UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUDESCUELA PROFESIONAL DE ENFERMERIA Tema: PRACTICA N 3: ACCION DE LOS AGENTES FISICOS Y QUIMICOS SOBRE LOS MICROORGANISMOS estudiantes: 1. ALVARADO TOLENTINO ANYELA 2. GIL SUMARY ROMINA Curso: MICROBIOLOGIA Ciclo: II Docente: CARLOS AZAEDO CHIMBOTE - PERU 2015

I.-INTRODUCCINMecanismo de accin de los agentes fsico y qumicos: Inhiben la sntesis de la pared celular o aceleran su degradacin. Alteran la permeabilidad selectiva de la membrana citoplasmtica. Desnaturalizan las protenas y alteran su estructura secundaria y terciaria. Inhiben la actividad enzimtica mediante el bloque de los radicales sulfhdrilo (-SH).A) AGENTES FSICOSTodos los microorganismos son afectados por diferentes factores fsicos, entre ellos el ms importante es la temperatura, pero tambin la presin y otros elementos del medio.1.-Temperaturaa) Altas temperaturas: Usadas para la esterilizacin o saneamiento.A.1) CALOR SECOa.1.1) Aire caliente: Esterilizacin mediante oxidacin y prdida de agua de los microbios (hornos entre 160 y 200 C).a.1.2) Incineracin: Esteriliza mediante fuego directo (mecheros Bunsen, incineraciones, etc).

A.2) CALOR HMEDOa.2.1) Valor a presin: Esterilizacin mediante la desnaturalizacin de protenas (autoclaves entre 120 y 210 C).a.2.2) Tyndalizacin: Esterilizacin a vapor fluente o fraccionado (temperatura que no sobrepasan los 100 C durante 20 por 3 das consecutivos).a.2.3) Pasteurizacin: Saneamiento que emplea temperaturas de 62,5 C por 30.

b) Bajas temperaturas:b.1) Refrigeracin: Conservacin entre 0 y 8C.b.2) Congelacin: Conservacin por debajo de los 0C con nitrgeno lquido.

2.-Desecacina) Liofilizacin: Sublimacin a temperaturas entre -60 y 70C.3.-Presin osmticaa) Plasmlisis: Prdida de agua en medio hipertnica (NaCl al 20%).b) Plasmoptisis: Incorporacin de agua en medio hipotnica (NaCl a 0,1%).4.-Radiacionesa) Radiacin No Ionizantea.1) Radiacin Ultravioleta: Los cidos nucleicos y las protenas absorben la radiacin ultravioleta, esa absorcin causa modificacin qumica.b) Radiacin Ionizante: Estas incluyen los rayos alfas, beta y gama, protones y neutrones de alta energa. Al absorber estas radiaciones, el agua y otras sustancias se ionizan, crendose radiaciones libres los cuales ocasionan diferentes tipos de daos en las clulas.B) AGENTES QUMICOSNo existe slo producto capaz de convertirse en el agente qumico ideal, por lo cual debe cumplir las siguientes caractersticas.1.-Actividad antimicrobiana2.-Solubilidad3.-Estabilidad4.-No debe de ser txico para personas y animales5.-Homogenidad6.-No debe combinarse con material orgnico extrao7.-Actividad antimicrobiana a T ambiente y corporal8.-Capacidad de penetracin9.-No debe ser corrosivo ni teir10.-Poder desodorante11.-Capacidad detergente12.-Disponibilidad y costos Fenol y compuestos fenlicos Alcoholes Halgenos y sus compuestos Metales pesados Colorantes Compuestos de amonio cuaternario Aldehdos Quimio esterilizantes gaseosos

II. PROCEDIMIENTOSMATERIALES Y PROCEDIMIENTOS1. ACCION DE LA TEMPERATURA DE EBULLICION En tres tubos con caldo comn, sembrar por SUSPENSION el cultivo puro bacterianoEscherichia coli1.1. Colocamos el asa bacteriolgica calibrada al rojo vivo

1.2. Cogemos con el asa la muestra de scherichia coli y lo colocamos en las paredes del tubo de ensayo

1.3. Repetir el mismo parecimiento con la muestra de Staphylococus aureus

1.4. Someter los tubos anteriores previamente rotulados a ebullicin: una serie de dos tubos a 1 min., otros dos 5 min. Y otros dos 10 min.

ACCION DE LA CONCENTRACION DE IONES DE HIDROGENO (pH) Rotular seis tubos de ensayo con caldo: dos a pH 2, dos a pH 7 y dos a pH 10.

