Módulo de Prácticas oct. 2011-def..doc

8/16/2019 Módulo de Prácticas oct. 2011-def..doc

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UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELAFACULTAD DE MEDICINA

ESCUELA DE ENFERMERÍA

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BÁSICASCÁTEDRA DE MICROBIOLOGÍA

MÓDULO DE PRÁCTICASDE MICROBIOLOGÍA

PARA EL ESTUDIANTE DE

ENFERMERÍASEGUNDO SEMESTRE

Autores: Dra Mar!a A"to"#a $e %a Parte P&re' Dra Mar!a $e% P#%ar (urta$o R#)o L#) *ea" *a)+ues P#tte%ou$

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Cara)as, o)tu-re $e ./00

CONTENIDO P12#"a

I. Información relativa a la Conducta en el Laoratorio de Microiolo!"a #

II. O$etivo% terminale% de la a%i!natura ................................................... &

III. Dia!rama de un micro%co'io ó'tico .................................................... (

I). In%tructivo 'ara el u%o del micro%co'io ó'tico ..................................... *

). Información relativa a la a%i!natura+ 'ro!ramación , evaluación ....... -

)I. Morfolo!"a acteriana , mtodo% de coloración ................................... 11

)II. Otención de mue%tra% ioló!ica% 'ara e%tudio microioló!ico............ #1

)III. Dia!nó%tico Microioló!ico de la% Infeccione% urinaria% .................... &/

I0. Mtodo% de e%teriliación en lo% %ervicio% de %alud............................ (&

0. 2i!iene en el medio 3o%'italario ........................................................ *1

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OCTU5RE 4611

INFORMACIÓN IMPORTANTE PARA RECORDAR 3 DIRIGIRNUESTRA CONDUCTA DURANTE LAS PRÁCTICAS EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

1. La% 'r7ctica% de Microiolo!"a tendr7n lu!ar una ve a la %emana en lo%laoratorio% de 'r7ctica o en la% aula% de%i!nada% a tal fin8 lo% d"a% lune% en el3orario 'ro!ramado de 69+66 a 11+/68 de acuerdo a la 'ro!ramación %eme%tral de laC7tedra 'ulicada en la cartelera , lo% alumno% %er7n a!ru'ado% , a%i!nado% al'rofe%or de 'r7ctica% corre%'ondiente8 %e!:n la% nece%idade% , recur%o% de la

;%i!natura.4. tamin llevar la'icero% de color ro$o ,aul.#. Una ve iniciada la 'r7ctica el alumno no 'odr7 %alir del Laoratorio o del ;ula8 %in

el 'ermi%o del ?de la@ 'rofe%or?a@.&. El me%ón de traa$o deer7 e%tar lire de cualAuier o$eto Aue no forme 'arte de la

'r7ctica. La% cartera%8 liro% , o$eto% 'er%onale% deen e%tar !uardado% en lo%lu!are% de%tinado% 'ara tal fin. Si tiene duda% al re%'ecto %olicite información al ?ala@ 'rofe%or?a@.

/. No e%t7 'ermitido fumar8 comer8 eer8 maAuillar%e o 'einar%e dentro del amientede lo% %alone% de cla%e , en lo% laoratorio%.

(. En el ca%o de Aue %e 'roduca al!:n accidente en el laoratorio8 avi%e de inmediatoal ?la@ 'rofe%ora.

*. Si un material de traa$o ?e$em'lo8 cultivo acteriano8 colorante%8 u otro@ entra encontacto con 'iel8 muco%a% o 3erida8 lave de inmediato con aundante a!ua ,notifiAue el 3ec3o al ?la@ 'rofe%or?a@.

-. E% o-%#2ator#o lavar%e la% mano% con a!ua , $aón al terminar cada e$ercicio'r7ctico.

9. Lo% e%tudiante% deer7n e%tudiar , a'render el ca'"tulo corre%'ondiente al tema dela %e%ión %emanal de 'r7ctica o di%ertación8 a"tes de a%i%tir a la mi%ma.

16. Realiada la evaluación e%crita 'reliminar8 el 'rofe%or 3ar7 una introducción , unademo%tración re%'ecto a la manera de traa$ar , conducir%e en el Laoratorio deMicroiolo!"a8 %eBalar7 la% norma% Aue dean cum'lir%e durante cada %e%ión en'articular , lo% rie%!o% a lo% Aue %e e'one el alumno %i no %e cum'lencuidado%amente la% norma% , recomendacione% indicada%.

11. La% ina%i%tencia% a la% Se%ione% de


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A"tes $e ret#rarse $e% a5-#e"te $e% La-orator#o, )o54rue-e +ue su %u2ar $etra-a6o +ue$a e" 4er7e)to or$e" 8 e% -a")o 2uar$a$o $e-a6o $e% 5es9"

OB*ETIVOS TERMINALES DE LA ASIGNATURA

;l concluir el 'ro!rama teórico='r7ctico8 el alumno e%tar7 en ca'acidad de+

1. ;%umir la ei%tencia en la naturalea de microor!ani%mo% invi%ile% al o$o de%nudo ,reconocer la im'ortancia de lo% microor!ani%mo% en %u interacción 'o%itiva , ne!ativacon el %er 3umano %ano , enfermo8 en cada una de la% eta'a% de %u vida evolutiva.

4. Inter'retar la im'ortancia 'ara el 'rofe%ional de Enfermer"a8 del conocimiento!eneral de la 5acteriolo!"a8 Micolo!"a , )irolo!"a8 a%" como la identificación ,

'revención de la% Infeccione% de Tran%mi%ión Seual , la% 2e'atiti% virale%.#. Inter'retar la im'ortancia de la flora normal re%idente en lo% diferente% ór!ano% ,

%i%tema% del %er 3umano.

&. Inter'retar lo% fenómeno% re%ultante% de la interacción 3o%'edador=a!ente'ató!eno8 con%iderando la% variale%+ mecani%mo% de defen%a del 3o%'edador8mecani%mo% de a!re%ión del 'ar7%ito8 medio amiente , mecani%mo% de tran%mi%ión.

/. De%criir lo% mecani%mo% de defen%a del or!ani%mo ante la a!re%ión microiana ,la% alteracione% de la re%'ue%ta inmunitaria Aue conducen a e%tado% 'atoló!ico%del 3o%'edador8 relacionado% con la% enfermedade% infeccio%a% del 3umano.

(. Diferenciar entre infección8 enfermedad infeccio%a , 'ortador a%intom7tico.

*. De%criir la% caracter"%tica% e%tructurale% , funcionale% de acteria%8 3on!o% , viru%'roductore% de enfermedad en el 3umano.

-. De%criir la etiolo!"a , 'ato!enia de la% enfermedade% infeccio%a%8 e%'ecialmenteaAuella% con elevada% cifra% de morilidad ,o mortalidad en )eneuela.

9. De%criir lo% %i!no% , %"ntoma% cl"nico% !enerale% m7% re%altante% ocaracter"%tico% de la% enfermedade% infeccio%a%.

16. Ele!ir lo% e7mene% de laoratorio m7% u%uale% Aue com'lementan el

dia!nó%tico de la% enfermedade% infeccio%a% m7% frecuente% en nue%tro medio.

11. De%criir la 're'aración del 'aciente 'ara lo% e7mene% de laoratorio m7%frecuente% en acteriolo!"a8 micolo!"a , virolo!"a8 a%" como dominar la% tcnica% derecolección de mue%tra% 'ara lo% e%tudio% acterioló!ico%8 micoló!ico%8 ,

&


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viroló!ico% m7% frecuentemente utiliado% 'ara el dia!nó%tico de la% enfermedade%infeccio%a%.

14. ;'licar lo% criterio% adecuado% 'ara la otención , env"o de la% mue%tra% 'arae7mene% microioló!ico% Aue 'ermitan el dia!nó%tico definitivo de la%enfermedade% infeccio%a%.

1#. Identificar la% medida% de 'revención , control de la% enfermedade% infeccio%a%8'ara %u a'licación en la comunidad8 la familia , el individuo8 e%'ecialmente la%infeccione% 3o%'italaria%. En relación con la% tcnica% de de%infección8 e%teriliacióne 3i!iene8 a%" como el efecto de la a'licación de e%ta% medida% 'reventiva% en lamorilidad ,o mortalidad 'or e%ta% enfermedade% , lo% eneficio% Aue %e otienende la a'licación de medida% 'reventiva%.

1&. ;%umir %u re%'on%ailidad en la% actividade% Aue com'artir7 con el EAui'ode Salud8 como 'arte de una atención inte!ral8 en todo lo relacionado con la'atolo!"a infeccio%a de nue%tro medio.

1/. )alorar la nece%idad de 'ermanecer actualiado en %u% conocimiento% %ore lamicroiolo!"a , la 'atolo!"a infeccio%a8 mediante la lectura de teto% , otra%'ulicacione%8 'artiendo de la 'remi%a Aue la Microiolo!"a e% una di%ci'linadin7mica con verdade% de corta duración.

1(.


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(


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MICROSCOPIO ÓPTICO

*


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INSTRUCTIVO RECOMENDADO PARA LECTURA ANTES DE CADA UNA DE

LAS PRÁCTICAS DONDE SE REUIERA EL USO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

1. Retire la cuierta del micro%co'io %i e%t7 cuierto.

4. IdentifiAue cada una de %u% 'arte% %e!:n el e%Auema Aue a'arece en la '7!inaanterior de e%te FMódulo de


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INTRODUCCIÓN

La a%i!natura Microiolo!"a e%t7 incluida en el 'ro!rama de%tinado a laformación del 'rofe%ional de la Enfermer"a de la Jacultad de Medicina de laUniver%idad Central de )eneuela8 como cur%o fundamental 'ara %u a'licación a lolar!o de toda% la% actividade% del e!re%ado8 con%iderando la im'ortancia de la%enfermedade% infecciona% en nue%tra% comunidade%8 en el 3o%'ital , otro% centro% deatención 'ara la %alud.

El cur%o de Microiolo!"a inclu,e tamin la% tcnica% de 3i!iene 3o%'italaria8 la

evaluación de la efectividad de lo% de%infectante% m7% comune% , la a'licación de la%K


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;l inicio de cada %e%ión 'r7ctica el 'rofe%or en %u función de facilitador8 realiar7una introducción al tema , e'licar7 en forma demo%trativa durante 16 a 1/ minuto%8lo% o$etivo% de la actividad a iniciar%e.

;l finaliar la 'r7ctica8 iniciar7 e$ercicio% de retroalimentación dentro del !ru'o'ara aclarar duda% , fi$ar conocimiento%.

A)t#;#$a$es $e% a%u5"o:


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E;a%ua)#9":

Dia!nó%tica = %e com'roar7 %i el alumno 3a le"do8 e%tudiado , com'rendido elcontenido teórico de la 'r7ctica.

Jormativa = %e relacionar7 el contenido 'r7ctico con el contenido teórico im'artido

'reviamente. Sumativa = la nota total e%tar7 formada 'or+ la% nota% 'arciale% otenida% en laevaluación e%crita ?'ruea corta@8 la 're'aración 'revia de la mi%ma8 la 'artici'ación ,actividade% individuale% realiada% , la% re%'ue%ta% de la% 're!unta% de auto=evaluación recomendada% 'ara la %e%ión 'r7ctica8 incluida% en el material de a'o,o.

BIBLIOGRAFÍA A CONSULTAR PARA AMPLIAR CONOCIMIENTOS:

1. Carmona O8 Góme M8 Monte% T8 Marcano C , MariBo J. M#)ro-#o%o2!aM&$#)a $e D#;o. McGra=2ill . Interamericana.

4. N:Be M8 Góme M , Carmona O. M#)ro-#o%o2!a M&$#)a ?Tomo% I , II@


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-. M#)ro-#o%o2!a M&$#)a. C7tedra de Microiolo!"a. E%cuela de Medicina KLu"%Raetti. Jacultad de Medicina. UC). Caraca%.

PRACTICAS 0 8 .

MORFOLOGÍA BACTERIANA 3 M>TODOS DE COLORACIÓN

OB*ETIVOS PRINCIPALES:

;l finaliar la 'r7ctica el e%tudiante e%tar7 en ca'acidad de realiar un etendido'ara o%ervación de la% acteria% en fre%co , 'ara coloración a%" como de reconocer la% acteria% %e!:n %u morfolo!"a , re%'ue%ta a la coloración de Gram , Hie3l Neel%en8en a%e a o%ervacione% al micro%co'io.

