LABORATORIO CLNICO MICRODIAGNOSTIC 2PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR, PARA EXTRACCION DE MUESTRAS SANGUINEASPAGINAS DEL 001 AL 002

Materiales: Barrera primaria de bioseguridad, gradilla, liga, jeringa, alcohol, torundas de algodn, venditas, tubos de ensayo con o sin anticoagulante segn sea el caso.

A) PUNCION VENOSA EN ADULTOS

a) Durante la toma de muestra deben guardarse las ms estrictas normas de higiene.b) El material descartable se abre en el momento de utilizarlos, una vez abiertos y manipulados no podr guardarse aun cuando se lo considere nuevo.c) Una vez realizada la toma de muestra, descartar inmediatamente los materiales usados en recipientes para ese fin. d) Los recipientes que contienen algodn y los de desecho deben estar perfectamente cerrados todo el tiempo y se abrirn solamente al momento de usar.e) Al momento de hacer la extraccin colocarse los guantes desechables para todo el procedimiento. f) Antes de iniciar la toma de muestra, tener todo el material preparado pero sin abrirlos, y los tubos debidamente identificados.g) Localizar, elegir, visualizar y palpar la vena. Colocar liga para comprimir el musculo y resaltar la vena, palpar de nuevo la vena, pedir al paciente que abra y cierre el puo para facilitar la extraccin. h) limpiar el rea circundante con algodn empapado en alcohol. Dejar secar perfectamente.i) Romper el sello de garanta de la jeringa, verificar el buen funcionamiento del embolo y aguja, j) Realizar la venopuncion con el bisel hacia arriba, dejando fluir la sangre en la jeringa, aspirando suavemente con el mbolo. La escala de la jeringa debe estar visible (hacia arriba).k) Indicar al paciente abrir la mano, retirar el torniquete y luego la aguja, presionando el lugar de la puncin con un trozo de algodn seco. LA AGUJA SE DESCARTAR EN EL CONTENEDORl) Inmediatamente se descargar la muestra en los tubos o frascos identificados, que contienen los anticoagulantes correspondientes, para hematologa o para tiempos de coagulacin; resbalado por las paredes evitando hemolisis y espumas en la muestra; tapar el tubo y mezclar suavemente para homogenizar la mezcla.m) En los tubos para qumica, que no contienen anticoagulantes sino un gel separador, no se deben agitar las muestras. n) En el sitio de la puncin se coloca una venda, despus de controlar que no haya ms sangrado.o) La persona que hace la extraccin deber quitarse los guantes al finalizar la toma de muestra y desecharlos inmediatamente. NO REUTILIZARLOS.p) Si hay algn dato que haya interferido con el procedimiento, aclararlo en el registro de muestras.

B) PUNCION VENOSA EN NIOSa) En nios mayores de 6 meses, se recomienda hacer la extraccin del brazo como en adultos, pedir la ayuda de un adulto para sujetar al pacienteb) En el caso de nios menores de 6 meses, extraer la muestra del taln con una lanceta descartable. Antes de la extraccin conviene calentar el taln frotndolo entre las manos para favorecer la irrigacin de la zona.c) Tambin se puede extraer de la vena de la mano, utilizando la liga para resaltar la vena, al tener ya la vena lista se punza con la aguja sin la jeringa , presionando unas veces si es necesario para que fluya la sangre en el tubo.d) Desinfectar con un trozo de algodn embebido en alcohol, dejar evaporar y punzar con la lanceta, en la zona del taln indicada en el dibujo adjunto. e) Limpiar la primera gota y dejar gotear la sangre en el tubo con anticoagulante.f) Secar la zona con un trozo de algodn seco y una vez que no haya sangrado, colocar una vendita.

