La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros...

download La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein, relación con el desarrollo testicular

of 22

Transcript of La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros...

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    1/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    1

    REDVET - Revista electrónica de Veterinaria - ISSN 1695-7504

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3.Calidad de la producción seminal en futuros

    sementales Holstein, relación con el desarrollotesticular - The bovine sires selection in Cuba. 3. Qualityof the seminal production, relationship whit the testiculardevelopment in Holstein future sires

    Dr. Tamayo Torres, ManuelProfesor de Andrología y Biotecnología de la ReproducciónAnimal. Departamento de Clínica, Facultad de MedicinaVeterinaria, Universidad Agraria de La Habana. AutopistaNacional Km 231/2,  San José de las Lajas, Mayabeque,Cuba. E-mail: [email protected] 

    Resumen

    Con el objetivo de evaluar la calidad seminal y su relación con eldesarrollo testicular en futuros sementales (FS) Holstein para suempleo en la selección como reproductores de los centros deinseminación artificial de Cuba; de 390 FS investigados, se evaluaron

    120 de 8 a 12 meses de edad para este trabajo. Los animales sesometieron a un régimen de estabulación permanente en la estacióngenética de cría y selección. El sistema de alimentación empleado fuecontrodado individualmente mediante el consumo de la ración deacuerdo con la edad del animal. Las medidas biométricas fueron elíndice de volumen testicular y la circunferencia escrotal. Serealizaron extracciones de semen semanalmente desde los 8 a los 12meses de edad mediante vagina artificial. La evaluacón seminalincluyó análisis macroscópicos y microscópicos de los eyaculados.Para el procesamiento estadísticos de los datos se empleó un ModeloLineal General del SAS, controlando las variables investigadas y losefectos edad del FS, época del año y efecto individual; se efectuaronanálisis de varianza, correlación y regresión. El volumen seminal seincrementó de 2,4±1,2 a 3,6±1,1 mL, la motilidad de 16,5±10,3 a64,0±16,9%, la concentración de 68,7±32,1 a 701,5±243,0 x 106 Spz/mL y las anomalías morfológicas disminuyeron de 40,5±10,3 a18,4±6,1%. Se concluye que la calidad seminal se incrementainfluenciada por el aumento de edad de los FS con efecto significativoindividual, resulta más favorable la época poco lluviosa en Cubanoviembre-abril y existen valores de correlación medios-altos entrela calidad seminal y el desarrollo testicular.

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    2/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    2

    Palabras claves: Calidad seminal | circunferencia escrotal |futurossementales| Holstein

    Abstract

    One hundred twenty Holstein future sires selected from a total of 390bulls ranged from 8 to 12 months of age were evaluated in Havana inthis research. The animals were kept under a permanent housingsystem in the genetic station for breeding and selection. The feedingsystem employed was controlled. Biometric testicular traits were:index of testicular volume and scrotal circumference. Semen wascollected weekly by artificial vagina since 8 to 12 months of age. Theseminal evaluation including: macroscopic and microscopic analysisof the ejaculate. To process the data a General Lineal Model from SAS

    was employed, controlling the effects of age of the future sire, seasonof year, and individual effect over all the evaluated variables.Variance, correlation and regression analyses were made over thetesticular and seminal variables. The seminal volume increased from2,4±1,2 to 3,6±1,1 mL, the motility from 16,5±10,3 to 64,0±16,9%,the concentration from 68,7±32,1 to 701,5±243,0 x 106 Spz/mL, andthe abnormal sperm morphology decreased from 40,5±10,3 to18,4±6,1%. In conclusion, the seminal quality improve influenced bythe increase of the age of the future sire with significant individualeffect, is more favorable  the  little rainy season in Cuba from

    November-April, and exist mean-high values of correlation intoseminal quality and testicular development.

    Keywords: Future sires | Holstein | seminal quality | scrotalcircumference

    INTRODUCCIÓN 

    La técnica más importante en la reproducción asistida, la cual haproducido un cambio significativo en los niveles de eficiencia, ha sidola inseminación artificial (IA). La IA es la tecnología que más harevolucionado la producción animal; entre sus ventajas se confirmaque con un número muy reducido de toros se insemina a unacantidad elevadísima de vacas, pues con un eyaculado de 6 000millones de espermatozoides se pueden inseminar 300 hembrasbovinas. Pero ese alto impacto del toro en los resultadosreproductivos y productivos de nuestros rebaños, tiene como premisala intensidad de selección del semental sobre la base de susuperioridad genética [22]. 

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    3/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    3

    En la IA para la mejora genética de los animales de interészootécnico, los fallos en la selección de los sementales tendrán comoconsecuencia importante pérdidas económicas. Así, el conocimientode la capacidad fecundante de cada toro se convierte en uno de losprincipales objetivos en la producción de semen bovino [16].

