a Ariane [CPyM]

a Pato, Paty, Richard y Nathy [ALC]

GLIFOSATOGentica,SaludyAmbiente

Autores/Editores

CsarPazyMioInstitutodeInvestigacionesBiomdicas

EscueladeMedicinaFacultaddeCienciasdelaSaludUniversidaddelasAmricas

AndrsLpezCortsInstitutodeInvestigacionesBiomdicas

EscueladeMedicinaFacultaddeCienciasdelaSaludUniversidaddelasAmricas

GLIFOSATOGentica,SaludyAmbienteUDLAUniversidaddelasAmricasSENESCYTSecretaraNacionaldeEducacinSuperior,Ciencia,TecnologaeInnovacinDerechosreservados.Citarmencionandosusautoresyfuentedeorigen.Estapublicacinpuedeserobtenidabajopedidoal:InstitutodeInvestigacionesBiomdicas(IIB).UniversidaddelasAmricas(UDLA).Av.delosGranadosE1241yColimes.Primernivel.Email:iib@udla.edu.ecwww.udla.edu.ecAutores/Editores:CsarPazyMio[UNIVERSIDADDELASAMRICAS]AndrsLpezCorts[UNIVERSIDADDELASAMRICAS]Autores:MaraJosMuoz[UNIVERSIDADDELASAMRICAS]MaraEugeniaSnchez[UNIVERSIDADDELASAMRICAS]CatalinaHerrera[UNIVERSIDADCENTRALDELECUADOR]AdolfoMaldonado[CORPORACINACCINECOLGICA]CarolinaValladares[CORPORACINACCINECOLGICA]Fotografa:AndrsLpezCortsCatalinaHerreraFotosdeportada: FiguramodificadadelaestructuratridimensionaldelaprotenaGSTP1(EMBLEBI,2010). FiguramodificadadelempaquetamientodelADN(TheRoyalSwedishAcademyofSciences,2009).Fotosdecontraportada: FiguramodificadadelaestructuratridimensionaldelaprotenaGPX1(EMBLEBI,2010).DerechosdeautorNo.034672ISBN:9789942033949Imprenta:HojasySignosElMunicipioMetropolitanodeQuitootorgelpremioEnriqueGarcsalamejorobraenCienciasdelaVidaatravsdelaestatuillaRumiahuideOro.2011

ndicedecontenidoCOLABORADORES VIIIAGRADECIMIENTOS IXPRESENTACIN XIRESUMEN XIIISUMMARY XIVABREVIATURAS XVPARTEIADNYCROMOSOMAS1. BASESMOLECULARESDELAGENTICA 1

1.1. MUTACIONESDELADN 11.2. POLIMORFISMOSDELADN 1

1.2.1. Biomarcadoresgenticos:SNPs,RFLPsySSLPs 12. CROMOSOMAS 2

2.1. ABERRACIONESCROMOSMICAS 33. NUESTRAEXPERIENCIAENESTUDIOSCONGENOTXICOS 4

3.1. GENES,POLIMORFISMOSYSUASOCIACINCONENFERMEDADES 43.2. GENOTXICOS:HIDROCARBUROS,RAYOSXYPESTICIDAS 5

FOTOGRAFAReginAmaznicaPARTEIICOCTELHERBICIDA4. ELGLIFOSATO 16

4.1. MECANISMODEACCIN 165. ROUNDUP:SURFACTANTES,COADYUVANTESYCONTAMINANTES 18

5.1. POLIOXIETILENOAMINA(POEA) 195.2. COSMOFLUX411F 205.3. NNITROSOGLIFOSATO 20

6. RESISTENCIAGENTICADEPLANTASALGLIFOSATO 216.1. RESISTENCIAADQUIRIDANATURALMENTECONTRAHERBICIDAS 216.2. PLANTASTRANSGNICASTOLERANTESALGLIFOSATOYSUSEFECTOSENLASALUD 21

FOTOGRAFAFloraPARTEIIITOXICOLOGA7. TOXICOLOGAGENTICAYSUSEFECTOSENLASALUD 308. ESTUDIOSTOXICOLGICOSDEPESTICIDASENHUMANOS 309. ESTUDIOSTOXICOLGICOSDEPESTICIDASENOTROSORGANISMOS 36

FOTOGRAFAAnfibiosyreptilesPARTEIVASPERSIONESAREAS10. BIODIVERSIDADAMAZNICAECUATORIANA:RECURSOSYAMENAZAS 4011. ORIGENDELASASPERSIONESAREAS 4112. ANTECEDENTESDEIMPACTOSPORLASASPERSIONESAREAS 43

12.1. CARACTERSTICASDELASASPERSIONES 4312.2. PERCEPCINSOBRELASASPERSIONES 4512.3. COMPORTAMIENTOANTELASASPERSIONES 46

13. EFECTOSDELASASPERSIONESALACOMUNIDAD 4813.1. DESARROLLOCOMUNITARIO 4813.2. COHESINYDESPLAZAMIENTO 49

14. EFECTOSDELASASPERSIONESALOSCULTIVOS 5015. EFECTOSDELASASPERSIONESALOSANIMALES 5116. EFECTOSDELASASPERSIONESALAGUA 51FOTOGRAFAInsectosPARTEVBIOMONITOREOENLAPROVINCIADESUCUMBOS17. READEESTUDIO 56

17.1. COMUNIDADES 5618. ORIGENYDATOSDELAPOBLACIN 57

18.1. INDICADORESSOCIOECONMICOSYDESALUD 5818.2. PROCEDENCIA 5918.3. ORIGENTNICO 5918.4. TIEMPODERESIDENCIA 6018.5. SEXOYEDAD 6018.6. NIVELEDUCATIVO 60

19. CONDICIONESDEVIDA 6119.1. DISTANCIAALAFRONTERA 6119.2. MATERIALESDELASCASASYTESTIMONIOSDECONDICIONESDEVIDA 6119.3. DORMITORIOSPORVIVIENDA 6219.4. VENTANASYTOLDILLOS 6219.5. MANEJODEBASURA 6219.6. FUENTESDEAGUAPARAELCONSUMO 6319.7. MANEJODEHECES 6319.8. POSESINYUSODELATIERRA 63

FOTOGRAFAComunidadesfronterizasIPARTEVIDIAGNSTICOGENTICO20. MUESTRASBIOLGICAS 7021. TCNICASDEBIOLOGAMOLECULAR 70

21.1. EXTRACCINDELADN 7021.2. REACCINENCADENADELAPOLIMERASA 7121.3. FRAGMENTOSDERESTRICCINDELONGITUDPOLIMRFICA 71

22. GENGPX1 7122.1. AMPLIFICACINYGENOTIPAJE 7322.2. POLIMORFISMOPRO198LEU 74

23. GENGSTP1 7523.1. AMPLIFICACINYGENOTIPAJE 7623.2. POLIMORFISMOILE105VAL 77

24. GENXRCC1 7724.1. AMPLIFICACINYGENOTIPAJE 7824.2. POLIMORFISMOARG399GLN 79

25. CITOGENTICA 7925.1. CULTIVODESANGREPERIFRICA 7925.2. COSECHADESANGREPERIFRICA 8025.3. EXTENSINDEPLACAS 8025.4. TINCINSIMPLEDEPLACAS 8125.5. BANDEOGTG 8125.6. ANLISISDECARIOTIPOS 81

FOTOGRAFAGenticaPARTEVIIDIAGNSTICOENSALUD26. VALORACINDELESTADONUTRICIONAL 86

26.1. ESTADONUTRICIONALGLOBAL 8626.2. ESTADONUTRICIONALCRNICO(RETRASODELCRECIMIENTO) 8826.3. ESTADONUTRICIONALAGUDO(EMACIACIN) 9126.4. NDICEDEMASACORPORAL 93

27. VALORACINDELASALUD 9427.1. PERCEPCINDELASALUD 9427.2. MORTALIDADFAMILIAR 95

28. SALUDMATERNOINFANTIL 9628.1. ABORTOS 9628.2. MALFORMACIONES 9728.3. MORTALIDADINFANTILYJUVENIL 9828.4. PLANIFICACINFAMILIAR 98

29. ANTECEDENTESPERSONALES 9929.1. MORDEDURASDEANIMALES 9929.2. INTOXICACIONESAGUDAS 9929.3. ENFERMEDADESINFECCIOSAS 10029.4. HBITOS 100

29.4.1. Tabaco 10029.4.2. Alcohol 10029.4.3. Droga 101

30. IMPACTODELASASPERSIONESAREASALASALUD 101

30.1. EFECTOSDELASASPERSIONESALASALUDDELOSPOBLADORES 10130.2. TIPOSDEPATOLOGAS 106

31. CHEQUEOSMDICOS 10831.1. ALERGIAS 10931.2. OJOS 10931.3. SISTEMADIGESTIVO 11031.4. PIEL 11031.5. ODONTOLOGA 11131.6. ODOS 11131.7. NARIZYGARGANTA 11231.8. SISTEMARESPIRATORIO 11231.9. CORAZNYVASOSSANGUNEOS 11231.10. RIN 11331.11. SISTEMALOCOMOTOR 11331.12. SANGRE 11431.13. SISTEMAENDCRINO 11431.14. GENITALES 11531.15. SISTEMANERVIOSOCENTRALYAFECCIONESPSICOLGICAS 115

FOTOGRAFASaludPARTEVIIIDIAGNSTICOPSICOLGICO32. ESTUDIOPSICOLGICO 124

32.1. COMUNIDADYANAMARUM 12432.2. COMUNIDADCHONE2 12532.3. COMUNIDADSANFRANCISCO 12532.4. COMUNIDADFUERZASUNIDAS 12532.5. COMUNIDADPLAYERAORIENTAL 12532.6. COMUNIDADCORAZNORENSE 12532.7. COMUNIDADLASSALINAS 12632.8. COMUNIDADPUERTOESCONDIDO 126

FOTOGRAFADibujosdeniosPARTEIXDIAGNSTICOAMBIENTAL33. DESTINOAMBIENTALYMOVILIDADDELGLIFOSATO 13034. MOVILIDADENSUELOS 13035. PERSISTENCIADELGLIFOSATO 13136. DESCRIPCINDELAZONA 13137. MUESTREODESUELOS 131

37.1. DETERMINACINDELGLIFOSATO 13237.2. DETERMINACINDEHIERROYALUMINIO 133

38. CALIDADDELSUELOAGRCOLA 13438.1. EVALUACINDELACALIDADDELSUELO 13438.2. INDICADORESDELACALIDADDELSUELO 134

38.2.1. Indicadoresfsicos 13538.2.2. Indicadoresqumicos 135

38.2.3. Indicadoresbiolgicos 13639. INDICADORESPARAEVALUARLACALIDADDELSUELO 137

39.1. METODOLOGAANALTICAYRESULTADOS 13739.1.1. Nitrgeno 13739.1.2. Fsforo 13839.1.3. Hierro,manganesoypotasio 13839.1.4. Materiaorgnica 139

39.2. DETERMINACINDEMACROYMICRONUTRIENTESENSUELOSCULTIVADOS 14040. CALIDADDELAGUA 14041. ANLISISMICROBIOLGICOYPARASITOLGICO 140

41.1. ANLISISMICROBIOLGICO 14141.2. ANLISISPARASITOLGICO 141

42. DETERMINACINDELACALIDADDELAGUA 14142.1. RESULTADOSDEMICROBIOLOGA 141

42.1.1. Recuentodeenterobacterias 14142.1.2. Recuentodehongos 14142.1.3. RecuentodeEscherichiacoli 14242.1.4. Recuentodecoliformestotales 142

42.2. RESULTADOSDEPARASITOLOGA 143FOTOGRAFAAmbientePARTEXMECANISMOSDEATENUACINYREMEDIACIN43. LASPLANTASCOMOFUENTEDEAGENTESANTIMUTAGNICOS 15144. MECANISMOSFISICOQUMICOSYBIOLGICOSCONVENCIONALES 15245. MECANISMOSENZIMTICOS 15346. MECANISMOSDEOXIDACIN 153FOTOGRAFAComunidadesfronterizasIIPARTEXICONCLUSIONESYSUGERENCIAS47. CONCLUSIONES 161

47.1. CONDICIONESGENTICAS 16147.2. CONDICIONESSOCIALESYDESALUD 16247.3. CONDICIONESPSICOLGICAS 16547.4. CONDICIONESAMBIENTALES 166

48. SUGERENCIAS 16648.1. SUGERENCIASDELASCOMUNIDADES 166

REFERENCIASBIBLIOGRFICAS 168ANEXOS 180GLOSARIO 191NDICEANALTICO 198

VIII

ColaboradoresSelesagradecealaspersonasquecolaboraronenlarealizacindelproyectodeinvestigacinPIC08113titulado:Cuantificacindeldaocausadoporaspersionesareasconglifosatoenmicroorganismos,plantas,animales,humanosyencalidaddesuelodelterritorioecuatorianolimtrofealafronteraconColombia,yenlapublicacindellibrotituladoGlifosato:Gentica,SaludyAmbiente.InstitutodeInvestigacionesBiomdicas(IIBUDLA)