LABORATORIO CLNICO MICRODIAGNOSTIC 2PROCEDIMIENTOS ESTANDAR PARA HEMATOLOGIA COMPLETA CON EQUIPO AUTOMATIZADOPAGINAS DEL AL

METODOLOGIA: Mtodo cuantitativo, automatizado para la determinacin de los componentes de la sangre.PRINCIPIO: Estudiar y determinar la cantidad de los elementos formes de la sangre, presentes en la muestra del paciente observando la forma y las caractersticas de cada uno de ellos.MATERIALES Equipo automatizado para hematologa, barrera primaria de bioseguridad, jeringas, tubos con anticoagulante EDTA, liga, alcohol, torundas de algodn, venditas, cubetitas de plstico y papel, absorbente y gradillaREACTIVOS PARA EL APARATO:HC- LYSE CF, HC DILUYENT, para el recuento automtico. HC CLEANER, para la limpieza de los conductos del aparatoEncender el aparato previo a la obtencin de la muestra, para que alcance la temperatura optima, preparar al paciente, rotular tubos y realizar la extraccin (ver POE para la extraccin), depositar la muestra en el tubo, hasta la marca indicada, resbalado por las paredes y mezclar en forma de 8 (16-18veces).Preparar el aparato, ingresar los datos, verificar los datos y presionar la tecla (ENTER) para el PROCEDIMIENTO Mezclar la muestra del tubo, colocarlo en el aspirador y presionar tecla (DILUYENT); mientras el equipo prepara la dilucin, limpiar con papel absorbente el aspirador de arriba hacia abajo y colocar la cubeta para recibir de regreso, la muestra ya diluida, en el mismo aspirador. Mezclar la dilucin, colocarla en el aspirador de la tecla (SAMPLE) y presionar para aspirar la mezcla. Esperar que el aparato realice el recuento y presionar tecla para la impresin de los resultados; Con la cubeta que contiene solucin CLEAR, lavar el aspirador (diluyent), secar con papel absorbente y colocar la misma cubeta en el aspirador (sample).Anotar y reportar los resultados en el cuaderno de reportes.

Entregar resultados al paciente firmados y sellados.

VALORES DE REFERENCIA DE HEMATOLOGAWBC ----------- 5.00-10.0 mil/mmLYMPH ----------- 25.0-5.50 %MID ------------0.1-6.0 %GRAN ---------- -50.0-70.0%HGB -----------12.0-16.0 mg/dlRBC ------------ 3.5-5.5 millones/mmHCT -----------37.0-50.0 %MCV -----------82.0-95.0 flMCH -----------27.0-32.0 pgMCHC -----------32.0-36.0 mg/dlPLT ----------150.0-450.0V/S ---------- H= 3-5 y M= 4-7mm/1hora

LABORATORIO CLNICO MICRODIAGNOSTIC 2POE PARA HEMATOLOGIA COMPLETA (MANUAL)

METODOLOGIA: Determinar la cantidad, la forma y las caractersticas de los componentes sanguneos.

PRUEBAS QUE SE REALIZAN: En su orden: Hematocrito, Hemoglobina, Formula diferencial (tincin de Wright), Recuento de glbulos blancos, de Glbulos rojos, de Eosinofilos, de Plaquetas y de Reticulositos. Y velocidad de sedimentacin.-Material y EquipoBarrera primaria de bioseguridad, Microcentrifuga, Microscopio, Camara de Neubauer, Laminas porta objetos, capilares Tabla de plastilina, Tabla para medicin del hematocrito, Reactivos y soluciones correspondientes para cada prueba, calculadora, cronometro, Pipetas de Thoma para glbulos blancos y para glbulos rojos, Pipetas automticas, Pipetas pasteur, Tubos de ensayo, Gradilla y tubos de Westergreen y papel absorbente.

HEMATOCRITOGENERALIDADESEs el porcentaje del volumen total sanguneo ocupado por glbulos rojos y la porcin de los elementos formes de la sangre y el plasma,

PRINCIPIO

Un volumen conocido de sangre completa se centrifuga a una velocidad constante durante un periodo determinado de tiempo, los glbulos rojos as sedimentados ocupan una parte del volumen total. Mide la fraccin que comprende a los glbulos rojos masa respecto al volumen total de la muestra de sangre

MATERIALES Y REACTIVOMicro centrifugaTubos capilares con anticoagulante o sin anticoagulantePlastilina, Regla milimetradaDispositivos para lectura del micro hematocrito.Sangre completa heparinizada o por puncin capilar

INTERFERENTESHomogeneizacin de la muestra, Centrifugacin incorrecta Y Sellado inadecuado del capilar.