    La evaluación de la calidad del semen debe ser el fundamento básicopara conocer la capacidad potencial del toro reproductor; ese análisisnos posibilita no sólo el examen de las características seminalessujetas a la influencia de diversos factores, sino también poseer unaexpresión más exacta de la fisiología o alteraciones del aparatoreproductor masculino, particularmente en el proceso de laespermatogénesis [33]. Así Ruedas et al.  [30] enfatizan la importanciade la calidad seminal en diferentes razas bovinas.

    La nutrición, temperaturas ambientales extremas y las enfermedadespueden reducir la calidad seminal, aunque esta puede variar con eltiempo. En la motilidad es fundamental el porcentaje deespermatozoides con movimiento rectilíneo progresivo, mientras queen la morfología se tiene en cuenta aquellos espermatozoides queposeen forma y estructura normales y los que presentananormalidades primarias y secundarias. La selección de toros conmás del 80% de espermatozoides normales puede aumentar las tasasde preñez del rebaño [25]. 

    El examen andrológico del semental se realiza con el propósito dedetectar problemas reproductivos, observar las cualidades físicas deleyaculado e identificar la cantidad de anormalidades presentes; en elanálisis del semen se valoran las características físicas, motilidad yconteo del número de células espermáticas en cámara de Neubauer,luego se realiza una tinción para determinar las anormalidadesmorfológicas presentes en dichas células [24]. Este examen le permiteal ganadero conocer el estado reproductivo real de sus toros.

    En los futuros sementales (FS) de IA siempre es conveniente la

    caracterización de las variables espermáticas en cada uno de losmeses de edad a partir del arribo a la pubertad, pues ello permitiráestablecer los indicadores de normalidad, hacer un pronóstico de losFS que no tienen aptitudes como reproductores e incluir estosindicadores dentro de los parámetros para la selección [33].

    En la calidad seminal se debe analizar la concentración, motilidad,características físicas, forma de los espermatozoides y el porcentajevivo y muerto. La calidad seminal es uno de los análisis másempleados en la clasificación de los machos para el servicio de IA,gracias a lo cual se puede conformar una opinión del potencial defertilidad del toro en ese momento. Existe una correlación directaentre el valor fecundante de los espermatozoides considerados

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    4/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    4

    normales y la morfología de los mismos,  lo cual permite destacar laimportancia del espermiograma [12].

    Muchos investigadores están tratando de diseñar el "análisis seminalideal", que valore y prediga la fertilidad en una muestra de semen. El

    análisis espermático ideal sería aquel que de forma sencilla y eficazpermita predecir la capacidad fecundante de un eyaculado, pero nose ha conseguido un método de evaluación seminal in vitro que seacapaz de predecir de forma segura la capacidad fecundante. Sinembargo, la valoración in vitro de la calidad del semen es muyimportante en la valoración andrológica de los sementales [16].

    Duarte  [11] explica la importancia de los Programas de MejoramientoAnimal utilizando el procedimiento de evaluación del Modelo Animalpara resumir toda la información de producción disponible del

    mejoramiento de hatos lecheros, como método reconocido de evaluartoros en su habilidad predicha de transmisión (PTA).

    En macho Holstein joven se puede combinar la información promediode padres del animal, con la información de pruebas de marcadorADN simultáneamente (Bovine SNP 50 BeadChip) para obtener unpromedio de las habilidades de transmisión - PTA genómico - con unaconfiabilidad de 60-70%, lo cual es mejor que la confiabilidad por elpromedio de padres (30-40%). Para un ternero, la confiabilidad de suPTA genómico es el equivalente al que se obtendría midiendo el

    desempeño de aproximadamente una docena de sus hijas[42]

    .

    El objetivo de esta investigación fue evaluar las variables de lacalidad seminal y su relación con el desarrollo testicular en futurossementales Holstein para su empleo en la selección comoreproductores de los centros de inseminación artificial de Cuba.

    MATERIALES Y MÉTODOS

    Características de los animales, manejo y alimentación

    En La Habana, se evaluaron en este trabajo 120 futuros sementales(FS) Holstein para IA de 8 a 12 meses de edad, pertenecientes a uncentro genético de cría y selección de sementales (toril). Estosanimales permanecieron en los toriles sometidos a un régimen deestabulación permanente en boxs individuales con cama de aserrín,desde los 11 días de nacidos hasta los 12 meses de edad, y elsistema de alimentación se realizó sobre la base de dos dosis diariascon 7 litros de leche hasta los 7 meses de edad; alimentosconcentrados desde 0,9 hasta 7,3 kg/animal/día; forraje desde 1,1Kg hasta 20 kg/animal/día y heno desde 0,8 hasta 7,0 kg/animal/día,incrementándose en todos los casos progresivamente con el aumentode edad hasta los 12 meses.

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    5/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    5

    Variables investigadas y metodología

    El largo, ancho y grueso testicular se obtuvieron con el testímetro opie de Rey, y sus valores se utilizaron para calcular el índice devolumen testicular (IVT).

    La circunferencia escrotal (CE) – se midió colocando la cinta métricaen la anchura máxima de ambos testículo, determinando superímetro.

