Micro Biolog i A

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El diseño, esquema, modelo, ilustraciones, fotografías y las marcascontenidas en este material están protegidos por las leyes de Copyrighto de Derechos de Autor, de los cuales es titular la ENTIDAD PROMOTORADE SALUD ORGANISMO COOPERATIVO SALUDCOOP. Es distribuido deforma gratuita con el fin de capacitar internamente y orientar a losprofesionales de la salud del Grupo SaludCoop.

No está permitida la fijación, reproducción, transmisión y comunicacióntotal o parcial de este documento, ni la difusión o publicación de sucontenido por ningún medio electrónico, impreso, fotocopia u otro, sinel permiso previo y por escrito de SALUDCOOP EPS. En consecuencia,el usuario de la información asume toda responsabilidad y riesgo por eluso y aplicación de esta información.

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SALUS KEDOS No. 9 Agosto de 2005. Manual deCapacitación interna que circula entre los profesionalesde la salud del Grupo SaludCoop.

COMITÉ EDITORIALCarlos Gustavo Palacino Antía, Alberto Castro Cantillo,María Antonina Román Ochoa, Patricia Guerra Morales,Maritza Pérez.

DIRECTORAlberto Castro CantilloVicepresidente Científico

DISEÑO GRÁFICOCarolina Martínez Apráez

DIAGRAMACIÓNLina Marcela Rojas Gutierréz

DESARROLLOHeOn

AVAL ACÁDEMICOFundación Universitaria Juan N. Corpas

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CARLOS GUSTAVO PALACINO ANTIAPresidente Ejecutivo

Cordialmente,

EDITORIAL

Como eje central del Programa Calidad sin límites seencuentra la capacitación, motivación y satisfacción detodos nuestros colaboradores; por lo cual continuamos conel propósito de preparar módulos de estudio que se ajustencada vez más a las necesidades de los profesionales y dela empresa, en pos de un servicio que genere en nuestrosusuarios un alto nivel de confianza.

Es por esto que nuestra Cooperativa da tanta importanciaal Programa de Educación continua a Profesionales de laSalud y busca fortalecerlo e innovarlo año a año. Esperamosde igual manera el compromiso y entusiasmo de nuestrosprofesionales de la salud mediante su participación activaen la preparación del tema, en la presentación del exameny en el seguimiento y aplicación de los conceptosaprendidos.

Esta es una invitación para que valoremos y aprovechemos los esfuerzosque la empresa hace día a día por mantener a nuestros profesionalesde la salud actualizados y por unificar criterios de atención en labúsqueda continua de la calidad; es un llamado a estudiarconcienzudamente, a presentar con entusiasmo los exámenesprogramados, a participar y aprovechar los diferentes talleresorganizados y a sentirnos orgullosos de pertenecer a la gran familiaSaludCoop.

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AUTORES

Gloria D. Pacheco Sierra. Bacterióloga Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca. Profesional experta en Microbiología conamplia experiencia en la parte clínica, docencia e investigación. Miembro de la Asociación Colombiana de Infectología. DocentePontificia Universidad Javeriana en la Especialización de Microbiología Clínica. Trabajó en las Secciones de Microbiología de la FundaciónSanta Fe de Bogotá, Preventium S.A., Instituto Nacional de Cancerología y Hospital de San Ignacio. Trabajó con Rochem Biocare deColombia como Asesora en Línea de Microbiología MicroScanÒ Dade Behring.

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CONTENIDO

Microbiología.

Recomendaciones del Instituto de Normas deLaboratorio y Clínica.

Protocolo de confirmación Manual para la detecciónde ciertos mecanismos de resistencia bacteriana.

Tecnología

Lecturas Recomendadas

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MICROBIOLOGÍA

Es el estudio de los organismos de tamaño microscópico, que incluyen:

Bacterias,Protozoos,Virus,Ciertas algasHongos

La microbiología es una ciencia relativamente joven que ha prestado magníficos servicios a la humanidad a través de su historia. Desde sus comienzos, la investigaciónmicrobiológica y sus aplicaciones han incidido sobre la salud, la nutrición y el medio ambiente y, en consecuencia, han ejercido una gran influencia sobre la sociedad, delos seres vivos (animales y vegetales).

MICROBIOLOGÍA CLÍNICA

Es una disciplina aplicada de la Medicina que estudia los microorganismos capaces de provocar enfermedades en los seres vivos. Los numerosos avances conceptualesde esta ciencia tienen aplicación práctica en la resolución de una vasta gama de problemas que aquejan a la sociedad contemporánea. En el terreno de la salud, serequieren mayores conocimientos acerca de procedimientos para detectar microorganismos patógenos, prevenir su diseminación y diseñar estrategias para el tratamientode enfermedades humanas.

En nuestro mundo actual, que atraviesa un proceso de globalización irreversible, la integración de esfuerzos entre distintos países es la alternativa lógica a problemas queafectan a todo el planeta. La formación de los profesionales de la microbiología, tanto para la investigación básica como desarrollar sus múltiples aplicaciones, requiereel estudio de disciplinas que se actualizan permanentemente. Como en la mayoría de las ciencias experimentales, la educación continuada es necesaria para poderdesarrollar eficazmente el propio trabajo.

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La Microbiología Médica en su diagnóstico comprende:

1) El diagnóstico etiológico de las enfermedades infecciosas por medio del aislamiento e identificación de los microorganismos infecciosos, y la demostraciónde respuestas inmunológicas .

2) La selección racional del tratamiento antimicrobiano sobre la base de las pruebas de laboratorio.

En el campo de las enfermedades infecciosas los resultados de las pruebas de laboratorio dependen principalmente de la calidad de la muestra, del tiempo en que serecolecta y del cuidado con que se realiza el procedimiento. La muestra debe ser obtenida del sitio más adecuado para proporcionar el microorganismo infeccioso en eseestado de la enfermedad y debe ser manejada de tal forma que favorezca la supervivencia y crecimiento del microorganismo patógeno. La forma más eficaz de garantizarla supervivencia del microorganismo infeccioso es utilizar en la toma de las muestras, medios de transporte adecuados.

Los medios de transporte son medios diseñados especialmente para el transporte de muestras para cultivos, asegurando la viabilidad de los microorganismos desde elmomento de la toma de la muestra hasta su siembra en el laboratorio. El medio de Stuart modificado se usa para el transporte de microorganismos exigentes. La siembradebe efectuarse dentro de las 24 a 48 horas siguientes a la obtención de la muestra.

El medio de Cary Blair se utiliza primordialmente en el transporte de materia fecal, debido, a que la viabilidad de las especies de Shigella es superior que en otros mediosde transporte.

El medio de transporte para anaerobios y microaerófilos se utiliza generalmente en casos de muestras de heridas y abscesos.

BACTERIAS

Son microorganismos procariotas, unicelulares, de tamaño microscópico (del orden de los micrones).CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES :

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-Están contenidas en una Pared Celular-Poseen ambos tipos de ácidos nucleicos (ADN y ARN)-Se multiplican por fisión binaria (tipo de reproducción asexual, donde la replicación es lineal, comenzando en un extremo de la cadena de ADN y terminandoen el otro, decimos que es semi-conservadora ya que cada una de las cadenas complementarias sirven de molde para la síntesis de otra).

-Pueden ser :

a.Aerobias, Anaerobias o Facultativasb.Móviles o Inmóvilesc.Patógenas (causan enfermedades en el organismo al que invaden) o Saprofitas (es decir, viven libres en la naturaleza, se nutren de materia inorgánicau orgánica, siendo responsables de la transformación de la materia orgánica en mineral y de los ciclos del N y del C en la naturaleza).

1-PARED CELULAR :

Es una estructura rígida y gruesa presente en casi todas las especies bacterianas dando forma a labacteria; se halla separada de la Membrana Citoplasmática por el Espacio Peri plasmático(este espacio virtual es más relevante en las bacterias Gram (–) y allí encontramos enzimas y proteínascomo la fosfatasa alcalina y ácida, desoxiribonucleasas, ribonucleasas y penicilinazas). Se pone enevidencia utilizando la Coloración de Gram (la que permite distinguir bacterias Gram (-) , bacteriasGram (+) y bacterias sin pared (Micoplasma y formas L – Bacterianas que no se colorean) o bienutilizando tinción de Ziehl Neelsen podemos observarla en el caso de los bacilos Acido AlcoholResistentes (BAAR).

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-Composición: Su principal componente es el Péptidoglicano o Mureína:

en el caso de las Gram : N- Acetilglucosamina + N – Acetilmurámico; y en el caso de las BAAR : N – Acetilglucosamina + N – Glucosil murámico

-Propiedades y Funciones:

a. Brinda protección y resistencia a la bacteria frente a los posibles cambios de presión osmótica del medio en el que se encuentra y a la acción deciertos agentes externos.

b. Presenta poros que actúan como filtros, permitiendo el paso de agua y metabolitos esenciales.c. Presenta antígenos de tipo y grupo específicos.d. Participa en la división (multiplicación) bacteriana (se invagina junto con la membrana plasmática)e. En las bacterias Gram (–) tiene poder patógeno debido a que presenta endotoxinas (Lípido A).f. Es el sustrato donde actúan los β -Lactámicos y otros antimicrobianos.g. Resulta ser el fundamento de la Coloración de Gram

-Síntesis de la Pared: Los precursores son sintetizados en el citoplasma bacteriano, luego son transportados a través de la MP, se forma y elonga un polímero linealy finalmente se establecen puentes de unión entre los polímeros constitutivos. La síntesis de la pared es inhibida por los β - Lactámicos.

2.- MEMBRANA CITOPLASMÁTICA (MC):

Es una bicapa lipídica sin esteroles, que presenta inclusiones de proteínas y glucolípidos que formanporos. También presenta enzimas , bajo control cromosómico, como Fosfatasa alcalina, Hidrolazas,Penicilinazas. Su cara externa presenta la proteína fijadora de penicilina (dicha proteína interviene en laformación del peptidoglucano o mureína y funciona como sitio blanco para la acción de los β-Lactámicos);su cara interna se relaciona con el ARN-m, Ribosomas y el Nucleoide.

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-Propiedades y Funciones:

a. Actúa como una barrera osmótica activa y selectivab. Participa en la síntesis de la pared celular y la cápsulac. Realiza síntesis de ATPd. Es el sustrato donde actúan Antibióticos como la Polimixina B (que alteran su permeabilidad)

En las bacterias Gram (+) podemos distinguir repliegues de la MC, denominados mesosomas.

Mesosomas :

- Mesosomas Septales: Estos repliegues participan en la división celular.- Mesosomas Laterales: Participan en funciones de secreción (Ej. Secreción de enzimas β-Lactamasas)

3.- CITOPLASMA :

Es una masa coloidal constituida por agua (85 %), minerales y fermentos. No contiene sistemas membranosos (organelas). Presenta un aspecto granuloso, distinguiéndose:

a.- Granulaciones mayores o microscópicas : Son vacuolas que almacenan sustancias de reserva, glucógeno, líquidos o gases.b.- Granulaciones Submicroscópicas : Son los ribosomas.

4.- RIBOSOMAS :

Son gránulos de unas 200 µm de diámetro, ricos en RNA y proteínas. Poseen un coeficiente de sedimentación de 70s (30s – 50s). Su función es realizar la síntesis deproteínas. Son el sitio blanco donde actúan varios antimicrobianos como loa Aminoglicósidos, Tetraciclinas, Cloramfenicol, Macrólidos y Lincosaminas (inhiben la síntesisde proteínas de la bacteria).

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5.- NUCLEOIDE (ADN CROMOSÓMICO):

Consiste en un único cromosoma (filamento de ADN) que se encuentra apelotonado (en su estructura en doble hélice no presenta puentes de histonas). En algunos puntosentra en relación con la MP o con sus Mesosomas.

-Propiedades y Funciones :

1. Confiere a la bacteria sus peculiaridades genéticas.2. Interviene en el mecanismo de transferencia hereditaria.3. Regula la Síntesis Protéinica.4. Induce los cambios que llevan a la división celular5. Es el sitio de acción donde actúan antibióticos como las Quinolonas (Ac. Nalidixico, Norfloxacina, etc), Rifampicina y Metronidazol.

-Tipo de Replicación :

La replicación es lineal, comenzando en un extremo y terminando en el otro. El ADN Cromosómico se auto reproduce por un mecanismo semi conservador , donde lacadena complementaria se separa y sirve de molde para la síntesis de otra cadena.

6.- FLAGELO:

Se trata de una estructura helicoidal que se comporta como órgano locomotor de la bacteria, además presenta el Ag H (específico de tipo) que es el responsable de laaglutinación flagelar.

7.- FIMBRIAS O PILIS:

Se trata de estructuras filamentosas carentes de movilidad, constituidas por una proteína llamada Pilina. Por lo general están presentes en las bacterias Gram (–) ,mientras que en las bacterias Gram (+) sólo se describen en el Corynebacterium renale y algunos Streptocococcus spp.

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1. Propiedad Antigénica2. Brindan Adherencia : ya sea a superficies de látex , hematíes y/o al glucocálix de las células epiteliales.

-Algunos tipos de Pilis (F e I) intervienen en la transferencia de material genético por conjugación-Pili F: Filamento Sexual, largo , responsable de transmisión hereditaria-Pili I: Filamento corto, responsable de la transmisión del factor Col (productor de bacteriocinas)

8.- CAPSULA:

Estructura compleja, de grosor variable que rodea a una o más bacterias. Puede estar presente tanto en bacterias Gram (–) como Gram (+).

-Composición : Contiene Agua en un 90% y polímeros orgánicos (en e género Bacillus contiene: polisacáridos y polipéptidos)


a. Propiedad Antifagocitaria : Dificulta o impide la fagocitosis, lo cual aumenta o potencia su virulencia ya que favorece la multiplicación y facilita la invasión

b. Brinda Protección frente a Fagos y Antibióticos: Dificulta la fijación de bacteriófagos e impide el paso de Antibióticos que puedan afectar a la bacteria.

c. Propiedades Antigénicas :

-Induce la producción de anticuerpos protectores (esto es útil en la producción algunas vacunas)-Permite la diferenciación de tipos serológicos dentro de la misma especie ya sea por aglutinación con sueros específicos o por el fenómeno devitrifacción o de Quellung (hinchazón de la cápsula)

d. Orienta a la clasificación mediante :

-Pruebas bioquímicas o inmunológicas.-Microscopía de contraste de fase (donde se la observa como un halo claro y refringente)-Tinción negativa con Tinta China

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Síntesis de Cápsula : Se realiza a partir de la MP.

E.- ESPOROS:

Son elementos de reproducción y/o de resistencia a un medio adverso que presentan algunas bacterias , especialmente del género bacilar. Su forma, tamaño y ubicaciónvaría según la especie.

