Diapositiva 1

1RESPUESTAS BIOQUMICO - FISIOLGICAS AL ESTRS HDRICO DE DOS VARIEDADES DE FRIJOL: RESISTENTE PINTO VILLA Y SUSCEPTIBLE BAYO MADERO

Dra. TERESA SUSANA HERRERA FLORES

13 de mayo del 2010

COLEGIO DE POSTGRADUADOS

INSTITUCIN DE ENSEANZA E INVESTIGACIN EN CIENCIAS AGRCOLAS

12JUSTIFICACINExisten indicadores fisiolgicos, morfolgicos, fenolgicos y bioqumicos relacionados con la tolerancia de las plantas a dficits hdricos, algunos son utilizados por los fitomejoradores para la seleccin de plantas tolerantes al estrs en diversos cultivos agrcolas.

Diversas investigaciones indican que para obtener variedades resistentes a un tipo de estrs, se deben identificar genotipos que posean caracteres distintivos de tolerancia (Munns, 2002; Ashraf, 2002).23El nivel de expresin de los indicadores vara dependiendo de las caractersticas de la especie, de la etapa en que se aplica el estrs y de los niveles y duracin del mismo (Hieng et al., 2004).

Los mecanismos de tolerancia a dficit hdrico son complejos y en ocasiones difciles de estudiar y de identificar ya que son diferentes entre especies y entre cultivares (Hieng et al., 2004; Meyre et al., 2001; Costa-Franca et al., 2000). 34En esta investigacin se trabaj con las variedades de frijol: Pinto Villa que es sobresaliente en diferentes condiciones ambientales (riego, sequa, enfermedades y dficit nutrimental) lo cual se manifiesta en mayor rendimiento y Bayo Madero que se considera susceptible al estrs hdrico.

A la fecha no se tienen identificadas que caractersticas bioqumicas y fisiolgicas estn relacionadas con este comportamiento y hasta que grado estn influyendo.45Caractersticas de las variedades estudiadasPinto Villa

Raza DurangoResistente a la sequaHbito de crecimiento indeterminado tipo IIITallos y ramas dbiles sin capacidad para treparFloracin 42 ddsMadurez fisiolgica 90 - 104 ddsResistente a la antracnosis, tizones bacterianos y tolerante a las pudriciones de la raz y la roya (Acosta et al., 1993; Rosales et al., 2004).

56Caractersticas de las variedades estudiadas

Bayo Madero

Raza DurangoSusceptible a la sequaHbito de crecimiento indeterminado tipo IIITallos y ramas dbiles sin capacidad para treparFloracin 35 - 44 ddsMadurez fisiolgica 79 - 112 dds.Tolerante a antracnosis, roya, y tizn de halo (Acosta et al., 1982; Rosales et al., 2004).67Objetivo general

Evaluar el efecto del dficit hdrico sobre la elongacin, acumulacin de biomasa y de compuestos bioqumicos en la radcula, y en las hojas de las variedades de frijol Pinto Villa y Bayo Madero.

Hiptesis general

El dficit hdrico tendr un efecto negativo mayor sobre la elongacin de la radcula y la acumulacin de la biomasa en las estructuras de la semilla germinada; as como en la concentracin de compuestos bioqumicos tanto en la radcula como en las hojas de la variedad Bayo Madero que en Pinto Villa. 78La presente investigacin se llev a cabo en tres fases:

1. Se estudi el efecto del estrs hdrico en la elongacin de la radcula y la acumulacin de biomasa en semillas germinadas de frijol Pinto Villa y Bayo Madero, desarrolladas en diferentes A del sustrato.

2. Se cuantific la concentracin de solutos como la prolina y los carbohidratos solubles, en la radcula de ambas variedades .

3. Se cuantific la concentracin de prolina, carbohidratos solubles y antioxidantes, en las hojas simples y en la primera y segunda hojas trifolioladas de las variedades de frijol Pinto Villa y Bayo Madero.89FASE 1

Objetivo

Evaluar el efecto del dficit de agua sobre la elongacin y acumulacin de biomasa en la radcula, y en las dems estructuras de las semillas germinadas de las variedades de frijol Pinto Villa y Bayo Madero.