OB*ETIVOS ESPECÍFICOS:

;l finaliar la 'r7ctica8 el e%tudiante e%tar7 en ca'acidad de+

a@ Demo%trar el u%o correcto del micro%co'io como in%trumento fundamental enMicroiolo!"a8 en a%e al mane$o del a'arato.

@ Demo%trar la tcnica , 'rocedimiento de elaoración de un froti% en fre%co a'artir de un medio de cultivo %ólido o l"Auido8 utiliando el material 'revi%to 'arala 'r7ctica.

c@ Demo%trar la tcnica , 'rocedimiento de la coloración de un etendido 'or elmtodo de Gram8 utiliando el material 'revi%to 'ara la 'r7ctica.

d@ De%criir la afinidad tintorial8 morfolo!"a , a!ru'ación de la% acteria% mediantela o%ervación micro%có'ica.

e@ Identificar la% acteria% %e!:n %u morfolo!"a , la re%'ue%ta a la coloración deGram.

f@ Identificar la% acteria% %e!:n la re%'ue%ta a la decoloración 7cida.

CONTENIDOS:

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1.


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INTRODUCCIÓN:

La 'alara Microiolo!"a e% un trmino mu, am'lio Aue %i!nifica el e%tudio de lo%or!ani%mo% viviente% Aue individualmente %on dema%iado 'eAueBo% 'ara o%ervar%e a

%im'le vi%ta. Inclu,e el e%tudio de la% acteria% ?acteriolo!"a@8 lo% viru% ?virolo!"a@8 la%levadura% , 3on!o% ?micolo!"a@8 lo% 'rotooario% ?'rotooolo!"a@. E%ta% forma% de vida%e conocen con el nomre de microor!ani%mo%.

La% acteria% %on un !ru'o 3etero!neo de or!ani%mo% unicelulare%. Sua'reciación no e% 'o%ile a %im'le vi%ta 'or lo Aue %e recurre al u%o del micro%co'ioó'tico8 ,a conocido , e%tudiado 'or u%tede%8 el cual a trav% del em'leo con$unto de%u% o$etivo% , oculare% 'ermite la am'lificación de la ima!en. Lo% oculare% e%t7nfaricado% con diferente% am'lificacione%8 /08 1608 , 1/08 ?%i!nificando 0 el n:mero devece% Aue %e 3a aumentado el tamaBo actual@. El em'leado m7% frecuentemente e% elocular 160. Un o$etivo 160 aumenta tamin 16 vece% la ima!en del o$eto ene%tudio. De manera Aue 'odemo% concluir Aue el aumento re%ultante %er7 el 'roductode la multi'licación del 'oder de am'lificador del o$etivo , ocular em'leado% 'ara elmomento.

El o$etivo de inmer%ión en aceite 'ermite una ma,or re%olución , %e em'leaca%i de manera eclu%iva 'ara el e%tudio de la% acteria%. ;m'lifica la ima!en cerca de9* vece% , %i e%tamo% em'leando un ocular 160 la am'lificación total del o$etivo %er7de 9*60.

La% acteria% %on micro%có'ica% , de muc3o menor tamaBo Aue lo% 'rotooario%, 3on!o% verdadero%. Lo% viru% %on ultramicro%có'ico% , 'or lo tanto im'erce'tile% almicro%co'io ó'tico %iendo nece%ario el em'leo del micro%co'io electrónico 'ara %ua'reciación.

La medida micro%có'ica la con%titu,e el micrómetro ?µm@8 con%titu,endo %ta lamil%ima 'arte de un mil"metro.


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or!ani%mo% alineado% uno detr7% del otro8 'udieran alcanar el di7metro de la caeade un alfiler.

;l!una% acteria% comune% miden 1 µm de lon!itud , 'or lo tanto 4666 de ella%'odr"an alcanar el tamaBo de la caea de un alfiler.

El micro%co'io ó'tico8 al am'lificar la ima!en 3a%ta 1666 vece% o m7%8 'ermiteuna uena vi%ualiación de la ma,or"a de la% acteria%8 'ero mue%tra 'oco% de %u%detalle%.

?CÓMO SE IDENTIFICAN LAS BACTERIAS@


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COCOS EN R;CIMOSE$. EST;JILOCOCO COCOS EN C;DEN;E$. ESTRE


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lo% e%'irale% 'ro'iamente ?e%'irale% o 3lice% como %acacorc3o%@8 , la% e%'iroAueta%8con la% mi%ma% caracter"%tica% 'ero ca'ace% de fleionar%e , mover%e 'or ondulación.

ES


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;l!una% acteria% 're%entan una movilidad de%liante8 %e mueven %ore la%%u'erficie% 'or onda% de contracción 'roducida% en el cito'la%ma8 'ero e%temecani%mo e% meno% im'ortante.

La% acteria% en %u e%tado natural %on dif"cile% de a'reciar con el micro%co'ioó'tico deido a Aue la ma,or 'arte de ella% %on ca%i incolora% cuando %e o%ervanindividualmente8 a:n cuando el cultivo 're%ente %u color 'articular. Deido a Aue elem'leo de colorante% Aue %e cominan Au"micamente 'ara teBir la% acteria% la% mata8a vece% e% nece%ario o%ervarla% viva%8 %in em'lear a:n mtodo% de tinción , a%" 'oder a'reciar %i %on móvile% o no.

El eamen micro%có'ico de la% acteria% al fre%co ?%in colorear@ facilita lao%ervación del movimiento acteriano mientra% Aue coloreado o teBido8 'ermitedeterminar la forma8 tamaBo8 di%'o%ición8 're%encia de c7'%ula8 formación de e%'ora%, di%'o%ición , n:mero de fla!elo%.

La o%ervación micro%có'ica al fre%co %e 'uede 3acer en cam'o claro8 cam'oo%curo o 'or contra%te de fa%e.

En la micro%co'"a en cam'o claro lo% ra,o% de lu via$an de%de la mue%tra a trav% delvidrio , el aceite r7'idamente lo Aue 'ermite una ima!en clara.

En el cam'o o%curo un conden%ador e%'ecial Aue 'roduce un cono tuular delu vi%ile 'ermite Aue no lle!ue lu al o$o a meno% Aue %e refle$e 'or al!:n o$eto Aue%e encuentre en el cam'o micro%có'ico 'udiendo 3acer%e vi%ile% la% e%tructura% Aue'ro'orcionen un contra%te in%uficiente con el medio Aue la% rodea. E%ta tcnica e%'articularmente valio%a 'ara la o%ervación de acteria% viva%8 'articularmenteaAuella% Aue %on tan del!ada% Aue %e acercan al l"mite de re%olución del micro%co'iocom'ue%to.

La micro%co'"a 'or contra%te de fa%e% e% el medio ideal 'ara o%ervar la materiaviviente en %u e%tado natural8 deido a Aue la% onda% lumino%a% Aue 'a%an a trav% deun or!ani%mo tran%'arente8 emer!en en fa%e% diferente% de'endiendo de la%'ro'iedade% de lo% elemento% Aue atravie%an. Un %i%tema ó'tico e%'ecial conviertee%ta diferencia de fa%e en una diferencia de inten%idad a'areciendo una% e%tructura%m7% o%cura% Aue otra%.

La% acteria% %e o%ervan m7% frecuentemente en 're'aracione% coloreada% oteBida% Aue en el e%tado natural8 deido a Aue %e 3ace m7% f7cil a'reciarla% ,e%tudiarla%.

Se 'ueden em'lear tincione% Aue 'on!an de manifie%to la e%tructura de la 'aredcelular de acuerdo a %u com'ortamiento frente a la% coloracione% de Gram , de Hie3l=Neel%en.

1-


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PREPARACIÓN DEL FROTIS:

El froti% o etendido8 e% una ca'a del!ada de material ioló!ico a e%tudiar8 Aue%e etiende en una l7mina 'ortao$eto% 'ara %u e%tudio micro%có'ico8 'udiendootener%e a 'artir de mue%tra de %ecrecione%8 ecrecione%8 le%ione% , de lo% mi%mo%cultivo%.

La confección del froti% com'rende+

1. Toma 'revia de una mue%tra del material a e%tudiar. La o%ervación delmicroor!ani%mo %er7 'o%ile en la medida Aue la mue%tra conten!a no meno% de16/ microor!ani%mo% 'or mL.

4. La l7mina 'ortao$eto a em'lear lim'ia8 %in !ra%a %e 'a%a 'or la l7mina del

mec3ero.#. Colocar una !ota de %olución fi%ioló!ica e%tril en %u centro.&. Se toma el a%a de alamre o 'latino8 %e e%terilia en la llama del mec3ero8 %e de$a

enfriar %in contactarla con o$eto al!uno , %e toma una 'art"cula del material Aue %eva a e%tudiar. E%te material %e di%'er%a en la !ota colocada 'reviamente , %eu%ca otener un etendido del!ado. Si el material a e%tudiar %e encuentra ,a enun medio l"Auido no e% nece%aria la !ota de %olución fi%ioló!ica 'revia , %e colocadirectamente la !ota del material en medio l"Auido.

/. E%teriliar el a%a nuevamente en la llama del mec3ero.Si %e Auiere o%ervar un froti% en fre%co e%te e% el momento8 'revia colocación de

una laminilla cureo$eto. Se vi%ualia directamente con o$etivo de inmer%ión. Si laacteria e% móvil en e%te momento 'odr7 a'reciar%e en movimiento.

El movimiento %e 'uede a o%ervar de manera m7% %ati%factoria en lo% cultivo% $óvene%8 de 1-=4& 3ora% o meno%8 deido a Aue la% acteria% tienden a 3acer%einmóvile% en lo% cultivo% vie$o%.

Si %e 're'ara el froti% con el o$eto de colorearlo entonce%+(. De$ar Aue el froti% %eAue e%'ont7neamente al aire amiental.*.


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fo%fato> e%to% %e cominan con lo% colorante% 7%ico% con car!a 'o%itiva. Lo%colorante% 7cido% no tiBen la clula acteriana , 'ueden %er u%ado% 'ara 'ro'orcionar un color de contra%te.

Lo% colorante% alcalino% m7% frecuentemente em'leado% %on el cri%tal violeta8 la%afranina , el aul de metileno.

Lo% colorante% 7%ico% tiBen la clula uniformemente. Sin emar!o %e 'uedenem'lear tcnica% e%'eciale% 'ara diferenciar fla!elo%8 c7'%ula%8 'arede% celulare%8memrana% celulare%8 !r7nulo%8 n:cleo% , e%'ora%.

Lo% colorante% 7cido% no tiBen la clula acteriana , 'or lo tanto %e em'lean'ara re%altar aAuella% clula% Aue no %e tiBen. Como la acteria e% incolora encontra%te con un fondo coloreado8 e%ta tcnica e% de muc3o valor 'ara o%ervar la

forma de la% clula%. Deido a Aue la% c7'%ula% no %e tiBen con la% tcnica%convencionale%8 e%ta% clula% %e %u%'enden en una %olución de tinta c3ina la cual al no'oder 'enetrarla 'ro'orciona un fondo ne!ro en el Aue la% c7'%ula% %e o%ervan comoun 7rea clara.

PREPARACIÓN DEL FROTIS

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E%Auema tomado de una Gu"a


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E% el ti'o de tinción m7% %encilla. Con%i%te en curir el froti%8 'reviamente fi$ado8con una de la% %i!uiente% coloracione%+ violeta de !enciana8 cri%tal violeta8 %afranina8

aul de metileno8 fuc%ina 7%ica fenicada u otro colorante alcalino. De%'u% de #6=(6%e!undo% %e lava la laminilla a$o el c3orro de a!ua , %e %eca el froti% con %uma'recaución8 e%tando entonce% li%to 'ara %u vi%ualiación micro%có'ica8 em'le7ndo%e elo$etivo de inmer%ión en aceite8 'revia colocación de una !ota de aceite directamente%ore el froti% teBido , de%cendiendo e%te o$etivo 3acia el aceite , la l7mina. COLORACIÓN DE GRAM

En 1--& el dan% C3ri%tian Gram de%arrolló una tinción e%'ecial8 la m7% :til ,com:nmente u%ada en acteriolo!"a. E% una tinción diferencial , 'or lo tanto 'ermitedi%tin!uir a la% acteria% en do% !rande% !ru'o%8 !ram'o%itiva% , !ramne!ativa%8

facilitando muc3o %u identificación.PROCEDIMIENTO PARA LOGRAR UNA TINCIÓN DE GRAM

1. Colorear con violeta de !enciana o cri%tal violeta durante un minuto , lue!o lavar lal7mina con a!ua de%tilada 'referilemente.