TatianaBermeo[BIOTECNOLOGA]AlejandroCabrera[GENTICA]BernardoCastro[GENTICA]CarlosChvez[BIOTECNOLOGA]MaraJosCorral[FINANZAS]NadiaCumbal[CITOGENTICA]JosDomnguez[BIOTECNOLOGA]JorgeNavarrete[VETERINARIA]PatricioOrozco[BIOTECNOLOGA]PauloRobles[CITOGENTICA]CarlaRodrguez[BIOTECNOLOGA]MayraRojas[COORDINACINDELABORATORIOS]LucaRomero[VDEOYCOMUNICACIN]CarmenSalvador[BIOTECNOLOGA]KarlaSandoval[BIOTECNOLOGA]DanielaSantander[BIOTECNOLOGA]JanethTerraza[ASISTENTEDELABORATORIOS]

EmiliaVzquez[BIOTECNOLOGA]AlexandraVillalba[BIOLOGA]PatricioViteri[CORRECTORDEESTILO]

AccinEcolgica GermnLuebert[GEOGRAFA]FundacinDeWaal XavierCaicedo[DIRECTOR] RocoMario[CIENCIASDELAEDUCACIN]PontificiaUniversidadCatlicadelEcuador(PUCE) JavierIrazbal[BIOLOGA]

IX

AgradecimientosSecretaraNacionaldeEducacinSuperior,Ciencia,TecnologaeInnovacin(SENESCYT)

ManuelBalden[SECRETARIOSENESCYT]PedroMontalvo[EXSECRETARIOSENACYT]

UniversidaddelasAmricas(UDLA) CarlosLarretegui[RECTOR] SimnCueva[VICERRECTOR]DireccindeFinanzasDepartamentodeReportes(UDLA) FranciscoCorral[FINANZAS] PabloMoreno[FINANZAS]AsociacindeComitsPopularesdeSaluddeSucumbos(ACOPSAS) MarioShingre[LABORATORISTA] JessPlasencia[PROMOTORDESALUD] CeliaErique[CHONE2] MaraJimnez[CHONE2] LuisMndez[YANAMARUM] DionisioEncarnacin[PLAYERAORIENTAL] VctorPineda[PLAYERAORIENTAL] CeciliaTriana[FUERZASUNIDAS] FlorTrujillo[FUERZASUNIDAS]

JuanEscobar[PUERTONUEVO]JairoMutumbajoi[PUERTOESCONDIDO]LuzAbad[PUERTOESCONDIDO]MnicaMuepaz[CORAZNORENSE]YuliCabrera[CORAZNORENSE]HugoGavilanes[5DEAGOSTO]NoraYela[SANTAMARIANITA]KellyMoreno[SANTAMARIANITA]RocoGrefa[SANFRANCISCO1]LauraSaritama[SANFRANCISCO2]FrancoOrtega[LASSALINAS]JacquelineElizalde[LASSALINAS]

CEPIFundacinponteenmipiel SantiagoPalacios[DERMATOLOGA] GenevieveBoily[ENFERMERA] AlejandroArias[MEDICINA] MaraAugustaVeintimilla[MDICO] DavidRevelo[MEDICINA]

VirgilioNarvez[PSICOLOGA]Clnicaambiental WilsonSurez[PROMOTORAMBIENTAL] BaliaVaca[PROMOTORAAMBIENTAL] LuisCongacha[PROMOTORAMBIENTAL] ngelEncarnacin[PROMOTORAMBIENTAL]

X

FederacindeOrganizacionesCampesinasdelCordnFronterizoEcuatorianodeSucumbos(FORCCOFES) CalixtoPrraga[PRESIDENTE] FrendaVite[SECRETARIO]IglesiadeSanMigueldeSucumbos(ISAMIS) PedroPerpin[MEDICINA] VaneskaZamora[MATRONA]MovimientodelosSinTierraBrasil FranciscoMartnez[MEDICINA]Radialistas CarlosRomero[CUENTACUENTOS]PatronatoProvincialdeSaluddelGobiernoProvincialdeSucumbos LuisSilva[LABORATORISTA] JoffreRobalino[ODONTOLOGA]Apoyologstico ngelLemache[COOPERATIVATAXISLAGOAGRIO] DanielVargas[COOPERATIVATAXISLAGOAGRIO] RobertoJaramillo[CHOFER] EdyVera[CHOFER] JulioMuoz[CHOFER]ProvinciadeSucumbos

Se les agradece a todas las personas que, bajo su consentimiento, se les extrajomuestrasdesangreperifrica,selestomfotografas,selesrealizchequeosmdicosyse lesrealizentrevistas.De lamisma forma,se lesagradecea laspersonasde lascomunidadesde laProvinciadeSucumbos,quienesapoyaronycolaboraroncon losinvestigadoresensuslaboresdiarias.

XI

PresentacinEl glifosato es uno de los herbicidas ms ampliamente utilizados alrededor del mundo; y ha sidosealadopor su fabricante comoelherbicidams seguropara la saludhumanabajo las condicionestcnicasestipuladas:fumigacindirectasobre lamaleza,concentracindeusoentreel1al3%,ybajadosisytiempodeexposicindequienlomanipule.ParaelEcuador,lasaspersionesareasqueelGobiernodeColombiarealizentrelosaos2000al2007,dentrodelplancolombianoparacombatirlasplantacionesdecoca,amapolaymarihuana,afectaronalas poblaciones de la zona fronteriza colomboecuatoriana; esto llev a los dos pases a unposicionamientodiplomtico,cientficotcnico,ticoygubernamentaldiverso, llegandoaconvertirseenunproblemadeEstados.Ambospases, a travsde sus gobiernos,nombraron sendas comisiones cientficas, las cuales en lasdiscusionesbilateralesnollegaronaponersedeacuerdo.ParaelEcuador,elproblemaradicaenqueelusodelglifosatoesantitcnico:lasaspersionesareasserealizaronagranaltura,deformarepetitiva,yconelusodeuncoctelherbicidaqueademsdepresentarglifosatocomoingredienteactivo,contenaCosmoFlux como coadyuvante y polioxietileno amina (POEA) como surfactante. Por lo tanto, laexposicincrnicaalambiente(agua,vegetacin,tierras),alosanimalesyalaspersonas,determinaronimportantes cambios y problemticas por el efecto indirecto que recibi el lado ecuatoriano de lafrontera. El efecto se lo observ y determin por los testimonios de los pobladores de las zonasafectadas,quienesrefirieron lamuertedesusanimales,plantacionesycontaminacindesusaguas,eincluso por las denuncias recogidas por laDefensora del Pueblo. El efecto fue verificado por variascomisionesnacionaleseinternacionales,incluidalasNacionesUnidas.Concomitantemente,losmdicosecuatorianos informaronuncambioenelpatrndesaludde laspersonasexpuestasa lasaspersionesconelcoctelherbicida.Aumentaron losproblemasgastrointestinales,depiel,respiratorios,ocularesytrastornospsicolgicos,segnloverificlaComisinCientficaEcuatoriana,nombradaporelPresidentedel Ecuador Rafael Correa y su Ministra de Relaciones Exteriores, Comercio e Integracin, MaraFernandaEspinosa.El trabajo investigativo de la Comisin Cientfica Ecuatoriana se plasm en el libro El sistema deaspersiones areas del Plan Colombia y sus impactos sobre el ecosistema y la salud en la fronteraecuatoriana(2007),querecogelasdiversasevidenciasyperjuiciosqueelEcuadorconsideraserobjeto.Producto de la documentacin recopilada por el Ecuador, el pas resolvi poner una demandainternacionalante LaHayapor considerarque lasaspersionesproducen severosdaosen la salud yambienteecuatorianos.En laactualidadexisteabundante informacincientfica,queponeenduda la inocuidaddelglifosatosolooencombinacionescomerciales,msandentrodeuncoctelherbicidaaltamenteconcentrado,cuyomtododeaplicacinno tienecomparacinalgunaenelplaneta.EstudiossobreeldaoqueelglifosatoproducealmaterialgenticoevidencianladegradacindelADNmediantelapruebacometaylas roturas de los cromosomas, convirtindolo en un agente genotxico. Los genotxicos estnimplicados en al menos tres fenmenos biolgicos importantes: desarrollo de cncer, prdidas deembarazoseinfertilidadenlosindividuosexpuestos.Lasaspersionesareas,conelcoctelherbicidaquecontieneglifosato,cesaronenenerodel2007,y laexperienciaquelosecuatorianosadquirimosconesteextraoynuevofactorquealterlabiologadelafrontera,haenriquecidoelconocimientoacadmico,pero tambinelsabercomunitariode laszonasafectadas.Elglifosatotieneunperodocortodevida,elfabricantehabladetresmeses,perolosestudiossobreeldestinoambientaldeesteherbicida lleganadetectarlohasta luegodedosaos,sobretodoensuelosricos en hierro. Sea como fuere, es evidente que las aspersiones areas causaron problemas en lafrontera,estudiadospor variasorganizacionesen sumomento.Conscientesdeestaproblemtica,elInstitutodeInvestigacionesBiomdicasdelaUniversidaddelasAmricasformulunproyectoquefueaprobadoporlaSecretaraNacionaldeCienciayTecnologa(SENACYT),actualmentellamadaSecretara

XII

NacionaldeEducacinSuperior,Ciencia,Tecnologae Innovacin (SENESCYT),paraevaluarel impactode lasaspersionesareasconglifosatoen la fronteranorte,ydurantedosaosanalizarunaseriededeterminantesgenticos,de salud fsicaypsquica,yambientales,queconforman los resultadosqueestelibrorecoge.Conestenuevolibro,queinvolucramuchosactoreseinvestigadores,pretendemosbrindarinformacincientficarelacionadaconlosmecanismosdecontaminacin,precaucin,proteccinyremediacin,ydelos potenciales efectos de las aspersiones areas indirectas y directas sobre las comunidadesecuatorianasfronterizasconColombia.Paraunmejorentendimientodelimpactodelcoctelherbicida,laSENACYT cre la Red de Ecotoxicologa, integrada por la Universidad de las Amricas, el MuseoEcuatorianodeCienciasNaturales, laUniversidadTcnicadelNortey laEscuelaPolitcnicaNacional;cuyopropsitoesel intercambiar la informacinqueestas cuatro institucionesobtendrn sobreunamismatemtica:aspersionesareasconpaqueteherbicidaysusefectosenterritorioecuatoriano.De formapreliminar, losresultadosdelproyecto,conjuntamenteconunvideo, lospresentamosen la13raReunindePacificBasinConsortiumdenominadaEnvironmentalExposures intheEraofClimateChange,yrealizadaelmesdenoviembredel2009enelTelethonInstituteforChildHealthResearchenPerth,Australia,bajoelttuloSocial,healthandgeneticdiagnosesofthezoneofinfluenceaffectedbyglyphosateaerialsprayinginthenorthEcuadorianborder;yeltrabajocientficoformalestdisponibleen larevistaReviewsonEnvironmentalHealth,Vol.26,No.1,Enerodel2011,conel ttuloBaselinedeterminationinsocial,health,andgeneticareasincommunitiesaffectedbyglyphosateaerialsprayingintheNortheasternEcuadorianborder.Terminado el proyecto bajo mi direccin, y cuyos resultados ahora los presentamos ampliados yanalizados en este libro, podra calificrselo como un estudio de lnea base sobre las condicionesgenticas, citogenticas, sociales, de salud y ambientales, de las comunidades de la Provincia deSucumbosfronterizasconColombia.EstaobracientficabrindainformacinsobrelosefectosdeestegenotxicosobrelaestructuradelADNydeloscromosomas;elmecanismodeaccindelglifosatoysuincrementodeaccinmedianteelusode surfactantes, coadyuvantes y otros contaminantes. Los estudios toxicolgicos internacionales depesticidasenhumanosyenotrosorganismos.Labiodiversidadamaznicaecuatorianaamenazadaporlas aspersiones areas, as como efectos en los cultivos, animales y el agua; la procedencia y lascondicionesdevidade lascomunidades;elestudiodealteracionescromosmicasydepolimorfismosgenticosdelADN,relacionadosamayoromenorsusceptibilidadfrentealglifosato.Lavaloracindelestado nutricional, la salud maternoinfantil y el impacto de las aspersiones areas en el estadopsicolgicode lascomunidades.Eldiagnsticoambiental,medianteelanlisisdeglifosatoyAMPAenmuestrasdesuelo,yelanlisisparasitolgicoymicrobiolgicodemuestrasdeagua.Porltimo,estaobra brinda informacin bibliogrfica sobre agentes antimutagnicos y mecanismos fisicoqumicos,enzimticosydeoxidacin,utilizadosenotrospases,conelobjetivodeatenuaryremediarlapresenciadelglifosatoenelambiente,yquepuedenserdeayudaenelEcuadorsienelfuturocontinuaelusoindiscriminadodeestepesticida.Laimportanciadedesarrollarunestudioestrictamentecientficodealtaenvergadura,paradeterminaruna lneabaseen lasreasdegentica,saludyambiente,yplantear la importanciadecontinuarconestudiosprospectivosacortoylargoplazo,permitirnalasinstitucionespblicasyprivadas,evaluardeformamsverselestadode lascomunidadesecuatorianas,ydesarrollarproyectosdeayudasocial,psicolgica,nutricional y ambiental, con el findemejorar elnivel socioeconmico,denutricin,desalud,psicolgicoyambiental,delascomunidadesecuatorianasfronterizasconColombia.