-Tipos :

-Endosporas: espora presente en el interior de la bacteria. Destinada a germinar originando la forma vegetativa de la que deriva.

-Exosporas : espora que permanece libre en el medio ambiente, constituyendo la forma de resistencia bacteriana ante condiciones adversas o desfavorables(nutrición, desecación, temperatura, presencia de agentes químicos, presiones, etc.)

Propiedades y Funciones :

-Son resistentes al calor, a la desecación, a las presiones, a los agentes químicos, a los rayos U.V. y radiaciones ionizantes.-Mantienen la virulencia de la forma vegetativa de la que derivan.-Tiene un muy bajo metabolismo que les permite permanecer viables por períodos de tiempo indefinidos.-Tiene propiedades inmunogénicas.

F.- PLASMIDOS (ADN EXTRACROMOSOMICO):

Se trata de una estructura esférica, que codifica independiente del Nucleoide y que contiene información genética para sintetizar sustancias que no son indispensablespara la bacteria.

Tipos y Funciones:

Los Plásmidos se clasifican por los caracteres que expresan y se designan según esas propiedades

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-Plásmido “Ent” : Codifica la síntesis de enterotoxinas.-Plásmido “Inv” : Da a las bacterias enteroinvasivas la capacidad de penetración a las células epiteliales del intestino.-Plásmido “K” : Codifica la Producción de los Ag de superficie de la Escherichia Coli.-Plásmido “Hly” : Codifica la producción de β β β β β -Hemolisina, responsable de la lisis de hematíes o glóbulos rojos-Factor F (sexual) : Son plásmidos auto transferibles, responsables de la transferencia de genes por conjugación que codifican la producción de Pilis sexuales o F.-Factor Col : codifican la producción de bacteriocinas (compuestos similares a los Antibióticos) que resultan letales para otras bacterias .-Factor R (de resistencia) : Es un Plásmido, presente en ciertas bacterias Gram (–) , que codifica los mecanismos de resistencia a uno o más Antibióticos.

MECANISMOS DE LA ACCIÓN PATÓGENA

COLONIZACIÓN:

Es la capacidad de llegar a la superficie del huésped por una puerta de entrada (piel o mucosas), formar o establecer una colonia en el epitelio y resistir la acción de lossistemas locales de defensa.

Se entiende por colonia bacteriana a la agrupación de bacterias originadas a partir de una bacteria madre que se establecen y extienden por determinado medio.

Las bacterias patógenas pueden proceder :

- Exterior: Llegan al organismo por una puerta de entrada causando infecciones exógenas.- Endógenas: Son bacterias oportunistas, que integran la población de la flora normal, y que por determinados factores alcanzaron la capacidad de producir

infecciones endógenas.

En cualquier caso , para iniciar la infección, los microorganismos deben fijarse o adherirse a las células y colonizar el epitelio.

PENETRACIÓN:

Es la capacidad de las bacterias para atravesar la barrera cutáneo – mucosa, alcanzar los tejidos subyacentes y ponerse en contacto con el medio interno del huésped,manifestando su acción patógena.

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Respecto a este punto, podemos decir que existen :

A.Bacterias Sin poder de Penetración:Estas bacterias no precisan atravesar el epitelio para expresar su acción patógena. Estas se adhieren, se multiplican, colonizan el epitelio donde liberan unaexotoxina soluble que al ser absorbida en la mucosa puede ejercer o una acción local o general. Ejemplos: (Bordetella pertussis, Vibrio cholerae, Corynebacteriumdiphtheriae)

B.Bacterias con capacidad de Penetración Pasiva:Estas bacterias atraviesan pasivamente el epitelio, ya sea mediante,1.- un vector de transmisión (artrópodos y otros insectos) : las bacterias son inoculadas a través del epitelio intacto.2.- heridas, quemaduras, catéteres, etc.: las bacterias atraviesan un epitelio que presente alteraciones anatómicas y funcionales.

C.Bacterias con Capacidad de Penetración Activa: Estas bacterias penetran activamente el epitelio, mediante endocitosis realizada por la célula huésped.Ej. Escherichia coli, Shigella, etc.

MULTIPLICACIÓN E INVASIÓN

MULTIPLICACIÓN: Es la capacidad de reproducirse y alcanzar un número crítico que les permita para invadir y desarrollar su acción patógena, sorteando los mecanismosdefensivos del huésped. Para ello necesitan obtener del organismo los elementos nutritivos, necesarios para su crecimiento y reproducción; cuando no los encuentran, nopueden multiplicarse y por ende no pueden desarrollar la infección o ésta es controlada con mayor facilidad en un lapso de tiempo breve.

INVASIÓN: Es la Capacidad de favorecer la difusión de la infección bacteriana en el organismo (ésta se debe a la producción de algunos metabolitos, enzimas y otrassustancias) ya sea interfiriendo los mecanismos defensivos del huésped o facilitando la penetración del microorganismo.

-Factores que favorecen la Invasión : En su mayoría son enzimas hidrolíticas que actúan sobre :a. Células y tejidos: Colagenasas, Hialuronidasa (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, etc.)b. Desdoblamiento de: Proteínas (por parte de proteasas), Mucina (Mucinasas), Lípidos (Lipasas), Ac. Nucleicos (Nucleasa)c. Proceso de Coagulación: Coagulasa (transforma fibrinógeno en fibrina) Ej. : Staphylococcus aureus, Quinasa (Transforma plasminógeno en

plasmina) Ej. : Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus.

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CAPACIDAD LESIONAL

Es la capacidad de producir alteraciones y/o lesiones en las células y tejidos del huésped, responsables del cuadro patológico. Estas alteraciones pueden ser producidaspor acción directa (presencia de Antígenos Capsulares, Somáticos o Flagelares) o por mecanismos de acción Indirectos (producción de Sustancias Tóxicas para las célulashuéspedes), lo cuales producen un proceso inflamatorio y ponen en marcha mecanismos inmunológicos responsables del cuadro clínico.

FACTORES QUE INTERVIENEN:

ACCION TOXICA : Determinada por la producción de Exotoxinas y/o Endotoxinas

-ExotoxinasSon sustancias de naturaleza proteica que se liberan de forma directa o a través de vesículas, sin que se produzca lisis bacteriana. Frecuentemente estáncodificadas por plásmidos o fagos; a veces consisten en 2 o más subunidades (una de las cuales sirve para adherirse y entrar a la célula huésped , mientras queotra activa o inhibe determinada función celular). Tiene una acción específica y las podemos clasificar en:

Neurotoxinas: (toxina : diftérica, tetánica, botulínica, etc)

Enterotoxinas: (toxina de: Bordetella pertussis, Clostridium perfringens, Clostridium difficile, Shigella dysenteriae, etc.).Algunas toxinas al ser inactivadas (con formaldehído)no alteran su antigenicidad, y los toxoides resultantes proporcionan algunas de las vacunas más eficaces(Ej. Toxoide tetánico y Toxoide diftérico)

-EndotoxinasSon sustancia de naturaleza lipopolisacárida, localizadas en la superficie celular del microorganismo y que son liberadas por lisis bacteriana. Son producidasprincipalmente por las bacterias Gram Negativas de los géneros Escherichia, Salmonella, Shigella y Klebsiella. Los lipopolisacáridos (LPS) estimulan una granvariedad de respuestas por parte del huésped. Desde el punto de vista clínico, los efectos más importantes de los LPS son la fiebre y el colapso vascular o Shock.La fiebre, actualmente se atribuye a la acción de citoquinas sobre el hipotálamo (principalmente la IL-1 y el factor tumoral o TNF) y puede beneficiar al huésped,al microorganismo o a ambos . En respuesta a los LPS, los macrófagos son quienes producen estas 2 citoquinas. El Shock por Endotoxinas (Shock Séptico) sesuele asociar con la diseminación sistémica del microorganismo y, el ejemplo más común es las septicemia por bacterias Gram Negativas como Escherichia coli,Neisseria meningitidis, etc.

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MECANISMOS INFLAMATORIOS:

Ya sea por mecanismos de acción directa o indirecta, las bacterias ponen en marcha el proceso inflamatorio; permitiendo que lleguen al foco inflamatorio los fagocitos.Si el microorganismo fuere capaz de producir la destrucción de los fagocitos, la liberación de enzimas lisosómicas desde estos últimos, ampliarán aún más la reaccióninflamatoria y llevando a alteraciones patológicas como la formación de granulomas.

MECANISMOS INMUNOLÓGICOS:

Las alteraciones patológicas también pueden deberse a fenómenos de hipersensibilidad. La simple respuesta inmune ya representa la producción de una serie dereacciones como vaso dilatación, edema, hiperplasia ganglionar, infiltración celular, etc.; estas en condiciones normales apenas influyen en el cuadro clínico , pero si seproduce un fenómeno de hipersensibilidad (respuesta inmune exagerada) el mismo puede ser el responsable de procesos patológicos graves o incluso causales demuerte.

FACTORES DE VIRULENCIA :

-FERMENTOS: Son enzimas como Mucinasas, Glicosidasas o Neuraminidasas que descomponen las proteínas del moco, facilitando la penetración.

-FACTORES DE SUPERFICIE: Como la Cápsula y/o los Antígenos de Pared que inhiben la fagocitosis y la acción de sustancias bactericidas de la mucosa.

-PROTEASAS Ig A: Es una enzima proteolítica que descompone la Ig A (subclase 1) desactivando el sistema local de defensa de la mucosa. La sintetizanmicroorganismos como Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae, etc.

-BACTERIOCINAS: Son sustancias que actúan como antibióticos frente a otras bacterias , lo que les permite competir con bacterias integrantes de la flora normalmicrobiana del huésped.

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FACTORES DETERMINANTES DE LA ACCIÓN PATÓGENA :

Son la Adherencia, la Acción Tóxica y otros componentes bacterianos :

-ADHERENCIA: Es el factor más importante en el momento de la colonización. Se lleva a cabo mediante la utilización de adhesinas que interactúan con losreceptores superficiales de la célula huésped.

-ACCION TOXICA: Como vimos ésta se debe a la producción de Exotoxinas y/o Endotoxinas, por ejemplo :

Toxinas de Amplia Acción

BACTERIA TOXINA ELAB. ESTRUCTURA Mec. de Acción Enfermedad (Órganos más afectados)

Corynebacterium diphtheriae

Toxina

Diftérica

Subunidad A +

Subunidad B

Inhibe la síntesis proteica a nivel

ribosomal

Difteria (Faringe y/o piel, corazón, Nervios periféricos). Las

alteraciones cardíacas, la parálisis muscular y nerviosa

conducen a la muerte por falla cardiaca y paro respiratorio.

Bacillus anthracis

Citotoxina de B. anthracis

Factor Letal +

Fac. Edematógeno +

Ag. Protector

- Produce aumento del AMPc, lo que

aumenta la permeabilidad

ocasionando edema pulmonar

Carbunco o ántrax (Pulmón) Las alteraciones causadas

(edema, Hemorragias) llevan a la formación de trombos y a una

falla circulatoria.

Pseudomonas aeruginosa

Toxina α - de P. aeruginosa

Subunidad A +

Subunidad B

Produce lisis celular

Produce alteraciones necróticas en el hígado y otros órganos, por

lo que es responsable de diversas infecciones

Neurotoxinas

Enterotoxinas (citotónica y citotóxica)

-OTROS COMPONENTES BACTERIANOS: Como porejemplo los antígenos flagelares, capsulares, de pared osomáticos; que son capaces de favorecer la Respuesta Inmune.

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RELACION HUÉSPED – BACTERIA :

CONCEPTO DE :

INFECCIÓN BACTERIANA: Es la entrada, establecimiento y multiplicación de bacterias en la superficie o interior del huésped que va asociada a una respuestaespecífica; pudiendo o no ser acompañada de manifestaciones clínicas.

COLONIZACIÓN BACTERIANA: Capacidad de las bacterias para establecerse y multiplicarse en la piel y/o mucosas del huésped en cantidades suficientes que permitanmantener un cierto número poblacional; sin que su presencia establezca o determine respuestas clínicas ni inmunológicas.

INFECCIÓN INAPARENTE O SUBCLÍNICA (ASINTOMÁTICA): Es aquel establecimiento de bacterias , que si bien induce una respuesta orgánica específica, no vaseguida de manifestaciones clínicas. Esto se debe a que hay un escaso número de bacterias, o que éstas son poco virulentas o que el huésped presenta un normalfuncionamiento de sus defensas.

ENFERMEDAD INFECCIOSA: Son aquellas enfermedades causadas por múltiples agentes patógenos (bacterias, virus, hongos y parásitos). Dichos agentes interactúancon el organismo humano de diferentes maneras, resultando así una relación que está dada por:

-PATOGENICIDAD O PODER PATÓGENO: Es la capacidad de producir daño o enfermedad por parte de una determinada especie de microorganismo. Hacereferencia a la especie. El poder patógeno no solo depende de la especie de microorganismo sino también de las características del huésped: número de bacterias+ virulencia (Mecanismos de acción patógena y factores de virulencia)

-VIRULENCIA: Es el mayor o menor grado de Patogenicidad que posee un microorganismo. Hace referencia a la cepa de determinado microorganismo.

CONCEPTO DE FLORA BACTERIANA NORMAL (FN)

Es la población de microorganismos que residen en piel y/o mucosas de las personas sanas. Tales microorganismos en su mayoría son bacterias, hongos, virus y parásitos.

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La composición de la FN es variable y depende de factores como las características zonales del organismo, la edad, el sexo, su alimentación, la higiene personal, el clima,las condiciones socioeconómicas de la población y el grado de saneamiento ambiental.

Respecto a las características zonales del organismo, diremos que estas difieren según :

-Condiciones físico – químicas (humedad, temperatura y pH).-Potencial de oxidorreducción.-Condiciones nutritivas (cantidad y calidad de nutrientes).-Presencia de receptores específicos en la membrana citoplasmática de las células huéspedes.-Presencia de sustancias inhibidoras (Lisozimas, Bacteriocinas, Ac. Grasos no saturados, Ig A secretoria).

Cabe destacar que los microorganismos están ampliamente distribuidos en la naturaleza, por ello el hombre se encuentra expuesto constantemente a los mismos desdesu nacimiento (en el paso por el canal vaginal) y luego por contacto y exposición. El hombre presenta zonas potenciales de colonización que reúnen las condiciones físico-químicas, nutricionales, etc. que pueden resultar adecuadas o no para la supervivencia y multiplicación de diversas especies de microorganismos.