4. Curir el froti% con odo de Gram ?,oduro de 'ota%io@ durante un minuto8 , lavar lal7mina de nuevo.

#. Manteniendo %u$eta la l7mina entre el 'ul!ar , el "ndice8 colóAuela de manera deotener un 7n!ulo de &/ con la %u'erficie de traa$o8 de$ando !otear el alco3ol=acetona8 Aue act:a como decolorante8 3a%ta Aue e%ta %olución de lavado de$e de%alir teBida con el colorante aul o morado durante 16=1/ %e!undo%. Lavar denuevo con a!ua.

&. Cura el froti% con %afranina durante un minuto , lave nuevamente.

/. ColoAue el froti% en 'o%ición vertical de manera de e%currir el ece%o de a!ua ,'ermitir Aue %eAue e%'ont7neamente al aire.

(. ColoAue el aceite de inmer%ión , o%erve la l7mina al micro%co'io con o$etivo de1660 , ocular de 1608 lo Aue 'ermitir7 un aumento de 16660.

De no llevar%e a efecto el 'rocedimiento de la manera indicada 'udieran otener%ereaccione% !ram'o%itiva% o !ramne!ativa% fal%a%.

Re%ulta cr"tico en 'articular el tiem'o de decoloración ,a Aue un tiem'o ma,or llevaa re%ultado% erróneo%.

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COLORACIÓN DE GRAM

4#


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FUNDAMENTOS DE LA COLORACIÓN DE GRAM

La diferencia fundamental entre una acteria !ram'o%itiva , una acteria!ramne!ativa radica fundamentalmente en la 'ared8 re%'on%ale de la formaacteriana.

Lo% !ram'o%itivo% 'o%een m7% del (6 de %u 'ared com'ue%ta 'or mureina , elre%to e%t7 re're%entado 'or 7cido% teicoico% 'rinci'almente. E%ta armaón mure"nicaim'ide Aue el decolorante de%tru,a la 'ared , 'or lo tanto di%uelva la unión %alinalo!rada 'or el cri%tal violeta , el ,odo con lo% com'onente% 7cido% ?rio%oma , 7cidode%oirrionucleico del filamento cromo%ómico@. En la% acteria% !ramne!ativa%8 la

mure"na re're%enta meno% del 16 de lo% com'onente% de la 'ared8 'ero %ta e% ricaen com'onente% !ra%o%8 e%'ecialmente li'o'rote"na% , li'o'oli%ac7rido%8 com'onente%fundamentale% de la memrana eterna Aue conforma el e%'acio 'eri'la%m7tico de la'ared.

La e%ca%a mure"na , la aundancia de l"'ido% 'ermiten una acción di%olvente'odero%a del alco3ol8 %olo o a%ociado a la acetona. La di%olución de la 'ared 'ermiteAue el alco3ol lle!ue a la intimidad del cito'la%ma acteriano8 arra%trando el colorante

4&

ESUEM; DE L;


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violeta Auedando la acteria decolorada. El colorante %afranina em'leado'o%teriormente en la :ltima eta'a de la tinción teBir7 de ro$o o ro%ado a la acteria'reviamente de%teBida.

;l!una% acteria% no %e colorean con Gram , 'or lo tanto no %e cla%ifican comoGram 'o%itiva% o Gram ne!ativa%8 deido a Aue tienen envoltura% di%tinta% a la% ,aconocida%. E$em'lo de e%te ti'o de acteria% lo con%titu,en la% micoacteria%8 Auedeido a %u alto contenido de l"'ido%8 Aue inclu,en cera% , 7cido% !ra%o% en %u 'ared8ella% %e colorean con colorante% e%'eciale% a a%e de fuc%ina 7%ica en la coloraciónde Hie3l=Neel%en. La% e%'iroAueta%8 or!ani%mo% de forma e%'irilar8 tam'oco %ecolorean con la tcnica de Gram8 utili7ndo%e entonce% colorante% a a%e de 'lata.

UTILIDAD DE LA COLORACION DE GRAM

Con%titu,e uno de lo% recur%o% dia!nó%tico% m7% im'ortante% en medicina. E%ta

tcnica e% con%iderada como la m7% %encilla8 confiale8 %en%ile8 e%'ec"fica , meno%co%to%a 'ara el dia!nó%tico de la% enfermedade% infeccio%a%. Entre %u% venta$a% m7%re%altante% tenemo%+

1. RE


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mtodo de Gram8 'ermite 're%umir la ei%tencia de acteria% en orina.


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5;CTERI;N;S EN DOS GRU


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9. ORIENT;CION SO5RE L; NECESID;D DE TECNIC;S MICRO5IOLOGIC;SES


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'rocedimiento Aue elimina la tinción de 'r7cticamente todo% lo% or!ani%mo% del froti%.La mue%tra %e tiBe con aul de metileno 'ara contra%te8 'udiendo entonce% a'reciar%ea lo% or!ani%mo% 7cido alco3ol re%i%tente% 're%entando una coloración ro$a mientra%

Aue toda% la% otra% clula% no 7cido alco3ol re%i%tente% %e 're%entan coloreada% deaul 'or el aul de metileno.

U%ando e%ta tinción en un froti% de e%'uto8 %e 'uede diferenciar la 're%encia deMycobacterium tuberculosis u otra% e%'ecie% de Mycobacterium de otro% or!ani%mo%'re%ente% normalmente en la oca , v"a% re%'iratoria%.

PROCEDIMIENTO:

1. Una ve 're'arado el froti% e%te %e de$a %ecar a tem'eratura amiente 'ara lue!ofi$arlo al calor.

4. Se cure el froti% durante / minuto% con fuc%ina 7%ica fenicada.#. Se calienta la 're'aración 3a%ta Aue %e 'roduca emi%ión de va'ore%.&. Se decolora con alco3ol 7cido 3a%ta Aue %te adAuiera una coloración ro%ada./. Se lava con aundante a!ua(. El contra%te %e e%talece al curir a3ora la 're'aración con aul de metileno

durante #6 %e!undo%.*. Se lava nuevamente , %e de$a %ecar.

COLORACIÓN DE ZIE(L NEELSEN

49


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E%Auema tomado de unaGu"a


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Generalmente en 4& 3ora%8 m7% o meno%8 el medio cultivo %e encuentra cuierto 'or !ru'o% o colonia% vi%ile% a %im'le vi%ta8 cada colonia com'ue%ta 'or millone% deor!ani%mo% Aue %e ori!inaron de una mi%ma clula.

E%te 'rocedimiento no% 'ermite a'reciar el a%'ecto de la% colonia% a trav% de%u forma8 elevación8 orde%8 tamaBo8 %u'erficie8 e%tructura8 con%i%tencia8 color ,tran%'arencia. Tamin la% 'ro'iedade% metaólica% , la actividad ioAu"mica , dere%i%tencia a a!ente% f"%ico%8 Au"mico% , ioló!ico%.

Se 3an de%arrollado varia% fórmula% de medio% de cultivo Aue favorecen elcrecimiento de e%'ecie% 'articulare%. La tem'eratura8 el '2 , la atmó%fera afectan elcrecimiento de e%to% %ere% vivo%.

En la 'r7ctica mdica cuando %e toma un material ioló!ico a 'artir de

%ecrecione%8 ecrecione% o directamente de una le%ión8 lo% microor!ani%mo% no %e're%entan %olo%8 a:n cuando %ean lo% :nico% cau%ante% del 'roce%o8 %ino Aue vienenacom'aBado% de otro% microor!ani%mo%8 con%iderado% como flora normal8 o a!ente%inva%ore% %ecundario%8 lo cual dificulta la tarea dia!nó%tica.


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5;CILOS+

GR;M


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*. Realice una li%ta Aue inclu,a / e$em'lo% de acteria% !ram'o%itiva%.

-. Realice una li%ta Aue inclu,a / e$em'lo% de acteria% !ramne!ativa%

9. E%cria do% cau%a% de fal%o% !ram'o%itivo% , do% de fal%o% !ramne!ativo%.

16.E%cria do% e$em'lo% de acteria% con morfolo!"a de Kcoco%

11. E%cria do% e$em'lo% de acteria% con morfolo!"a de Kacilo%

14.E%cria lo% com'onente% de la ater"a de l"Auido% reAuerido% 'ara la coloración deGram.

1#.E%cria lo% com'onente% de la ater"a de l"Auido% reAuerido% 'ara la coloración de

Hie3l Neel%en.1&.2a!a un diu$o e%Auem7tico Aue e'liAue la anatom"a de la 'ared de una acteria

!ramne!ativa.

1/.2a!a un diu$o e%Auem7tico Aue e'liAue la anatom"a de la 'ared de una acteria!ram'o%itiva.

1(.2a!a una li%ta con / %ituacione% cl"nica% donde la coloración de Gram re%ulte :til.

1*.2a!a una li%ta de do% enfermedade% Aue 'udieran dia!no%ticar%e con la coloraciónde Hie3l Neel%en.

PRÁCTICA

OBTENCIÓN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS PARA ELDIAGNÓSTICO MICROBIOLOGICO

OB*ETIVO PRINCIPAL:

;l finaliar e%ta 'r7ctica el e%tudiante e%tar7 en ca'acidad de conocer , a'licar lo% diferente% 'a%o% 'ara la otención de mue%tra% ioló!ica% de%tinada% al dia!nó%ticomicroioló!ico de la% enfermedade% infeccio%a% 'roducida% 'or acteria%8 viru%8 3on!o%, 'ar7%ito%8 con nfa%i% en la 're'aración del 'aciente 'ara la toma de la mue%tra8identificación , 'rocura del tran%'orte de la mi%ma8 %e!uimiento de lo% re%ultado% einformación , an7li%i% de %to% en con$unto con el mdico tratante.

OB*ETIVOS ESPECÍFICOS:

##


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;l finaliar la 'r7ctica8 el e%tudiante e%tar7 en ca'acidad de+

1. Demo%trar la ca'acidad de informar al 'aciente la nece%idad de otener lamue%tra.

4. De%criir la 're'aración del 'aciente 'ara la otención de una mue%trae%'ec"fica.

#. Enumerar el eAui'o nece%ario 'ara la otención de una mue%tra e%'ec"fica.

&. Demo%trar ca'acidad 'ara la otención de la% mue%tra% no inva%iva%.

/. Demo%trar ca'acidad 'ara a%i%tir o coo'erar con el o'erador en la otención de

mue%tra% Aue reAuieran de 'rocedimiento% inva%ivo%.(. De%criir lo% dato% de identificación Aue deen acom'aBar a la mue%tra.

-. Enumerar la% diferente% 'recaucione% de con%ervación8 tran%'orte , mane$o dela% mue%tra% ioló!ica%.

9. Demo%trar la nece%idad del %e!uimiento de la mue%tra 3a%ta otener lo%re%ultado%.

16. Informar de lo% re%ultado% , 'roceder a %u an7li%i% en con$unto con el mdicotratante.

CONTENIDOS:

- Dato% reAuerido% en la %olicitud de la otención de la mue%tra- Generalidade% %ore la otención de mue%tra% ioló!ica%-


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ACTIVIDADES:

Pro)e$#5#e"tos 4ara %a o-te")#9" $e:- mue%tra 'ara 3emocultivo- mue%tra de %ecrecione%- mue%tra de LCR- mue%tra de 'iel8 'elo , uBa%- mue%tra de un a%ce%o en la %u'erficie cor'oral- mue%tra de 3ece%- mue%tra de e%'uto

EVALUACIÓN:Pr1)t#)a No


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El dia!nó%tico microioló!ico e%t7 a%ado en lo% 3alla!o% otenido% 'or eamenmicro%có'ico , cultivo. Se 3ar7 %iem're lo m7% 'recomente 'o%ile ,a Aue un retra%o'uede %er 'er$udicial 'ara el 'ro'io enfermo8 a%" como 'ara la comunidad8 'ue% el

enfermo 'uede %er una fuente de conta!io 'ara lo% Aue le rodean.Una mue%tra otenida en forma adecuada e% el 'a%o m7% im'ortante en el

dia!nó%tico de una infección8 deido a Aue lo% re%ultado% de la% 'ruea% de dia!nó%ticode enfermedade% infeccio%a% de'enden de la %elección8 el tiem'o , el mtodo deotención de mue%tra%. El fraca%o en el ai%lamiento del a!ente cau%al muc3a% vece%no %e dee a tcnica% inadecuada%> a menudo %e dee a una mala toma de mue%tra8 adeficiencia% en %u con%ervación o en el tran%'orte8 e% 'or e%to Aue e% nece%ariocom'render lo% reAui%ito% , la% con%ecuencia% no %e!uir adecuadamente lo%'rocedimiento%.