    Previo entrenamiento de los FS, se estableció un programa deextracción de semen semanalmente desde los 8 a los 12 meses deedad, mediante el empleo de la vagina artificial. Los eyaculadoscolectados fueron analizados en un pequeño laboratorio instalado enla propia empresa genética promotora de sementales y en el

    Laboratorio de Bioquímica y Andrología del Centro Nacional deSanidad Agropecuaria (CENSA).

    Los análisis de las variables de la calidad espermática de los FSfueron: volumen del eyaculado, medido en el propio colectorgraduado en mL; motilidad masal y densidad subjetiva, por latécnica de la gota colgante; concentración por valoración en cámarade Neubauer (hemocitómetro); porcentaje de espermatozoides vivos,mediante el método de Blom y análisis morfológico o espermiogramautilizando la tinción de Giemsa para observar las patologías

    espermáticas totales, por segmentos de los espermatozoides y lasgotas citoplasmáticas (gotas).

    Modelo matemático

    Los análisis de las variables espermáticas y los efectos evaluados serealizaron mediante un Modelo Lineal General (MLG), aplicando elsiguiente modelo matemático:

    Yijkl = m + Ei + P j + Sk + eijkl; donde:

    Yijkl = Observación correspondiente a las variables seminales.

    m = Media general.

    Ei = Efecto de la edad del FS a la evaluación seminal (i= 8...12meses)

    P j = Efecto de la época en que se realizó la evaluación espermática(j= 1...2). Época 1: seca o poco lluviosa de noviembre-abril y

    época 2: lluviosa de mayo-octubre.

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    6/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    6

    Sk = Efecto individual (k= 1...120)

    eijkl= Efecto del error aleatorio.

    Análisis estadísticosLos datos se procesaron por el SAS  [32]  con un MLG, se efectuaronanálisis de varianza (ANOVA),  se realizaron análisis de correlaciónentre las variables volumen, motilidad, densidad, concentración,vivos, patologías espermáticas y gotas citoplasmáticas y entre estas,el IVT y la CE a los 9 y 12 meses de edad. Y se hicieron análisis deregresión entre las patologías totales a los 12 meses de edad enfunción de los valores alcanzados a los 9 meses.

    RESULTADOS

    El IVT mantuvo un incremento progresivo acorde con la edad, sindiferencia significativa entre el testículo izquierdo y derecho. Lascifras oscilaron entre 145,5 ± 27,0 cm3 a los 8 meses y 357,0 ± 50,3cm3 a los 12 meses de edad.

    En la Figura 1 se puede observar los valores de la CE, donde seprodujo un incremento lineal (R2 = 0, 98; p

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    7/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    7

    0

    0,5

    1

    1,5

    2

    2,5

    3

    3,5

    4

    8 9 10 11 12

    2,42,9   3,1   3,0

    3,6

    mL

    Edad (meses)  Figura 2. Volumen seminal en futuros sementales

    La Mot fue influenciada (p

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    8/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    8

    Tabla 1. Resultados medios y por épocas del año de la calidadseminal en futuros sementales

    Época Volumen Motilidad Densidad Vivos Concentración Patologías Gotas

    Lluvia 3,1±1,2ª 44,0±17,3ª 40,6±18,0ª 50,8±16,4ª 333,0±106,1ª 25,7±10,4ª 11,0±5,1ª 

    Seca 3,2±1,0ª 50,6±15,5b  50,6±14,5b 54,6±15,0b 471,9±103,3b  24,5±8,9b  10,2±4,1a

      _X ± DE 3,2±1,0 47,3±16,6 45,6±16,1 52,7±15,4 403,5±96,0 25,1±9,7 10,6±-4,5

    Letras distintas en la misma columna difieren entre sí p

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    9/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    9

    40,5

    31,327,9

    23,1

    18,4

    24,1

    16,413,9

    7,54,7

    0

    5

    10

    15

    20

    2530

    35

    40

    45

    8 9 10 11 12

    %

    Edad (meses)

     Anomalias

    Gotas Citoplasm.

    Figura 5. Anomalías morfológicas totales y gotas

    El espermiograma refleja una disminución de las anomalíasmorfológicas espermáticas (Tabla 2 y Figura 5) de 40,5 ± 10,3 a 18,4± 6,1% entre el octavo y duodécimo mes de edad de los FS,influenciadas por la edad y épocas del año (p

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    10/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    10

    Tabla 4. Correlaciones entre las variables seminales a los 9meses de edad en la época de seca

    VariablesMotilidad

    Densidad

    Concent. VivosPatologías

    Gotas

    Volumen NS NS NS NS NS NSMotilidad 0,72b  0,72b  0,91b  -0,65b  -0,67b 

    Densidad 0,92b  0,64b  -0,53a  -0,56b 

    Concent. 0,69b -0,51a  -0,51a 

    Vivos -0,63b  -0,62b 

    Patologías 0,87b 

    a (p

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    11/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    11

    En el análisis de regresión de las alteraciones espermáticas a los 12meses de edad en función de los resultados de los 9 meses, elcoeficiente de determinación fue de R2=0,82 (p

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    12/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    12

    toma de decisión. La calidad seminal está relacionada con la CE, deahí que esta variable debe ser considerada en programas de selecciónde toretes sobre la base de su fertilidad potencial. López plantea quela CE es una herramienta vital en la selección de sementales [19]. 