IMPORTANCIA DE LA FLORA NORMAL

1. Sirve como Barrera frente a microorganismos patógenos u oportunistas.

2.En el tubo digestivo es beneficiosa para la digestión de productos no atacables por los fermentos digestivos del sujeto, así como también contribuyen a lasíntesis de algunas vitaminas como la vitamina K.

CLASIFICACION DE LAS BACTERIAS

Se basa en la afinidad o no por la tinción de Gram, su morfología y en la utilización o no de O2 en su metabolismo, las bacterias son divididas en 3 grandes grupos :Gram Negativas , Gram Positivas y aquellas que no se tiñen con Gram (ej. BAAR); a su vez estos grupos pueden estar conformados por bacterias Aerobias oAnaerobias facultativas y bacterias Anaerobias Estrictas.

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HAY BACTERIAS QUE NO SE TIÑEN CON LA COLORACIÓN DE GRAM

A. MYCOPLASMAS : No tienen Pared

B. MICOBACTERIUM (TUBERCULOSO Y LEPRAE) : Son BAAR (bacilos ácido alcohol resistentes), se tiñen con Ziehl Neelsen. Pedir cultivo específico paraMicobacterias.

C. ESPIRILOS (TREPONEMA PALIDUM) : Es una espiroqueta, que se tiñe con Giemsa o impregnación argéntica; visibles a la microscopía de campo oscuro o decontraste de fase. No pedir Cultivo

D. CHLAMIDIAS (PNEUMONIAE Y TRACHOMATIS) : Son de Parásitos Intracelulares Obligados

TAXONOMÍA Y CLASIFICACIÓN

BACTERIAS DE IMPORTANCIA CLINICA

BACILOS GRAM (-) AEROBIOS/FACULTATIVOS

ENTEROBACTERIAS:

Cedecea davisae Cedecea lapagei Cedecea neteri

Citrobacter amalonaticus Citrobacter braakii Citrobacter farmeri

Citrobacter freundii Citrobacter koseri Citrobacter sedlakii

Citrobacter werkmanii Citrobacter youngae

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ENTEROBACTERIAS: Cedecea davisae Cedecea lapagei Cedecea neteri Citrobacter amalonaticus Citrobacter braakii Citrobacter farmeri Citrobacter freundii Citrobacter koseri Citrobacter sedlakii Citrobacter werkmanii Citrobacter youngae Edwardsiella hoshinae Edwardsiella ictaluri Edwardsiella tarda Enterobacter amnigenus biogrupo 1 Enterobacter amnigenus biogrupo 2 Enterobacter asburiae Enterobacter cancerogenus Enterobacter cloacae Enterobacter gergoviae Enterobacter hormaechei Enterobacter intermedius Enterobacter sakazakii Escherichia coli Escherichia fergusonii Escherichia hermannii Escherichia vulneris Ewingella americana Hafnia alvei

Klebsiella oxytoca Klebsiella pneumoniae ssp. ozaenae

Klebsiella pneumoniae ssp. pneumoniae Klebsiella pneumoniae ssp. rhinoscleromatis

Kluyvera ascorbata Kluyvera cryocrescens

Leclercia adecarboxylata

Leminorella grimontii Leminorella richardii

Moellerella wisconsensis Morganella morganii Pantoea agglomerans Pragia fontium Proteus mirabilis Proteus penneri Proteus vulgaris Providencia alcalifaciens Providencia rettgeri Providencia rustigianii Providencia stuartii Rahnella aquatilis Raoultella (Klebsiella) ornithinolytica Salmonella choleraesuis spp. arizonae Salmonella choleraesuis spp. choleraesuis Salmonella gallinarum Salmonella paratyphi A Salmonella pullorum Salmonella species Salmonella typhi Serratia ficaria Serratia fonticola Serratia liquefaciens Serratia marcescens Serratia odorífera 1 Serratia odorífera 2 Serratia plymuthica Serratia rubidaea Shiguella boydii Shiguella dysenteriae Shiguella flexneri Shiguella sonnei Shiguella species Tatumella ptyseos Yersinia enterocolitica Yersinia frederiksenii Yersinia intermedia Yersinia kristensenii Yersinia pseudotuberculosis Yersinia ruckeri Yokenella regensburgei

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NO FERMENTADORAS: Achromobacter species Acinetobacter baumannii Acinetobacter baumannii-calcoaceticus complex Acinetobacter haemolyticus Acinetobacter lwoffii Acinetobacter species Alcaligenes faecalis Bergeyella zoohelcum Bordetella bronchiseptica Bordetella avium Bordetella hinzii Bordetella holmesii Bordetella parapertussis Bordetella pertussis Brevudimonas diminuta Brevundimonas vesicularis Burkholderia cepacia Burkholderia gladioli Burkholderia species / Ralstonia species CDC group EF4a CDC group EF4b CDC group EO2 CDC group Vb3 Chromobacterium violaceum Chryseobacterium gleum Chryseobacterium indologenes Chryseobacterium meningosepticum Comamonas terrigena Comamonas testosteroni Delftia (Comamonas) acidovorans Empedobacter brevis Kingella denitrificans Kingella kingae

Methylobacterium extorquens Moraxella atlantae Moraxella (Branhamella) catarrhalis Moraxella lacunata Moraxella nonliquefaciens Moraxella osloensis Moraxella species Myroides odoratus / odoratimimus Ochrobactrum anthropi Oligella ureolytica Oligella urethralis Pseudomonas (Chryseomonas) luteola Pseudomonas (Flavimonas) oryzihabitans Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas fluorescens Pseudomonas mendocina Pseudomonas pseudoalcaligenes Pseudomonas putida Pseudomonas species Ralstonia (Burkholderia) pickettii Ralstonia gilardii Ralstonia paucula (CDC group IVC2) Rhizobium (Agrobacterium) radiobacter Shewanella putrefaciens Sphingobacterium multivorum Sphingobacterium spiritivorum Sphingobacterium thalpophilum Sphingomonas paucimobilis Stenotrophomonas maltophilia Suttonella indologenes Weeksella virosa

2525252525

GRUPO MISCELANEO: Actinobacillus lignieresii Actinobacillus suis Actinobacillus ureae Aeromonas caviae Aeromonas hydrophila Aeromonas sobri Aeromonas veronii Aeromonas schubertii Aeromonas salmonicida ssp. masoucida Aeromonas salmonicida ssp. salmonicida Aeromonas salmonicida ssp. smithia Cardiobacterium hominis Eikenella corrodens Mannheimia (Pasteurella) haemolytica Pasteurella aerogenes Pasteurella multocida Pasteurella pneumotropica Photobacterium damselae Plesiomonas shiguelloides Vibrio alginolyticus Vibrio cholerae Vibrio metschnikovii Vibrio mimicus Vibrio parahaemolyticus Vibrio vulnificus

BACTERIAS GRAM (+) AEROBIAS/FACULTATIVAS

BACILOS GRAM POSITIVOS Arcanobacterium haemolyticum Arcanobacterium (Actinomyces) pyogenes Bacillus cereus Bacillus circulans Bacillus coagulans Bacillus licheniformis Bacillus megaterium Bacillus pumilus Bacillus sphaericus Bacillus subtilis Bacillus thuringiensis Brevibacillus brevis Brevibacterium species Cellulomonas (Oerskovia) turbata Corynebacterium amycolatum Corynebacterium diphtheriae Corynebacterium bovis Corynebacterium jeikeium Corynebacterium kutscheri Corynebacterium matruchotii Corynebacterium minutissimum Corynebacterium propinquum Corynebacterium pseudodiphtheriticum Corynebacterium pseudotuberculosis Corynebacterium renale Corynebacterium striatum Corynebacterium ulcerans Corynebacterium urealyticum Corynebacterium xerosis Dermabacter hominis

2626262626

Erysipelothrix rhusiopathiae Gardnerella vaginalis Globicatella sanguinis Leifsonia (Corynebacterium) aquatica Listeria grayi Listeria innocua Listeria ivanovii Listeria monocytogenes Listeria welshimeri Oerskovia xanthineolytica Paenibacillus (Bacillus) alvei Paenibacillus (Bacillus) macerans Rhodococcus equi Rothia dentocariosa Rothia (Stomatococcus) mucilaginosa

COCOS GRAM POSITIVOS Aerococcus urinae Aerococcus viridans Alloiococcus otitidis Dermacoccus (Micrococcus) nishinomiyaensis Enterococcus avium Enterococcus casseliflavus Enterococcus durans Enterococcus faecalis Enterococcus faecium Enterococcus gallinarum Enterococcus hirae Enterococcus raffinosus

Macrococcus (Staphylococcus) caseolyticus

Micrococcus luteus Micrococcus lylae

Pediococcus acidilactici Pediococcus damnsus Pediococcus dextrinicus

Pediococcus parvulus Pediococcus pentosaceus

2727272727

Staphylococcus aureus Staphylococcus auricularis Staphylococcus capitis ssp. capitis Staphylococcus capitis ssp. ureolyticus Staphylococcus caprae Staphylococcus carnosus Staphylococcus chromogenes Staphylococcus cohnii ssp. Cohnii Staphylococcus cohnii ssp. Urealyticum Staphylococcus epidermidis Staphylococcus equorum Staphylococcus felis Staphylococcus gallinarum Staphylococcus hominis Staphylococcus hyicus Staphylococcus intermedius Staphylococcus kloosii Staphylococcus lentus Staphylococcus lugdunensis Staphylococcus pasteuri Staphylococcus saprophyticus Staphylococcus sciuri Staphylococcus schleiferi ssp coagulans Staphylococcus simulans Staphylococcus schleiferi ssp. schieferi Staphylococcus vitulinus Staphylococcus warneri Staphylococcus xylosus Streptococcus acidominimus Streptococcus agalactiae Streptococcus anginosus Streptococcus canis Streptococcus constellatus Streptococcus cristatus Streptococcus dysgalactiae ssp. dysgalactiae Streptococcus equinus Streptococcus dysgalactiae ssp equisimilis Streptococcus equi ssp. equi Streptococcus equi ssp. zooepidemicus Streptococcus gordonii Streptococcus group C/G Streptococcus intermedius Streptococcus mitis Streptococcus mutans Streptococcus oralis Streptococcus parasanguinis Streptococcus pneumoniae Streptococcus porcinus Streptococcus pyogenes Streptococcus salivarius Streptococcus sanguinis Streptococcus sobrinus Streptococcus uberis Streptococcus vestibularis

BACTERIAS ANAEROBICAS

COCOS ANAEROBICOS

Acidaminococcus fermentans

Peptostreptococcus anaerobius Peptostreptococcus saccharolyticusPeptostreptococcus indolicus Peptostreptococcus lacrimalisPeptostreptococcus magnus Peptostreptococcus microsPeptostreptococcus prevotii Peptostreptococcus tetradiusPeptostreptococcus vaginalis

Peptococcus Níger

Ruminococcus ssp.

Staphylococcus saccharolyticus

Veillonella párvula

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CLOSTRIDIAS - BACILOS GRAM (+) ESPOROFORMADORES

Clostridium baratii Clostridium bifermentans Clostridium botulinum

Clostridium butyricum Clostridium cadaveris Clostridium difficile

Clostridium clostridioforme Clostridium hathewayi Clostridium histolyticum

Clostridium innocuum Clostridium perfringens Clostridium ramosum

Clostridium septicum Clostridium sordellii Clostridium sporogenesClostridium subterminale Clostridium symbiosum Clostridium tertium Clostridium tetani

BACILOS GRAM POSITIVOS NO ESPOROFORMADORES Actinomyces israelí Actinomyces odontolyticus Actinomyces viscosus Bifidobacterium dentium Eubacterium lentum Eubacterium limosum Lactobacillus ssp. Propionibacterium acnes Propionibacterium granulosum

Fusobacterium mortiferum Fusobacterium necrophorum Fusobacterium nucleatum

Fusobacterium varium

Porphyromonas asaccharolytica Porphyromonas catoniae

Porphyromonas cangingivalis Porphyromonas cansuici

Porphyromonas creviocanis Porphyromonas circumdentaria

Porphyromonas endodontalis Porphyromonas gingivalis

Porphyromonas gingivicanis Porphyromonas levii

Porphyromonas macacae Porphyromonas salivosa

Prevotella bivia Prevotella buccae Prevotella corporis

Prevotella denticola Prevotella disiens Prevotella intermedia

Prevotella loescheii Prevotella melaninogenica Prevotella nigrescens

Prevotella oralis group

Tannerella forsythensis

2929292929

BACTERIAS FASTIDIOSAS

Moraxella catarrhalis Neisseria cinerea Neisseria elongata

Neisseria flavescens Neisseria gonorrhoeae Neisseria lactamica

Neisseria meningitidis Neisseria mucosa Neisseria polysaccharea

Neisseria sicca Neisseria subflava

Haemophilus aphrophilus Haemophilus ducreyi Haemophilus haemolyticus

Haemophilus influenzae Haemophilus parahaemolyticus Haemophilus parainfluenzae

Haemophilus paraphrophilus Haemophilus segnis

Afipia felis

Bartonella bacilliformis Bartonella clarridgeiae Bartonella elizabethae

Bartonella henselae Bartonella quintana

Brucella abortus Brucella canis Brucella melitensis

Brucella suis

Francisella philomiragia Francisella tularencis

Legionella anisa Legionella birminghamensis Legionella bozemanii

Legionella cincinnatiensis Legionella dumoffii Legionella feeleii

Legionella gormanii Legionella hackeliae Legionella israelensis

Legionella jordanis Legionella lansingensis Legionella longbeachae

Legionella maceachernii Legionella micdadei Legionella oakridgensis

Legionella pneumophila Legionella sainthelensi Legionella tucsonensis,

Legionella wadsworthii

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El CLSI/NCCLS es una organización internacional, interdisciplinaria, no lucrativa y educacional que desarrollan normas y promueve el uso de acuerdo a pautas o guíasgenerales y voluntarias dentro de la comunidad para el cuidado de la salud.

Es reconocido a nivel mundial para la aplicación de su único proceso del acuerdo general en el desarrollo de normas y pautas o guías para las pruebas de los problemasrelacionados con el paciente y del cuidado de salud. Nuestro proceso es basado en el principio, que el acuerdo general es una manera eficaz y rentable de mejorar laspruebas del paciente y los servicios de cuidado de salud.

El consenso del CLSI/NCCLS es un mecanismo por el cual un documento es revisado por dos o más niveles para poder ser usado por la comunidad de la salud, es unproceso continuo. Los usuarios deben estar actualizados en estos documentos ya que hay cambios rápidos en tecnología que pueden afectar los procedimientos,métodos y protocolos.

Los métodos descritos por la CLSI/NCCLS, son procedimientos genéricos de referencia que pueden ser utilizados por los Laboratorios Clínicos para sus pruebas desusceptibilidad de rutina o para evaluar sistemas comerciales para un posible uso rutinario.

