園芸学研究科 教授 近藤 - JST...Abz 処理葉で低く推 移した。( Abz 処...

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アブシナゾール処理による植物へ の乾燥耐性付与技術の開発 千葉大学大学院 園芸学研究科 教授 近藤

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  • アブシナゾール処理による植物へ

    の乾燥耐性付与技術の開発

    千葉大学大学院 園芸学研究科 教授 近藤 悟

  • 新技術の特徴 1:植物への乾燥耐性付与を目的とした技

    術開発は、極めて少ない。 2:植物の種類にかかわらず応用可能。 3:本技術の適用により、灌水の回数が削減されるため、大幅な節水が期待される。 4:処理方法は、散布のみであるため簡単。

  • 新技術の特徴・従来技術との比較 植物の乾燥耐性の向上には、葉の気孔を速

    やかに閉鎖させることが必要。 1:トリアゾール系の薬剤は同様な効果を持つが、植物の成長を阻害する副作用を伴う。 2:成長を阻害せずに乾燥耐性を付与できるアブシナゾールが開発。

  • 本技術の具体的なメカニズム 植物ホルモンの特徴

    1:微量であるが、植物の発育に大きな影響を与える。 2:植物の様々な組織で合成され、様々な部位に作用する

  • 成育を促進するタイプ 成育を抑制するタイプ

    1:エチレン 2:アブシシン酸(植物の休眠、気孔の開閉、

    紅葉の誘導など) 3:ジャスモン酸

    1:オーキシン 2:ジベレリン 3:サイトカイニン 4:ブラシノステロイド

  • Xanthoxin

    ジヒドロファゼイン酸(DPA) HO

    OH O COOH

    OH

    O COOH

    アブシシン酸(ABA)

    -Carotene β

    ファゼイン酸(PA)

    OH O

    O COOH

    O

    OH

    8‘- ヒドロキシル - ABA

    HO

    COOH

    NCED ネオキサンチン酸化開裂酵素

    ABA-8'-hydroxylase(CYP707A)

    ABA水酸化酵素

    ABAの生合成(一部)・主要代謝経路

    ABA8’位水酸化酵素制御がより効率的

    気候変動によりアジア内陸部および中東地域での緑地の減少、作物栽培への被害が報告されている。 植物体の水分保持にはアブシシン酸(ABA)が関連している

  • Abz処理

    トリアゾール系薬剤処理

    0 0.03 0.1 0.3 1 3 10 30 100 µM

  • (A) 灌水

    LSD 0.05 = 0.222 気孔開度

    (µm

    )

    0.00.51.01.52.02.53.03.54.0

    0 24 48 72 96 120 144 168 192 216

    (B) 乾燥 再灌水 灌水

    LSD 0.05 = 0.317

    スプレー後時間 (h)

    気孔開度

    (µm

    )

    Abz処理は灌水下でも処理4時間後には気孔閉鎖に有意な効果を示した。

  • -3.0

    -2.5

    -2.0

    -1.5

    -1.0

    -0.5

    0.00 24 48 72 96 120 144 168 192 216

    Untreated controlAbz-F1

    水ポテンシャル

    (MPa

    )

    乾燥 再灌水

    スプレー後時間 (h)

    灌水

    LSD 0.05 = 0.137

    Abz処理は乾燥下でも無処理に比べて葉内の水ポテンシャルを高く維持した。

  • 0

    0.1

    0.2

    0.3

    0.4

    0.5

    0 24 48 72 96 120 144 168 192 216

    Untreated controlAbz-F1

    乾燥 再灌水

    AB

    A 濃

    度 (µ

    mol

    .kg-

    1 DW

    )

    (A) 灌水

    LSD 0.05 = 0.038

    0

    0.1

    0.2

    0.3

    0.4

    0.5

    0 24 48 72 96 120 144 168 192 216

    乾燥 再灌水 (B) 灌水

    PA 濃

    度 (µ

    mol

    .kg-

    1 DW

    )

    スプレー後時間 (h)