Dee e%talecer%e una uena comunicación con el laoratorio , %u 'er%onal demanera de conocer la% ei!encia% del laoratorio en cuanto a la toma8 env"o8materiale% e in%truccione% adecuado% , 'oder coordinar lo% di%tinto% evento%8 inclu%oconocer el 3orario de rece'ción de mue%tra%8 de ei%tir al!uno en 'articular.

E% e%encial la e%trec3a colaoración entre el mdico8 el 'rofe%ional de enfermer"a ,el laoratorio.

En el cam'o de la% enfermedade% infeccio%a% lo% re%ultado% de la% 'ruea% delaoratorio de'enden en !ran 'arte de la calidad de la mue%tra8 el tiem'o , el cuidadocon el Aue fue recolectada , la 3ailidad tcnica , e'eriencia del 'er%onal delaoratorio. ;l %olicitar la% 'ruea% el mdico tratante informar7 al 'er%onal dellaoratorio acerca de la condición cl"nica , el dia!nó%tico 're%untivo ?ti'o infección oa!ente 'atoló!ico del Aue %e %o%'ec3e@.

Muc3o% microor!ani%mo% 'ató!eno% 'roliferan lentamente , 'ueden tran%currir d"a% , a:n %emana% ante% de Aue %ean ai%lado% e identificado% , el tratamiento no'uede diferir%e. De%'u% de otener la% mue%tra% a'ro'iada% , de informar allaoratorio del dia!nó%tico cl"nico %o%'ec3ado8 el mdico dee iniciar el tratamientoadecuado con medicamento% diri!ido% contra el microor!ani%mo con%iderado como'o%ile cau%ante del 'adecimiento. ; medida Aue el 'er%onal del laoratorio comienaa otener información de car7cter cl"nico 'uede informar al mdico8 Aue entonce%revalorar7 el dia!nó%tico , la evolución cl"nica del 'aciente 'ara8 de %er nece%ario83acer camio% o a$u%te% en el tratamiento.

SOLICITUD DE L; TOM; DE L; MUESTR;

La %olicitud de la mue%tra ioló!ica Aue 3a, Aue inve%ti!ar 'o%ee !ranim'ortancia. Dee e%'ecificar el nomre8 a'ellido% , edad del 'aciente8 el mdico

#(


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%olicitante , el centro8 %ervicio8 %ala o con%ulta al Aue 'ertenece. Do% fec3a% %on de!ran utilidad+ la del comieno de la enfermedad , la de otención de la mue%tra.

En %e!undo trmino %e e%'ecificar7 la naturalea de la mue%tra Aue 3a, Aueanaliar ?eudado8 e%'uto8 froti%8 otro%@ , el lu!ar eacto de la toma8 en el ca%o de 'or e$em'lo8 le%ione% de 'iel8 u otra% , %i aAuella %e 3a realiado 'or al!una tcnicae%'ecial ?e%'uto etra"do 'or a%'iración ronAuial8 'unción de a%ce%o@.

Do% dato% Aue %e olvidan frecuentemente 'ero Aue no deen faltar %on 1@ eldia!nó%tico cl"nico de 're%unción8 el cual va a orientar %ore la% tcnica% a %e!uir ,cultivo% a realiar8 , 4@ la 'reci%ión de %i el 'aciente e%t7 %iendo tratado con antiiótico%8cuale% %on %to% , cuanto tiem'o 3ace de la :ltima admini%tración.

Lo% dato% microioló!ico% deen correlacionar%e con la información cl"nica 'ara

lle!ar a una inter'retación %i!nificativa de lo% re%ultado%.La recu'eración de acteria% , 3on!o% e% m7% %i!nificativa %i el a!ente e%

ai%lado de un %itio normalmente de%'rovi%to de microor!ani%mo% ?un 7rea normalmentee%tril@. De manera Aue cualAuier ti'o de microor!ani%mo ai%lado a 'artir de %an!re8l"Auido cefalorraAu"deo ?LCR@8 l"Auido %inovial o cavidad 'leural e% un 3alla!o con !ranvalor dia!nó%tico. Muc3a% re!ione% del cuer'o tienen una flora microiana normal Aue'uede %er alterada 'or influencia% endó!ena% o eó!ena%. La otención demicroor!ani%mo% 'otencialmente 'ató!eno% de la% v"a% re%'iratoria8 !a%trointe%tinal o!enitourinaria8 de 3erida% o de la 'iel dee con%iderar%e en el conteto de la floranormal de cada %itio 'articular.

Ei%ten re!la% !enerale% Aue %e a'lican a toda% la% mue%tra%+

1@ La cantidad dee %er adecuada8 %uficiente 'ara a%e!urar un eamen com'leto ,adecuado.

4@ La mue%tra dee otener%e del %itio donde %ea m7% 'roale Aue %e 're%ente elmicroor!ani%mo en determinada eta'a de la enfermedad8 de manera Aue e%ta %eare're%entativa ?'or e$em'lo+ e%'uto , no %aliva@.

#@ 2a, Aue evitar Aue %e contamine la mue%tra u%ando %olo eAui'o e%tril ,'recaucione% de a%e'%ia.

&@ Deen conocer%e , em'lear%e tcnica% adecuada% 'ara %u recolección

/@ E% nece%ario a%e!urar la adecuada otención de mue%tra% 'ara dia!no%ticar infeccione% acteriana% , f:n!ica%8 ante% de admini%trar a!ente% antimicroiano%.Si la mue%tra 'ara el cultivo 3a %ido reco!ida de%'u% de la iniciación de la tera'iaantiacteriana8 el laoratorio dee %er informado 'ara Aue 'ueda tomar la% medida%corre%'ondiente%.

#*


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(@ Dee enviar%e la mue%tra al laoratorio , eaminar%e con 'rontitud. En al!uno%ca%o% 'uede %er :til el em'leo de un medio e%'ecial de tran%'orte.

O5TENCIYN DE L; MUESTR;

El ti'o de mue%tra% Aue %e va,a a tomar %e determina 'or el cuadro cl"nico> %i lo%%i!no% , %"ntoma% %on %u!e%tivo% de la alteración de un %i%tema or!7nico8 la% mue%tra%%e otienen de e%a fuente. En au%encia de %i!no% o %"ntoma% localiado%8 'rimero %etoman mue%tra% re'etida% de %an!re 'ara cultivo ?3emocultivo@ , entonce% %econ%idera en %ecuencia otro% %itio%8 de'endiendo en 'arte de la 'roailidad deafectación de un %i%tema or!7nico dado en un 'aciente en 'articular8 , en 'arte8 de lafacilidad 'ara otener la% mue%tra%.

El material cl"nico Aue 'roalemente contiene una flora microiana aundante8en la ma,or"a de lo% ca%o%8 'uede mantener%e en el refri!erador durante varia% 3ora%ante% de %u cultivo %i no 'uede %er 'roce%ado inmediatamente. La refri!eración no%olo con%ervar7 la viailidad de la ma,or"a de lo% 'ató!eno% %ino Aue reducir7 alm"nimo el crecimiento de microor!ani%mo% comen%ale%8 Aue %i e%t7n 're%ente% enn:mero ece%ivo com'licar7n el crecimiento del a!ente Aue realmente no% intere%a ,Aue en e%te ca%o e% m7% im'ortante. Cuanto m7% r7'ido %e tran%fiera un a!ente Aueacaa de aandonar el amiente 'rotector de %u 3u%'ed a un medio de cultivoa'ro'iado8 ma,ore% %er7n la% 'roailidade% de %u %u'ervivencia , 'o%terior multi'licación. No refri!erar la mue%tra% de LCR deido a Aue la% acteria%'roductora% de menin!iti% %on mu, %en%ile% a la% tem'eratura% fr"a% , 'odr"adificultar%e %u recu'eración.

O5TENCIYN DE MUESTR;S ES


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infeccione% 3i'era!uda% ?%e'ticemia 'or !ramne!ativo% con c3oAue8 o %e'ticemia 'or e%tafilococo%@ e% a'ro'iado cultivar do% mue%tra% de %an!re otenida de %itio%anatómico% di%tinto% en un 'er"odo de die minuto%. En otra% infeccione% actermica%

?endocarditi%@ deer7n otener%e tre% mue%tra% durante un la'%o Aue va de%de al!una%3ora% 3a%ta 4& 3ora%. Un total de tre% ?#@ 3emocultivo% de%curen la acteriainfectante en m7% del 9/ de lo% 'aciente% actermico%.

En 'er%ona% %ana%8 la% mue%tra% de %an!re otenida% en forma a'ro'iada %one%trile%. La contaminación de lo% 3emocultivo% con flora cut7nea normal %e dee!eneralmente a errore% durante la recolección.

M;TERI;LES


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14@ Inocule la %an!re en fra%co e%tril con medio de tran%'orte o el adecuado 'ara3emocultivo tanto 'ara aeroio% como anaeroio%.

1#@ IdentifiAue adecuadamente la mue%tra

1&@ Env"e con ra'ide la mue%tra al laoratorio o colóAuela en incuadora a #*C 3a%tatanto 'ueda %er enviada al laoratorio.1/@ De%carte lo% materiale% utiliado% en reci'iente% %e!uro%

LIUIDO CEJ;LORR;UZDEO ?LCR@La menin!iti% tiene uno de lo% 'rimero% lu!are% en la% ur!encia% mdica%8 , e%

e%encial un dia!nó%tico o'ortuno8 r7'ido , 'reci%o. E%te de'ende de tener %iem're enmente la 'o%iilidad de %u 're%encia8 a%e!urar la otención adecuada de uena%mue%tra% , eaminarla% con 'rontitud. Deido a Aue el rie%!o de muerte o de daBocereral irrever%ile e% !rande8 a no %er Aue %e inicie el tratamiento de inmediato.

El o$etivo m7% ur!ente en el dia!nó%tico e% la diferenciación entre la menin!iti%acteriana 'urulenta a!uda8 la menin!iti% a%'tica ?viral@ , la menin!iti% tuerculo%a.La deci%ión inmediata %e a%a en la cuenta de clula%8 el contenido de !luco%a ,'rote"na% del LCR ?%imult7neamente con la determinación de !luco%a en %an!re o!licemia@ , lo% re%ultado% de la :%Aueda de microor!ani%mo% a la micro%co'"a.

EUI


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3ora% de%'u% de otenida8 deen enviar%e 1=4!r de 3ece% en enva%e% a'ro'iado%. Si3uiera demora de m7% de 4 3ora% en %emrar la mue%tra8 %ta dee enviar%e allaoratorio en medio% de tran%'orte8 l"Auido o %emi=%ólido. En amo% ca%o% deer7

tomar%e de la materia fecal emitida cierto% elemento% de a'ariencia 'atoló!ica ?moco8'u%8 %an!re8 u otro%@. En el ca%o de Aue %e realice 3i%o'ado rectal 'ara la otención dela mue%tra8 el 3i%o'o %e introduce 48/=/cm% a trav% del ano8 %e le 3ace !irar , %e retiracuidado%amente. Tamin %e env"a en medio de tran%'orte a'ro'iado.

Cuando %e %o%'ec3e diarrea de ti'o inva%iva %e 3ar7 determinación de 'iocito% ,leucocito% al cam'o micro%có'ico 'ara a%" confirmar e%ta 're%unción. Deen utiliar%etcnica% e%'eciale% 'ara u%car 'rotooario%8 'ar7%ito% , 3elminto% , %u% 3uevo%.


