Universidad VeracruzanaManual de Hematologa Serie Blanca0Hematologa Serie Blanca ndicePrctica no 1: Toma de muestra de sangre1Prctica no 2: Realizacin de frotis 4Prctica no 3: Manejo de animales 6Prctica no 4: Otencin de muestra !Prctica no ": Tincin1#Prctica no 6: otencin de leucocitos12Prctica no $: Recuento de leucocitos14Prctica no !: Morfolog%a de medula sea16Prctica no &: Tincin de medula sea1!Prctica no 1#: 'iferenciacin de c(lulas lasticas2#1Hematologa Serie Blanca Practica no 1Toma de muestra1. Introduccin)sel *rinci*al m(tododee+traccindesangreenel laoratoriodeanlisiscl%nicos, -a .ue es relati/amente fcil de realizar0VENTAJAS. 1os *ermite 2acer m3lti*les e+menes - en re*etidas /eces sise desea,con la mismamuestra0 4as al%cuotasde *lasma - suero *ueden congelarse *ara futura referencia0 DESVENTAJAS Puede *ro/ocar la coagulacin de la sangre si el *rocedimiento lle/a muc2otiem*o0 5lgunos com*onentes no son estales en sangre anticoagulada0 Puede dificultarse en ni6os, *acientes oesos en estado de s2oc70 Puede ocasionarse 2emlisis de las muestras afectando ciertasdeterminaciones, *or las siguientes causas:8Por forzar el *aso de la sangre al tuo 8Por agitar el tuo en(rgicamente 8Por e+traer sangre de un 2ematoma2. Principio y metodologa)l sitio ms *rctico *araotener sangre /enosa es la fle+uraanterior del razo,de*referenciajusto*or arriadealgunadelasramas/enosas.ueall% seencuentran0 4as /enas su*erficiales de la cara anterior del anterazo son lasms comunes*ara la /eno*uncin0 4as tres/enas*rinci*ales.uese utilizanson:19 /ena ceflica, uicadaen la *artesu*erior del anterazo- delladodel*ulgarde la mano029 /ena as%lica, uicada en la *arte inferior del anterazo - del lado deldedo me6i.uede la mano39/ena cuital mediana,.ue conectalas /enas as%lica- ceflicaen la fosaantecuital :fle+in del codo9- es la /ena de eleccin0 ;i el *aciente a*rieta el*u6o des*u(sde a*licarel torni.uete, la /ena se tornar ms *rominente0)l torni.uete facilita la otencin0 )n los ni6os *e.ue6os se *ueden utilizar otrossitios< si es as%, es mejor .ue la sangre la otenga alguna *ersona cone+*eriencia0 =sar una aguja *untiaguda, nunca menor de calire 21- una jeringa2Hematologa Serie Blanca de " ml de 1# ml0 Tanto la aguja como la jeringadeern estarlim*ias, secas -est(riles0 >on *rctica se *uede otener sangre usando slo una aguja con untuo de goma *or el .ue se deja correr la sangre 2asta los tuos en los .ue serecoge la muestra0 Para esta t(cnica se utilizan agujas de calire 1&03. Lista de requerimientos Tuos *ara ?acutainer 5guja *ara ?acutainer >amisa *ara ?acutainer @eringa Torundas de algodn 5lco2ol 4igadura 4. Procedimiento401 Andicaciones: 5segurarse de .ueel *aciente llegue en condiciones *timas -tran.uilizarlo0 >2ecarelmaterial*ara la e+traccin 'ee indicarse al*aciente la *osicin correcta, .ue *uede ser sentado recostado, a*o-ando ien el razo en *osicin 2orizontal0 )legir la /ena adecuada, *refiri(ndose la cuital mediana, la /ena as%lica,la ceflica, las/enas de la mu6eca, toillo - mano, -a .ue resultan fcilesde *al*ar0402 T(cnica: 10 'esinfectar la *iel en el sitio de *uncin con algodn mojado en undesinfectante a*ro*iado como alco2ol de $#B020 Pre*arar la jeringa - la aguja, en su defecto la aguja con el contenedor enel caso del sistemade tuos al /ac%o, cuidando .uelat(cnica seaas(*tica030 5*licar un torni.uete en el razo :*or arria del sitio de *uncin9,suficientemente a*retado *ara .uerestrinja el flujo de la sangre /enosa040 'esinfectar nue/amente el sitio de *uncin, - secar la *iel con algodn gasa lim*ios, secos - est(riles0"0 5segurarse de .ue el (molo de la jeringa est( 2asta el fondo, es decir, .uela jeringa nocontenga aire0 Ansertar la aguja de la jeringaen