Infecciones por Histoplasma capsulatum y el complejo...

24 Revista COPÉRNICO Año X. N° 20. Enero - Julio 2014.

Julman Cermeño y Marisol Sandoval

pp. 24-35

Infecciones por Histoplasma capsulatum y el complejo Paracoccidioides spp en la

sede 5 de julio de la Universidad Nacional Experimental de Guayana, Ciudad Bolívar.

Estado Bolívar, VenezuelaJulman R. Cermeño1. [email protected]

Marisol Sandoval de Mora2

[email protected]

1Departamento de Parasitología y Microbiología. Escuela de Ciencias de la Salud “Dr. Francisco Battistini Casalta”. Universi-dad de Oriente, Núcleo Bolívar. Avenida José Méndez. Ciudad Bolívar. Estado Bolívar. Venezuela.

2Departamento de Medicina. Escuela de Ciencias de la Salud “Dr. Francisco Battistini Casalta”. Universidad de Oriente. Núcleo Bolívar. Avenida Germania. Hospital Universitario “Ruiz y Páez”. Ciudad Bolívar. Estado Bolívar. Venezuela.

Resumen

Para determinar la prevalencia de infecciones por Histoplasma capsulatum y del Complejo Paracoccidioides spp y describir la diversidad fúngica en la Sede 5 de Julio de la Universidad de Guayana, se realizó un estudio clínico-epidemiológico, inspec-ción y toma de muestras de aire ambiental. Las muestras fueron sembradas en medios especiales para hongos. Previo con-sentimiento informado, se aplicó una encuesta epidemiológica y se administraron pruebas intradérmicas de histoplasmina y paracoccidiodina. A los individuos sintomáticos respiratorios crónicos se les realizó estudio de esputo y serología específica para los hongos: Histoplasma capsulatum, Complejo Paracoccidioides spp y Cryptococcus spp. Sesenta muestras del ambien-te fueron cultivadas identificándose: Aspergillus spp, Mucor spp, Rhizopu ssp, Penicillium spp, Fusarium spp,y Cryptococcus spp. La histoplasmina fue positiva en 31,5% (n=45) y la paracocccidioidina en 30,1% (n=43). Los factores de riesgo fueron: contacto con perros (42%), palomas (27,3%) y visitas a fincas con gallineros (23,1%).El tiempo de permanencia en la sede no se asoció con la infección de H. capsulatum ni Paracoccidioides spp (p>0,05). Hubo un caso de paracoccidioidomicosis pulmonar crónica (0,7%). Se demuestra una elevada prevalencia de infección por H. capsulatumy por el Complejo Paracocci-dioides spp en el área urbana. Los hongos identificados en el ambiente interno especialmente del Género Cryptococcussppre presentan un riesgo para la salud de los trabajadores o usuarios de la sede.

Palabras claves: Estado Bolívar, histoplasmina, histoplasmosis, paracoccidioidina, paracoccidioidomicosis, prevalencia.

Abstract

To determine prevalence of infections by Histoplasmacapsulatum and Paracoccidioides spp Complexand to describe fun-galdiversityin The Campus July 5of Universidad Experimental de Guayana. A clinical-epidemiological study; inspection and air samplingwere performed. Samples were culturedon special mediafor fungi. Once informed consent was obtained, an epidemiological surveywas applied to volunteer’s subjects andintradermaltests were realized inoculating paracoccidiodine andhistoplasmine. Microbiological study of sputum from subjects withchronicrespiratory symptoms and serologic tests for determination of specific antibodies for fungi:Histoplasmacapsulatum, Paracoccidioides spp complex and Cryptococcus spp were done. Aspergillus spp, Mucor spp, Rhizopus sp, Penicillium spp, Fusarium spp y Cryptococcus spwere identified from sixty environmental cultured samples. Histoplasmine test were positivein 31.5% (n=45) and paracocccidioidine test in 30.1% (n=43) of population, respectively. The risk factors detected were: contact with dogs (42.0%), with pigeons (27.3%) and visits tofarmswithpoultry (23.1%). The dwell timeat the headquarters was not associated with infection by H.capsulatum or Para-coccidioides spp(p> 0.05). There was one case of chronic pulmonary paracoccidioidomycosis(0.7%).These results showed a high prevalence of infection with H.capsulatum and Paracoccidioides spp complex in urban areas. The fungi identified in the internal environment specially of the genus Cryptococcus spp ,is ahealth risk tousers of the site.

Keywords: Bolívar state, histoplasmine, histoplasmosis, paracoccidioidine, paracoccidioidomycosis, prevalence.

Recibido: 11 de Julio de 2014 | Aceptado: 17 de Octubre de 2014

COPÉRNICO Revista arbitrada de divulgación científica. 25

Infecciones por Histoplasmacapsulatum y el complejo Paracoccidioidesspp ...

Breves antecedentes

La Histoplasmosis (H) y la Paracoccidioidomicosis (PCM) son micosis sistémicas causadas por hongos dimórficos, geófilos: Histoplasma capsulatum y el

Complejo Paracoccidioides spp, respectivamente; comu-nes en América (Prado et al., 2009; Bonifazet al., 2011). Estas micosis son endémicas en Venezuela (Martínez Méndez et al., 2013) y son consideradas un problema im-portante de salud pública en el estado Bolívar (Cermeño et al., 2004; Cermeño et al., 2005a, Martínez Méndez et al., 2013). La prevalencia estimada es de 3 casos por cada 1.000 habitantes (Cermeño, 2012).

Las micosis aparecen frecuentemente en ciertas regio-nes, donde existen factores bioclimáticos que favorecen el desarrollo del hongo en vida saprofítica (organismos que se desarrollan sobre sustancias orgánicas en descomposi-ción) en el medio ambiente. En otros casos, es probable que factores genéticos puedan intervenir en la mayor in-cidencia de determinadas micosis (Da Silva Lacaz, 1983).

La H y la PCM están relacionadas con las condiciones ambientales: humedad, temperatura, pluviometría, carac-terísticas y contenido orgánico del suelo (Da Silva Lacaz, 1983; Poncio-Mendes et al., 2000), las cuales determinan la distribución de estos hongos en la naturaleza (De Albor-noz, 1996).

Dado que la PCM comparte algunas características epi-demiológicas y clínicas semejantes a la H en una misma región (Cermeño et al., 2004) y motivados por la solicitud realizada por representantes de los Trabajadores Admi-nistrativos de la Universidad Nacional Experimental de Guayana (UNEG), debido a la presencia de murciélagos, palomas en la sede del Jardín Botánico, en la avenida 5 de Julio de la UNEG en Ciudad Bolívar, y la presencia de varios individuos sintomáticos respiratorios crónicos, se decidió realizar la presente investigación con la finalidad de determinar la prevalencia de la infección por Histoplas-ma capsulatum y el Complejo Paracoccidioides spp en los trabajadores de esa sede y describir la diversidad micro-biológica fúngica presente en algunas instalaciones de la Universidad.