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En !eneral el material 'ara cultivo de anaeroio% %e otiene me$or con la a,udade una $erin!a , a!u$a 'ue% dee 'rovenir de un e%'acio cerrado. Dee 'ara e%to

e'ul%ar%e todo el aire de la $erin!a , a!u$a. Dee tener%e e%'ecial cuidado 'ara evitar la inclu%ión de la flora normal mu, numero%a. La m"nima contaminación de la mue%tra'uede llevar a re%ultado% erróneo%. lo% m7% comune%%on e%tafilococo%8 e%tre'tococo% o acilo% entrico% !ramne!ativo%. Deido a Aue enlo% a%ce%o% adominale% , lo% conti!uo% a la% %u'erficie% muco%a%8 a%" como en la%3erida% aierta%8 com:nmente %e encuentran una multitud de microor!ani%mo%8 e%dif"cil decidir cuale% %on %i!nificativo% en e%ta% %ituacione%. Cuando la% le%ione%'urulenta% 'rofunda% drenan 3acia la% %u'erficie% eteriore% a trav% de un %eno of"%tula8 la flora de e%ta% :ltima% no dee confundir%e con la de la le%ión 'rofunda.

En la ma,or"a de lo% ca%o% %e ai%lar7 el a!ente cau%al %i la mue%tra e% tomada ,tran%'ortada adecuadamente al laoratorio. El eamen acterioló!ico de 'u% dele%ione% cerrada% o 'rofunda% dee incluir el cultivo 'ara anaeroio%.


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La% mue%tra% de 3erida% aierta% del 'iel o :lcera% %uelen contaminar%e conacteria% de 'iel o muco%a% ,8 en !eneral8 el u%o del 3i%o'o 'ara recolectar material de

e%ta% ona%8 e% de ilimitado valor acterioló!ico. Sin emar!o8 de %er nece%ario %u u%o83ar7 de de%infectar%e la 'arte eterna con %olución ,odada , otener la mue%tra de la'arte activa de la re!ión 'rofunda de la 3erida 'revio lavado con %olución fi%ioló!ica.

OIDOS OOS


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-


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;dem7% de %u lailidad al calor , a la acide8 muc3o% viru% no toleran elde%ecamiento. E% 'or e%to Aue lo% 3i%o'ado% de %u'erficie% muco%a%8 ra%'ado% de'iel , te$ido% %e coloca en un medio de tran%'orte Aue 'ro'orcione% e%tailidad.

Dado Aue lo% a!ente% virale% no %on afectado% 'or lo% a!ente% antimicroiano%u%uale%8 'ueden otener%e cultivo% a:n cuando ,a %e 3a,a iniciado tratamiento 'ara'otenciale% 'ató!eno% acteriano%.

La% mue%tra% Aue %e env"an con el 'ro'ó%ito de ai%lar el viru%8 llevar a cao'ruea% %eroló!ica% , realiar e7mene% 3i%toló!ico% %on+ San!re8 %uero8 orina8 3ece%8l"Auido ve%icular8 %ecreción ocular8 l"Auido% de lavado de nari , !ar!anta8 e%'uto8LCR8 'iea% de io'%ia %in fi$ar , troo% de te$ido u ór!ano% otenido% en la necro'%ia.

Deen remitir%e al laoratorio a la revedad 'o%ile , en fra%co%8 tuo% o cualAuier

enva%e adecuado8 colocado% en termo% o ca$a% de metal o cartón convenientementeacondicionado%8 a fin de 'oner 3ielo %eco o com:n8 con el 'ro'ó%ito de !arantiar laviailidad del a!ente o la con%ervación del 'oder de lo% anticuer'o%.

Cuando 'or cualAuier raón %e im'o%iilite el 'ronto tra%lado del material8 e%te deecon%ervar%e en refri!eración o con!elación. No %e aBadir7 %u%tancia anti%'tica ofi$adora al!una. En el ca%o de %uero%8 e%to% deen %e'arar%e del co7!ulo.

TR;NS


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're%ión de lo% dedo% lo Aue 'ermitir7 Aue el medio de cultivo entre en contacto con el3i%o'o. E%te medio de tran%'orte 'ro'orcionar7 %uficiente 3umedad durante 3a%ta *43ora% a tem'eratura amiente. La finalidad de e%te ti'o de unidade% con%i%te en

rindar un medio de tran%'orte Aue 'rolon!ue la viailidad de lo% microor!ani%mo%cuando ei%ta la 'o%iilidad de una demora entre la recolección de la mue%tra , %u'o%terior cultivo. E%to% medio% mantienen un '2 favorale 'reviniendo a la ve lade%3idratación de la% %ecrecione% , autode%trucción enim7tica durante el tran%'orte.

EN)IO DE MUESTR;S ;L L;5OR;TORIO

En oca%ione% e% nece%ario enviar mue%tra% a un laoratorio de referencia.


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4. Mencione cuatro ti'o% de mue%tra% ioló!ica% de la% e%tudiada% con ma,orfrecuencia

#.


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El a'arato o %i%tema urinario com'rende do% riBone%8 cada uno de lo% cuale%tiene un urter Aue conduce orina a la ve$i!a :nica. La orina %e vac"a de%de la ve$i!a atrav% de la uretra. Con la ece'ción de la 'orción eterna ?di%tal@ de la uretra8 todo el

%i%tema urinario e% e%tril. ?Revi%ar la anatom"a , la fi%iolo!"a del Si%tema Urinario enlo% teto% de Morfofi%iolo!"a@.

; 'e%ar de Aue la orina ve%ical en condicione% normale% no contienemicroor!ani%mo%8 lo% 'rimero% 46 cc de orina emitido% 'or 'er%ona% normale% decualAuier edad o %eo8 %iem're 're%entan acteria%. %ta% 'roceden de la flora normalde la uretra anterior8 're'ucio8 re!ión vulvova!inal o de contaminación fecal.

Microioló!icamente ei%te infección de la% v"a% urinaria% cuando en la orina8uretra8 ve$i!a8 riBón o 'ró%tata %e detectan microor!ani%mo% 'ató!eno%.

La% infeccione% del tracto urinario e%t7n confinada% a la uretra ?uretriti%@ ve$i!a?ci%titi%@8 riBone% ?'ielonefriti%@ , 'ró%tata ?'ro%tatiti%@. Uretriti% , ci%titi% %e corre%'ondencon ITU a$a , 'ielonefriti% , 'ro%tatiti% con ITU alta.

ETIOLOGIA

Muc3o% microor!ani%mo% %on ca'ace% de cau%ar infección urinaria8 , entre ello%%e de%tacan la% enteroacteria%8 're%ente% en el tracto !a%trointe%tinal8 de la% cuale%Escherichia coli e% el a!ente etioló!ico m7% frecuente8 cau%ando alrededor del -6 dela% infeccione% urinaria% no com'licada%. Otra% enteroacteria% como !lebsiella %''."#roteus mirabilis , Enterobacter %''8 tamin cau%an infeccione% urinaria%8 'ero enmenor 'ro'orción. #roteus , !lebsiella8 'redi%'onen a la formación de c7lculo% , %onlo% a!ente% Aue m7% a menudo %e ai%lan en 'aciente% con litia%i%. En mu$ere% $óvene%con infeccione% a$a% Staphylococcus saprophyticus e% un a!ente etioló!ico frecuente?16=1/@.

En infeccione% com'licada% del tracto urinario o en infeccione% adAuirida% en elamiente 3o%'italario donde la in%trumentación e% m7% frecuente8 aunAue E. coli e% el'ató!eno m7% frecuentemente ai%lado8 otra% acteria% como !lebsiella" #roteus8Enterobacter 8 Enterococos8 #seudomonas8 #rovidencia8 Serratia , Morganella %e a"%lancon frecuencia. Candida , otra% e%'ecie% de 3on!o% colonian con frecuencia la orinade enfermo% cateteriado% o diatico%.

Otro% microor!ani%mo% Aue %on a!ente% etioló!ico% oca%ionale% %onSalmonella" $cinetobacter 8 Micoplasmas8 Chlamydia" %reoplasma urealyticum8e%tafilococo% coa!ula%a ne!ativo8 lo% adenoviru%8 Mycobacterium %' p.

En al!uno% 'aciente% con infeccione% urinaria% com'licada%8 con %onda%ve%icale% 'or lar!o tiem'o o con c7lculo%8 la etiolo!"a 'uede %er 'olimicroiana.

&-


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PATOGENIA

La% infeccione% urinaria% como toda% la% infeccione% %e in%crien en el marco de

la relación din7mica entre el 3o%'edero 3umano , un microor!ani%mo determinado8 demanea Aue %e con%idera tienen un ori!en multifactorial en el Aue intervienen tantofactore% del 3o%'edero 3umano como factore% del microor!ani%mo.

De%de el 'unto de vi%ta del 3o%'edero 3umano tenemo% Aue ei%ten diver%o%mecani%mo% de defen%a ine%'ec"fico% Aue mantienen 'r7cticamente lire de acteria%el tracto urinario.

En circun%tancia% normale% la% acteria% Aue a%ientan en la ve$i!a %oneliminada% r7'idamente. E%to %e dee en 'arte al flu$o urinario , a la% 'ro'iedade%antiacteriana% directa% de la 'ro'ia orina , de la muco%a de la ve$i!a. La orina e$erce

acción de lavado Aue al fluir continuamente im'ide el e%talecimiento de acteria%.Tamin %on im'ortante% factore% como el '28 la a$a ten%ión de O 48 au%encia de!luco%a8 la o%molaridad , la concentración de urea urinaria Aue in3ien el crecimientode !ran 'arte de la% acteria%8 la 're%encia de uromucoide Aue atra'a la% acteria% ,la% %ecrecione% 'ro%t7tica% Aue tienen un efecto antiacteriano. Lo%'olimorfonucleare% neutrófilo% de la 'ared de la ve$i!a tamin 'arecen de%em'eBar un'a'el en la de'uración de la acteriuria. Otra% defen%a% naturale% %on lo% mecani%mo%antiad3erencia de la% acteria%.

Circun%tancia% en el 3o%'edero como interru'ción del flu$o urinario8 're%encia dereflu$o ve%icoureteral8 c7lculo%8 o%truccione% mec7nica% o vol:mene% re%iduale% deorina8 alteran lo% factore% de defen%a mencionado% anteriormente , 3acen m7% factilela coloniación e infección del tracto urinario 'or microor!ani%mo%.

La ruta a%cendente e% ace'tada como la m7% com:n en la 'ato!ne%i% deinfeccione% de la% v"a% urinaria%. Se inicia a 'artir de una fuente rectal de acteria%'ató!ena% Aue mi!ran 'or el 'erin cau%ando coloniación 'eriuretral. Una vee%talecido% en la uretra8 lo% microor!ani%mo% !anan acce%o a la ve$i!a donde %ere'roducen ori!inando acteriuria ,o invaden el te$ido ori!inando ci%titi%8 o iena%cienden 'or lo% urtere% 3acia el riBón cau%ando 'ielonefriti%. La% infeccione% de lauretra , ve$i!a %e con%ideran %u'erficiale% ?o muco%a%@8 mientra% Aue la 'ro%tatiti% ,'ielonefriti% indican inva%ión ti%ular.


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;. La v"a 3emató!ena ?e%tafilococo% o Candida entre otro%@ en enfermo% deilitado%como recin nacido% , al!uno% adulto%8 ien %ea 'or enfermedade% crónica% o 'or 3aer %ido tratado% con inmuno%u're%ore%. La 'ielonefriti% 'or e%tafilococo% 'uede %er

con%ecuencia de una acteriemia ori!inada 'or foco% infeccio%o% di%tante%8 alo$ado% en3ue%o8 'iel8 endotelio u otro% %itio%.

5. Inoculación directa en te$ido% ad,acente% durante ciru!"a renal.

C. Di%eminación linf7tica 'roducida en el 7rea en torno a la ve$i!a 3a%ta lle!ar al riBón'ero %on muc3o meno% comune%8 'rinci'almente la% :ltima%.

