UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA CENTRO UNIVERSITARIO METROPOLITANO FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS AREA DE INMUNOLOGÍA Y MICROBIOLOGÍA MÉDICA TERCER AÑO 2014

ACTIVIDAD PRACTICA No. 2 FAGOCITOSIS

Dr. Mario Roberto Pinto

Introducción El sistema inmune nos defiende especialmente cuando somos atacados por microorganismos (virus, bacterias, hongos y protrozoos) del medio ambiente, ya sea porque sufrió una herida en la piel o penetraron a través de la mucosa. El sistema inmune según su función, se divide en: inmunidad innata e inmunidad adquirida. La inmunidad innata tiene células y moléculas y es la primera línea de defensa con la que se encuentran dichos microorganismo. Entre sus células están los fagocitos polimorfonucleares neutrófilos y los monocitos-macrófagos), las células NK (asesinos naturales), mastocitos, células dendríticas, fibroblastos y células endoteliales y entre sus moléculas: las proteínas de fase aguda de la inflamación como la proteína “C” reactiva y la proteína “P” amiloide, otras como la lectina fijadora de la manosa, la proteína fijadora de los lipopolisacáridos y proteínas de COMPLEMENTO. Ellas son encargadas de neutralizar, eliminar y reparar el daño inicial ocasionado, pero si el microorganismo es muy patógeno (capacidad de producir daño), porque produce toxinas o cápsulas difíciles de fagocitar. Entra luego en función el sistema inmune adquirido que tiene sus células: los linfocitos T y B, el primero es la célula fundamental de la inmunidad celular y las moléculas solubles que producen son las linfoquinas (citoquinas) y los linfocitos B que son la base principal de la inmunidad humoral (anticuerpos), que sufren una transformación final a célula plasmática productora de anticuerpos con la cooperación de las células T.

Las principales células de la Inmunidad Innata son los fagocitos: los polimorfonucleares neutrófilos y los monocitos. Macrófagos que nos protegen especialmente cuando se produce una infección por microorganismo patógeno con bacterias y hongos.

Objetivo de la práctica:El alumno deberá ser capaz: A. Identificar morfológicamente las siguientes células sanguíneas en un frote periférico con coloración de Wright: 1) Leucocitos granulosos, polimorfonucleares, neutrófilos, eosinófilos y basófilos. 2) Leucocitos no granulosos (mononucleares: linfocitos y monocitos). 3) Eritrocitos.

B. Identificar en el proceso de la fagocitosis. 1) Las principales fases de reconocimiento: Ingestión y destrucción de microorganismos (bacterias y hongos) 2) Evaluar la fase de la fagocitosis de la degranulación en la vacuola digestiva y producción de oxidantes (H2O2 y anión superóxido)

NORMAS DE BIOSEGURIDAD Traer bata blanca MATERIALES Y EQUIPO QUE PROPORCIONA EL LABORATORIO - Frotes sanguíneos con coloración Wright - Frotes con microorganismos sanguíneos con Nitroazul de Tetrazolium - Microscopios de luz

FAGOCITOSIS Para observar las distintas fases de la fagocitosis se utilizarán portaobjetos con frotes de sangre que se incuban con bacterias y hongos obtenidos de un cultivo de Staphylococcus aureus y Candida albicans. Principales fases que se pueden observar: a) Reconocimiento b) Emisión de pseudópodos c) Formación de vacuola digestiva (fagosoma) d) Degranulación: liberación de enzimas proteolíticas en la vacuola digestiva y producción de oxidantes (anión superóxido H2O2) (Nitrozul de Tetrazolium (fagolisosoma)

TÉCNICA DE NITROZUL DE TETRAZOLIUM (NBT) Esta técnica de laboratorio evalúa la capacidad de los fagocitos para producir oxidantes, se usa para el diagnóstico de la inmunodeficiencia, enfermedad granulomatosa crónica. Principio El artrazán es una sal de color amarillento que cuando se une al peróxido de hidrógeno, se oxida transformándose en la sal tetrazolio que es de color azul.

Interpretación: El 95% de los fagocitos tienen coloración azul en su citoplasma. RESULTADOS DIBUJOS CONCLUSIONES BIBLIOGRAFÍA 1. Harris J, Michel WI, Westra S, Kradin R. Case 21-2008: An 11-month-old Boy with fever and pulmonary infiltrates. N. Engl. J. Med 2008. 359: 178-87. 2. Male D. Brostoff J. Roth D. Roitt I. Inmunología.8a. Ed. 2013, Editorial Elsevier, España, S.A. Cap. 7. Pags: 125-141, y Cap.16, pag. 299-309.

LECTURA RECOMENDADA - Leckstrom-Himes J.A. Gallin J. Immunodeficiency diseases caused by defects in phagocytes. N. Engl. J. Med 2000. 343: 1703.