Hiptesis

La elongacin y acumulacin de biomasa en la radcula bajo condiciones de estrs de humedad ser mayor en la variedad de frijol Pinto Villa con respecto a Bayo Madero, como una manifestacin del diferente grado de tolerancia a la sequa entre las dos variedades.

9101011

Preparacin de la vermiculitaSe lav con agua destiladaSe coloc en charolas de aluminioSe puso a secar a 70C, durante 72 hSe dividi en porciones de 100 g, en bolsas de plsticoSe aplicaron cantidades de agua (6, 10, 12 y 100 mL)Se dej reposar durante 72 hLos A se obtuvieron en cmaras psicromtricas y un microvoltmetro de punto de roco (-2.07, -0.56, -0.27 y -0.16 MPa)METODOLOGIA1112METODOLOGIAGerminacin y TransplanteSe germinaron 200 semillas (25 C).Pinto VillaBayo MaderoRadcula con una longitud de 3 a 5 cm, se marc con tinta china a 2 mm de distancia del pice.Trasplantaron a tubos de PVC, con vermiculita.El lugar donde se realiz el transplante se ilumin con luz verde, para evitar la estimulacin del hipoctilo.Se cubrieron con polietileno negro, para mantener constantes los A en la vermiculita y favorecer la elongacin de la radcula.

1213METODOLOGIAPinto Villa y Bayo Madero Se hicieron cuatro mediciones de longitud de radcula (24, 48, 72 y 144 h) despus del transplante.Se separaron las estructuras de las semillas: testa, cotiledn ms plmula y radcula.Se secaron a 70 C durante 72 h, para conocer la acumulacin de biomasa en cada una de ellas.Diseo experimental completamente al azar con combinacin factorial.Variedades Potenciales de agua (A)

13141415Significancia de los factores de variacin de las variables indicadasFactor de variacinglLongitud de la radculaBiomasa de la radculaBiomasa en las estructuras de la semillaVariedad1*****Tiempo3****NSA3******Var*Tiempo3NSNSNSVar*A3**NSTiem*A9****NSVar*Tiem*A9NSNSNSVar = Variedad, A = Potencial de agua, *Significativo (p0.05), **Altamente significativo (p0.01), NS = No significativo.15Longitud de radcula (cm) de Pinto Villa y Bayo Madero en cuatro potenciales de agua (A)Medias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.05)ed1617Biomasa de la radcula (mg) de Pinto Villa y Bayo Madero en cuatro potenciales de agua (A)Medias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.05)d17Porcentaje de biomasa acumulada en las estructuras de las semillas germinadas de Pinto Villa en cuatro potenciales de agua (A) a las 144 hPorcentajes calculados en base a la biomasa inicial de la semilla (450 mg), Cot + plum = Cotiledn ms plmula, Rad = radcula , PBxR= Prdida de biomasa por respiracin.18Porcentaje de biomasa en las estructuras de las semillas germinadas de Bayo Madero en cuatro potenciales de agua (A) a las 144 hPorcentajes calculados en base a la biomasa inicial de la semilla (510 mg), Cot + plum = Cotiledn ms plmula, Rad = radcula , PBxR= Prdida de biomasa por respiracin.19CONCLUSIONESEl A de mayor estrs (-2.07 MPa) afect la elongacin de la radcula y se observaron valores de 5.28 y 5.09 cm en Pinto Villa y Bayo Madero respectivamente, en comparacin con los potenciales de agua intermedios -0.27 y -0.16 MPa en los que se tuvo 14.85 cm en Pinto Villa y 12.27 cm en Bayo Madero.

Se observaron diferencias estadsticas significativas en la acumulacin de biomasa en la radcula de ambas variedades en los A de mayor estrs -2.07 MPa y menor estrs -0.16 MPa siendo Bayo Madero superior a Pinto Villa; en los A intermedios 0.52 y -0.27 MPa no hubo significancia estadstica.

20CONCLUSIONESLa proporcin de la biomasa en las estructuras de las semillas germinadas con respecto a la biomasa inicial de la semilla, fue similar en ambas variedades, aun cuando el tamao de la semilla de Bayo Madero es mayor a la de Pinto Villa.