Sembrar por SUSPENSION 3 tubos de cada serie con el cultivo puro bacteriano Escherichacoli y Staphylococcus.1.1. Se coloca alcohol yodado en el vaso precipitado y se introduce el hisopo

1.2. Luego cojo solucin salina con el hisopo

1.3. Por ltimo, se aplica el cultivo en forma de estras el hisopo por la placa Petri

1.4. Se repite el mismo perecimiento con Sthaphylococcus

ACCION DE AGENTES INORGANICOS Y ORGANICOS (DESINFECTANTES Y/O ANTISEPTICOS)

1. Con el hisopo siembro con estras la placa Petri con agar comn. Con Escherichacoli

2. Con ayuda de una pinza esterilizada por flameado

3. Coger un disco de papel filtro y embeber con alcohol y colocarlo dentro de la placa Petri.

4. Colocar los discos de papel filtro de manera equidistante en la placa Petri

5. Repito el mismo procedimiento con Staphylococcus.COLOCAR TODOS LOS TUBOS DE ENSAYO Y PLACAS PETRI EN LA INCUBADORA

III. RESULTADOS Accin de la temperatura de ebullicinSe demostr en funcin al tiempo que mayor es la accin de temperatura y menor es el crecimiento bacteriano.

En la accin de la concentracin de iones de hidrogeno pH. La utilizacin de los componentes anionicos de un medio tiende a hacer este medio an ms alcalino, que como consecuencia se inici el crecimiento bacteriano y se multiplicaron; el alcohol yodado utilizado funciona como un amortiguador para el mantenimiento de un pH adecuado.

En la accin de agentes qumicos inorgnicos y orgnicos (Desinfectantes y/o antispticos), durante la incubacin el agente se difunde desde el disco de papel al agar o medio de cultivo. Al finalizar el periodo de incubacin e observan una serie de halos de inhibicin del crecimiento microbiano alrededor de los discos de papel, de diferentes dimetros. A una determinada distancia del disco de papel se alcanza la CMI (Concentracin Mnima Inhibidora) y a partir de ese punto se observa el crecimiento microbiano. La zona de inhibicin es proporcional a la cantidad de agentes qumicos antimicrobianos aadido al disco de papel de filtro, la solubilidad del agente, el coeficiente de difusin y la eficacia del agente. Este mtodo es muy rutinario para comprobar la sensibilidad a los antibiticos de los microorganismos patgenos y se conoce con el nombre de antibiograma.

Prueba de susceptibilidad.Se observ la accin de los agentes qumicos con relacin al efecto que tienen sobre los microorganismos, el cual el alcohol y el fenol son los agentes que tienen ms reaccin a la muerte de las bacterias.

IV.-DISCUSION VERA (2004) Se toma como ejemplo a los microorganismos como blanco y a los agentes antimicrobianos como balas, se est simplificando la accin de un agente antimicrobiano con un fin didctico. Sin embargo, en la realidad, los microorganismos no se comportan como simples blancos y la accin del agente antimicrobiano depende de su intensidad (si es fsico) o de su concentracin (si es qumico). Las principales formas en que los agentes antimicrobianos actan para matar o inhibir se pueden resumir en las siguientes acciones: Dao a la pared celular o inhibicin de su sntesis, alteracin de la permeabilidad de la membrana citoplasmtica; alteracin del estado fsico o qumico de las protenas o cidos nucleicos, inhibicin de la accin enzimtica, de la sntesis de la protena o de los cidos nucleicos.

HUGO HUMBERTO MONTOYA EN MICROBIOLOGIA BASICA PARA LA SALUD Y AFINES. La concentracin Mnima Inhibidora, valor utilizado para expresar el resultado de la medicin de la actividad antimicrobiana, se mide determinada la cantidad o la concentracin mnima de un agente qumico antimicrobiano que se necesita para inhibir el crecimiento de un organismo utilizado como control.

