UNIVERSIDAD AUTNOMA

CHAPINGO

DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGA AGRCOLA

NEMATOLOGIA AGRICOLA

TRABAJO:

PRACTICA 4 EXTRACCIN DE NEMATODOS

PRESENTA:

GLVEZ FLIX ABEL

BOLAOS ZAPATA CELESTE

CRUZ JIMENEZ EDGARDO

EUDOXIO MACARIO ERASMO

ACOSTA MARTINEZ KENIA

JIMENEZ BACA ELIAS

IGNACIO GUTIERREZ JUAN PABLO

MAYORAL VASQUEZ MARCOS

LEDESMA MACIAS ANA GABRIELA

TOVAR HERNANDEZ VICTOR ULISES

OSORIO SARMIENTO CUTBERTO

SAUCEDO RUEDA ALMA LORENA

ESCOBEDO CARDENAS CASSANDRA

PROFESOR:

DR. EDILBERTO AVITIA GRACIA

CHAPINGO, MX., A 28 DE AGOSTO DEL 2015.

INTRODUCCIN

Los nemtodos son organismos fitopatgenos que pertenecen al reino Animal y

son probablemente los organismos pluricelulares ms abundantes en el mundo,

despus de los insectos. Su tamao flucta entre unas cuantas micras hasta 0.5-1

mm.

Los nemtodos son gusanos cilndricos con cuerpo alargado y delgado con

simetra bilateral. Su cutcula es lisa, no segmentados y carecen de patas u otros

apndices. Presentan todos los sistemas fisiolgicos principales de los animales

como lo son el sistema excretor, nervioso, reproductor y digestivo.

Durante el ciclo de vida de los nemtodos se llegan a presentar cinco estados y

cuatro mudas. En algunas especies de nemtodos la primera y segunda etapa

larval no puede infectar a las plantas y sus funciones metablicas son realizadas a

expensas de la energa almacenada en el huevecillo.

Los nemtodos fitopatgenos presentan gneros ectoparsitos, los cuales pasan

toda su vida en el suelo y se alimentan externamente de las races de las plantas

hospederas, por ejemplo, Cricononemoides, Hemicycliophora, Cacopaurus,etc.

Otros gneros son endoparsitos, produciendo lesiones internas en los tejidos

vegetales. Generalmente se ubican en el parnquima cortical, o bien llegan hasta

el clindro central de las races hospederas, en donde permanecen o migran

hacia otros rganos de las plantas, por ejemplo, Aphelenchoides, Anguina,

Ditylenchus, etc.

Otros gneros pasan una parte de su vida como endoparsitos y la otra parte la

pasan en el suelo que se encuentra alrededor de las races que parasitan , a estos

se les conoce como nemtodos semiendoparsitos, Algunos ejemplos de estos

son Meloidogyne, Heterodera y Tylenchus.

De los nematodos fitoparsitos, los gneros Aphelenchoides, Dytilenchus,

Meloidogyne, Xiphimena, Pratylenchus, Tylenchulus, Globodera y Heterodera,

causan prcticamente el 100% de los daos en cultivos econmicamente

rentables.

Existen muchas tcnicas diferentes para la extraccin de los nematodos del suelo.

En general, las ms utilizadas son aquellas basadas en la capacidad de los

nematodos de migrar del suelo al agua a travs de un filtro, embudo de Baermann

y bandejitas, o aquellas basadas en su densidad especfica, centrifugacin es

diferencial es en gradientes de sacarosa o sales. Una vez realizada la toma de

muestras de suelo y plantas, los nematodos deben ser extrados para su recuento.

Si este no se va a realizar inmediatamente, deben guardarse en sitio fresco hasta

su procesamiento.

OBJETIVO

Familiarizarse y dominar las diferentes tcnicas que existen para la extraccin de

nematodos del suelo en especial Fitonematodos.

MATERIALES

200 mL de muestra de suelo

Probeta de 5 L

Tamices de 400u, 325u, 200u, 100u, 60u, 35u.

Recipiente de 10 L

Cubeta

Agua de la llave

Centrifugadora

Azcar

Agua destilada

Agitador

Tubos de ensayo de plstico

METODOLOGIA PRACTICA DE TAMIZADO Y CENTRIFUGADO DE COBB

1. se coloc 200 ml de suelo en una probeta con agua 500ml.