CsarPazyMioQuito,Enero2011

XIII

ResumenDurante los aos 2000 al 2007, lascomunidades ecuatorianas localizadas en lafronteranortehansidoafectadasporelPlanColombiadebidoalasaspersionesareasconglifosato,unherbicidaselectivoquecontienepesticidas, surfactantes y adyuvantes,aplicados en la erradicacin del cultivo decoca, fuente de produccin mundial de lacocana.El propsito de esta investigacin fuecuantificareldaoanivelgentico,desalud,social y ambiental, de las comunidadesecuatorianas localizadas en el cordnfronterizo, afectadas por las fumigaciones,mediante la aplicacindebiomarcadoresdeexposicin, efecto y susceptibilidadindividual, que facilitar una valoracintempranadeldesarrollodecarcinognesisenpoblaciones vulnerables expuestas agenotxicos.La ejecucin del estudio se realiz en dosetapas considerando el avance de losresultadosporcadacomponente.Laprimeraetapa consisti en obtener la informacintoxicolgica de 144 familias mediante unchequeomdico,evaluandoa521 individuospertenecientes a las comunidades afectadasde la Provincia de Sucumbos. En cuanto asalud, se determin que lamalnutricin fuede 3%. El 7,7%de laspersonaspresentaronnios con malformaciones, mientras que elporcentaje de abortos fue 12,7%. Enconclusin, la poblacin no present daosignificativo a nivel gentico pero presentaproblemas en relacin con el desarrollopsicolgico,socialysanitario.Paradeterminarlosefectosanivelgentico,se emplearon dos biomarcadores. Elbiomarcador de efecto fue evaluado enlinfocitos de sangre perifrica en 182individuos de la poblacin expuesta,aplicando la tcnica de AlteracionesCromosmicas (AC). Los resultados de ACpresentaron un cariotipo normal (46cromosomas)en182individuosestudiados.

Para el biomarcador de susceptibilidadindividual, se realiz la respectivaextraccinde ADN. Para el genotipaje de lospolimorfismos GSTP1 Ile105Val, GPX1Pro198Leu y XRCC1 Arg399Gln se utiliz latcnica de Reaccin en Cadena de laPolimerasaFragmentos de Restriccin deLongitud Polimrfica (PCRRFLP). Conrespecto al anlisis gentico, los individuosconlavarianteGSTP1Val/Valpresentaronunoddsratio(OR)de4.88(P

XIV

SummaryDuring the years 2000 to 2007, theEcuadorian communities located in theNorthern border have been affected by thePlan Colombia due to glyphosate aerialspraying.Glyphosate is a selective herbicidecontaining pesticides, surfactants, andadjuvants,which isappliedtoeradicatecocacrops,sourceofglobalcocaineproduction.The purpose of this researchwas to assessthedamageatthegenetic,health,social,andenvironmental level in the Ecuadoriancommunities located along the border thathas been affected by this spraying. Thisassessment is carried out through theapplicationofbiomarkersofexposure,effect,andindividualsusceptibility.Suchbiomarkerswill provide an early assessment ofcarcinogenesis development in vulnerablepopulations that have been exposed togenotoxics.This study was executed in two stages,considering the progress of the results foreachcomponent.The firststageconsisted inobtainingthetoxicologicalinformationof144families by means of a medical checkup,assessing 521 individuals belonging to theaffected communities in the Province ofSucumbios, Ecuador. Regarding health,undernourishmentwasdeterminedtobe3%.7.7% of the people had children withmalformations,asthepercentageofabortionis12.7%.Inconclusion,thepopulationhadnosignificantdamageatthegeneticlevel,butitdoeshavepsychological, social,and sanitaryproblems.In order to determine the effects at thegeneticlevel,twobiomarkerswereused.Thebiomarker of effect was assessed inperipheral blood lymphocytes of 182individuals from theexposed community,byapplying the technique of ChromosomalAlterations (CA). The CA resultsdemonstrated a normal karyotype (46chromosomes)in182studiedindividuals.

Forthebiomarkerofindividualsusceptibility,the respective DNA extraction was carriedout.For the genotype of the GSTP1 Ile105Val,GPX1 Pro198Leu, and XRCC1 Arg399Glnpolymorphisms, the technique calledPolymerase Chain Reaction RestrictionFragments Length Polymorphism (PCRRFLP)was used. Considering the genetic analysis,theindividualswiththeGSTP1Val/Valvarianthadanoddsratio(OR)of4.88(P

XV

Abreviaturas45,X CariotipodelsndromedeTurner47,XXY CariotipodelsndromedeKlinefelter2 ChicuadradoA Tallaaltaaa AminocidoAAS EspectrometradeabsorcinatmicaACAasa EnzimaacetilCoAcarboxilasaADN cidodesoxirribonucleicoAl AluminioALS EnzimaacetolactatosintetasaAMPA cidoaminometilfosfnicoArg ArgininaARN cidoribonucleicoASTM TheAmericanSocietyforTestingandMaterialsATSDR AgenciaparaSustanciasTxicasyRegistrodeEnfermedadesB TallabajaCAT CatalasaCCE ComisinCientficaEcuatorianaCd CadmioCE ConductividadelctricaCNE ConcejoNacionaldeEstupefacientesCHCl3 CloroformoC3H8NO5P NfosfonometilglicinaCOOH cidocarboxiloCONICET ConsejoNacionaldeInvestigacionesCientficasyTcnicasCS CalidaddelsueloCu CobreDa DaltonDE DesviacinestndarDG DesnutricingraveDL DesnutricinleveDL50 Dosisletal50DM DesnutricinmoderadaDNA cidodesoxirribonucleicodNTP DideoxinucletidotrifosfatoEDTA cidoetilendiamintetracticoEOR EspeciesoxgenoreactivasEPA AgenciadeProteccinAmbientaldeEstadosUnidosEPSPS Enzima5enolpiruvilshikimato3fosfatosintetasaETS EnfermedadesdetransmisinsexualFe HierroFe+3/C2O4

2 SistemaferrioxalatoFMOC 9fluorenilmetilcloroformatoFORCCOFES FederacindeOrganizacionesCampesinasdelCordnFronterizoGPX1 Glutatinperoxidasa1GSTP1 GlutatinStransferasapi1Gln Glutamatog/L Gramosporlitrog/m3 Gramospormetrocbico

XVI

ha HectreaHA AminasheterocclicasH2O2 PerxidodehidrgenoH3PO4 cidofosfricoHg MercurioHPLC CromatografalquidadealtaperformanceHTA HipertensinarterialIle IsoleucinaIMC ndicedemasacorporalINEC InstitutoNacionaldeEstadsticasyCensosINFA InstitutoNacionaldelaNiezylaFamiliaINH InstitutoNacionaldeHigieneISS InstitutodeCienciasenlaSociedadIVU InfeccinavasurinariasK PotasioKb KilobasedeADNKH2PO4 FosfatomonopotsicoKm KilmetroKd CoeficientedeparticinKoc CoeficientedeabsorcinLA TallaligeramentealtaLB TallaligeramentebajaLeu LeucinaLLA LeucemialinfoideagudaLMC LeucemiamieloideagudaL/Kg Litrosporkilogramom MetrosMgCl2 Clorurodemagnesiomin MinutosmPa MegaPascalMn ManganesoMO MateriaorgnicaMS EspectrometrademasasNH4+ NitrgenoqueseencuentraenformadeamonioN Tallanormalnm NanmetroNaCl ClorurodesodioNNG NnitrosoglifosatoNRCS NationalResourseConservationSoilOB ObesidadOH HidroxiloOMS OrganizacinMundialdelaSaludOR OddsratioP Fsforop BrazocortodelcromosomaPAH HidrocarburospolicclicosaromticosPAO ProcesosavanzadosdeoxidacinPb PlomoPCB Bifenilospoliclorinadospb ParesdebasesnucleotdicasPCR ReaccinencadenadelapolimerasaPENMPF PrimerEncuentroNacionaldeMdicosdePueblosFumigados

XVII

pKa FuerzadedisociacinPN PesonormalPOEA Polioxietilenoaminappm PartespormillnPro Prolinaq BrazolargodelcromosomaQA/QC AseguramientoycontroldecalidadqCO2 CocienterespiratorioRFLPs FragmentosderestriccindelongitudpolimrficaSeg SegundosSNC SistemanerviosocentralSNPs PolimorfismosdenucletidosimpleSOD SuperxidodismutasaSP SobrepesoSSLPs LongitudpolimrficadecadenasimpleSSSA SoilScienceSocietyofAmericaSTRs RepeticionesentndemcortosTA TemperaturaambienteTAO TecnologasavanzadasdeoxidacinTBC TuberculosisTiO2 DixidodetitanioTNI InstitutoTransnacionalTNF FactordenecrosistumoralUNC UniversidadNacionaldeCrdobaUSDA DepartamentodeAgriculturadeEstadosUnidosUSEPA AgenciadeProteccinAmbientaldeEstadosUnidosUSOPP OficinadeProgramasdePesticidasdeEstadosUnidosUV UltravioletaVal ValinaVNTRs RepeticionesentndemdenmerovariableWHO OrganizacinMundialdelaSaludXRCC1 GenreparadordelADNYM YeastandmoldZn Zinc

1

PARTEIADNYCROMOSOMAS1. Basesmolecularesdelagentica

La informacin para el desarrollo y lasfunciones especficas de las clulas y lostejidos sealmacenaen losgenes.Ungenesuna secuencia nucleotdica que codificainformacin gentica, presenta unaestructura y cumple una funcin especfica.Loscromosomasseencuentranconformadospor laagrupacindegenesyseubicanenelncleocelular.Los genes se encuentran conformados porexones, en los cuales est la informacinnecesariaparalosprocesosdetranscripcinyposteriorsntesisdeprotenasestructuralesoenzimticas.El cido desoxirribonucleico (ADN) es unamacromolcula conformada por una doblecadena larga. Fue descubierto por JohannFriedrich Miescher en el ao 1869. Suscomponentes qumicos son basesnitrogenadas (purinas: adenina y guanina;pirimidinas: citosina y timina), azcar(desoxirribosa) y grupos fosfato (Passarge,2004).En el cido ribonucleico (ARN) el azcardesoxirribosadelADNesreemplazadopor laribosay labasetiminaporeluracilo.ElARNmensajero realiza la traduccin delmensajeal ribosoma ubicado como organela dentrodel citoplasma celular y all se sintetiza laprotena que cumplir funciones especficasdentroyfueradelaclula(Celeda,1991).1.1. MutacionesdelADN

ElADNcodificanteysurespectivopolipptidosoncolineales.Unamutacinde lasecuenciadebasesdelADNpuededarlugarauncodndiferente. La posicin del cambio resultanteen lasecuenciadeaminocidoscorrespondea laposicinde lamutacin (Alberts, et al.,1994).Existen tres tipos de mutaciones diferentesque involucranunsolonucletido (mutacin

puntual):sustitucin,delecineinsercin.Sedistinguen dos tipos de sustituciones:transicin, que es el cambio de una purinapor otra o de una pirimidina por otra; y latransversin, que es el intercambio de unapurinaporunapirimidinaoviceversa(Lodish,etal.,2004).Unasustitucinpuedealteraruncodn de modo que se presente unaminocido incorrecto en este sitiopero sinque se produzcan cambios en el marco delectura, mientras que una delecin o unainsercin causa un corrimiento en elmarcodelectura.Luego,lassecuenciasquesiguenacontinuacin ya no codifican para unproducto gentico funcional o causan unasobre expresin en la codificacin de undeterminadogen(Passarge,2004).1.2. PolimorfismosdelADN

El polimorfismo gentico se refiere a laexistencia de variantes con relacin a unlocusgnico,unaestructuracromosmica,unproducto gnico o un fenotipo. ElpolimorfismodelADNserefiereaunaampliagama de variaciones en la composicin debases nitrogenadas, la longitud derepeticionesdenucletidosolasvariantesenunsolonucletido(Passarge,2004).Los polimorfismos genticos pueden serutilizados como biomarcadores genticospara el anlisis de enfermedades o estudiosparentales. Entre los biomarcadores msdestacados para su estudio se encuentran:polimorfismos de nucletido simple (SNPs),polimorfismos de longitud de secuenciasdiscretas (SSLPs)y fragmentosde restriccinde longitud polimrfica (RFLPs).Debido a lagran importancia que tiene el estudio demarcadores de ADN, han sido rpidamentedesarrolladas tcnicas que permiten suanlisis.1.2.1. Biomarcadoresgenticos:SNPs,RFLPs

ySSLPs

LosSNPssonvariacionesdelADNqueafectanauna solabasenitrogenadade la secuencia

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del genoma. Para ser consideradopolimorfismo, la variacin debe darse almenosenel1%de lapoblacin.LosSNPsseoriginancuandounamutacinpuntualocurreenelgenoma,convirtiendounnucletidoenotro. Si la mutacin ocurre en clulasreproductivas de un individuo, uno o msdescendientes pueden nacer con dichamutacin, y a lo largo de generaciones lamutacin se puede establecer en lapoblacin. En la mayora de organismoseucariotes, hay almenos unamutacin porcada10KbdeADN(Brown,2007).LosRFLPsfueronlosprimerosmarcadoresdeADN en ser estudiados. Consiste en queenzimasderestriccincortanelADNensitiosespecficos, esto quiere decir quemolculasde ADN tratadas con la misma enzima derestriccin producirn el mismo set defragmentos. Estos biomarcadores se losutiliza generalmente para obtener elgenotipo de cualquier organismo en lassecuenciasgenticasdeinters.LosSSLPsreportanvariacionesalolargodelacadena de ADN. Estas variaciones sonsecuencias repetitivas, en donde diferentesalelos contienen diferentes nmeros deunidades repetidas. Existen dos tipos deSSLPs: los minisatlites, tambin conocidoscomo repeticiones en tndem de nmerovariable (VNTRs), en los cuales las unidadesderepeticintienenunalongitudaproximadade25paresdebases(pb),ylosmicrosatliteso repeticiones en tndem cortos (STRs) quepresentan unidades cortas de repeticin de13pb(Brown,2007).2. CromosomasEl descubrimiento del nmero cromosmicohumano(46cromosomas)enelao1956porTjio y Levan, marc el comienzo de lacitogenticahumanamoderna.ElADN seencuentraenelncleo celularenformadispersa y junto con ciertasprotenasconstituyelacromatina(2,37nm).