PROCEDIMIENTOObtener sangre por puncin venosa. (Ver POES de extraccin sangunea.)Mezclar la sangre obtenida por puncin venosa.Introducir un extremo del capilar en la sangre y dejar que se llene hasta 1 cm del extremo superior.Retirar el capilar lleno, limpiar el exterior y sellar el otro extremo usando plastilina.Colocar los capilares en las ranuras radiales de la micro centrfuga con el extremo sellado hacia afuera. Colocar la tapa de seguridad de la micro centrifuga.Centrifugar durante 5 minutos a 10,000 rpm o 10 minutos a 5,000 rpm.Realizar lectura en la tabla, anotar y reportar resultado en el cuaderno de reporte.CALCULOSExisten aparatos que dan resultado final en %. Cuando se carece de este, la lectura se puede realizar usando una regla milimetrada, haciendo el clculo siguiente.

Valores Normales:Hombres: 42 50 %Mujeres: 40 48 % CONCENTRACION DE HEMOGLOBINACon el porcentaje del Hematocrito obtenido, dividido dentro de 3, se determina la concentracin de hemoglobina.El resultado en mg/dl, se anota donde corresponde.

FORMULA DIFERENCIALGENERALIDADESEs la extensin de sangre realizada sobre un portaobjetos y a partir de la cual se observaran al microscopio, las caractersticas de las clulas sanguneas. Aporta informacin valiosa sobre leucemias, deficiencias de hierro, etc.PRINCIPIOUn frotis de sangre preparado de forma adecuada es esencial para asegurar la evaluacin correcta de la morfologa celular. Tambin es usado para dar informacin valiosa acerca de una leucemia. MATERIALES Y REACTIVOSSangre completa, Colorante de Wright, Aceite de inmersin y PortaobjetosMicroscopioCapilares.INTERFERENTESFrotis excesivamente gruesos Tiempo prolongado, dando lugar a sobre tincin Lavado insuficiente Empleo de solucin diluyente o el colorante demasiado alcalino. PROCEDIMIENTORealizar un buen extendido de sangre. Colocar una gota de sangre, en el cubreobjetos.Colocar un segundo portaobjetos delante de la gota de sangre, formando un ngulo de 45, desplazarlo suavemente, hacia atrs hasta que alcance la gota de sangre, presionar ligeramente y jalar hacia la derecha, de manera que fluya la sangre a lo largo del bordeExtienda ahora hacia la izquierda rpidamente, sin detenerse, ni despegarlo, sin presionarlo, conservando el ngulo, de manera que la gota de sangre quede como una capa fina sobre el primer portaobjetos.Dejar secar. COLORANTE WRIGHTCubrir el frote con colorante Wright durante 1 minuto.Agregar buffer de fosfatos pH 6.8 o agua destilada hasta que aparezca una escarcha metlica.Dejar 2 a 4 minutos.Lavar con agua, dejar secar.Colocar una gota de aceite de inmersin al frote.Observar en el microscopio con objetivo 100X.Anotas resultados.

CALCULOSRecorrer el frote en cualquiera de las formas siguiente.Recorrer los frotes en forma horizontal.Recuento en colmena: se empieza en un borde a contar las clulas hasta 1/3 del ancho del frote, luego regresar sobre una lnea paralela.Valores Normales.Polimorfonucleares neutrfilos 40 60 %Neutrfilos en cayado 1 3 %Eosinofilos 0 1 %Linfocitos 20 45 %Monocitos 3 8 % Es importante observar si son clulas maduras o no, si existe granulacin toxica o cualquier desviacin. RECUENTO DE GLOBULOS BLANCOSGENERALIDADESLos recuentos leucocitarios determinan la concentracin de leucocitos en la sangre. Un recuento elevado de leucocitos produce en infeccin, alergia, enfermedad sistmica, inflamacin, dao tisular, y la leucemia. Un bajo conteo de leucocitos puede ocurrir en algunas infecciones virales, inmunodeficiencia y fallo de mdula sea.PRINCIPIOEl recuento de leucocitos es uno de los procedimientos importantes. La condicin previa de todos los mtodos de recuento es la dilucin y preparacin de la muestra de sangre. El acido actico al 10% hemoliza los eritrocitos, se recuenta el tipo de clula deseado en un volumen definido y se calcula el nmero de clulas en un micro litro de sangre.

MATERIALES Y REACTIVOSSangre completa, Diluyente de glbulos blancos, Pipetas de Thoma para glbulos blancos, Cmara de Neubauer, Cubreobjetos y Microscopio.