MetodologíaSe trata de un estudio descriptivo, transversal y pros-

pectivo. Se realizó un estudio clínico-epidemiológico en



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los trabajadores (docentes, empleados administrativos y obreros) y algunos estudiantes que voluntariamente die-ron su consentimiento informado para participar en el es-tudio. Este estudio fue aprobado por el Comité de Ética de la Universidad de Oriente, respetándose los principios éticos para la investigación médica en seres humanos, en concordancia a los lineamientos de la Declaración de Helsinki de la Asamblea Médica Mundial. Además se rea-lizó una evaluación de la diversidad microbiológica fúngi-ca ambiental, en el edificio de Turismo y en la Oficina de Servicios Generales, en cuyas áreas algunos trabajadores referían la presencia de palomas.

Descripción del área de estudioLa Universidad Nacional Experimental de Guayana se

ubica en la región de la Guayana Venezolana, la región más extensa del país, ubicada al sureste y a 700 Kilómetros de Caracas, la Capital de la República. Tiene varias sedes, dos ubicadas en Ciudad Bolívar: una en la Casa de las Doce Ventanas y otra en la avenida 5 de Julio en el Jardín Bo-tánico. Las otras sedes se ubican en Caicara del Orinoco, Ciudad Guayana, Upata, Tumeremo, Guasipati, El Callao y Santa Elena de Uairén (UNEG, 2010).

La sede ubicada en el Jardín Botánico de Ciudad Bolí-var, estado Bolívar, cuenta con un área de 60 hectáreas (UNEG, 2010). En sus instalaciones funciona, además, el Herbario Regional de Guayana, en el que se preservan, ca-talogan y reproducen especies de plantas obtenidas en va-rias zonas del estado Bolívar, así como de Delta Amacuro y Amazonas. También se encuentran árboles traídos de Áfri-ca y Asia y que fueron donados a este centro. Numerosas especies de aves utilizan estos espacios como dormidero, donde se alimentan y reproducen sin ser molestados por el hombre (Ossa, 2012). Entre las aves destacan los azulejos de jardín, torditos, turpiales de agua, cotorras caracoleras, negroluises, garzas azules, turpiales de agua, entre otros. Muchas de estas provienen de los ecosistemas ribereños del río Orinoco y en algunos casos se detectan bandadas de aves migratorias provenientes de Brasil (UNEG, 2010).

La sede de la UNEG ubicada en el Jardín Botánico contó, para el momento del estudio, con 191 trabajadores: 154 docentes, 22 administrativos, 15 obreros y 3.719 estudian-tes inscritos.

Recolección de datos clínicos y epidemiológicos

Se realizó una encuesta epidemiológica para la recolec-ción de datos clínico-epidemiológicos (edad, sexo, oficio, procedencia, tiempo de permanencia en la sede, mani-festaciones clínicas, antecedentes respiratorios previos, hábitos psicobiológicos, factores de riesgo que interfieren en el proceso salud-enfermedad y sintomatología actual, entre otros). Además, se colocaron dos pruebas intradér-micas: histoplasmina, en la cara interna del tercio proximal del antebrazo izquierdo y paracoccidiodina, en la cara in-terna del tercio proximal del antebrazo derecho.

En aquellos individuos sintomáticos respiratorios cróni-cos, con más de tres meses de evolución, se les realizó una evaluación clínica y les fue solicitado: radiografía de tórax postero-anterior y lateral, hematología completa, perfil li-pídico, glicemia, urea, creatinina, determinación de Inmu-noglobuli na IgE, demostración de anticuerpos específicos para Histoplasma capsulatum, Complejo Paracoccidioides spp y Complejo Cryptococcus spp. Se recolectaron mues-tras de esputo, sólo en aquellos casos que los individuos que presentaron tos productiva al momento del estudio.

MetodologíaPara las pruebas cutáneas se emplearon los antígenos

elaborados por el Instituto de Biomedicina, de la Univer-sidad Central de Venezuela. La histoplasmina es un an-tígeno metabólico obtenido de la fase filamentosa del Histoplasma capsulatum y la paracoccidiodina es un poli-sacárido obtenido de la fase levaduriforme de 8-9 aislados del Complejo Paracoccidioides spp (Fava y Fava, 1998). Las pruebas cutáneas fueron realizadas antes de la toma de muestra para la determinación de anticuerpos específi-cos contra el Complejo Paracoccidioides spp, Histoplasma capsulatum y Cryptococcus spp.

Para la demostración de la infección por hongos, se inocularon 0,1ml de histoplasmina y paracoccidioidina. La zona de inoculación fue identificada con una marca. Se emplearon jeringuillas desechables de 1ml y agujas de calibre 27. Las lecturas intradérmicas fueron realizadas a las 24 y 48 horas después de las inoculaciones. La prueba se consideró positiva cuando exista un área de induración



con un diámetro de 5mm o más en el lugar de inoculación (Albornoz, 1990; Tavares y Apreciada, 1996).

Para la demostración de anticuerpos específicos con-tra el Complejo Paracoccidioides spp e Histoplasma cap-sulatum se empleó la técnica de doble difusión en gel de agarosa. El antígeno del Complejo Paracoccidioides spp fue el fabricado por el Instituto de Biomedicina de la Universidad Central de Venezuela y el suero control pro-cedía de pacientes con paracoccidioidomicosis sistémica confirmada por biopsia. El antígeno de H. capsulatum y el suero control empleado fue el fabricado por de Meridian Bioscience, Inc. La demostración del antígeno capsular de Cryptococcus spp fue realizada en suero, mediante un ensayo Inmunosenzimático, empleando el kit comercial Cryptococcus, Premier EIA, de Meridian Diagnostics, si-guiendo las recomendaciones del fabricante.

Cada una de las muestras de esputo fueron concen-tradas mediante centrifugación a 3000 x g durante 15 minutos, y el sedimento fue resuspendido con 2 ml de tampón fosfato. A cada una de las muestras de esputo se les realizó la coloración de Ziehl-Neelsen (Z-N), un examen directo con KOH al 20%, tinción con Giemsa y Metenami-naargéntica. Las muestras de esputo fueron sembradas por duplicado en medios de agar glucosado de Sabouraud cloranfenicol, SabouraudDextrosa más gentamicina y Agar Cerebro Corazón; y las placas fueron incubadas a 35 ºC durante 8 semanas.