    Dietas altamente energéticas con adecuada proteína, vitaminas yminerales traen como resultado una CE mayor, sin embargo, parte deese incremento en el tamaño testicular es de grasa escrotal, por lotanto, existen indicaciones sobre el efecto de la nutrición en elternero, la edad a la pubertad y el tamaño testicular [6]. También hayque ser cuidadoso en el efecto de la reducción en la nutrición delternero, pues ella interviene en la secreción de gonadotrofina, y seconoce que la FSH es un medio para manejar la proliferación de las

    células de Sertoli en animales prepúberes.

    Barth et al. [5] indicaron la importancia de la calidad seminal para elestudio de efectos espermáticos. Los valores del volumen seminal enla presente investigación se consideran normales, pues aumentaronde 2,4 ± 1,2 a 3,6 ± 1,1 mL en el período de 8-12 meses de edad delos FS. El hecho de que no se evidenciaran efectos significativos de laedad y épocas del año en el volumen, presumiblemente está asociadoa que este indicador es altamente variable entre los eyaculados de un

    mismo semental y entre diferentes toros, lo cual pudiera explicar lano manifestación de ambos efectos desde el punto de vista delanálisis estadístico. El volumen debe continuar en ascenso (p

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    13/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    13

    investigación los resultados fueron de 3,1 ± 1,2 en la estación delluvia y 3,2 ± 1,0 mL en la seca, o sea, similares en la seca ysuperiores a las dos restantes épocas, pero hay que tener en cuentaque las condiciones climáticas fueron diferentes.

    Cuando se colecta semen a edades muy tempranas, el volumen poreyaculado es relativamente menor comparado con toros maduros, yla producción de semen por unidad es más baja en toros jóvenes queen toros probados, por lo cual los indicadores y parámetros de calidadseminal se deben establecer en función de la edad y etapa dedesarrollo del animal, y no se debe aplicar las mismas normas que seemplean en los centros de inseminación para toros adultos.

    El semen de toros jóvenes se comercializa a precios inferiores parafavorecer el rápido uso y la difusión de estos animales, con elpropósito de que tengan hijas suficientes para probarlos lo másrápido posible; esta práctica es un incentivo para los productores deleche que hacen un buen trabajo criando hijas de estos toros [14].

    La motilidad fue influenciada por los efectos de la edad del FS y lasépocas del año, con resultados más favorables en el período pocolluvioso de noviembre-abril. El análisis de la motilidad es de gran

    interés por la relación que tiene la actividad cinética de las célulasespermáticas con la fertilidad [18, 38].

    La motilidad es uno de los parámetros más importantes de laanalítica seminal; hasta hace pocos años este estudio se hacíamediante métodos semicuantitativos, estos métodos evalúan elporcentaje de espermatozoides móviles y el tipo de movimiento quepresenta la media de una población espermática; estas medidasofrecen una descripción general de la motilidad, pero la exactitud yprecisión están limitadas por la destreza del observador [16]. Pero lavaloración subjetiva de la motilidad realizada por personasexperimentadas es de gran valor, es inmediata, económica y de fácilejecución.

    Referente al efecto de las épocas del año, la estación más calurosaproduce una influencia negativa mayor en los toros Holstein. En lostrópicos la calidad del semen de los toros Bos taurus es menor en los

    meses de mayor calor, por el efecto estresante de las altastemperaturas sobre la fisiología del sistema reproductivo [8].

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    14/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    14

    El estrés por calor tiene efectos negativos en la reproducción bovina,particularmente en razas europeas (Bos taurus) que son menostermotolerantes que el ganado Cebú (Bos indicus). El espermatozoidey ovocito, ambos contribuyen a la resistencia temprana embrionaria

    al shock calórico[4]

    .

    La motilidad espermática es uno de los indicadores fundamentalespara evaluar los eyaculados frescos y post-congelados, pero espreciso resaltar la importancia que tiene el movimiento progresivoindividual como parámetro de fertilidad en toros [26, 31]. 

    El porcentaje de motilidad en este trabajo es inferior al deespermatozoides vivos, fundamentalmente de 8 a 10 meses de edad,

    dato que también fue señalado por Tamayo  [33]

    , quien observóespermatozoides vivos sin que se apreciara motilidad masalsatisfactoria.

    Los porcentajes de patologías espermáticas hasta los 10 mesesfueron altos, aunque este comportamiento es característico de esteperíodo de edad. Muchas pruebas han sido aplicadas para predecir elpotencial de fertilidad en toros jóvenes, pero la morfologíaespermática ha sido la más segura de las pruebas de rutina [36].