De los resultados obtenidos en esta fase, se puede sealar que la elongacin de la radcula de las variedades, se puede considerar como un indicador relacionado con la repuesta de tolerancia al estrs hdrico y que el comportamiento de Pinto Villa en este aspecto, puede apoyar la percepcin que se tiene de esa variedad.2122FASE 2Objetivo

Estudiar el efecto del dficit hdrico sobre la concentracin de prolina y carbohidratos solubles en la RADCULA de las variedades de frijol Pinto Villa y Bayo Madero, para evaluar la importancia de estos indicadores en la tolerancia al estrs hdrico.

Hiptesis

La variedad Pinto Villa tendr mayor concentracin de prolina que Bayo Madero en condiciones limitantes de humedad.

La degradacin del almidn favorecer la sntesis de glucosa, fructosa y sacarosa y su concentracin a niveles ms altos en Pinto Villa, que en Bayo Madero. 222323METODOLOGIAPara obtener el material vegetal para la medicin de la concentracin de prolina y de los carbohidratos solubles (glucosa, fructosa, sacarosa) y almidn se utiliz el mismo procedimiento detallado en la Fase I de la presente investigacin. Los potencial de agua (A) considerados en esta fase fueron -2.07, -1.29 y -0.27 Mpa y 72 h de evaluacin. 2425METODOLOGIAPinto Villa y Bayo MaderoSe hicieron tres muestreos de radcula a las 24, 48 y 72 h despus del trasplante, en cada A, se congelaron en nitrgeno lquido (-196 C), para su anlisis qumico.

Prolina (Bates, 1973).Carbohidratos (Scholes et al., 1996).GlucosaFructosaSacarosaAlmidn

Se us un diseo experimental completamente al azar, con combinacin factorial.VariedadesPotenciales de agua (A)

2526METODOLOGIADETERMINACIN DE PROLINA (Bates, 1973)50 mg de radcula. Se molieron en 2.5 mL de Ac. sulfosaliclicoCentrifug a 11 mil g/5 min/4C2 mL sobrenadante se adicionaron 2 mL de ninhidrina cida y 2 mL Ac. actico glacialBlanco : 2 mL de Ac. sulfosaliclico, 2 mL de ninhidrina cida y 2 ml de ac. actico glacial Mezcla se coloc en tubos en una gradilla, a bao mara durante 45 min.2627METODOLOGIADETERMINACIN DE PROLINA (Bates, 1973)ContinuacinSe sumergieron en agua con hielo durante 5 a 10 min. Hasta enfriar completamenteA cada tubo se le adicionaron 4 mL de tolueno y se agitaron en un vortexLa fase superior que se form (color rojo), se separy se realizaron las lecturas en un espectrofotmetro a de 520 nm2728METODOLOGIAExtraccin azucares solubles: Glucosa, Fructosa y Sacarosa (Scholes et al., 1996)50 mg radcula se pusieron en tubos de ensayo con 3 mL de alcohol 80%. Bao mara / 10 min / 70CSe realiz 5 veces, las extracciones se pusieron en frascos de cristal y se metieron en una estufa a 50C, para su evaporacin.El tejido del cual se hicieron las extracciones, se congel para la cuantificacin de ALMIDNLo que qued en las paredes de los frascos, se resuspendi con 500 L de H20 destilada y se guard para la lectura de los azucaresCurva de calibracin con una mezcla de 15 mg de glucosa, fructosa y sacarosa, disueltos en agua destilada. Se prepar la mezcla de enzimas con HEPES (NAD, APT y G6P) para la curva de calibracin.2829METODOLOGIADETERMINACION de AZUCARES SOLUBLES: Glucosa, Fructosa y Sacarosa(Scholes et al., 1996)Se utiliz una microplaca con 72 celdas, en la cual se colocaron 230 L de la mezcla de enzimas por celdaSe aplicaron 10 L de los azucares de la radcula, excepto en la curva de calibracinGLUCOSA se agregaron 10 L de HEXOQUINASA, en la curva de calibracin y en las muestras.FRUCTOSA se agregaron 10 L de FOSFOGLUCOSA ISOMERASA (PPGI).SACAROSA se agregaron 10 L de INVERTASALa enzima se dej actuar por 20 minutos y se tom la lectura. Longitud de onda de 340 nm2930METODOLOGIACUANTIFICACIN DE ALMIDN(Scholes et al., 1996)Tejido se moli y se le adicion 1 mL de H2O destilada, se coloc en frascos de vidrio con tapa de roscaSe metieron a la autoclave / 30 min / 121CSe tomaron100 L de la muestra, se agregaron 100 L de amortiguador MES (500 mM/pH 4.5), 50 L de -amilasa y 50 L de amiloglucosidasaLa mezcla se incub durante 4.5 h a una temperatura de 37 C. Se congel para despus hacer las lecturas de almidnSe utiliz la enzima HEXOQUINASA para su lectura. A una longitud de onda de 340 nm30313132Significancia de los factores de variacin de las variables indicadasFactor de variacinglProlinaCHOs solubles (glu+fruc+sac)GluFrucSacAlmVariedad1**NSNSNS*NSTiempo2***********A2***********Var*Tiempo2***********Var*A2*******NSTiem*A4*******Var*Tiem*A4***NS****Var = Variedad, A = Potencial de agua, *Significativo (p0.05), **Altamente significativo (p0.01). NS = No significativo.32Concentracin de prolina (nmolgpf) en la radcula de Pinto Villa y Bayo Madero en tres potenciales de agua (A)Medias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.05)ab3334Concentracin de carbohidratos solubles (glucosa + fructosa + sacarosa) (mggpf) en la radcula de Pinto Villa y Bayo Madero en tres potenciales de agua (A)Medias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.01). ac34Concentracin de sacarosa (mggpf) en la radcula de Pinto Villa y Bayo Madero en tres potenciales de agua (A)Medias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.01)3536Concentracin de almidn (mggpf) en la radcula de Pinto Villa y Bayo Madero en un periodo de 72 hMedias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.01). 36CONCLUSIONESLa concentracin de prolina en la radcula de Pinto Villa fue alta y estadsticamente diferente (691.57 nmolgpf) a Bayo Madero (486.85 nmolgpf) en el A -2.07 MPa, lo que indica que su concentracin en cantidades elevadas en Pinto Villa est relacionada con la exposicin a un dficit hdrico y con la respuesta propia de la variedad que se considera resistente a la sequia.