ROGER Y. STANIER & JULIO R. VILLANUEVA. Aunque un medio determinado puede ser adecuado para la iniciacin del crecimiento, el posterior desarrollo de una poblacin bacteriana puede estar severamente limitada por los cambios qumicos que se producen por el crecimiento y metabolismo de los propios organismos. V.-CONCLUSIONES Los microorganismos pueden ser eliminados, inhibidos o muertos por agentes fsicos o agentes qumicos. Un agente fsico es una condicin fsica o propiedad fsica que causa un cambio. La temperatura, la presin y la radiacin son ejemplos de agentes fsicos que actan sobre los microorganismos. Los filtros los retienen, mediante los procesos fsicos se causan cambios en los microorganismos, por ejemplo la esterilizacin y la incineracin que los conducen a la muerte. Un agente qumico es una sustancia (slido, lquido o gas) que se caracteriza por una composicin molecular definida y que causa una reaccin en los microorganismos, por ejemplo los compuestos fenlicos, los alcoholes, el cloro, el yodo y el xido de etileno. Dependiendo de la concentracin y del tiempo de exposicin, que los daa o mata.VI.-CUESTIONARIO1.- Qu diferencia hay en cuanto al uso de la ebullicin, la tindalizacin y la pasteurizacin para el control microbiano?

EBULLICIN: La ebullicinno es un procedimiento de esterilizacin. Con este procedimiento fsico tan slo alcanzamos temperaturas de 100C, insuficientes para eliminar formas de resistencia como las esporas. Pero este procedimiento nos puede permitir la eliminacin de formas vegetativas, sobre todo de patgenos, reduciendo significativamente la carga microbiana.

PASTEURIZACIN: Es el proceso y el resultado de pasteurizar. Este verbo hace referencia a la accin de incrementar la temperatura de un producto alimenticio en estado lquido a un nivel que resulta apenas inferior al necesario para su ebullicin, durante un periodo temporal reducido. A continuacin, el producto es enfriado con gran rapidez. De este modo se logra eliminar los microorganismos sin modificar las caractersticas del alimento en cuestin.

TINDALIZACIN: Tcnica de esterilizacin que consiste en elevar la temperatura del material que se quiere someter a tratamiento, entre 60 y 100 C, varias veces seguidas a intervalos de 24 horas. Con ello se consigue la destruccin de los microorganismos sin alterar la composicin qumica del material.2.- Cul es la relacin entre la temperatura de ebullicin y el tiempo sometido para lograr la muerte de los microrganismo?Se necesita ms tiempo someter al microorganismo y mayor la temperatura para que sea efectivo a mayor ebullicin es mayor accin.3.- Cmo evidencia si hubo o no crecimiento en relacin a la concentracin de hidrogeniones?Porque cuanto mayor es la concentracin de hidrogeniones es directamente proporcional al crecimiento de microorganismos bacterianos.4.- Cul de los agentes qumicos usados logran un efecto bactericida y/o bacteriosttico? Los alcoholes matan las bacterias, primero, al hacer que los lpidos que forman parte de la membrana protectora celular externa de cada clula bacteriana sean ms solubles en agua, de modo que la membrana celular comienza a perder su integridad estructural y se deshace. A medida que la membrana de la clula se desintegra, el alcohol puede entrar en las protenas celulares y desnaturalizar las protenas que se encuentran dentro de cada bacteria. Los compuestos de fenol pueden actuar como microbicidas o microbiostticos dependiendo de la concentracin que se utilice. Los fenoles poseen efecto germicida pues daan la membrana y desnaturalizan las protenas bacteriales.5.-Elabora una tabla e indique segn el grado de inhibicin si fue alto, medio y/o por parte del agente qumico usado sobre determinado microorganismo.ALCOHOLFENOL IODOLEJA

Fue alto porque lesionan la membrana celular de los microorganismos y desnaturalizan protenas celulares. Desorganizan la estructura fosfolipdica.Fue alto porque que provocan lesiones en la membrana citoplasmtica porque desordenan la disposicin de las protenas y fosfolpidos. Esto causa filtracin de compuestos celulares, inactivacin de enzimas y lisis.Fue medio porque modifica grupos funcionales de protenas y cidos nucleicos. Inactiva protenas y enzimas por oxidacin de los grupos -SH a S-S, pudiendo atacar tambin grupos amino, ndoles, etc.Fue bajo porque se utiliza como un desinfectante porque solo asegura una adecuada inactivacin de los microorganismos adheridos a superficies, siendo evidente y, tambin demostrable, la accin antimicrobiana, mas no mata los microorganismos.

VII.-REFERENCIA BIBLIOGRAFA VERA GARCIA CORTEZ. (2004) 2 EDICIN. INTRODUCCIN A LA MICROBIOLOGA. COSTA RICA: UNIVERSIDAD ESTATAL A DISTANCIA. FELIPE FONELLI LAFON. (2001) 2 EDICIN. MANUAL DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGA. MEXICO: UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CIUDAD DE JUAREZ.