DuranteladivisincelularelADNseorganizaen estructurasms complejas hasta formarlos cromosomas. El primer nivel deorganizacin del ADN consiste ensubunidades denominadas nucleosomas, enlas cuales la fibra de cromatina dar dosvueltasalrededordeunncleo formadoporun octmero de histonas empaquetando alADN en una proporcin de siete veces,constituyndose una fibra de 10 nm dedimetro.Un segundo nivel de organizacineselsolenoideenelque losnucleosomassereenrollan sobre smismos, condensando lalongituddelADNen40vecesms.Elarreglointerno del solenoide est formado por unafibra de cromatina enrollada en forma dehlice conteniendo seis nucleosomas porvueltay tiene30nmdedimetro.Esta fibrapareceserlaunidadfundamentalparaquelacromatina se organice en cromosomas. Lafibra de 30 nm durante la condensacin delos cromosomas forma empaquetamientosenformadelazosunidosaunejecentral,queconstituye una matriz de protenas nohistnicas;elADNenestenivelsecompactamil veces al finalde la interfase (700 nm) ydiezmil veces en el cromosomametafsico(2000nm). Los lazos contienende60 a100Kb cadauno yestnempacados amododehlicessuperpuestassujetasaunejecentraloandamio(Strachan&Read,2004).Entrelasprotenasnohistnicasdelandamiose destaca la Sci (Topoisomerasa II). LaTopoisomerasa II constituye el 70% del ejecentralformandoloscomplejosdeanclajedeloslazosdeADN.Sufuncinesladeenrollary desenrollar las cadenas de ADN parapermitir la separacin de las cromtideshermanas durante la anafase. Su ubicacinestratgica en la base de los dominiospermite que desde aqu acte en lasegregacin y condensacin cromosmica(Strachan&Read,2004).Los cromosomas estn formados por doscromtides unidas en el centrmero(constriccinprimaria),regionesterminalesotelmeros y en ocasiones pueden presentarsatlites, separadosdel cromosomaporunaconstriccinsecundaria.Elcentrmerodivide

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alcromosomaendosbrazos:unocorto(p)yunolargo(q).Elcomplementocromosmicodecadaclulasedenominacariotipo.Estetrminoseutilizaparadescribirlaconstitucincromosmicadeunaespecie.La identificacinmorfolgicadeloscromosomasestbasadaen los tamaosrelativosde losmismos yde susbrazos.Unidiograma es la representacin esquemticade la morfologa cromosmica que se usacomodiagnsticoparalacomparacindeloscariotipos de diferentes especies yvariedades. El idiograma est basado en lasmedidasdeloscromosomasenvariasclulas.Los cromosomas humanos de acuerdo a laposicin del centrmero se clasifican en:metacntricos cuando sus brazos sonequidistantes con respecto al centrmero ypor lotantosuscromtidessonde lamismalongitud;acrocntricoscuandoelcentrmeroselocalizaenlareginsubterminalformandobrazos muy pequeos generalmente consatlites; submetacntricos cuando lalocalizacindelcentrmerotiendehaciaunode losextremos,por loque losbrazosde lascromtides son desiguales, y telocntricoscuando el centrmero se ubica en la reginterminal del cromosoma, por lo tanto noexistenbrazosp,estetipodecromosomanoestpresenteenel cariotipohumano (ISCN,1985).En 1960, en la convencin de Denver, seunific la nomenclatura de los cromosomasreconocindose dos grupos: autosomas(cromosomas somticos) y gonosomas(cromosomas sexuales). Los autosomas senumerandel1al22ordenadosportamaosdecrecientes y, dentro del mismo tamao,por la posicin del centrmero. Loscromosomasdetamaosemejanteserenenengruposquesedesignanpor letras(A G).A los cromosomas sexuales X y Y se lesincluyeenlosgruposCyGrespectivamente.Desde 1970 se han desarrollado nuevastcnicasquepermiten identificar a cadaparde cromosomas por supatrn caractersticode bandas transversales, que se ponen demanifiesto con mtodos de tincin

especiales. Las tcnicas de bandeocromosmico consisten en exponer a loscromosomas a diferentes substancias ycolorantes para desnaturalizar porciones deprotenas del esqueleto cromosmico(histonas y no histonas) o evidenciarsecuencias de ADN con mayor o menorcantidaddeenlacesbiotrivalentesentre lasbasesnitrogenadasconstitutivasdelADN.2.1. Aberracionescromosmicas

La exposicin de clulas eucariotes a variosagentes qumicos y fsicos puede inducirdaos cromosmicos, ya sea en nmero oestructura. Estos daos pueden serproducidosenclulassomticasogerminales(Au,1991;Leonard,etal.,1985).Las anomalas numricas o mutacionesgenmicas se presentan en individuos cuyonmerodecromosomasvarade sunmerodiploide. Pueden afectar tanto a autosomascomoacromosomassexuales.Lasanomalasnumricas se clasifican en aneuploida, endonde un individuo presentaaccidentalmente un cromosomams o unomenoscon respectoasucondicindiploide;la monosoma, en donde un individuopresenta solo un cromosoma del parhomlogo.Casi todas las monosomas autosmicasllevan a la muerte poco despus de laconcepcin. La trisoma es cuando hay lapresenciadetrescromosomashomlogosenun mismo individuo. Adems, existe unacondicin llamada triploida, en la cual hayunacopiaextradetodosloscromosomas.Losindividuos con esta condicin puedenocasionalmente sobrevivir hasta elnacimiento, aunque normalmente muerenduranteelperodoneonatal.Las anomalasde cromosomas sexualesmscomunessonlamonosomadelcromosomaX(45,X)osndromedeTurneryelsndromedeKlinefelter(47,XXY).Lasanomalasestructuralesimplicancambiosenlaestructuradeunoovarioscromosomas.Existen varios tipos de anomalas

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estructurales, como son las deleciones, queimplican la prdida de material de un solocromosoma;lasinversiones,quetienenlugarcuando se dan dos cortes dentro de unmismocromosomayelsegmentointermediose invierte y se vuelve a unir formando uncromosoma que estructuralmente tiene lasecuencia cambiada; y las translocaciones,

queimplicanelcambiodematerialentredosomscromosomas.Lasanomalasnumricasyestructuralessepuedendividirasuvezendos categoras principales: las constitutivas,aqullasconlasquesenace,ylasadquiridas,lasque surgen como cambios secundarios aotras enfermedades, tales como el cncer(FiguraI.1).

FiguraI.1.Aberracionescromosmicas

3. Nuestra experiencia en estudios con

genotxicosDesde1987,nuestrogrupodeinvestigadoresintegradospormdicos,genetistasybilogosmoleculares hemos venido desarrolladoproyectose investigaciones relacionadasconel estudio gentico y citogentico desndromes y enfermedades. De la mismaforma, se han realizado biomonitoreosgenticosparaevaluareldaoenelADNyelporcentajedeaberracionescromosmicasenpoblaciones ecuatorianas afectadas por laexposicin a genotxicos como loshidrocarburos,pesticidasyrayosX.

3.1. Genes, polimorfismos y su asociacinconenfermedades

Elestudiodepolimorfismosenpacientescondiferentes enfermedades, como cncer, esuna lneade investigacinque seha venidodesarrollandoenelEcuadordebidoaqueesde mucho inters cientfico conocer lasfrecuencias polimrficas de los genes paradeterminar si pueden ser consideradosbiomarcadores moleculares especficos paralasdiferentesenfermedades.Una de las causas de mayor ndice demortalidad en el Ecuador es el cncer; estaenfermedad puede desarrollarse debido afactores externos como la exposicin a

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genotxicos, los cuales rompen las cadenasdel ADN, alteran la informacin gentica yporendelasntesisproteicadelosdiferentesgenes relacionados al cncer, como son losgenes supresores de tumores, losreparadores del ADN, los oncogenes y losgenesdeapoptosis.Entre losproyectosde investigacingenticams relevantes que se realizaron estn:encontrar nuevas mutaciones ypolimorfismos del gen RB1 en personas conretinoblastoma (Leone, et al., 2003); elestudio de lamutacin F508 del gen CFTRen pacientes con fibrosis qustica (PazyMio, et al., 1999); el estudio de los genesBRCABLyhRAD5enindividuosconleucemiamieloide crnica (LMC) y leucemialinfoblstica aguda (LLA) (PazyMio, et al.,2002,2010);elanlisisdepolimorfismosdelgen hMSH2 asociado con el linfoma noHogkin (PazyMio, et al., 2002); el estudiodel gen CYP1A1 en personas expuestas apesticidas (PazyMio, et al., 2004); laasociacin entre el cncer de prstata y elgen SRD5A2 (PazyMio, et al., 2009); larelacin entre cncer de pulmn y lasmutacionesL858RyG719SdeloncognEGFR(PazyMio,etal.,2010); laasociacinentrelos genes GPX1 (Pro198Leu) y MnSOD(Ile58Thr) con cncer de vejiga (PazyMio,et al., 2010); la asociacin entre los genesdetoxificadores GPX1, GSTP1 y el genreparador XRCC1 en individuos expuestos aaspersiones areas con glifosato en lafrontera norte del Ecuador (PazyMio, etal., 2011); y la correlacin entre los genesMTHFR,MTRyMTRR,lametilacindelADNyel cncer de prstata (LpezCorts, et al.,2011).3.2. Genotxicos: hidrocarburos, rayos X y

pesticidasEl anlisis citogentico para determinar elporcentaje de aberraciones estructurales ynumricasen individuosesunaherramientamuy til que permite ver el dao a nivelcromosmico de personas enfermas o bajoexposicin de agentes genotxicos comohidrocarburos, rayos X o pesticidas como elglifosato. De la misma forma, la prueba

ensayo cometa es til para determinar elnivelde fragmentacindelADNdebido a laexposicinaagentes txicosquerompen lascadenasdelcidonucleico.En el ao 2008, se public un artculocientfico en la revista Annuals of the NewYork Academy of Sciences, en el cual serealiz unmonitoreo del dao del ADN enindividuosexpuestosahidrocarburosenSanCarlos, Provincia deOrellana. Las evidenciascientficas obtenidas en esta investigacindemostraron que los individuos expuestos ahidrocarburos presentaron alto riesgocarcinognico y mutagnico. Las personasexpuestas a agentes txicos propios de lasindustrias petroleras sufrieron sntomascomo fatiga, dolor de cabeza, micosiscutnea,dermatitis, irritacinnasalyocular,gastritis, nusea y diarrea. El anlisis,desarrollado mediante la prueba ensayocometa, permiti determinar que losindividuos expuestos a los hidrocarburospresentaron alto porcentaje de dao en elADN comparado con individuos sanosconsiderados como control. El anlisiscitogentico determin que las personasexpuestas presentaron rupturascromosmicas y gaps. Mientras que en losestudios genticos se encontr asociacinsignificativadelgenhMSH2conlosindividuosexpuestos a hidrocarburos y derivados delpetrleo(PazyMio,etal.,2008).En los aos 2002 y 2010, se publicaron dosartculos cientficos en las revistasMutationResearch y Oncologa, respectivamente.Ambosartculostrataronsobreelestudiodeaberraciones cromosmicas y dao delADNen trabajadores hospitalarios de losdepartamentos de radiologa expuestos aradiacin ionizante.Enambosestudiossehapodido concluir que existe un efecto nocivode la radiacin ionizanteanivelgenticoenlas personas expuestas ocupacionalmente abajas dosis de rayos X. En el estudio deaberraciones cromosmicas no se encontrdiferencia significativa entre gruposexpuestosycontrol,apesarquepresentaronmayor nmero de alteraciones estructuraleslos individuos expuestos a radiacinionizante. El ensayo cometa demostr que

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existediferenciasignificativaentrelosnivelesde fragmentacin del ADN entre sanos yexpuestos a rayos X. Es por ello que laspersonas expuestas a dosis de radiacinionizante permisible presentanfragmentacin leveensuADNyalteracionescromosmicas estructurales dentro de losrangos normales (PazyMio, et al., 2002;Muoz,etal.,2010).En los aos 2002 y 2004, se publicaron dosartculos cientficos relacionados con elestudio gentico y citogentico de personastrabajadoras en florcolas de Quito yCayambe, las cuales estaban expuestas apesticidas. Estas investigaciones fueronpublicadas en las revistas EnvironmentalHealth Perspectives y Mutation Research,respectivamente. Segn las evidenciasencontradas se concluy que los individuosexpuestos a pesticidas en las florcolaspresentaron un alto riesgo carcinognico

debidoalosagentesgenotxicos.Tantoenelestudio citogentico como en la pruebaensayo cometa hubo diferencia significativaentre los trabajadores expuestos a lospesticidas con los individuos controles noexpuestosaagentestxicos.EstosresultadosnoseasociaronconlosestudiospolimrficosdelgenCYP1A1(PazyMio,etal.,2002;PazyMio,etal.,2004).En los aos 2007 y 2011, se publicaron dosartculos cientficos en las revistas Geneticsand Molecular Biology y Reviews onEnvironmental Health, respectivamente. Losdosestudiostuvieronelobjetivodeevaluaryrealizardiagnsticosgenticos,ambientalesyde salud en poblacin expuesta a lasaspersiones areas con glifosato en lafrontera norte del Ecuador. Ambos estudiosseanalizandetalladamenteen los siguientescaptulos (PazyMio, et al., 2007; PazyMio,etal.,2011).

