Bol. San. Veg. Plagas, 18: 725-734, 1992

Peligrosidad de Botrytis cinerea Pers, en siembras adelantadasde garbanzo en Extremadura

J. DEL MORAL, V. CHICA, M. GALLEGO y D. CASADO

En este trabajo se denuncia la peligrosidad de Botrytis cinerea Pers, en siembrasadelantadas de garbanzo (36 % de plantas afectadas en algunos campos durante 1991).Se comprueba que tres cultivares de garbanzo son sensibles al patógeno y se demues-tra la eficacia de procimidona como preventivo de la enfermedad. La epidemiologíaes discutida teniendo en cuenta las características fitotécnicas del cultivo, obteniéndo-se de dicha discusión recomendaciones para la profilaxis de la enfermedad.

Palabras clave: Botrytis cinerea, procimidona, garbanzo.

J. DEL MORAL, V. CHICA, M. GALLEGO y D. CASADO. Servicio de Investigación Agra-ria. Junta de Extremadura. Apdo. 22. 06080 Badajoz (España).

INTRODUCCIÓN

El cultivo del garbanzo en nuestro paísha vuelto a interesar a los consumidores es-pañoles y consecuentemente a los agricul-tores. Las razones de los primeros son detipo gastronómico —esta semilla tiene tan-ta calidad proteica como la carne y bastan-tes más ventajas sanitarias. Pero las razo-nes agroeconómicas de los segundos sonmuy poderosas, y entre ellas está la de que,para estructurar una política agropecuariaseria, hay que implantar una alternativadonde las leguminosas jueguen un papel tanimportante como los cereales, el girasol, laremolacha... Estas razones, respecto a Es-paña, han sido sintetizadas por DEL MO-RAL (1989).

De los 10 millones de hectáreas que hayen el mundo dedicadas al garbanzo, la CEEposee 140.000 Ha, superficie que se inten-ta aumentar para así disminuir la importa-ción de proteínas. Esto queda de manifies-to al conocer que la CEE subvencionó cin-cuenta y cinco proyectos de investigación

sobre diversos aspectos del cultivo en 1988y 1989 (ECC AGRIMED, 1988). Gran par-te de la mejora que los investigadores rea-lizan en el vegetal está basada sobre el cul-tivo de siembra invernal, y ello por muchasy fundadas razones (SING, 1988). Evitar laFusariosis del garbanzo es una de ellas,pero este adelantamiento del cultivo, res-pecto a sanidad, no es enteramente benefi-cioso, ya que por una parte induce la apa-rición de la Rabia y las marras de nacencia(DEL MORAL, 1989, 1990); pudiendo tam-bién propiciar el desarrollo de la Botrytissp.

En la primavera de 1989, en sembradosde garbanzos, aparecieron algunas plantasmarchitas de las que se obtuvo, en labora-torio, un micelio conferible a Botrytis cine-rea. Posteriormente, en enero de 1990, alcomprobar el estado sanitario de una par-tida de semilla, pudimos observar que algu-nas de ellas presentaban el mismo incitan-te. Dichas razones nos indujeron a iniciarlos experimentos que se exponen en estetrabajo, y con el cual pretendemos, entre

otros objetivos, llamar la atención de lospatólogos mediterráneos, ya que la modifi-cación de la fitotecnia que se está consi-guiendo por los agrónomos, tal y como másadelante discutiremos, parece ser propiciaal desarrollo de la Botrytis del garbanzo.

ANTECEDENTES

Referencias a esta enfermedad en elmundo

ELLIS, en 1969, afirma que Botrytis cine-rea vive sobre el garbanzo como parásito osaprofito, desarrollándose en numerososagrosistemas donde la humedad es alta y lastemperaturas suaves. En la Universidad deManitoba (Canadá) se pudo observar, encampos experimentales cuya vegetación eralujuriante, que después de una bajada detemperatura y ambiente húmedo, las hojasde algunas plantas comenzaban a presentaramarilleamientos y, en apenas tres sema-nas, más de la mitad de ellas habían muer-to; el incitante de esta enfermedad eraB. cinerea, siendo ésta la primera cita quese hizo en Norteamérica sobre garbanzo(KHARBANDA, 1979). En India esta enfer-medad, conocida por el «Moho gris», estáconsiderada como endémica en grandesáreas, siendo muy peligrosa para el cultivodel garbanzo —en enero de 1979 destruyóc o m p l e t a m e n t e una superficie de20.000 Ha— ( C H A U B E Y , 1983; R E -WAL, 1989). En Pakistán y Bangladesh fueconsiderada como calamidad en 1980-81(LAHA, 1983). Chile, con una superficie decultivo creciendo significativamente, de-nunció la enfermedad en la temporada1982-83; a los 60 días de la siembra habíaun 20 % de plantas con síntomas, siendo deun 100 % en algunas áreas (ALVA-REZ, 1984; SEPÚLVEDA, 1984). En Anda-lucía, donde la enfermedad está registrada,por el momento carece de importancia(TRAPERO, 1986).

