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FACULTAD DE INGENIERÍA MARÍTIMA Y CIENCIAS DEL MAR FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO CÓDIGO MATERIA Microbiología FMAR03749 NOMBRE David Quiñonez PARALELO 1 TEMA DE LA PRÁCTICA Hemolisis de las Pseudomonas OBJETIVOS GENERALES: -Observar la capacidad hemolítica que tiene la pseudomona aeruginosa en el agar sangre. INTRODUCCIÓN: Agar Sangre El agar sangre es una combinación de un agar base (agar nutritivo) con fuente proteica (digeridos trípticos, digeridos proteicos de soja) el cual tiene un agregado de 5 % de sangre ovina, (también puede usarse sangre humana, para cultivos en una placa de Agar) con una pequeña cantidad de hidratos de carbono naturales y cloruro sódico. El agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento. Se usa también para ver la capacidad hemolítica de los microorganismos patógenos (que es un factor de virulencia). Observando los halos hemolíticos alrededor de las colonias se determina el tipo de hemólisis que posee: (limpias, 2011) Alfa: halos verdosos Beta: halos incoloros Gamma: inexistencia de halos. POFCM0102-1 Hoja 1 de 5

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FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO

CÓDIGO

MATERIA Microbiología FMAR03749

NOMBRE David Quiñonez

PARALELO 1

TEMA DE LA PRÁCTICA

Hemolisis de las Pseudomonas

OBJETIVOS GENERALES:-Observar la capacidad hemolítica que tiene la pseudomona aeruginosa en el agar sangre.

INTRODUCCIÓN:Agar SangreEl agar sangre es una combinación de un agar base (agar nutritivo) con fuente proteica (digeridos trípticos, digeridos proteicos de soja) el cual tiene un agregado de 5 % de sangre ovina, (también puede usarse sangre humana, para cultivos en una placa de Agar) con una pequeña cantidad de hidratos de carbono naturales y cloruro sódico. El agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento. Se usa también para ver la capacidad hemolítica de los microorganismos patógenos (que es un factor de virulencia). Observando los halos hemolíticos alrededor de las colonias se determina el tipo de hemólisis que posee: (limpias, 2011) Alfa: halos verdosos Beta: halos incoloros Gamma: inexistencia de halos.

Fig1.- tipos de hemolisis

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Pseudonoma aeruginosaPseudomonas aeruginosa pertenece a la familia Pseudomonadaceae y es un bacilo gram negativo aerobio con un flagelo polar. Cuando se cultiva en medios adecuados produce piocianina, un pigmento azulado no fluorescente. Muchas cepas producen también el pigmento verde fluorescente pioverdina. Pseudomonas aeruginosa, al igual que otras pseudomonas fluorescentes, produce catalasa y oxidasa, así como amoniaco a partir de la arginina, y puede utilizar citrato como única fuente de carbono. (BVSDE, 2013)

Fig2.-Pseudomonas aeruginosas

EQUIPOS Y MATERIALES:-Placas Petri-Muestra de bacteria -Asa de platino -Hisopos-Tubo de ensayo

PROCEDIMIENTO: -Se realiza una suspensión bacteriana, primero se toma la placa con la bacteria y con ayuda de un asa de platino esterilizado se toma una colonia de bacteria y se lo coloca en la pared del tubo de ensayo, incorporando suavemente a la sustancia -Una vez realizada la suspensión bacteriana, con ayuda de un hisopo se raya de la forma que desees en la placa que contiene agar sangre -Esperamos por 24 horas y observamos la reacción (si observamos que la bacteria se ha alimentado de la parte donde rayamos, quiere decir que es hemolíticamente positiva)

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RESULTADOS: (Puede incluir información, características)

La presencia de halos incoloros alrededor de las colonias, nos dice que poseen un tipo de hemolisis beta.

Observaciones:-AL momento de hacer la dilución no dejar grumos en la suspensión, observar que quede todo homogéneo.-Procurar no contaminar ningún material que usaremos.-Al momento de hacer el rayado en la placa hacerlo con cuidado para no romper el agar.

Conclusión:-La capacidad hemolítica de las pseudomonas aeruginosa es beta, debido a que se presentaron halos incoloros alrededor de las colonias bacterianas.-Las pseudomonas aeruginosas son bacilos gram negativos.

BibliografíaAnduaga, E. S. (2008). Microbiología General y Bucal. Lima.BVSDE. (2013). www.bvsde.paho.org. Obtenido de www.bvsde.paho.org:

http://www.bvsde.paho.org/cd-gdwq/docs_microbiologicos/Bacterias%20PDF/Pseudomonas.pdf

limpias, M. (2011). www.laanunciataikerketa.com. Obtenido de www.laanunciataikerketa.com: http://www.laanunciataikerketa.com/trabajos/manoslimpias/medios.pdf

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