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    Laboratorio de Tcnicas Citolgicas

    UNIVERSIDAD VERACRUZANAFACULTAD DE BIOANLISIS

    REGIN VERACRUZ

    MANUAL DE PRCTICAS DE LABORATORIO

    CATEDRTICA:

    Dra. Martha Elva Daz Viveros

    ALUMNO:

    FECHA:

    Facultad de Bioanlisis, Regin Veracruz.

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    Prctica No. 1

    DESCRIPCION, MANEJO Y CUIDADOS DEL MICROSCOPIO COMPUESTO EILUMINACIN DE KHLER

    * FUNDAMENTO:El microscopio como su nombre lo indica, es un instrumento

    ptico que amplifica la imagen de un objeto pequeo, las imgenesmicroscpicas pueden aumentar de 100 a 2000 veces el tamaooriginal. No obstante, la funcin ms importante del instrumento no essolo ver los objetos pequeos sino interpretar lo que se ve, debido aesto, el empleo del microscopio exige ms que en ningn otro caso, ungran conocimiento del instrumento y su adecuado manejo para lograrimgenes amplificadas con la menor cantidad posible de defectospticos y el logro de contraste adecuado.

    El microscopio es el instrumento que ms se usa en loslaboratorios que estudian imgenes pequeas. Actualmente existendos tipos de microscopios: el ptico y el electrnico. En el microscopioptico el aumento del objeto se consigue usando un sistema de lentesque manipula el paso de los rayos de luz entre el objeto y los ojos. Elmicroscopio electrnico utiliza un rayo de electrones controlado por uncampo magntico. A nivel del laboratorio, en donde el Qumico Clnicodesempea su principal funcin, el microscopio es un instrumentofundamental de trabajo, por lo anterior, se considera necesario que enla formacin del Qumico Clnico se ponga principal inters en suenseanza.

    El microscopio compuesto es un instrumento ptico que se empleapara aumentar o ampliar las imgenes de objetos y organismos novisibles a simple vista. El microscopio ptico comn est conformadopor tres sistemas:

    a. El sistema mecnico est constituido por una serie de piezas enlas que van instaladas las lentes que permiten el movimientopara el enfoque.

    b. El sistema ptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de

    tal manera que produce el aumento de las imgenes que seobservan a travs de ellas

    c. El sistema de iluminacin comprende las partes del microscopioque reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz necesariapara efectuar la observacin a travs del microscopio.

    La parte mecnica del Microscopio

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    La parte mecnica del microscopio comprende: el pie, el tubo, elrevlver, el asa, la platina, el carro, el tornillo macromtrico y el tornillomicromtrico. Estos elementos sostienen la parte ptica y deiluminacin, adems permite los desplazamientos necesarios para elenfoque del objeto.

    El pie. Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tienepor lo general forma de Y o bien es rectangularEl tubo. Tiene forma cilndrica y est ennegrecido internamente paraevitar las molestias que ocasionan los reflejos de la luz. En suextremidad superior se colocan los oculares.El revlver. Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales seenroscan los objetivos. Al girar el revlver, los objetivos pasan por eleje del tubo y se colocan en posicin de trabajo, la cual se nota por elruido de un pin que lo fija.La columna, llamada tambin asa o brazo, es una pieza colocada en

    la parte posterior del aparato. Sostiene el tubo en su porcin superior ypor el extremo inferior se adapta al pie.La platina. Es una pieza metlica plana en la que se coloca lapreparacin u objeto que se va a observar. Presenta un orificio en eleje ptico del tubo que permite el paso de los rayos luminosos a lapreparacin. La platina puede ser fija, en cuyo caso permaneceinmvil; en otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante tornilloslaterales puede centrarse o producir movimientos circulares.Carro. Es un dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizarla preparacin con movimiento ortogonal de adelante hacia atrs y de

    derecha a izquierda.El tornillo macromtrico. Girando este tornillo, asciende o desciendeel tubo del microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a unacremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rpido de lapreparacin.El tornillo micromtrico. Mediante el movimiento casi imperceptibleque produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exactoy nitido de la preparacin. Lleva acoplado un tambor graduado endivisiones de 0,001 mm que se utiliza para precisar sus movimientos ypuede medir el espesor de los objetos.

    Sistema pticoEl sistema ptico es el encargado de reproducir y aumentar lasimgenes mediante el conjunto de lentes que lo componen.Los oculares. Los oculares estn constituidos generalmente por doslentes, dispuestas sobre un tubo corto. Los oculares generalmente msutilizados son los de: 8X, 1OX, 12.5X, 15X. La X se utiliza para expresaren forma abreviada los aumentos.

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    Los objetivos. Los objetivos producen aumento de las imgenes delos objetos y organismos y, por tanto, se hallan cerca de la preparacinque se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dostipos: objetivos secos y objetivos de inmersin.Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia

    alguna entre ellos y la preparacin. En la cara externa llevan una seriede ndices que indican el aumento que producen, la abertura numricay otros datos. As por ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es planacromtico, suaumento 40 y su abertura numrica 0,65, calculada para una longitudde tubo de 160 mm. El nmero de objetivos vara con el tipo demicroscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivossecos ms frecuentemente utilizados son: 6X, 1OX, 20X, 45X y 60X.El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado sistema delentes. Para observar a travs de este objetivo es necesario colocar

    una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparacin, demanera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro.Generalmente, estos objetivos son de 1 OOX y se distingue por uno odos crculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior.Los objetivos se disponen en una pieza giratoria denominada revlver.

    Sistema de IluminacinDirige la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la

    preparacin u objeto que se va a observar en el microscopio.Comprende los siguientes elementos:El espejo. Tiene dos caras: una cncava y otra plana. Goza de

    movimientos en todas las direcciones. La cara cncava se emplea depreferencia con iluminacin artificial, y la plana, para iluminacinnatural (luz solar). Modernamente se prescinde del espejo en lafabricacin de microscopios, ya que stos traen incorporada unalmpara colocada en el eje del microscopio.Condensador. El condensador est formado por un sistema de lentes,cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de lapreparacin. El condensador se halla debajo de la platina. Puededeslizarse sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo quedetermina su movimiento ascendente o descendente.

    Diafragma. Generalmente, el condensador est provisto de undiafragma-iris, que regula su abertura y controla la calidad de luz quedebe pasar a travs del condensador.

    Trayectoria del Rayo de Luz a travs del MicroscopioEl haz luminoso procedente de la lmpara pasa directamente a travsdel diafragma al condensador. Gracias al sistema de lentes que posee

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    el condensador, la luz es concentrada sobre la preparacin a observar.El haz de luz penetra en el objetivo y sigue por el tubo hasta llegar elocular, donde es captado por el ojo del observador

    * MATERIAL:Microscopio Compuesto de campo claro.

    * METODOLOGA:

    El microscopio es un instrumento ptico de precisin que proporciona laamplificacin de las imgenes de los objetos, lo que hace posible, ver condetalles y claridad sus estructuras pequeas o invisibles a la vista humana,facilitando de esta manera su estudio. Esta integrado por tres sistemas; ptico,mecnico y de iluminacin, a su vez cada sistema esta constituido por varioscomponentes y cada uno tiene funciones especificas, las que son necesarias

    conocer para su buen funcionamiento.

    1. Identifique las partes del sistema mecnico del microscopio.2. Identifique las partes del sistema ptico del microscopio.3. Identifique las partes del sistema de iluminacin del microscopio.4. Describa las principales caractersticas de cada uno de los

    componentes que integran el sistema mecnico, ptico y deiluminacin del microscopio.