una /ena conun mo/imiento*reciso060 @alar lentamente el (molo - otener 2 a 3 ml de sangre0$0 Retirar la jeringa de la aguja - sustituirla*or otra jeringa .uecontenga lasolucinanticoagulantedecitratodesodio0 Odirectamenteintroducireltuo del sistema de /ac%o0!0 Otener el /olumen de sangre deseado jalando el (molomu- des*acio03Hematologa Serie Blanca &0 ;oltar el torni.uete - colocar una gasa seca sore el sitio de la *uncin,retirando des*u(s la agujacon un solo mo/imiento01#0 Presionar ligeramente la gasa sore el sitio de *uncin durante algunosmomentos- des*u(s *edir al *aciente.ue contin3e a*licando la *resindurante unos minutos0110 >uando la sangre se otiene em*leando slo una aguja sin jeringa, seem*lea el mismo *rocedimiento - cantidad de anticoagulante0 'eenusarse tuos graduados *ara otener la *ro*orcin adecuada deanticoagulante - sangre05. Esquemas 6. !ser"aciones Para la toma de muestras es im*ortante la *rctica - la seguridad con la .ue se2ace, -a .ue eso de*ende de .ue las muestras sean tomadas correctamente -tami(n desarrollar el sentido de la sensiilidad *ara *al*ar - determinar cul es la/ena correcta *ara realizar la e+traccin< tami(n es indis*ensale .ue el materialnoe+cedasufec2adecaducidad, -a.ueestetiene.ueestar en*erfectascondiciones0Practica no 24Hematologa Serie Blanca Realizacin de frotis1. Introduccin 4os e+tendidos de sangre se realizan dentro del estudio del 2emogramacom*leto, ien de manera aislada 0)n ellos se *ueden estudiar los eritrocitos,los leucocitos - las *la.uetas, - el *ro*sito de ello es determinar lascaracter%sticas morfolgicas de cada ti*o celular - e/aluar la frecuenciarelati/a delos distintos ti*os de leucocitos0;e deen te6ir con una de las tinciones de RomanoCs7- las cuales /ar%an en sus*ro*iedades de tincin, - *or lo tanto, es im*ortante seleccionar una -familiarizarse con ella0 4a coloracin de Drig2t es mu- confiale - sencilla, *erootras tami(n lo son, tales como la de Eiemsa0 4eis2man Ma-8ErFnCald, lascuales son igualmente satisfactorias, aun.ue *uede /ariar la tincin de un lote aotro de colorante02. Principios y metodologa4os frotis de sangre deen confeccionarse con lminas *ortaojetos de /idrio .ue*re/iamente se 2a-an la/ado - secado de manera con/eniente, con la finalidad deeliminar cual.uier resto de grasa .ue *udiera .uedar en ellos - e/itar as% una malacalidad en la tincin0 4os frotis de sangre son esenciales *ara el estudiomorfolgico - cuantitati/o de las c(lulas sangu%neas0 >uandoun frotis seencuentraienrealizado, se*odrndistinguir en(l tresreasim*ortantes: lacaeza zona de inicio, el cuer*o zona media - la cola rea final del mismo0=n frotis no deerser ni grueso ni delgado, *ues en ninguno de ellos se *odrna*reciar ien las reas antes mencionadas0 )n un frotis ien realizado, la tincinser de mejor calidad03. Lista de requerimientos >aja de *ortaojetos lim*ios Easas Muestra de sangre Pi*eta Pasteur 4. Procedimiento 10 >olocar a una distancia de 10"810& cmdel e+tremo derec2o de un*ortaojetos, una *e.ue6a gota de sangre otenida *or *uncin ca*ilar deltaln, del lulo de la oreja *or e+traccin /enosa020 ;ise em*lea sangre/enosa mezclada con anticoagulante, elfrotis deerrealizarse loms *ronto*osile, deidoa.ue el contacto*rolongadocon(stealtera la morfolog%a celular030 5*ro+imar el*ortaojetos e+tensor a la gota, dejando .ue 2agan contacto -.ue *or ca*ilaridad (ste se e+tienda a lo largo del orde05Hematologa Serie Blanca 40 ;e desliza el *ortaojetos e+tensor 2acia el e+tremo contrario, *aralograr una*el%cula delgada de sangre0"0 'ejar secar - te6ir05. Esquemas 6. !ser"aciones Para otener uenos frotis en necesario cum*lir con estos re.uisitos:- 4a caeza 2a de estar cerca de uno de los e+tremos del *orta0- 4a