De%de el 'unto de vi%ta del microor!ani%mo , e%'ec"ficamente en relación con lavirulencia microiana8 o %ea la ca'acidad de 'roducir infeccione% , enfermedad8 ei%tenfactore% e%'eciale% Aue 3acen Aue una acteria 'articular ten!a m7% 3ailidad Aue

otra% 'ara cau%ar infeccione% en el tracto urinario.Escherichia coli e% re%'on%ale del -6 de la% infeccione% a!uda% en enfermo%

%in %onda%8 c7lculo% o anomal"a% uroló!ica%. La elevada frecuencia de Escherichia coli como a!ente re%'on%ale de infeccione% urinaria% %e e'lica 'or %u% caracter"%tica%e%'eciale% Aue lo 3acen un uen 'ató!eno urinario. No todo% lo% E. coli tienen lami%ma ca'acidad de infectar la% v"a% urinaria% "nte!ra%. ;%" tenemo% Aue a muc3o% delo% microor!ani%mo% ai%lado% %e le% demue%tra la 're%encia de c7'%ula con 'oder antifa!oc"tico , de re%i%tencia a lo% camio% inflamatorio%. Se 3a e%talecido adem7%relación entre la e%tructura del li'o'oli%ac7rido ?O@ de la E. coli , %u ca'acidad de'roducir infeccione% urinaria%.

La ad3erencia de la% acteria% a la% clula% uroe'iteliale% e% una 'rimera eta'adeci%iva 'ara el inicio de la infección.

La% e%tructura% de la E. coli m7% e%tudiada% en relación con la 'ato!ne%i% dela% infeccione% urinaria% %on la% fimria%8 a'ndice% %u'erficiale%8 e%tructura%filamento%a% 're%ente% en la %u'erficie eterna de la acteria8 la% cuale% tienen'ro'iedade% ad3erente% al reconocer rece'tore% e%'ec"fico% en la% clula% del tractourinario8 evitando de e%ta manera la acción del lavado Aue e$erce el flu$o urinario.

Se 'ien%a Aue la ad3erencia acteriana e%t7 a%ociada a %u ve con lainflamación de la% v"a% urinaria%. E%ta %ituación 'ermite Aue lo% li'o'oli%ac7rido%?ant"!eno O@ de la 'ared acteriana e%tn m7% cerca de la% clula% uroe'iteliale% , Aueel contacto entre ella% %ea 'rolon!ado.

La c7'%ula induce re%i%tencia a lo% camio% inflamatorio% e%enciale% 'aracomatir e%ta% infeccione%.

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FACTORES PREDISPONENTES PARA EL DESARROLLO DE INFECCIONESURINARIAS

En cuanto al %eo tenemo% Aue la lon!itud de la uretra femenina ?a'ena% 48/cm@ 'arece %er un factor im'ortante en la marcada 'redi%'o%ición a %ufrir infeccione%urinaria%8 adem7% de la 'roimidad de la uretra al ano , la coloniación de la va!ina 'or miemro% de la flora fecal. En la% mu$ere% 3a, una 'articular tendencia a lacoloniación durante cierta% 'oca% del ciclo men%trual.

En mu$ere% con infeccione% recurrente%8 el 7rea 'eriuretral %e encuentrafrecuentemente coloniada 'or acteria% !ramne!ativa%8 'rinci'almente E. coli . En3omre% adulto% 'or el contrario %e con%idera Aue el ori!en de infeccione% recurrente%e% la 're%encia de microor!ani%mo% en la 'ró%tata a:n cuando la% %ecrecione%'ro%t7tica% %on actericida%.

En lo% varone%8 la 'ro%tatiti% o la o%trucción uretral 'or 3i'ertrofia 'ro%t7tica %onfactore% 'redi%'onente% im'ortante% de acteriuria. La falta de circunci%ión e% unfactor de rie%!o en neonato% , adulto% $óvene%.

La% relacione% %euale% , la mani'ulación uretral facilitan el a%cen%o de lo%microor!ani%mo% 3acia la ve$i!a. El u%o de diafra!ma% , e%'ermaticida% al alterar 'rofundamente la flora nativa del introito determina un aumento %i!nificativo de lacoloniación va!inal 'or E. coli , un ma,or rie%!o de infección urinaria.

La 3omo%eualidad 'udiera %er 'redi%'one a un ma,or rie%!o de ci%titi%8'roalemente como con%ecuencia del coito anal8 'ero no lo e% per se.

De'endiendo de la% condicione% %ocioeconómica%8 la% infeccione% urinaria% %edetectan en 4 a - de la% emaraada%. La% infeccione% urinaria% del emarao8e%'ecialmente la% Aue com'rometen la% v"a% alta%8 'ueden dar lu!ar a una ma,or 'revalencia de 'rematuridad , de mortalidad del recin nacido.

El cateteri%mo ve%ical ante% o de%'u% del 'arto8 'udiera %er cau%al de infecciónurinaria.

CualAuier o%trucción u o%t7culo al flu$o urinario ?tumor8 e%trec3e8 c7lculo o3i'ertrofia 'ro%t7tica@ determina una frecuencia con%ideralemente elevada deinfección de la% v"a% urinaria%. La infección8 a%ociada a la o%trucción de la% v"a%urinaria%8 'udiera conducir a una r7'ida de%trucción del te$ido renal.

Di%función neuró!ena de la ve$i!a. Lo% 'roce%o% Aue interfieren con lainervación de la ve$i!a8 como le%ione% de la mdula e%'inal8 la tabes dorsalis8 lae%clero%i% m:lti'le8 la diaete% u otra% enfermedade% 'ueden acom'aBar%e de

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infección urinaria. El u%o de cattere% ve%icale% 'ara drenar la ve$i!a8 favorecen lainfección urinaria.

El reflu$o ve%icoureteral e% una condición en la cual 3a, reflu$o o tr7n%ito

retró!rado de la orina de%de la ve$i!a 3acia lo% urtere% , a vece% 3a%ta la 'elvi% renal.Se 'roduce durante la micción o al elevar%e la 're%ión en la ve$i!a. La alteraciónve%icoureteral facilita el reflu$o de acteria% , de e%ta forma la infección de la% v"a%%u'eriore%. E% frecuente en niBo% con anomal"a% morfoló!ica% de la% v"a% urinaria% ,en niBo% anatómicamente normale% con v"a% urinaria% infectada%. En e%te :ltimo !ru'oel reflu$o de%a'arece a medida Aue %e avana en edad , 'roalemente %e dea acau%a% di%tinta% a la infección urinaria a lar!o 'lao. La% le%ione% renale% !uardancorrelación con un reflu$o inten%o8 no con la infección.

El cateteri%mo ve%ical ?o 'a%o de una %onda a trav% de la uretra 3a%ta la ve$i!a@'redi%'one a Aue de manera mec7nica %e arra%tren a!ente% 'ató!eno% directamente a

la ve$i!a a 'artir de la uretra o de la% mi%ma% %onda% contaminada%. En e%te ti'o deinfección de adAui%ición 3o%'italaria la frecuencia en varone% , 3emra% e% eAuivalente, %e 3an relacionado 'rinci'almente con el u%o de %onda% fi$a%.

Lo% factore% Aue %e a%ocian con ma,or rie%!o de infección %on+ %eo femenino8ma,or duración del cateteri%mo8 enfermedad %u,acente !rave8 de%coneión de la%onda , el tuo de drena$e8 cuidado% deficiente% de la %onda8 , au%encia deantimicroiano% %i%tmico%.

La infección %e 'roduce cuando la% acteria% alcanan la ve$i!a ien %uiendo'or la columna de orina en la lu del catter o a%cendiendo 'or la vaina muco%a %ituada'or fuera del catter. Lo% 'ató!eno% no%ocomiale% lle!an al catter del 'aciente o al%i%tema recolector de orina en la% mano% del 'er%onal8 en %olucione% o irri!adore%contaminado% , a trav% de in%trumental o de%infectante% contaminado%. La entradade la% acteria% en el %i%tema del catter %uele 'roducir%e 'or la unión entre el catter ,el tuo colector o 'or la ol%a de drena$e8 a%cendiendo la% acteria% intraluminalmente3a%ta la ve$i!a en 4&=*4 3ora%.

E% frecuente Aue la flora inte%tinal del 'aciente emi!re a la 'iel del 'erin , a laona 'eriuretral , lle!ue a la ve$i!a 'or la %u'erficie eterna del catter. E%ta v"a e%'articularmente frecuente en mu$ere%. La% acteria% crecen en la %u'erficie interna dela %onda en forma de 'el"cula% ioló!ica% , 'roducen co%tra% Aue con%tan de acteria%8!licoc7lice% acteriano%8 'rote"na% de la orina del 'aciente , %ale% urinaria%. E%ta%co%tra% ofrecen un refu!io a la% acteria% , 'ueden 'rote!erla% de lo% antimicroiano% ,fa!ocito%.

Ei%ten cada ve m7% indicio% de Aue lo% factore% !entico% del 3u%'edinflu,en en la %u%ce'tiilidad a la infección urinaria.

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Saiendo Aue una infección e% el re%ultado del de%eAuilirio entre la virulenciaacteriana , lo% factore% del 3u%'ed e% ueno tener 're%ente Aue cuando 3a,acteria% mu, virulenta% %e 'roduce infección8 inde'endientemente de %i el 3o%'edero

tiene o no una anomal"a 're=ei%tente en la% v"a% urinaria%.


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E'idemioló!icamente la% infeccione% de la% v"a% urinaria% deen dividir%e en la%Aue acom'aBan al cateteri%mo ?3o%'italaria%@ , la% a$ena% al mi%mo ?amulatoria% o de

la comunidad@. En amo% ca%o% 'ueden %er %intom7tica% o a%intom7tica%.La% infeccione% urinaria%+

Con%titu,en la 'rimera cau%a de infeccione% 3o%'italaria% , el 96 de ella%e%t7n a%ociada% a cateteri%mo8 e%'ecialmente con %i%tema% aierto%.

El rie%!o de cateteri%mo ve%ical e% ma,or en+ anciano%8 inmuno%u'rimido%8deilitado%8 anormalidade% anatómica%8 emaraada%.

Con%titu,en la %e!unda cau%a de com'licacione% en la UCI8 de%'u% de la%

infeccione% re%'iratoria%.

MANIFESTACIONES CLINICAS

La% infeccione% ?alta% , a$a%@ 'ueden 'roducir%e con$untamente o en forma%e'arada , 'ueden %er %intom7tica% o a%intom7tica%.

CISTITISE%ta infección de la ve$i!a e% cau%ada 'or el a%cen%o de !rmene% 'or la uretra8

ante la 're%encia de a!ente% de ori!en inte%tinal en la va!ina.

Lo% %"ntoma% m7% de%tacado% de ci%titi% %on dolor ti'o di%uria , en la re!ión%u'ra':ica Aue 'udiera irradiar%e 3acia la columna. ;dem7% micción im'erio%a8e%ca%a , frecuente. La orina %uele volver%e turia a %im'le vi%ta8 maloliente , en el#6 de lo% ca%o% %an!uinolenta. Generalmente no %e acom'aBa de fiere , %i la 3a,e%ta e% di%creta.

En la% mu$ere% ei%te el SINDROME URETR;L ;GUDO Aue con%i%te en la're%encia de di%uria8 micción im'erio%a , 'oliaAuiuria en au%encia de acteriuria%i!nificativa. Cl"nicamente e%te cuadro e% dif"cil de di%tin!uir de la ci%titi%. Elantecedente adicional de un camio de 'are$a %eual8 %i %ta 3a tenido una uretriti%!onocócica o 'or clamidia% dee 3acer %o%'ec3ar una infección 'or conta!io %eual8i!ual Aue lo %er"a la 're%encia de una cerviciti% muco'urulenta. El cultivo e% ne!ativo.Se dee de%cartar infeccione% 'or a!ente% de tran%mi%ión %eual ?!onococo8 C.trachomatis8 , 3er'e% %im'le@.


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fiere alta 'recedida de e%calofr"o% , dolor en la re!ión lumar ?de co%tado@. ;dem7%8male%tar !eneral8 vómito , al!una% vece% diarrea. Lo% %"ntoma% a'arecen r7'idamenteen una% 3ora%. En al!uno% 'aciente% 'redominan %i!no% , %"ntoma% 'or !ram=

ne!ativo%. Durante la fa%e a!uda de la enfermedad 'uede 3aer 3ematuria8 , de'er%i%tir %ta de%'u% de remitir la% manife%tacione% a!uda%8 3a, Aue 'en%ar en unc7lculo8 un tumor o una tuerculo%i%.

La 'ielonefriti% e% una enfermedad con tendencia a la% recaida% 'eriódica% en elcur%o de lo% aBo%.