La concentracin de almidn en la radcula de Pinto Villa disminuy por el proceso de degradacin y di lugar a la sntesis y acumulacin de azcares solubles, sacarosa, fructosa y glucosa en el potencial de -2.07 MPa.Con lo anterior se acepta la hiptesis que la variedad Pinto Villa, muestra mayor capacidad de acumular solutos que protegen a las clulas vegetales y as tolerar condiciones de dficit hdrico lo que le permite continuar con su metabolismo, en comparacin con Bayo Madero. 3738FASE 3Objetivo

Evaluar el efecto del dficit hdrico sobre la concentracin de solutos: prolina, carbohidratos solubles, cido ascrbico y la actividad de la enzima ascorbato peroxidasa en las HOJAS de las variedades de frijol Pinto Villa y Bayo Madero.

Hiptesis

El estrs de humedad provocar mayor concentracin de prolina en las hojas de Pinto Villa que en las de Bayo Madero, lo que demostrar las diferencias en tolerancia a la sequa entre las variedades. 3839Hiptesis

Pinto Villa tendr mayor concentracin de sacarosa en las hojas, causada por la degradacin del almidn con respecto a Bayo Madero.

Los niveles de cido ascrbico y la actividad de la ascorbato peroxidasa, sern mayores en Pinto Villa que en Bayo Madero, lo que justificar las diferencias en tolerancia al estrs hdrico entre ambas variedades.39404041METODOLOGIARecipientes de 0.5 y 1 kg.

Sustrato: mezcla de peat moss y tierra negra (proporcin 2:1).

Variedades Pinto Villa y Bayo Madero.

Emergencia a los 5 das despus de la siembra.

La temperatura dentro del invernadero fue de 26 y 16 C (da y noche) y la humedad relativa de 54 y 76 % (da y noche).