INTERFERENCIASFormacin de burbujas en la pipeta.Mezcla inadecuada.

PROCEDIMIENTOColocar la muestra en el agitador o mezclarla con movimientos en forma de 8.Con la pipeta de Thoma para glbulos blancos, limpia y seca, aspirar sangre hasta la marca de 0.5, limpiar la punta de la pipeta con una torunda seca.Introducir la pipeta en una alcuota del diluyente; aspirar diluyendo exactamente y sin que se formen burbujas hasta la marca 11.Con los dedos tapar los extremos de la pipeta y agitarla manualmente por 2 minutos.Tomar la cmara de neubauer y colocarle el cubreobjetos.Tomar la pipeta y descartar las primeras tres gotas, la cuarta gota colocarla directamente en la cmara de nuebauer, dejar que por capilaridad corra la gota de muestra.Dejar en reposo la cmara de neubauer por 3 minutos.Colocar la cmara en el microscopio y con objetivo 10X enfocar la cmara.Contar los leucocitos en los 16 cuadros de cada extremo (4 cuadros grandes).Clculos:

Valores normales: Hombres: 5000 10000 X mm Mujeres : 5000 10000 X mm RECUENTO DE GLOBULOS ROJOSGENERALIDADESEl recuento de glbulos rojos es el nmero total de glbulos rojos que hay por milmetro cbico de sangre. Los glbulos rojos son las clulas sanguneas que contienen en su interior la hemoglobina. Son los principales portadores de oxgeno a las clulas y tejidos del cuerpo. Tienen una forma bicncava para adaptarse a una mayor superficie de intercambio de oxgeno por dixido de carbono en los tejidos.

PRINCIPIOLa determinacin-del volumen de los glbulos rojos empacados, en la sangre total se investiga con el objeto de determinar el ndice volumtrico. Este ndice sirve para determinar el grado de anemia en lugar del recuento globular rojo. Da resultados ms definidos que el simple recuento, sobre la condicin de la sangre, debido al hecho de, que los cambios en tamao de los eritrocitos as como su nmero pueden ser determinados.

MATERIALES Y REACTIVOSSangre completa, Diluyente de glbulos rojos, Pipetas de Thoma para glbulos rojos, Cmara de Neubauer, Cubreobjetos y Microscopio

INTERFERENCIASPresencia de burbujas en la pipeta de Thoma.Mezcla inadecuada

PROCEDIMIENTOTomar una pipeta de Thoma para glbulos rojos limpia y seca, aspirar sangre hasta la marca de 0.5 y con el diluyente de rojos llevar a la marca 101.Con los dedos tapar los extremos de la pipeta y agitar manualmente por 2 minutos.Tomar la cmara de neubauer y colocarle el cubreobjetos.Tomar la pipeta y descartar las primeras tres gotas, la cuarta gota colocarla directamente en la cmara.Dejar que por capilaridad se llene la cmara, en el rea cuadriculada. No mover la cmara.Dejar la cmara en reposo por 3 minutos.Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. luego con el objetivo de 40x contar sobre el cuadro grande central de la cmara solo en 5 cuadrados pequeos: uno central y cuatro angulares (80 cuadritos del total).CALCULOSLos resultados se obtienen por la siguiente formula.

Valores Normales: Hombres: 4.5 6.2 millones * mm Mujeres: 4.0 5.5 millones * mm

RECUENTO DE EOSINOFILOSGENERALIDADESLos eosinfilos son, al igual que los neutrfilos, granulocitos derivados de la medula sea y constituyen del 2-5% de los leucocitos sanguneos en personas sanas. Este granulocito reside predominantemente a nivel tisular y es reclutado en sitios de reacciones especficas inmunes, incluyendo enfermedades alrgicas.

PRINCIPIOEste examen mide la cantidad de eosinfilos en su sangre. Se usa para Evaluar y manejar condiciones alrgicas, enfermedades de sangre y enfermedades infecciosas (incluyendo enfermedad del colgeno eosinoflico diseminado y asma), as como algunas infestaciones por parsitos.