    Las alteraciones morfológicas a los 12 meses estuvieron en el límitesuperior permisible estipulado por el Manual de ProcedimientoTécnico de IA [21] (18%), influenciadas por factores individuales, edady épocas del año, encontrándose los mejores resultados en el períodopoco lluvioso en Cuba de noviembre-abril.

    En una investigación del semen de toros en centros de IA de Brasil,  concluyeron [7] que la temperatura, humedad ambiental y el mes del

    año no mostraron efectos significativos en la producción y calidad delsemen; pero observaron que los toros Bos indicus tuvieronconcentraciones espermáticas significativamente mayor, mientrasque los Bos taurus mostraron defectos espermáticos morfológicosmenores. En tal sentido, se  resalta la importancia que tiene lavaloración de las anormalidades espermáticas por su asociaciónnegativa con la fertilidad de los toros [26].

    Las gotas citoplasmáticas son anomalías primarias transitorias,puesto que estas se eliminan con la madurez de los espermatozoides,

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    15/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    15

    y aunque su existencia en la pieza intermedia o la cola puede deberseal uso excesivo del semental, lo más frecuente es encontrarlas en loseyaculados de toros muy jóvenes. La razón fundamental de que lostoros jóvenes tengan elevada proporción de anomalías espermáticas

    se debe a la existencia de espermatozoides inmaduros por lapresencia de la gota citoplasmática proximal [36], criterio que fueconfirmado con los resultados de la presente investigación.

    Existen diferencias (p

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    16/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    16

    La integridad de la membrana espermática es fundamental para elmetabolismo celular e imprescindible en diversos eventos fisiológicosrelacionados con la fecundación, tales como la capacitación, reacciónacrosómica y fusión con el ovocito, lo cual permite la fertilidad del

    toro semental[20, 28, 40]

    .

    La integridad de la membrana plasmática y acrosómica han sido dosde los parámetros de valoración seminal más estudiados por su papelpreponderante como límite celular y por ser responsable de hacerefectivas las interacciones entre células, tanto en términos deintegridad morfológica como funcional. La integridad funcional deestas membranas se ha evaluado mediante test osmóticos [29].

    Los espermatozoides en machos Rojo Sueco y Holstein Sueco fueronmorfológicamente diferentes entre toros y eyaculados, el 50% de lossementales tuvieron eyaculados que contenían >10% de formasmorfológicamente desviadas de las cabezas, pero comúnmente seusaron en IA estos toros jóvenes [1].

    El análisis de regresión de las alteraciones espermáticas a los 12meses de edad expresó un alto coeficiente (R2 = 0,82; P

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    17/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    17

    En estudios realizados se ha demostrado que existe una relaciónsignificativa entre características seminales y el ambiente [39]. Lastemperaturas elevadas disminuyen la concentración, reducen lamotilidad y aumenta el número de alteraciones de los

    espermatozoides.

    Las anomalías morfológicas primarias, tales como vacuolas nucleares,defectos de la pieza intermedia y gotas citoplasmáticas se presentanmás en toros Belga Azul (BB) que en Holstein Friesian [17].

    Las alteraciones de la espermatogénesis son la causa de la peorcalidad del semen en los toros BB. El hecho de encontrar máspatologías de los espermatozoides en el genotipo BB está

    determinado por una predisposición genética de mayorsusceptibilidad al estrés calórico, el cual interfiere el normal procesode la espermatogénesis [17].

    Prieto et al. [26] investigaron el efecto del invierno y verano sobre elcomportamiento reproductivo en toros cruzados y explicaron que lostoros jóvenes son más sensibles al estrés ambiental que los torosadultos, debido posiblemente a que aún no han completado sumadurez sexual y como consecuencia tienen menor adaptación al

    ambiente caluroso de la época de verano.

    Como muestran los coeficientes de correlación entre las variablesfisiológicas seminales, estas fueron altas y positivas, pero entre ellasy las alteraciones morfológicas de los espermatozoides fueronmedias-altas y negativas. Estos resultados reflejan que loscomponentes de la calidad de los eyaculados están asociadosbiológicamente e indican el nivel del funcionamiento del aparatoreproductor.

    El semen está relacionado con el tamaño testicular en virtud de quecada gramo de tejido del testículo produce de 13 a 19 x 106 Spz/día.Existe una correlación positiva (p

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    18/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    18

    toro joven entrando en servicio produce sólo 1 o 2 mL de semen poreyaculación, mientras que un toro completamente maduro produce10 a 15 mL [10]. De ahí la importancia de establecer los parámetrosde calidad seminal en las edades previas a la selección del FS [33].

    Esta asociación entre medidas testiculares y calidad seminal debeevaluarse integralmente con otras variables y factores queintervienen en el potencial reproductivo del toro, pues existe unaproporción no despreciable de FS que poseen clínicamente un normaldesarrollo gonadal, pero al evaluar la producción seminal se descubreque tienen serios trastornos en su calidad.