Muestreo ambientalSe realizó un monitoreo del edificio de turismo, para el

reconocimiento de las paredes deterioradas,con el fin de detectar daños provocados por agentes biológicos, restos de excrementos de animales, exudados, zonas humedeci-das y zonas descamadas.Para ello, hubo desplazamientos en el interior del edificio de turismo, específicamente en las aulas (A): A-18, A-21, A-22; y en las oficinas de coor-dinación de servicios generales, coordinación de turismo, coordinación de pasantías, baño de caballeros y baño de damas ubicadas en el edificio de turismo. Las muestras fueron recolectadas durante los meses de Abril del año 2013 en placas de Petri estériles y fue efectuada por un grupo interdisciplinario de especialistas (Bioanalista, mé-dico tropicalista e infectólogo). Se recogieron muestras de los aires acondicionados y superficies dañadas, mediante frotis de la superficie de los mismos, con hisopos estériles

y luego aplicados en la superficie de los medios de cultivos y en solución salina fisiológica estéril (0,85%).

Las muestras de paredes fue realizada por técnicas de raspado y adhesión. Los excrementos de aves fueron reco-lectados en placas de Petri estériles. El material fue sem-brado en medios selectivos micológicos (agar Sabouraud dextrosa con cloranfenicol, agar extracto de malta, medio de Staib, agar Semillas de Girasol-AGA, agar cerebro co-razón). Los cultivos fueron incubados a 35º C y a 25º C. Estos fueron observados hasta por 4 semanas. Se tomaron muestras del aire ambiental, dentro del edificio de turis-mo y sala de servicio general de la sede, realizándose una técnica no volumétrica (Técnica de Sedimentación en pla-cas de Petri -Técnica gravitacional), exposición de las pla-cas de Petri abiertas por 20 minutos, conteniendo agar de Sabouraud cloranfenicol y Sabouraud dextrosa con genta-micina como antibióticos, por duplicado. Este método de sedimentación en placa permite una estimación cualita-tiva de los elementos fúngicos presentes en el ambiente.

Las placas de Petri fueron incubadas a 25-28º C y ob-servadas diariamente hasta evidenciar crecimiento fún-gico durante 8 semanas. A las 72 horas cada colonia fue enumerada e identificada hasta nivel de género, según morfología macroscópica y microscópica (Calvo et al., 1980; Pitt y Hocking, 1997; Barnett y Hunter, 1998).En los medios micológicos, una vez desarrolladas las estructuras reproductoras, fundamentales para la identificación, se realizaron preparaciones húmedas tomando fragmentos de los micetos, luego teñidas y revisadas al microscopio (Olympus CH 20). Adicionalmente, fueron realizados mi-crocultivos por el método de Ridell y se emplearon claves dicotómicas para identificación de géneros según Hooget al. (2000). Las colonias levaduriformes desarrolladas en los medios selectivos fueron sometidas a tinciones espe-ciales y observaciones microscópicas, así como a pruebas bioquímicas utilizando el sistema API 20 C y 32 C (Biome-rieux®, Francia) y test de urea para su caracterización.

La identificación fue realizada por las técnicas estándar de laboratorio aplicando los siguientes criterios para todos los agentes: examen directo, características macroscópi-cas y microscópicas de la colonia obtenida. Se aplicaron, además, otros criterios: para hongos no dermatofíticos, los indicados por Kwong-Chung y Bennett (1995). Las co-lonias que no esporularon luego de 8semanas de incuba-ción fueron consideradas como Myceliasterilia (Calvo et



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al., 1980).Las bacterias que crecieron en los medios mico-lógicos con antibióticos fueron identificadas siguiendo los métodos estándares y las recomendaciones del Comité In-ternacional de Laboratorios Clínicos (Lennetteet al., 1996; CLSI, 2013)

Todas las muestras ambientales y de esputo fueron procesadas en el Departamento de Parasitología y Micro-biología de la Universidad de Oriente, Núcleo Bolívar. La demostración de anticuerpos específicos y la detección de antígenos para los diferentes hongos se realizaron en la Unidad de Diagnóstico Biomédico Bolívar (UNDIBIBO, CA). El resto de exámenes paraclínicos fueron realizados en un laboratorio privado regional y las radiografías de tórax en la Unidad de Imágenes del Centro Médico Orinoco de Ciu-dad Bolívar.

Análisis estadísticoLos datos fueron analizados mediante estadística des-

criptiva utilizando el programa SPSS versión 11 para Win-dows, y las pruebas de Ji-cuadrado y prueba exacta de Fisher, con un nivel de significancia de 0,05.

ResultadosSe aplicaron 318 pruebas intradérmicas a 159 indi-

viduos quienes aceptaron voluntariamente participar en el estudio. De estos sólo 143 entregaron la encuesta clínico-epidemiológica completa y acudieron a la lectura de la prueba a las 24 y 48 horas respectivamente. Cator-ce individuos no acudieron a las lecturas de las pruebas cutáneas y 2 de ellos no identificaron la encuesta clínico-epidemiológica. La encuesta demostró que la mayoría de los trabajadores vivían en el Municipio Heres: Parroquia Catedral (n=39; 27,3%), Vista Hermosa (n=34; 23,8%), Sabanita (n=32; 22,3%), Agua Salada (n=27; 18,9%), Mar-huanta (n=5; 3,5%) y José Antonio Páez (n=1; 0,7%).Cua-tro de ellos vivían en el Municipio Caroní (2,7%) y 1 en el Municipio Independencia del estado Anzoátegui (0,7%). La mayoría era del sexo femenino (n=107; 74,8%).Con re-lación a la ocupación, 74 eran docentes (51,7%), 22admi-nistrativos (15,4%), 16 obreros (11,2%), 1 chofer (0,7%) y 25 estudiantes (17,5%). Los trabajadores eran predomi-nantemente solteros(n=70; 49%), casados (n=58; 40,6%) y divorciados (n=7; 4,9%), entre otros. Los sujetos evaluados tenían una media de edad de 39,6 años (DE + 11,1), con

mínimo de 18 y un máximo de 64 años. El grupo de edad más frecuente fue de 46 a 55 años (n=37; 25,9%).

Dentro de los antecedentes patológicos de importan-cia destaca: hipertensión arterial (n=34; 23,4%), diabetes mellitus (n=17; 11,7%), alergias (n=17; 11,7%), bronquitis recurrentes (n=8; 5,5%), asma bronquial (n=13; 9,0%), ar-tritis reumatoide (n=2; 1,4%) y Lupus eritematoso sistémi-co (n=1; 0,6%). Dentro de los hábitos psicobiológicos se evidenció: 42 sujetos con hábitos alcohólicos ocasionales (29,4%), 5 que realizan labores de agricultura (3,5%) y 11 con hábitos de fumar (7,7%).

Las manifestaciones clínicas señaladas fueron: tos (n=18; 12,6%), fiebre (n=4;2,8%), disnea (n=6; 4,2%), ex-pectoración (n=10; 7,0%); y dolor torácico (n=3; 2,1%).

La histoplasmina fue positiva en el 31,5% (n=45) y la paracoccidioidina en el 30,1% (n=43) de los sujetos eva-luados. Sólo en 27 sujetos hubo simultáneamente ambas pruebas positivas (18,8%).