    5. Describa la funcin que tienen cada una de las partes queintegran los sistemas antes mencionados.

    1. Colocar el microscopio en una mesa que permita una cmodaobservacin a travs del ocular.

    2. Limpiar el sistema ptico y el de iluminacin.3. Subir el condensador hasta el tope y cerrar el diafragma iris

    aproximadamente a la mitad.

    4. Seleccionar con el revolver el objetivo de menor aumento (10 X).

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    Bajar la platina y colocar la preparacin (fijarse que quede firmementesujeta al carro, y que el cubre objetos y el objeto estn situados haciaarriba) acomodando la porcin de la preparacin que se va examinar en laapertura central de la platina

    5. Mirando por los extremos subir la platina hasta el tope, si no haytope acercar la platina lo ms cerca posible a la lente objetiva, hastaapoyarlo levemente sobre la preparacin. Normalmente los microscopiosconvencionales poseen un tope que impide su ascenso por arriba decierta marca. Sin embargo, puede darse el caso que tal tope no exista.(este tope solo existe en la lente objetiva de 10X)

    6. Mirando por los oculares bajar la platina con el tornillomacromtrico hasta que empiecen a distinguirse los detalles de lapreparacin.

    7. Afinar los detalles de la imagen moviendo el tornillo micromtrico.8. Ajustar la distancia interpupilar ( distancia entre los ojos).

    9. Ajustar dioptras (agudeza visual) en el porta ocular izquierdo, o bien conel ocular enfocable izquierdo

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    10 Una vez conseguido el enfoque correcto, recorra todo lapreparacin, a fin de ir reconociendo imgenes que le sean familiares.recordar que el objetivo de 10X permite ver la visin panormica delpreparado. Es decir, los tejidos, su ubicacin, y sus relaciones (funcinimportante al inicio del estudio que ahorrar tiempo dedicado al anlisis

    de la muestra).11 Cambiar a un objetivo de ms aumento (sin bajar la platina con eltornillo macromtrico) y enfocar nicamente con el tornillomicromtrico.

    12 Para usar el objetivo de 100X, aleje la lente de la muestra,deposite una gota de aceite de inmersin en el portaobjetos (sin quitarla laminilla de la platina) en el punto de mayor concentracin luminosa,acerque la lente de 100 lentamente hasta que esta se encuentre encontacto con el aceite (observar lateralmente ste movimiento).Observe por el ocular y mueva ligeramente el tornillo micromtricohasta encontrar la imagen.

    13 Recordar que los objetivos de 40X y 100X, permiten ver detallesde una clula, o la conformacin celular de una estructura. Se puedeobservar la forma y tamao de clulas o grupo de ellas, aspecto quepermite analizar la muestra de manera eficiente.

    14 Al finalizar su observacin, apague la fuente de luz, colocar la lente de menor aumento. Aleje la

    platina del objetivo. Retire la laminilla y limpie las lentes objetivas y la platina.

    MICROSCOPIO COMPUESTO

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    * OBSERVACIONES Y RESULTADOS:

    El microscopio, es uno de los instrumentos de uso ms frecuente en loslaboratorios clnicos, muchos de los errores diagnsticos no tienen su base enel preparado, sino en la errnea manipulacin del instrumento. El usoadecuado de los recursos pticos del microscopio permitir reconocer detallesy variaciones tintoriales, que ayudarn al correcto diagnstico, es por esoimportante, que para su manejo, se cuente con tcnicas adecuadas que

    permitan obtener imgenes claras en el menor tiempo posible y que adems,mantengan al instrumento en buenas condiciones.El microscopio es un instrumento ptico de precisin, mediante un sistema delentes y fuentes de iluminacin puede hacer visible un objeto microscpico yproporciona la amplificacin de las imgenes de los objetos, lo que haceposible, ver con detalles y claridad sus estructuras pequeas o invisibles a lavista humana, facilitando de esta manera su estudio. Las lentes de unmicroscopio ptico se encuentran en el condensador, el objetivo y el ocular. Elcondensador se utiliza para enfocar la luz sobre la preparacin. Elevando obajando el condensador puede alterarse el plano del foco de luz y elegirse unaposicin que consiga el foco preciso. El objetivo es la lente situada cerca del

    objeto que se observa. El aumento primario del objeto es producido por lalente objetivo y la imagen se transmite al ocular, donde se realiza el aumentofinal. En los microscopios modernos el tubo ptico tiene una medida estndary produce aumentos de 1x, no obstante este aumento varia de acuerdo a sumedida. Por lo tanto, el aumento total de un microscopio compuesto se debecalcular tomando en cuenta el producto del aumento de su objetivo, tuboptico y de su ocular.

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    Prctica No. 2

    TOMA DE ESTUDIO CITLOGICO CRVICO-VAGINAL PARA DOC

    * FUNDAMENTO:

    El cncer crvico-uterino es la neoplasia maligna ms frecuente enMxico. El estudio citolgico crvico-vaginal anual es la forma ms adecuada,sencilla y de bajo costo para detectar este tipo de cncer. Para un diagnsticocorrecto es fundamental abarcar la zona escamocolumnar.

    El estudio al microscopio de las clulas exfoliadas del aparato genitalfemenino es un complemento diagnstico de primordial importancia en

    ginecologa y obstetricia.La principal utilidad de la citologa exfoliativa ginecolgica es ladeteccin precoz de lesiones precursoras del carcinoma de cuellouterino. Mediante la organizacin de programas de deteccin masiva enmujeres asintomticas, con el procedimiento de Papanicolaou y el tratamientoy control adecuado de los casos diagnosticados, se ha logrado, en algunospases del mundo, reducir la incidencia y, la mortalidad por cncer invasor delcuello uterino.

    La citologa exfoliativa tambin puede tener utilidad en el diagnstico detumores de la vagina, endometrio y ovario. La citologa hormonal puede serempleada para evaluar ciertos aspectos de la condicin hormonal en la mujer.

    El estudio de la citologa exfoliativa del aparato genital de la mujer fueespecialmente desarrollado por George Papanicolaou, quien, adems dedescribir las caractersticas morfolgicas de las clulas exfoliadas, desarrolluna tcnica de fijacin y tincin de los extendidos que se mantiene hasta hoyy que permite un adecuado estudio citolgico. En su honor se denomina,prcticamente en todo el mundo, examen de Papanicolaou (PAP) al estudio dela citologa exfoliativa diagnstica del aparato genital femenino, especialmentea la proveniente del cuello uterino. En la actualidad ya est demostrado que el

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    uso del PAP no slo es til en la deteccin del cncer en la citologaginecolgica sino en otros tipos de patologas.

    El Dr. George Papanicolaou en 1941 propuso por primera vez laevaluacin citolgica de clulas obtenidas del cervix y vagina como mtodo

    para detectar cncer cervical y sus precursores. Posteriormente la citologacervical ha sido aprobada como el mtodo ms eficaz y efectivo para ladeteccin del cncer y sus precursores.A pesar de la probada efectividad de los frotis de PAP en la reduccin de laincidencia del cncer cervical, muchos se han preocupado de la precisin deesta prueba diagnstica, la cual depende de su especificidad y sensibilidadpara detectar. La citologa es extremadamente especfica para detectar cncercervical y NIC de alto grado, pero es mucho menos especfica paradiagnosticar NIC de bajo grado.