cola dee estar cercana al otro e+tremo del *orta, *ero sin llegar a (l0- )l orde de la cola tiene .ue estar finamente des2ilac2ado0 - Toda la e+tensin 2a de ser fina - 2omog(nea0- 4os ordes laterales de la e+tensin deen estar se*arados de los ordesdel *orta *or 1 mm a*ro+imadamente0- =na e+tensin normal 2a de tener una longitud de las G*artes del*ortaojetos0Practica no 3Manejo de animales 1. Introduccin6Hematologa Serie Blanca )l usodeanimales delaoratorioenestudios dein/estigaciniom(dica-*roduccin de reacti/os iolgicos en general, re.uiere .ue (stos sean losa*ro*iados *ara .ue *ro*orcionen la seguridad en los resultados es*erados, *araello, es necesario contar con ioterios .ue rinden animales de calidadmicroiolgica - gen(ticamente definidos mantenidos ajo condicionesestandarizadas - de acuerdo con normas internacionales estalecidas0 )l animaldelaoratoriotiene.ueser res*etadocomoser /i/o, entender .ue*adecenecesidades - sufre dolor, *or le- es oligacin del *ersonal .ue lo cuida,mantiene - utiliza :in/estigador9, asegurar su ienestar - confort mientras /i/a02. Principio y metodologa 4o .ue se usca con este m(todo es matar al ratn de una manera r*ida, fcil -sore todo sin sufrimiento04os in/estigadores - *rofesores deen asegurarse de .ue todas las *ersonas .ueutilicen animales ajo su su*er/isin 2a-an reciido entrenamiento en los*rocedimientose+*erimentales, enel cuidado, mantenimiento-manejodelases*ecies .ue est(n utilizando03. Lista de requerimientos Rata o ratn )stuc2e de diseccin >loroformo ?aso de *reci*itado de 1### ml4. #$cnica 10 Poner al ratn sore una su*erficie lim*ia - lisa020 Tran.uilizar al ratn, frotando su caeza con los dedos030 ;ujetar al ratn *or el cuello - la cola< tratando se sujetarlo firme040 'ar un tirn fuerte, tratando de no arrancarle la cola0)n caso de tener dificultades a la 2ora de ejecutar esta t(cnica se *uede dormir alanimal010 >olocar al ratnsore una su*erficie lisa20 >olocar algodn, im*regnado de cloroformo30 >olocar el/asode *reci*itado oca aajocon elratn-el algodnconcloroformo dentro0 40 )s*erar a .ue se duerma *ara *roceder con la diseccin07Hematologa Serie Blanca 5. Esquemas 6. !ser"aciones )n la actualidad son innegales las contriuciones .ue di/ersas in/estigacionesasadas en elem*leo de animales de laoratorio 2an dado aldesarrollo de lasciencias iolgicas, las cuales 2an *ermitido *re/enir - curar di/ersasenfermedades, mejorando la calidad - la e+*ectati/a de /ida0 5s%, es claro .ue losgrandes descurimientos iom(dicos - sus constantes a/ances de*enden en granmedida de la in/estigacin .ue se realiza en los animales de laoratorio0 Practica no 8Hematologa Serie Blanca !"tencin de muestra1. Introduccin4a m(dula sea es un ti*o de tejido .ue se encuentra en el interior de los 2uesoslargos, /(rteras, costillas, esternn, 2uesos del crneo, cintura esca*ular - *el/is0Todas las c(lulas sangu%neas deri/an de una sola c(lula *recursora2emato*o-(tica multi*otencial uicada en la m(dula sea04a m(dula sea roja, a la .ue se refiere 2aitualmente el t(rmino m(dula sea, esel lugar donde se *roduce la sangre :2emato*o-esis9, *or.ue contiene las c(lulas*recursoras .ue originan los tres ti*os de c(lulas sangu%neas .ue son losleucocitos, 2emat%es-*la.uetas0 4am(dulasea*uedetras*lantarse, -a.ue*uede e+traerse de un 2ueso de donante /i/o, generalmente del esternn o de lacadera, mediante una *uncin - as*iracin - transfundirse al sistema circulatoriodel rece*tor si e+iste com*atiilidad del sistema H45 :com*atiilidad de rganosentredonante-rece*tor90 4asc(lulas*recursoratransfundidasanidarnenlam(dula sea de los 2uesos del rece*tor02. Principio y metodologa)sta t(cnica nos /a a *ermitir otener leucocitos en sus formas inmadura, *aralograr