Micro Bacteria

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    11-Jul-2015
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OBJETIVO: Identificar las especies patgenas de las vas gastrointestinales a travs del coprocultivo y de sus reacciones bioqumicas INTODUCCION La alta incidencia de procesos infecciosos entricos en la poblacin en general, en pases desarrollados y en vas de desarrollo, y sus elevados ndices de morbimortalidad entre determinadas subpoblaciones (nios y ancianos), hacen que este tipo de patologa siga cobrando gran inters desde el punto de vista clnico y microbiolgico. En pases en vas de desarrollo suele ser la causa ms frecuente de muerte y desnutricin en pacientes en edad peditrica. En pases desarrollados, debido al aumento de la calidad de vida, hay una disminucin de la frecuencia y mortalidad, siendo la mayora de los procesos autolimitados y resueltos con tratamiento adecuado. FINALIDAD DEL COPROCULTIVO La finalidad del coprocultivo es determinar el pronostico del o los agentes causantes de las infecciones intestinales y toxiinfeccin alimentaria estas por lo general estn producidas por m. O. Pertenecientes a la familia de las entero bacterias no por ello se descarta a otros m. O. Como stafilococcus productores de entero toxinas Estreptococos , Clostridios , etc. As como tambin virus , hongos y parsitos . La bsqueda del agente causal no se descarta despus de procesado una sola muestra ,la eliminacin del posible agente patgeno se hace muchas beses en forma intermitente obligando al microbilogo repetir el anlisis por lo comn despus de una semana . INDICACIONES DEL COPROCULTIVO Generalmente suele indicarse en un cuadro entrico infeccioso persistente de ms de 2 3 das, se aconseja la toma de muestras para exmenes de laboratorio. Se recomienda la evaluacin del cuadro: su duracin, su gravedad (grado de deshidratacin, fiebre, sangre en heces, prdida de peso, etc.); y la evaluacin de los antecedentes clnicos del paciente: uso reciente de antibiticos (diarreas asociadas a uso de antibiticos), edad del paciente (los rota virus son la primera causa de gastroenteritis deshidratante en nios), ingestin de mariscos poco cocidos (orienta hacia la infeccin por vibriones o virus smil Norwalk), viajes a zonas tropicales (aumentaran las infecciones por parsitos, virus, y E. coli entero hemorrgico O157), en huspedes inmuncomprometidos se tendran que considerar un amplio espectro de agentes etiolgicos (bacterianos, parasitarios, vricos y micolgicos), en brotes epidmicos se debe orientar hacia la presencia de S. aureus, Cl. perfringens, Salmonella, Vibriones, Shigella, Campylobacter, E. coli, B. Creus. Algunos de ellos escapan a la rutina diagnstica (S. aureus, B. Creus, etc.) porque lo que suele interesar es el estudio de su poder toxignico. Finalmente en cuadros gastroentricos que persisten durante ms de 10 das, se recomiendan los exmenes parasicolgicos. ETIOLOGA El nmero de microorganismos responsables de cuadros entricos se ha ido ampliando debido al mejor conocimiento de los mismos y al desarrollo de mtodos diagnsticos cada vez ms sensibles.

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Diversos microorganismos afectan directamente o a travs de sus toxinas al tubo digestivo provocando cuadros diarreicos, dolor abdominal, vmitos, fiebre, etc. Las infecciones gastrointestinales pueden tener una etiologa bacteriana y/o toxiinfeccin alimentara, vrica y parasitaria. BACTERIANA : Entre las que incluiremos Salmonella, Campylobacter, Helicobacter, Shigella, Yersinia entero colitica ,E. Coli entero patgeno , Psedomonas , Aeromonas , hidrfila , Pleciomonas , B. Creus , Clostridium difficile, Staphylococcus aureus, vibrios, y otras menos frecuentes como Mycobacterium tuberculosis . VIRICA : Los virus productores de gastroenteritis son Rotavirus, Adenovirus, virus Norwalk, entre otros. PARASITARIA : Los agentes etiolgicos parasitarios pueden representar un amplio grupo de los que slo mencionaremos algunos como Giardia lambia , Cryptosporidium, Entamoeba histoltica, Ciclos porra, Blastocystis, etc. MICOTICA : levaduras como cndida albicans . Al igual que en el caso de otras muestras humanas, sera conveniente que el clnico orientase al laboratorio sobre el proceso de infeccin y la etiologa sospechosa. Todo ello repercutir en beneficio del paciente, permitiendo ganar tiempo en la obtencin del diagnstico y disminuyendo el coste del precio del anlisis. Esta orientacin es de gran importancia, y en caso de no recibirla, sin ningn tipo de reparos debe ser el microbilogo quien la solicite al mdico para que le d informes sobre detalles epidemiolgicos, perodo de incubacin, as como si el paciente cursa o no con fiebre. Es preciso recordar que las intoxicaciones alimentarias, es decir, las debidas a toxinas producidas fuera del hospedador y despus ingeridas, generalmente no cursan con fiebre y tienen un perodo de incubacin muy corto; en cambio, las producidas directamente por microorganismos cursan habitualmente con fiebre y tardan ms en aparecer. En la tabla 1 se justifica, en parte, lo expuesto. RELACION ENTRE ALGUNOS TIPOS DE GASTROENTERITIS Y LA FIEBRE (1) Patologa causada por Perodo de incubacin (3) Sntomas comunes (4) (2) Nuseas, vmitos, calambres abdominales, Staphylococcus aureus. Toxina (termoestable). 26 horas. diarrea (30 %), sin fiebre o muy poca. Diarrea, dolor abdominal, Salmonella. Infeccin 1236 horas. por lo comn fiebre. Diarrea lquida con mucus; Shigella Infeccin 2472 horas. la fiebre es habitual Toxina (moderadamente Diarrea, calambres, sin Clostridium perfringens. 612 horas. termoestable) fiebre o muy poca. Gastroenteritis inicial Clostridium botulinum. Toxina (termoestable) Variable (de horas a das) seguida por efectos de tipo curare. Microorganismos