4142METODOLOGIAMuestreosHojas simples1 Hoja trifoliolada2 Hoja trifoliolada

Tratamientos de humedadSe aplicaron cuando las hojas respectivas se encontraron en su mxima expansin.

Riego: humedad constante.Sequa: suspensin de riego. Riego de recuperacin: se aplic despus del muestreo en sequa y 24 h despus se muestreo nuevamente.

4243METODOLOGIATratamiento de sequa

Se determin el punto de marchitez permanente (PMP) con una humedad del sustrato de 33.6%, en base a una curva de retencin de humedad.

El sustrato de las macetas de 0.5 kg alcanz el PMP a los 5 das despus de que las hojas simples se encontraban totalmente expandidas.

En las macetas de 1 kg el PMP se alcanz a los 9 das despus de que las 1 y 2 hojas trifolioladas se expandieron totalmente.

Despus de ese periodo se realiz el muestreo en el tratamiento de sequa.4344Determinacin de solutos en los tres tipos de hojas de Pinto Villa y Bayo MaderoProlina (Bates, 1973)

Carbohidratos (Scholes et al., 1996)GlucosaFructosaSacarosaAlmidn

Antioxidantescido ascrbico (Foyer et al., 1983)Ascorbato peroxidasa (Nakano y Asada, 1981; Jimnez et al., 1997)

Diseo experimental completamente al azar con combinacin factorialVariedadesTratamientos de humedadTipos de hojas4445METODOLOGIACuantificacin de Acido ascrbico (Foyer et al., 1983)Molieron 100 mg de muestra, con 1 mL de ac. perclrico (HCLO4) 1MCentrifug a 11 mil g / 10 min. 500 L del sobrenadante agregar 100 L de fosfato de sodio 120 mM, pH 7.6. El sobrenadante se neutralizSe ajust el pH con carbonato de potasio (K2CO2) 2.5 MCentrifug a 11mil g / 10 min4546METODOLOGIACuantificacin de Acido ascrbico (Foyer et al., 1983)ContinuacinAscorbato total: 100 L del sobrenadante neutralizado se agregaron 10 L de DDT 50 mM y 140 L de fosfato de sodio pH 7.6 (120 mM), la mezcla dej en obscuridad 30 min.La mezcla de reaccin consisti de 200 L de la solucin anterior ms 800 L de amortiguador de fosfato de sodio con pH 5.6 El blanco fue el amortiguador fosfato de sodio 120 mM, pH 5.6Se ley en una absorbancia de 265 nm antes y despus de la adicin de 20 l de ascorbato oxidasa (0.05 U)La diferencia entre la absorbancia inicial (sin enzima) y la final (con enzima) es el equivalente del contenido de cido ascrbico4647METODOLOGIAActividad de la enzima Ascorbato peroxidasa(Nakano y Asada, 1981; Jimnez et al., 1997)125 mg de tejido se molieron en N2 lquido y se extrajo en una proporcin de 250 L del amortiguador de fosfato de sodio 100 mM, pH 7.0, 1mM DTT, 5 mM cido ascrbicoLa extraccin se centrifug a 11 mil g /10 minutos / 4 CPara la lectura de cada muestra se aplic:4748METODOLOGIAActividad de la enzima Ascorbato peroxidasa(Nakano y Asada, 1981; Jimnez et al., 1997)Continuacin1720 L de amortiguador de fosfato de potasio 50 mM, pH 7.0, con 0.1 mM de ascorbato, 0.1 mM de EDTA, 60 L del extracto, y 220 L de perxido de hidrgeno (H2O2) 2.7 mM = volumen final 2000 LBlanco solo contena 2 mil L de amortiguador de fosfato de potasio sin cido ascrbico ni EDTA.Los amortiguadores se mantuvieron en bao mara a una temperatura entre 25 - 30CLa actividad se midi durante un periodo de 5 minutos. En una longitud de onda de 290 nm. Las lecturas fueron de mayor a menor48494950Significancia de los factores de variacin de las variables indicadasFactor de variacinglProlinaCHOs solublesGluFrucSacAlmAc ascAsc peroxVariedad1*****NS******T hum2*NS*NSNSNS***Hojas2***************Var*T hum2*NSNSNSNS***Var*Hojas2***NSNS******T hum*Hojas4************Var*T hum*Hojas4*********NS**Var = Variedad, T hum = Tratamientos de humedad (riego, sequa, riego de recuperacin), *Significativo (p0.05), **Altamente significativo (p0.01), NS=No significativo.50Concentracin de prolina (nmolgpf) en tres tipos de hojas de Pinto Villa y Bayo Madero Medias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.01)cab51Promedio de la concentracin de prolina (nmolgpf) en tres tipos de hojas de Pinto Villa y Bayo Madero en tres tratamientos de humedadMedias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.05)b52Concentracin de carbohidratos solubles (glucosa + fructosa + sacarosa) (mggpf) en tres tipos de hojas de Pinto Villa y Bayo MaderoMedias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.05)dd53Promedio de la concentracin de glucosa (mggpf) de los tres tipos de hojas y de los tres tratamientos de humedad en Pinto Villa y Bayo MaderoMedias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.01)b54Concentracin de sacarosa (mggpf) en tres tipos de hojas en Pinto Villa y Bayo MaderoMedias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.01)b55Promedio de la concentracin de almidn (mggpf) en tres tipos de hojas de Pinto Villa y Bayo Madero en los tres tratamientos de humedadMedias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.05)a56Concentracin de almidn (mggpf) en tres tipos de hojas de Pinto Villa y Bayo Madero Medias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.01)d57Promedio de la concentracin de cido ascrbico (mmolesgpf) en tres tipos de hojas de Pinto Villa y Bayo Madero en tres tratamientos de humedadMedias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.01)b58Concentracin de cido ascrbico (mmolesgpf) en tres tipos de hojas de Pinto Villa y Bayo Madero Medias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.01)bba59Promedio de la actividad de la ascorbato peroxidasa (mmolesgpfmin) de los tres tipos de hojas de Pinto Villa y Bayo Madero en tres tratamientos de humedadMedias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.05)ca60Actividad de la ascorbato peroxidasa (mmolesgpfmin) en tres tipos de hojas de Pinto Villa y Bayo Madero Medias con distinta letra son estadsticamente diferentes (Tukey, p0.05)a61CONCLUSIONESEn Pinto Villa la concentracin mayor de prolina se tuvo en la primera hoja trifoliolada (153.42 nmolgpf) en relacin a Bayo Madero (77.56 nmolgpf); en el tratamiento de sequa Pinto Villa tuvo 109.02 nmolgpf y Bayo Madero 67.45 nmolgpf.En Bayo Madero la concentracin total de los carbohidratos solubles: glucosa, fructosa y sacarosa fue mayor en la primera hoja trifoliolada que en Pinto Villa, pero la concentracin de cada uno de ellos vari entre las variedades.