Síntomas

Aunque todas las partes del vegetal sonsusceptibles a la enfermedad, las alteracio-

nes morfológicas y fisiológicas de las plan-tas afectadas son muy distintas según el ini-cio de los síntomas. Cuando un tallo, a ni-vel de cuello (Fig. 1), presenta un chancro,la totalidad de la parte aérea pierde su co-lor verde y turgencia, presentando un mus-tiamiento y aspecto general amarillento(Fig. 2), siendo la evolución de los sínto-mas muy rápida; por el contrario, cuandolos órganos aéreos son invadidos individual-mente, aparecen manchas cloróticas defini-das que van evolucionando más lentamen-te a tonos oscuros (KHARBANDA, 1979; SE-PÚLVEDA, 1984). Si la infección afecta a lassemillas en el proceso de la germinación és-tas se pudren (NEERGAARD, 1988).

Etiología y epidemiología

El hongo aislado de las lesiones observa-das en las plantas enfermas es el deutero-miceto Botrytus cinerea Pers. (Fig. 3). Lasconidias, producidas por conidioforos li-bres, en cabezuela, son elipsoidales u ovoi-des, y con un tamaño de 6-18 x 4-11 um.Botrytis cinerea es el estado conidial deSclerotinia fuckeliana (De Bary) FKL, te-niendo gran facilidad para la formación deesclerocios de color negro (ELLIS, 1974,1980; SEPÚLVEDA, 1984) (Fig. 4).

Los órganos afectados, en condicioneshúmedas y frescas, producen abundantesfructificaciones del patógeno que son dis-persadas eficazmente por el viento. El mi-celio sobrevive en las semillas y así es trans-portado a grandes distancias, permanecien-do en forma de esclerosis, por largo tiem-po, en los suelos que han tenido un cultivoenfermo (ELLIS, 1974).

El porcentaje de semillas afectadas pro-vinientes de un campo enfermo es grande,pero la peligrosidad real varía con el tiem-po y la forma de almacenamiento. Despuésde un año de almacenadas las semillas in-fectadas, el micobionte pierde casi toda suviabilidad, mucho más cuando éstas hansido guardadas en sacos de tela que cuandolo han sido en sacos de polietileno(LAHA, 1983; NEEGAARD, 1988).

Fig. 1.—Planta sana y enferma por impregnación con Botrytis cinerea. En la enferma se aprecia un chancro a nivelde cuello y la pudrición del garbanzo.

(Healthy plant and diseased plant by impregnation with Botrytis cinerea. The diseased plant has a necrosis next tothe neck and the rotten seed).

Fig. 2.—Planta muy enferma mostrando fructificaciones de Botrytis cinerea como resultado de impregnar la semillaen una suspensión de esporas del hongo.

(A very damaged plant with fructifications of Botrytis cinerea. The seed was impregnated with spores from fungus).

Fig. 3.—Fructificaciones de Botrytis cinerea aisladas de garbanzos enfermos.(Conidiophore and conidium from Botrytis cinerea isolated from diseased chicpea).

Fig. 4.—Esclerocios formados en plantas afectadas con Botrytis cinerea.(Sclerotiums developed on diseased plants afectted by Botrytis cinerea).

Fig. 5.—Campo de garbanzos con un rodal de plantas muertas y enfermas de las que se aisló Botrytis cinerea.(Chicpea's field with dead and diseased plants affected by Botrytis cinerea).

Los sembrados de vegetación cerrada, sinpasillos de ventilación, son extraordinaria-mente favorecedores de la enfermedad(Fig. 5). Al principio del cultivo, de formainapreciable, se pueden producir esporasque sobreviven e inician una segunda infec-ción, en primavera, cuando el vegetal pre-senta un gran desarrollo (LAHA, 1983;NEEGAARD, 1988).