Un documento se publica como una Norma (Standard), Pauta o Guías (Guideline) o Informe del Comité (Report).

Norma. – Es un documento que se desarrolla a través del proceso del acuerdo general que claramente identifica los requisitos específicos, esenciales para losmateriales, métodos, o prácticas para el uso en un formulario no modificado. Una norma puede contener elementos discrecionales que se identifican claramente.

RECOMENDACIONES DEL INSTITUTO DE NORMAS DE LABORATORIO Y CLINICA(CLSI/NCCLS)

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Pauta o Guías. – Es un documento que se desarrolla a través del proceso del acuerdo general que describe el criterio para una práctica que opera general,procedimiento o material para el uso voluntario. Una pauta o guía puede usarse como escrito o ser modificada por el usuario para encajar en necesidades específicas.

Informe del Comité. – Es un documento que no se ha sido sujeto a la revisión del acuerdo general y se ha liberado por la Junta directiva

PROCESO DE ACUERDO GENERAL

El CLSI en el proceso del acuerdo general voluntario tiene un criterio formal estableciendo protocolos para:

-La autorización de un proyecto-El desarrollo y la revisión abierta de documentos-La revisión de documentos en respuesta a los comentarios hechos por los usuarios-La aceptación de un documento como una norma del acuerdo general o pauta

La mayoría de los documentos está sujeto a dos niveles de acuerdo general “Propuestos” y “Aprobados.”

Dependiendo de la necesidad por evaluación del campo o colección de los datos, también pueden dejar los documentos disponible para la revisión a un nivelintermedio de acuerdo general.

Documento Propuesto:

Es un documento del acuerdo general que sufre la primera fase de revisión por la comunidad de cuidado de salud como una norma propuesta o pauta. El documento deberecibir una revisión técnica amplia y completa, incluso una revisión global de su alcance, acercamiento y utilidad y una revisión del línea-por-línea de su volumen técnicoy editorial.

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Documento Aprobado:

Es una norma o pauta aceptada que ha logrado el acuerdo general dentro de la comunidad de cuidado de salud. Debe revisar y evaluar la utilidad del documento final,asegurar los logro del acuerdo general e identificar la necesidad por los documentos del acuerdo general adicionales.

Misión del Subcomité de Pruebas de Susceptibilidad Antimicrobiana

El subcomité de Pruebas de Susceptibilidad Antimicrobiana está compuesto de representantes de las diferentes profesiones, gobierno e industria, incluso los laboratoriosde microbiología, agencias gubernamentales, proveedores de cuidado de salud, educadores e industria farmacéutica y de diagnostico microbiológico. Usando el CLSI elproceso del acuerdo general voluntario, el subcomité desarrolla normas que promueven pruebas exactas de susceptibilidad Antimicrobiana y el reporte apropiado.

- Desarrollar los métodos de la referencia para las Pruebas de Susceptibilidad Antimicrobiana.- Mantener los parámetros de los métodos de Control de Calidad de las pruebas.- Establecer el criterio Interpretativo para los resultados de Pruebas de Susceptibilidad Antimicrobiana.- Mantener las sugerencias probando e informando estrategias que son clínicamente pertinentes y rentables.- Continuar el refinamiento de las normas y perfección en la detección de los mecanismos de resistencia a través del desarrollo de nuevos métodos o su

revisión, criterio interpretativo y parámetros de control de calidad.- Educar a los usuarios a través de la comunicación multimedia de normas y pautas o guías.- Adoptar un diálogo con los usuarios de estos métodos y aquellos que los aplican.

El último propósito de la misión del subcomité es proporcionar la información útil para permitir a los laboratorios ayudar al médico en la selección de TerapiaAntimicrobiana adecuada para el cuidado paciente.

Los valores que guían esta misión son calidad, exactitud, limpieza, trabajo en equipo, acuerdo general y confianza.

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I. SELECCIÓN DE AGENTES ANTIMICROBIANOS PARA PROBAR E INFORMAR:

A. La selección de la mayoría agentes antimicrobianos apropiados para probar e informar es una decisión tomada por cada laboratorio clínico en consulta con losMédicos, Infectólogos, Comité de Infecciones y Farmacia.Las recomendaciones para cada grupo de microorganismos comprenden la eficacia del agente probado que muestra aceptable resultado in vitro. Las consideracionesen la asignación de agentes específicos a los grupos del prueba/informe incluyen la eficacia clínica, predominio de resistencia, minimizando la emergencia o apariciónde resistencia, el costo las indicaciones de FDA, y recomendaciones del acuerdo general actuales para la primera opción y las drogas alternativas, además de losproblemas específicos descritos. Las pruebas de los agentes seleccionados pueden ser útiles para el propósito del control de la infección.

B. La lista de agentes antimicrobianos comparables se reúnen en un solo grupo que no necesitan ser duplicados en la prueba, porque los resultados interpretativos sonusualmente similares y la eficacia clínica comparable. Además, un “o” designa un grupo relacionado de agentes antimicrobianos que tienen un espectro casi idéntico deactividad y de los resultados interpretativos. Por consiguiente, usualmente se selecciona un único antimicrobiano dentro de cada grupo de selección para probar.Los antimicrobianos probados deben ser informados, a menos que el reporte se base en probar a otro antimicrobiano para proporcionar un resultado más exacto, yellos usualmente deben ser incluidos en el formulario del hospital; o el informe debe incluir notas en el pie de página que indican a los agentes antimicrobianos quenormalmente muestran los resultados interpretativos comparables. Los resultados inesperados deben ser considerados para informar.

C. GRUPO DE ANTIBIÓTICOS PARA LOS DIFERENTES REPORTES:

1.GRUPO A: Corresponde a los antibióticos que se deben incluir en las pruebas primarias de rutina así como para el reporte de los resultados para cada gruposde microorganismos específicos.

2.GRUPO B: En este grupo, los antibióticos tienen importancia clínica en infecciones nosocomiales, se deben reportar selectivamente, por ej. Cuando el microorganismoes resistente a los antibióticos del Grupo A. Otras indicaciones para informar el resultado podrían incluir una muestra seleccionada o específica; una infecciónpolimicrobiana; infecciones que involucren sitios múltiples; en caso de que el paciente sea alérgico, presente intolerancia, o fracaso para responder a unantibiótico del Grupo A; o para informar al Comité de Infección como una ayuda Epidemiológica.

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GRUPO B – PRUEBA PRIMARIA DE REPORTE SELECTIVO

Ampicilina Ceftazidima Oxacilina Penicilina o Ampicilina

Cefazolin Cefalotina

Gentamicina Penicilina

GRU

PO A

PRU

EBA

PRIM

ARIA

YR

EPO

RTE

Gentamicina Piperacilina Mezlocilina o Ticarcilina

Daptomicina

Linezolid

Qinupristin-dalfopristin

Amikacina

Amikacina

Amox-Ac. Clavulánico o Ampicilina-Sulbactam Piperacilina-Tazobactam Ticarcilina-Ac. Clavulánico

Cefepime

Azitromicina o Claritromicina o Eritromicina

Clindamicina

Cefoperazona Aztreonam

Daptomicina

Linezolid

Cefamandole o Cefonicid o Cefuroxime

Ciprofloxacina Levofloxacina

Telithromicina

Cefepime Imipenem Meropenem

Trimetropin-sulfamethoxazole

Cefmetazole Cefoperazona Cefotetan Cefoxitin

Ticarcilina –Ac. Clavulánico Tobramicina

Cefotaxime o Ceftizoxime o Ceftriaxona

Ciprofloxacina o Levofloxacina

Ertapenem Imipenem Meropenem

Mezlocilina o Piperacilina Ticarcilina

GR

UP

O B

PR

UE

BA P

RIM

AR

IA R

EPO

RTE

SEL

EC

TIVO



Vancomicina

Vancomicina

Enterococcus ssp.Enterobacterias Pseudomonas aeruginosa yotras No-Enterobacterias

Staphylococcus ssp.

Enterococcus ssp.Enterobacterias Pseudomonas aeruginosa y otras Staphylococcus ssp.

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Cefotaxime o Ceftriaxona

Cloranfenicol

Cloranfenicol

Gentamicina (Solamente – Screen de Resistencia – Alta Concentración)

Aztreonam Ceftazidime (Ambos son Indicadores para la detección de B-Lactamasas de Espectro Extendido)

Cloranfenicol

Kanamicina

Netilmicina

Ciprofloxacina o Levofloxacina u Ofloxacina Gatifloxacina o Moxifloxacina

Streptomicina (Solamente – Screen de Resistencia – Alta Concentración)

Tetraciclina Gentamicina

Tobramicina Qinupristin dalfopristin

Rifampicina

GR

UP

O

C

SU

PL

EM

EN

TA

RIO

S

RE

PO

RT

E S

EL

EC

TIV

O

Netilmicina

Tetraciclina

Cloranfenicol Eritromicina Rifampicina Tetraciclina (Estos antibióticos pueden ser probados para VRE

Enterococcus ssp.Enterobacterias Pseudomonas aeruginosa yotras No-Enterobacterias

Staphylococcus ssp.

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Carbenicilina

Cinoxacina

Lomefloxacina o Norfloxacina o

Ofloxacina

Carbenicilina

Ciprofloxacina Levofloxacina Norfloxacina

Gatifloxacina

Ceftizoxime

Lomefloxacina o

Norfloxacina

Loracarbef

Nitrofurantoina

Nitrofurantoina

Nitrofurantoina

Sulfisoxazole

Sulfisoxazole

GRU

PO U

SU

PLEM

ENTA

RIO

S SO

LAM

ENTE

PAR

A O

RIN

A

Trimetropin

Lomefloxacina o Norfloxacina o

Ofloxacina

Trimetropin

Tetraciclina

EnterococcusEnterobacterias Pseudomonas aeruginosa yotras No-Enterobacterias

Staphylococcus

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Ceftazidima

GR

UPO

PR

UEB

A PR

IMAR

IA Y

R

EPO

RTE

Imipenem Meropenem

Trimethoprim-sulfamethoxazole

Trimethoprim-sulfamethoxazole

Ceftazidima

Ceftazidima

Cloranfenicol

Cloranfenicol

Amikacina Gentamicina Tobramicina

Levofloxacina Levofloxacina

Meropenem

Minociclina

Ampicilina – Sulbactam Piperacilina – Tazobactam Ticarcilina - Clavulanato

Minociclina

Cefepime

Cefotaxime Ceftriaxona Ciprofloxacina, Gatifloxacina Levofloxacina

Doxycyclina, Minocyclina Tetraciclina

GR

UPO

B

PRU

EBA

PRIM

ARIA

REP

OR

TE S

ELEC

TIVO

Mezlocilina, Piperacilina Ticarcilina

Ticarcilina - Clavulanato

Ticarcilina - Clavulanato

Acinetobacter ssp Burkholderia cepacia Stenotrophomonas maltophilia

GR

UP

O C

SU

PLE

MEN

TAR

IOS

REP

OR

TE S

ELEC

TIV

O

P o l im ix in a B

3838383838

COMENTARIOS GENERALES:

a. Cefalotina puede ser usada como representante de Cefalotina, Cefapirin, Cefradine, Cefalexina, Cefaclor y Cefadroxil. Cefazolin, Cefuroxime, Cepodoxime,Cefprozil y Loracarbef pueden ser probados individualmente solamente en aislamientos urinarios, porque algún microorganismo puede ser susceptible a estosagentes cuando es resistente a Cefalotina.

b. Los microorganismos que son susceptibles a la Tetraciclina son también considerados susceptibles a Doxyciclina, y Minocyclina. Sin embargo, algunosmicroorganismos que son intermedios o resistentes a Tetraciclina puede ser susceptible a Doxyciclina o Minocyclina o a ambos.

c. Azitromicina, Claritromicina, Eritromicina y Clindamicina, no deben ser reportados en aislamientos urinarios.

d. Salmonella ssp. y Shiguella ssp. aisladas de materia fecal, se deben probar y reportar los siguientes antibióticos: Ampicilina, Fluoroquinolonas y Trimethoprim/Sulfametoxazole. Y en aislamiento extraintestinales de Salmonella ssp., deben ser probados y reportados: Cloranfenicol y Cefalosporinas de tercera generación.

e. Cefotaxime y Ceftriaxona se deben probar y reportar en aislamientos de Liquido Cefalorraquídeo en lugar de Cefalotina y Cefazolin.

f. Cepas de Klebsiella ssp., y E. coli que producen ESBLs pueden ser clínicamente resistentes a la terapia con Penicilinas, Cefalosporinas o Aztreonam, así invitro, sean sensibles a alguno de estos antibióticos. Para todas las cepas confirmadas que produzcan ESBLs, la prueba debe ser reportada como resistente atodas las Penicilinas, Cefalosporinas, y Aztreonam.

g. Las cepas de no-Enterobacterias con excepción de Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter spp., Burkholderia cepacia y Stenotrophomonas maltophiliadeben ser probadas por el método de Dilución.

h. Para Enterococcus spp., las Cefalosporinas, Aminoglicósidos (con excepción del Screening de Alto Nivel de Resistencia), Clindamicina, y Trimethoprim-sulfamethoxazole pueden aparecer activas in vitro, pero no son efectivas clínicamente y en los resultados de los aislamientos no deben ser reportadas consusceptibles.