    En contraste a su alta especificidad para detectar alto grado de NIC y

    cncer invasor el PAP no es muy sensitivo, pues los resultados falsos negativosocurren entre el 8 y 50%. Cuando los frotis de PAP fueron introducidos porPapanicolaou las muestras eran tomadas solo del fondo de saco vaginal yprontamente pareci que este mtodo era inadecuado resultando unaproporcin alta de falsos negativos, Ayre en 1947 report el uso de esptulade madera para raspar la superficie del cervix para obtener las clulas delrea en que se inician y desarrollan las NIC y cnceres muy conocida como laZona de Transformacin, la muestra puede ser tornada con un aspiradorendocervical, un hisopo de algodn humedecido con solucin salina o conescobilla endocervical (citobrush). Con esta ltima se obtiene 10 veces msclulas endocervicales que con el hisopo de algodn, mejorando la eficacia del

    PAP. Estudios que usan una combinacin de esptula de madera y escobillaendocervical reportan alrededor de 20% de falsos negativos. Otros factoresimportantes para reducir la proporcin de falsos negativos son la fijacinrpida de clulas para prevenir cambios secundarios artificiales debidos a lasequedad por aire y tambin el uso de un laboratorio citolgico con normasrigurosas de control de calidad.

    Es necesario cumplir simples lineamientos. La paciente debe serinstruida a no usar ducha o lavado vaginal y no tener coito por 24 horas antesde la obtencin de la muestra. El PAP no debe ser obtenido durante la regla omenos de una semana despus de cesar antibiticos intravaginales o agentesantimicticos. Debe ser tomado antes del examen bimanual usando una

    pequea cantidad o no de lubricante. cido actico no debe ser aplicado alcervix antes de tomar el frotis. Una esptula de madera tipo Ayre deber serusada y rotada alrededor del cervix dos veces con presin firme, Una escobillaendocervical, inmediatamente colocada en el orificio externo, rotada 180solamente y retirada. Las clulas obtenidas con ambos mtodos son colocadasen la misma lmina. La muestra es inmediatamente fijada y etiquetada con elnombre de la paciente.

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    * MATERIAL:

    Mesa de exploraciones. Espejo vaginal estril y sin lubricantes. Guantes estriles. Citobrush, esptula de Ayre o hisopo sin algodn. Citospray o alcohol de 96. Laminillas portaobjetos. Lpiz diamante.

    * METODOLOGA:

    Con la paciente en posicin ginecolgica, se introduce el espejo vaginalcerrado verticalmente caba adentro y ligeramente hacia abajo, rotndolohasta quedar dentro y horizontal. Se abre el espejo, se observa el cerviz y seprocede a la toma del estudio mediante el citobrush o esptula de Ayre,introduciendo la parte convexa dentro del orificio cervical y rotndola 360.

    Se coloca la muestra sobre el portaobjetos previamente identificado conlos datos de la paciente ponindola a continuacin de la muestra o la tomaexocervical. Se fija con el citospray rocindola a 30 cm de distancia.

    * OBSERVACIONES:

    Se debe tratar de localizar el cerviz siempre, con el mnimo demolestias para la paciente. En caso de no contar con material adecuado,puede usarse el abatelenguas junto con el hisopo sin algodn. En caso decarecer del citospray puede sustituirse por alcohol de 96. Se debe procurarque no pasen ms de 10 segundos entre la toma y la fijacin.* RESULTADOS:

    Se obtendrn as las laminillas con material celular adecuado y fijado,listas para ser teidas y observadas al microscopio.

    * ESQUEMAS

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    Frotis de Papanicolaou

    El examen de Papanicolaou es unprocedimiento simple y relativamenteeconmico que puede detectar con facilidadcondiciones cancerosas o precancerosas.

    Prctica No. 4

    OBSERVACIN DE CLULAS CERVICOVAGINALES NORMALES

    * FUNDAMENTO:

    La muestra citolgica habitual se obtiene del cuello uterino de la uninescamocolumnar y del fondo de saco posterior de la vagina para diagnsticooncolgico y de pared lateral de la vagina para diagnstico hormonal. Con esteprocedimiento se obtienen fundamentalmente clulas exfoliadas del epiteliopavimentoso cervicovaginal y del epitelio cilndrico endocervical, en ocasionestambin se encuentran clulas endometriales y, excepcionalmente, clulas delepitelio de la trompa y del ovario, Adems pueden encontrarse eritrocitos,clulas inflamatorias, microorganismos y elementos de contaminacin.

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    El Frotis Citolgico se tie generalmente con el mtodo de Papanicolaou. Estemtodo emplea hematoxilina para teir el ncleo de color azul oscuro ovioleta oscuro y un conjunto de substancias que colorea el citoplasma enforma diferente segn la maduracin celular. El citoplasma de las clulas

    inmaduras y en general de las metablicamente activas, se tie de color azulplido o azul verdoso porque capta el light green, que es un colorante bsico,estas clulas se denominan basfilas o cianfilas. Las clulas con citoplasmaacidfilo toman el color rosado de la eosina y se denominan eosinfilas.Tambin es eosinfilo el nucleolo. Las clulas que contienen grnulos dequeratina tienen avidez por el colorante Orange G, que tie el citoplasma decolor anaranjado o amarillo. Aqu se describen los rasgos morfolgicosesenciales de los componentes del extendido cervicovaginal, como seobservan con la tincin de Papanicolaou.

    Clulas exfoliadas del epitelio pavimentoso estratificado.- El epitelio que

    reviste la vagina y porcin vaginal del cuello uterino de la mujer sexualmentemadura es un epitelio pavimentoso estratificado, llamado tambin epitelioescamoso. Mide aproximadamente 0,2 mm de espesor y est formado porestratos histolgicamente bien diferenciables:

    El estrato basal est formado por una sola capa de clulas de tipo cilndricodispuestas en empalizada sobre la membrana basal. Las clulas germinativas(aquellas cuya funcin es producir clulas de la especie) son redondas uovaladas, con ncleo grande, ovalado y central, que ocupa gran parte de laclula. El proceso de regeneracin del epitelio se efecta a partir de esta capacelular, el resto de los estratos representan etapas del proceso de maduracin

    y diferenciacin celular para, finalmente, descamarse en la superficie.El estrato parabasal est compuesto de varias capas de clulasredondeadas o polidricas, de ncleo central, citoplasma grueso, con puentesintercelulares (estrato espinoso profundo).El estrato intermedio tambin presenta puentes intercelulares (estratoespinoso superficial) y est formado, por numerosas capas de clulasaplanadas, con citoplasma rico en glucgeno, ncleos relativamentepequeos, centrales y vesiculosos.El estrato superficial consta de varias capas de clulas aplanadas grandes,de forma poligonal, de citoplasma delgado y claro, sin puentes intercelulares ycon ncleo picntico central. El epitelio escamoso tiene la capacidad de

    exfoliar diversos tipos celulares segn el grado de maduracin alcanzado.Habitualmente las clulas que se exfolian provienen de los estratos superiores,a menos que existan lceras o que la muestra se tome con excesiva energa.Los tipos celulares del epitelio escamoso que se reconocen en elextendido citolgico son los siguientes:

    Clulas superficiales:

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    Las clulas exfoliadas del estrato superficial miden 40 a 60 micrones dedimetro. Son aplanadas, delgadas, de contorno generalmente poligonal. Lamayora de ellas tienen citoplasma eosinfilo, pero puede ser cianfilo. Elncleo es central, circular y pequeo, mide menos de 6 micrones de dimetro.Es picntico, denso, homogneo y no se reconoce en l estructura

    cromatnica.Clulas intermedias:Las clulas exfoliadas del estrato intermedio son del mismo tamao oligeramente menores que las superficiales. Tienen forma redondeada opoligonal, algunas con el borde plegado, el citoplasma es algo ms grueso queel de las clulas superficiales, generalmente basfilo, pudiendo ser eosinfilo.El ncleo es central, redondo y mide alrededor de 8 micrones; la cromatinanuclear tiene disposicin reticular.Existen algunas variedades de clulas intermedias. Las clulas intermediassuperficiales son ms grandes y poligonales que las clulas intermedias

    profundas, que tienen un contorno ms ovalado. Las clulas navicularespresentan dos extremos aguzados que le confieren la forma de un bote; por sucontenido de glucgeno, su citoplasma puede aparecer vaco y el ncleodesplazado hacia un borde.