Medios de cultivo y técnicas de inoculación

El hongo, mantenido a 24 °C, crece so-bre PDA al 2 %. Al cabo de 5 días apare-cen colonias grises con abundantes fructifi-caciones; a los 20 días se producen esclero-cios globosos y negros de 2 a 6 mm (SEPÚL-VEDA, 1984). La oscuridad total induce ex-clusivamente la producción de esclerocios,mientras que bajo UV se obtiene gran can-tidad de conidias (KHARBANDA, 1979).

Las inoculaciones realizadas sobre plan-

tas con 12 días de edad, y mediante con-centraciones de 9 x 105 conidias/cc, mues-tran los primeros síntomas de la enferme-dad a los 15 días; a los 30 días todas lasplantas inoculadas presentan los síntomas(SEPÚLVEDA, 1984). En otras condicionesparecidas también se consiguen realizar losexámenes de patogenicidad, así LAHA, en1983, utiliza plantas con 21 días de edad yuna concentración de inoculo de 5 x 104

esporas/cc.

Sanidad del cultivo respectoa la enfermedad

Como fungicidas se han aplicado con éxi-to captan, TMTD, diclofluanida y benomi-lo (ELLIS, 1974); pero recientemente sehan denunciado resistencias a sistémicos,tales como benomilo, metiltiofanato y tia-bendazol (NEERGAARD, 1988).

El empleo de variedades resistentes se

presenta esperanzador después de queCHAUBEY, en 1984, y REWAL, en 1989, ha-yan encontrado dos líneas de garbanzos re-sistentes (lcclO69 y lcc6250).

MATERIAL Y MÉTODOS

Determinación específica de un aislado deBotrytis sp. afectando a un lote de semillasde garbanzo y comprobación de su poderpatógeno

Los pasos dados han sido los siguientes:1. Cultivo, en PDA, de micelios de

Botrytis sp. producidos en semillas de gar-banzo colocadas en cámara húmeda. Loscultivos se sitúan en el alféizar de una ven-tana con orientación a la umbría.

2. Esporulado el micelio realizamos unestudio morfométrico de 100 esporas. Paraello empleamos una cámara clara y un ob-jetivo 100 x.

3. Mediante agua estéril, y conidias delhongo, formamos suspensiones de las si-guientes concentraciones:

4. Inmersión de 100 semillas de garban-zo del cv. Castellano en las suspensiones a,b, c y d.

5. Todos y cada uno de los lotes de se-milla son sembrados en turba estéril y cul-tivados bajo cubierta de plástico.

6. La sanidad de los lotes de siembra sevalora a partir de los 15 días de realizadaésta.

Estudio de la sensibilidad de tres cultivaresde garbanzo a un aislado de Botrytis sp.

El procedimiento, partiendo del cultivoen PDA anteriormente descrito, ha sido elsiguiente:

1. Formamos una suspensión de espo-ras, en agua estéril, con una concentraciónde:

a: 7 x 105 esporas el 1

b: Agua estéril. Testigo

2. Inmersión de 100 semillas de garban-zo de los cv. Castellano, Blanco Lechoso yPedrosillano en las suspensiones de esporasa y b.

3. Siembra en turba estéril de las varia-bles del experimento (6 lotes de 100 semi-llas cada uno).

4. La comprobación de los resultados serealiza a partir de los 15 días de siembra.

Análisis del poder fungicida deprocimidona respecto al desarrollo de laenfermedad en garbanzos impregnados conBotrytis sp.

El desarrollo de este experimento, con elaislado de Botrytis sp., ha sido de la siguien-te forma:

1. Suspensión en agua estéril de espo-ras del hongo con una concentración de:

a: 7 x 105 esporas el"1

b: Agua estéril. Testigo

2. Inmersión de 100 semillas de garban-zo Blanco L. en la suspensiones a y b.

3. Colocación de los lotes de semillasentre papel de filtro humedecido durante 24horas, con objeto de que los promicelios delhongo se introduzcan en el interior de lostejidos seminales.

4. Impregnación o no de los garbanzoscon procimidona (3 g/kg de semilla) for-mando las siguientes combinaciones con ayb .

Variables:— Garbanzo impregnado con a + pro-

cimidona.— Garbanzo impregnado con a (Tes-

tigo).— Garbanzo impregnado con b + pro-

cimidona.— Garbanzo impregnado con b (Tes-

tigo).5. Control de la sanidad de plántulas a

partir de los 15 días.