identificarlos0Ia .ue se lograr otener de una manera fcil - r*ida03. Lista de requerimientos ;olucin fisiolgica Tuo de ensa-e de 13 +1## @eringa de insulina >aja Petri Media >entrifuga4. #$cnica10 =na/ez.ueseotu/oel f(murdel ratn, conunastijerassecortanlae*%fisis de cada e+tremo020 >ona-udadelajeringadeinsulina, .uecontienesolucinfisiolgicaseintroduce la aguja en el 2ueso - se descarga *oco a *oco la solucin0 I se*rocede a seguirse la/ando030 >on la a-uda de la media se intentara colar la solucin .ue se otu/o della/ado de f(mur040 ;e meter a centrifugar 3 min0 5 2"## r*m0"0 ;e decantara lo ms *osile la muestra060 I con el sorante se realizaran frotis *ara des*u(s ser te6idos05. Esquemas 9Hematologa Serie Blanca 6. !ser"aciones )s necesario realizar un uen la/ado de f(mur, -a .ue as% otendremos ms c(lulas05dems .ue es mu- necesario decantar lo ms *osile la muestra0=na correcta realizacin de frotis es lo fundamental *ara oser/ar las c(lulas0Practica no #Tincin 10Hematologa Serie Blanca 1. Introduccin 4a finalidad de la tincin de Drig2t es lograr .ueel alumno se sienta ca*acitado*ara *re*arar adecuadamente algunos de los reacti/os - colorantes mscom3nmente em*leados en las reas de 2ematolog%a - microiolog%a, .ue como.u%mico cl%nico tiene laoligacin de conocer- dominar02. Principio y metodologa 5 loscolorantesde les *uede clasificar en tres gru*os:1% &cidos.;on a.uellos constituidos *or sales cu-a ase es incolora - cu-o cidoes coloreado0 5 este gru*o*ertenecen las eosinas0 )stas soluciones se usan *arala coloracin cito*lasmtica coloracin de fondo02% '(sicos.;ona.uellassalesdecidoincoloro-asecoloreadacomoelclor2idratodeazul demetileno0 )stoscolorantesti6en*or logeneral algunoselementos del n3cleo03% )eutros. ;on a.uellas sales con el cido - la ase coloreados, *or ejem*lo, loseosinatosdeazul -azur demetileno, losmsem*leadosen2ematolog%a0 )lm(todo de *omano+s,y, .ue em*lea estos colorantes, 2a sido la ase de lascoloraciones *an*ticas utilizadas en la actualidad -a .ue 2a tenido un gran (+itoen la tincin diferencial de la ma-or%a de las estructuras normales- anormales dela sangre0 4a ma-or *arte de estos colorantes *olicromos deri/ados del m(todode RomanoCs7-, se disuel/en en alco2olmet%lico, cominando as%, la fijacin conla tincin0 4os ms conocidos de todos ellos, son los deEiemsa- de Drig2t03. Lista de requerimientos Jit de tincin r*ida de Drig2t Krotis Easas 4. #$cnica 10 >on una *inza sujetar el *ortaojetos20 Realizar " inmersiones con el fijador - .uitar el e+ceso de reacti/o con unagasa30 Realizarnue/amente"inmersionesconel reacti/o2-cona-udadelagasa .uitar el e+ceso de reacti/o040 I *or 3ltimo realizar " inmersiones en el reacti/o 30"0 )njuagar - secar05. Esquemas 11Hematologa Serie Blanca 6. !ser"aciones )l alumnodeerensa-artiem*os2astaajustara.uellos.uemscon/engan*ara una *tima coloracin04os resultados es*erados en la tincin sern los siguientes:Hemat%es en color rosa013cleosdelosleucocitosdeazul *3r*ura, conlacromatina-*aracromatinanetamente diferenciadas0Ernulos neutrfilos del cito*lasma, lila /ioletaErnulos eosinfilos, rojo tirando a naranja0Ernulos asfilos, *3r*ura tirando a azul oscuro0Pla.uetas, color lila oscuro0>ito*lasma de los linfocitos, azul claro0>ito*lasma de los monocitos, ligero azul0Practica no $12Hematologa Serie Blanca !"tencin de leucocitos 1. Introduccin4os leucocitos son c(lulas .ue estn *rinci*almente en la sangre - circulan *orellaconlafuncindecomatir lasinfecciones ocuer*os e+tra6os< *eroenocasiones *ueden atacar los tejidos normales del *ro*io cuer*o0 )s una *arte delas defensas inmunitarias del cuer*o 2umano0Ha- diferentes gru*os de leucocitos: los llamados *olimorfonucleares :neutrfilos,eosinfilos - los asfilos9 - los mononucleares :los linfocitos - los monocitos90)l origen de todas las formas de leucocitos es a *artir de c(lulas *recursoras de lam(dula sea02. Principio y metodologa 4amodificacindelacantidaddeleucocitos*uedeorientar al diagnsticodeenfermedadesinfecciosas, inflamatorias, cncer -leucemias, -otros*rocesos0Por ello el recuento es mu- orientati/oen diferentesenfermedades05dems el*orcentaje de cada gru*o de leucocitos nos ofrecer una ma-or informacin *ara*recisar un diagnstico0>uando en la medicin de leucocitos se /en c(lulas j/enes a*arecen losneutrfilos en forma de n3cleo en forma de astn :ca-ados9, - un aumento del*orcentaje de los leucocitos *olimorfonucleares, esto se denomina comodes/iacin La la iz.uierdaL0 )ste t(rmino sugiere infecciones acterianas agudas0)l estudio de los leucocitos se realiza 2aitualmente en un estudio de2ematimetr%a - recuento leucocitario com*leto03. Lista de requerimientos Tuos *ara ?acutainer 5guja *ara ?acutainer >amisa *ara ?acutainer @eringa Torundas de algodn 5lco2ol 4igadura >mara de 1euauer Reacti/o de Tur74. #$cnica 10 Para realizar este anlisis no se *recisa estar en a-unas013Hematologa Serie Blanca 20 Pararealizar latomase*recisadelocalizar una/enaa*ro*iada-, engeneral, se utilizan las /enas situadas en la fle+ura delcodo0 4a *ersonaencargada de tomar la muestra utilizar guantes sanitarios, una aguja :conuna jeringa o tuo de e+traccin90 4e *ondr una ligadura en el razo *ara.ue las /enas retengan ms sangre - a*arezcan ms /isiles - accesiles030 4im*iar la zona de *uncin con un antis(*tico - mediante una *al*acinlocalizar la /ena a*ro*iada - acceder a ella con la aguja0 4e soltarn laligadura040 >uandolasangreflu-a*orlaagujael sanitariorealizarunaas*iracin:mediantelajeringaomediantelaa*licacindeuntuocon/ac%o90 5lterminar la toma, se e+trae la aguja - se *resiona la zona con una torundade algodn *ara fa/orecer la coagulacin - se le indicar .ue fle+ione elrazo - mantenga la zona *resionada0"0 Homogenizar la sangre, cargar la *i*eta de conteo de leucocitos 2asta lal%nea .ue marca #0"060 Terminar de llenar la *i*eta conTur70 Homogenizar, desec2ar las *rimeras3 gotas0$0 >argar la cmara de 1euauer *or succin05. Esquemas 6. !ser"aciones )l recuento de leucocitos es una *ruea de rutina en la ma-or%a de los laoratorioscl%nicos0 Paralarealizacindela*rueaesnecesarioel alistamientodeuna14Hematologa Serie Blanca muestra de sangre0 )l cido ac(tico contenido en la solucin act3a como2emolizante de los eritrocitos - el colorante ti6e los leucocitos0 Posteriormente se cuenta el ti*o de c(lula deseado en un /olumen definido - secalcula el n3mero de c(lulas en un micro litro de sangre15Hematologa Serie Blanca Practica no %Recuento de leucocitos 1. Introduccin4os leucocitos comaten las infecciones0 )lrecuento de glulos lancos forma*arte del recuento sangu%neo com*leto .ue se 2ace *ara /igilar susconcentracionesdec(lulassangu%neas0 )+isten/ariosti*osdeleucocitos0 =nanlisis diferencial inclu-e ms detalles acerca del recuento de leucocitos0)l anlisis desangreesuna*rueacl%nica2aitual .uea*ortainformacindegran /alor *ara el diagnstico, -a .ue las alteraciones en el n3mero, la forma - lafuncin de las c(lulas sangu%neas, *ermiten orientar el diagnstico - la necesidadde otras *rueas com*lementarias02. Principio y metodologa )l recuento de leucocitos es una *ruea de rutina en la ma-or%a de los laoratorioscl%nicos0 Paralarealizacindela*rueaesnecesarioel alistamientodeunamuestra de sangre0 )l cido ac(tico contenido en la solucin act3a como2emolizante de los eritrocitos - el colorante ti6e los leucocitos0 Posteriormente se cuenta el ti*o de c(lula deseado en un /olumen definido - secalcula el n3mero de c(lulas en un micro litro