PRÁCTICA N°1 BOTÁNICA corregida

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MANUAL DE PRÁCTICAS DE BOTÁNICA GENERAL 0 PRÁCTICA N° 01 ENSAYOS PARA EL ESTUDIO MORFOANATÓMICO DE UNA ESPECIE VEGETAL TIPOS DE CORTE Y TÉCNICAS DE TINCIÓN I. INTRODUCCIÓN Para el estudio morfo-anatómico de una especie vegetal, es fundamental una adecuada técnica de colección, herborización y conservación de las muestras a estudiar. El estudio de la estructura interna de los vegetales requiere de adecuadas preparaciones microscópicas, lo que permitirá la observación detallada de los diferentes tejidos y estructuras. Realizando buenos cortes y siguiendo los procedimientos adecuados, se podrá obtener láminas histológicas de calidad. Fig.1 Etapas del estudio morfo-anatómico de una especie vegetal Colección Herborización Clasificación taxonómica Estudio Botánico Estudio morfológico (organografía) Estudio anatómico (citología e histología) Estudio histoquímico

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PRÁCTICA N° 01

ENSAYOS PARA EL ESTUDIO MORFOANATÓMICO DE UNA ESPECIE VEGETAL TIPOS DE CORTE Y TÉCNICAS DE TINCIÓN

I. INTRODUCCIÓN

Para el estudio morfo-anatómico de una especie vegetal, es fundamental una adecuada técnica de

colección, herborización y conservación de las muestras a estudiar. El estudio de la estructura

interna de los vegetales requiere de adecuadas preparaciones microscópicas, lo que permitirá la

observación detallada de los diferentes tejidos y estructuras. Realizando buenos cortes y siguiendo

los procedimientos adecuados, se podrá obtener láminas histológicas de calidad.

Fig.1 Etapas del estudio morfo-anatómico de una especie vegetal

Colección

Herborización

Clasificación taxonómica

Estudio Botánico

Estudio morfológico (organografía)

Estudio anatómico (citología e histología)

Estudio histoquímico

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Tabla 1. Tipos de cortes histológicos

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Decolorar

Hipoclorito de sodio

50%

Lavado 1

Agua destilada 5-

6 veces

Lavado 2

Alcohol de diferente graduación: 50º, 70º y 96

Teñir

Colocar los cortes en colorante diluido de 2-5 min.

Lavado 3

Agua destilada 5-6 veces

Montar

Gelatina-Glicerina-> Esmatado

Fig. 2 Procedimiento general de técnica de tinción

fresco

safranina y verde Janus

Verde brillante

lugol

esquema

safranina

Fig. 3 Tinción de raíz de Iris florentino (lirio) con diferentes colorantes

fresco safranina

Fig. 4 Tinción de tallo de Helianthus annuus (girasol) en fresco y safranina

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II. COMPETENCIAS

Conoce las diversas técnicas de colección y herborización

Prepara cortes histológicos utilizando técnicas de tinción.

III. MATERIALES

Microscopio compuesto

Cámara fotográfica (mínimo zoom óptico 5 mpx)

Laminas portaobjetos, cubreobjetos, placa de toques, caja

porta lámina, tijeras, pinzas, frasco gotero, pincel Nº 0-1, papel lente, plumón,

indeleble, hojas de afeitar nueva (Gillete, etc), mechero de alcohol.

Reactivos: etanol 70º, 96º, alcohol isopropílico, glicerina ,hipoclorito de sodio

(lejía), esmalte transparente

Colorantes: safranina, fast green, lugol, rojo de metilo, verde Janus

Muestras vegetales :

-Hoja de eucalipto, tallo de hinojo y raíz de diente de león -Muestras colectadas en el Jardín Botánico.

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. RECOLECCIÓN, HERBORIZACIÓN Y CONSERVACIÓN

Se dará una breve explicación de las técnicas de recolección, conservación,

herborización.

2. PREPARACIÓN DE CORTES

Se trabajara la preparación de cortes con las muestras vegetales colectadas del

jardín Botánico y las solicitadas en la práctica.

Tabla 2. Preparación de cortes histológicos y técnica de tinción.

a. PREPARACIÓN DE CORTES HISTOLÓGICOS

Realizar los cortes histológicos con la técnica a mano libre, se seleccionan los cortes más finos y se colocan sobre la placa portaobjetos y se agrega 1-2 gotas de agua, luego se coloca el cubreobjetos lentamente desde un ángulo de 45º con respecto al portaobjeto para evitar la formación de burbujas de aire.

b. OBSERVACIÓN –TINCIÓN-OBSERVACIÓN

Observar al microscopio a diferentes aumentos (4X, 10X y 40X). Aplique la técnica de tinción y de montaje a los cortes de mejor calidad. Según la Fig.2

c. MONTAJE

Colocar el corte seleccionado sobre un portaobjetos (limpio y seco), agregar una gota de glicerina, deslizar el cubreobjetos y observe. Ubicar el corte seleccionado sobre la gota, pasar por la llama para evitar la formación de burbujas, deslizar el cubreobjetos, dejar secar. Quitar el excedente, limpiar y observar. Una vez fijado y realizado el montaje se procede a conservar las láminas aplicando esmalte, secar y guardar en caja portalaminas.

