Ponencia de Sistemas de Abo -Discrepancias

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Sistemas de Grupo Sistemas de Grupo SanguineoABO,Métodos e SanguineoABO,Métodos e Interpretación,Discrepancias y Interpretación,Discrepancias y resolución. resolución. Lic.TM. Efraín Montes Hijar Hospital IV Essalud –Hyo.

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Sistemas de Grupo Sistemas de Grupo SanguineoABO,Métodos e SanguineoABO,Métodos e

Interpretación,Discrepancias y resolución.Interpretación,Discrepancias y resolución.

Lic.TM. Efraín Montes Hijar

Hospital IV Essalud –Hyo.

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GRUPOS SANGUINEOS O-A-BGRUPOS SANGUINEOS O-A-B

LOS ANTIGENOS QUE LA SANGRE POSEE SON A-B QUE SE LES LLAMA AGLUTINOGENOS.

TAMBIEN TENEMOS ANTICUERPOS QUE SON LLAMADOS AGLUTININAS,

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ANTIGENOSANTIGENOS

Los antigenos A y B son oligosacaridos complejos

Un gen H codifica para una transferasa de fucosa

Los del grupo A tienen una N-acetilgalactosamina

Los del grupo B tinenen galactosa

Los AB tienen ambas y los del grupo O ninguna.

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REACCIONES ESPERADAS PARA GRUPO ABO

Glóbulos Rojos SueroInterpretación

Grupo ABOAnti-A Anti-B Anti-A,B Cels A1 Cels A2 Cels B

0 0 0 4+ 4+ 4+ 0

4+ 0 4+ 0 0 4+ A

0 4+ 4+ 4+ 4+ 0 B

4+ 4+ 4+ 0 0 0 AB

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HEMATIESPLASMA

LECHEORINA

SECRECIONESSEROSASMUCOSAS

GLUCOLIPIDOS

GLUCOPROTEINAS

ANTIGENOS A B H

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GRUPOS SANGUINEOS IGRUPOS SANGUINEOS I

Se han descrito más de 400 antígenos eritrocitarios

Cada antígeno está definido por un anticuerpo específico que reaccionan con él

Existen antígenos de alta frecuencia, que no han sido identificado

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SISTEMA ABHSISTEMA ABH

Antígenos ABH se encuentran en Hematies, plasma, leche,secreciones,orina y mucosas

La presencia de los antígenos A,B,O depende de genes alélicos A, B, O.

El gen H situado en un locus separado codifica la sustancia sobre la que actúan los genes A y B.

Estas son unas enzimas que actúan como transferasas

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SISTEMA ABO IISISTEMA ABO II El gen H produce sustancia H

Estas enzimas(transferasas) transforman la sustancia H en antígenos A y B

El gen O es un alelo silencioso que no altera la estructura de la sustancia H

Los individuos que no tienen gen H (genotipo hh) fenotipo Bombay

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Gal NaGl Gal

Gal NaGl Gal

R

R

PRECURSOR DE TIPO I

Unión 1,3

Unión 1,4

PRECURSOR DE TIPO II

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gal NaGl gal

gal NaGl gal

Fuc

FucH tipo I

H tipo II

1,2 fucosiltransferasa

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Gal NaGlNaGl Gal

Fuc

Gal Gal NaGl Gal

Fuc

ANTIGENO A

ANTIGENO B

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DETERMINACION DETERMINACION GENETICAGENETICAA = B > 0

Genotipo AA, A0

BB, B0 AB 00

Fenotipo A B AB O

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GENOTIPOSGRUPOS

SANGUÍNEOSAGLUTINOGENOS AGLUTININAS

OOOA o AAOB o BB

AB

OAB

AB

---AB

A y B

Antina y anti-BAnti-BAnti-A

---

GRUPOS SANGUÍNEOS, GENOTIPOSAGLUTINOGENOS Y AGLUTININAS

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LOS RESULTADOS:

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GRUPOS SANGUINEOS RECEPTORES

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COMPATIBILIDAD

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FENOTIPO BOMBAYFENOTIPO BOMBAY

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Fenotipo BombayFenotipo Bombay

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SUBGRUPOS ABOSUBGRUPOS ABO

Reactividad a los antisuerosDiferencias

– Cuantitativas– Cualitativas

A1, A2, Aint, Ax, Ael, etc.B3, Bx, BelA1B, A2B

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ANTICUERPOS ABOANTICUERPOS ABO

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ANTICUERPOS ABOANTICUERPOS ABO

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SISTEMA RHESUSSISTEMA RHESUS Está constituído por 40 antígenos distintos, 5 de

ellos son importantes Existen 3 nomenclaturas: Fisher-Race, Wiener,

Glicoproteína Fisher-Race plantea que se hereda 3 genes muy

próximos D y d, C y c, E y e, cada gen codifica para un gen excepto el “ d”

La presencia o la ausencia del antígeno D determina si es Rh (+) o (-)

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SISTEMA RHESUS IISISTEMA RHESUS IIWiener plantea que se hereda gen de cada

progenitor, y estos tendrían una estructura de mosaico que comprendería un número variable de antígenos sanguíneos.