2. se pas toda la suspensin a otro recipiente o balde y se le agregaron 2

litros ms de agua, a los cuales con las manos se desasen los terrones y s

deja sedimentar.

3. Se coloca un balde los tamices, agrupndolos de mayor a menor de la

siguiente manera de 40, 60, 100, 200, 325, siendo el de 325 el que quede

en el inferior.

4. Se basea el contenido del balde en los tamices pero dejando la tierra

sedimentada en el balde.

5. Los residuos del tamiz de 40 y 60 se desecha. El contenido del tamiz de

100 se pasa al de 200 con agua de la pipeta, de igual manera el de 200 se

pasa al de 325.

6. El contenido del tamiz se pasa a un vaso de precipitado con agua,

considero que sea poca el agua usada.

7. El contenido en el precipitado se centrifugara, el cual previamente es

pasado a los tubos de centrifugacin en 2 partes iguales del mismo peso y

se agreg 1 gramo de caoln a cada frasco y se centrifugo a 3500 rpm por 5

min

8. Los tubos posteriormente se les decanta en agua y se eliminan los residuos

con agua pero cuidando no romper la capa sedimentada

9. A los tubos limpios se les agrega una solucin azucarada de igual dejando

en igual peso cada tubo y se revuelve el contenido de los tubos

10. Los tubos son centrifugados nuevamente a 3500 rpm por 3 min

11. Al terminar de centrifugar se decanta el contenido de los tubos en un vaso

de precipitado y se observa al microscopio

RESULTADOS

TCNICA DE TAMIZADO

Agua para aforar con el suelo

Agregar el suelo para aforar

Se vaco de la probeta a la cubeta para diluir

Se vaca la mezcla a los tamices

Lavado de tamices Vaciado del ultimo tamiz a un vaso de precipitado

TECNICA DE CENTRIFUDADO

Se pesa 1 gramo de caoln y las muestras

Centrifuga Muestra que sali de la centrifuga

Muestra final lista para ser observada al microscopio

DISCUSIN

Es muy importante asegurarse de que durante todo el proceso, todos los

recipientes utilizados para cada muestra estn etiquetados de forma correcta y

consistente durante todo el proceso ya que es muy fcil cometer equivocaciones.

Las extracciones de suelo y races se deben etiquetar por separado.

Las muestras de suelo hmedo se deben mezclar muy bien antes de tomar sub-

muestras para la extraccin de los nematodos. Romper los terrones o grumos de

suelo y eliminar las piedras, races y restos vegetales. Pasar el suelo hmedo por

un tamiz con malla gruesa que se colocar sobre un recipiente adecuado y

mezclar muy bien. Tomar una sub-muestra de la mezcla con un vaso o recipiente

de volumen conocido. Separar las races del suelo y eliminar cualquier suelo

adherido a las mismas golpendolas suavemente o enjuagndolas con cuidado

bajo el grifo o en un recipiente con agua.

CONCLUSION

Los nematodos son habitantes comunes del suelo, algunos pueden tener un

efecto benfico para los ecosistemas (degradando materia orgnica, parasitando

plagas, etc.) mientras que otros son parsitos de muchos cultivos, entre ellos los

hortcolas, afectando su desarrollo, rendimiento y calidad. El anlisis de suelo es

fundamental para diagnosticar la presencia de nematodos parsitos de plantas

antes de establecer un cultivo o cuando se observan sntomas en campo. Los

sntomas producidos por nematodos no son tpicos de esta plaga (tambin podran

ser causados por otras plagas y enfermedades), por lo cual debe realizarse un

anlisis de suelo para obtener un correcto diagnstico. En un cultivo afectado

pueden observarse plantas con menor crecimiento, con acortamiento de los

entrenudos, las hojas pueden presentar amarillamiento y en algunos casos

deformaciones. a nivel subterrneo es posible observar el sistema radical

destruido, prdida de color y firmeza de los bulbos, presencia de agallas o ndulos

en las races y en los tubrculos. por todo esto se hace el muestro en campo.

BIBLIOGRAFA

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