Linkswebwww.ncbi.nlm.nih.gov/snpwww.humanvariomeproject.com

7Ro Tiputini Parque Nacional Yasun

Provincias de Napo, Pastaza y Orellana

Parque Nacional YasunRefugio de vida del Pleistoceno

Provincias de Napo, Pastaza y Orellana

FotoGrAFA regin Amaznica

8Espacio areo ecuatorianoProvincia de Sucumbos

Reserva Faunstica CuyabenoProvincia de Sucumbos

9Bosque de doselParque Nacional Yasun

Provincias de Napo, Pastaza y Orellana

Bosque hmedo tropicalReserva Faunstica Cuyabeno

Provincias de Sucumbos y Orellana

10

rboles caractersticos de la regin fronteriza con Colombia

Fuente natural de agua susceptible a ser contaminada

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La CeibaProvincia de Sucumbos

Luis BermeoProvincia de Sucumbos

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Luis BermeoPlantaciones

Provincia de Sucumbos

La CeibaPlantaciones con hojas secas

Provincia de Sucumbos

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Ro PutumayoRegin Amaznica

Ro San MiguelFrontera natural entre Ecuador y Colombia

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Ro Putumayo

Ro San Miguel

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Luis BermeoTarde nublada

La CeibaBosque de dosel

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PARTEIICOCTELHERBICIDA4. ElglifosatoLa Nfosfonometil glicina (C3H8NO5P) fuereportada como herbicida en el ao 1971.Esta sustancia conocida comnmente comoglifosato es un herbicida organofosforado,sistmico,noselectivoydeamplioespectro,efectivoparacontrolarymatar todo tipodeplantas anuales, bienales y perennes,incluyendo especies leosas. Adems, es elingrediente activo de varias formulacionescomerciales de pesticidas y herbicidasfabricadas y distribuidas a nivel mundial(Smith,etal.,1992;Duke&Powles,2008).A temperaturaambiente,elglifosatoesunasustancia cristalina de color blanco. En suformacristalina,esteherbicidaestformadopor cargaspositivas ynegativas.En solucinacuosa, los tomos de hidrgeno del cidocarboxlico (COOH) y del grupo fosfato(PO2H2) tienen la capacidad de asociarse (COOH)odisociarse(COO+H+)dependiendodelniveldepHdelasolucin,quevarade5a 9 (USDA, 2003). El glifosato en su gradotcnico contiene un microcontaminantedenominado Nnitroso glifosato (NNG). Laspropiedades fsicas, qumicas y bioqumicasdelglifosatoselasdetallaenlatablaII.1.Actualmente existe en el mercado 35formulaciones comerciales de glifosatoregistradasparaelusocomoherbicidaen laagricultura. Todas estas formulaciones usanalglifosatocomnmentecomosal,siendo laformamsutilizada la sal isopropilaminadeNfosfonometil glicina. El glifosato tieneunasolubilidadrelativamentealtaenelaguay lanaturalezainicadeesteherbicidaretardalapenetracin en las plantas con cutculashidrofbicas, es por esta razn que elglifosato es comnmente formulado consurfactantes que decrecen la tensinsuperficial de la solucin y por ende seincrementa la capacidad de penetracin enlostejidos(WHO,1994;Giesy,etal.,2000).El glifosato es uno de los herbicidas msutilizadosenlaagriculturaanivelmundial.Se

encuentra conformando decenas deproductosdevarias compaaselaboradorasdepesticidas.Laventade losproductosconglifosato han generado gananciasaproximadamente de US$1200 millonesanuales y abarca el 60% de ventasrelacionadas a herbicidas no selectivos(Zeneca, 1995). Este herbicida esmayormenteutilizadoenEstadosUnidosconcerca de 51000 toneladas y en Europa con20000 toneladas (Acquavella, et al., 2004;Kiely,etal.,2004).4.1. MecanismodeaccinElmecanismodeaccindelglifosatoconsisteprincipalmenteen la inhibicin de laenzima5enolpiruvilshikimato3fosfato sintetasa(EPSPS), generando retraso o colapso de laruta metablica shikimato, la cual seencuentra envuelta en la sntesis deaminocidosaromticosesencialescomosonlafenilalanina,latirosinayeltriptfano,ydeesta manera se impide el crecimiento ysupervivencia de plantas ymicroorganismos(USDA,2003;Mladinic,etal.,2009).Apartirdel cido shikmico se producen otrosproductos aromticos como ligninas,alcaloides, flavonoides, cidos benzoicos yfitohormonas propias del metabolismosecundario como los aleloqumicos. Dehecho,un20%del carbonoquees fijadoesutilizadoenestarutametablica(CCE,2007).Debido a que la ruta metablica del cidoshikmiconoexisteenanimales, la toxicidadaguda del glifosato es baja. Este herbicidapuede interferirenmecanismosbioqumicoscomosoneldesacoplamientodelosprocesoscelulares de fosforilacin oxidativa y lainhibicin de oxidasas hepticas de funcinmixta. La fosforilacin oxidativa es unprocesometablicofundamentalenelcuallaenergametablica derivada de la oxidacindenutrientesestransferidayalmacenadaenenlaces fosfato de alta energa; eldesacoplamientode esteproceso resulta enprdida de energa en los organismos y porende sumuerte. Los sntomasdedisfuncin

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en los procesos de fosforilacin oxidativaincluyen incremento del ritmo cardiaco,problemas respiratorios, fiebre, acidosismetablicayprdidadepeso(ATSDR,2001).Lainhibicindeoxidasashepticasdefuncinmixta impide que las enzimas oxidantesacten en el metabolismo de compuestosextraos y txicos. Los sntomas deintoxicacin dependen de altas dosis ytiempo prolongado de exposicin. Sin

embargo, los productos que contienenglifosato tambin contienen otroscompuestostxicos.Elprincipalmetabolitoen ladegradacindelglifosatoenambientes terrestreseselcidoaminometilfosfnico (AMPA), el cual estambintxico.DelAMPApasaametilaminay de ah a formaldehdo, un carcingenoconocido(Cox,1991y1995;Dinham,1999).

TablaII.1.Propiedadesfisicoqumicasybioqumicasdelglifosato

CAS#: 1071836

Nombrequmico: NfosfonometilglicinaClase/usoqumico: Herbicidafosfanoglicina

Solubilidadenagua:12g/L(25C)900g/L,salamina(Knisel,etal.,1992)11,6g/L(Schuette,1998)

Solubilidadenotrossolventes: InsolubleencompuestosorgnicosPesomolecular: 169,07(Budavari,1989)Puntodefusin: 185C(descomponea199C)Presindevapor(mmHg): 500000(Gerritse,etal.,1996)54(Knisel,etal.,1992)

Vidamediaenhojas(das):

1,6(Thompson,etal.,1994)810(Feng&Thompson,1990)10,626,6(Newton,etal.,1984)2,5(Knisel,etal.,1992)46(Siltanen,etal.,1981)

Vidamediaensuelo(das):

2040(Weber,1991)35(Schuette,1998)

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5. Roundup: surfactantes, coadyuvantes ycontaminantes

La Organizacin Mundial de la Saludrecomienda la clasificacin del glifosato deacuerdo con su peligrosidad como de ClaseIV: Poco probable que presente peligro encondiciones de uso normal. La Agencia de

Proteccin Ambiental de los EEUU deNorteamrica (USEPA,1992), loubica comocompuesto Clase III: Irritante leve (WHO,2004). Las caractersticas que se toman encuentaen lascuatrocategorasse lasdetallaenlatablaII.2.

TablaII.2.Listadeproductosinertesenbaseasuspropiedadesnocivas

Propiedadesnocivas

Lista1 Productos inertesquehandemostradopotencial cancergeno, efecto sobre eldesarrollo,efectosneurotxicosoquepresentanriesgosecolgicosyquesonprioritariosenmateriadeaccinreglamentaria.

Lista2 Productosaltamenteprioritariosdebidoaquelosdatosdetoxicidadsonsubjetivosperonoconcluyentes,losefectoscrnicossobrelasaludsonposiblesotienenunaestructurasimilaralosproductosdelalista1.

Lista3 Productos juzgados no prioritarios en trminos de accin reglamentaria puesto que losdatosdetoxicidadolaevaluacindesusestructurasqumicasnopresentaninquietudesencuantoalatoxicidadolosriesgosdeutilizacindelosproductos.

Lista4 Ingredientesinertesgeneralmentereconocidoscomoseguros.Todoproductopesticidacontiene,ademsdesu ingrediente activo, otras sustancias cuyafuncines facilitarsumanejooaumentarsueficiencia. En general, estos ingredientesdenominados inertesno son especificadosen lasetiquetasde losproductos.Enelcasode los herbicidas como el glifosato, se hanidentificado muchos ingredientes inertes.Paraayudaralglifosatoapenetrarlostejidosde las plantas, la mayora de lasformulaciones comerciales incluyen unasustancia qumica surfactante. Por lo tanto,las caractersticas toxicolgicas de los

productos comerciales son diferentes aaquellaspresentadassoloporelglifosato.Las compaas fabricantes de pesticidasutilizan una amplia lista de ingredientesinertes que se encuentran conformandodiferentes frmulas comerciales en base alglifosato. Cada uno de estos compuestosinertes desarrolla sntomas de toxicidadaguda en humanos en altas dosis y tiempoprolongadodeexposicin. La sintomatologade los ingredientes inertes se detalla en lasiguientetabla:

TablaII.3.Ingredientesinertesysintomatologa

Sintomatologa

Sulfatodeamonio Irritacinocular,nusea,diarrea,reaccionesalrgicasrespiratoriasydaoocularirreversibleenexposicinprolongada.

Benzisotiazolona Eccema,irritacindrmica,fotoreaccinalrgicaenindividuossensibles.3yodo2propinilbutilcarbamato

Irritacinocularsevera,mayorfrecuenciadeabortos,alergiacutnea.

Isobutano Nusea,depresindelsistemanervioso,disnea.Metilpirrolidinona Irritacinocularsevera,abortoybajopesoalnacerenanimales.cidopelargnico Irritacinocular,drmicaydeltractorespiratorio.Hidrxidodepotasio Lesiones oculares irreversibles, ulceraciones cutneas profundas,

ulceracionesseverasdeltractodigestivo,irritacinpulmonar.Sulfitosdico Irritacin ocular y drmica concomitante con vmito y diarrea, alergia

cutnea,reaccionesalrgicasseveras.

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Existen varias formulaciones lquidas queestncompuestasporglifosatoyaguacomoson Aquamaster, Glyfos Aquatic, RoundupCustom, Rodeo. Otras formulacionescomerciales compuestas por glifosato ysurfactantes son Credit, Glyfos, Glyfos Pro,Glyfos XTRA, Honcho, Mirage, Razor,Roundup, Roundup PRO. La formulacinherbicida ms utilizada se denominaRoundup, cuya formulacin qumica seencuentra patentada por la compaaMonsanto.El Roundup es una solucin acuosacompuesta por glifosato como ingredienteactivo, polioxietileno amina (POEA) comosurfactante, CosmoFlux 411F comocoadyuvante y Nnitroso glifosato (NNG)

comomicrocontaminante(Doliner,1991;Tsui&Chu,2003).5.1. Polioxietilenoamina(POEA)De acuerdo con la informacin dada porMartin Jelsma, especialista en polticasinternacionales sobre drogas e investigadorasociado de Transnational Institute (TNI), lacompaa Monsanto ha confirmado que elingrediente activo del Roundup Ultra es elmismo glifosato del Roundup comercialcomn. Segn Farm Chemicals Handbook2000,elglifosatose identificaqumicamentecomo una sal isopropilamina de Nfosfonometilglicina.LaformulacinRoundupUltracontiene:

TablaII.4.FormulacinqumicadeRoundupUltra

RoundupUltra

41% Salisopropilaminadeglifosato(ingredienteactivo)44,5% Agua14,5% Aphosphateesterneutralizedpolyethoxylatedtallowaminemixture

