerpos humanos contra Helicobacter

pylory.

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Anexo Nº12

Hoja de registro de información

UNIVERSIDAD DOCTOR ANDRES BELLO

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

LICENCITURA EN LABORATORIO CLINICO

Hoja de registro de información Seropositividad a anticuerpos para Helicobacter pylori

en usuarios asintomáticos de 18 a 60 años que consultan en el Hospital Centro Médico

Lourdes, Municipio de Colón, Departamento de La Libertad de Enero a Diciembre de

2014.

NUMERO SEXO EDAD RESULTADOS DE

LABORATORIO

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113

Anexo Nº13

Definición de términos básicos

Adhesina BabA: Es la Adhesina mejor caracterizada de Helicobacter pylori la cual

interactúa con la célula epitelial a través de los antígenos de Lewis B fucosilados que

forman parte del glicocálix de la membrana del epitelio gástrico.

Anasmol: Es un anticoagulante (diluyente de la sangre). Se reduce la formación de

coágulos de sangre mediante el bloqueo de la formación de ciertos factores de

coagulación. Anasmol se usa para prevenir ataques cardíacos, accidentes cerebro

vascular y coágulos de sangre en venas y arterias.

Arcobacter: Es un género de bacterias Gram-negativas, en forma de espiral. Se

muestra una inusualmente amplia gama de hábitats, y algunas especies pueden ser

patógenas en humanos y animales.

Cancerígeno: Es un agente físico, químico o biológico potencialmente capaz de

producir cáncer al exponerse a tejidos vivos. Basándose en lo anterior, un carcinógeno

es un agente físico o químico que puede producir una neoplasia.

Page 114: helocbacter pylori

114

Citotoxina vacuolizante (VacA): La proteína VacA es una de las principales toxinas

de Helicobacter pylori y uno de los factores de virulencia que más se ha visto asociado

a la incidencia de enfermedades gástricas severas, en conjunto con CagA y BabA.

Cobalamina: Hace referencia a varias formas de la vitamina B12.

Dispepsia: Es todo trastorno de la secreción, motilidad gastrointestinal o sensibilidad

gástricas que perturben la digestión; designa cualquier alteración funcional asociada

al aparato digestivo.

Espirilos o Espiral: Són bacterias grandes y Gram negativas (agrupadas básicamente

en las "proteo bacterias")flageladas de forma helicoidal o de espiral. Se desplazan en

medios viscosos avanzando en tornillo. Su diámetro es muy pequeño, lo que hace que

puedan atravesar las mucosas.

Endoscopia: Es una técnica utilizada en medicina, que consiste en la introducción de

una cámara o lente dentro de un tubo o endoscopio a través de un orificio natural, una

incisión quirúrgica o una lesión para la visualización de un órgano hueco o cavidad

corporal.

Gastritis aguda: Es una inflamación súbita del revestimiento del estómago.

Gastritis crónica: Es una inflamación crónica de la mucosa del estómago que afecta

inicialmente a áreas superficiales y glandulares de la mucosa, progresando a la

destrucción glandular, atrofia y metaplasia.

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115

Gastrectomía: Es la intervención quirúrgica que consiste en la remoción parcial o total

del estómago. Este procedimiento se indica en casos de malestar estomacal que

requieran cirugía o para remover pequeños tumores benignos.

Carcinoma gástrico: Es un tumor maligno que se origina en el epitelio del estómago.

Genoma: Es el conjunto de genes contenidos en los cromosomas, lo que puede

interpretarse como la totalidad de la información genética que posee un organismo o

una especie en particular.

Inmunoglobulina A (IgA): Es la clase predominante de anticuerpo en las secreciones

seromucosas del organismo como saliva, lágrimas, calostro,leche y secreciones

respiratorias, gastrointestinales y genitourinarias. Actúan como la defensa inicial contra

los patógenos invasores (virus ybacterias) antes de que penetren en el plasma;

identifican los antígenospatógenos e impiden que se instalen en las mucosas.

Inmunoglobulina G (IgG): Es una de las cinco clases de anticuerposhumorales

producidos por el organismo. Se trata de la inmunoglobulinapredominante en los fluidos

internos del cuerpo, es la única clase de inmunoglobulinas que atraviesa la placenta,

transmitiendo la inmunidad de la madre al feto de manera natural y pasiva.

Inmunoglobulina (IgM): Es uno de los cinco isotipos de inmunoglobulina, es el primer

tipo de inmunoglobulina sintetizada en respuesta a una infección.

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Linfoma: Són un tipo de enfermedades neoplásicas (tumorales) que afectan a los

linfocitos, células que forman parte de nuestro sistema inmune.

Linfoma MALT o Maltomas: Esla proliferación neoplásica monoclonal de linfocitos B que

infiltran las glándulas gástricas, con típicas lesiones linfo epiteliales.

Metalogénesis: Es la formación de metano por microbios. Es una forma de metabolismo

microbiano muy importante y extendido.

Metaplasia intestinal: Es la conversión de las glándulas del estómago en otras

parecidas a las del intestino delgado. De esta forma, la gastritis superficial se acaba

transformando en gastritis atrófica.

Microaerófila: Es un microorganismo que requiere niveles de oxígeno muy inferiores a

los que se encuentran en la atmósfera de la tierra para sobrevivir.

MOGene: Son laboratorios de Bio-Investigación, desarrollo y Crecimiento que ofrecen

una gama completa de servicios de genómica para la Investigación y Aplicaciones

clínicas: Preparación de la muestra, microarrays, Reacción en Cadena de la Polimerasa

con Transcriptasa Inversa (RT-PCR), NextGen Secuenciación y Bioinformática.

Mucularismucosae: Se le llama así al fino estrato de fibras musculares que forma parte

de lamucosa que tapiza la pared interna de diferentes órganos deltubo digestivo,

principalmente esófago, estómago, intestino delgado e intestino grueso.

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Pirosecuenciación 454: Es una tecnología de determinación de secuencia de Ácido

Desoxirribonucleico (ADN) a gran escala, aplicable a genomas completos,

mediante luminiscencia.

Proteína CagA: Es una proteína de las muchas secretadas por Helicobacter pylori durante

su proceso infectivo, con el fin de optimizar su habilidad para colonizar el tracto digestivo y

para escapar de las defensas del hospedador. Al ser una proteína muy relacionada con

formas más severas de gastritis producidas por la infección de este patógeno, se han

llevado a cabo muchos estudios para determinar las causas que provocan este aumento

de patogenicidad.

Secuenciación de Sanyers: Es un conjunto de métodos y técnicas bioquímicas cuya

finalidad es la determinación del orden de los nucleótidos (A, C, G y T) en

un oligonucleótido de ADN.

Serendipia: Es un descubrimiento o un hallazgo afortunado e inesperado que se

produce cuando se está buscando otra cosa distinta. También puede referirse a la

habilidad de un sujeto para reconocer que ha hecho un descubrimiento importante

aunque no tenga relación con lo que busca. En términos más generales se puede

denominar así también a la casualidad, coincidencia o accidente.

Ulcera péptica: Es una llaga abierta o un área en carne viva en el revestimiento del

estómago o el intestino.

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