Microscopia (MET, MEB)
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FATIMA GUADALUPE RAMIREZ FONSECA
IBI
CICLO 2012-A
HISTORIA
En 1873 Ersnt Abbe, físico, imprimo un gran
impulso a la óptica teórica y practica al concluir que
el aumento de un microscopio depende mas de la longitud de onda de la luz que de la calidad del
sistema óptico.
Luis de Bröglie en 1924 hizo trabajos sobre
mecánica ondulatoria y la generación de longitudes de onda 10000 veces mas pequeñas que la longitud de onda de la luz visible, permitió el surgimiento del germen de un nuevo
tipo de microscopio,el microscopio
electrónico.
En 1926, Bus descubre que los rayos electrónicos
son refractados por campos magnéticos, de
forma similar a la refracción de la luz por las lentes de vidrio, y además demuestra que las leyes geométricas de la óptica son obedecidas también
por los sistemas electrónicos
La ecuación fundamental de la mecánica
cuántica expresa que la longitud de
onda de una partícula en movimiento es
función de su velocidad y de su masa:
= h/mv
h: cte de Planck
m: masa del electrón
v: velocidad
SE
UTILIZANPARA EL ESTUDIO DETALLADO DE ESTRUCTURAS CELULARES.
(0,2 y 200 nm)
PRIMER M.E. EN ESPAÑA
(1949)
MICROSCOPIO ELECTRONICO
DE TRANSMISION.
(MET o TEM)
MICROSCOPIO ELECTRONICO DE BARRIDO. (MEB o SEM)
CARACTERISTICASESTOS MICROSCOPIOS UTILIZAN LOS HAZ DE ELECTRONES EN LUGAR DE RAYOS DE LUZ.
DADO QUE LOS ELECTRONES TIENEN UNA LONGITUD DE ONDA MUCHO MENOR QUE LA DE LA LUZ PUEDEN MOSTRAR ESTRUCTURAS MUCHO MÁS PEQUEÑAS.
LAS LENTES SON ELECTROMAGNETICAS.
SE OPERAN AL ALTO VACIO.
TIENEN MAYOR RESOLUCION QUE EL MICROSCOPIO OPTICO
Una unidad óptica-electrónica, que genera el haz que se desplaza
sobre la muestra.
Un portamuestra, con distintos grados de
movimientos.
Una unidad de detección de las señales que se
originan en la muestra, seguida de un sistema
de amplificación adecuado.
Un sistema de visualización de las imágenes ( tubo de rayos catódicos ).
Un sistema de vacío, un sistema de
refrigeración y un sistema de suministro
eléctrico, relativamente similares a los del
MET.
Un sistema de registro fotográfico, magnético o
de video.
Un sistema de procesamiento de la imagen con ayuda
computacional ( optativo ).
MICROSCOPIO
ELECTRONICO DE
TRANSMISION (MET). El microscopio
electrónico detransmisión(T.E.M.)consiguióaumentos de100.000 X. Fuedesarrolladopor Max Knolly Ernst Ruskaen Alemania en1931
permite la observación de
muestra en cortes ultrafinos.
Un TEM dirige el haz de electrones hacia
el objeto que se desea aumentar. Una
parte de los electrones rebotan o son absorbidos por el objeto y otros lo
atraviesan formando una imagen aumentada.
Se coloca una placa fotográfica o una
pantalla fluorescente detrás del objeto para registrar la
imagen aumentada.
Los microscopios electrónicos de
transmisión pueden aumentar un objeto hasta un millón de
veces.
PREPARACION DE LA
MUESTRA
SISTEMA DE VACIO
SISTEMA DE
REFRIGERACION
PORTAESPECIMEN
SISTEMA DE
DETECCION.
UNIDAD OPTICA
ELECTRONICA.
• CANON DE e-
• LENTES
ELECTRONICAS.
Corte fino de un bacteria Gram positiva
(MET).
En 1938, Von Ardenne diseña un nuevo
tipo de microscopio, con el objeto de
estudiar muestras relativamente
gruesas.
Se lava con solución salina la
muestra para remover
contenientes.
Anestesicos(extencionesintactas en condiciones normales.
no hay cortes, pero si
necesitamos hacer fijaciones (en cambio, no es
necesario deshidratar).
El proceso que realizamos es la
metalización, depositamos
sobre la superficie la capa metálica que refleja los
electrones, entonces la
imagen es la de la superficie de las
células.
La imagen que obtenemos es similar a la del
sombreado, pero en este caso
suelen darnos imágenes en tres
dimensiones.
SISTEMA DE VACIO
SISTEMA DE
REFRIGERACION
PORTAESPECIMEN
SISTEMA DE
BARRIDO
SISTEMA DE
DETECCION.
UNIDAD OPTICA
ELECTRONICA.
• CANON DE e-
• LENTES
ELECTRONICAS.
Célula de bacteria foto tróficas
(MEB).
BUENA RESOLUCION.
DA MAYOR INFORMACION. (IMAGENES CON DETALLES PROFUNDOS).
PERMITE VER ESTRUCURA, MORFOLOGIA, TOPOGRAFIA PARA CARACTERIZAR MUETRAS.
FAVORECE AL ESTUDIO DE ENFERMEDADES.
TECNICA MUY COSTOSA.
PERSONAL ESPECIALIZADO.
NO DA INFORMACION SOBRE EL METABOLISMO DE LOS ESPECIEMENES.
DESTRUCCION DE LAS MUETRAS
• -Observación de composición de materiales
• -Fenómenos de difusión
• -Composición de aleaciones
• -Crecimiento de granos
• -Estudios de corrosión de metales y aleaciones
Metalurgia:
• Una eficaz ayuda en estudios geométricos y morfológicos relacionados con la mineralogía y metalurgia.
Geología:
•-Observación de los distintos organelos intracelulares
•-Diferenciación de células
•-Estructura y ultra estructura de tejidos y órganos animales y vegetales
•-Inmunocitolocalización de macromoléculas
•-Patologías animales y vegetales
•-Estudios forenses (búsqueda de partículas, tejidos, hilos, semen…)
Biología:
•-Caracterización morfológica y analítica de materiales
•-Estudio de superficies
•-Procesos de difusión
•-Segregación
•-Análisis de fallos
•-Control de calidad
•-Irregularidades de piezas fabricadas en cadena
•-Biodeterioro de obras de arte
Ciencia e Ingeniería
de Materiales:
GRACIAS
ATENCIONPOR SU
BIBLIOGRAFIA
Serie Científica Avanzada: El microscopio Electrónico Centro de Extensión Biomédica Facultad de Medicina Universidad de Chile M. L. López
BIOLOGÍA DE LOS MICRO-ORGANISMOS,Brock10va Ed., (sección 4.3).
http://www.cienciaexplicada.com/2010/07/microscopio-electronico.html
http://www.elergonomista.com/microbiologia/11s01.htm