    LSD 0.05 = 0.134

    Abz処理は灌水下および乾燥下でも

    無処理に比べて葉

    内の内生ABA濃度を高く維持した。 逆にAbz処理葉のPA濃度は灌水および乾燥下で低

    くなった。

  • MdNCED1 1 DGTASYACRFTETHRMSQERDLGRPLFPKAIGELHGHSGIARLLLFYARGMFGLVDPSHG 60MdNCED2 1 DGTASYACRFTETSRISQERDLGRPLFPKAIGELHGHSGIARLLLFYARGMFGLVDPTHG 60

    MdNCED1 61 IGVANAGLVYHNGHLLAMSEDDLPYHVQITETGDLKTVGRYDFEGQLKSTMIAHPKVDPA 120MdNCED2 61 IGVANAGLVYHNGHLLAMSEDDLPYHVQITETGDLKTVGRYDFEGQLKSTMIAHPKVDPA 120

    MdNCED1 121 TGELFALSYDVVQKPYLKYFKFSPSGDKSPDVEINLEQPTMMHDFAIT 168MdNCED2 121 TGDLFALSYDVVQRPYLKYFKFSPNGEKSPDIEINLEQPTMMHDFAIT 168

    (A)

    (B)

    Pear PbNCED1

    Apple

    MdN

    CED1

    Appl

    e M

    dNC

    ED2

    Pea

    ch P

    pNC

    ED

    1

    Swee

    t che

    rry P

    aNC

    ED1

    Arab

    idop

    sis

    AtN

    CED

    3

    Oran

    ge C

    sNCE

    D1

    Pea P

    sNCE

    D2Oran

    ge CsNC

    ED2Peach PpNCED2

    Grape VvNCED2

    Arabid

    opsis A

    tNCED

    9

    Toma

    to Le

    NCED

    1

    Arab

    idop

    sis

    AtN

    CED

    2

    Ara

    bido

    psis

    AtN

    CE

    D5

    Avo

    cado

    PaN

    CE

    D3

    Gra

    pe V

    vNC

    ED1

    Avoc

    ado P

    aNCE

    D1

    Arab

    idops

    is At

    NCED

    6Ar

    abido

    psis

    AtCCD

    4

    Pea

    PsNC

    ED1

    Arabido

    psis AtC

    CD1

    Avocado PaCCD1

    Tomato LeCCD1B

    Tomato LeC

    CD1A

    0.1

    MdNCED1およびMdNCED2の推定アミノ酸の類似性

    は92%であった。

  • 0.0

    0.5

    1.0

    1.5

    2.0

    2.5

    3.0

    3.5

    0 24 48 72 96 120 144 168 192 216

    Untreated controlAbz-F1

    乾燥 再灌水 (A) 灌水

    Rel

    ativ

    e M

    dNC

    ED1

    expr

    essi

    on

    LSD 0.05 = 0.581

    乾燥 再灌水 (B) 灌水

    Time after spray (h)

    0

    1

    2

    3

    4

    5

    6

    0 24 48 72 96 120 144 168 192 216

    Rel

    ativ

    e M

    dNC

    ED2

    expr

    essi

    on

    LSD 0.05 = 0.402

    MdNCED1およびMdNCED2遺伝子とも、乾燥

    下での内生

    ABAの増加にもかかわらず、

    Abz処理葉で低く推移した。

    (Abz処理への植物の適応性

    を確認)

  • MdCYP707A1 1 GCPCVMLASPEATKFVLVTHAHLFKPTYPKSKEKLIGPSALFFHRGDYHISLRKLIQNSL 60MdCYP707A2 1 GCPCVMITSPEAARMVLVSRAHLFKPTYPRSKERMIGPEAIFFHQGAYHSRMKKMVQASL 60

    MdCYP707A1 61 SPNPNTIQKLVPGIEALVISALDSWAEGRKVINTYHEMKKFSFDVGFLAMFGQLDETYRE 120MdCYP707A2 61 --LPCAIKESVSEIEQIVINLLPTWKN--NTINTLQEMKRYAFDVAMISAFGNKRDFEME 116