MATERIALES Y REACTIVOSSangre completa con EDTAPipetas de thoma para blancos,Cmara de neubauer. Diluyente de eosinofilos,Porta objetos y colorante de contraste wrightINTERFERENTESMezcla de muestra incorrecta.PROCEDIMIENTO 1:Realizar un frote, teirlo y hacer el recuento diferencial. Para ver el % de eosinofilos se hacer la relacin de globulos blancos contados x eosinofilos encontrados= % de eosinofilos

PROCEDIMIENTO 2Usar dos pipetas de Thoma para blancos y con ambas realizar todo el proceso para cada muestraLlenar con sangre completa hasta la marca 1, limpiar la pipeta.Aspirar el diluyente hasta la marca 11.Agitar las pipetas durante 2 minutos.Con la primera pipeta, descartar las primeras 3 gotas y llenar un lado de la cmara de neubauer, con la siguiente pipeta llenar el otro lado de la cmara, de la misma forma que la anterior.En el fondo de una caja de petri colocar un trozo de papel filtro hmedo, colocar la cmara dentro de la caja y cubrir, durante 15 minutos.Luego de 15 minutos, usando el objetivo seco dbil (10x) enfocar, contar los eosinfilos con objetivo 40X en los nueve cuadros grandes de cada lado.Los eosinfilos tienen un color morado mientras que el resto de leucocitos son de color amarillo plido.Clculos:

Valores Normales:150-300 Eosinofilos/mm de sangre.

RECUENTO DE PLAQUETASGENERALIDADESLas plaquetas son las clulas ms pequeas de la sangre. Las plaquetas tienen forma de disco y no contienen hemoglobina. Son esenciales para la coagulacin de la sangre.

PRINCIPIOEl recuento de plaquetas se realiza directamente en un microscopio de contraste de fases, previa lisis de los hemates, o tambin se puede observar en un microscopio convencional

MATERIALES Y REACTIVOSSangre completa, Diluyente para plaquetas,Pipetas de Thoma para Glbulos Blancos,Cmara de Neubauer y Microscopio

INTERFERENTESMezcla inadecuada de la muestra.Tener la muestra en la pipeta por mucho tiempo.Aspiracin de burbujas en la pipeta.

PROCEDIMIENTOCon la pipeta de Thoma para blancos, aspirar diluyente de plaquetas hasta la marca de 0.5, luego aspirar sangre hasta la marca de 1.0 y finalmente llevar hasta la marca 11 con el diluyente.Mezclar suavemente durante 20-30 minutos. Preparar la cmara de Meucare.Descartar las primeras 3 gotas y llenar la cmara de Neubauer.En el fondo de una caja de petri colocar un trozo de algodn hmedo y dejar la cmara de neubauer en reposo por 15 minutos.Observar en el microscopio enfocando con objetivo 10X y contar con objetivo 40x las plaquetas, encontradas en los 5 cuadros donde se cuentan los glbulos rojos.Clculos Valores Normales.

200,000 400,000 plaquetas X mm

RECUENTO DE RETICULOCITOGENERALIDADESEritrocito inmaduro caracterizado por la presencia de una especie de malla formada por filamentos y partculas en la antigua localizacin del ncleo.

PRINCIPIOLos reticulocitos solo pueden ser reconocidos mediante el uso del colorante supra vitales que tienen cido ribonucleico, el cual aparece como una malla o retculo de color azul.

MATERIALES Y REACTIVOSSangre completa colorante de contraste (Wright),Solucin azul de crecil refrigerado, Portaobjetos, Tubo de ensayo y pipetas pasteur

INTERFERENCIASReactivo vencido, Frote mal hecho, Tincin prolongada de tiempo.