de sangre3. Lista de requerimientos >mara de 1euauer Microsco*io Pi*eta *ara leucocitos Reacti/o de Tur74. #$cnica 10 >olocar en la *latina del microsco*io - enfocar la cuadricula a 1#+0 - contar en los 4 cuadrados angulares020 )n el recuento se inclu-en las c(lulas .ue curen o tocan *or dentro o *or fuera las l%neas limitantes su*erior e iz.uierda en el cuadro *e.ue6o de recuento - no se consideran los .ue est(n en los l%mites inferior - derec2o030 Multi*licar *or "# el *romedio de los leucocitos con la siguiente frmula40 >(lulas contadas + :dilucin9 + 1#M4 :n3m0 'e cuadros905. Esquemas 16Hematologa Serie Blanca 6. !ser"aciones )l n3mero normal de leucocitos en la sangre es 4,"## a 1#,### *or microlitro0)ste e+amen se 2ar *ara a/eriguar cuntos leucocitos *roduce el organismo0 )l cuer*o 2umano *roduce ms glulos lancos cuando se tiene una infeccin o una reaccin al(rgica0 Practica no &Morfologa de medula sea17Hematologa Serie Blanca 1. Introduccin)l estudiomedular esun*rocedimientoes*ecializadodegranutilidadcl%nica0Puede ser realizadotanto *oras*irado como *or io*sia *ercutneaseg3n lascaracter%sticas cl%nicas del *aciente - el diagnstico *resunti/o0 )l estudio medular*ermite identificar las diferentes series 2emato*o-(ticas, estudiar el estromamedular - otener material *ara estudios acteriolgicos, micolgicos, decitometr%a de flujo - gen(ticos entre otros0 4a decisin de solicitar un estudio de m(dula sea dee asarse en la 2i*tesis de.ue los 2allazgos .ue sees*eran delestudio justifi.uen someter al*acientealriesgo - la molestia, a *esar de (stos ser m%nimos0 4os 2allazgos medulares es*erados :o ines*erados9 en *arte de*enden delcuadro cl%nico, de los 2allazgos en sangre *erif(rica - de la informacin .ue sere.uiere en algunos casos es*ec%ficos0 )n la actualidad el estudio medular 2ace*arte integral del estudio sistematizado de un im*ortante n3mero deenfermedades 2ematolgicas, infiltrati/as - neo*lsicas .ue estn ien*rotocolizadas0 'eido a .ue el as*irado de m(dula sea est /irtualmente lirederiesgo:e+ce*tosi se2aceenel esternn9-.uelaio*siamedularesun*rocedimiento in/asi/o m%nimo, elestudio se recomienda en todos los casos endonde se *ueda justificar un *roale eneficio con la informacin otenida02. Principio y metodologa 4os e+tendidos de m(dula sea se colorean con Drig2t siguiendo la t(cnica usual0Anicialmente son oser/ados macrosc*icamente *ara determinar la *resencia de*art%culas0 4uego el e+tendido es e+aminado en ajo *oder :1#N9 *ara a*reciar larelati/a cantidad de grasa - de contenido celular 2emato*o-(tico de acuerdo alcual la m(dula se *uede clasificar como: 2i*ocelular, normocelular e 2i*ercelular0 'es*u(s de la oser/acin en 1#N el e+tendido se e+amina con ojeti/o de 1##Nlocalizando los cam*os donde se 2allan las *art%culas - se *rocede al anlisis delas c(lulas sangu%neas .ue 2aitan en la m(dula sea0 ;e estalece la relacindeln3mero de las c(lulas lancas frente aln3mero de c(lulas rojas nucleadas0)sta *ro*orcin se denomina Orelacin mielo 8 eritroideP :M:)90 Para estimar estarelacin es necesario la identificacin - taulacin de 3## 8 "## c(lulas nucleadas0;eoser/a aumento enlarelacin mielo8eritroide, cuando se aumentanlos*recursores mieloides como sucede en los *rocesos inflamatorios agudos,leucemias o cuando se disminu-en los *recursores eritroides como en lainsuficiencia renal crnica0 =na disminucin en la relacin mielo8eritroide se*resentacuandosedisminu-enlos*recursoresmieloidescomoenlaanemiaa*lsticaocuandoaumentanlos*recursoreseritroidescomoenlasanemias2emol%ticas - megalolsticas0 )n forma simultnea se realiza una /aloracin cuidadosa de la morfolog%a de lasdiferentes l%neas celulares: serie eritroide, granuloc%tica, linfoide, monoc%tica,megacarioc%tica, c(lulas *lasmticas - otras c(lulas018Hematologa Serie Blanca 3. Lista de requerimientos Muestra Pi*eta Pasteur Portaojetos Jit de tincin de Drig2t Easas 5ceite de inmersin 4. #$cnica 10 Realizar e+tendidos de la muestra de medula sea020 Te6ir los frotis con el 7it de tincin de Drig2t r*ida - enjuagar*erfectamente030 'ejar secar los frotis040 56adir una gota de aceite de inmersin0"0 )nfocar con el ocular de 1##+060 Oser/ar los diferentes estadios del linaje celular05. Esquemas