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i. Los antibióticos del Grupo B, puede garantizar el antibiograma primario, pero sólo debe informarse selectivamente, como cuando el microorganismo esresistente a los antibióticos del Grupo A. Otras indicaciones para el reporte es informar estos antibióticos muestras seleccionadas; o cuando el paciente esalérgico o presenta intolerancia, o hay fracaso o falla terapéutica a un antibiótico del Grupo A; las infecciones del polimicrobianas; infecciones que involucransitios múltiples con los microorganismos diferentes; o para reportar al Comité de Infecciones como una ayuda Epidemiológica.

j. El Grupo C representa a los antibióticos que son una alternativa o suplemento que requieren que se prueben en instituciones que albergan cepas endémicaso epidémicas resistentes a uno o más de los antibióticos primarios, o para el tratamiento de microorganismos raros o informarlos al Comité de Infección comouna ayuda Epidemiológica.

k. Los aislamientos de H. influenzae en Líquido Cefalorraquídeo, sólo se deben probar y reportados rutinariamente Ampicilina, una Cefalosporina de 3ª.generación, Cloranfenicol y Meropenem.

l. Amoxacilina-Acido Clavulánico, Azithromycina, Claritromicina, Cefaclor, Cefprozil, Loracarbef, Cefnidir, Cefixime, Cefpodoxime, Cefuroxime-axetil y Telithromicinason antibióticos orales que pueden ser usados como terapia empírica en infecciones del tracto respiratorio debidas a Haemophilus spp. Los resultados de laspruebas de susceptibilidad con estos antibióticos no se utilizan a menudo para el manejo de pacientes individuales. Sin embargo, las pruebas de susceptibilidadcon estos compuestos, puede ser apropiada para vigilancia o estudios epidemiológicos.

m. La prueba de â-Lactamasa descubrirá una forma de resistencia de la penicilina y también puede usarse para proporcionar la información Epidemiológica.Las cepas con resistencia cromosómica, sólo pueden ser descubiertas con una prueba adicional, como el método de Difusión de Disco o el método de MIC.

n. Para aislamientos de Streptococcus pneumoniae en Líquido Cefalorraquídeo, se deben probar y reportar Penicilina, Cefotaxime, Ceftriaxona, Meropenem yVancomicina.

o. Rifampina no debe usarse sola en quimioterapia para Streptococcus pneumoniae.

p. Rx: Penicilina o Ampicilina es la recomendaciones en la profilaxis intra parto para Streptococcus agalactiae (B). Mientras que Cefazolin esta recomendadapara mujeres alérgicas a la Penicilina con bajo riesgo de anafilaxis, mientras que las que tienen alto riesgo de anafilaxis pueden recibir Clindamicina oEritromicina. Streptococcus agalactiae (B) es susceptible a Penicilina, Ampicilina y Cefazolin, pero puede ser resistente a Clindamicina y/o Eritromicina. CuandoStreptococcus agalactiae (B) es aislado de una mujer embarazada con alto riesgo de anafilaxis por severa alergia a la Penicilina, se debe probar y reportarClindamicina y Eritromicina.

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q. Durante una terapia prolongada, Pseudomonas aeruginosa puede desarrollar resistencia con todos los antimicrobianos. Por consiguiente, losaislamientos que son inicialmente susceptibles puede volverse resistentes dentro de tres a cuatro días después de iniciar la terapia. Se debe realizarpruebas de susceptibilidad a los aislamientos que se repiten, para garantizar su sensibilidad.

r. Para la prueba de susceptibilidad de Pseudomonas aeruginosa aislada de pacientes con Fibrosis Quística se recomienda realizar la prueba por el método deDilución en Agar o Microdilución en caldo, pero se requiere extender el tiempo de incubación a 24 horas, antes de informar el microorganismo como “Sensible”.

s. En la detección de resistencia a Oxacilina: La prueba para la detección del gen mecA o para la proteína expresada por el mecA, la PBP 2a (llamada tambiénPBP 2’) es el método más exacto para la predicción de resistencia a la Oxacilina y podría usarse para confirmar los resultados de aislamientos de Staphylococcusspp. de infecciones serias. Los aislamientos de Staphylococcus spp. que muestran llevar el gen del mecA, o PBP 2a, deben informarse como Oxacilinaresistentes. Los aislamientos que no muestran llevar el gen mecA o no produce PBP 2a, deben informarse como Oxacilina Susceptibles, si los MICS de Oxacilinason < 2 ìg/mL. Debido a la rara ocurrencia de mecanismos de resistencia de otra manera que el gen mecA, los aislamientos que son negativo para el gen delmecA o no produce PBP 2a, pero que tiene MICs de Oxacilina > 4 ìg/mL, se deben informar como Oxacilina Resistentes.

t. Las pruebas de susceptibilidad de rutina, para aislamientos de orina Staphylococcus saprophyticus no se aconseja, porque las infecciones responden aconcentraciones normalmente logradas en la orina de los antibióticos (p.ej. Nitrofurantoina, Fluoroquinolonas o Trimethoprim-sulfamethoxazole) que se usanpara tratar las infecciones del tracto urinario complicadas o no complicadas.

u. Las pruebas de susceptibilidad de rutina, para aislamientos de orina Staphylococcus saprophyticus no se aconseja, porque las infecciones responden aconcentraciones normalmente logradas en la orina de los antibióticos (p.ej. Nitrofurantoina, Fluoroquinolonas o Trimethoprim-sulfamethoxazole) que seusan para tratar las infecciones del tracto urinario complicadas o no complicadas.

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D. REPORTE SELECTIVO:Cada laboratorio debe decidir que antibióticos se deben informar rutinariamente (Grupo A), que se podría informar selectivamente (Grupo B), en consenso con losMédicos, Infectólogos, así como el Comité de Infecciones y del personal médico del hospital. Los reportes selectivos debe ayudar a mejorar la relevancia clínica deinformes de la prueba y ayuda minimizar la selección de microorganismos nosocomiales multirresistentes a antibióticos de amplio espectro. Los resultados para antibióticosdel Grupo B no informarlos rutinariamente, deben estar disponibles para la solicitud, o ellos pueden informarse para muestras seleccionadas.

II. INFORME DE RESULTADOS MIC

Pueden informarse los valores del MIC determinados como descritos directamente a médicos para el propósito del cuidado paciente. Sin embargo, es esencial para unacomprensión que los médicos conozcan la categoría interpretativa del reporte o informe de la prueba de susceptibilidad y se proporcione rutinariamente. Las categoríasinterpretativas recomendadas para los varios valores de MIC son incluidas en las tablas para cada grupo de microorganismos y son basado en los datos de evaluacióndescritos en CLSI.

1.Susceptible (S)

La categoria “Susceptible” implica que una infección debido a una cepa puede tratarse apropiadamente con la dosificación de agente antimicrobiano recomendadapara ese tipo de infección y la especie o cepa infectante, a menos que, por otra parte, esté contraindicado

2.Intermedio (I)

La categoria “Intermedio” incluye aislamientos con MICs de un antibiótico que se acercan a los niveles en sangre y en tejido y que la rata de respuesta pueden sermás baja que para los aislamientos susceptibles. La categoría “Intermedio” implica la aplicabilidad clínica en sitios del cuerpo dónde las drogas se concentranfisiológicamente o cuando una dosificación alta de una droga puede usarse (Quinolonas y â-Lactámicos en orina). La categoría “Intermedio” también incluye unazona buffer que debe impedir los factores técnicos pequeños, no controlados que puede causar discrepancias mayores en las interpretaciones, especialmente paralas drogas con márgenes de fármaco toxicidad estrechos.

3.Resistente (R)

Las cepas Resistentes no son inhibidas por las concentraciones sistémicas que normalmente se alcanzan con la dosificación normal fija del antibiótico y/o sedesploma el rango de la eficacia probable y clínica y dónde el mecanismos de resistencia microbiana específica no ha sido fiable en los estudios del tratamiento.

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Tabla de Interpretación de Halos de Inhibición Método de Difusión de Disco (mm) y los Puntos de Corte Equivalentes a MIC Control

Diámetro Limites de diámetros

Standard interpretivos (mm)

(mm) E. S. P. H. H. N. S.

coli aureus aeruginosa inflenzae inflenzae gonorrhoeae pneumonia

e

Agente Código potencia Resis- inter- suscep- ATCC ATCC ATCC ATCC ATCC ATCC ATCC

antimicobiano del

disco tente medio tible 25922 25923 27853 49247c 49766c 49226d 49619e

Amikacina AN-30 30µg Enterobact, P. aeruginosa, Acinetobacter, Staphylococcus ≤14 15−16 ≥17 19-26 20-26 18-26

Amox/Ac Clavulánico AmC-30 20/10/µg 18-24 28-36 -

Enterobacterias y V. Cholerae ≤13 14−17 ≥18

Staphylococcus spp. ≤19 − ≥20

Haemophilus spp. ≤19 − ≥20 15-23 -

Ampicilina AM-10 10µg 16-22 27-35 -

Enterobacterias y V. cholerae ≤13 14−16 ≥17


Enterococcus spp. ≤16 − ≥17

Listeria monocytogenes ≤19 − ≥20

Haemophilus spp. ≤18 19−21 ≥22 13-21 -

Streptococcus ( no S. pneumoniae, solamente - - >24 30-36

beta hemolítico

Ampicilina/

Sulbactam SAM-

20 10/10µg 19-24 29-37 -

Enterobacterias, P. Aeruginosa, Acinetobacter y

Staphylococcus spp. ≤11 12−14 ≥15

Haemophilus spp. ≤19 − ≥20 14-22 -

Azithromycina AZM-

15 15µg - 21-26 -

Staphylococcus spp. <13 14−17 >18

Las siguientes tablas contienen los Halos de Inhibición y MIC de los Antibióticos usados más frecuentemente y los diferentes microorganismos:

4343434343

Haemophilus spp. − − ≥12 13-21 -

S. pneumoniae y otros Steptococcus ≤13 14−17 ≥18 19-25

Aztreonam ATM-

30 30µg 28-36 - 23-29


Enterobact, P. aeruginosa Acinetobacter ≤15 16−21 ≥22

Cefaclor CEC-30 30µg 23-27 27-31 -

Haemophilus spp. ≤16 17−19 ≥20 - 25-31

Enterobacterias y Staphylococcus ≤14 15−17 ≥18

Cefazolina CZ-30 30µg 21-27 29-35 -

Enterobacterias y Staphylococcus <14 15−17 >18

Cefepime FEP-30 30µg 31-37 23-29 24-30

Enterobacterias, P aeruginosa, Acinetobacter y <14 15−17 >18

Staphylococcus spp.

Haemophilus spp. - - >26 25-31 -

N. gonorrhoeae - - >31 37-46

Streptococcus viridans (no S. pneumoniae) <21 22−23 >24 28-35

Streptococcus ( no S. pneumoniae, solamente - - >24

beta hemolítico

Cefoperazona CFP-75 75µg 28-34 24-33 23-29

Enterobacterias, P aeruginosa, Acinetobacter ≤15 16−20 ≥21

y Staphylococcus spp. Cefotaxime CTX-

30 30µg 29-35 25-31 18-22

Enterobacterias, P aeruginosa, Acinetobacter <14 15−22 >23

y Staphylococcus spp.


