PRÁCTICA N°1 BOTÁNICA corregida
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MANUAL DE PRÁCTICAS DE BOTÁNICA GENERAL
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PRÁCTICA N° 01
ENSAYOS PARA EL ESTUDIO MORFOANATÓMICO DE UNA ESPECIE VEGETAL TIPOS DE CORTE Y TÉCNICAS DE TINCIÓN
I. INTRODUCCIÓN
Para el estudio morfo-anatómico de una especie vegetal, es fundamental una adecuada técnica de
colección, herborización y conservación de las muestras a estudiar. El estudio de la estructura
interna de los vegetales requiere de adecuadas preparaciones microscópicas, lo que permitirá la
observación detallada de los diferentes tejidos y estructuras. Realizando buenos cortes y siguiendo
los procedimientos adecuados, se podrá obtener láminas histológicas de calidad.
Fig.1 Etapas del estudio morfo-anatómico de una especie vegetal
Colección
Herborización
Clasificación taxonómica
Estudio Botánico
Estudio morfológico (organografía)
Estudio anatómico (citología e histología)
Estudio histoquímico
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Tabla 1. Tipos de cortes histológicos
MANUAL DE PRÁCTICAS DE BOTÁNICA GENERAL
1
Decolorar
Hipoclorito de sodio
50%
Lavado 1
Agua destilada 5-
6 veces
Lavado 2
Alcohol de diferente graduación: 50º, 70º y 96
Teñir
Colocar los cortes en colorante diluido de 2-5 min.
Lavado 3
Agua destilada 5-6 veces
Montar
Gelatina-Glicerina-> Esmatado
Fig. 2 Procedimiento general de técnica de tinción
fresco
safranina y verde Janus
Verde brillante
lugol
esquema
safranina
Fig. 3 Tinción de raíz de Iris florentino (lirio) con diferentes colorantes
fresco safranina
Fig. 4 Tinción de tallo de Helianthus annuus (girasol) en fresco y safranina
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II. COMPETENCIAS
Conoce las diversas técnicas de colección y herborización
Prepara cortes histológicos utilizando técnicas de tinción.
III. MATERIALES
Microscopio compuesto
Cámara fotográfica (mínimo zoom óptico 5 mpx)
Laminas portaobjetos, cubreobjetos, placa de toques, caja
porta lámina, tijeras, pinzas, frasco gotero, pincel Nº 0-1, papel lente, plumón,
indeleble, hojas de afeitar nueva (Gillete, etc), mechero de alcohol.
Reactivos: etanol 70º, 96º, alcohol isopropílico, glicerina ,hipoclorito de sodio
(lejía), esmalte transparente
Colorantes: safranina, fast green, lugol, rojo de metilo, verde Janus
Muestras vegetales :
-Hoja de eucalipto, tallo de hinojo y raíz de diente de león -Muestras colectadas en el Jardín Botánico.
IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. RECOLECCIÓN, HERBORIZACIÓN Y CONSERVACIÓN
Se dará una breve explicación de las técnicas de recolección, conservación,
herborización.
2. PREPARACIÓN DE CORTES
Se trabajara la preparación de cortes con las muestras vegetales colectadas del
jardín Botánico y las solicitadas en la práctica.
Tabla 2. Preparación de cortes histológicos y técnica de tinción.
a. PREPARACIÓN DE CORTES HISTOLÓGICOS
Realizar los cortes histológicos con la técnica a mano libre, se seleccionan los cortes más finos y se colocan sobre la placa portaobjetos y se agrega 1-2 gotas de agua, luego se coloca el cubreobjetos lentamente desde un ángulo de 45º con respecto al portaobjeto para evitar la formación de burbujas de aire.
b. OBSERVACIÓN –TINCIÓN-OBSERVACIÓN
Observar al microscopio a diferentes aumentos (4X, 10X y 40X). Aplique la técnica de tinción y de montaje a los cortes de mejor calidad. Según la Fig.2
c. MONTAJE
Colocar el corte seleccionado sobre un portaobjetos (limpio y seco), agregar una gota de glicerina, deslizar el cubreobjetos y observe. Ubicar el corte seleccionado sobre la gota, pasar por la llama para evitar la formación de burbujas, deslizar el cubreobjetos, dejar secar. Quitar el excedente, limpiar y observar. Una vez fijado y realizado el montaje se procede a conservar las láminas aplicando esmalte, secar y guardar en caja portalaminas.