    Clulas parabasales:En el frotis normal de una mujer en edad frtil no constituyen ms del 5% delas clulas exfoliadas del epitelio pavimentoso. Miden 15 a 25 micrones, songeneralmente redondeadas, con citoplasma grueso cianfilo. El ncleo escentral, redondo o elptico, con un dimetro mayor que el de las clulasintermedias; la cromatina se dispone en forma de finos grnulos. Las clulas

    bsales prcticamente no aparecen en los frotis.

    Clulas exfoliadas del epitelio endocervical:La mucosa endocervical est revestida por epitelio cilndrico simple mucosecretor. Estas clulas cilndricas pueden descamarse aisladamente o engrupos. Las clulas aisladas observadas de perfil, presentan el ncleo cerca deuno de los extremos que corresponde al polo basal. En este extremo se reduceel dimetro de la clula a manera de un tallo. El ncleo es redondo u ovalado,con la cromatina granular fina y dispersa.Cuando las clulas endocervicales descamadas en grupos se observan desdeel polo superior, presentan un aspecto semejante a un panal de abejas, porque

    muestran su borde citoplasmtico ntido, de forma hexagonal; cuando seobservan lateralmente presentan un caracterstico aspecto en "empalizada".

    Clulas exfoliadas del endometrio:Aproximadamente el 2% de los frotis obtenidos por aspirado endocervicalcontienen clulas endometriales. Las clulas endometriales recogidashabitualmente en el frotis cervicovaginal suelen presentar signos dedegeneracin.

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    Otros tipos de clulas:Rara vez aparecen en el frotis clulas epiteliales cilndricas exfoliadas delepitelio tubrico; cuando ello ocurre, pueden ser confundidas con clulas

    endocervicales. Tambin es excepcional observar clulas de la decidua o deltrofoblasto (postaborto, placenta previa). Los histiocitos o macrfagosgeneralmente se encuentran aislados. Miden entre 10 y 25 micrones dedimetro, segn el estado funcional. Son redondeados u ovalados, elcitoplasma es semitransparente, finamente vacuolado o con grandes vacuolasrestos de clulas fagocitadas. El ncleo es oval o reniforme con la cromatinafina y granular, el nuclolo es pequeo. Los histiocitos se presentancomnmente alrededor del perodo menstrual, en el embarazo, en el postparto y en los procesos inflamatorios del endometrio. En algunos procesosinflamatorios y en la menopausia se pueden observar histiocitos gigantesmultinucleados. Los leucocitos polimorfonucleares pueden encontrarse en el

    frotis normal. Miden alrededor de 10 micrones, tienen citoplasma pocodefinido y a menudo transparente. En los procesos inflama torios puedenllegar a ser tan abundantes que impiden ver las clulas epiteliales. Loslinfocitos y plasmocitos se observan en las inflamaciones crnicascervicovaginales. Es frecuente observar eritrocitos, son considerados comocomponentes anormales.

    * MATERIAL:* Microscopio* Aceite de inmersin* Laminillas fijadas y teidas por la tcnica de Papanicolaou.

    * METODOLOGA:

    Una vez fijada y teidas (tincin modificada de Papanicolaou) nuestrasmuestras de estudio citolgico crvico-vaginal, se procede a la observacin delas mismas, para lo cual se requiere de un microscopio ptico., el cual deberestar limpio y con la iluminacin regulada, posteriormente se coloca lalaminilla en la platina y se enfoca la muestra con el objetivo de 10 X ,despus, se procede a la observacin con el objetivo seco fuerte (40 X), lacual debe realizares de manera sistemtica y precisa para dar un resultadopreciso.

    * OBSERVACIONES:

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    Clulas parabasales Clulas superficiales

    Clulas superficiales

    RESULTADOS:Se observ la morfologa cervicovaginal normal, lo cual es muy importantepara poder diferenciar entre las clulas normales y las clulas malignas. Elconocimiento detallado de la morfologa celular normal nos ayuda para queun momento dado podamos establecer la diferencia entre una clula normal yuna clula maligna, de acuerdo a las caractersticas morfolgicas de lasclulas.

    Prctica No. 6

    OBSERVACIN DE DISPLASIAS: LEVE, MODERADA Y GRAVE

    * FUNDAMENTO:

    La displasia se puede definir como la presencia de alteraciones nucleares,cambios en la relacin ncleo/citoplasma y de las caractersticascitoplasmticas de una clula cualquiera. La intensidad de la displasia puedeser leve, moderada o avanzada. En la displasia del epitelio escamoso lasclulas se exfolian generalmente aisladas; las que se descaman en grupos,presentan lmites netos. A mayor diferenciacin de la lesin, los lmitescelulares de los grupos exfoliados son menos distinguibles. La forma y tamao

    de las clulas depende del grado de maduracin que alcanza el epitelio.

    En 1973 fue propuesto el trmino de Neoplasia Intraepitelial Cervical (NIC)para incluir todas las formas de lesiones precursoras de cncer cervical,incluyendo displasia y carcinoma in situ; el NIC se divide en tres grupos: NIC 1corresponde a displasia leve; NIC 2 corresponde a displasia moderada. Dadoque los patlogos no pueden distinguir la reproducibilidad entre displasiasevera y carcinoma in situ, NIC 3 abarca ambas lesiones.

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    * Tienen relaciones sexuales por primera vez a una edad muytemprana* Tienen deficiencias de vitaminas y mala nutricin

    * MATERIAL:

    * Microscopio* Aceite de inmersin* Laminillas fijadas y teidas por la tcnica de Papanicolaou.

    * METODOLOGA:

    Una vez fijada y teidas (tincin modificada de Papanicolaou) nuestrasmuestras de estudio citolgico crvico-vaginal, se procede a la observacin delas mismas, para lo cual se requiere de un microscopio ptico., el cual deberestar limpio y con la iluminacin regulada, posteriormente se coloca la

    laminilla en la platina y se enfoca la muestra con el objetivo de 10 X ,despus, se procede a la observacin con el objetivo seco fuerte (40 X), lacual debe realizares de manera sistemtica y precisa para dar un resultadopreciso.

    * OBSERVACIONES:

    Displasia leve Displasia moderadaDisplasia grave

    RESULTADOS:

    Despus de haber hecho una revisin y observacin detallada de las muestras,se obtuvieron los siguientes resultados:

    Displasia leve:Flora bacteriana cocoide (+ +).

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    Reaccin inflamatoria (+ +).Eritrocitos (+ +).Clulas del epitelio crvico-vaginal con alteraciones de Displasia Leve,asociada a infeccin por VPH y Gardnerella vaginalis.Papanicolaou Negativo Clase III.

    NIC I.LIE Bajo grado.

    Displasia moderada:Flora bacteriana cocoide (+ +).Reaccin inflamatoria (+ + +).Lectura hormonal no fue posible.Clulas del epitelio crvico-vaginal con alteraciones de displasia moderada.Papanicolaou Negativo Clase III.NIC II.

    Displasia grave + VPH:Flora bacteriana bacilar (+ +).Reaccin inflamatoria (+).Lectura hormonal no fue posible.Clulas del epitelio crvico-vaginal con alteraciones de discariosis,pleomorfismo y coilocitosis que integran el diagnstico de Displasia Grave,asociada a infeccin por VPH.Papanicolaou Negativo Clase III.NIC III.LIE Alto grado.