Hubo predilección por el sexo masculino para la infec-ción por el Complejo Paracoccidioides spp (p=0,015), pre-dominando las intradermorreacción positiva en mayores de 35 años de edad (p=0,03); sin embargo para la infec-ción por Histoplasma capsulatum no hubo predilección por sexo (p= 0,08), y se observó más frecuente en los ma-yores de 35 años (p= 0,01).

La frecuencia de infección por Complejo Paracocci-dioides spp y/o Histoplasma capsulatum resultó indepen-diente del tiempo de permanencia en la sede del Jardín Botánico y de la visita a la Casa de las Doce Ventanas (p>0,05). Los factores de riesgo encontrados fueron: con-tacto con perros 42% (n=60), palomas 27,3% (n=39), mur-ciélagos 11,9%, (n=17), visitas a la “Cueva del Guácharo”, estado Monagas 12,6% (n=18) y visitas a fincas con galline-ros 23,1% (n=33). Sin embargo, estos factores de riesgo no se asociaron con la infección de hongos (p >0,05). El mayor porcentaje de intradermorreacción positiva a histoplasmi-na se observó en los grupos de edades comprendidos en-tre > 45 a 55 años (p=0,01). Sin embargo, con la prueba de paracoccidioidina se observó en el grupo de 50 a 65 años (p= 0,03).

Se evaluaron clínicamente 15 individuos, trabajadores de la UNEG, de los cuales 12 eran sintomáticos respira-torios crónicos (10,3% de la población total) y 3 portado-res de alguna inmunosupresión (2,1%). El examen físico



fue normal en 14 personas y sólo 1 de ellos tenía esca-sos estertores y roncus en ambas bases pulmonares. La radiografía de tórax mostróalteraciones en 9 individuos: reforzamiento hiliar derecho (2), reforzamiento hiliar bila-teral (1), aumento de radiotransparencia ambos pulmones (1), aumento de la trama bronquial (3),trama bronquial reforzada, paredes bronquiales engrosadas, infiltrado pe-ribronquítico, e intersticial difuso (2), el resto fue normal. La determinación de Inmunoglobulina E fue normal en 7 sujetos. Cinco sujetos fueron referidos a otros especia-listas: 1 al cirujano de Tórax y 4 al neumonólogo para su evaluación.

El examen directo de esputo con KOH al 20% y la co-loración de Grocott demostró la presencia de levaduras multigemantes del Complejo Paracoccidioides spp en un solo caso (0,7%); el cual tenía alteraciones radiológicas y manifestaciones clínicas compatibles de una PCM pulmo-nar crónica.

En ningún caso se evidenció serología positiva para Histoplasma capsulatum, Complejo Paracoccidioidesspp ni para el Complejo Cryptococcus spp. No se observó creci-miento de Paracoccidioides spp, Histoplasma capsulatum ni de Cryptococcus sp en los diferentes medios de cultivo empleados en el cultivo de esputo después de 8 semanas de incubación; ni fueron observadas micobacterias.

Con relación al estudio ambiental, se evidenció algunas (n=4) paredes deterioradas por las excretas de palomas en el edificio de turismo con pinturas levantadas y con colo-res variables de blanco, beige, verde y marrón claro, así como también deterioradas por la humedad (descama-das). Se evidenció plumas de palomas, nidos y excretas de las mismas en la parte superior de las aulas: A-18, A-21y sólo excretas de murciélagos en el techo del baño de ca-balleros y en el área de coordinación de pasantía.

En el área de servicios generales se evidenció exceso de humedad y olor a moho. No se evidenció presencia de palomas ni excretas en esta área inspeccionada.

En la sede inspeccionada se observa limpieza frecuente de los filtros de los aires acondicionados y en los pisos de las aulas seleccionadas. Sin embargo, la limpieza es esca-sa en las ventanas, en los baños y en la parte superior de las paredes del edificio inspeccionado. Se evidencia en el baño de caballeros la ausencia de vidrios en una de las ventanas y una ventana rota, lo que posiblemente implica el paso de murciélagos a esta área.

Es evidente la presencia de perros flacos, con piel des-camada, áreas de alopecia, hambrientos y en aparente malas condiciones higiénico sanitarias.

Sesenta placas de Petri fueron cultivadas con muestras ambientales. Demostrándose crecimiento de hongos fila-mentosos, levaduriformes y bacterias resistentes a cloran-fenicol. Se identificaron los siguientes géneros: Aspergillus sp, Mucor spp, Rhizopus sp, Penicillium spp, Fusarium spp, y Cryptococcus spp (Ver Tabla Nº 1). Estos géneros repre-sentan a una amplia variedad de hongos ambientales. En 5 placas (8,3%), ubicadas encima de los filtros de los aires acondicionados de las aulas: A-21, A-18 y coordinación de turismo no hubo crecimiento de hongos.

Las Unidades Formadoras de Colonias (UFC) fueron en-tre 1 UFC a 200 UFC. El género Aspergillus spp, representó el 63,5% del total de las colonias fúngicas observadas, se-guido de Mucor spp (23,8%). Se observó el mayor número de colonias fúngicas en el área de coordinación de turis-mo (200 UFC), oficina de servicios generales (150 UFC) y el Aula A-21 (75 UFC).

Se evidenció crecimiento de hongos levaduriformes del Complejo Cryptococcus spp, hongo patógeno primario, en el área de la coordinación de pasantía, donde se observó concomitantemente la presencia de excretas de murcié-lagos y, en el aula A-21 donde se evidenció excretas de palomas. Asimismo, hubo crecimiento de bacterias, resis-tentes al cloranfenicol, de la especie Pseudomonas stutze-ri en el área de coordinación de pasantía.



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Tabla 1

Géneros de hongos identificados en el interior de la sede de la UNEG, Jardín Botánico -5 de Julio, Ciudad Bolívar, estado Bolívar. Abril 2013.

Ubicación Crecimiento fúngico: Géneros

Aula A-18 (ambiente) 01 Placa sin evidencia de crecimiento.Paredes A-18 Aspergillus pp, Mucor sp, Aspergillus niger, Aspergillus

versicolor.Encima del filtro de aire acondicionado 01 placa sin evidencia de crecimientoAula A-21Excretas de palomas Rhizopus spp, Aspergillus spp, Mucor sp, Cryptococcus spp.

Paredes A-21 Aspergillus niger, Aspergillus spp,

Encima del filtro de aire acondicionadoAula A-22Paredes

01 placa sin evidencia de crecimiento

Aspergillus spp, Aspergillus niger, Mucor sp, Fusarium sp.