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Tabla 3. Tipos de cortes para diferentes de órganos vegetales
ÓRGANO TIPO DE CORTE HISTOQUÍMICA
(TÉCNICA DE TINCIÓN)
Raíz transversal fresco, safranina y lugol
Tallo transversal, longitudinal
fresco, safranina y fast green o verde janus
Hoja paradermal, transversal
fresco, safranina, rojo de metilo y lugol
Flor Paradermal, transversal y longitudinal,
fresco, safranina, lugol
Fruto paradermal , transversal, longitudinal
fresco, safranina y lugol
Semilla Raspado
fresco y lugol
V. RESULTADOS
Dibuje en la Ficha de Observaciones Nro. 1 las muestras identificadas en el microscopio y de una de las Observaciones proceda a completar el Formato de Protocolo Botánico.
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FICHA DE OBSERVACIÓN N°01
TEMA:………………………………………………………NOMBRE:……….……………………
Revisado:…………………………………. Fecha: ……………………………………….
Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:
Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:
Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:
Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:
Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:
Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:
Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:
Nombre común: Nombre científico: Muestra: Corte: Tinción: Aumento: Descripción:
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VI. INVESTIGACIÓN BIBLIOGRÁFICA
(Sustentar con libros, revistas científicas y bases de datos sugeridas)
1. Indique los fundamentos del microscopio electrónico y compuesto:
grafique y señale sus partes.
2. Describa brevemente las últimas técnicas de recolección de especies
vegetales.
3. Mencione mediante un cuadro 10 plantas medicinales, toxicas y/o
alimenticias endémicas o nativas del Perú, con los siguientes datos:
Nombre Común
Nombre Científico
Familia Usos Coloque autor y año de estudios botánicos
1.
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Libros, revistas y manuales:
1. BRACK E., A. 1999. Diccionario enciclopédico de las plantas útiles del Perú. Edit. PNUD – CBC, Cusco – Perú.
2. CASTAÑEDA C. B, RAMOS LL. E., IBAÑEZ V. L. 2008. Evaluación de la capacidad antioxidante de plantas medicinales peruanas nativas e introducidas. Rev. Acad. Perú Salud 15(1),2008 , ISSN 1990-4614
3. ESAU, K. 2008. Anatomía vegetal. Tercera Edición. Editorial Omega. Barcelona. 4. MOSTACERO L., J. 2011. Plantas Medicinales del Perú. Primera Edición. 5. PEREZ T., E y Col. 2003. Introducción a la Biología Vegetal. Edit. UNMSM. Lima – Perú. 6. SORIA, R. 1997. Farmacobotánica. Lima 7. SORIA, R., CARHUAPOMA, M. 2005. Manual de prácticas de Botánica General y
Sistemática. Lima 8. SOUKUP, J. 1971. Vocabulario de Nombres Vulgares de Plantas Peruanas, Ed. Salesiana,
Lima. 9. THOMAS-DOMÉNECH, J.M. 1997. Atlas Temático de Botánica. Barcelona. 10. VALDIZAN H.; MALDONADO A. 1922. La Medicina Popular Peruana Imp. Torres Aguirre,
Lima.
Páginas Web
1. Plantas endémicas del Perú: http://www.regionamazonas.gob.pe/sicre/documentos/archivos/3_Especies_endemicas.pdf
2. Libro Rojo de Plantas Endémicas del Perú: http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/biologia/v13n2/contenido.htm
3. Biblioteca virtual EBSCO HOST Research Databases: http://search.ebscohost.com/ 4. Blog de la Cátedra de Botánica (Botanica FFyBB):
https://plus.google.com/u/0/+BotanicaFFyBB/posts 5. Fieldmuseum: http://fm1.fieldmuseum.org/vrrc/ 6. Raintree's Tropical Plant Database: http://www.rain-tree.com/plistbot.htm#.Ux9nDD95NPI 7. Revistas de investigación UNMSM: http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/ 8. ScienceDirect: http://www.sciencedirect.com/ 9. The Plant List: www.theplantlist.org 10. Trópicos, Missouri Botanical Garden: www.tropicos.org 11. Revista Cubana de Plantas Medicinales. http://bvs.sld.cu/revistas/pla/indice.html
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PROTOCOLO DE ANÁLISIS BOTÁNICO
TEMA DE LA PRÁCTICA:……………………………………………………………………….
Nombre común: Nombre científico: Familia:
Elaborado por (Apellidos y Nombres): Fecha: / /
Fotografías Planta completa Órgano utilizado
Lugar de origen: Habitad: Lugar de recolección:
Fotografías del corte Menor aumento
Mayor aumento Tipo de corte Coloración Aumento
Señale y dibuje el corte (sin colorear)
Menor aumento
Mayor aumento
INTERPRETACIÓN DE OBSERVACIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS (aplicar normas Vancouver)