Obtención de Agentes de Control Biológico .

Montevideo,

21 de febrero de 2003

Objetivos:• Transmitir la importancia de los procesos de búsqueda y selección de ACB como base del éxito de un programa de CB.

• Analizar las diferentes vías o caminos posibles en el proceso de búsqueda y selección.

•Discutir los factores que condicionan estos procesos.

• Comprender como los resultados finales pueden estar condicionados por las técnicas utilizadas.

•Analizar posibles estrategias de búsqueda y selección de ACB

Aislamiento de ACB

• Aislamiento de ACB– ¿Dónde encontrar ACB?– ¿Cómo aislar?– ¿Cualquier antagonista?– ¿Qué características deseamos encontrar?

Importancia del aislamiento y selección

• “El aislamiento y la selección de microorganismos antagonistas sustentan a todo Programa de Control Biológico determinando las chances de éxito”. (Bettiol 1991)

•El número de microorganismos en una comunidad microbiana es inmenso.

– En la rizosfera de un árbol de roble se calcula que existen 45 mil billones de m. o. (45 x 1015)

Dónde encontrar ACB

• En cualquier lugar puede existir algún microorganismo antagonista.

•Muchos m.o. valiosos se encuentran en forma azarosa.

Dónde encontrar ACB

• En cualquier lugar puede existir algún microorganismo antagonista.

•¿Existe algún lugar donde sea más probable hallarlo?

•En aquellos sitios donde coincidiendo la presencia del patógeno, la planta huésped y el ambiente favorable al desarrollo de la enfermedad esta no ocurre, es posible que allí esté funcionando naturalmente algún tipo de biocontrol.

Dónde encontrar ACB cont..

• Esto puede suceder naturalemente:– suelos supresivos

• Podemos forzar la situación:– Colocamos plantas o frutos en situaciones favorables al desarrollo de la enfermedad y seleccionamos aquellos individuos que se mantuvieron sanos.

•Monilinia fructicola en duraznos.

• Penicillium expansum en manzana.

Selección de ACB para Monilinia

Aislamiento

Algunos lugares

• Suelos supresivos

• Sobre las partes aéreas de las plantas (m.o. epifíticos, o del filoplano)

• Sobre la superficie de las raíces (rizoplano)

• Colonizando a patógenos

• Dentro de la planta (endofitos)

• Fitopatógenos (razas leves o avirulentas)

¿Por qué sobre la planta?

• Porque se ha demostrado que sobre la planta viven numerosos m.o. entre los cuales existen antagonistas de los patógenos y promotores de las defensas de las plantas.

¿Por qué sobre la planta?

• En el agua de lavado concentrada crecen solamente bacterias y levaduras

Aislamiento de frutos

¿Por qué sobre la planta?

• Porque se supone que si están allí es porque están adaptados a vivir en esas condiciones.

– Si queremos controlar a un patógeno que ingresa por heridas nos interesa que nuestro antagonistas sea un buen colonizador de heridas.

¿Por qué sobre la planta?

• Porque existe mayor aceptación por parte de los consumidores a admitir a los m.o. que naturalmente viven sobre la planta que a otros extraños.

Colonizadores de patógenos

• Se pueden encontrar antagonistas colonizando naturalmente a los patógenos de plantas.

•Se pueden utilizar a los patógenos como cebo para capturar a sus antagonistas.

Colonizadores de patógenos

Endófitos• Para superar una de las limitantes mayores del CB. Obtener antagonistas con capacidad curativa.

• Control de patógenos vasculares.Plant species Minutes in

NaOCLNaOCl dilution Reference

Lichens 1 1:5 Petrini (1986)Mosses 1 1:5 Petrini (1986)Ferns 3 1:5 Dreyfuss & Petrini (1984)Conifer needles 5 1:2 Carroll & Carroll (1978)Conifer twigs 7 1:2 Carroll & Carroll (1978)Dicots (general) 3 1:5 Petrini (1986)Erica leaves 3 1:5 Petrini (1986)Erica stems 5 1:5 Petrini (1986)Rhododendron 3 1:5 Petrini (1985)Vaccinium 3 1:5 Petrini (1985)

Aislamiento

• En medio generales

• Selectivamente– Hongos– Bacterias– Capaces de digerir al patógeno

Selección• In vitro

– Cultivos duales

• In vivo– Inoculación en plantas

• Intermedios– utilizando trozos de vegetal

Cultivos duales• Consiste en sembrar en una misma placa enfrentados al antagonista y al patógeno

Selección “in vitro”• Fácil de realizar

• Rápida

• Menor costo relativo.

• Solamente selecciona por algunos mecanismos de acción, descartando antagonistas que podrían funcionar sobre la planta.

• Tiene baja correlación con la performance a campo.

Selección “in vivo”• Consiste en inocular plantas con el patógeno y al antagonista

Selección sobre frutos

Selección “in vivo”

• Selecciona independientemente de los mecanismos de acción antagónica.

• Implica un mayor trabajo

• Mayor tiempo

• Mayor costo relativo.

• Mayor equipamiento (Plantas, invernáculo, personal, etc)

Selección combinada

• Consiste en inocular tejidos vegetales en el laboratorio.

Otras consideraciones

• ¿A quién debe enfrentar nuestro antagonista?

• ¿En qué condiciones?

•Elección de la cepa más agresiva

•Elección de la cepa más resistente a fungicidas

Resumen final

• El aislamiento y selección de antagonistas es un proceso fundamental en cualquier programa de control biológico.

• Las técnicas utilizadas pueden sesgarnos los resultados.

•No existe una única estrategia de trabajo.

• El arte está en diseñar aquella estrategia que nos conduzca en la forma más directa hacia nuestro objetivo final.