N. gonorrhoeae − − ≥31 38-48

Streptococcus viridans (no S. pneumoniae) ≤25 26−27 ≥28 31-39

Streptococcus ( no S. pneumoniae, solamente - - >24

beta hemolítico

Cefotaxime/ CTX/C

LA 30/10µg

Ácido Clavulánico

Cefotetan CTT-30 30µg 28-34 17-23 -

N. gonorrhoeae ≤19 20−25 ≥26 30-36


Cefoxitina FOX-

30 30µg 23-29 23-29 -

N. gonorrhoeae ≤23 24−27 ≥28 33-41


Cefpodoxima CPD-

10 10µg 23-28 19-25 -




Ceftazidime CAZ-

30 30µg 25-32 16-20 22-29



Enterobacterias, P. Aeruginosa. Acinetobacter ≤14 15−17 ≥18

*NOTA: Falta Tabla de Rangos de MIC

4444444444


Ceftazidime/ CAZ/C

LA 30/10µg

Acido Clavulánico

Ceftriaxone CRO-

30 30µg 29-35 22-28 17-23

Enterobacterias, P aeruginosa, Acinetobacter <13 14−20 >21




Streptococcus viridans (no S. pneumoniae) <24 25−26 >27 30-35

Streptococcus (no S. pneumoniae, solamente - - >24

beta hemolítico

Cefuroxima (sodio) CXM-

30 30µg 20-26 27-35 -

Haemophilus spp. ≤16 17−19 ≥20 - 28-36

N. gonorrhoeae ≤25 26−30 ≥31 33-41

Enterobacterias y Staphylococcus (parenteral) ≤14 15−17 ≥18

Cephalothin CF-30 30µg 15-21 29-37 -


Chloramphenicol C-30 30µg 21-27 19-26 -

Haemophilus spp. ≤25 26−28 ≥29 31-40 -

S. pneumoniae ≤20 − ≥21 23-27

Streptococcus (no S. Pneumoniae) <17 18−20 >21

Enterobacterias, P. Aeruginosa, Acinetobacter ≤12 13−17 ≥18

Staphylococcus spp. Enterococcus y V. cholerae

Ciprofloxacin CIP-5 5µg 30-40 22-30 25-33


N. gonorrhoeae <27 28−40 ≥41 48-58

Enterobacterias, P. Aeruginosa, Acinetobacter, ≤15 16−20 ≥21

Staphylococcus spp. Y Enterococcus

Clarithromycina CLR-15 15µg - 26-32 -

Haemophilus spp. ≤10 11−12 ≥13 11-17 -

S. Pneumoniae y otros Streptococcus ≤16 17−20 ≥21 25-31


Clindamycina CC-2 2µg - 24-30 -



Ertapenem ETP-10 10µg 29-36 24-31 13-21 20-28 27-33 28-35

Enterobacterias y Staphylococcus spp <15 16−18 >19

Haemophilus spp. - - >19

Eritromicina E-15 15µg - 22-30 -


Staphylococcus spp y Enterococos ≤13 14−22 ≥23

Fosfomycin FOS-200 200µg 22-30 25-33 -

Solamente E.coli y E. Faecalis <12 13−15 >16

Gatifloxacin GAT-5 5µg 30-37 27-33 20-28

4545454545

Enterobacterias y Staphylococcus spp. <14 15−17 >18

P. Aeruginosa, Acinetobacter spp. y Enterococos <14 15−17 >18

H. Influenzae y H. Parainfluenzae - - >18 33-41 -

N. gonorrhoeae <33 34−37 >38 45-56

S. Pneumoniae y otros Streptococcus (no <17 18−20 >21 24-31

S. Pneumoniae, solo beta hemolítico

Gentamicina

Para test de Enterococcus GM-120 120µg 6 7−9 ≥10 - - -

de alto nivel de resistencia

Enterobacterias GM-10 10µ

g ≤12 13−14 ≥15 19-26 19-27 16-21

P. aeruginosa, Acinetobacter y Staphylococcus

Grepafloxacin GRX-5 5µg 28-36 26-31 20-27



N. gonorrhoeae <27 28−36 >37 44-52

S. pneumoniae y otros Streptococcus <15 16−18 >19 21-28

Imipenem IPM-10 10µ

g 26-32 - 20-28


Enterobacterias, P. aeruginosa, Acinetobacter y ≤13 14−15 ≥16

Staphylococcus

Kanamycina K-30 30µ

g 17-25 19-26 -


Levofloxacina LVX-5 5µg 29-37 25-30 19-26

Enterobacterias, P. aeruginosa. Acinetobacter, ≤13 14−16 ≥17

Staphylococcus y Enterococos


S. Pneumoniae y otros Streptococcus (no ≤13 14−16 ≥17 20-25

S. pneumoniae, solamente beta hemolítico

Linezolid LZD-30 30µ

g - 25-32 -

Staphylococcus spp. - - >21

Enterococcus spp. <20 21−22 ≥23 -

Streptococcus pneumoniae y otros Streptococcus - - >21 25-34

Lomefloxacin LOM-10 10µ

g 27-33 23-29 22-28


N. gonorrhoeae <26 27−37 >38 45-54

Enterobacterias, P. aeruginosa, Acinetobacter y ≤18 19−21 ≥22

Staphylococcus

Loracarbef LOR-30 30µ

g 23-29 23-31 -

Haemophilus spp. ≤15 16−18 ≥19 - 26-32


Meropenem MEM-10 10µ

g 28-34 29-37 27-33

Enterobacterias, P. aeruginosa. Acinetobacter <13 14−15 >16

y Staphylococcus


Methicillin

4646464646

S. pneumoniae ≤16 17−18 ≥19 25-30

Staphylococcus spp y Enterococcus spp ≤16 17−19 ≥20

Sparfloxacina SPX-5 5µg 30-38 27-33 21-29


S. pneumoniae ≤15 16−18 ≥19 21-27

Streptomycina

Para test de Enterococcus S-300 300µg 6 7−9 ≥10 - - -

de alto nivel de resistencia

Enterobacterias S-10 10µg ≤11 12−14 ≥15 12-20 14-22 -

Tetracyclina Te-30 30µg 18-25 24-30 -

Haemophilus spp. ≤25 26−28 ≥29 14-22 -

N. gonorrhoeae ≤30 31−37 ≥38 30-42

S. Pneumoniae y otros Streptococcus ≤18 19−22 ≥23 27-31 Enterobacterias, P. aeruginosa, Acinetobacter 15−18 ≥19

Staphylococcus, Enterococcus y V. cholerae Ticarcilina/

Acido Clavulánico TIM-85 75/10µg 24-30 29-37 20-28

P. aeruginosa ≤14 − ≥15

Enterobacterias y Acinetobacter ≤14 15−19 ≥20


Tobramycina NN-10 10µg 18-26 19-29 19-25

Enterobacterias, P. aeruginosa, Acinetobacter ≤12 13−14 ≥15

y Staphylococcus

Trimethoprim/ SXT 1.25µg

Sulfamethoxazole 23.75µg 23-29 24-32 -

Haemophilus spp. ≤10 11−15 ≥16 24-32 -

S. pneumoniae ≤15 16−18 ≥19 20-28

Enterobacterias, P. Aeruginosa, Acinetobacter ≤10 11−15 ≥16

Staphylococcus y V. cholerae

Vancomycina Va-30 30µ

g - 17-21 -

Staphylococcus spp. − − ≥15

Enterococos ≤14 15−16 ≥17

S. Pneumoniae y otros Streptococcus − − ≥17 20-27

Prueba confirmatoria Betalactamasa de espectro extendido BLES-ESBL

B- Ceftazidime con Acido Clavulánico

B- Cefotaxime con Acido Clavulánico

4747474747

III. VERIFICACIÓN DE LOS RESULTADOS DEL PACIENTE

Hay múltiples parámetros en la metodología de las pruebas de Susceptibilidad a los Antimicrobianos que se deben monitorear siguiendo las Recomendaciones de Controlde Calidad descritas en las guías de la CLSI. Sin embargo los resultados aceptables, derivados de probar las cepas de control de calidad, no garantizan la Precisión delos resultados cuando se prueban con los aislamientos de los pacientes.

Estos controles deben asegurar que:

-Los resultados de las pruebas de sensibilidad son consistentes con la identificación del aislamiento.-Los resultados de cada antibiótico, dentro de una clase específica de drogas, siga el comportamiento establecido de actividad.-El aislamiento es sensible a aquellos antibióticos en los cuales no se ha documentado resistencia o para los cuales en el documento M-100 existe solo el criteriode interpretación de “Sensible”.

También ADVIERTE en las siguientes recomendaciones:

Los siguientes agentes antimicrobianos NO DEBERAN informarse rutinariamente en bacterias aisladas de LCR:

-Cefalosporinas de 1a. y 2a. Generación-Con excepción de Cefuroxima Sódica-Clindamicina-Macrólidos-Tetraciclinas-Fluorquinolonas

Algunos de los comentarios en la siguiente tabla se relacionan a resultados peligrosamente engañosos que pueden ocurrir cuando se prueban ciertos agentes antimicrobianosy se informan como susceptibles contra microorganismos específicos. Éstos se denotan con la palabra “ADVERTENCIA”.

4848484848

“ADVERTENCIA” Las siguientes combinaciones de Antibióticos / Microorganismos pueden aparecer activos “in vitro”, pero no son efectivos clínicamente y no deben ser reportados como Susceptibles

Microorganismos Agentes Antimicrobianos que no deben ser Reportados como Susceptibles

Salmonella spp., Shigella spp.

Cefalosporinas de 1ª y 2ª Generación y Aminoglicósidos

Staphylococcus spp. Oxacilino-Resistentes

Todos los Carbapenems, Cefalosporinas y β-Lactámicos solos o con Inhibidor de β-Lactamasa.

Enterococcus spp. Aminoglicósidos (Excepto a Altas Concentraciones), Cefalosporinas, Clindamicina y Trimethoprim-sulfamethoxazole.

Yersinia pestis Antibióticos β-Lactámicos

Listeria spp. Cefalosporinas

Método Prueba de Screen Inicial Prueba Confirmatoria Fenotípica

Medio Caldo Mueller Hinton con Cationes Caldo Mueller Hinton con Cationes

Concentración Antimicrobiana Cefpodoxime 4 µg/mL o

Ceftazidima 1 µg/mL o Aztreonam 1 µg/mL o Cefotaxime 1 µg/mL o Ceftriaxona 1 µg/mL o (El uso de más de un Antibiótico para el Screening aumentara la sensibilidad de la detección)

Ceftazidima 0.25 –128 µg/mL Ceftazidime+Ac. Clavulánico 0.25/4-128/4 µg/mL Y Cefotaxime 0.25 –128 µg/mL Cefotaxime+Ac. Clavulánico 0.25/4-128/4 µg/mL (La prueba confirmatoria requiere el uso de ambos, Ceftazidima y Cefotaxime, solos y en combinación con Ac. Clavulánico)

Inoculo

Condiciones de Incubación

Tiempo de Incubación

Recomendaciones Standard de Método de Dilución

Recomendaciones Standard de Método de Dilución

Resultados Crecimiento = Puede indicar la producción de ESBLs (p.ej. MIC ≥ 2 µg/mL para Ceftazidima, Aztreonam, Cefotaxime o Ceftriaxona; o MIC ≥ 8 µg/mL para Cefpodoxime)

La disminución en ≥ 3 diluciones en el MIC para el antibiótico probado en combinación con Ac. Clavulánico versus el MIC cuando el antibiótico se prueba solo es igual a ESBLs (p. Ej. Ceftazidima 8 µg/mL y Ceftazidima + Ac. Clavulánico 1 µg/mL).

Recomendaciones de Control de Calidad

Cuando se realiza la prueba de Screening para ESBLs, la cepa de Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 proporciona Aseguramiento de Calidad (p.ej. entrenamiento, competencia o evaluación de la prueba). O, las cepas de Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 o Escherichia coli ATCC 25922, puede ser usada para la rutina de CC (p.ej. semanalmente o diariamente) Escherichia coli ATCC 25922 = No crece. Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 = Crece Cefpodoxime MIC ≥ 8 µg/mL Ceftazidima MIC ≥ 2 µg/mL Aztreonam MIC ≥ 2 µg/mL Cefotaxime MIC ≥ 2 µg/mL Ceftriaxona MIC ≥ 2 µg/mL

Cuando se realiza la prueba confirmatoria para ESBL, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 o Escherichia coli ATCC 25922 debe probarse rutinariamente (p.ej. semanalmente o diariamente). Escherichia coli ATCC 25922: Decrece < 3 diluciones en el MIC del antibiótico en combinación con el Acido Clavulánico versus el MIC cuando se prueba solo. Klebsiella pneumoniae ATCC 700603: Decrece ≥ 3 diluciones en el MIC del antibiótico en combinación con el Acido Clavulánico versus el MIC cuando se prueba solo.

PRUEBAS DE SCREEN Y CONFIRMATORIAS PARA ESBLs ENKlebsiella pneumoniae, Klesiella oxytoca,

Escherichia coli y Proteus mirabilis

4949494949

COMENTARIO:

No se recomienda de rutina el Screening para la producción de ESBL para Proteus mirabilis. Sin embargo, cuando se juzga pertinente clínicamente (por ejemplo, aisladode bacteremia), los puntos de corte del MIC para el Screening de ESBL cambian, Ceftazidime (MIC ³ 2 ìg/mL) o Cefpodoxime (MIC ³ 2 ìg/mL en lugar de ³ 8 ìg/mL)identificará presuntamente la producción de ESBL. En la prueba confirmatoria fenotípica se usa Ceftazidime y Cefotaxime solo y en la combinación con ácido Clavulánicopueden confirmar las cepas productoras de ESBL. Para todo Proteus mirabilis productor de ESBL, la interpretación de la prueba debe informarse como resistente paratodas las Penicilinas, Cefalosporinas y Aztreonam.

5050505050

PROTOCOLO DE CONFIRMACIÓN MANUAL PARA LA DETECCIÓN DE CIERTOSMECANISMOS DE RESISTENCIA BACTERIANA

1a. Salmonella y Fluoroquinolonas (FQ)

Cepas de Salmonella sensibles a FQ que se prueban con Ácido Nalidixico y son resistentes, tienen fracaso clínico o respuesta tardía en los pacientes tratados con FQ ensalmonelosis extraintestinal. Los aislamientos que son susceptibles a FQs y resistentes al Ácido Nalidixico, deben informarse al médico que el germen no puedeerradicarse por el tratamiento de FQ. Se recomienda interconsulta con el Infectólogo.

Cuando se recuperaSalmonella spp. de muestras de sangre y se obtiene el siguiente resultado de prueba de susceptibilidad:

Ampicilina >32 RCiprofloxacina ≤ 0.25 SCeftriaxona ≤ 0.5 STrimethoprim-sulfa >4/78 R

Y se realiza la prueba de susceptibilidad a Acido Nalidixico y es resistente, se debe agregar el siguiente comentario al informe de susceptibilidad:

Ampicilina >32 RCiprofloxacina ≤ 0.25 SCeftriaxona ≤ 0.5 STrimethoprim-sulfa >4/78 R

5151515151

“Este aislamiento demuestra sensibilidad reducida a las Fluoroquinolonas. Para algunos pacientes con Salmonelosis Extraintestinal con esta cepasno pueden erradicarse con el tratamiento de Fluoroquinolonas”.

Puntos de Corte en MIC paraSalmonella y Ciprofloxacina con su interpretación y probable mutación presente:

CIP MIC NCCLS Probable Ácido(mg/ml) Interpretación Mutación Nalidixico

≤0.06 S ninguna S0.12- 1 S una R*≥4 R dos R

Cambios MayoresM100-S15Staphylococcus

“S. aureus y de Staphylococcus Coagulasa-Negativa, puede tener resistencia constitutiva o inducida a Clindamicina [ Metilación de la 23S de rRNAcodificado por el gen erm llamado MLSB de Resistencia ( Macrólidos, Lincosamida y Streptogramina B )] o sólo pueden ser resistentes a Macrólidos ( Mecanismode Eflujo codificado por el gen msrA ).”

5252525252

M100-S15 (M2-A8, M7-A6)Staphylococcus spp.Eritromicina / Clindamicina

Presentación de los diferentes mecanismos de resistencia de Staphylococcus ssp. con Clindamicina y Eritromicina:

Mecanismo Determinante Eritromicina Clindamicina

Eflujo msrA R SAlteración Ribosomal erm R S*Alteración Ribosomal erm R R constitutiva

msrA = Resistencia a Macrólidos y Streptograminaerm = erythromycin ribosome methylase

* Exige Inducción para mostrar la resistencia

Todo Staphylococcus aureus que presente esta prueba de susceptibilidad:

5353535353

Staphylococcus aureus

Clindamicina SEritromicina ROxacilina RPenicilina RVancomicina S

Si Clindamicina es Sensible y Eritromicina es Resistente, No se debe reportar Clindamicina-S sin realizar “Test D”.

Hay una Estrategia Opcional de Informe:


Eritromicina ROxacilina RPenicilina RVancomicina S

“Contactar al Laboratorio si se necesita el resultado de Clindamicina”

5454545454

“Test D” – Reacción Positiva

Resistencia Inducible a Clindamicina (mediada-erm)

Test de Rutina Difusión de Disco:

Colocar discos de 2 mg Clindamicina y 15 mg Eritromicina a una distancia de borde a borde de 15 mm a 26 mm.

Fotos cortesía de J. Jorgensen y K. Fiebelkorn “Test D” Positivo y Comentario opcional


Clindamicina REritromicina ROxacilina RPenicilina RVancomicina S

“Este S. aureus se presume ser resistente, basado en la detección de Resistencia Induciblea Clindamicina. Clindamicina todavía puede ser eficaz en algunos pacientes.”

5555555555

Fotos cortesía de J. Jorgensen y K. Fiebelkorn

“Test D” – Reacción Negativa

NO hay Inducción (Resistencia a Eritromicina mediada por gen msrA)

“Test D” Negativo y Comentario opcional


Clindamicina SEritromicina ROxacilina RPenicilina RVancomicina S

“Este S. aureus NO demuestra Resistencia Inducible in vitro a Clindamicina.”

5656565656

STAPHYLOCOCCUS spp. Y OXACILINA

Pruebas para asegurar la detección de Resistencia a Oxacilina:

En la detección de resistencia a Oxacilina: La prueba para la detección del gen mecA o para la proteína expresada por el mecA, la PBP 2a (llamada también PBP 2’)es elmétodo más exacto para la predicción de resistencia a la Oxacilina y podría usarse para confirmar los resultados de aislamientos de Staphylococcus spp. de infeccionesserias. Los aislamientos de Staphylococcus spp. que muestran llevar el gen del mecA, o PBP 2a, deben informarse como Oxacilina resistentes. Los aislamientos que nomuestran llevar el gen mecA o no produce PBP 2a, deben informarse como Oxacilina Susceptibles, si los MICS de Oxacilina son < 2 ìg/mL. Debido a la rara ocurrenciade mecanismos de resistencia de otra manera que el gen mecA, los aislamientos que son negativo para el gen del mecA o no produce PBP 2a, pero que tiene MICs deOxacilina > 4 ìg/mL, se deben informar como Oxacilina Resistentes.