    De los 120 futuros sementales sometidos al programa de extracción y

    análisis del semen, a los 12 meses de edad la Comisión Nacional deSelección de Sementales, seleccionó 44 toros utilizando los criteriosdel método tradicional, pero sin tener acceso a los resultados de estainvestigación. De los toros seleccionados para IA por dicha comisión,el 27,3% fueron evaluados previamente "no aptos" comoreproductores de IA, sobre la base de un análisis integral de laproducción y calidad seminal del período de 8 a 12 meses de edad.

    El problema esencial entonces se hizo más evidente, demostrar o no,

    en función de nuestra hipótesis, que estos futuros sementalesclasificados como “no aptos”, tendrán similar comportamiento demala calidad espermática en su fase de madurez en el centro deinseminación artificial, resultados que publicaremos en el artículo 4de esta serie.

    CONCLUSIONES

    1. La calidad seminal de los futuros sementales se incrementa

    positivamente influenciada por el aumento de edad, alcanza su mayorestabilidad a los 12 meses, posee un efecto significativo individual yde época, siendo más favorable el periodo poco lluvioso en Cuba denoviembre-abril.

    2. Existe una significativa relación entre las variables seminales,positiva para los indicadores fisiológicos y negativa con las anomalíasespermáticas. La calidad seminal y el desarrollo testicular tambiénestán asociados significativamente.

    3. Más de una cuarta parte de los futuros sementales seleccionadospara inseminación artificial por el método tradicional, presentan

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    19/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    19

    problemas con la producción y calidad espermática en el período de 8a 12 meses de edad, los cuales se clasifican como no aptos por susresultados de las investigaciones del semen.

    REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

    1.  Al-Makhzoomi, A.; Lundeheim, N.; Håård, M. and Rodríguez, H.  Spermmorphology and fertility of progeny-tested AI dairy bulls in Sweden.Theriogenology, Volume 70, Issue 4, Pages 682-691, 1 September 2008. 

    2. Amann, R. P.; Seider Jr., G. E. and Mortiner, R. G. Fertilizing potential in vitroof semen from young beef bulls containing a high or low percentage of spermwith a proximal droplet. Theriogenology, 54 (9): 1499-1515, 2000.

    3.  Aranguren-Méndez, J.; Madrid-Bury, N.; González-Stagnaro, C. et al.Pubertad en toretes 5/8 Holstein y 5/8 Pardo suizo. Facultad de Agronomía,Universidad del Zulia. Maracay, Venezuela. [En línea]. 2009. Disponible en:http://www.revfacagronluz.org.ve/v12_3/v123z110.html. [Consulta: 5 defebrero de 2010]

    4.  Barros, C. M.; Pegorer, M. F.; Moraes, J. L. et al.  Importance of spermgenotype (indicus versus taurus) for fertility and embryonic development atelevated temperatures. Theriogenology, Volume 65, Issue 1, Pages: 210-218,7 January 2006. 

    5. Barth, A.D.; Bull, Thundathill y Mapletoft, R.J. Importancia de la calidadseminal y de FIV para el estudio de efectos espermáticos. V SimposioInternacional de Reproducción Animal. Memorias. INRA. Pág. 205-221, 2003.

    6.  Barth, A. D.; Brito, L. F. C. and Kastelic, J. P.  Proceedings of the AnnualConference of the Society for Theriogenology. The Society for Theriogenology

    2008 Annual Conference. Theriogenology,  Volume 70, Issue 3, Pages 485-494, August 2008.7. Brito, L. F. C.; Silva, A. E. D.; Rodrigues, L. H. et al. Effects of environmental

    factors, age and genotype on sperm production and semen quality in Bosindicus and Bos taurus AI bulls in Brazil. Animal Reproduction Science,Volume 70, Issues 3-4, Pages 181-190, 15 April 2002.

    8.  Carmen, C. I. Evaluación reproductiva y de la fertilidad de toros y suutilización para aumentar la eficiencia reproductiva en sistema dereproducción bovina del trópico bajo. CORPOICA. Ciencia y tecnología parael desarrollo agropecuario de Colombia. [En línea]. 2002. Disponible en:http://www.turipana.org.co/clturipana.htm#carmen. [Consulta: 14 de marzo de

    2004]9. Castro, A. C. S.; Berndtson, W. E. e Cardoso, F. M. Cinética e quantificaçàoda espermatogenese: bases morfológicas e sua aplicaçào en estudos dareproduçào de mamíferos. Rev. Bras. Reprod. Anim. 21 (1): 25-34, 1997.

    10. Cuenca Rural. Aspectos generales de la reproducción de la vaca lechera.Cuenca Rural. Lechería. [En línea]. 2008. Disponibleen:http://www.cuencarural.com/lecheria/aspectos_generales_de_la_reproduccion_de_la_vaca_lechera/  [Consulta: 18 de diciembre 2009]

    11.  Duarte, A. Manual de inseminación Artificial de Ganado. Facultad deMedicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Autonoma de Tamaulipas.México. Pág. 3-53, 2006.

