INFORME DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA N°5

ENZIMAS

Carlos andres serrano alba cod.2010296195

Diego hernan cabrera macias cod.20112107269

Cristian

PRESENTADO A.

ING. EDUARDO PASTRANA

UNIVERSIDAD SURCOLOMBIANA

FACULTAD DE INGENIERIA

INGENIERIA AGRICOLA

NEIVA - HUILA

2012

INTRODUCCION

Las enzimas se hallan en todos los seres vivos y son fragmentos esenciales en su funcionamiento. A partir del panorama bioquímico son proteínas que actúan como aceleradores de las reacciones químicas, de síntesis y degradación de compuestos. Algunas de las características más sobresalientes de las enzimas es su elevada especificidad. Lo cual dice que cada enzima se une a un único tipo de sustancia, el sustrato, sobre el que actúa.

Las enzimas poseen muchos estudios en diversos tipos de industrias, entre las que se subraya la alimenticia. En algunos casos, como la obtención de cerveza, o la producción de yogur, el proceso de fermentación se debe a las enzimas presentes en los microorganismos que entran en el proceso de producción. Otros procesos de producción de alimentos, se obtienen mediante la acción de las enzimas aisladas, sin incluir a los microorganismos que las producen.

Hoy en día, la genética contribuye a la biosíntesis de enzimas de gran pureza, que aportan mayor calidad al producto final, y mejoran los procesos de producción de alimentos. Los adelantos que se están ejecutando hoy por hoy en el área permiten augurar el desarrollo cada vez mayor del uso de enzimas en la industria alimenticia.

OBJETIVOS

1. Observar la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y vegetales.

2. Comprobar la acción de la temperatura sobre la actividad de las enzimas.

3. Comprobar la acción hidrolítica de la amilasa.

1. MARCO TEORICO

1.1. ENZIMAS

- Biocatalizadores. Proteínas globulares que activan las reacciones bioquímicas. Cada reacción que se produce en el organismo es catalizada por un enzima.

- Pueden ser holo- o heteroproteínas. En este último caso, la parte formada por aminoácidos se designa Apoenzima (no activo), el grupo prostético se designa cofactor y la unión de ambos es el Holoenzima (activo).

- El reactivo sobre los cuales actúan los enzimas se conocen como sustratos.

1.1.1 PROPIEDADES

- Son de gran poder catalítico: son muy activas. Una chica cantidad de enzima es capaz de catalizar la transformación de una gran cuantía de sustrato. Además aceleran las reacciones.

- No se gastan ni alteran durante la catálisis: son reutilizables.

- Altamente específicos: presentan especificidad de sustrato y de acción. Como el resto de las proteínas son además característicos de cada especie.

1.1.2. CARACTERÍSTICAS DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

- Someten la energía de activación. Permiten que las reacciones bioquímicas transcurran rápidamente y a bajas temperaturas (compatible con el mantenimiento de estructuras complejas).

- Poseen un centro activo. Zona de la molécula donde se une el sustrato. Al unirse enzima y sustrato forman el complejo enzima-sustrato que luego se separará en enzima y producto.

1.1.3 FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

Temperatura

- La velocidad de las reacciones catalizadas enzimáticamente aumenta al crecer la temperatura hasta alcanzar su máxima actividad para una temperatura conocida como temperatura óptima. Por encima de esa temperatura el enzima se hace inestable y se desnaturaliza, perdiendo su actividad.

PH- Cada enzima tiene un pH óptimo para el cual la actividad es máxima.

Inhibidores

- Los inhibidores son sustancias que paralizan o reducen la actividad de un enzima. Pueden ser:

Irreversibles: Unión covalente. Algunos venenos inhiben así a ciertos enzimas.

Reversibles: No se altera el enzima, sólo se impide su acción. Tienen interés en la regulación de la actividad enzimática.

Inhibición competitiva: El inhibidor se une al centro activo. La inhibición dependerá de las concentraciones relativas de enzima e inhibidor: si [S]>[I] el enzima estará activo; si [I]>[S] estará inactivo)

Inhibición no competitiva: El inhibidor se une a un lugar distinto del centro activo (enzimas alostéricos).

Regulación de la actividad enzimática

- Dado su gran dominio catalítico es significativo regular la actividad de los enzimas para evitar su acción cuando no son necesarios los productos que generan. Además, como las reacciones no catalizadas son muy tardas, la regulación de la actividad enzimática es el mejor modo de regular el metabolismo.

- El primordial mecanismo de regulación de la acción enzimática es la retroinhibición. Reside en que el producto final de una rumbo metabólico el cual actúa inhibiendo al primer enzima que interviene en la misma, acorralando el proceso completo cuando la concentración del producto es elevada. En las rutas ramificadas el producto final de cada ramificación actúa inhibiendo el primer enzima que interviene en dicha ramificación.

1.1.4 FUENTES DE OBTENCIÓN DE ENZIMAS

Las fuentes principales de producción de enzimas para empleo industrial son:

Animales: La industria empacadora de carnes es la fuente principal de las enzimas derivada del páncreas, estómago e hígado de los animales, tales como la tripsina, lipasas y cuajos; las Vegetales: La manufactura de la malta de cebada es la fuente principal de enzimas de cereales. Las enzimas proteolíticas (que degradan proteínas) tales como la papaína y la bromelina e obtienen de la papaya y del ananá, respectivamente y las Microbianas: primariamente se extraen de bacterias, hongos y levaduras que se desarrollan en la industria de la fermentación. La mejoría de la obtención de enzimas microbianas es que los microorganismos se reproducen a ritmo acelerado, son fáciles de manipular genéticamente, crecen

en un amplio rango de condiciones ambientales y tienen una gran variedad de vías metabólicas, haciendo que las enzimas obtenidas sean más económicas.