6. !ser"aciones )n los adultos sanos, 2a- un *e.ue6o *orcentaje de c(lulas con camiosdis*lsicos0 Para undiagnsticode ;M' se necesita como m%nimoun 1#B dec(lulasdis*lsicas*or linaje*aradistinguirlosdeladis*lasiamenor05dems,deen oser/arse camios dis*lsicos en al menos 2 de los 3 linajes de c(lulas2emato*o-(ticas0 19Hematologa Serie Blanca Practica no 'Tincin de medula sea1. Introduccin4os e+tendidos de m(dula sea se colorean con Drig2t siguiendo la t(cnica usual0Anicialmente son oser/ados macrosc*icamente *ara determinar la *resencia de*art%culas0 4uego el e+tendido es e+aminado en ajo *oder :1#N9 *ara a*reciar larelati/a cantidad de grasa - de contenido celular 2emato*o-(tico de acuerdo alcual la m(dula se *uede clasificar como: 2i*ocelular, normocelular e 2i*ercelular0 'es*u(s de la oser/acin en 1#N el e+tendido se e+amina con ojeti/o de 1##Nlocalizando los cam*os donde se 2allan las *art%culas - se *rocede al anlisis delas c(lulas sangu%neas .ue 2aitan en la m(dula sea0 ;e estalece la relacindeln3mero de las c(lulas lancas frente aln3mero de c(lulas rojas nucleadas0)sta *ro*orcin se denomina Orelacin mielo 8 eritroideP :M:)90 Para estimar estarelacin es necesario la identificacin - taulacin de 3## 8 "## c(lulas nucleadas0;eoser/a aumento enlarelacin mielo8eritroide, cuando se aumentanlos*recursores mieloides como sucede en los *rocesos inflamatorios agudos,leucemias o cuando se disminu-en los *recursores eritroides como en lainsuficiencia renal crnica0 =na disminucin en la relacin mielo8eritroide se*resentacuandosedisminu-enlos*recursoresmieloidescomoenlaanemiaa*lsticaocuandoaumentanlos*recursoreseritroidescomoenlasanemias2emol%ticas - megalolsticas0 )n forma simultnea se realiza una /aloracin cuidadosa de la morfolog%a de lasdiferentes l%neas celulares: serie eritroide, granuloc%tica, linfoide, monoc%tica,megacarioc%tica, c(lulas *lasmticas - otras c(lulas02. Principio y metodologa 4os;M'sonungru*o2eterog(neodeenfermedades, -el diagnstico-lae/aluacin del *ronstico se asan en su clasificacin en suti*os :tala90 ;e 2anidentificadosuti*osa*artir delascaracter%sticascom*artidasdemorfolog%acelular - se 2an desarrollado dos sistemas *rinci*ales de clasificacin asados enestos suti*os :el sistema K5Q Rfranc(s8estadounidense8ritnicoS - el sistema dela Organizacin Mundial de la ;alud ROM;S90 )l resultado cl%nico de los *acientes*uede e/aluarse utilizando el %ndice internacional de *ronstico :AP;;9 o el %ndicede *ronstico asado en la clasificacin de la OM; :DP;;903. Lista de requerimientos Portaojetos Muestra de medula sea Jit de tincin de Drig2t r*ida Easas20Hematologa Serie Blanca 4. #$cnica 10 Realizar e+tendidos de medula sea, - *onerlos a secar020 Te6ir con la t(cnica de tincin de Drig2t r*ida< .ue consiste en "inmersiones con cada reacti/o, tratando de retirar ele+ceso de colorante*ara no contaminar los otros reacti/os0 =na /ez .ue *aso *or los 3reacti/os enjuagar030 'ejar secar - montar en el microsco*io05. Esquemas 6. !ser"aciones 'eido a .ue los s%ndromes mielodis*lsicos son un gru*o 2eterog(neo deenfermedades, el diagnstico-lae/aluacindel *ronsticoseasanensuclasificacin en suti*os0)l e+amen morfolgico de las c(lulas sangu%neas - de la m(dula sea