El gen R1 codificaría para C,D,e

El gen”r” codificaría para c y e, pero no para D,C ni E

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Rh

positivo

(85%)

Expresa el antígeno Den los Hematíes

Rhnegativo(15%)

No expresa el antígeno Den los hematíesej:dCe / dce

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DuDu

Es una variante débil del antígeno D, poco frecuente entre los individuos caucasoides, común en la raza negra( 22%)

Los Du dan reacciones débiles con el anti D, son detectados gracias a la prueba indirecta de la antiglobulina

Du es un Rh positivo débil pero POSITIVO

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Anticuerpos del Sistema RhAnticuerpos del Sistema Rh

Casi siempre son IgG Su producción es estimulada por transfusiones y

por el embarazo No activan el complemento porque antígeno Rh

no permite la formación de dobletes de IgG necesarios

Estos anticuerpos pueden causar reacciones transfusionales y enfermedad hemolítica del RN

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Rh(D)negativo

Rh(D)positivo

gen RHDgen RHCE

5’

5’

3’

3’

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Cromosoma 1p34-36

Organización genómica del locus RH

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D1 D2 D1 D2600 bp 1200 bp

600 bp

4 5

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

4 5

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

4 5

Método de Arce para la Método de Arce para la tipificación molecular del tipificación molecular del

antígeno Dantígeno D

Rh(D)positivo

Rh(D)negativo

600 bp

1200 bpD1 D2

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Método de Arce

1200bp

600bp

D- D+ D-

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Otros sistemas de grupoOtros sistemas de grupo

Existen otros sistemas de grupo sanguíneo, como el sistema Duffy y el sistema Kell, cuyos polimorfismos han sido también caracterizados a nivel molecular.

Se han desarrollado técnicas de tipificación molecular, basadas en estrategias de tipo PCR-ASRA o PCR-SSP, que ofrecen hoy en día una alternativa a las técnicas de tipificación clásicas mediante métodos serológicos.

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1.- La aplicación de las técnicas de Biología Molecular

en la enfermedad hemolítica del recién nacido (EHRN),

permite determinar precozmente el genotipo Rh(D) fetal

a partir de una muestra de líquido amniótico o incluso

a partir de células fetales presentes en la sangre

periférica materna, haciendo posible el planteamiento

de una estrategia profiláctica más racional.

Aplicaciones prácticas de la tipificación Aplicaciones prácticas de la tipificación molecular de los antígenos eritrocitariosmolecular de los antígenos eritrocitarios

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Aplicaciones prácticas de la tipificación Aplicaciones prácticas de la tipificación molecular de los antígenos eritrocitarios molecular de los antígenos eritrocitarios

2.- Cuando el fenotipo resulta difícilmente interpretable,

como sucede con los pacientes recientemente

transfundidos, o cuando técnicamente resulta

imposible, como en el caso de los pacientes con

anemia hemolítica autoinmune en los que no es

factible la tipificación serológica.

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3.- En el estudio de individuos con fenotipo nulo para

ciertos sistemas de grupo sanguíneo así como en el

estudio de variantes poco frecuentes.

4.- En el seguimiento del quimerismo post-transplante

de células precursoras hematopoyéticas.

Aplicaciones prácticas de la tipificación Aplicaciones prácticas de la tipificación molecular de los antígenos eritrocitariosmolecular de los antígenos eritrocitarios

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El futuro

La posibilidad de generar hematíes para detección de anticuerpos eritrocitarios utilizando antígenos recombinantes

Aplicación del conocimiento de los polimorfismos y su relación con determinadas enfermedades

Las técnicas de microseries de DNA permitiran definir el fenotipo completo de un individuo a partir de una pequeña muestra de DNA

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DISCREPANCIAS DE GRUPO DISCREPANCIAS DE GRUPO SANGUINEOSANGUINEO

DISCREPANCIA DEL GRUPO ABO

La interpretación de las pruebas de determinación del grupo hemático no concuerda con las pruebas sericas.

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DISCREPANCIAS DEL SISTEMA ABO

N Prueba Celular Prueba Serica o Inversa Posible Causas Posibles Resolucion del ProblemaAnti-A Anti-B Anti-AB Hem-A1 Hem-B Hem-O A.C Grupo

1 0 0 0 0 0 0 0

2 4+ 0 4+ 1+ 4+ 0 0

3 4+ 4+ 4+ 2+ 2+ 2+ 2+

4 3+ 4+ 4+ 1+ 0 0 0

5 0 0 0 4+ 4+ 4+ 0

6 0 0 2+ 2+ 4+ 0 07 4+ 2+ 4+ 0 4+ 0 0

8 1+ 1+ 1+ 4+ 4+ 0 0

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DISCREPANCIAS ABODISCREPANCIAS ABOSi Pba Globular y Serica: No ConcuerdanDebe InvestigarseUnidad de Sangre : No TransfundirRevisar: Historia clínica, Diagnostico,

antecedentes, etc.Son Arbitrariamente clasificadas

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CLASIFICACIONCLASIFICACION

Error Técnico Inherente a la células Inherente al suero

Grupo I: Acs Grupo II: Ags Grupo III: Proteínas Grupo IV: Mixtos

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ERRORES TECNICOSERRORES TECNICOS

Material Sucio Contaminación Suspensiones inadecuado rotulo

y/o identificación Hemólisis Centrifugación

elmer

José Gianina

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PROBLEMAS : CELULASPROBLEMAS : CELULAS

Suspensión G. Rojos Exceso proteínas Post Transfusión Sub. grupos de A, B Expresión débil Ags Infección Gram. (-) Poli aglutinación Coombs directo

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PROBLEMAS SUEROPROBLEMAS SUERO Anti-H, Anti-A1 Acs irregulares fríos Autoacs : anti-I Proteínas anormales

Rouleaux Expansores plasmáticos Ausencia de Acs

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Anormalidades en el suero que Anormalidades en el suero que causa discrepanciacausa discrepancia

Rouleaux.- Es la alteración y la

disposición que va adoptar los glóbulos rojos en forma de moneda o en fila. A veces, es fácilmente reconocible pero en otras ocasiones los agregados son irregulables

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