    Practica No. 7

    OBSERVACIN DE CNCER IN SITU Y CNCER INVASOR

    * FUNDAMENTO:

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    Existen alteraciones morfolgicas, que en conjunto caracterizan a las clulastumorales malignas. Estas alteraciones se conocen como criterios demalignidad (Frost, 1979). Sin embargo, es indispensable precisar que no existeun signo morfolgico patognomnico de cncer. Por otra parte, no siempretodos los signos de malignidad se encuentran en cada clula cancerosa. Por

    estos hechos la citologa, como mtodo de colaboracin diagnstica, requierede gran experiencia y ponderacin.Los criterios de malignidad se clasifican en: alteraciones de la clula,alteraciones del ncleo y alteraciones de la relacin entre las clulas.

    *Alteraciones de la clula:Las clulas cancerosas exfoliadas presentan variaciones en el tamao(anisocitosis) y en la forma (polimorfismo), la que en ocasiones puede ser muyanormal, como en las clulas en forma de fibra o de raqueta. El citoplasmapuede ser cianfilo (signo de menor diferenciacin), pudiendo presentarcaractersticas de diferenciacin anmala (queratinizacin intensa o gran

    acumulacin de mucus en una gran vacuola que desplaza al ncleo hacia laperiferia). Pueden presentar numerosas mitosis; siendo el hallazgo msimportante, pero poco frecuente, las mitosis atpicas.

    *Alteraciones del ncleoSon las de mayor valor en la estimacin de malignidad. Los ncleos presentanvariaciones de tamao (anisocariosis); generalmente son mayores que los delas clulas normales. El aumento del ncleo es proporcionalmente mayor queel de la clula, por lo que la relacin ncleo/citoplasma est aumentada. Enalgunas clulas tumorales el citoplasma es reducido a una delgada bandaalrededor del ncleo, que slo se ve con los mayores aumentos del

    microscopio. Se observan tambin alteraciones en la forma del ncleo(polimorfismo): el borde nuclear puede tener angulaciones y pliegues y lamembrana nuclear presentar grosor irregular. La densidad de la cromatinapuede estar aumentada (hipercromatismo), ya sea en forma difusa o engruesos grumos que alternan con espacios pticamente vacos Los nuclolospueden estar aumentados en nmero y tamao; a menudo de contornoirregular y angulado. Puede haber multinucleacin,

    *Alteracin de la relacin entre las clulasLa cohesin entre las clulas es menor en los tumores malignos, por eso engeneral se exfolian abundantes clulas y una gran proporcin de ellas se

    desprenden aisladas o en grupos pequeos. A diferencia de los conjuntos declulas normales, que se desprenden, estos grupos son irregulares, por lo cual,el extendido se observa superposicin de ncleos y pueden no observarse losbordes celulares. En algunos frotis obtenidos de tumores malignos, las clulasforman estructuras que normalmente no existen en el rgano de origen; porejemplo, clulas endometriales dispuestas en forma de papilas.Cncer se define como crecimiento desordenado de un tejido. El cncercervicouterino, es una enfermedad en la cual se encuentra clulas

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    cancerosas (malignas) en los tejidos del cuello uterino. El cuello uterino es laabertura del tero, el rgano hueco en forma de pera donde se desarrolla elfeto, y lo conecta con la vagina (canal de nacimiento).El cncer cervicouterino suele crecer lentamente por un perodo de tiempo.Antes de que se encuentre clulas cancerosas en el cuello uterino, sus tejidos

    experimentan cambios y empiezan a aparecer clulas anormales (procesoconocido como displasia). La prueba de Papanicolaou generalmente encuentraestas clulas. Posteriormente, las clulas cancerosas comienzan a crecer y sediseminan con mayor profundidad en el cuello uterino y en las reascircundantes.

    Ya que en general no hay sntomas asociados con el cncer cervicouterino, elmdico debe hacer una serie de pruebas para buscar el cncer. La primeraprueba es la de Papanicolaou, que se lleva a cabo usando un pedazo dealgodn, un cepillo o una esptula de madera pequea para rasparsuavemente el exterior del cuello uterino con el fin de recoger clulas.

    Si se encuentra clulas anormales, el mdico tendr que extraer una muestrade tejido (este procedimiento se conoce con el nombre de biopsia) del cuellouterino y lo observar a travs del microscopio para ver si hay clulascancerosas.El pronstico (posibilidades de recuperacin) y la seleccin del tratamientodependen de la etapa en que se encuentra el cncer (si se encuentra en elcuello uterino o si se ha diseminado a otros lugares) y el estado de salud engeneral de la paciente.

    * MATERIAL:

    * Microscopio* Aceite de inmersin* Laminillas fijadas y teidas por la tcnica de Papanicolaou.

    * METODOLOGA:

    Una vez fijada y teidas (tincin modificada de Papanicolaou) nuestrasmuestras de estudio citolgico crvico-vaginal, se procede a la observacin delas mismas, para lo cual se requiere de un microscopio ptico., el cual deber

    estar limpio y con la iluminacin regulada, posteriormente se coloca lalaminilla en la platina y se enfoca la muestra con el objetivo de 10 X ,despus, se procede a la observacin con el objetivo seco fuerte (40 X), lacual debe realizares de manera sistemtica y precisa para dar un resultadopreciso.

    * OBSERVACIONES:

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    * RESULTADOS:

    Despus de haber hecho una revisin y observacindetallada de las muestras, se obtuvieron lossiguientes resultados

    Cncer In situ:Flora bacteriana cocoide (+ +).Reaccin inflamatoria (+ + +).Clulas del epitelio crvico-vaginal con alteraciones de hipercromasia, prdidade la relacin ncleo-citoplasma, que integran el diagnstico de CncerEpidermoide In situ asociado a infeccin por VPH.

    Papanicolaou Positivo Clase IV.LIE Alto grado.NIC III.

    Cncer Invasor de clulas pequeas:Flora bacteriana cocoide (+).Reaccin inflamatoria (+ +).Eritrocitos (+ +).Lectura hormonal no posible.Clulas del epitelio crvico-vaginal con alteraciones de Cncer epidermoideinvasor de clulas pequeas.

    Papanicolaou Positivo Clase V.OBSERVACIONES: Se recomienda toma de biopsia por colposcopa para iniciartratamiento.Cncer invasor:Flora bacteriana mixta (+ +).Reaccin inflamatoria (+ +).Clulas del epitelio crvico-vaginal con alteraciones de hipercromasia,pleomorfismo, prdida de la relacin ncleo-citoplasma, clulas fibroideas yclulas en raqueta, que integran el diagnstico de Cncer Epidermoideinvasor.

    Papanicolaou Positivo Clase V.

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    Prctica No. 5

    AGENTES BIOLGICOS VIRUS, BACTERIAS, HONGOS Y PARSITOS

    * FUNDAMENTO:

    Mediante el examen citolgico podemos diagnosticar enfermedadesinfecciosas como las ocasionadas por: virus, bacterias, hongos y parsitos.

    VIRUS: La identificacin de estas infecciones tiene implicaciones de tipovenreo, perinatal y neoplsico. Ejemplos: Herpes, condiloma, varicela,citomegalovirus.

    Virus de Papiloma Humano (VPH): Los papilomavirus son virus DNA y delos 41 tipos identificados, el 16, 18, 45, 56, se relacionan con el cncercervicouterino. El 6 y el 11 se encontraron en el condiloma acuminado y

    neoplasia leve, mientras que el 16 y el 18 se relacionan con lesionespremalignas de alto grado de cncer invasor. Patrn clnico en la infeccin porVPH:

    * Coliocitosis* Macronucleosis* Binucleacin* Anfofilia* Distribucin irregular de la cromatina.

    Herpes.- Es un virus de DNA transmitido habitualmente por relacin sexual.Periodicidad de 1 a 3 meses, relaciones prolongadas despus de 7 aos.

    Presenta imagen citolgica en Vidrio esmerilado, ncleo con aumento detamao y multinucleacin; apariencia en bolsa de canicas.