SurfactantequeincrementaelpoderdepenetracindelingredienteactivoLa parte polietoxilada significa que tienemltiplesunidades(CH2CH2O),dondeC,HyOson carbono, hidrgeno y oxgeno. Untallowamine es derivado de grasa animal(tallow)ytieneungrupofuncionalamina.Lasaminas son bases dbiles y sus sales deamonio soncidosdbiles,peropueden sercorrosivos a la piel a causa de suspropiedadescido/base(Nivia,2001).El POEA es un agente tensoactivo aninicoutilizado en la formulacin comercialRoundup en una proporcin aproximada de15%(150g/L).Esunderivadodegrasaanimalconocido qumicamente como un aminadograso polioxietileno. Los surfactantesaninicos son frecuentemente utilizados endetergentesyjabonesaninicos(Onil,2001).Este surfactante contiene una variedad decidos grasos incluyendo los cidos: oleico(3743%), palmtico (2432%), esterico (2025%),mirstico (36%) y linoleico (23%), as

como pequeas cantidades de colesterol(Budaveri,1989).Existenvariasformulacionesdeglifosatoquecontienen POEA a nivelesmayores del 20%(200 g/L). El POEA esun surfactanteque seusaparaqueelglifosatopasea travsde lacutcula de las plantas, ya que esta tienecaractersticas no polares (hidrofbicas), loque dificulta la absorcin del qumico. Losllamadosingredientes inertesactancomosolventes y humectantes capaces deaumentar la permeabilidad y atravesar labarreracuticularvegetal(CCE,2007).Varias investigaciones sobre el glifosatoindicanque laadicindesurfactantespuedeincrementar los efectos del herbicida yproducirfitotoxicidad(OSullivan,etal.,1981;Sundaram, 1990; Laerke, 1995; Riechers, etal., 1995; De Ruiter & Meinen, 1996;Sundaram,etal.,1996;Denis&Delrot,1997;Miller,etal.,1998).Adems,variosestudiosconcluyenquelosefectosdelossurfactantes

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puedenllegarasermsperjudicialesparalasplantas y animales que el herbicida solo(Chang,etal.,1999;Garry,etal.,1999;Lin&Garry,2000).El POEA tiene una toxicidad aguda muchomayor que la del glifosato, causa daogastrointestinal, alteraciones del sistemanervioso central, problemas respiratorios,destruccin de los glbulos rojos, daos alhgadoyriones, lesionescutneas(eritema,inflamacin, exudacin, ulceracin), nuseasy diarrea. Adems, el polioxietileno aminaestcontaminadocon14dioxano,elcualseloharelacionadoconeldesarrollodecnceren animales y dao heptico y renal enhumanos(Nivia,2001).La toxicidad aguda del surfactante POEA esentre4y5vecesmayorqueladelglifosatoyRoundup.Ladosisletal(DL50)oralenratases>1.200mg/KgylaDL50dermalenconejoses>1.260mg/Kg(CCE,2007).5.2. CosmoFlux411F

Existeescasa informacin relacionada con lacomposicin y los efectos nocivos de esteproducto qumico. Ha sido utilizado en lasaspersiones areas en la frontera norte delEcuadorcomocoadyuvanteno inicoqueselo aade a herbicidas como Roundup paramejorar la adherencia y uniformidad de laspreparaciones de agroqumicos. Estecompuesto conforma la lista3deproductosmoderadamente txicos, y su vida mediafluctaentre3y60aos(Cox,1991y1995).Su efectividad se considera 4 veces mayorque losaceitesdeaspersinconvencionales,porelsinergismoentreelaceiteparafnicoyeltensoactivoespecializado.Segn la ficha tcnica313,03de laempresacolombiana Cosmagro, comercializadora deeste producto, se describe qumicamente aCosmoFlux411Fcomounamezcladeaceitemineral y surfactantes especializados noinicosconagentesdeacoplamiento.El ingrediente activo es descrito como unamezcla de steres de Hexitan: alcoholeslinealesmsaryletoxilado.Esdecir,mezclas

detensoactivosestereoespecficosnoinicosbasados en alcoholes lineales etoxiladospropoxilados con pequeas cantidades decompuestoaryletoxilado(Cosmagro,2004).El ingrediente aditivo lo conformanisoparafinas lquidas, que son aceitesisoparafnicos de alta pureza, de muy bajafitotoxicidad, de muy bajo contenido dearomticos y baja tensin superficial quemejoralahumectabilidad,promoviendoaslaeficiencia de los ingredientes activos(Cosmagro,2004).ElCosmoFlux411Fesun lquidoamarillentoa25C;puntodellama(flashpoint)mayorde149C; gravedad especfica 0,89; viscosidad60mPaa25C;pHensolucinal1%enaguadestiladaentre6,3 y6,8y concentracindeaceite 8085 (% w/w). Soluble en aceitesminerales, aceites vegetales y solventesorgnicos usados en la formulacin deagroqumicos.Dispensableenaguaformandouna rpida emulsin e insoluble en etanol(Nivia,2001).Este coadyuvante estereoespecfico decarcter no inico, constituido por lacombinacin de aceite parafinado ms untensoactivo adyuvante estereoespecfico,controlalaevaporacinehidrlisisdelactivocon cubrimiento total, garantizandoconcentracin homognea del activo porunidaddereayextendiendoelespectrodelosagroqumicos(Nivia,2001).5.3. Nnitrosoglifosato

El Nnitroso glifosato (NNG) ha sidoreconocido como unmicrocontaminante dela materia activa tcnica y lasconcentracioneshalladashan sidodelordende 0,1 a 0,4ppm (el lmitede deteccinhasidode0,1a0,2ppm)(Onil,2001).Alcombinarseconnitrato(presenteensalivahumana o fertilizantes) el glifosato puedegenerar trazas de Nnitroso glifosato. Lamayora de compuestos de Nnitroso soncancergenos y no existe nivel seguro deexposicinaellos(Cox,1995;Dinham,1999).

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6. Resistenciagenticadeplantasalglifosato

6.1. Resistenciaadquiridanaturalmentecontraherbicidas

La resistencia es la capacidad hereditarianatural de una planta, dentro de unapoblacin, que le permite sobrevivir yreproducirsedespusdeltratamientoconunherbicidacomoelglifosato.Laespeciecomotalesafectadaporlaaplicacindelherbicida,pero la planta genticamente resistentesobrevive y completa su ciclo reproductivo.Laresistenciaaunoovariosherbicidasesunacaracterstica hereditaria cuya transmisin alas generaciones siguientes depender de lanaturaleza del gen o genes involucrados ytambinde lapresindeseleccin impuestaporelusodelherbicida.Elbiotiporesistentesedesarrollaapartirdeuna mutacin natural y espontnea, quepuede ser nica y que da origen a unindividuoespecialentrelosdesuespecie.Esamutacin no tiene ninguna relacin con elherbicidaqueseaplica.Estoquieredecirquelos herbicidas no inducen el cambio(mutacin) que genera el biotipo resistente.Sin embargo, al tener ahora una ventajaadaptativa en presencia del herbicida, estebiotipo es capaz de difundirse ampliamenteen la poblacin, es decir es seleccionadofavorablemente en detrimento de losindividuossensibles.La evolucin de plantas naturalmenteresistentes a herbicidas como el glifosatoconlleva a lo largo del tiempo a gravesproblemasecolgicosyambientalesdebidoala capacidad adaptativa de las malezasresistentes y a la probable extincin demalezas susceptibles al glifosato. Debido aque la naturaleza conforma nichos de lasdiferentes especies animales y vegetales, laintroduccin de sustancias qumicas comoherbicidas o pesticidas altera esta cadenanatural equilibrada, lo que desencadena nosololamuertedelasplantas,sinotambindelasmilesdeespeciesde insectosquevivenysealimentandeellas.

La resistencia de una planta a undeterminadoherbicidasedebealaaparicindeunaoungrupodeplantasquepresentaninformacin gentica modificadanaturalmente en determinado gen, y porende, la especificidad de un herbicida eninhibir determinada enzima codificada poresegennosedayporellolaplantaescapazde ser seleccionada naturalmente parasobreviviryreproducirseenesemedio.Hastafinalesdelao2005seregistraron296biotiposdemalezas resistentesaherbicidas.Esos biotipos pertenecen a 178 especies demalezas distintas: 107 dicotiledneas y 71monocotiledneas. Existen 90 especies deplantas resistentes a herbicidas inhibidoresde laenzimaacetolactatosintetasa (ALS),34especies de plantas resistentes a herbicidasinhibidores de la enzima acetil CoAcarboxilasa (ACCasa) y se ha confirmado unmnimode7especiesdeplantas resistentesal glifosato, inhibidor de la enzima 5enolpiruvilshikimato3fosfato sintetasa(EPSPS).SegnlacompaaMonsantoenArgentina,laprevencin de la resistencia de malezas alglifosato consiste en aplicar la dosisadecuada,enelmomentoadecuadoycon laformulacin adecuada de herbicida.A pesarde las recomendaciones de la propiacompaa, las aspersiones areas en lafronteraecuatoriana se las realizaplicandoun porcentaje de ingrediente activo ysurfactantemayoralpermitido sin tomarenconsideracin otro tipo de aspectosimportantes como la resistencia gentica, lafaunaylasaludhumana.6.2. Plantas transgnicas tolerantes al

glifosatoysusefectosenlasalud

La planta de soja argentina, genticamentemodificada (transgnica) para adquirirresistencia al herbicida glifosato, ha sidodesde1996ampliamentecomercializadaparala agricultura de ese pas (NationalAgriculture Statistics Service, 2005). Al igualque la soja argentina, el principio detransgnesis est siendo aplicado con variosproductosagrcolasanivelmundial.

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Los herbicidas que tienen como ingredienteactivo al glifosato, como el Roundup,cumplenlafuncindeinhibirlaenzimaEPSPSen lavashikimato;estavaes indispensablepara la vida de las plantas. Las plantastransgnicas presentan una versin de laenzima EPSPS tolerante al glifosato. Elprocesode transgnesis consisteenaislarelgen CP4 EPSPS de Agrobacterium sp. cepaCP4 resistente al glifosato; este gen se loclona y una vez transfectado a la soja, estaadquiere la capacidad de tolerar lasaspersiones con glifosato debido a lacodificacin de la enzima CP4 5enolpiruvilshikimato3fosfato sintetasatolerante al glifosato (Heck, et al., 2005;Funke,etal.,2006).Desde 1996 comenz la comercializacin dela soja transgnica (National AgricultureStatisticsService,2005).Enun informepublicado el ao2002porelInstitute of Science in Society (ISS) deInglaterra,elProfesorJoeCummisrevelaquelaalertasanitariaconrespectoalapresencia

de acrilamida txica en alimentos cocidosestrelacionadaconelglifosato,elherbicidaquees toleradopor loscultivos transgnicosmsdifundidos, tales como la sojaRoundupReady. La acrilamida es un potenteneurotxico, afecta la funcin reproductivamasculina, causamalformaciones congnitasycncerenanimales(ISIS,2002).Las evidencias y estudios realizados indicanque la acrilamida es liberada por lapoliacrilamida ambiental, cuya fuenteprincipal se halla en las frmulas herbicidasen base a glifosato. La coccin de vegetalesque han estado expuestos al glifosatoutilizadoencultivostransgnicostolerantesaherbicidas o usados en la preparacin delsueloencultivosconvencionalesresultaraenuna adicional liberacin de acrilamida. Lasituacinesms compleja cuandoenpasescomo Estados Unidos, los aditivos tipopoliacrilamida se consideran secretocomercial y la informacin sobre lacomposicin de las frmulas herbicidas noest al alcance del pblico (Smith, et al.,1997;Weiss,2002).

Linkswebwww.epa.govwww.isis.org.ukwww.nass.usda.gov

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FotoGrAFA Flora

Ceiba pentandraParque Nacional YasunProvincias de Napo, Pastaza y Orellana

Flora caracterstica del YasunBosque hmedo tropical

Provincias de Napo, Pastaza y Orellana

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rbol caracterstico del YasunProvincias de Pastaza y Orellana

rbol caracterstico de la regin fronterizaProvincia de Sucumbos

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Theobroma cacaoProduccin de polvo y grasa de cacaoProvincia de Sucumbos

Artocarpus heterophyllusFruta de Jack

Provincia de Sucumbos

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Theobroma cacaoAfectado por herbicidas txicos

Provincia de Sucumbos

Hojas quemadas por herbicidas txicosComunidad 5 de AgostoProvincia de Sucumbos

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ArrozalesProvincia de Sucumbos

CultivosProvincia de Sucumbos

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MalangaProvincia de Sucumbos