Encima del filtro de aire acondicionado 01 placa sin evidencia de crecimiento

Coordinación de Turismo

Ambiente ParedesCoordinación de PasantíaExcretas de murciélagos y palomasParedes

01 placa sin evidencia de crecimiento.Aspergillus spp

Cryptococcus spp, Mucor sp, Aspergillus sppMucor sp, Pseudomonas stutzeri

Baños de caballerosExcretas de murciélagosParedes

Aspergillus spp, Mucor sp.Aspergillus spp

Oficina de Coordinación Servicios Generales Paredes, aire acondicionado Aspergillus niger, Penicillium spp, Aspergillus candidus,

Aspergillus versicolor, Mucor sp, Aspergillus spp.

DISCUSIÓNEste estudio demuestra una elevada prevalencia de

infección por Histoplasma capsulatum (31,5%) y por el Complejo Paracoccidioides spp (30,1%) en los sujetos evaluados, similar al estudio realizado recientemente en la sede de la Casa de las Doce Ventanas de la UNEG en Ciudad Bolívar (Cermeño y Sandoval, 2013), aunque en esta última sede, la prevalencia fue superior para ambas infecciones (61,5% y 46,2%, respectivamente).

A diferencia de otros estudios realizados en otras pobla-ciones del estado Bolívar donde la prevalencia de ambas infecciones es inferior. Por ejemplo, en San Félix (10,2% y 7,6%) (Cermeño et al., 2009), Monteralo, área agrícola del estado (8,5% y 11,3%) (Cermeño et al., 2004) y en Upata (25, 7% y 19,6%) (Cermeño et al., 2005b). Estos resulta-dos demuestran un mejor conocimiento epidemiológico

de las infecciones causadas por el Complejo Paracocci-dioides spp e Histoplasma capsulatum, hongos patógenos endémicos en el estado Bolívar; observándose una mayor prevalencia de las infecciones, en áreas urbanas más que en áreas rurales o suburbanas, a pesar de que 5 individuos desempeñaban labores agrícolas, las cuales se conocen que juegan una papel importante en la adquisición de la infección ocasionada por el Complejo Paracoccidioides spp (Mota et al., 2009).

Esto evidencia una variabilidad en la frecuencia de in-fección de los individuos que viven en el estado Bolívar y quizás esa elevada prevalencia en el área urbana, obedece a las diferentes movilizaciones de tierra, por construccio-nes de nuevas edificaciones, viviendas e invasiones que se están observando en diferentes zonas del municipio Heres y Caroní, a la presencia de aves migratorias y/o a la pre-



sencia de palomas que frecuentan, casas, edificios, plazas, avenidas, calles, mercados, hospitales, entre otras, donde quedan restos de alimentos (venta ambulantes de maíz y comida rápida) y/o basuras que se observan en toda la ciudad, sin ninguna preocupación por parte de las autori-dades competentes.

Los hallazgos obtenidos en esta investigación sugieren que en los individuos procedentes del área geográfica es-tudiada y que hacen vida en la Sede del Jardín Botánico, coexisten las infecciones del Complejo Paracoccidioides spp e Histoplasma capsulatum.

Hubo coexistencia de la infección por ambos hongos en el 18,8% (n=27), similar a lo demostrado por Silva-Ver-gara y Martínez (1998) en Brasil, quienes efectuaron un análisis de asociación similar entre las intradermopositivi-dades a la paracoccidioidina y histoplasmina en cultivado-res de café; concluyendo que la probabilidad de obtener una prueba cutánea positiva a la paracoccidioidina es seis veces mayor cuando ésta se realiza en personas que han sufrido infección previa por H. capsulatum y exhiban prue-bas dérmicas positivas a la histoplasmina. No obstante, los investigadores antes mencionados refirieron que las po-sitividades entre estos antígenos, no necesariamente sig-nifican dependencia entre los resultados, por lo que sus hallazgos fueron explicados debido a la coexistencia de ambos agentes micóticos en la región objeto de la investi-gación, tal como ocurrió en el presente estudio.

En otras regiones de Venezuela, donde la histoplas-mosis y la paracoccidioidomicosis son endémicas, se han señalado prevalencias de infección variables, como en la Sierra de Perijá (estado Zulia), Paracotos (estado Miran-da), Isla de la Culebra (estado Carabobo) y Sierra de San Luís (estado Falcón), donde la positividad se estimó alre-dedor del 60% (Albornoz y Albornoz, 1971; Mirt y Mirt, 1986; Albornoz, 1990).

En Latinoamérica la prevalencia de infecciones por H. capsulatum y el Complejo Paracoccidioides spp es varia-ble (Mangiaterra et al., 1996; Fava y Netto, 1998; Bonifaz et al., 2011; Colombo et al., 2011). En áreas endémicas de América Central se ha señalado prevalencias entre el 12% a 40,4% en personas que han visitado cuevas recien-temente (Negroni, 1984).

El mayor porcentaje de positividad para la paracoccidioi-dina e histoplasmina se observó en el grupo de los mayores

de 35 años, similar a lo descrito en otras investigaciones en la región (Cermeño et al., 2009; Cermeño y Sandoval, 2013).

La ocupación de los trabajadores no constituyó un fac-tor de riesgo para adquirir infección.

Las infecciones por Histoplasma capsulatum y del Complejo Paracoccidioides spp en el estado Bolívar son endémicas (Cermeño et al., 2004; Cermeño et al., 2005ª)probablemente sea debido al bioclima tropical húmedo del estado, a las condiciones de humedad, vegetación, temperatura y características del suelo (27º C -31º C, plu-viosidad entre 500-2500 mm/año, humedad entre 67-87% y suelos con alto contenido orgánico) que determinan la distribución de estos hongos en la naturaleza (Poncio-Mendes et al., 2000).

Hubo un caso de paracoccidioidomicosis pulmonar. Es importante señalar que cuando se hacen estudios epide-miológicos en busca activa de infecciones por hongos sis-témicos es frecuente la detección de casos (Cermeño et al., 2005 b; Cermeño et al., 2009; Cermeño y Sandoval, 2013).

Se debe destacar que la presencia de excrementos de murciélagos frugívoros y excretas de Palomas (Columba livia) en la sede, podría constituir riesgo y posibilidad de adquirir infecciones respiratorias. El papel de la paloma como portadora de hongos patógenos fue establecido por Emmons en 1955, el cual aisló C. neoformans de las excreciones de palomas urbanas, siendo el primero en es-tablecer la relación existente entre el microorganismo y las heces de estas aves (Casadevall y Perfect, 1998). Ac-tualmente numerosos estudios de casi todo el mundo han demostrado que deposiciones de palomas son un impor-tante reservorio del Complejo Cryptococcus spp (Rosario et al., 2008) y suele aislarse el hongo en las deyecciones acumuladas de estas aves tanto frescas como secas en palomares, aleros de edificios, áticos o balcones de casas abandonadas donde duermen las palomas (Pal, 1997; Ro-sario et al., 2008; Colom Valiente et al., 1997; Castañón Olivares et al., 2000; Cermeño et al., 2006).