Screen - Difusión de Disco para Resistencia mediada por gen mecA en Staphylococcus

“Los resultados de la Prueba de Difusión de Disco usando disco de Cefoxitina de 30 mg y puntos de corte pueden ser usados para predecir laResistencia mediada por gen mecA – en Staphylococcus.”M100-S15 (M2, M7)

1.- Realizar Método Estándar de Difusión de Disco con disco de Cefoxitina (30 mg)2.- Incubar por 24 h; sin embargo, los resultados pueden ser reportados después de 18 h, si es resistente3.- Reportar el resultado para OXACILINA, no para Cefoxitina.

5757575757

Screen - Difusión de Disco para la predicción de Resistencia mediada por gen mecA en Staphylococcus

“Los resultados de la Prueba de Difusión de Disco usando disco de Cefoxitina de 30 mg y puntos de corte pueden ser usados para predecir laResistencia mediada por gen mecA – en Staphylococcus.”M100-S14 (M2, M7); Tabla 2C

1.- Realizar Método Estándar de Difusión de Disco con disco de Cefoxitina (30 mg).2.- Incubar por 24 h según las condiciones de la prueba; sin embargo, los resultados pueden ser reportados después de 18 h, si es resistente.3.- La lectura se debe realizar con luz refleja.4.- Reportar el resultado para OXACILINA, no para Cefoxitina.

AAnnttiibbiióóttiiccoo CCoonntteenniiddoo –– DDiissccoo

GGrruuppoo ddee MMiiccrroooorrggaa-- nniissmmooss

DDiiáámmeettrroo ddee llaa ZZoonnaa MMmm

CCoommeennttaarriiooss

CCeeffooxxiittiinnaa ((3300 µµgg)) SS.. aauurreeuuss yy SS.. lluuggdduunneennssiiss

?? 1199 ?? 2200 CCuuaannddoo SS.. aauurreeuuss yy SS.. lluuggdduunneennssiiss pprreesseennttaann uunnaa zzoonnaa ddee iinnhhiibbiicciióónn ?? 1199 mmmm ddeebbee sseerr rreeppoorrttaaddoo ccoommoo OOxxaacciilliinnaa RReessiisstteennttee,, mmiieennttrraass qquuee aaqquueellllooss qquuee pprreesseennttaann uunnaa zzoonnaa ddee iinnhhiibbiicciióónn ?? 2200 mmmm ddeebbeenn sseerr rreeppoorrttaaddooss ccoommoo OOxxaacciilliinnaa SSeennssiibblleess..

5858585858

ALGORITMO PARAReporte de Resultados de MIC para Staphylococcus spp. Coagulasa Negativa

Oxacilina MIC (µg/mL)

< =0.25 0.5 - 2

>=4

Reportar Oxacilina Susceptible

Prueba Cefoxitina 30 mecA o PBP 2a

Negativo Positivo

Reportar Oxacilina Susceptible

Reportar Oxacilina Resistente

Reportar Oxacilina Resistente

Diferentes de Staphylococcus epidermidis en sitios estériles

5959595959

PRUEBA DE SCREENING AGAR SALADO – OxacilinaPARA Staphylococcus aureus

PPrruueebbaa SSccrreeeenn RReessiisstteenncciiaa aa OOxxaacciilliinnaa

MMeeddiioo AAggaarr MMuueelllleerr HHiinnttoonn ccoonn NNaaCCll ((44%% ww//vv;; 00..6688 mmooll//LL

CCoonncceennttrraacciióónn ddeell AAnnttiibbiióóttiiccoo 66 µµgg//mmLL OOxxaacciilliinnaa

IInnóóccuulloo PPrreeppaarraarr uunnaa ssuussppeennssiióónn ddiirreeccttaammeennttee ddee llaa ccoolloonniiaa ppaarraa oobbtteenneerr uunnaa ttuurrbbiiddeezz eeqquuiivvaalleennttee aa 00..55 MMccFFaarrllaanndd.. UUssaannddoo uunnaa aannssaa ccaalliibbrraaddaa ddee 11 µµLL,, ttoommaarr ddee llaa ssuussppeennssiióónn yy ccoollooccaarr llaa ggoottaa eenn uunn áárreeaa ddee 1100 aa 1155 mmmm ddee ddiiáámmeettrroo.. AAlltteerrnnaattiivvaammeennttee,, uussaannddoo uunn eessccoobbiillllóónn iinnttrroodduucciirrlloo eenn llaa ssuussppeennssiióónn yy eexxpprriimmiirrlloo ppoorr llaass ppaarreeddeess,, rreeaalliizzaarr uunnaa ssiieemmbbrraa ssiimmiillaarr oo eenn uunn ccuuaaddrraannttee ccoommpplleettoo..

CCoonnddiicciioonneess yy ttiieemmppoo ddee IInnccuubbaacciióónn 3355ººCC,, eenn aattmmóóssffeerraa ssiinn CCOO22 2244 hhoorraass

RReessuullttaaddooss >>11 CCoolloonniiaa == RReessiisstteennttee EExxaammiinnaarr ccuuiiddaaddoossaammeennttee ccoonn lluuzz iinnddiirreeccttaa,, ppaarraa oobbsseerrvvaarr >> 11 ccoolloonniiaa oo uunnaa ppeellííccuullaa tteennuuee ddee ccrreecciimmiieennttoo..

RReeccoommeennddaacciioonneess ppaarraa eell CCoonnttrrooll ddee CCaalliiddaadd

SSttaapphhyyllooccooccccuuss aauurreeuuss AATTCCCC 2299221133 –– SSuusscceeppttiibbllee SSttaapphhyyllooccooccccuuss aauurreeuuss AATTCCCC 4433330000 -- RReessiisstteennttee

PRUEBAS DEDE RESISTENCIA A VANCOMICINA

Staphylococcus spp.

Las cepas de Staphylococcus aureus Vancomicina Resistentes (VRSA)con MICs e” 32 ìg/mL son realmente detectados por el método dereferencia de Microdilución en Caldo. Cuando se usa otro método MICque no ha sido validado para la detección de VRSA, se debe utilizar elAgar Screen Vancomicina que contiene 6 ìg/mL, como se usa para ladetección de Enterococos resistentes a Vancomicina. Enviar a Laboratoriode Referencia cualquier cepa que ha sido determinada un MIC e” 4 ìg/mLpara Vancomicina.

6060606060

PRUEBAS DE SCREENING DE RESISTENCIA A VANCOMICINAEnterococcus spp.

PPrruueebbaa SSccrreeeenn RReessiisstteenncciiaa aa VVaannccoommiicciinnaa

MMeeddiioo AAggaarr IInnffuussiióónn ddee CCeerreebbrroo yy CCoorraazzóónn ((BBHHII))

CCoonncceennttrraacciióónn ddeell AAnnttiibbiióóttiiccoo 66 µµgg//mmLL VVaannccoommiicciinnaa

IInnóóccuulloo PPrreeppaarraarr uunnaa ssuussppeennssiióónn ddiirreeccttaammeennttee ddee llaa ccoolloonniiaa ppaarraa oobbtteenneerr uunnaa ttuurrbbiiddeezz eeqquuiivvaalleennttee aa 00..55 MMccFFaarrllaanndd.. TToommaarr ddee 11 -- 1100 µµLL ddee llaa ssuussppeennssiióónn yy ccoollooccaarrllaa eenn llaa ssuuppeerrffiicciiee ddeell aaggaarr.. DDeejjaarr sseeccaarr yy lluueeggoo vvoolltteeaarr llaa ppllaaccaa.. SSee ppuueeddeenn sseemmbbrraarr hhaassttaa 66 cceeppaass ddiiffeerreenntteess ppoorr ppllaaccaa

CCoonnddiicciioonneess yy ttiieemmppoo ddee IInnccuubbaacciióónn 3355ººCC,, eenn aattmmóóssffeerraa ssiinn CCOO22 2244 hhoorraass

RReessuullttaaddooss >>11 CCoolloonniiaa == RReessiisstteenncciiaa pprreessuunnttiivvaa EExxaammiinnaarr ccuuiiddaaddoossaammeennttee ccoonn lluuzz iinnddiirreeccttaa,, ppaarraa oobbsseerrvvaarr >> 11 ccoolloonniiaa oo uunnaa ppeellííccuullaa tteennuuee ddee ccrreecciimmiieennttoo.. RReeaalliizzaarr MMIICC aa VVaannccoommiicciinnaa yy rreeaalliizzaarr llaa pprruueebbaa ddee mmoottiilliiddaadd yy pprroodduucccciióónn ddeell ppiiggmmeennttoo ppaarraa ddiissttiinngguuiirr llaass eessppeecciieess ccoonn rreessiisstteenncciiaa aaddqquuiirriiddaa ((VVaannAA yy VVaannBB)) ddee aaqquueellllooss ccoonn rreessiisstteenncciiaa iinnttrríínnsseeccaa,, aa nniivveell iinntteerrmmeeddiioo ddee VVaannccoommiicciinnaa ((VVaannCC)) ccoommoo EEnntteerrooccooccccuuss ggaalllliinnaarruumm yy EEnntteerrooccooccccuuss ccaasssseelliiffllaavvuuss qquuee aa mmeennuuddoo ccrreecceenn eenn eell aaggaarr SSccrreeeenn VVaannccoommiicciinnaa ccuuaannddoo eell MMIICC eess ddee 88--1166 µµgg//mmLL ((IInntteerrmmeeddiioo)),, ccoonn pprrooppóóssiittooss ddee CCoonnttrrooll ddee IInnffeecccciióónn


EEnntteerrooccooccccuuss ffaaeeccaalliiss AATTCCCC 2299221122 –– SSuusscceeppttiibbllee EEnntteerrooccooccccuuss ffaaeeccaalliiss AATTCCCC 5511229999 -- RReessiisstteennttee

PRUEBA DE Screening PARA RESISTENCIA AALTO NIVEL DE Aminoglicósidos EN Enterococcus spp.

PPrruueebbaa SSccrreeeenn GGeennttaammiicciinnaa HHLLAARR SSttrreeppttoommiicciinnaa HHLLAARR

MMeeddiioo BBHHII CCaallddoo oo AAggaarr BBHHII CCaallddoo oo AAggaarr

CCoonncceennttrraacciióónn ddeell AAnnttiibbiióóttiiccoo 550000 µµgg//mmLL CCaallddoo:: 11000000 µµgg//mmLL AAggaarr:: 22000000 µµgg//mmLL

IInnóóccuulloo PPrreeppaarraarr uunnaa ssuussppeennssiióónn ddiirreeccttaammeennttee ddee llaa ccoolloonniiaa ppaarraa oobbtteenneerr uunnaa ttuurrbbiiddeezz eeqquuiivvaalleennttee aa 00..55 MMccFFaarrllaanndd.. AAggaarr –– 1100 µµLL ddee llaa ssuussppeennssiióónn yy sseemmbbrraarrllaa ssoobbrree eell aaggaarr eenn uunnaa llíínneeaa.. CCaallddoo –– DDiilluucciioonneess SSttaannddaarrdd eenn ccaallddoo rreeccoommeennddaaddaass..

PPrreeppaarraarr uunnaa ssuussppeennssiióónn ddiirreeccttaammeennttee ddee llaa ccoolloonniiaa ppaarraa oobbtteenneerr uunnaa ttuurrbbiiddeezz eeqquuiivvaalleennttee aa 00..55 MMccFFaarrllaanndd.. AAggaarr –– 1100 uuLL ddee llaa ssuussppeennssiióónn yy sseemmbbrraarrllaa ssoobbrree eell aaggaarr eenn uunnaa llíínneeaa.. CCaallddoo –– DDiilluucciioonneess SSttaannddaarrdd eenn ccaallddoo rreeccoommeennddaaddaass..

CCoonnddiicciioonneess yy ttiieemmppoo ddee IInnccuubbaacciióónn

3355 ººCC 2244 hhoorraass

3355 ººCC 2244 –– 4488 hhoorraass ((ssii eess ssuusscceeppttiibbllee aa llaass 2244 hhoorraass,, rreeiinnccuubbaarr))

RReessuullttaaddooss AAggaarr:: >> 11 ccoolloonniiaa == RReessiisstteennttee CCaallddoo:: ccuuaallqquuiieerr ccrreecciimmiieennttoo == RReessiisstteennttee.. RReessiisstteennttee –– NNoo hhaabbrráá ssiinneerrggiissmmoo ccoonn AAnnttiibbiióóttiiccooss aaccttiivvooss ccoonnttrraa ppaarreedd cceelluullaarr ((pp..eejj.. AAmmppiicciilliinnaa,, PPeenniicciilliinnaa,, VVaannccoommiicciinnaa)).. SSuusscceeppttiibbllee –– HHaabbrráá ssiinneerrggiissmmoo ccoonn AAnnttiibbiióóttiiccooss aaccttiivvooss ccoonnttrraa ppaarreedd cceelluullaarr,, qquuee ttaammbbiiéénn ssoonn sseennssiibblleess ((pp..eejj.. AAmmppiicciilliinnaa,, PPeenniicciilliinnaa,, VVaannccoommiicciinnaa))..

AAggaarr:: >> 11 ccoolloonniiaa == RReessiisstteennttee CCaallddoo:: ccuuaallqquuiieerr ccrreecciimmiieennttoo == RReessiisstteennttee.. RReessiisstteennttee –– NNoo hhaabbrráá ssiinneerrggiissmmoo ccoonn AAnnttiibbiióóttiiccooss aaccttiivvooss ccoonnttrraa ppaarreedd cceelluullaarr ((pp..eejj.. AAmmppiicciilliinnaa,, PPeenniicciill iinnaa,, VVaannccoommiicciinnaa)).. SSuusscceeppttiibbllee –– HHaabbrráá ssiinneerrggiissmmoo ccoonn AAnnttiibbiióóttiiccooss aaccttiivvooss ccoonnttrraa ppaarreedd cceelluullaarr,, qquuee ttaammbbiiéénn ssoonn sseennssiibblleess ((pp..eejj.. AAmmppiicciilliinnaa,, PPeenniicciilliinnaa,, VVaannccoommiicciinnaa))..




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SUGERENCIAS PARA LA VERIFICACIÓN DE LAS PRUEBASDE SUSCEPTIBILIDAD

Hay que asegurar que los resultados inusuales no se deban a:

-Errores de Trascripción.-Contaminación.-Uso de un panel no apropiado o defectuoso.-Revisar los informes previos del paciente con el fin de determinar si el aislamientofue detectado y verificado previamente.-Confirmar la identificación del microorganismo.-Repetir la prueba de sensibilidad con el fin de confirmar los resultados (Métodoalterno).

Ampicilina : S P.vulgaris, Providencia spp.

BLES positiva - confirmada Ampicilina : S Klebsiella spp.