PROCEDIMIENTO1. Mtodo Hmedo.Colocar 6 gotas de sangre con EDTA en el tubo de ensayo, ms 3 gotas de azul de crecil, mezclar la solucin e incubarlo a 37C durante 30 minutos.Colocar una gota de la solucin sobre el portaobjetos limpio, para preparar un frote y teir con colorante de contraste. (Wright).Observar el frote en el microscopio y usando el objetivo 100X con aceite de inmersin,Contar en varios campos (10 mnimo) como reticulocitos todas las clulas con granulacin o retculo de color azul, hasta llegar a 1000 celulas(eritrocitos). Sumar la cantidad de reticulositos, observados y calcular el porcentaje con la formula.2. Mtodo seco.Tomar un cubreobjetos y en el centro colocar una gota pequea de sangre.Colocar el cubreobjetos sobre un frote teido. La gota debe estar uniformemente distribuida.Dejar en reposo durante 15 minutos, observar.Contar 100 reticulocitos, anotar el nmero de campos necesarios para obtener los 100 reticulocitos, mnimo 10 campos.O contar el nmero de reticulocitos encontrados al contar 1000 eritrocitos, en campos consecutivos.CALCULOS% de reticulocitos = total de reticulositos x 100 1000 Valores Normales.Adultos: 0.5 1.5 % 90,000 X mm de sangre completa.Nios: 0.5 4 %Infantes: 2 6 % PROCEDIMIENTO PARA VELOCIDAD DE SEDIMENTACIONGENERALIDADESLa velocidad de sedimentacin es un examen hematolgico que no est incluido en el desarrollo de un hemograma; sin embargo, es una prueba muy importante por su gran sensibilidad, pues resulta normal en las enfermedades funcionales, as como en los procesos inactivos o estrictamente locales

PRINCIPIOEn una muestra no coagulable, los glbulos sedimentan debido a su mayor densidad (1.10g/ml) frente a la del plasma, descendiendo lentamente hasta el fondo del recipiente.Materiales y Reactivos: Sangre completa, Tubos de sedimentacin de Westergren y Gradilla para tubos de Westergren.

INTERFERENTESsi se deja la muestra por ms tiempo, altera los resultados.El defecto de calibracin de la pipeta y la no verticalidad de esta.

PROCEDIMIENTOLlenar la pipeta de westergren hasta la marca de 0, limpiar la punta de la pipeta.Colocar la pipeta en forma vertical en la gradilla, que posee una cama de caucho en la parte inferior y en la superior un clip para asegurar la pipeta.Colocar la gradilla en una superficie plana donde no haya vibraciones.Dejar en reposo por 1 hora.Al cabo de una hora leer resultados.CALCULOS: Valores Normales.Hombres: 3-5 mm/1 horaMujeres: 4-7 mm/1 hora.

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA COOMS DIRECTO

METODOLOGIA: mtodo para determinar eritrocitos defectuosos al hacer contacto con el Reactivo.

PRINCIPIO: El contacto de los eritrocitos defectuosos con la inmunoglobina humana, produce aglutinacin.REACTIVOS: Coombs anti-HC

MATERIALES: Centrifuga, sangre con anticoagulante, 2 tubos de ensayo rotulados, solucin isotnica, pipetas pasteur y cronometro

PROCEDIMIENTO DEL ENSAYOMezclar la muestra y con una pipeta pasteur depositar 3 gotas de muestra en un tubo de ensayo Ms 3ml de la solucin isotnica, no agitar el tubo y centrifugar durante 3 minutos a 3 mil rpm. Decantar el sobrenadante sin romper el botn del sedimento.Repetir 2 veces el procedimiento. Se agrega 10 gotas de solucin isotnica al tubo que contiene el botn de eritrocitos y se mezcla suavemente; En el otro tubo,Agregar 3 gotas de la solucin de eritrocitos, ms 3 gotas de reactivo Coombs anti- HG, mezclar suavemente e incubar por 30 minutos a 37C.Centrifugar por 5minutos a 5 mil rpm.Mezclar suavemente, observar si hay aglutinacin, la prueba ser positiva, si no se observa aglutinacin, ser negativa.El resultado positivo se reporta con cruces, dependiendo del grado de aglutinacionAnotar y reportar donde corresponde y entregar resultado firmado y sallado.VALOR NORMAL: Negativo.SIGNIFICADO CLINICO: Hemolisis en el paciente, si el resultado es positivo.

FROTIS DE SANGRE PERIFRICAPRINCIPIO Para el estudio cualitativo y cuantitativo de clulas y plaquetas. Se debe considerar lo siguiente: Calidad del frotis Debe abarcar 80% de la lmina con cabeza, cuerpo y cola. Extensiones gruesas dificultan la visualizacin e identificacin celular, mientras que las delgadas originan una distribucin anormal de los elementos. Eritrocitos Se estudia su tamao, forma, color y si existen inclusiones o elementos extraos. Plaquetas Estudiar tanto cualitativa como cuantitativamente, debiendo observarse de 3 a 10 plaquetas aproximadamente por 100 glbulos rojos o varias plaquetas y grupos ocasionales por campo. Visto con objetivo de inmersin, no debe existir menos de una plaqueta por campo.