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    20/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    20

    12. Echeverry J. Evaluación morfológica seminal de toros. Crianza ganaderíataurina.  [En línea]. 2008.  Disponible en: http://html.rincondelvago.com/evaluacion-morfologica-seminal-de-toros.html[Consulta: 10 de septiembre de 2009]

    13. Foote C.; Riera, S. and Simplicio, A. The effects of tropical environment on

    reproduction efficiency in ruminants. Primer Simposio Internacional deBioclimatología Animal en los Trópicos: Pequeños y Grandes Rumiantes.Anaïs Fortaleza Embrapa: 63-86, 1990.

    14. Funk, D. Toros jóvenes contra toros probados de alta fertilidad. Genética yReproducción. [En línea]. 2002. Disponible en:http://www.absmexico.com.mx/m/docs/jovenes.pdf . [Consulta: 3 febrero 2007]

    15. Hammerstedt, R. H.; Grahm, J. K. and Nolan, J. P. Cryopreservation ofmammalian sperm: what we ask them to survive. J. Androl. 11: 73-88. 1990.

    16. Hidalgo, C. O.; Tamargo, C. y Monforte, C. 2005. Análisis del semenbovino. Revista Tecnología Agropecuaria, ISSN 1135-6030. BoletínInformativo, Época 2, No.5. [En línea]. 2005. Disponible en: 

    http://www.serida.org/publicacionesdetalle.php?id=01495. [Consulta: 10 demayo 2009]

    17. Hoflack, G.; Opsomer, G.; Van Soom, A. Et al. Comparison of sperm qualityof Belgian Blue and Holstein Friesian bulls. Theriogenology, Volume 66, Issue8, Pages 1834-1846, November 2006.18. JanusKauska, A.; Johannisson, A.; Soderquist, L. and Rodríguez-Martínez, H. Assessment of sperm characteristics post-thaw and response tocalcium ionophore in relation to fertility in Swedish dairy IA bulls.Theriogenology, 53 (4): 859-875, 2000.

    19. López, S. Circunferencia escrotal una herramienta vital en la selección.Sociedad Rural de Mercedes Corrientes, EEA INTA Mercedes, CentroRegional Corrientes. [En línea]. 2007. Disponibleen:http://www.mimercedes.com.ar/sociedadrural/ampliar.php?ampliar=180.[Consulta: 9 de noviembre de 2009] 

    20. Madrid, N. Relación entre los métodos de valoración seminal in vitro y lafertilidad in vivo del semen descongelado de toros frisones. Facultad deVeterinaria. División de Estudios de Posgrado. Universidad Complutense deMadrid, España. Tesis Doctoral. Pág. 1-164, 2004.

    21. Manual Normativo de Procedimiento Técnico. Empresa InseminaciónArtificial. Ministerio de la Agricultura. La Habana. 2007.

    22. Nuevas Tecnologías reproductivas. 2002. Manipulación embrionaria. [En

    línea]. 2002. Disponible en:  http://www.canal-h.net/webs/sgonzalez002/Manipulacion/INDICE.htm .[Consulta: 18 de diciembre de 2009] 23. Palacios C. J. Técnicas para la evaluación de la capacidad fecundante de

    espermatozoides. Memorias. Posgrado de reproducción bovina. CGR,Colombia. 2005.

    24. Páramo, B. Análisis andrológico de toros. Productos y Servicios Ganaderos –PROSEGAN- En línea 4 de marzo de 2010. Disponible en:http://jairoserrano.com/2010/03/analisis-andrologico-de-toros/. [Consulta: 8 demarzo de 2010]

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    21/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futurossementales Holstein, relación con el desarrollo testicular  http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113/011301.pdf  

    21

    25. Perry, G. y Patterson, D. Determinación de la fertilidad reproductiva detoros padres. Department of Animal Sciences. Missouri. [En línea]. 2008.Disponible en: www.produccion-animal.com.ar/ www.produccionbovina.com.[Consulta: 15 de enero de 2010]

    26. Prieto, E.; Espitia, A. y Cardozo, J. Efecto del invierno y verano sobre el

    comportamiento reproductivo de toros cruzados. Rev. MVZCórdoba, Vol.12, No.1, Córdoba, Jan./June 2007. [En línea]. 2007. Disponibleen: http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=S0122-02682007000100007&script=sci_arttext. [Consulta: 20 de octubre de 2009]

    27. Rodriguez, H. Laboratory semen and prediction of fertility: still utopia?.Reprod. Dom. Anim. 38: 312–318, 2003.

    28. Rota, A.; Penzo, N.; Vicenti, L. and Mantovani, R. Hypoosmotic swelling(HOS) as a screening assay for testing in vitro fertility of bovine spermatozoa.Theriogenology, 53: 1415-1420, 2000.