    BACTERIAS: Entre las bacterias que ms frecuentemente causan infecciones deltracto genital femenino, se encuentran:Chlamydia trachomatis.- Interviene de manera importante en la etiologa decervicitis mucopurulenta, en la enfermedad plvica inflamatoria aguda y LGV.

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    Vacuolizacin en clulas basales (grandes burbujas en el citoplasma). No sepuede establecer un diagnstico certero mediante la tcnica de Papanicolaou.Gardnerella vaginalis.- Puede aparecer en forma de cocos o bacilos;presencia de clulas indicio (clue). Cuadro clnico vulvovaginitis.Lepthrotrix actinomyces.- Grandes bacilos que se entrelazan y dan una

    apariencia de madejas de cabellos.Candida albicans.- Ms frecuente en mujeres embarazadas, diabticas, quetoman anticonceptivos orales. En el frotis se observan como hifas o esporas,que se tien en color pardo rojizo y se ven refringentes al microscopio.

    PARSITOS: Entre los protozoarios que infectan al aparato reproductor femeninose encuentran las Tricomonas y las amebas.Trichomonas vaginalis.- tiene forma oval o de pera; la imagen citologica esde color gris o verde con ncleo oval o redondo excntrico.

    * MATERIAL:

    * Microscopio* Aceite de inmersin* Laminillas fijadas y teidas por la tcnica de Papanicolaou.

    * METODOLOGA:

    Una vez fijada y teidas (tincin modificada de Papanicolaou) nuestras

    muestras de estudio citolgico crvico-vaginal, se procede a la observacin delas mismas, para lo cual se requiere de un microscopio ptico., el cual deberestar limpio y con la iluminacin regulada, posteriormente se coloca lalaminilla en la platina y se enfoca la muestra con el objetivo de 10 X ,despus, se procede a la observacin con el objetivo seco fuerte (40 X), lacual debe realizares de manera sistemtica y precisa para dar un resultadopreciso.

    * OBSERVACIONES:

    VPH HERPES

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    CHLAMYDIA TRACHOMATIS GARDNERELLA VAGINALIS

    CANDIDA ALBICANS LEPTHOTRIX ACTYNOMICES

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    Recoleccin del material: El rgano que se va a estudiar debe estar encondiciones fisiolgicas, sin manipular, sin lavar, y sin medicamentos; si estono se puede evitar debe informarse por escrito en la solicitud de estudio.Adems la recoleccin del material a examinar ser diferente para cadargano.

    Preparacin de los extendidos: El material que ser objeto de estudio debellegar al laboratorio de citologa lo ms pronto posible para ser procesadodebidamente. En forma ideal, el clnico debera conocer los primeros pasos yllevarlos a efecto en el momento de la toma. El material a examinar se tomasobre una laminilla portaobjeto limpia y seca; se hace un extendido delgado yuniforme de la muestra representativa; se sumerge en alcohol etlico de 96 ose roca con lquido fijador a base de polietileglicol e isopropil (spray normal).Si se usa el alcohol las laminillas deben permanecer dentro del fijador durante10 minutos como mnimo.

    Manejo del material obtenido: El material, una vez fijado, puede sertransportado a cualquier distancia en estuches que prevean su destruccin.Las laminillas deben identificarse con nombre, fecha o nmero en un extremoutilizando lpiz diamante. Se puede utilizar plomo si las lminas tienenextremo mate.

    Tincin de los extendidos: Existen varias coloraciones. No obstante, la masutilizada es la tincin de Papanicolaou modificada, ya que resulta ser mas tiltanto para el diagnostico de alteraciones tisulares como para la valoracinhormonal. Y se basa en la reaccin qumica de los colorantes con loselementos celulares; su captacin vara de acuerdo con el pH del medio

    intracelular. Es tricrmica a base de: hematoxilina, Orange G y EA 50. Laprimera tie los ncleos, la segunda los citoplasmas transparentes y la terceralos citoplasmas mas densos.

    Interpretacin microscpica: Todo citlogo antes de revisar una laminilladebe conocer los datos aportados por el clnico en la solicitud; edad, sexo,diagnostico clnico probable, rgano del cual se obtuvo el material, hallazgosdurante el examen clnico, tratamiento previo y diagnostico citolgico anterior.El medico solicitante debe conocer las posibilidades y limitaciones de lacitologa para que pueda aprovechar en su diagnostico y tratamiento los datosproporcionados por el citlogo.

    La evaluacin de los extendidos requiere experiencia. La toma del productopuede hacerla el citloga o el medico en el consultorio, siempre que esteconozca perfectamente las tcnicas y posibles causas de error. El 50% delxito en el diagnostico depender de la toma y fijacin de la muestra.El envo de ella puede hacerse en el fijador o bien sacando la laminilla ycubrindola con una gota de glicerina y otro portaobjeto.La laminilla debe observarse a seco dbil recorrindola en zigzag, de talmanera que el circulo luminoso del ocular corresponda al principio del circulo

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    del campo siguiente a observar; no deber pasarse sin observar ningn campode la preparacin.

    * MATERIAL:

    * Portaobjetos* Aplicadores y espatulas* Cubreobjetos* Microscopio

    * REACTIVOS:

    * Los siguientes colorantes: hematoxilina de Harris, OG-6 y EA-50.* Alcohol de 96* Alcohol cido* Xilol

    * Alcohol absoluto* Resina sinttica

    * METODOLOGA:

    Inmediatamente que se toma la muestra, y se extiende sobre el portaobjetos,se introduce dentro de alcohol de 96. Y se procede con la tincin:

    1.- Se introduce en una tina con hematoxilina de Harris durante 3minutos.

    2.- Se lava con agua corriente.3.- Se introduce en alcohol cido (un bao).

    4.- Se enjuaga con agua corriente.5.- Se introduce en alcohol de 96 (10 baos)6.- Se introduce en alcohol de 96 (10 baos)7.- Se introduce dentro del colorante OG-6 durante 30 segundos y no se

    enjuaga.8.- Se introduce en una tina con alcohol (10 baos)9.- Se introduce en una tina con alcohol (10 baos)10.- Se introduce en una tina con alcohol (10 baos)11.- Se introduce en una tina con el colorante EA-50 durante minuto y

    medio.12.- Se introduce en alcohol (10 baos)

    13.- Se introduce en alcohol (10 baos)14.- Se introduce en alcohol (10 baos)15.- Se introduce en xilol (10 baos)16.- Se introduce en xilol (10 baos)17.- Se deja secar.18.- Se le coloca resina sinttica y se le pone un cubreobjetos.

    * OBSERVACIONES:

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    Inmediatamente se toma la muestra, se debe realizar el extendido e introduciren alcohol de 96, es decir, no se debe esperar a que seque la muestra. Loscolorantes utilizados dentro de la tincin de Papanicolaou son:

    Hematoxilina de Harris: tie los ncleos de las clulas.

    OG-6: tie los citoplasmas de las clulas superficiales e intermedias.EA-50: tie los citoplasmas de las clulas basales y parabasales.

    * RESULTADOS:

    Se obtiene una lmina perfectamente teida por Papanicolaou, lista para serleda al microscopio.

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    Un cncer incipiente y no invasivo (carcinoma in situ) puede ser tratado conuna operacin mnima, mientras que un cncer invasivo suele requerir una

    histerectoma (extirpacin de crvix y tero y posiblemente de otros rganosde la pelvis.

    Colposcopa: Tcnica para estudiar el crvix o cuello del teromediante la visin) para examinar las clulas cervicales msdetalladamente con aparatos de aumento especiales.

    Conizacin, una forma ms extensiva de biopsia en la cual se extraeuna cua del crvix.