La infección de la% v"a% urinaria% 'uede eventualmente dar ori!en a acteriemiacon %i!no% cl"nico% de %e'%i%.

INJECCIONES URIN;RI;S ;SOCI;D;S ; C;TETERES )ESIC;LES

16=1/ de lo% 'aciente% 3o%'italiado% con cattere% uretrale% 'ermanente%tienen acteriuria. El rie%!o de infección e%t7 'róimo a / de cada cateteri%mo.

Cl"nicamente la ma,or"a de la% infeccione% a%ociada% a %onda% ori!inan%"ntoma% m"nimo%8 nin!una fiere , con frecuencia %e re%uelven al retirar el catter. Se3a com'roado Aue la% v"a% urinaria% cateteriada% %on el 'unto de 'artida Aue conma,or frecuencia ori!ina acteriemia 'or acteria% !ramne!ativa% en enfermo%3o%'italiado%.

Son con%iderada% INJECCIONES URIN;RI;S COM


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condicione% dee notificar%e al laoratorio el tratamiento Aue el 'aciente vienereciiendo.

La toma de la mue%tra8 'or lo e'licado anteriormente8 reAuiere de una cuidado%a

lim'iea de lo% !enitale% eterno%.En la mu$er+Lavado cuidado%o de lo% !enitale% eterno% con a!ua , $aón. Se'arando lo%

laio% ma,ore% %e realia lim'iea en %entido antero'o%terior ?de adelante 3aciaatr7%@ con !a%a% e%trile% , %olución $aono%a o !ermicida8 cuidando de no 'a%ar nuevamente la !a%a em'leada de atr7% adelante , a%" no contaminar el 7rea ,atratada8 dada la 'roimidad del ano. Se re'ite e%to :ltimo em'leando nueva% !a%a%e%trile%.

Se en$ua!a aundantemente con a!ua 'reviamente 3ervida , %e %eca ien el7rea con nueva% !a%a% e%trile% o con una toalla lim'ia recin 'lanc3ada.Manteniendo lo% laio% ma,ore% , menore% %e'arado%8 %e inicia la micción %indetenerla en nin!:n momento8 reco!iendo en un enva%e e%tril la 'orción media dela micción8 %iendo %uficiente% uno% &6=/6 mL de orina.

En el 3omre+

Lavado cuidado%o de lo% !enitale% eterno%8 con e%'ecial nfa%i% del !lande ,'re'ucio ien con $aón o %olución $aono%a !ermicida.

/*


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Se en$ua!a aundantemente con a!ua Aue 3a,a %ido 3ervida 'reviamente , %e%eca el !lande 3acia el 're'ucio ien %ea con !a%a% e%trile% o con una toallalavada , lim'ia recin 'lanc3ada.

Con el 're'ucio retra"do %e inicia la micción en forma ininterrum'ida 3a%tafinaliar8 reco!iendo en un enva%e e%tril la 'orción media de la micción8 %iendo%uficiente% #6=&6 mL de orina

En cualAuiera de lo% do% ca%o%8 una ve reco!ida la mue%tra %e ta'a el enva%ecuidando de no contactar el interior de la ta'a con la mano u o$eto al!uno , a%"contaminarla.

E%ta tcnica no e% a'ro'iada 'ara niBo% Aue no tienen control ve%ical8recurrindo%e entonce% a la

TECNIC; DE RECOLECCION


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En cierta% condicione% 'udiera $u%tificar%e el cateteri%mo o %ondeo ve%ical o la

a%'iración %u'ra':ica.


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otiene8 en forma a%'tica 'or 'unción , a%'iración de la ve$i!a llena o re'leta?'al'ale@ a trav% de la 'ared adominal en %u re!ión %u'ra':ica.


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'uede 'rolon!ar%e en el tiem'o , 'or lo tanto con%tituir un %i%tema cerrado en con$untocon una ol%a recolectora de la orina a la cual %e conecta el catter em'leado.

La in%talación de %onda acarrea el rie%!o de introducir microor!ani%mo% a lave$i!a8 'ero en al!una% oca%ione% e% inevitale %u indicación.

E% nece%aria la lim'iea de la ona !enitourinaria como de%crito en la tcnica dela 'orción media del c3orro8 'ero en e%te ca%o el 'aciente %e encuentra aco%tado , enel ca%o de la mu$er la tcnica %e de%arrolla en 'o%ición !inecoló!ica mientra% Aue en el3omre %e realia en 'o%ición dec:ito dor%al con la% 'ierna% al!o %e'arada%.


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Catter ve%ical en el !nero femenino Catter ve%ical en el !nero ma%culino

Si el cateteri%mo no e% 'o%ile o no %e 3a 'rocedido deidamente de manera de!arantiar un 'rocedimiento lire de contaminación8 %te %olo 'odr7 re'etir%e

em'leando un nuevo eAui'o e%tril.

De no reAuerir%e ,a el catter %te e% retirado de inmediato. De no %er a%"8 %econecta a una ol%a colectora a trav% de %u unión e%talecindo%e entonce% un%i%tema cerrado en el Aue la orina alcana la ol%a , %e acumula a medida Aue %aleliremente.

En un SISTEM; CERR;DO de recolección la mue%tra dee otener%e 'or a%'iración e%tril8 con a!u$a , $erin!a a 'artir de la %onda , no de la ol%a derecolección. La orina %e reco!e de%'u% de de%infectar la 'ared de la %onda en %u'unto de unión con el tuo de drena$e. Se a%'ira la orina 'or medio de 'unción en la

%onda con una a!u$a 41. En nin!:n momento deer7 tomar%e la mue%tra de la ol%arecolectora.

La ol%a colectora SIEM


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SISTEM; CERR;DO DE RECOLECCIYN DE ORIN;

CONSER);CION DE L; MUESTR;

Deido a Aue muc3a% e%'ecie% de microor!ani%mo% %e multi'lican con ra'ideen la orina a tem'eratura amiente o cor'oral dado Aue e% un ecelente medio decultivo8 e% nece%ario Aue la% mue%tra% %e 'roce%en lo ante% 'o%ile una ve reco!ida%.Deen enviar%e al laoratorio 'revia colocación del enva%e en un reci'iente Aueconten!a cuo% de 3ielo. E%te 'rocedimiento 'ermitir7 Aue el n:mero de acteria%'ermaneca relativamente con%tante 'or un tiem'o con%iderale8 'ero lo ideal %er"a %u'roce%amiento durante la% %i!uiente% & 3ora% de%'u% de emitida%.

(#


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E0;MEN MICROSCY


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5;CTERIURI;: %i!nifica acteria% en la orina. Ca%i toda% la% infeccione% acteriana%de la% v"a% urinaria% %e caracterian 'or la 're%encia de !rande% cantidade% deacteria% en la orina. El e%tudio cuantitativo de la% acteria% en la orina %e realia

mediante el urocultivo , %e informan de la %i!uiente manera+

♦ No 3uo de%arrollo acteriano♦ Meno% de 16.666 colonia% 'or mL %e inter'reta como contaminación♦ Entre 16.666 , 166.666 colonia% dee re'etir%e♦ M7% de 166.666 colonia% 'or mL %u!e%tivo de infección urinaria

La acteriuria a%intom7tica %e define como acteriuria im'ortante8 'ero menor de166.666 UJCmL en au%encia de manife%tacione% cl"nica% de infección activa.8 , no %etrata a meno% Aue e%temo% en 're%encia de una 'aciente emaraada ?'or rie%!o deaorto8 emarao 'rematuro o %e'%i% neonatal@8 'rocedimiento Auir:r!ico de la e%fera

uroló!ica o de un 'aciente diatico8 entre otro%.


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recolectada a'ro'iadamente e% una fuerte 'ruea de infección activa de la% v"a%urinaria%.

Se 3a e%talecido Aue recuento% ma,ore% o i!uale% a 166.666 colonia% 'or mLen un urocultivo de la 'rimera orina reco!ida en la maBana re're%enta infección en un9/ de lo% ca%o% ?de re'etir%e en do% 'ruea%@. Recuento% menore% de 16.666colonia% 'or mL indican contaminación uretral o va!inal8 , recuento% entre 16.666 ,166.666 colonia% nece%itan %er evaluada% en con$unto con la información cl"nica 'araa%" definir %u %i!nificado. Lo e'ue%to 'ermite dia!no%ticar correctamente la ma,or"ade la% 'ielonefriti% , ci%titi%. Sin emar!o8 en al!uno% 'aciente% con verdadera%infeccione% urinaria%8 factore% como el ti'o de mue%tra , la% circun%tancia% en la% Aue%e reco!e8 el ti'o de a!ente8 %u% condicione% cl"nica%8 'ueden contriuir a recuento%a$o%.

En lo% enfermo% con %"ntoma% la infección 'uede ir acom'aBada de un menor n:mero de acteria% ?164 a 16/ 'or cc@. En la% mue%tra% de orina otenida% 'or 'unción=a%'iración %u'ra':ica o en el cateteri%mo de Kentrar , %alir o en la%'rocedente% de enfermo% con cateteri%mo 'ermanente8 la 're%encia de acteriuria decualAuier a!rado un recuento de colonia% de 164 a 16& microor!ani%mo% 'or mL indica'or lo !eneral la 're%encia de infección.

Si el n:mero de acteria% cultivada% re%ulta menor al e%timado 'ara al e%timado'ara e%talecer infección urinaria8 'udieran e%tar indicado% e7mene% re'etido% de laorina 'ara e%talecer la 're%encia de infección.

La% 'unta% de %onda de Jole, ve%ical no %on recomendale% 'ara cultivo8 ,aAue %iem're e%t7n contaminada% con acteria% coloniante% de la uretra. Su cultivo e%un error en el cual %e incurre con muc3a frecuencia. La diure%i% acuo%a o una micciónanterior di%minu,en lo% recuento% de acteria% en la orina.

El %i!nificado de un ai%lamiento urinario en el laoratorio dee a%ar%e eninformación tal como el n:mero , ti'o de acteria% ai%lada%8 el ti'o de mue%tra otenida, la información cl"nica 'ro'orcionada 'or el 'aciente8 lo Aue 'ermitir7 entonce% lacorrecta inter'retación de lo% re%ultado% informado% 'or el laoratorio. E% 'or e%to Aue'or e$em'lo8 en al!uno% ca%o%8 4 o m7% colonia% 'udieran no %er contaminación ,corre%'onder%e en camio con infección en un 'aciente inmuno%u'rimido.

Si lo% cultivo% %on ne!ativo% en 're%encia de %i!no% cl"nico% de infecciónurinaria8 dee tomar%e en cuenta el %"ndrome uretral a!udo u otro% 'roce%o%.

Ei%ten do% 'rocedimiento% a %e!uir en el eamen cuantitativo o recuento decolonia%+

a@ Mtodo de conteo en 'laca o recuento de colonia%

((


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@ Mtodo del a%a calirada

METODO DE CONTEO EN


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;l!uno% 'aciente% 3o%'italiado% o no8 deido a le%ión medular e%'inal8incontinencia u otro% factore%8 reAuieren cateteri%mo urinario a lar!o 'lao o%emi'ermanente8 Aue 'racticado adecuadamente reduce la incidencia de acteriuria

, de la% com'licacione% a%ociada%.

PRÁCTICA No

CONTROL DEL MUNDO MICROBIANO METODOS DE ESTERILIZACIÓN

;utor+ Lic. ean acAue%


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d@ la ra$#a)#9" 2a55a 8 'rocedimiento utiliado 'or la% com'aB"a% Aue 'roducen lo%materiale% de%cartale% de 'l7%tico.


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tem'eratura% elevada% ?1(6 =1-6OC@'or 'er"odo% de tiem'o entre 1/6 = &/ minuto% ?eltiem'o de'ender7 de la tem'eratura_@

1/6 minuto% a 1/6o

C 1#6 minuto% a 1(6oC (6 minuto% a 1*6oC &/ minuto% a 1-6oC

Una de la% limitacione% del 'rocedimiento e% Aue la e'o%ición del material atale% tem'eratura% 'uede oca%ionar = a la lar!a = deterioro% %i!nificativo%.


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La tem'eratura de'ende directamente de la calidad del va'or , de la 're%ión delmi%mo> el tiem'o de e'o%ición %e fi$ar7 en función del ti'o de material ?dentro de lo%

l"mite% e%talecido%@ , de la tem'eratura alcanada.