    29. Rubio, J. L.; Quintero, A. A. y González, D. M. Efecto de la criopreservaciónsobre la integridad de la membrana plasmática y acrosomal de

    espermatozoides de toros. Rev. Cient. Maracaibo, V.19, No.4. Maracaibo,2009. [En línea]. 2010. Disponible en:http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0798-22592009000400010&lng=pt&nrm=iso. [Consulta: 8 de marzo de 2010]

    30. Ruedas, F.; Abadía, B. y Cardozo, J. Actividad enzimática de la aspartato-aminotransferasa y su relación con la calidad seminal en toros de tres razasbovinas criollas colombianas. Sistema de Producción Bovinos. CorporaciónColombiana de Investigación Agropecuaria. [En línea]. 2009. Disponible en:http://www.corpoica.org.co/SitioWeb/Ofertas/articulo.asp?id=1415. [Consulta:8 de marzo de 2010]

    31. Santana, A. C. e Cardoso, F. M. Avaliação dos métodos de quantificaçãoda produção espermática em estudos experimentais em animais domésticos.Cad. Téc. Vet. Zootec. No. 35: 31-40 2001.

    32. SAS. Copyright (c). Institute INC., Cary, NC 27511. USA. 2004.33. Tamayo, M. Calidad espermática y desarrollo testicular en futuros

    sementales Holstein. Relación con la producción, calidad y fertilidad delsemen ulterior de los toros en inseminación artificial. Tesis de Maestría.Centro de Investigación para el Mejoramiento Genético de la GanaderíaTropical. Ministerio de la Agricultura. La Habana. 2006.

    34. Tamayo, M. La selección de sementales bovinos en Cuba. 1.Crecimiento y desarrollo corporal y gonadal en futuros sementales Holstein .

    REDVET. Revista Electrónica de Veterinaria. ISSN: 1695-7504. Vol.10, N

    o

    12,diciembre/ 2009. [En línea]. 2009. Disponible en:http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n121209.html. [Consulta: 10 deenero de 2010]

    35. Tamayo, M.; Pérez, J. F. y Pérez-Pérez, F. Libido, pubertad,concentraciones séricas de testosterona y su relación con variablescorporales y testiculares en futuros sementales Holstein. REDVET. Revistaelectrónica de Veterinaria. ISSN 1695-7504. Vol. 11, Nº 11, Noviembre/2010.[En línea]. 2010. Disponible en:http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n111110.html. [Consulta: 18 dediciembre de 2010]

  • 8/17/2019 La selección de sementales bovinos en Cuba. 3. Calidad de la producción seminal en futuros sementales Holstein,…

    22/22

    REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2013 Volumen 14 Nº 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html 

    La selección de sementales bovinos en Cuba 3 Calidad de la producción seminal en futuros 22

    36. Thompson, J. A.; Wikse, S. E.; Forrest, D. W. et al. Predicting end-of-testsemen quality in bulls prior to performance testing. Theriogenology, 47 (7):1297-1307, 1997.

    37. Tiba, T.; Matsuzaki, K. and Kojima, Y. Examination of spermatogonialmultiplication in the bull using whole-mount seminiferous tubules. Reprod.

    Dom. Anim. 29: 458-468, 1994.38. Vale Filho, V. R. Fertilidad en toros. Parámetros de evaluación andrológicay conceptuación general. Cad. Téc. Vet. Zootec. No. 35: 81-87, 2001.

    39. Valle, A.; Fuentes, A. y Puerta, M. Influencia de factores climáticos sobrelas características seminales de toros Holstein y Pardo Suizo nacidos en eltrópico. Rev. Fac. Agron. V. 22, No.1 (ISSN 0378-7818). Caracas, 2005. 

    40. Watson, P. F. The causes of reduced fertility with criopreserved semen.Anim. Reprod. Sci. 60: 481-492, 2000.

    41. Yáñez-Cuéllar, L.; Madrid-Bury, N.; Contreras-Durán, R. y Rincón-Urdaneta,R. Relaciones de circunferencia escrotal con edad y peso corporal en torosmestizos. Universidad Sur del Lago, Zulia. [En línea]. 2005. Disponible en:

    http://www.alpa.org.ve/PDF/Arch%2005%20Suplemento/GM06.pdf .[Consulta: 10 de noviembre de 2009]

    42. Ziegler, J. Cómo usar el Código del Genoma. Genomics Program. SelectSires. The Word’s Source for Bovine Genetics. [En línea]. 2009. Disponibleen: http://www.selecta.com.uy/index.php?view=article&catid=48%3Aarticulos-leche&id=56%3Acomo-usar-el-codigo-del-genoma&format=pdf&option=com_content&Itemid=104. [Consulta: 12 demarzo de 2010]

    REDVET: 2013, Vol. 14 Nº 1

    Recibido 12.06.2012 / Ref. prov. JUN1242B_REDVET / Revisado 31.10.2013Aceptado 21.11.2012 / Ref. def. 011301_REDVET / Publicado: 01.01.2013

    Este artículo está disponible en http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010113.html concretamente en http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n01013/011301.pdf  

    REDVET® Revista Electrónica de Veterinaria está editada por Veterinaria Organización®.

    Se autoriza la difusión y reenvío siempre que enlace con Veterinaria.org®  http://www.veterinaria.org y con REDVET®- http://www.veterinaria.org/revistas/redvet