MATERIALES: Un capilar, lanceta, algodn y lminas portaobjetos.PROCEDIMIENTO: Tomar la muestra en la yema del dedo, limpiar el rea, sujetar bien el dedo y realizar la puncinLlenar el capilar, limpiar con algodn seco y presionar el rea de la puncinzColocar una pequea gota de sangre en el portaobjetos y realizar el froteSecar el frote sin teir y se entrega a donde corresponde.

GRUPO SANGUINEO Y RHMETODOLOGIA: Tipificacin del grupo sanguneo y RH, por el sistema ABO, en placas

PRINCIPIO: Mtodo de aglutinacin de eritrocitos con antgeno especifico, que produce una reaccin con el reactivo.

SIGNIFICADO CLINICO: Para prevenir accidentes de incompatibilidad en transfusiones sanguneas

REACTIVOS:Anti-A Reagent, reactivo monoclonal para determinacin de antgeno AAnti-B Reagent, reactivo monoclonal para determinacin de antgeno B Anti-D Duoclone para determinar antgenos D

MATERIALES:Muestra con anticoagulante, laminas porta objetos, pipetas pasteur, palillos de madera, 3 reactivos y tubos de ensayo, si fuese necesario.PROCEDIMIENTO:Rotular las lminas con las letras A, B y DAgitar suavemente la muestra y con la pipeta tomar un poco de muestra y trabajar 3 gotasColocar 1 gota pequea en cada extremo de una lmina y 1 gota en el centro de otra laminaColocar 1gota de suero Anti-A, Anti-B y Anti D, en la gota de muestra que corresponde a la misma letra.Mezclar cada gota muestra con diferente palillo y agitar en forma circular las lminas durante 3 minutosObservar aglutinacin en cada gota de muestraAnotar y reportar resultados firmados y selladosESQUEMA DE LA TIPIFICACIONGRUPO A RH POSITIVO GRUPO B RH POSITIVOREACTIVOAGLUTINACIONINTERPRET.REACTIVOAGLUTINACIONINTERPRET.

Anti-APositivaGrupo AAnti-ANegativa---------------

Anti-BNegativa-----------Anti-BPositivaGrupo B

Anti-DPositivaGrupo RHAnti-DPositivaGrupo RH

GRUPO AB RH POSITIVO GRUPO O RH POSITIVOREACTIVOAGLUTINACIONINTERPRET.REACTIVOAGLUTINACIONINTERPRET.

Anti-APositivaGrupo AAnti-ANegativa ------------

Anti-BPositivaGrupo BAnti-BNegativa------------

Anti-DPositivaRHAnti-DPositivaGrupo O

IMPORTANTE: Si no aglutina en muestra Anti-D para determinar el RH, habr que realizar lavado de clulas con solucin salina, centrifugando a 3mil rpm por 1 minuto, entre cada lavado.Agregar 10 gotas de solucin salina al botn de clulas lavadas y mezclar suavementeColocar 3 gotas de clulas lavadas, en un tubo de ensayo, ms 3 gotas de Reactivo Anti-DIncubar por espacio de 15 minutos a 37C. Observar visual y microscpicamente, si se aglutina la muestra, se reporta como Dbilmente Positivo o en caso contrario se reporta Negativo.

LABORATORIO CLNICO MICRODIAGNOSTIC 2TIEMPOS DE COAGULACIONPAGINAS DEL

HEMOSTAT THROMBOPLASTIN-SITIEMPO DE PROTROMBINAMETODOLOGIADeterminacin automatizada del tiempo de Protrombina en un solo tiempo. Anlisis de las vas extrnsecas y comunes de la coagulacinPRINCIPIOEl PT de una etapa mide el tiempo de coagulacin del plasma, despus de adicionar una fuente de factor tisular (tromboplastina) y calcio; generando la activacin del factor Xa, la formacin de trombina y la formacin de un coagulo de fibrina insoluble.REACTIVOS RGT y BUFCONTENIDOS

GRT: Reactivo deTromboplastina, liofilizado Extracto de cerebro de conejo >10% Azida de sodio