    MdCYP707A1 121 KLKENYCIVDKGYNSFPTKIPGTAYQKALLARKRLGEILSQII--CERKEKKTMQNDLLG 178MdCYP707A2 117 GIKHLYQCLEKGYNSMPLDLPGTSFHKAMKARKLLNETLKKMIELERRKSPKEDSGGLLR 176

    MdCYP707A1 179 HLLNFQDENGQ---TLTEDQISDNII 201MdCYP707A2 177 VMLGATDQNNKLNLQLSDSQIADNI- 201

    (A)

    (B)

    Potato StCYP707A2

    Tomato SlCYP707A1

    Apple MdCYP707A1

    Arabidopsis AtCYP707A4

    Arabidopsis AtCYP707A2 Apple MdCYP707A2

    Sweet cherry PaACYP707A3

    Potato StCYP707A1

    Arabidopsis AtCYP707A1

    Arabidopsis AtCYP707A3

    OsCYP707A5

    OsCYP707A60.05

    Rice OsCYP707A6

    Rice OsCYP707A5

    PaCYP707A3

    MdCYP707A1およびMdCYP707A2の推定アミノ酸の類

    似性は57%であった。

  • 0.00.51.01.52.02.53.0

    0 24 48 72 96 120 144 168 192 216

    Untreated controlAbz-F1

    乾燥 再灌水 (A)

    灌水

    Rel

    ativ

    e M

    dCYP

    707A

    1

    expr

    essi

    on

    LSD 0.05 = 0.179

    乾燥 再灌水 (B)

    灌水

    0.00.5

    1.01.52.0

    2.53.0

    0 24 48 72 96 120 144 168 192 216

    Rel

    ativ

    e M

    dCYP

    707A

    2

    expr

    essi

    on

    スプレー後時間 (h)

    LSD 0.05 = 0.332

    Md707A1およびMd707A2遺伝子とも、Abz処理葉で低く推

    移した。(Abz処理の有効性を

    確認)

  • 0.0

    0.2

    0.4

    0.6

    0.8

    1.0

    1.2

    1.4

    0 24 48 72 96 120 144 168 192 216

    Untreated controlAbz-F1

    乾燥 灌水 (A) 灌水

    EC50

    (mg.

    mL-

    1 )

    LSD 0.05 = 0.132

    O2-ラジカル消去活性のEC50値はAbz処理葉で高く推移した。この結果は、乾燥下でもAbz処理葉では乾燥ストレスは軽減されていることを示す。

  • 無散布 Abz-F1 5 µM

    Abz-F1 10 µM

    Abz-F1 50 µM

    Abz スプレー後192時間(8日間)乾燥下に置いたリンゴ実生

    無散布区は萎縮しているが,処理区のリンゴ実生は健全である

  • アブシナゾール処理

    水分ストレス20日後のリンゴ実生の生育状態 対照 アブシナゾール処理

    対照は枯死しているが,処理区のリンゴ実生は健全である

  • アブシナゾール処理が芝生の乾燥耐性に及ぼす影響 (無灌水後12日)

    無処理 トリアゾール系薬剤処理 アブシナゾール処理

  • 想定される用途 1:ゴルフ場での使用(灌水回数の削減) 2:屋上緑化への適用 3:壁面緑化への適用 4:ビル内緑化への適用 5:鉢物花卉への適用

  • 実用化に向けた課題 1:植物種で異なる可能性のある反応を明確化し、気孔の開閉に関係する光合成との関

    連を明らかにする必要がある。 2:実用化に向けて、植物で異なる灌水の間隔を明らかにしていく。

  • 企業への期待 本技術は降雨の少ない地域において、環境

    および農業分野に有効な活用が期待される

    ので、海外への展開も考えている企業に、

    より有効と思われる。

  • 本技術に関する知的財産権 1:発明の名称:植物の乾燥耐性付与方法及びそれに用いられる植物乾燥耐性付与剤 2: 出願番号:特願2012-022583 3:出願人:国立大学法人 千葉大学 4:発明者:近藤 悟 2012年:JST A-Step事業に採択

  • お問い会わせ先 千葉大学 産学連携・知的財産機構 産学官連携コーディネーター 小柏 猛 TEL 043-290-3565 FAX 043-290-3519 e-mail [email protected]

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