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(1) La tabla describe algunos microorganismos productores de gastroenteritis. (2) Patologa causada por la produccin de toxinas o por enteroinvasividad. (3) El efecto patolgico se manifiesta generalmente antes si el microorganismo produce toxinas. (4) Entre los sntomas de gastroenteritis figura siempre la diarrea y slo en los casos de infeccin es habitual la fiebre. OBTENCIN DE LA MUESTRA Se utilizaran heces recientes en un recipiente limpio de boca ancha y cierre hermtico con un volumen mnimo de 2 a 4 g en heces pastosas y 5 a 10 ml en heces lquidas. En general debe desaconsejarse el uso de hisopos rectales y restringirlo a casos excepcionales como en neonatos. En muestras digestivas se puede utilizar aspirado gstrico o duodenal. Las biopsias y muestras obtenidas por endoscopia son fundamentales para la bsqueda de Helicobacter pylori (biopsia gstrica y duodenal). La biopsia rectal es empleada para la deteccin de Entamoeba histoltica. El meconio se suele utilizar para estudio perifrico en neonatos con riesgo de sepsis. En muestras para estudio parasicolgico se envan con frecuencia estas en frascos cerrados con lquido conservador. La obtencin de la muestra se har depositando directamente la misma en un recipiente estril, para lo cual puede servir una placa de Petri o un frasco de boca ancha. En caso de no ser posible esta toma directa, se recoger con una cuchara estril alguna porcin del material fecal recin emitido, que no haya entrado en contacto con el frasco receptor (orinal), y se verter en un contenedor estril. Se recomienda procesar las muestras en el menor tiempo posible puesto que un numero de m. O. No sobreviven a lo cambios en el PH lo cual ocurre cuando baja la temperatura , esto es especialmente importante cuando se trata de Shigella y un numero apreciable de salmonellas , si se desea preservar las muestras se deben de someter a la accin de un preservante como el buffer fosfato 0.033 M mezclado con igual volumen de glicerina se estar frente a un PH de 7.0 . las muestras se obtienen por evacuacin natural o mediante frotis rectal de una evacuacin natural tomar las porciones que presenten mucosidad y sangre , cuando se obtiene la muestra por frotis rectal se debe de utilizar una torunda de 6 y sembrar inmediatamente en los medios apropiados o en su efecto colocar en un medio de transporte . este mtodo de toma de muestra es por lo general utilizado en lactantes . El producto as recogido se debe sembrar inmediatamente, incluso en la misma habitacin del paciente si ello es posible, pues algunos patgenos intestinales, concretamente Shigella y algunas especies de Salmonella, sobreviven muy poco tiempo a los cambios de pH que sufren las heces en contacto con el ambiente. En caso de no poder sembrar la muestra in situ, y ante la necesidad de mandarla a un laboratorio, aunque est relativamente cercano, es conveniente enviar parte de ella, incluida en algn medio de transporte que mantenga el pH cercano a la neutralidad. Entre estos medios de transporte se pueden citar: a) Buffer fosfato 0,033 M, mezclado en partes iguales con glicerina. b) Medio tamponado con indicador (Sachs, 1939). Es parecido al anterior, con la innovacin de incluir un indicador, que seala que el medio slo se puede utilizar en condiciones de coloracin rosa y que se debe desechar cuando adquiere tonalidad amarilla. 3

c) Medio de Hajna. Es un excelente medio para el transporte de heces que contienen Salmonella o Shigella.. Puede adquirirse comercializado en forma deshidratada y aadirle, una vez rehidratado, glicerina al 30 por 100. d) Caldo GN. Debido tambin a Hajna. e) Medio de transporte de CaryBlair. Es quiz el ms aceptado universalmente. Permite incluso la recuperacin de anaerobios. NMERO DE MUESTRAS Si con la primera muestra no se detecta la presencia de entero patgenos, es necesario enviar dos tomas ms en diferentes das. MUESTRAS INADECUADAS No se consideran adecuadas las heces emitidas no procesadas antes de 2 horas y no refrigeradas y el envo de tres muestras de heces el mismo da. OBSERVACIONES Las muestras debern tomarse antes de la administracin de antibiticos y se debe indicar siempre en el volante de peticin el juicio diagnstico de presuncin, la edad y explcitamente algunas investigaciones especiales como toxina de C. difficile. PROCESAMIENTO Y VALORACIN

OBSERVACIN DE LA MUESTRA Se puede realizar un ex