El hábitat desecado, alcalino, rico en sales y nitrógeno, es ecológicamente restrictivo pero no es infrecuente en el medio ambiente urbano (Pal, 1997; Cermeño 2006). Pa-rece que la alta concentración de creatinina en el estiér-col de paloma favorece el crecimiento de los criptococos, pero, además, las heces de pichón, brindan otras caracte-rísticas: ambiente alcalino, hiperosmolar y rico en muchos



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compuestos nitrogenados, además de la creatinina (Casa-devall y Perfect, 1998).

Cryptococcus sp se ha aislado de otras especies de aves (Rosario et al., 2008). Por lo tanto, la presencia de aves no debe considerarse un riesgo sanitario para Cryptococcus spp, ya que es un saprofito del tubo digestivo de un buen número de especies aviarias, pero los excrementos de estos animales si constituyen un hábitat importante para esta levadura patógena. La elevada capacidad de super-vivencia del microorganismo en estos sustratos, aún de-secados e insolados, los convierte en potenciales fuentes de infección, aunque deben existir factores externos, aún no bien conocidos, que influyen poderosamente en la per-sistencia de Cryptococcus en el ambiente (Rosario et al., 2008).

No solamente se ha aislado diferentes especies del Complejo Cryptococus neoformans sino otras especies no neoformans en los excrementos de las palomas (Rosario et al., 2008), además, de otros hongos patógenos como Histoplasmacapsulatum (Cermeño et al., 2006); así tam-bién en los excrementos de murciélagos (Chávez-Tapia et al., 1998; Taylor et al.,2000).

El papel del murciélago como potencial reservorio y dispersor en la naturaleza de H. capsulatum fue propuesto por diferentes autores (Chávez-Tapia et al., 1998; Hoff y Bi-gler, 1981; Taylor et al., 2000). Además, se sugiere que es-tos mamíferos son responsables de transportar el hongo por ejemplo, entre regiones geográficas distantes (Taylor et al., 2000).Por ello, es recomendable el cierre entre las paredes y el techo del edificio de turismo del Jardín Botá-nico y el arreglo de las ventanas del baño de los caballe-ros; en los cuales anidan las palomas, existen excrementos de ellas en las paredes y la presencia de excrementos de murciélagos en los techos; recomendándose una limpieza exhaustiva de estos nichos y las paredes.

La criptococosis es la cuarta micosis sistémica frecuente en Venezuela en orden de frecuencia, llamando la aten-ción que los estados con mayor número de casos corres-ponden a los estados Zulia y Bolívar (Martínez Méndez et al., 2013). Es por ello, que deben considerarse algunas medidas de saneamiento ambiental en esta sede. 16

Por otro lado, la presencia de Pseudomonas stutzeri, bacilo no fermentador aeróbico, es ubicua del suelo, agua y raras veces ocasiona infecciones nosocomiales o adqui-

ridas en la comunidad (Bisharatet al., 2012), esta bacteria fue encontrada en las excretas de las palomas.

Aunque no se puede atribuir la adquisición de la infec-ción, por el Complejo Paracoccidiodes spp e Histoplasma capsulatum,con la permanencia de los trabajadores y es-tudiantes en la sede evaluada (p>0,05), a pesar de que la sede del Jardín Botánico reúne condiciones propicias para el desarrollo de ambos hongos. Los individuos estudia-dos viven en una región donde ambas infecciones son en-démicas y coexisten; por lo tanto, es difícil establecer, en una región endémica, el lugar específico donde ocurrió la infección. Para ello, serían necesarios estudios epidemio-lógicos de tipificación molecular, intraespecífica de cepas, que permiten comparar, con un alto grado de discrimina-ción, las cepas encontradas en los pacientes, suelo y en los animales en su entorno más cercano, para asegurar el lugar preciso de la adquisición de la infección y la cepa pa-tógena responsable, permitiendo demostrar el biotipo y genotipo de la cepa que provocó la infección.

Los hallazgos demostrados en esta investigación indi-can la necesidad de promover la búsqueda activa de in-fecciones respiratorias, por ambos hongos, en el estado Bolívar, fundamentalmente en individuos con infeccio-nes respiratorias crónicas, que no mejoran con terapia antibacteriana; debido a que ésta región reúne todas las caracterís¬ticas ambientales y geográficas, propicias para el desarrollo de hongos patógenos sistémicos; y por ello, son necesarios estudios enfocados en conocer la epide-miología del Complejo Paracoccidioides spp e Histoplas-ma capsulatum, los cuales serán de gran utilidad para que los organismos de salud desarrollen medidas de control, destinadas a reducir la incidencia de la patología micótica en referencia e iniciar programas de vigilancia epidemio-lógica y de salud, con el objeto de detectar casos precoces de la enfermedad y administrar el tratamiento adecuado.

Los hongos filamentosos identificados en Sede del Jar-dín Botánico de la UNEG de Ciudad Bolívar, son comunes en los ambientes interiores y exteriores (Sautouret al., 2009; Dubey et al., 2011; Herrera et al., 2011), excepto las levaduras del Complejo Cryptococcus spp que son fre-cuente en ambientes exteriores (Rosario et al., 2008).El aislamiento de hongos en interiores es debido a que exis-ten condiciones de temperatura, humedad óptima para su crecimiento y un sustrato adecuado y a que existen excre-mentos de aves (Colom Valiente et al., 1997; Rosario et al.,



2008), específicamente palomas en el ambiente interior de la sede.

Aspergillus, fue unos de los géneros más frecuente-mente aislados en el ambiente interior, el cual produce una alta cantidad de conidios que están bien adaptados para la diseminación aérea, siendo habitualmente inhala-das por el ser humano y otros hospedadores. La inhalación de conidios de Aspergillus spp por el ser humano no suele producir manifestaciones clínicas, pero en determinados pacientes puede asociarse con una amplia variedad de presentaciones clínicas que van desde el aspergiloma a la aspergilosis invasiva, pasando por varios tipos de cuadros alérgicos como la aspergilosis broncopulmonar alérgica, la rinitis alérgica, la sinusitis alérgica y la alveolitis alérgica extrínseca (Potón y Cabañes, 2000).La exposición a estos hongos, incluso en concentraciones altas, no suele provo-car infecciones en individuos sanos (Zaoutiset al., 2006).

Existen evidencias de asociación de ambientes hú-medos con el desarrollo de asma bronquial, alergias, neumonías por hipersensibilidad, sinusitis crónicas y exa-cerbaciones de asma (Feng et al., 2012).