MontepaProvincia de Sucumbos

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Carica papayarbol de papaya

Eugenia stipitataAraz

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PARTEIIITOXICOLOGA7. Toxicologa gentica y sus efectos en la

saludCon la revolucin industrial y agrcola delsigloXXylaaplicacindenuevastecnologasparadiversosfinescomoproduccinvegetal,industriaqumicayproduccindeenerga,haido aumentando enormemente la presenciadeagentesfsicosyqumicos.Apartirde 1940 seha venidodemostrandoque el usode estos agentesqumicos comolospesticidassoncapacesdeproducirefectosperjudiciales sobre los seresvivos,desde lasbacterias hasta los mamferos msevolucionados,incluyendoalhombre.La toxicologa gentica se ocupafundamentalmente de la identificacin y elanlisis de la accin de cualquier agentefsico,qumicoobiolgicoque sea capazdeejercer efectos txicos sobre el materialgenticodelosseresvivos.Actualmentesesabequeungrannmerodeproductos qumicos, tanto naturales comosintticos, as como las radiacionesionizantes,laluzultravioleta,algunasfibrasydistintos virus y bacterias pueden provocaralteracionesgenticasen lasclulasyen losorganismos. Si las clulas afectadaspertenecen a la lnea germinal oreproductora, pueden aparecer distintastaras genticas hereditarias. Si las clulasafectadas son clulas somticas, lasmutaciones pueden conducir al cncer,envejecimiento y aterosclerosis. As mismo,tambin es conocido que estos agentespotencialmentemutagnicospueden ejercersu accin nociva durante el desarrolloembrionario,produciendoalteracionesmsomenos graves durante el desarrollo normal.Porlotanto,nodebemosolvidarque,aunqueen lamayora de los casos, la teratognesisno tiene una base gentica, existen agentesgenticosconaccinteratognica.Las exposiciones teratognicas suelenproducir anomalas mltiples, siendo

responsablesdealrededordel10%de todaslas anomalas congnitas en humanos. Porejemplo, se sabe que la radiacin ionizantepuede producir microcefalia; la iodinaradiactiva puede originar cretinismo; losbifenilos policlorinados (PCBs) puedenproducir retraso en el crecimiento fetal,hiperpigmentacin difusa y aparicin dedientes en el neonato; el alcohol origina unsndrome caracterstico que incluyedeficienciaenelcrecimiento,retrasomental,anomalasdelcomportamientoyunaspectofacialtpico; lacocanaseharelacionadoconroturas de placenta y rompimientosvasculares tales como lesionesencefaloclsticasenel feto; la talidomidaenel primer trimestre de gestacin puedeproducir distintos efectos, especialmentegraves anomalas en el desarrollo de lasextremidades; la aminopterina y otroscompuestos citotxicos destruyenrpidamente lasclulasencrecimientoenelfeto y causandeficiencias en el desarrollo yunavariedaddeanomalas.Dada la importancia de las consecuenciasadversasquelosagentesgenotxicosejercensobre los seres vivos y la relacin entretoxicidad gentica,mutacin, cncer y otrasenfermedades, la toxicologa genticadesempea un papel relevante con fines demejorarlasaludpblica.Sinlugaradudas,latoxicologagenticaha contribuidoaque setome conciencia de la importancia depreservar nuestro patrimonio gentico yreduciralmximoelriesgoquesupone,paracualquierservivoengeneral, laexposicinaagentes mutagnicos y/o carcinognicos(Johansen&Mange,1999;PazyMio,etal.,2002).8. Estudios toxicolgicos de pesticidas en

humanosEl glifosato es uno de los herbicidas msampliamente utilizado a nivel mundial, con20000 toneladas en Europa y 51000toneladas en EstadosUnidos (Acquavella, et

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al.,2004;Kiely,etal.,2004).Laactividaddelglifosato se debe principalmente a lainhibicin de la enzima 5enolpiruvilshikimato3fosfato sintetasa, lacualgeneraelretrasodelavashikimatoquese encuentra envuelta en la sntesis deaminocidos aromticos en plantas ymicroorganismos (USDA, 2003; Mladinic, etal., 2009). Se encuentra comnmenteformulado con surfactantesquedecrecen latensin superficial de la solucin eincrementan la penetracin en los tejidos(OMS, 1994). Round up es una solucinacuosadesalisopropilaminadeglifosatoconPOEA como surfactante y Cosmoflux 411Fcomoadyuvante(Bolognesi,etal.,2009;Tsui&Chu,2003).

Existenvarias investigacionesanivelmundialquedemuestranqueelusodelaformulacindel glifosato desarrolla niveles de toxicidad,tanto altos como bajos, en diferentesorganismos. Este herbicida puede interferircon algunas funciones enzimticas enanimales, pero los sntomas deenvenenamiento dependen de la dosis y eltiempodeexposicin.En humanos, se ha demostrado que elglifosato es txico en clulas placentarias yembrionariasyenlabiosntesisdeesteroidessexuales (Benachour & Sralini, 2009). Estepesticida mezclado con adyuvantes haresultado ser citotxico a travs dealteraciones de la enzima succinatodeshidrogenasaytambinsehademostradoqueestxicopara lasclulasmononuclearesde la sangre perifrica (Martnez, et al.,2007).Cuatroestudioscasocontrol sugierenunaasociacinentreelglifosatoyelriesgoadesarrollar linfoma noHodgkin (DeRoos, etal.,2003;Eriksson,etal.,2008;Hardell,etal.,2002;McDuffie,etal.,2001).En el ao 2007, se public en la revistaGenetics and Molecular Biology un estudiorelacionado con la evaluacin del dao delADNen lapoblacinecuatorianaexpuestaalglifosato(PazyMio,etal.,2007).El estudio de la fragmentacin del ADN serealiza travsde la tcnicaensayocometa

(ensayodeelectroforesisdeunasolaclula),queesunaherramientadegranutilidadparainvestigar dao del ADN y su posiblecorrelacinconmecanismosdereparacin.Elensayocometatieneexcelentesensibilidadyespecificidad para dao del materialgentico; cuando el ncleo celular essometido a electroforesis los fragmentosrotos migran fuera del mismo, dando laimagen de una cometa, dependiendo deltamaode los fragmentosdeADN,comodela cantidad delmaterial gentico destruido.La cluladaada tienedosopciones:1)queseareparadoelADNporsistemaspropios,2)que no sea reparado por fallascircunstanciales o constitucionales: si afectalas clulas germinales se desencadenardificultades reproductivas o efectosteratognicos en la descendencia; si afectalas clulas somticas se desencadenarapoptosiscelularo, si lamutacinnopuedeser eliminada, se generara la lnea celularqueocasionaruncncer.El objetivo del estudio fue determinar laposible influencia de la formulacin delglifosato, usado durante las aspersionesareasdelao2006,enelmaterialgenticode los individuos expuestos. El grupoexpuesto consisti de 24 individuos quienesvivierona3KmsomenosdelafronteraentreEcuador y Colombia. El grupo de individuosexpuestos manifest sntomas de toxicidaddespus de varias exposiciones a lasaspersiones areas, entre ellos: dolorintestinalyvmito,diarrea,fiebre,doloresdecabeza, insomnio, cansancio, quemadura deojos y piel y dificultad al respirar (PazyMio,etal.,2007).Luego de los anlisis se encontr que losindividuos expuestos a las aspersiones conglifosato presentaron altos niveles demigracin del ADN a diferencia de losindividuoscontrol (p

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FiguraIII.1.TiposdecometassegnelniveldedegradacindelADN

TablaIII.1.MedicionesdeldaodelADNenindividuosexpuestosalasaspersiones

Individuosexpuestosalglifosato

Individuos(gnero,ao)a

Nmerodeclulasanalizadasencadagrupo MigracindelADN(m)A B C D E Media Mediana

1E(F,53) 2 120 76 5 3 39,5 32,52E(F,37) 13 92 82 14 0 44,1 32,53E(F,40) 2 64 62 77 4 56,6 52,54E(M,27) 8 75 64 47 8 49,2 37,55E(F,44) 9 138 63 3 0 34,6 30,06E(F,50) 51 113 30 3 0 30,8 27,57E(F,38) 21 139 48 3 0 33,2 30,08E(F,46) 21 116 72 4 0 35,2 30,09E(F,55) 26 100 84 1 0 32,8 30,010E(F,50) 26 100 84 1 0 34,2 30,011E(F,22) 28 123 60 0 0 32,0 27,512E(F,27) 11 130 63 6 0 33,7 30,013E(F,28) 40 132 40 2 0 31,0 30,014E(F,59) 10 96 99 1 0 36,4 32,515E(F,55) 35 110 62 1 0 32,7 30,016E(F,17) 60 101 44 1 0 31,3 37,517E(F,34) 7 114 57 2 0 33,4 30,018E(F,45) 10 150 50 4 0 33,0 30,019E(F,28) 13 160 44 0 0 31,3 27,520E(F,21) 1 153 47 3 0 33,2 30,021E(F,34) 2 130 25 1 0 31,8 30,022E(F,23) 0 29 173 2 0 39,3 37,523E(F,34) 2 88 115 1 0 35,5 37,524E(F,42) 93 103 9 0 0 27,6 27,5

Edadmedia=3812,2b 35,56,4c 305,4daF=femenino,M=masculino;b,cMediadesviacinestndar;dValordelamedianadesviacinestndar

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TablaIII.2.MedicionesdeldaodelADNenindividuosnoexpuestosalasaspersiones

IndividuosnoexpuestosalglifosatoIndividuos

(gnero,ao)aNmerodeclulasanalizadasencadagrupo MigracindelADN(m)

A B C D E Media Mediana1U(F,17) 150 59 3 0 0 26,2 25,02U(F,40) 164 43 4 0 0 25,4 25,03U(F,26) 165 40 2 0 0 25,7 25,04U(M,14) 111 96 6 0 0 27,3 26,55U(M,32) 165 38 3 0 0 25,9 25,06U(M,21) 171 35 1 0 0 25,7 25,07U(M,16) 177 25 6 0 0 25,8 25,08U(F,47) 176 25 3 0 0 25,7 25,09U(F,15) 190 14 1 0 0 25,2 25,010U(F,36) 179 25 1 0 0 25,4 25,011U(F,21) 150 46 9 0 0 26,3 25,012U(F,43) 148 49 15 0 0 26,8 25,013U(F,53) 161 27 10 0 0 26,1 25,014U(F,35) 164 23 21 0 0 27,0 25,015U(F,38) 169 28 11 0 0 26,4 25,016U(F,22) 183 15 8 0 0 25,1 25,017U(F,71) 191 8 5 0 0 25,0 25,018U(F,39) 195 13 6 0 0 25,5 25,019U(F,21) 179 20 8 0 0 25,9 25,020U(F,50) 190 14 2 0 0 25,3 25,021U(F,43) 150 56 9 0 0 26,4 25,0

Edadmedia=3315b 25,940,6c 250,3daF=femenino,M=masculino;b,cMediadesviacinestndar;dValordelamedianadesviacinestndarLos compuestos formulados a partir demezclas de herbicidas con glifosato sonmutgenos ms potentes paramicroorganismos, plantas, animales yhumanos, a diferencia del mecanismo deaccindel glifosato solo.Esporelloque losindividuosexpuestosalglifosatopresentaronaltos niveles de dao en el ADN encomparacinconlosindividuosnoexpuestosalasaspersionesareas.Conelfindegenerarunespaciodeanlisisyreflexin acadmica y cientfica sobre elestadosanitariode lospueblos fumigados,ydeescucharyconteneralosmiembrosdelosequiposde saludque vienendenunciando yenfrentando este problema, la Facultad deCienciasMdicasde laUniversidadNacionalde Crdoba (UNC) de Argentina convoc alPrimer Encuentro Nacional de Mdicos dePueblosFumigadoslosdas27y28deagostodel2010.Lasexposicionesyrelatosdelosparticipantesfueron coincidentes con respecto a la

observacin clnica de una gama deenfermedadesyafeccionesde la saluden lapoblacinsujetaa fumigaciones.Loquemsalarma a los mdicos de los pueblosfumigadossondosobservacionesprincipales:1)unamayorcantidadderecinnacidosquepresentaron malformaciones congnitas ymuchos ms abortos espontneos que losque habitualmente se producan en suspoblaciones de pacientes, y 2) una mayordeteccin de cnceres en nios y adultos, yenfermedades severas como prpuras,hepatopatas txicas y trastornosneurolgicos. Los mdicos destacaron queellos atienden, en general, desde hacemsde25aosalasmismaspoblaciones,peroloque encuentran en los ltimos aos esabsolutamente inusual y lo vinculandirectamentea lasfumigacionessistemticasconplaguicidas.El Dr. Rodolfo Pramo, mdico pediatra yneonatlogo del hospital pblico deMalabrigo,Argentina,resaltlaalarmaqueleprodujoencontrar12casosdeneonatoscon

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malformaciones sobre 200 nacimientosanuales en el ao 2006. Al igual que los 4casos de nios muertos a causa demalformaciones congnitas nacidos en elpequeopueblodeRosariodelTala,zonademasivafumigacinconagrotxicos(PENMPF,2010).La Dra. Mara del Carmen Seveso, jefa deterapia intensiva del hospital 4 de junio dePresidencia Roque Saenz PeaChaco,present un panorama desolador en lospueblosdelcentrode laProvinciadelChacocomoNapenay,Gancedo, Santa Silvina,TresIsletas,ColoniaElisayAviaTerai,en losquehubo muchos casos de enfermos coninsuficiencia renal, malformacionescongnitas en hijos de madres jvenes,cncer en personas muy jvenes, abortosespontneos y dificultades para quedar

embarazadas, problemas respiratorios yalrgicosagudos.Todosellosvinculados,porlos equipos de salud, a un mayor nivel decontaminacin qumica del ambiente,generado por la prctica agroindustrialimpuesta en la zona, que desplaz a lospequeos y numerosos predios de algodnpreexistentes y extermin al bosque nativo(PENMPF,2010).LaDra.AnaLaOtao,delegadanacionaldelMinisteriodeSaludenelChaco,presentlosresultados de una investigacin donde sedestaca claramente un aumento a nivelprovincialdelaincidenciademalformacionescongnitasenrecinnacidos,segnlosdatosdelServiciodeNeonatologadelHospitalJ.C.Perrando de Resistencia Chaco (Tabla III.3)(PENMPF,2010).