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Fig. 6.—Potencialidad parasitaria del agrosistema extremeño en el que se cultiva el garbanzo y recomendacionessanitarias.

(Parasitic potential of chickpea cultivation in the Extremadure agrosystem. Some sanitary recommendations).

Incidencia en campo de la enfermedadrelacionada con la fecha de siembra

Aprovechando la existencia de dos cam-pos de garbanzo contiguos, con unas carac-terísticas de cultivo muy definidas y con di-ferentes intensidades de síntomas de la en-fermedad, decidimos hacer una valoraciónobjetiva de los mismos. Las característicasde las parcelas y el muestreo realizado sonlas siguientes:

Cultivar: Pedrosillano.Superficie de cultivo: 10 Ha.Comarca: Maguilla (Campiña Sur Ex-

tremeña).Campo A: Siembra el 10 de noviembre

de 1990.Campo B: Nacimiento espontáneo, pri-

mera semana de octubre, como consecuen-cia de los restos de recolección de la cose-cha anterior y mantenidos en cultivo duran-te la primavera-verano de 1991.

Valoración 2.a: Quincena de abril de1991. Determinación de la sanidad de lasplantas en 15 estaciones al azar/campo. Lasplantas se clasifican como completamentesanas o con algún tallo muerto.

RESULTADOS

Los estudios morfométricos realizadossobre el aislado de Botrytis sp. nos permi-ten conocer que sus esporas tienen unas di-m e n s i o n e s e x t r e m a s de 10,56 -16,98 x 6,68 - 9,76 (xm y unos valores me-dios de 13,37 x 8,52 um.

El poder patógeno del micobionte sobreCv. de garbanzo se evidencia en el Cua-dro 1.

Tanto en el campo, sobre plantas enfer-mas, como en los cultivos de laboratorio,hemos obtenido abundantes esclerosis.

El análisis de la sensibilidad de tres Cv.

Cuadro 1.—Poder patógeno del micobionte sobre el Cv. de garbanzo Castellano

1 x 105 esporas el7 x 105 esporas el"1

4 x 106 esporas el"1

Testigo. Agua estéril

29188

98

Resultados de impregnar semillas de garbanzos Castellano, previamente a su siembra, con distintas concentraciones deBotrytis sp.

Results of impregnated chickpea seed previously to be sown, with several concentración of Botrytis sp.

Cuadro 2.—Análisis de la sensibilidad de tres Cv. de garbanzo al aislado de Botrytis sp.

Variables

Plantas severamenteafectadas o muertas

(Few disease or deadplants)

Plantas sanas(Healthy plants)

Hongo aislado de lassemillas afectadas

(Mould isolated fromdisease plants)

Garbanzo Castellano. Impregnación (a) 100Garbanzo Castellano. Impregnación (b) 2

098

Botrytis sp.

2. Garbanzo Blanco L. Impregnación (a)Garbanzo Blanco L. Impregnación (b)

974

396

Botrytis sp.

3. Garbanzo Pedrosillano. Impregnación (a) 96Garbanzo Pedrosillano. Impregnación (b) 2

498

Botrytis sp.

(a) = 7 x 105 esporas el ' de Botrytis sp.(b) = agua estéril.Comportamiento de tres Cv. de garbanzo frente a un aislado de Botrytis sp.Behaviour of three Cv. Chickpeas whit respecto to Botrytis sp. cultivation.

de garbanzo al aislado de Botrytis sp., que-da reflejado en el Cuadro 2.

La comprobación del poder fungicida dela procimidona, como profiláctico del pato-sistema, se expresa en el Cuadro 3.

La valoración de la incidencia en campode la enfermedad, tal y como se ha descri-to en el apartado correspondiente de mate-rial y métodos, ha sido muy neta: Un 16 %de las plantas analizadas, y correspondien-tes a la siembra del 10 de noviembre de1990, manifestaban síntomas de Botrytissp., mientras que los garbanzos nacidos es-pontáneamente, en la primera semana deoctubre, tenían un 38 % de plantas en-fermas.

DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES

• El aislado de Botrytis sp., que ha ser-vido para todos los experimentos de este

trabajo, tiene unas esporas, con tales di-mensiones, que se puede conferir con ro-tundidad a la especie Botrytis cinerea Pers.

• Del cuadro 1 se puede concluir queprobablemente Botrytis cinerea es el inci-tante del patosistema aparecido en la Cam-piña Sur de Extremadura.