No hay un nivel de los hongos ambientales que puede ser considerado como seguro. Esto depende de la concen-tración fúngica en los ambientes exteriores y de los tipos de esporas presentes en el ambiente interno. General-mente, la concentración fúngica de los ambientes inter-nos es menor que la presente en los externos (Burgeet al., 1977). Se ha propuesto que la concentración de hongos en ambientes internos por encima de 2.000 UFC/m3 pue-de ser considerada como un factor de riesgo serio para la

salud de los ocupantes (Klanova, 2000). En este estudio el máximo de UFC fue de 200 UFC por placa. Los resultados obtenidos demuestran una diversidad de géneros fúngicos en el edificio de Turismo y en la oficina de servicios gene-rales de la sede del Jardín Botánico, resultados similares a los obtenidos por otros investigadores (Medina et al., 1999; San Blas, 2005; Cermeño y Hernández, 2007-2008; Cermeño y Sandoval, 2013). El número de Unidades For-madoras de Colonias es bajo con relación a otros estudios realizados en otras instituciones del país (Medina et al., 1999).

De todos los hongos encontrados en el ambiente inter-no de la Sede del Jardín Botánico, sólo las levaduras del Complejo Cryptococcus spp representan un riesgo para la salud de los usuarios o trabajadores, el resto de los hongos son comunes en ambientes exteriores y salvo en aquellos individuos con enfermedades de base, como asma, siste-ma inmunológico comprometido (inmunocomprometi-dos) o con antecedentes de alergias, en quienes podrían exacerbarse sus síntomas.

AGRADECIMIENTOSA la Asociación de Profesores de la Universidad Nacio-

nal Experimental de Guayana.A los representantes de los Trabajadores Administrati-

vos de la Universidad Nacional Experimental de GuayanaA las Profesoras: Alba Torres y Yelitza Linares.A los estudiantes de Turismo quienes colaboraron en

el estudio.A la Dra .Julmery Cermeño y a la Licda. Irais Dimas.

Referencias bibliográficasAlbornoz MB, Albornoz R. (1971). “Estudio de la sensibilidad específica en residentes de un área endémica a la Paracoccidioidomicosis

en Venezuela”. MycopatholMycolAppl. 45:65-75.

Albornoz MB. (1990). Pruebas cutáneas en el estudio de la hipersensibilidad retardada. Boletín Informativo “Las Micosis en Venezuela”. 16: 16-20.

Barnett HL, Hunter BB. (1998). Illustrated Genera of Imperfect Fungi. APS Press, Minnesota, USA. 218 pp.

Bisharat N, Gorlachev T, Keness Y. (2012). “10-Years Hospital experience in Pseudomonas stutzeriand literature review”. The Open Infectious Diseases Journal 6:21-24.

Bonifaz A, Vázquez-González D, Perusquía-Ortiz AM. (2011). “Endemic systemic mycoses: coccidioidomycosis, histoplasmosis, paracoc-cidioidomycosis and blastomycosis”.J Dtsch Dermato lGes. 9(9):705-14.

Burge HP, Boise JR, Salomon WR, Bandera E. (1977). Fungi in libraries: an aerometric survey .Mycopathologia. 64(2): 67-72.

Calvo MA, Guarro J, Suárez G, Ramirez C. (1980). “Air-borne fungi in Barcelona city (Spain). A two-year study (1976-1978)”. Myco-pathologia. 71: 89-93.

Casadevall A, Perfect JR. (1998). Cryptococcus neoformans. Washington D.C. ASM Press.



pp. 24-35

Castañón Olivares LR, Arreguín Espinosa R, Ruiz Palacios y Santos G, López Martínez R. (2000). “Frequency of Cryptococcus species and varieties in México and their comparison with some Latin American Countries”.Rev Latinoam Microbiol. 42: 35-40.

Cermeño J, Sandoval M. (2013). “Estudio clínico epidemiológico de histoplasmosis y paracoccidioidomicosis en la Casa de las Doce Ven-tanas, sede de la Universidad Nacional Experimental de Guayana, Ciudad Bolívar, Estado Bolívar”. Copérnico 17:5-14.

Cermeño JR, Cermeño JJ, Gerardo G,Hernández I, Orellán Y, Blanco Y, et al. (2009). “Epidemiological study of paracoccidioidomycosis and histoplasmosis in a suburb of San Félix city, Bolívar state, Venezuela”.Invest. Clín. 50:213-220.

Cermeño JR, Cermeño JJ, Hernández I, Godoy G, Cermeño J, Cabello I, Orellán Y, Blanco Y, Penna S. (2005b). “Histoplasmine and para-coccidiodine epidemiological study in Upata, Bolívar state, Venezuela”. Trop Med Int Health. 10: 216-219.

Cermeño JR, Hernández I, Cabello I, Orellán Y, Cermeño JJ, Albornoz R, Padrón E, Godoy G. (2006). “Cryptococcusneoformans and Histo-plasmacapsulatum in dove's (Columbialivia) excreta in Bolívar state, Venezuela”. Rev Latinoam Microbiol. 48(1):6-9.

Cermeño JR, Hernández I, Cermeño JJE, Godoy G, Cermeño JJ, Orellán Y, et al.(2004). “Epidemiological survey of histoplasmine and paracoccidioidine skin reactivity in an agricultural area in Bolivar state, Venezuela”. Eur J Epidemiol 19:189-193.

Cermeño JR, Hernández I, Godoy G, Cabello I, Cermeño JJ, Orellán Y, et al. (2005a). “Casuística de las micosis en el Hospital Universitario “Ruiz y Páez”. Ciudad Bolívar, Venezuela, 2002”. Inves tClín. 46:37-42.

Cermeño JR, Hernández I. (2007-2008). “Hongos ambientales en la Biblioteca Central de Ciencias de la Tierra y Unidad de Cursos Bási-cos. Universidad de Oriente. Núcleo Bolívar. Estado Bolívar. Venezuela”. Bol Inf “Las Micosis en Venezuela”; 40: 13-18.

Cermeño JR. (2012). Micosis en el estado Bolívar: una revisión clínico epidemiológica. Trabajo de ascenso a Profesor Titular. Universidad de Oriente. pp 297.

Chávez-Tapia CB, Vargas-Yánez R, Rodríguez-Arellanes G, Peña-Sandoval GR, Flores-Estrada JJ, Reyes-Montes MR, et al (1998). “El mur-ciélago como reservorio y responsable de la dispersión de Histoplasmacapsulatum en la naturaleza II. Papel de los marcadores moleculares del hongo aislado de murciélagos infectados”. Rev. Inst. Nal. Enf. Resp. Mex. 11: 187-191.

Clinical and Laboratory Standards Institute. (2013). CLSI/NCCLS. Document M100-S23. Performance Standards for Antimicrobial Sus-ceptibility Testing. Twenty-Third Informational Supplement. CLSI, Wayne, Pa.

Colom Valiente MF, Alberdi M, Meseguer I, Torres-Rodríguez JM. (1997). “Aislamiento de Cryptococcusneoformansen muestras de me-dio ambiente de Alicante”. Rev. Iberoam. Micol. 14: 63-64.

Colombo AL, Tobón A, Restrepo A, Queiroz-Telles F, Nucci M. (2011). “Epidemiology of endemic systemic fungal infections in Latin America”.Med Mycol. 49(8):785-98.