esnecesario *ara realizar el diagnstico definiti/o - la clasificacin de los s%ndromesmielodis*lsicos0Para un diagnstico de s%ndromes mielodis*lsicos se necesita como m%nimo un1#Bdec(lulasdis*lsicas*or linaje*aradistinguirlosdeladis*lasiamenor05dems, deen oser/arse camios dis*lsicos en al menos 2 de los 3 linajes dec(lulas 2emato*o-(ticas021Hematologa Serie Blanca Practica no 1()iferenciacin de c*lulas "lasticas 1. Introduccin4as c(lulas sangu%neas deladulto se forman, con la e+ce*cin de los linfocitos,e+clusi/amente en la m(dula sea4a funcin *rinci*al de la m(dula sea esla *roduccin de c(lulassangu%neasdiferenciadas0 )stas deri/an de c(lulas troncales multi*otenciales con ca*acidadde reno/acin, ca*aces de diferenciarse0 )sta 3ltima ca*acidad lle/a a la*roduccin de c(lulas uni*otenciales dan origen a las l%neas celulareseritro*o-(tica, granulo*o-(tica - tromo*o-(tica0 4as c(lulas uni*otenciales estnen una eta*a acti/a del ciclo celular, con ca*acidad de autorreno/arse - *roliferar*or tiem*o *rolongado0 ;in emargo, estas c(lulas necesitan del est%mulo 2umoraldeciertassustanciascon2ca*acidad2emato*o-(tica0 4amejor conocidadeestas es laeritro*o-etina, .uees elaorada*or el ri6nenres*uestaala2i*o+emia-.ueestimulala*roduccindeeritrocitos0 Tami(nseconocelae+istencia de leuco - tromo*o-etinas0 2. Principio y metodologa )l sistema2emato*o-(ticoestcom*uesto*or diferentesti*oscelulares.uederi/an de la diferenciacin - e+*ansin de *rogenitores inmaduros0 ;ufuncionamientocorrectoasegurala*roduccindelasc(lulasres*onsalesdeltrans*ortedeo+%geno, lacoagulacinsangu%nea-lainmunidad0 ;eorganizacomo una jerar.u%a en la .ue las relaciones entre los diferentes ti*os celulares seasan en la ca*acidad de *roliferacin - de diferenciacin celular0 )lfuncionamiento normal de la 2emato*o-esis resulta de la interaccin entremecanismos intracelulares - la influencia del microamiente donde se desarrollanlas c(lulas 2emato*o-(ticas0 'iariamentemiles de millones dec(lulas 2emticas maduras, *rinci*almenteeritrocitos - granulocitos, mueren - son eliminadas de la circulacin0 =n n3meroe.ui/alente de3 c(lulas j/enes alcanza la sangre *erif(rica :;P9, de manera .uese com*ensa la *(rdida -a se6alada0 4a 2emato*o-esis 2ace referencia a este*roceso continuo de *roduccin de c(lulas 2emticas0 )l sistema 2emato*o-(tico est com*uesto *or diferentes ti*os celularesorganizadosjerr.uicamente0 Mientrassudesarrollo-maduracinsucedeenlocalizaciones anatmicas concretas, los elementos maduros -, en menor medida,los inmaduros circulan juntos *or la ;P0 3. Lista de requerimientos 5ceite de inmersin Krotis Microsco*io 22Hematologa Serie Blanca 4. #$cnica >olocar una gota de aceite de inmersin sore el frotis0 )nfocar en el microsco*io con el ocular de 1##+0 'istinguir los diferentes estadios de los linfocitos05. Esquemas 6.!ser"aciones)l sistema2emato*o-(ticoestcom*uesto*or diferentesti*oscelulares.uederi/an de la diferenciacin - e+*ansin de *rogenitores inmaduros0 ;ufuncionamientocorrectoasegurala*roduccindelasc(lulasres*onsalesdeltrans*ortedeo+%geno, lacoagulacinsangu%nea-lainmunidad0 ;eorganizacomo una jerar.u%a en la .ue las relaciones entre los diferentes ti*os celulares seasan en la ca*acidad de *roliferacin - de diferenciacin celular0 )l funcionamientonormal dela2emato*o-esisresultadelainteraccinentremecanismos intracelulares - la influencia del microamiente donde se desarrollanlas c(lulas 2emato*o-(ticas0 )ste gru*o de c(lulas es el res*onsale de la generacin continua - de *or /idade todas las dems c(lulas 2emticas0 ;on las c(lulas con la m+ima ca*acidadde autorreno/acin - diferenciacin, caracter%sticas .ue se /an *erdiendoconforme las c(lulas 2emato*o-(ticas se diferencian en elementos ms maduros0