En ambas variedades la concentracin de glucosa fue mayor en relacin a la sacarosa, posiblemente por el desdoblamiento de la sacarosa a hexosas, por lo que la concentracin de sacarosa fue menor. 62CONCLUSIONESPinto Villa concentr mayor cantidad de cido ascrbico que Bayo Madero en la primera hoja trifoliolada y en los tratamientos de sequa y riego de recuperacin con respecto al tratamiento de riego.

En Pinto Villa la actividad de la enzima ascorbato peroxidasa fue mayor que en Bayo Madero en los tres diferentes tipos de hojas y alcanz su valor ms alto en la segunda hoja trifoliolada.

Pinto Villa tuvo mayor actividad de la enzima ascorbato peroxidasa que Bayo Madero en los tratamientos de humedad (riego y sequa) en relacin al riego de recuperacin. 63CONCLUSIN FINALEn base a los resultados anteriores:

La variedad de frijol Pinto Villa que es considerada resistente a la sequa, mostr niveles de expresin de caracteres bioqumicos como prolina, carbohidratos solubles (sacarosa y glucosa) y antioxidantes (cido ascrbico y ascorbato peroxidasa); y la elongacin de la radcula los cuales estn relacionados con la respuesta al estrs hdrico, superiores a Bayo Madero que se considera susceptible.

Por lo tanto, dichos caracteres podran ser utilizados como criterios de seleccin por los fitomejoradores, para desarrollar variedades de frijol tolerantes a dficits hdricos.6465GRACIAS65