1.2 LA CATALAZA

Es una enzima que la podemos encontrar en muchos organismos vivos, y  cataliza la reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno.

En la industria, s se utiliza la enzima catalasa, para diferentes fines. Por ejemplo, se usa en los textiles, para eliminar residuos de peróxido de hidrógeno.

La catalasa cumple una función protectora contra determinados microorganismos patógenos, sobre todo anaerobios. Las bacterias anaerobias, mueren al entrar en contacto con oxígeno, es por esta razón que el oxígeno producido por esta enzima tiene efecto bactericida sobre estos microorganismos. Tanto es así, que la ausencia de dicha enzima por defectos genéticos, llamada acatalasemia o enfermedad de Takahara, es el origen importantes infecciones en la mucosa bucal, pudiendo llegar a causar la pérdida de dientes y graves lesiones en los maxilares y tejidos blandos de la cavidad bucal.

2. PROCEDIMIENTO

1. Reconocimiento de la Catalasa

1. Colocar en un tubo de ensayo unos trocitos de hígado y tomate.

2. Añadir 1-2 c.c. de agua oxigenada.

3. Se observará un intenso burbujeo debido al desprendimiento de oxígeno.

2. Desnaturalización de la catalasa

1. Colocar en un tubo de ensayo varios trocitos de hígado.

2. Añadir agua para hervir la muestra. Hervir durante unos minutos.

3. Después de este tiempo, retirar el agua sobrante.

4. Añadir el agua oxigenada.

5. Observar el resultado.

3. Hidrólisis de la catalasa

1. Poner en una gradilla un tubo de ensayo.

2. Añadir en cada tubo 1-2 mililitros de almidón.

3. Añadir una pequeña cantidad de saliva.

• En el tubo 1, haz la Reacción de Fehling.• En el tubo 2, realiza la Reacción de Lugol. • Los resultados son los esperados para un polisacárido como el almidón.

3. RESULTADOS Y ANÁLISIS DE LA EXPERIENCIAS

EXPERIENCIA No.1

El agua oxigenada se transformará en agua y oxígeno. El desprendimiento de oxígeno se pone de manifiesto como un intenso burbujeo. Para comprobar que se trata de gas oxígeno, es posible realizar una prueba colocando una astilla ardiente (que debería “avivarse” en presencia de este gas).

Se puede repetir esta práctica con muestras de distintos tejidos animales y vegetales. Puede ser interesante evaluar la mayor o menor actividad, según el tejido con el que se realice la experiencia.

FOTO1 Y 2: TROZO DE HÍGADO- DESPRENDIMIENTO DE BURBUJAS

EXPERIENCIA No.2

Si se eleva la temperatura en la muestra se obtubo una reaccion negativa de efervecencia, y esto se debe a la perdida de su funcion enzimatica, como a su estructura original, y al proceso de desnaturalizacion.

Todas las enzimas son proteínas. Por lo tanto, todas las enzimas sufren desnaturalizarción frente al calor. Lo que dice es que cuando la temperatura es muy elevada, la enzima pierde su estructura terciaria, por lo tanto su sitio activo también se desnaturaliza, y ya no puede cumplir su función. Este hecho se puede demostrar repitiendo el experimento anterior, pero cuando herbé previamente los

trocitos de hígado. Cuando añadimos el agua oxigenada, no se observa el burbujeo.

FOTO 3 Y 4: PEDAZO DE HÍGADO Y TOMATE. ELEVANDO LA TEMPERATURA

EXPERIENCIA No.3Baño de maría 30 min

Dentro de los instrucciones seguidas en el laboratorio se utiliza un ultimo reactivo que es normalmente usado para identificar azucares reductores. Dicho reactivo es el Felingh. Para efectos positivos de experimentación en el laboratorio se utilizaron dos clases de reactivos de felingh: Felingh – A y Felingh –B.El inconveniente es que la reacción debió haber estado en color verde y tomo fue un color azul.

FOTO5: REACCIÓN CON FELINGH A Y B CON SALIVA.

CONCLUSIONES

Las enzimas son catalizadores biológicos muy determinados los cuales actúan para un sustrato determinado dependiendo del tipo de enzima.

Se observó que hay presencia de enzimas en unos órganos que en otros, tal es el caso de la catalasa que se halla en mayor proporción en el hígado que en el tomate.

Se evidenció que las enzimas se hallan presentes en los organismos vivos y auxilian a acrecentar la velocidad de las reacciones fisiológicas.

Dentro del proceso de hidrólisis de catalasa no se observó la reacción esperada ya que esta debió quedar de color verde y resulto quedando de color azul, no se sabe si es algunos de los felingh que afecto el proceso

BIBLIOGRAFIA

http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002353.htmhttp://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz1.htmhttp://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz1.htm#ahttp://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz1.htm#phttp://genesis.uag.mx/edmedia/material/quimicaII/enzimas.cfm