TablaIII.3.Aumentodemalformacionescongnitas

Ao Casosregistradosde

malformacionesNacidosvivos Incidencia

(malformados/10000nacidosvivos)1997 46 24030 19,1/100002001 60 21339 28,1/100002008 186 21808 85,3/10000

En laProvinciadelChacoahora se reconocequelaactividadlaboralconagroqumicosolaexposicinhabitacionalest relacionada conproblemas reproductivos, abortosespontneos repetidos y gravesmalformacionescongnitas,como laseriedecasos de malformaciones congnitas cuyasmadres presentan antecedentes directos deexposicin con plaguicidas, recogida por elDr. Horacio Lucero jefe del laboratorio debiologamoleculardel InstitutodeMedicina

Regional de la Universidad Nacional delNordeste, quien los viene registrando yestudiandodesdehacemsde10aos; susobservaciones han sido totalmenteconfirmadas(PENMPF,2010).Conrespectoalcncer infantil, laDra.Otaosealque lastasasde incidenciadelcncerhan aumentado marcadamente sobre losniveles previamente existentes en susregistros(TablaIII.4).

TablaIII.4.Aumentodecasosdecncerinfantil

Ao Casosregistradosdecncerinfantil Poblacinmenora15aos Incidencia1985 29 275858 10,5/1000001991 26 323788 8,03/1000002001 40 354991 11,3/1000002007 59 376833 15,7/100000

Se analiz la incidencia de cnceres en elpueblo ms agredido con agrotxicos (LaLeonesa),ysecomparconpuebloscercanosmedianamente fumigados (Las Palmas), y

pocofumigados(PuertoBermejo)(TablaIII.5)(PENMPF,2010).

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TablaIII.5.Incidenciadecnceresinfantiles

Municipio Poblacin(2001)

Menoresde15aos(2001)

Casosesperados

Casosregistrados Incidenciaanual

LaLeonesa 10067 2960

0,41casos/ao

1996:1 caso1997:1caso2000:1caso2003:2casos2004:1caso2008:1caso2009:1caso

199019990,2casos/ao

200020090,6casos/ao

LasPalmas 6593 2146

0,3casos/ao

1993:1caso1995:1caso2006:1caso

199019990,2casos/ao

20002009

0,1casos/ao

PuertoBermejo 1832 652

0,09casos/ao

1995:1caso2008:1caso

199019990,1casos/ao

20002009

0,1casos/ao

El Centro Latinoamericano de Registro deMalformacionesCongnitas(ECLAM)informque la Provincia deMisiones tiene una tasade 0,1 / 1000 nacidos vivos con defecto decierredeltuboneural;porelcontrario,elDr.Demaio,cirujanopeditricoyjefedelserviciode pediatra del hospital de Posadas enMisiones,registraensuhospitalunatasade7,2 / 1000nacidos vivos (70 vecesms). Suequipogeoreferencielorigendelasfamiliascon estos graves e invalidantes dficits ytodos provienen de zonas fuertementefumigadas(PENMPF,2010).LaDra.Mara Fernanda Samoniello, junto alequipo de toxicologa, farmacologa ybioqumica legal de la Universidad Nacionaldel Litoral, se ha dedicado al estudio debiomarcadores de reaccin celular en

personas expuestas a plaguicidas en formadirecta(fumigadoresdelcordnfrutihortcolade Santa Fe) e indirecta (no fumigadores),quienes han sido evaluados mediante elensayo cometa para determinar dao yfragmentacin del ADN. Este grupo detrabajo presenta varias publicacionesnacionales e internacionales (Simoniello, etal.,2007,2008,2010).Los resultadosmostraronqueambosgruposdeexpuestosa losplaguicidas(ocupacionalyhabitacional) tenan un ndice de daogentico estadsticamente muy superior algrupo control (no expuestos a plaguicidas),diferencia que es estadsticamentesignificativa yque semantuvo en el anlisisdereparacindedaogentico(TablaIII.6).

TablaIII.6.ndicededaodelADNmedianteelensayocometa

Ensayocometa Control(n=30) Expuestosdirectos Expuestosindirectosndicededao(mediaSDa)

113,3613,48 214,9215,44 221,0618,32aSD=desviacinestndarPor el contrario, existen investigacionesquehan demostrado un nivel de toxicidad bajodel glifosato, entre ellos se destacan: unestudio realizadoporBolognesi,etal.,enel

cual efectan un anlisis citogentico aagricultores de cinco regiones de Colombia(Bolognesi,etal.,2009);unestudiorealizadoporSanin,etal.,enelcualdemuestran lano

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asociacinentreelglifosatoylaprolongacinen el tiempo de embarazo de las mujeres(Sanin, et al., 2009); yun estudio en elquedemuestran el bajo riesgo genotxico delglifosatoenelambienteencomparacinconproductos utilizados en la produccin decocanaenColombia(Solomon,etal.,2009).9. Estudios toxicolgicos de pesticidas en

otrosorganismosNo solamente existen estudios para evaluarla toxicidad de una amplia gama depesticidas, como el glifosato, en humanos,sino que tambin se han realizadoinvestigacionesendiversasespeciesanimalescomo anfibios, ratones, conejos, erizos demar,entreotros.En anfibios, renacuajos de Rana pipiensSchreber demostraron decrecimiento en lalongitud bocacloaca e incremento de laetapademetamorfosis, tambin seobservdaoen lacolayanomalasanivelgonadal.Latoxicidaddelospesticidasesunfactorqueha contribuido en el declinamiento de losanfibiosanivelmundial (Howe,etal.,2004;Dinehart,etal.,2009).Encuantoaldesarrollodeloshuevosdeerizode mar, el glifosato previene la sntesis deenzimasyalhaberdaoenelADNseactivaelpuntodecontrolCDK1/ciclinaBenelciclocelular desencadenando la muerte celularprogramadamedianteapoptosis(Marc,etal.,2002; Bell, et al., 2007; Benachour, et al.,2009).En conejos, el tratamiento con glifosato haresultadoenlaprdidadepesocorporal,bajaconcentracindeespermayalteracinen laosmolalidaddelsemen(Yousef,etal.,1995).Mientrasqueenmuestrasmitocondrialesdehgado de ratn se ha observado queRoundupaltera loscomplejosmitocondriales

IIyIIIpermitiendolaformacindeaductosdeADN tanto en el hgado como en el rin(Peixoto,etal.,2005).El laboratorio de embriologamolecular delConsejo Nacional de InvestigacionesCientficasyTcnicas(CONICETUBA),dirigidopor el Dr. Andrs Carrasco, ha venidoestudiando el glifosato como noxa deldesarrollo embrionario en modelos devertebrados con reconocida compatibilidadcon el desarrollo embrionario humano.Carrasco, et al., verificaron los efectosteratognicos del glifosato, incubando einoculando embriones anfibios y de polloscon dosis muy diluidas del herbicida. Losresultados encontrados fueron disminucindel largo del embrin, alteraciones en laformacindel eje embrionario,modificacindel tamao de la zona ceflica concompromiso en la formacin del cerebro yreduccin de ojos, alteraciones de los arcosbranquiales y placoda auditiva y cambiosanormales en losmecanismos de formacinde la placa neural que podran afectar elnormaldesarrollodel cerebro,del cierredeltubo neural u otras deficiencias del sistemanervioso(Paganelli,etal.,2010).Al medir la actividad de algunos sistemasenzimticos, se descubri que el glifosatoaumenta la actividad endgena del cidoretinoico; la manifestacin de los daosestructuralesen losembriones fue revertidacuando se utiliz simultneamente alherbicida,unantagonistadelcido retinoico(Paganelli,etal.,2010).Los autores concluyen afirmando que elefecto directo del glifosato sobre losmecanismos iniciales de lamorfognesis enembriones de vertebrados, generapreocupacinpor los resultados clnicosquese observan en la descendencia de laspoblaciones expuestas a glifosato en loscampos agrcolas (Paganelli, et al., 2010).

Linkswebwww.scielo.br/pdf/gmb/v30n2/a26v30n2.pdfwww.fs.fed.us/r5/hfqlg/publications/herbicide_info/1996_glyphosate.pdf

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FotoGrAFA Anfibios y reptiles

Bufo sp.Parque Nacional Yasun

Provincias de Napo, Pastaza y Orellana

RenacuajosParque Nacional Yasun

Provincias de Napo, Pastaza y Orellana

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Diversidad de anfibiosParque Nacional Yasun

Provincias de Napo, Pastaza y Orellana

Diversidad de anfibiosReserva Faunstica Cuyabeno

Provincias de Sucumbos y Orellana

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Caiman nigerReserva Faunstica Cuyabeno

Provincias de Sucumbos y Orellana

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PARTEIVASPERSIONESAREAS10. Biodiversidad amaznica ecuatoriana:

recursosyamenazasLa regin amaznica es uno de losecosistemas o biorregiones geogrficasmsimportantes del planeta, y desempea unpapelecolgicofundamentalanivelmundial.Esta reginequivaleaun terciodel totaldelosbosques tropicalesdelplaneta,ysus rosconstituyen la quinta parte del agua dulceque circula por la corteza terrestre. LaAmazonia posee la mayor diversidadecolgica en su fauna y flora. Asimismo,permite la regulacin de oxgeno y gascarbnico para Sudamrica y el mundo(Veyrunes,2008).ElEcuadoresunpasprivilegiadoporposeeruna porcin de este gran ecosistema yalbergar la gran biodiversidad presente enesteyotrosecosistemaspropiosdelareginandina, siendo el Ecuadorunode lospasesconmayorbiodiversidadanivelmundial,consolo270,600km2de territorionacional,estodebido a su alta variedad de factoresclimticos y geogrficos (Izquierdo, et al.,2000).Dentro de los ecosistemas presentes en elEcuador,quevandesdeelpramoenzonadealtitud (hasta los4700msnm)pasandoporelbosque nublado a altitudes intermedias, elbosque hmedo tropical, en tierras bajas,ocupa una gran porcin del territorioecuatoriano, principalmente en la reginamaznica. Estos bosques son de granimportancia debido a la extensin queocupanysusriquezasecolgicas,ademsdesu alta diversidad y heterogeneidad, lo cualse encuentra mayormente reflejado en lareginorientaldelpas correspondientea laAmazonia ecuatoriana (Palacios& Jaramillo,2001).El levantamiento sucesivo y final de losAndes, caus la separacin progresiva dezonasdevegetacintropicaleneloeste,delagran zona que actualmente llamamosAmazonia;elclimasevolvimshmedopor

el levantamiento de la cordillera, y sedesarrollunafloradeextraordinariariquezacon abundantes elementos endmicos (Vander Hammen, 2000). Aproximadamente un80% de endemismo, y su diversidad puedeexplicarse por el predominio de unaespeciacin aloptrica y por el equilibrioecolgico y evolutivo de la regin comoconsecuenciadellevantamientodelosAndes(Palacios&Jaramillo,2001).A menudo a la regin amaznica se la hadescrito como una extensin montona debosque de dosel alto que cubre ms de lamitad del continente sudamericano, sinembargo existe una alta heterogeneidad deespecies dentro de este ecosistema, lavariabilidaddelacomposicindeespeciessemanifiesta a escala de cuenca, regional ylocal. Tras varia investigaciones se hademostradoestaheterogeneidadmostrandoflorasconunamarcadadiferenciaregional,yunadistribucindevertebrados limitadaporros, locualconllevaa lapresenciadevariasespecies y subespecies endmicas (Killeen,2007). En el Ecuador, a pesar de su cortaextensin en relacin al territorio total queocupa la Amazonia, la heterogeneidad deesteecosistemaseencuentrareflejadaenloscambios de dominancia de especies en lasdistintasprovinciaspresentesenlaAmazoniaecuatoriana(Palacios&Jaramillo,2001).En cuanto a su biodiversidad, la Amazoniaecuatoriana alberga una gran riquezabiolgica, y contiene el 27% de las especiesdelostrpicosyalmenosel13%deespeciesvegetales del planeta, por este motivo elbosque hmedo tropical amaznico delEcuador consta como uno de los diezhostpots de biodiversidad de los trpicos.Adems, el Ecuador ocupa un lugarimportanteenlariquezadeanfibios(eltercerlugar a nivel mundial con 402 especies)(Izquierdo, et al., 2000). Y es el bosquehmedo tropical, principalmente el de laregin amaznica, el que contiene los

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mayoresporcentajesdeespeciesdeanfibiosyreptilesregistradosenelpas(Izquierdo,etal.,2000).Debido a la alta diversidad de los bosquesamaznicos,estapresentaungranpotencialeconmico para los pases en vas dedesarrollo como es el Ecuador, y existenactividades de extraccin de recursosnaturales de forma sustentable as comodestruyendoelequilibriodeesteecosistema,como es el caso de la extraccin petrolera,mineraymaderera,ademsdelaganaderayel uso de pesticidas en la agricultura, lascualessemanejandemaneraresponsableenalgunoscasosoirresponsablementeenotros;sin embargo, estas actividades siempretienenunnivelde impactoenelecosistema.Adems del impacto directo que estasactividades tienen sobre el ecosistema,generan efectos secundarios como laconstruccindecaminosenreasremotas,locual estimula la migracin humana, queconlleva a un cambio acelerado del uso delsueloyaunaumentodelafragmentacindelhbitat.Puestoque las tierrassituadasenelpie demonte y las llanuras adyacentes sonesencialmente planas, proliferarn loscaminos secundarios, causando una grandeforestacin, fragmentacin y degradacindelosbosques(Killeen,2007).En el Ecuador, las tasas anuales dedeforestacin varan entre 0,5% y 2,4%,portanto, en la Amazona ecuatoriana seperderan anualmente entre 46,000 y220,800hectreasdebosques (Brito, 2006),lo cual conlle