Amikacina, Fluorquinolonas: R Carbapenemes: I o R Enterobacterias

BLES positiva - confirmada Escherichia coli

Ampicilina, Cefazolina o Cefalotina : S

C. freundii, Enterobacter spp. S. marcescens

Gram Negativos Microorganismos:

Categoría II Fenotipos que podrían ser poco

comunes en una Institución dada y/o resultar de errores técnicos

Categoría I Fenotipos que no han sido documentados, son poco

comunes y/o resultan de errores técnicos

Grupo de Organismos

6262626262

Trimetropin Sulfametoxazole : R Carbapenems : S S. maltophilia

Gentamicina, Tobramicina y Amikacina simultáneamente : R Ps. aeruginosa

Resistente a todos los antibióticos probados de rutina

Cualquier microorganismo

Fluorquinolonas : R Cefalosporinas de 3ª Gen : R N. gonorrhoeae

Ampicilina: R y β-lactamasa Neg. Amoxa/Clavulanato: R H. influenzae

Gram Negativos Microorganismos:

Categoría II Fenotipos que podrían ser poco comunes en una Institución dada y/o resultar de

errores técnicos

Categoría I Fenotipos que no han sido

documentados, son poco comunes y/o resultan de errores técnicos

Grupo de Organismos

Oxacilina : R Linezolid : NS Synercid : I ó R Vancom icina : I ó R

S. aureus

Vancom icina : R Enterococos spp.

Alto nivel de R Am inoglicósidos (particularm ente si el ais lam iento es de sitio estéril). Synercid : R

Linezolid : R Enterococcus

faecium

Alto nivel de R Am inoglicósidos (particularm ente si el ais lam iento es de sitio estéril)

Am picilina, o Penicilina : R Synercid: S Linezolid : R

Enterococcus faecalis

Gram Positivos M icroorganism os:

Categoría II Fenotipos que podrían ser poco

com unes en una Institución dada y/o resultar de errores técnicos

Categoría I Fenotipos que no han s ido

docum entados, son poco com unes y/o resultan de errores técnicos

Grupo de Organism os

Pencilina : I ó R Linezolid : NS Vancomicina : NS Streptococcus Grupo Viridans

Penicilina : R Cefalosporinas de 3ª Gen.: R

Fluorquinolonas : R Linezolid : NS Vancomicina : NS

S. pneumoniae

Linezolid : NS Vancomicina : I ó R

S. Coagulasa Negativa

Resistente a todos los antibióticos probados de rutina

Cualquier microorganismo

Gram Positivos Microorganismos:

Categoría II Fenotipos que podrían ser poco comunes en una Institución dada y/o resultar de

errores técnicos

Categoría I Fenotipos que no han sido

documentados, son poco comunes y/o resultan de errores técnicos

Grupo de Organismos

6363636363

RESISTENCIAS INUSUALES

Ciprofloxacina M. catarrhalis

Cualquier cefalosporina de 3ª Generación o Carbapenem

H. influenzae

Meropenem Imipenem (excepto con Proteus spp.)

Enterobacterias

Cualquier: Penicilina, Vancomicina, Teicoplanina, Linezolid

S. β-hemolíticos del Grupo A, B, C, G.

Cualquier: Meropenem, Vancomicina, Teicoplanina, Linezolid

S. pneumoniae

Cualquier: Vancomicina, Linezolid Staphylococcus CoagulasaNegativa

Cualquier: Vancomicina, Teicoplanina, Linezolid, Synercid

S. aureus

Resistencias que requieren Confirmación

Microorganismo

Cualquier: Metronidazol, Vancomicina Clostridium difficile

Cualquier: Metronidazol, Carbapenems, Amoxacilina/Clavulanato

Bacteroides spp.

Metronidazol Anaerobios en general

Colistin Acinetobacter spp., Ps. aeruginosa

Cualquier Cefalosporina de 3ª Generación Neisseria gonorrhoeae

RReessiisstteenncciiaass qquuee rreeqquuiieerreenn CCoonnffiirrmmaacciióónn MMiiccrroooorrggaanniissmmoo

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La automatización en los Laboratorios de Microbiología Clínica está evolucionando rápidamente desde el comienzo de los años setenta. Son sistemas de incubaciónautomatizada para la identificación y susceptibilidad rápida de bacterias que han sido probados clínicamente. Tradicionalmente el Laboratorio de Microbiología Clínica haidentificado los microorganismos responsables de las enfermedades infecciosas, mediante el cultivo, aislamiento e identificación de los mismos y estos sistemas proporcionanuna ayuda importante. En todo el mundo los programas de reducción en los costos sanitarios requieren que todos los implicados en el campo de las enfermedadesinfecciosas trabajen por un objetivo común: “Mejorar el tratamiento de los pacientes”. La automatización ha sido diseñada para ayudar a microbiólogos y clínicos de todoel mundo en su lucha diaria contra las enfermedades infecciosas y en los retos económicos que tienen que afrontar.

BENEFICIOS DEL USO DE SISTEMAS AUTOMATIZADO EN MICROBIOLOGÍA

A. PACIENTE EN ESTADO CRÍTICO.

· Permite establecer una terapia más adecuada.· Reduce eL tiempo de estancia en la Institución.· Reduce la exposición del paciente a infecciones nosocomiales.· Reduce el tratamiento combinado.· Ofrece alternativas en la terapia ambulatoria.· Provee calidad de vida.

TECNOLOGÍA

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B. EN EL CONTROL DE LA INFECCIÓN.

· Implementación de reportes epidemiológicos.· Incidencia mensual bacteriana.· Información epidemiológica actualizada para mejorar la elección del tratamiento y realizar un control y seguimiento de las infecciones.· Seguimiento de la resistencia bacteriana.

C. PARA EL CUERPO MÉDICO.

· Reporte diario de resultados de pacientes críticos y no críticos.· Datos exactos de ID/MIC.· Evita en un momento dado, el tratamiento empírico o profiláctico prolongado con el uso de una terapia adecuada, basado en el reporte confiable y rápido del

antibiograma.

D. PARA EL HOSPITAL.

· Provee exactitud y confiabilidad.· Provee calidad para el paciente en estado crítico o no.· Reduce costos en el tratamiento.· Reduce el tiempo de hospitalización.· Reduce la incidencia de Infección adquirida en el hospital.

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E. LABORATORIO CLÍNICO – SECCIÓN DE MICROBIOLOGÍA

· Ayuda a optimizar el tiempo para la evaluación, análisis y validación de los resultados.· Exactitud en la identificación y en los resultados de sensibilidad para instaurar el tratamiento adecuado y controlar la infección hospitalaria y la aparición de

resistencias.· Excelente Screening para la detección de Betalactamasas de Espectro Extendido (ESBLs).· Aseguramiento en la reproducibilidad y Control de Calidad.· Permite generar Informes Epidemiológicos al Comité de Infecciones e Institución.

INFECCIÓN NOSOCOMIAL

La Infección es el resultado de la interacción de un microorganismo infeccioso y un huésped susceptible, dicha interacción se produce a través de un mecanismo detransmisión. Estos huéspedes tienen factores predisponentes , como la enfermedad de base y los tratamientos.

Habitualmente aparece más allá de las 72 horas del ingreso, dependiendo del tipo de infección. Para reconocer en cierta medida si la infección es adquirida en lacomunidad o en el hospital es imprescindible conocer el periodo de incubación de la enfermedad específica.

Existen infecciones, como por ejemplo las heridas quirúrgicas y las transmisibles por sangre (Hepatitis B), que pueden aparecer luego de dar de alta del hospital, y estaslas debemos considerar como Infección Nosocomial u Hospitalaria. En 1847 K. Ignaz Semmelwieis, médico húngaro, radicado en Viena, por primera vez destaca laimportancia de la transmisión de infecciones en el hospital de persona a persona de la fiebre puerperal, promoviendo como medida eficaz para el control de la misma , elLavado de Manos. Instituyo el Lavado de Manos, disminuyendo el número de infecciones y su mortalidad consecuente.

Muchas son las causas que contribuyen en la patología infecciosa hospitalaria:

1.La virulencia de los microorganismos:a.Patogenicidad de las cepasb.Multirresistenciac.Cantidad y número

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2.El paciente:a.Edadb.Sexoc.Enfermedad subyacented.Su estado inmune (mecanismos de defensa y respuesta inmune).

3.El medio ambiente:a.Planta físicab.Personal hospitalarioc.Visitas

4.El tratamiento:a.Terapia inmunodepresivab.Antibióticosc.Técnicas invasivas

Estas variables, además de incidir en la magnitud de la Infección Nosocomial, también contribuye a la aparición de la patología infecciosa por microorganismos oportunistaso reemergentes, caracterizada por ser infecciones causadas por microorganismos de baja virulencia y no ser patógenos en pacientes inmunocompetentes o reaparecendespués de estar controlados.

Se debe aclarar que no todas la Infecciones Nosocomiales son prevenibles y se estima que, como mínimo, la mitad se producirán a pesar de la aplicación de las medidasestrictas de prevención.

Los agentes etiológicos de la Infección Nosocomial pueden ser bacterias, virus, hongos y parásitos. La mayor parte son debidas a bacterias o virus, le siguen los hongosy raramente los parásitos.

La transmisión se puede realizar por cuatro vías:

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1.Por contacto (directo o indirecto). De ahí la importancia del correcto lavado de manos entren paciente y paciente examinado.2.Por un vehículo apropiado (por ej. Alimentos, soluciones intravenosas, dispositivos biomédicos, catéteres)3.Por vía aerógena4.A través de un vector (siendo estos dos últimos excepcionales).

También encontramos la infección de origen endógeno, entendiéndose aquella infección, a partir o que se deriva de la flora del paciente.

Una de las principales consecuencias directas de la Infección Nosocomial es la prolongación de los días de hospitalización. Aumenta los costos por atención al paciente,alcanzando cifras muy superiores a estas, dependiendo del costo del o los antibióticos utilizados y la localización de la infección. Aumenta la mortalidad y encontramoscada vez con mayor impacto las demandas civiles y penales realizadas por los mismos pacientes, sus familiares y el personal de salud.

VIGILANCIA, CONTROL Y PREVENCIÓN DE LA INFECCIÓN NOSOCOMIAL

“La resistencia a los antibióticos como hecho en sí, no es sorprendente. Ni siquiera es nueva. Sin embargo actualmente es preocupante porque aumenta progresivamente,mientras que las herramientas para combatirla disminuyen tanto en eficacia como en número.” Joshua Lederberg, Ganador del Premio Novel.

En 1968 se publica en Inglaterra un manual titulado “Infection Control in the Hospital” de la Asociación Americana de Hospitales que contenía las normas mínimas parael control de las infecciones en los pacientes; este manual sugería la creación del Comité de Infecciones, siendo este el asesor de las decisiones y el cuerpo estratégicopara el control de las infecciones.

COMITÉ DE INFECCIONES

ORGANIZACIÓN:

La función primaria de un programa de control de infección intra hospitalaria consiste en reducir los riesgos para los pacientes, empleados y visitantes. Es necesarioorganizar diversas actividades, de modo que se puedan obtener información útil para la toma de decisiones.

El comité está conformado por personal médico de cirugía, medicina, Infectología, enfermería, farmacia y la administración.

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Comité asesor hospitalario para la

elaboración de políticas

Comité de practica profesional de médicos

Comité de control de infecciones

Recomendaciones del equipo de epidemiología del hospital Función de Control de Infecciones

1. Vigilancia e informe / investigación de epidemias 2. Educación 3. Salud de los empleados / evaluación masiva del personal 4. Revisión del uso de antibióticos / datos o informes de resistencia

de microorganismos 5. Revisión de las políticas y procedimientos para control de

infecciones

Los imperativos para un buen programa de control de infecciones son de tipo médico,administrativo, económico, legal, social y ético.

La función básica del comité es establecer políticas generales para el control de infeccionesdel hospital. Esto es posible.

1. Estableciendo un sistema de información y archivo que permita conocer el tipo yfrecuencia de infección entre todo el personal hospitalario.

2. Manteniendo la Sección de Microbiología continuamente informada y conseguirque se practiquen aquellos métodos y técnicas que hagan posible el control de lainfección.

3. Revisando periódicamente las técnicas de asepsia utilizadas en áreas criticas(quirófanos, UCIs, etc.).

4. Intentando reducir el uso de los antibióticos, tanto en el tratamiento como en laprofilaxis.

5. Creando un programa educacional dirigido a todo el personal hospitalario destinadoa conocer la importancia y peligros de la Infección Nosocomial, así como lasmedidas que se deben adoptar para prevenirla y combatirla.

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PAPEL DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

Son múltiples las funciones que cumple dicha sección en la vigilancia, control y prevención de la Infección Nosocomial, he aquí algunas de ellas:

-Participación como un miembro activo del Comité de Infecciones.

-Actividad docente desde el punto de vista de los aspectos microbiológicos de la Infecciones Nosocomiales al personal que las controla.

-Diagnóstico etiológico de la infección en base a una correcta identificación taxonómica y susceptibilidad de los microorganismos.

-Apoyo en las investigaciones de los problemas específicos de la Infección nosocomial como la investigación de un brote infeccioso, orientación terapéuticaAntimicrobiana más conveniente para el paciente conociendo la sensibilidad del microorganismo problema.

-Control de técnicas de esterilización y desinfección en forma rutinaria y en contadas situaciones control del personal sanitario y del ambiente.

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1.- Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Fifteenth Informational Supplement. M100-S15 Vol. 25 No. 1, January 2005. Clinical and LaboratoryStandards Institute.

2.- Ad C. Fluit, Maarten R. Visser and Franz-Josef Schmitz. 2001. Molecular Detection of Antimicrobial Resistance, Clinical Microbiology Reviewes.

3.- Hanssen, A.M., G. Kkjeldsen and J.U.E. Sollid. 2004 Local variants of staphylococval cassette chromosome mec in sporadic methicillin resistant Staphylococcus aureusand meticillin resistant coagulase negative staphylococci; evidence of horizontal gene transfer? Antimicrob. Agent Chemother. 48: 285-96.

4.- Skov, R., R. Smyth, M Clausen, A.R. Larsen, N. Fridt Moller, B. Olsson-Liljequist, and G. Kahlmeter, 2003. Evaluation of Cefoxitin 30 ug disc on Iso-Sensitest agar fordetection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus. J. Antimicrob. Chemother. 52:204-7

5.- Susan M. Shima, MS, MT(ASCP), and Lawrence W. Donahoe, M(ASCP). 2004. Bacterial resistence: How to detect three types.

6.- Mandell/Douglas/Bennett. 2000. Enfermedades Infecciosas. Principios y Practica.

7.- Center for Disease Control and Prevention. Infectious Disease News. December 2003. Vol 16, No. 12.

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