    CNCER CERVICAL.-El cncer cervical o decrvix uterino es uno de los ms

    comunes, y en Mxico es el msfrecuente. En el pasado era una de lasmayores causas de muerte por cncer,pero gracias a los nuevos conocimientossobre la enfermedad y a los avanceshechos para detectarlo en su primera

    etapa, es hoy uno de los ms curables.El cncer cervical se desarrolla en cualquier

    lugar del crvix o en la porcin inferior del tero.

    El cncer cervical, como su nombre indica, se sita en el crvix uterino,

    porcin inferior y estrecha del tero que desemboca en la vagina. En estelugar, las clulas del crvix se malignizan originando el cncer.SIGNOS Y SNTOMASHemorragia anormalAumento de flujo vaginalDolor en el pubisDolor durante el coito

    Cncer cervical .-El desarrollo del cncercervical es gradual y se inicia como unacondicin pre-cancerosa que se denomina

    displasia. Por lo general, es un cncer delento crecimiento y si se detecta de maneratemprana puede tratarse con xito. Larealizacin de exmenes rutinarios de Papanicolaou puede detectar en formatemprana los cambios celulares en el cuello uterino, lo que permite unadeteccin a tiempo del cncer cervical. Los principales factores de riesgoidentificados en la aparicin del cncer cervicouterino son:

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    http://www.tusalud.com.mx/130105.htmhttp://www.tusalud.com.mx/130105.htmhttp://www.tusalud.com.mx/130105.htm
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    Clase I: negativaClase II: atipiasClase III: sospechosoClase IV: muy sugestivo de malignidadClase V: conclusivo de malignidad

    Con el paso de los aos la clasificacin evolucion y el reporte se informabacomo:PAP I: negativoPAP II: atipias benignas Atipias severas o metaplasia escamosaPAP III: displasia ligera, moderada o severaPAP IV: carcinoma in situPAP V: carcinoma invasorEn el ao 1966 R. Richart propuso adoptar el sistema NIC (NeoplasiaIntraepitelial Cervical), que se reporta as:NIC I: displasia leveNIC II: displasia moderada

    NIC III: displasia severa Carcinoma in situCarcinoma de clulas escamosasLuego aparece el sistema Bethesda que se reporta as:NormalNormal inflamatorioLIE bajo gradoLIE alto gradoClulas sospechosas de cncer invasorUn informe citolgico debe contener: Descripcin de la muestra como adecuada o inadecuada Descripcin de cambios reparativos o reactivos

    Diagnstico de la flora microbiana como hongos, bacterias, protozoos, virus. Descripcin de las anormalidades epiteliales de las clulas escamosas.Etapas del cncer cervicouterino

    Una vez detectado (diagnosticado) el cncer cervicouterino, se harn mspruebas para determinar si las clulas cancerosas se han diseminado a otraspartes del cuerpo. Este proceso se conoce como clasificacin por etapas. Elmdico necesita saber la etapa de la enfermedad para planear el tratamientoadecuado. Las siguientes etapas se usan en la clasificacin del cncercervicouterino:

    Etapa 0 o carcinoma in situ El carcinoma in situ es un cncer en su etapa

    inicial. Las clulas anormales se encuentran slo en la primera capa de clulasque recubren el cuello uterino y no invaden los tejidos ms profundos delcuello uterino.

    Etapa I El cncer afecta el cuello uterino, pero no se ha diseminado a losalrededores.etapa IA: una cantidad muy pequea de cncer que slo es visible a travs delmicroscopio se encuentra en el tejido ms profundo del cuello uterino

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    etapa IB: una cantidad mayor de cncer se encuentra en el tejido del cuellouterino

    Etapa II El cncer se ha diseminado a regiones cercanas, pero an seencuentra en la regin plvica.

    etapa IIA: el cncer se ha diseminado fuera del cuello uterino a los dos terciossuperiores de la vaginaetapa IIB: el cncer se ha diseminado al tejido alrededor del cuello uterino

    Etapa III El cncer se ha diseminado a toda la regin plvica. Las clulascancerosas pueden haberse diseminado a la parte inferior de la vagina. Lasclulas tambin pueden haberse diseminado para bloquear los tubos queconectan los riones a la vejiga (los urteres).

    Etapa IV El cncer se ha diseminado a otras partes del cuerpo.etapa IVA: el cncer se ha diseminado a la vejiga o al recto (rganos cercanos

    al cuello uterino)etapa IVB: el cncer se ha diseminado a rganos distales como los pulmonesRecurrente La enfermedad recurrente significa que el cncer ha vuelto(reaparecdo) despus de haber sido tratado. Puede volver al cuello uterino o aotro lugar.

    PRACTICA No. 10

    CANCER BRONQUIALEl cncer bronquial constituye el 30% de todas las neoplasias del ser humano.La mortalidad por cncer bronquial ha aumentado en las ltimas dcadas y en

    Chile se estima en 18 hombres y 5 mujeres por 100.000 habitantes. Afecta conmayor frecuencia a hombres de edad promedio 60 aos. La frecuencia haaumentado especialmente en mujeres y en estrecha relacin con el hbito defumar. La sobrevida a un ao del diagnstico es de 20% y a los 5 aos de 5%.Para los casos con tumor extirpable quirrgicamente puede aumentar a 35% alos 5 aos.ETIOLOGIAhay que considerar factores ocupacionales, hereditarios, contaminacinambiental y hbitos personales. Los trabajadores de industrias convencionalesy nucleares en que se utilizan sustancias qumicas para la manufactura de

    materiales, instrumentos, maquinarias, etc tienen mayor incidencia de cncerbronquial. En estas condiciones los trabajadores estn expuestos a radiacionesy sustancias tales como uranio, nquel, hierro metlico, sales de cromo, xidosde hierro, asbesto, arsnico, berilio, gas de mostaza, etc. En el airecontaminado de las grandes ciudades se encuentran adems de los irritantescomunes, sustancias carcingenas tales como 3,4- benzopireno, 1,12-benzoperileno, xido arsenioso, trazas de elementos radiactivos, gases deaceite de petrleo, ozono, polvo de asbesto, trazas de nquel, cromo,

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    compuestos de arsnico, xido de nitrgeno, formaldehdo, hidrocarburosaromticos y alifticos. Sin embargo, estos factores representan unaproporcin infinitesimal de causas cuando se comparan con el cigarrilloEst comprobada la relacin causal entre humo de cigarrillo y cncer bronquial(pipa y cigarro tambin). El humo del cigarrillo contiene benzopireno y otros

    cancergenos, as como irritantes. Existira una relacin entre dao epitelial yel efecto de los irritantes, tales como cianuro, acrolena, formaldehdo y xidonitroso. El epitelio bajo y el metaplsico, que reemplazan al epiteliorespiratorio destrudo por los irritantes del humo del cigarrillo, son mssensibles a la accin de los carcingenos y la ausencia de factores defensivosmecnicos y funcionales favorece la penetracin de los carcingenos y elcontacto de stos con las clulas en fase proliferativa.LESIONES PRECURSORASSe consideran lesiones precursoras (precancerosas) de la mucosa bronquial :hiperplasia de clulas basales y de clulas caliciformes, metaplasia

    epidermoide, displasia y carcinoma in situ.En la hiperplasia el epitelio est engrosado (ms de 50 m), debido a unaumento en el nmero de clulas basales, de clulas caliciformes o de ambas.En la metaplasia epidermoide el epitelio respiratorio normal est reemplazadopor uno plano estratificado maduro. Se distinguen tres grados de displasia:leve, moderado y avanzado, segn la intensidad de las atipias y la extensinde la distorsin arquitectural del epitelio. Las alteraciones estructurales sonestratificacin, espesor irregular, reemplazo total o parcial de las clulasnormales por las atpicas y discontinuidades de la membrana basal. En elcarcinoma in situ las alteraciones citolgicas e histolgicas mencionadasalcanzan su mxima expresin. Todo el espesor del epitelio est reemplazado

    por clulas atpicas, habitualmente es un foco pequeo, con irregularidades ydiscontinuidades evidentes de la membrana basal. En la mucosa adyacente alcarcinoma in situ hay frecuentemente signos de displasia y metaplasia.En casos de carcinoma bronquial manifiesto, en las zonas vecinas seencuentran la hiperplasia y la metaplasia casi en el 90% de los casos, displasiaen alrededor del 40% y carcinoma in situ en 20-30%. El tiempo detransformacin calculado citolgicamente para la fase displasia moderada-carcinoma invasor es de 3,2 aos.