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Tabla 3. Tipos de cortes para diferentes de órganos vegetales

ÓRGANO TIPO DE CORTE HISTOQUÍMICA

(TÉCNICA DE TINCIÓN)

Raíz transversal fresco, safranina y lugol

Tallo transversal, longitudinal

fresco, safranina y fast green o verde janus

Hoja paradermal, transversal

fresco, safranina, rojo de metilo y lugol

Flor Paradermal, transversal y longitudinal,

fresco, safranina, lugol

Fruto paradermal , transversal, longitudinal

fresco, safranina y lugol

Semilla Raspado

fresco y lugol

V. RESULTADOS

Dibuje en la Ficha de Observaciones Nro. 1 las muestras identificadas en el microscopio y de una de las Observaciones proceda a completar el Formato de Protocolo Botánico.

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FICHA DE OBSERVACIÓN N°01

TEMA:………………………………………………………NOMBRE:……….……………………

Revisado:…………………………………. Fecha: ……………………………………….

Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:

Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:

Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:

Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:

Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:

Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:

Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:

Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:

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VI. INVESTIGACIÓN BIBLIOGRÁFICA

(Sustentar con libros, revistas científicas y bases de datos sugeridas)

1. Indique los fundamentos del microscopio electrónico y compuesto:

grafique y señale sus partes.

2. Describa brevemente las últimas técnicas de recolección de especies

vegetales.

3. Mencione mediante un cuadro 10 plantas medicinales, toxicas y/o

alimenticias endémicas o nativas del Perú, con los siguientes datos:

Nombre Común

Nombre Científico

Familia Usos Coloque autor y año de estudios botánicos

1.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Libros, revistas y manuales:

1. BRACK E., A. 1999. Diccionario enciclopédico de las plantas útiles del Perú. Edit. PNUD – CBC, Cusco – Perú.

2. CASTAÑEDA C. B, RAMOS LL. E., IBAÑEZ V. L. 2008. Evaluación de la capacidad antioxidante de plantas medicinales peruanas nativas e introducidas. Rev. Acad. Perú Salud 15(1),2008 , ISSN 1990-4614

3. ESAU, K. 2008. Anatomía vegetal. Tercera Edición. Editorial Omega. Barcelona. 4. MOSTACERO L., J. 2011. Plantas Medicinales del Perú. Primera Edición. 5. PEREZ T., E y Col. 2003. Introducción a la Biología Vegetal. Edit. UNMSM. Lima – Perú. 6. SORIA, R. 1997. Farmacobotánica. Lima 7. SORIA, R., CARHUAPOMA, M. 2005. Manual de prácticas de Botánica General y

Sistemática. Lima 8. SOUKUP, J. 1971. Vocabulario de Nombres Vulgares de Plantas Peruanas, Ed. Salesiana,

Lima. 9. THOMAS-DOMÉNECH, J.M. 1997. Atlas Temático de Botánica. Barcelona. 10. VALDIZAN H.; MALDONADO A. 1922. La Medicina Popular Peruana Imp. Torres Aguirre,

Lima.

Páginas Web

1. Plantas endémicas del Perú: http://www.regionamazonas.gob.pe/sicre/documentos/archivos/3_Especies_endemicas.pdf

2. Libro Rojo de Plantas Endémicas del Perú: http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/biologia/v13n2/contenido.htm

3. Biblioteca virtual EBSCO HOST Research Databases: http://search.ebscohost.com/ 4. Blog de la Cátedra de Botánica (Botanica FFyBB):

https://plus.google.com/u/0/+BotanicaFFyBB/posts 5. Fieldmuseum: http://fm1.fieldmuseum.org/vrrc/ 6. Raintree's Tropical Plant Database: http://www.rain-tree.com/plistbot.htm#.Ux9nDD95NPI 7. Revistas de investigación UNMSM: http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/ 8. ScienceDirect: http://www.sciencedirect.com/ 9. The Plant List: www.theplantlist.org 10. Trópicos, Missouri Botanical Garden: www.tropicos.org 11. Revista Cubana de Plantas Medicinales. http://bvs.sld.cu/revistas/pla/indice.html

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PROTOCOLO DE ANÁLISIS BOTÁNICO

TEMA DE LA PRÁCTICA:……………………………………………………………………….

Nombre común: Nombre científico: Familia:

Elaborado por (Apellidos y Nombres): Fecha: / /

Fotografías Planta completa Órgano utilizado

Lugar de origen: Habitad: Lugar de recolección:

Fotografías del corte Menor aumento

Mayor aumento Tipo de corte Coloración Aumento

Señale y dibuje el corte (sin colorear)

Menor aumento

Mayor aumento

INTERPRETACIÓN DE OBSERVACIONES

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS (aplicar normas Vancouver)