Una suspensión de al menos 10.000 es-poras/cc del hongo es capaz de provocar lamuerte de plantas, cuando las semillas degarbanzo son sumergidas en dicha suspen-sión.

• Los cultivares de garbanzo Castellano,Blanco Lechoso y Pedrosillano son suscep-tibles a Botrytis cinerea, sin que manifies-ten diferencias entre sí respecto al hongo.

• El fungicida procimidona ha eviden-ciado su eficacia impidiendo el desarrollode Botrytis cinerea sobre semillas de gar-banzo.

Cuadro 3.—Comprobación del poder fungicida de la procimidona, como profiláctico delpatosistema

Variables

Plantas severamenteafectadas o muertas

(Few disease or deadplants)

Plantassanas

(Healthy plants)

Semillas impregnadas con (a) + ProcimidonaSeed impregnanted with (a) + Procimidona 100

Semillas impregnadas con (a)Seed impregnanted with (a) 51 49

Semillas impregnadas con (b) + ProcimidonaSeed impregnanted with (b) + Procimidona 99

Semillas impregnadas con (b)Seed impregnanted with (b) 97

(a) = 7 x 105 esporas el ' de Botrytis sp.(b) = agua estéril.Valoración del poder fungicida de la procimidona para impedir el desarrollo de Botrytis cinerea en semillas de garbanzo.Valuation of fungicide power Procimidona to prevent the develop of Botrytis cinerea in Chikpea's seed.

• La susceptibilidad de las siembras tem-pranas al desarrollo de la enfermedad pa-rece aumentar con el adelanto de aquéllas.

La recolección mecanizada de garbanzosdeja en el suelo gran cantidad de semilla(100-150 kg/Ha). Las lluvias de otoño pro-vocan la germinación de éstas, constituyén-dose sembrados de garbanzo extratempra-nos y de gran densidad. Estas plantas vana permanecer en el terreno, ya desarrolla-das, durante mucho tiempo, justo en el mo-mento en que las condiciones bioclimáticasson favorables al desarrollo del micobion-te. Abundantes focos de plantas parasita-das por Botrytis cinerea pueden, con estesupuesto, constituirse en depósitos impor-tantes de vehiculación del patógeno en cul-tivos sucesivos, teniendo en cuenta que lassemillas afectadas, y con menos de un añode antigüedad, son focos primarios de la en-fermedad en el cultivo siguiente.

La consideración anterior, y el hecho deque este hongo forme con facilidad esclero-cios, obliga a los agricultores a diseñar la al-ternativa considerando las característicasbioclimáticas y técnicas del agrosistema, detal forma que no se provoque el desarrollode este patosistema. La figura 6 recoge es-

tos planteamientos y sugiere, como medi-das profilácticas, las siguientes recomen-daciones:

— Ajustar la fecha de las siembras ade-lantadas de garbanzo en Extremadura apartir de enero.

— No cultivar garbanzos nacidos espon-táneamente por los restos de la recoleccióndel cultivo anterior, eliminándolos prefe-rentemente mediante el redileo de ganado.

— Emplear para la siembra semillas sa-nas y con más de un año.

— En aquellos campos donde se hayadetectado la presencia de la enfermedadserá conveniente, en siembras adelantadas,impregnar la semilla con procimidona o al-gún otro específico de probada eficacia.

AGRADECIMIENTOS

A la Ayudante de Laboratorio MilagrosArenas por colaborar en los diversos expe-rimentos del trabajo y por el mecanografia-do del texto. Al empresario Lorenzo Barra-gán que ha puesto a nuestra disposicióntoda su infraestructura agropecuaria.

ABSTRACT

DEL MORAL, J.; CHICA, V.; GALLEGO, M.a; CASADO, D. (1992): Peligrosidad deBotrytis cinerea Pers, en siembras adelantadas de garbanzo en Extremadura. Bol. San.Veg. Plagas, 18 (4): 725-734.

This article reports the dangerous of Botrytis cinerea Pers, on early sown chick-pea's (36 % of disease planta during 1991 in some fields of Extremadura). Three Spa-nish cv. proved to be sensitive to pathogen. Procimidona, impregnating the seed, pre-vents the disease. Several aspects about the epidemiology are discussed and recom-mendation are given for healthy crops.

Key words: Botrytis cinerea, procimidona, chickpea.

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(Aceptado para su publicación: 30 enero 1992)