    CLASIFICACIN HISTOLGICA DEL CNCER BRONQUIALExiste una gran variedad de tumores, siendo los ms frecuentes los

    carcinomas. Los tipos histolgicos de este grupo, segn la clasificacin de laOMS, son:Carcinoma epidermoide o escamoso.-Es el prototipo del carcinomabronquial. Se origina aparentemente en los bronquios mayores y medianos. Esel tipo histolgico ms frecuente en las biopsias (cerca del 45% de todas lasbiopsias bronquiales positivas). Es ms frecuente en el hombre y la sobrevidaa los 5 aos es de 22%. Histolgicamente son carcinomas slidos condiferenciacin crnea (perlas crneas y disqueratosis) o presencia de

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    abundantes puentes intercelulares, o ambas. Tiende a ser multifocal en un20%.

    Carcinoma indiferenciado de clulas pequeas.-Representa alrededor del20% de todos los carcinomas bronquiales y el 40% de todas las biopsias

    positivas. Afecta predominantemente a hombres en proporcin de 19 : 1. Almomento del diagnstico mas del 80% tiene extensin extratorcica. Lasobrevida a los 5 aos es de 2%. Es un tumor constituido por clulasuniformemente pequeas (10-15 m), de escaso citoplasma, ncleospequeos, redondos o fusados, de cromatina fina y en grumos regulares, con osin focos de diferenciacin glandular o crnea. Las clulas tumorales puedenser argentafines.

    Adenocarcinoma .-Representa alrededor del 10% de los carcinomas en elhombre y el 50% en las mujeres. Es predominantemente perifrico. Sobrevidaa los 5 aos es de 10%. Es el tipo ms frecuente en no fumadores. Se asocia

    en 45-65% de los casos a cicatrices de infarto, tuberculosis y otrosgranulomas. Los criterios histolgicos son presencia de secrecin mucosa,estructuras glanduliformes o papilares y vacuolas citoplasmticas con mucus.El carcinoma bronquoloalveolar es una variedad de adenocarcinoma, quetiende a ser multicntrico, multinodular, de aspecto bronconeumnico.

    Carcinoma indiferenciado de clulas grandes .-Se presenta como uncarcinoma slido, constituido por clulas uniformemente grandes (20 m oms), de ncleos polimorfos y frecuente canibalismo celular.Histolgicamente, no presentan ninguno de los caracteres histolgicosmencionados en los otros tipos. Es un diagnstico de exclusin.

    Carcinoma combinado adeno-epidermoide o adeno-escamoso.-Corresponde a un tumor en cuya masa coexisten un carcinoma epidermoidey un adenocarcinoma. Constituye el 0,4 - 3% de los casos.

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    PRACTICA 9CANCER MAMARIO

    El cncer de mama, que por lo general se presenta en mujeres, es unaenfermedad en la que clulas malignas (cancerosas) crecen dentro del tejido

    mamario.Cada mama contiene entre 15 y 20 lbulos, los que poseen secciones menoresllamadas lobulillos. Los lbulos y lobulillos estn conectados por conductosllamados ductos. El tipo ms frecuente de cncer mamario nace en los ductosa partir de clulas ductales. Los que surgen en los lbulos o lobulillos sonllamados cnceres lobulillares. stos afectan con mayor frecuencia ambasmamas, a diferencia de otros tipos de tumores.El cncer inflamatorio de la mama es una clase especial de cncer demama, bastante poco frecuente. El aspecto de la mama se parece a unainflamacin o quemadura de sol. Se ve inflamada, roja y caliente. Tiende a

    avanzar con rapidez. Lo ms importante es no confundirlo con una mastitis,Existen formas hereditarias de cncer mamario, que representan alrededor del5-10% de todos los casos.

    Por otro lado, la mayora de los casos corresponde al llamado cncerespordico de mama, en donde no existe una alteracin gentica heredadaque sea responsable de su aparicin.

    Tambin hay otros factores relacionados con el cncer de mama comonuliparidad, primera menstruacin precoz y menopaucia tarda, entre otros.Algunos estudios sugieren que el uso de terapia de sustitucin hormonal se

    asocia a un riesgo un poco mayor de desarrollar cncer mamario.Se debe consultar a un especialista si se notan cambios de coloracin en lapiel de la mama, un ndulo o retraccin del pezn. Una radiografaespecialmente diseada para la mama que es capaz de detectar ndulos queno son palpables. Dependiendo de las caractersticas del ndulo, confrecuencia es necesaria una muestra de ese tejido para ser analizada bajo elmicroscopio, procedimiento que se llama biopsia. La muestra de tejido sepuede obtener usando una aguja especial o mediante una pequea operacin.Las probabilidades de mejora (pronstico) y la eleccin del tratamientodependen del estado de avance de la enfermedad (si se ubica en la mama ose ha extendido fuera de la glndula); del tipo de cncer de que se trate; de

    algunas caractersticas de las clulas tumorales que tienen que ver con laagresividad del tumor, y de si est comprometida una o las dos mamas. Laedad, el peso, el estado menstrual y las condiciones generales de saludtambin afectan el pronstico y el tratamiento necesario.

    - Estadio 0:Es la forma ms temprana que puede tener un cncer de mama. Existen dostipos: carcinoma in situ ductal (carcinoma intraductal) y el carcinoma in situ

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    Invasivo:El cncer se ha diseminado ms all de los conductos y ha llegado al tejidocircundante y ms tarde a los ganglios linfticos contiguos.

    Metastsico:

    Este cncer se ha diseminado a otras regiones del organismo, como ganglioslinfticos distantes, huesos, pulmones, hgado o cerebro.

    Los tipos de cncer de mama se clasifican en:

    El carcinoma ductal in situ se origina en las clulas de las paredes de losconductos mamarios. Es un cncer muy localizado, que no se ha extendido aotras zonas ni ha producido metstasis. Por este motivo esta enfermedad'premaligna' puede extirparse fcilmente. La tasa de curacin ronda el 100%.Este tipo de tumor se puede detectar a travs de una mamografa.

    El carcinoma ductal infiltrante (o invasivo) es el que se inicia en elconducto mamario pero logra atravesarlo y pasa al tejido adiposo de la mamay luego puede extenderse a otras partes del cuerpo. Es el ms frecuente de loscarcinomas de mama, se da en el 80% de los casos.

    El carcinoma lobular in situ se origina en las glndulas mamarias (olbulos) y, aunque no es un verdadero cncer, aumenta el riesgo de que lamujer pueda desarrollar un ctumor en el futuro. Se suele dar antes de lamenopausia. Una vez que es detectado, es importante que la mujer se realiceuna mamografa de control al ao y varios exmenes clnicos para vigilar el

    posible desarrollo de cncer.El carcinoma lobular infiltrante (o invasivo) comienza en las glndulasmamarias pero se puede extender y destruir otros tejidos del cuerpo. Entre el10% y el 15% de los tumores de mama son de este tipo. Este carcinoma esms difcil de detectar a travs de una mamografa.

    El carcinoma inflamatorio es un cncer poco comn, tan slo representa un

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