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4. De 49 3a%ta (/oC #. De &/ 3a%ta -/ de 3umedad relativa &. De 4 3a%ta / 3ora%

Conviene %eBalar Aue el 3ec3o de mantener el material mo$ado no eAuivale a3umedecerlo. En un material mo$ado8 'articularmente en un tuo de 'l7%tico mu, fino8'ueden formar%e ta'one% de a!ua Aue no 'ermiten la circulación del !a%8 ,8 'or con%i!uiente8 im'iden la e%teriliación del material.

El óido de etileno inactiva todo% lo% microor!ani%mo%8 aunAue la% e%'ora%acteriana% ?(acillus subtilis@ e%tn m7% re%i%tente% Aue la ma,or"a de la% dem7%e%'ecie%.

La de%venta$a del mtodo de e%teriliación 'or el óido de etileno e% la lar!a

duración del ciclo de e%teriliación8 %u co%to , lo% rie%!o% tanto 'ara el 'er%onal como'ara el medio amiente+ No %e 'uede olvidar Aue el óido de etileno e% un 'roductotóico , Aue %u u%o e%t7 %ometido a e%tricta% condicione% 'ara evitar cualAuier 'rolema.

RADIACIONES IONIZANTES:

La e%teriliación 'or ra,o% !amma ?!enerado% 'or coalto (6@ o 'or otraradiación ioniante 'roducida 'or aceleradore% de electrone%8 e% un mtodo Auefunciona a a$a tem'eratura , %e utilia 'rinci'almente 'ara el tratamiento demateriale% mdico=Auir:r!ico% faricado% a 'artir de materia %inttica ti'o 'l7%tico o'ara 'roducto% farmacutico%. E% un mtodo co%to%o Aue %ólo 'ueden utiliar la%indu%tria% Aue 'roducen !rande% vol:mene% de materiale%.

OTROS METODOS DE ESTERILIZACIÓN:

Entre lo% mtodo% alterno% Aue 'odr"an utiliar%e en un momento dado 'aracurir falla% de lo% %i%tema% tradicionale% e%t7n+

= La filtración mediante el u%o de memrana% de mu, a$o di7metro de 'oro% ?6844 µ[email protected] mtodo %e u%a tradicionalmente 'ara la e%teriliación de cierta% %olucione%farmacutica% termol7ile%. La cr"tica Aue 'uede formular%e e% Aue el tamaBo de lo%

'oro% 'ermite a'arentemente filtrar todo ti'o de acteria%8 'ero no e% efectivo 'ara lafiltración de viru%. 'or otra 'arte8 el mtodo oli!a a la realiación de mani'ulacione%Aue re're%entan rie%!o% de contaminación.

= El u%o de 'roducto% !a%eo%o%8 tale% como + 'eróido de 3idró!eno8 dióido de cloro8formalde3"do ?formol@8 7cido 'eractico8 oono. Toda% la% %u%tancia% mencionada%'re%entan 'ro'iedade% microicida%8 'ero %on de mane$o delicado8 motivo 'or el cual%u u%o rutinario no e%t7 todav"a 'revi%to.

*4


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= El u%o de 3orno% microonda%+ e%tudio% reciente% 3an demo%trado Aue la% microonda%'roducen un efecto microicida en un tiem'o relativamente corto. Sin emar!o8 %e

nece%ita efectuar otro% e%tudio% 'ara determinar eactamente la% condicione% 'ara unu%o rutinario en el amiente 3o%'italario.

= Cierto% com'ue%to% Au"mico% reconocido% como de%infectante% 'o%een 'ro'iedade%microicida% evidente% Aue 'ermiten %u u%o 'ara de%contaminar materiale% con mu,uena efectividad en un tiem'o de e'o%ición variale ?de ( 3a%ta 16 3ora%@. Sinemar!o8 el mtodo no 'uede con%iderar%e como e%teriliación8 'orAue no ofrece la%condicione% 'ara mantener el material eento de contaminante.


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= Lo% mtodo% f"%ico=Au"mico% = Lo% mtodo% acterioló!ico%

Lo% mtodo% f"%ico% utilian la% indicacione% de 'ar7metro% f"%ico%8 tale% comotem'eratura o la 're%ión8 , el tiem'o. Lo% a'arato% moderno% incor'oran %i%tema% de!raación autom7tica de dic3o% 'ar7metro% en cada ciclo de e%teriliación. En el ca%ode a'arato% meno% %ofi%ticado%8 el u%uario tiene la re%'on%ailidad de controlar 'eriódicamente la% indicacione% de lo% termómetro% o de lo% manómetro% de 're%ión.

Lo% mtodo% f"%ico=Au"mico% %e a%an en la% reaccione% de indicadore% como elcalor ,o como la 3umedad en función del tiem'o8 o la tran%formación del indicador 'or el contacto con %u%tancia% Au"mica% ?'or e$em'lo+ óido de etileno o formol@. Otroe$em'lo e% el ad3e%ivo Aue %e u%a de manera rutinaria 'ara con%olidar lo% emala$e%de materiale% mdico=Auir:r!ico%8 el cual lleva l"nea% Aue camian de color o

inten%ifican %u tono8 lue!o de e%tar e'ue%ta% a la 3umedad o al calor. KE% )a5-#o $e)o%or o $e to"o "o #"$#)a %a ester#%#$a$ $e% 5ater#a%, s#"o %a e4os#)#9" $e%5ater#a% a% 4ro)eso $e ester#%#'a)#9"

Lo% mtodo% acterioló!ico% %e efect:an mediante el u%o de microor!ani%mo%vivo% llamado% ioindicadore%> la% 'ruea% acterioló!ica% %on la% :nica% Aue indicancon certea la efectividad de la e%teriliación.


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= 2i!ieniación , de%infección = ;nti%'tico , de%infectante#. De%cria %ituacione% en la% Aue %er"a a'ro'iado+

= E%teriliar = 2i!ieniar = De%infectar = Realiar anti%e'%ia&. Enumere lo% factore% a tener en cuenta en la elección de un %i%tema de e%teriliación/. Com'are la eficacia del calor 3:medo , del calor %eco8 como mtodo% de

e%teriliación.(. Com'are la% clula% ve!etativa% de la% acteria% con la% e%'ora% acteriana%8 en

cuanto a la re%i%tencia al calor.*. u e% un autoclave^ u cla%e de materiale% %e e%terilian u%ualmente en un

autoclave^

-. Cite al!uno% materiale% Aue 'referentemente %e e%terilian en un 3orno de airecaliente8 en lu!ar de un autoclave. IndiAue 'ara cada material8 'or Au el airecaliente e% el mtodo de elección 'ara %u e%teriliación.

9. u ti'o% de materiale% %uelen e%teriliar%e !eneralmente 'or medio dein%trumento% de filtración^


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CONTENIDO+

a@ )i%ualiación del conce'to de flora normal de la 'iel.

@ Demo%tración de la efectividad de lo% mtodo% de anti%e'%ia.

c@ Demo%tración de la contaminación inevitale , con%tante de la% mano% , laefectividad de la% tcnica% 'ro'ue%ta% de lavado de la% mano%.

d@ Demo%tración de la contaminación del medio amiente 'or acteria% , 3on!o%> de la efectividad de lo% mtodo% de de%infección , de la% diferencia% Aue 'uedan re%ultar entre la% diver%a% tcnica% ,o lo% diver%o% 'roducto% utiliado%.

INTRODUCCION

La% 'r7ctica% de F2IGIENE 2OS


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!a%trointe%tinal , de la 'iel8 %in manife%tación de infección ,8 Aui7% %in %aerlo.


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Toda% la% mue%tra% %e tomar7n mediante el u%o de una 'laca e%'ecialmente di%eBada'ara 'ermitir la toma 'or im're%ión , la evaluación directa ?no inmediata@ del !rado decontaminación de %u'erficie% 'lana% , m7% o meno% li%a%. Dic3a 'laca %e denominó

R.O.D.;.C.8 nomre formado 'or la% iniciale% de la% / 'alara% in!le%a% Aue definen el'roce%o + R de Fre'licateF ` re'licación o im'renta O de For!ani%mF ` microor!ani%mo D de FdetectionF ` detección A de FandF ` , C de Fcountin!F ` recuentoEn otra% 'alara%8 el mtodo 'uede definir%e como el ai%lamiento , el recuento demicroor!ani%mo% otenido% 'or la tcnica de la re'licación.

*-

La 're%entación de la 'laca R.O.D.;.C. 'ermitetomar la% mue%tra% 'or %im'le a'licación , 're%iónde la 'laca %ore la %u'erficie analiada. En efecto8el medio de cultivo dee formar un meni%co8 el cual%ore%ale li!eramente del orde de la 'laca. E%3ec3o facilita el contacto directo entre la %u'erficie ,el medio de cultivo Aue act:acomo ad3e%ivo.

En otra% 'alara%8 %e realia una im're%ión de la%u'erficie ,8 al cao de &- 3ora% de incuación a latem'eratura de #4C ?±4 C@ %e 'uede efectuar unaevaluación cuantitativa del !rado de contaminación= mediante el conteo del n:mero de colonia% Auecrecieron en la %u'erficie del medio de cultivo = ,una evaluación cualitativa


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mediante la o%ervación morfoló!ica de la% colonia% ,o re'ica$e de la% mi%ma% enlo% medio% e%'ec"fico% 'ara la identificación.

El medio de cultivo contenido en la% 'laca% R.O.D.;.C. 'uede e%co!er%eentre el medio FTri'tica%e So, ;!ar it3 Lecit3in and


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E$em'lo+ 1#1 n:mero correlativo 4 n:mero de la mue%tra D Fde%'u%F

La finalidad del %i%tema de numeración e% la de 'oder cla%ificar %in

eAuivocación 'o%ile la% mue%tra% entre lo% alumno% , ti'o% de mue%tra8 'ara unainter'retación correcta de lo% re%ultado%.

En virtud de Aue8 durante el 'er"odo de incuación8 %e 'roduce laconden%ación de una 'arte del a!ua contenida en el medio de cultivo8 %eaco%tumra a incuar la% 'laca% en la 'o%ición Fvolteada% 3acia aa$oF de manerade evitar Aue el a!ua %e de'o%ite %ore el a!ar , modifiAue el !rado decontaminación real. ;l retirar la% 'laca% de la incuadora8 conviene %er 'rudente ,mantenerla% en la mi%ma 'o%ición 3a%ta verificar la 're%encia o no de !ota% dea!ua en la 'arte interna de la ta'a> la% !ota% de a!ua %e 'ueden eliminar 'or a%orción con una %ervilleta de 'a'el.

E%'ecificacione% cualitativa% , cuantitativa% del material nece%ario 'ara una'r7ctica+

= a'roimadamente 14 'laca% R.O.D.;.C. 'or cada e%tudiante= marcadore% con tinta indelele o l7'ice% !ra%o%= 1 'a%tilla de $aón corriente= varia% mue%tra% de $aone% anti%'tico%= 'aAuete% de toalla% de 'a'el 'reviamente e%teriliada%= 1 enva%e de alco3ol i%o'ro'"lico o et"lico al *6 = 1 enva%e ?como m"nimo@ de un anti%'tico comercial en %olución alco3ólica= 1 enva%e ?como m"nimo un ti'o@ de 'roducto comercial de lim'ieade%infección

'ara 'i%o% . Lo ideal %er"a com'arar8 en 'aralelo8 la efectividad de un'roducto de lim'iea %im'le , la de un 'roducto de%infectante.

= 1 mo'a e%teriliada , %u man!o 'ara ada'tación= 1 alde dole con e'rimidora de mo'a , un reci'iente !raduado 'ara la correcta dilución del 'roducto deter!ente o de%infectante= vario% 'aBo% de lim'iea 'reviamente e%teriliado%= vario% reci'iente% ti'o 'alan!ana% ?'onc3era%@= una incuadora a$u%tada a la tem'eratura de #4 1C b 4 1C= un contador de colonia% con marcador de tinta indelele.

JLOR; NORM;L DE L;


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5I5LIOGR;JI;+

1. 5iolo!ical Contamination Control Committee. ;merican ;%%ociation for Contamination Control.

4. Committee on Microiolo!ical Contamination of Surface%8 Laorator, Section82ealt3 La. Sci.8 1 + 4/( 8 ;


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E0


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Módulo de Prácticas oct. 2011-def..doc

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