Da Silva Lacaz C. “Micología Médica. (1983).Revisión histórica. Importancia y nuevas perspectivas”. AnBrasDermatol. 58: 33-36.

De Albornoz M. (1996). Temas de Micología Médica. Editor: María C. B de Albornoz. Litografía Tipografía ELALCA SRL. Caracas-Vene-zuela. 385 pp.

Dubey S, Lanjewar S, Sahu M, Pandey K, Kutti U. (2011). “The Monitoring of Filamentous Fungi in the Indoor, Air Quality and Health”. J Phytol. 3-14.

Fava S, Fava Netto C. (1998). “Epidemiologic surveys of histoplasmin and paracoccidioidin sensitivity in Brazil”. Rev Inst Med Trop Sao Paulo. 40: 155-164.

Feng M, Yang B, Zhuang YJ, Yanagi U, Cheng XJ. (2012). “A study on indoor environment contaminants related to dust mite in dwellings of allergic asthma patients and of healthy subjects”.Biosci Trends. 6(1):7-9.

Herrera AB, Rodríguez LA, Niederbacher J. (2011). “Biological pollution and its relationship with respiratory symptoms indicative of asthma, Bucaramanga, Colombia”.Biomedica. 31(3):357-71.

Hoog G, Guarro J, Gene J, Figueras M. (2000). Atlas of clinicalfugi. 2daedition, Universitat Rovira. Barcelona, España. 1126 pp.

Klanova K. (2000). “The concentrations of mixed populations of fungi in indoor air: rooms with and without mould problems, rooms with and without health complaints”. Cent Eur J Public Health 8. 59-61.

Kwong–Chung K, Bennett JE. (1995). Medical Mycology. Philadelphia, Lea and Febiger, 1992. Larone DH. Medicaly important fungi. A guide to identification. 3 ed. Washington DC, ASM Press,

Lennette EH, Balows A, Hausler WJ Jr, Shadomy HJ, eds. (1996). Manual of clinical microbiology. 4th ed. New York: Elsevier.

Mangiaterra M, Alonso J, Galvan M, Giusiano G, Gorodner J. (1996). “Histoplasmin and paracoccidioidin skin reactivity in infantile po-pulation of northern Argentina (1)”.Rev Inst Med Trop Sao Paulo. 38(5):349-53.



Martínez Méndez D, Hernández Valles R, Alvarado P, Mendoza M. (2013).”Mycoses in Venezuela: Working Groups in Mycology reported cases (1984-2010)”.Rev IberoamMicol. 30(1):39-46.

Medina L, Thouzzo A, Herrera J, Perozo Y, Gonzalez L. (1999). “Estudio de hongos en Bibliotecas de la Universidad de Carabobo-Valen-cia. CDH. Consejo de Desarrollo Científico y Humanístico. Valencia Venezuela”. 3 (1). Disponible: http://servicio.cid.uc.edu.ve/fcs/vol3n1/3estu.pdf#search='Hongos%20ambientales%20Bibliotecas

Mirt JA, Mirt SA. (1986). “Estudio de la Paracoccidioidomicosis en el estado Falcón. Venezuela. Casos clínicos y encuesta epidemiológica con paracoccidioidina en un área endémica”. Boletín Informativo “Las Micosis en Venezuela” 4:16-17.

Mota J, Pavillard A, Pérez R, Pérez-Ybarra L, Luis-León J. (2009). “Prevalencia de la infección por Paracoccidioidesbrasiliensise Histoplas-macapsulatum en agricultores del “Caserío La Entrada”. Estado Aragua. Venezuela”.Salud Trab. 17(1): 33-47.

Negroni R. (1984). “Epidemiología de Histoplasmosis”. RevIberoam Micol.1: 93-98.

Ossa O. (2012).” Jardín Botánico del Orinoco, reserve genética de la flora guayanesa. AVM. Regiones”. Disponible: http://www.avn.info.ve/contenido/jard%C3%ADn-bot%C3%A1nico-del-orinoco-reserva-gen%C3%A9tica-flora-guayanesa. [05 de Julio 2013].

Pal M. (1997).” First report of isolation of Cryptococcus neoformansvar. neoformansfrom avian excreta in Kathmandu, Nepal”. RevIbe-roamMicol. 14: 181-183.

Pitt JI, Hocking AD. (1997). Fungi and Food spoilage. Second Edition, Blackie Academic and Profesional. London, UK. 593 p.

Poncio-Mendes R, Negroni RR, Bonifaz A, Pappagianis D. (2000). “New aspects of some endemic mycoses”. Med Mycol. 38:237- 241.

Potón J, Cabañes FJ. (2000). “Aspergillus y Aspergilosis”. Rev IberoamMicol. 17 (Suppl): 77-78.

Prado M, Silva MB, Laurenti R, Travassos LR, Taborda CP. (2009). “Mortality due to systemic mycoses as a primary cause of death or in association with AIDS in Brazil: a review from 1996 to 2006”. Mem. Inst. Oswaldo Cruz.104, 513–521.

Rosario I, Acosta B, Colom F. (2008). “La paloma y otras aves como reservorio de Cryptococcus spp”. RevIberoamMicol. 25: S13-S18.

San Blas G. Análisis de carga fúngica en la Biblioteca Marcel Roche (IVIC). 2005.[En línea]. Disponible:http://biblioteca.ivic.ve/servicios-BMR/Informe/InformeOficial-Oct24-05-Web.pdf.[05 de Enero 2014].

Sautour M, Sixt N, DalleF,L’OllivierC,Fourquenet V, Calinon C, et al. (2009). “Profiles and seasonal distribution of airborne fungi in indoor and outdoor environments at a French hospital”. Science of the Total Environment. 407:3766-3771.

Silva-Vergara M, Martínez R. (1998). “Inquérito epidemiológico comparacoccidoidina e histoplasminaem área agrícola de café emIbiá, Minas Gerais, Brasil”. RevIberoamMicol. 15(4): 294-297.

Tavares M, Apreciada de Resende M. (1996). “Epidemiologic skin test survey of sensitivity to paracoccidiodin, histoplasmin and sporo-trichin among gold mine workers of Morro Velho Mining, Brazil”. Mycopathologia 135: 89-98.

Taylor ML, Chávez-Tapia CB, Reyes-Montes MR. (2000). “Molecular typing of Histoplasmacapsulatumisolated from infected bats, cap-tured in Mexico”.Fungal Genet Biol. 30(3):207-12.

UNEG. La institución. Sedes. (2010). Disponible: http://www.uneg.edu.ve/htmls/?p=institucion/sedes.html. [05 de Julio 2013].

Zaoutis TE, Heydon K, Chu JH, Walsh TJ, Steinbach WJ. (2006). “Epidemiology, outcomes, and costs of invasive aspergillosis in immuno-compromised children in the United States, 2000”. Pediatrics.117:711-716

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