Practica Nº 12
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PRACTICA Nº 14
PIGMENTOS ANTOCIANINAS Y SU ESTABILIDAD
INTRODUCCIÓN
El principio del colorante de maíz morado, se basa en la existencia de
antocianina, la que se encuentra en mayor cantidad en la coronta y menos
proporción en el pericarpio (cascara),es el grupo mas importante de compuestos
hidrosolubles ,responsables del colores rojos , purpura y azul que se aprecian
también en flores, frutos y otras partes de las plantas (BRAVERMAN, 1980)
La utilización de estos compuestos como pigmentos en alimentos ha estado
imitada por su susceptibilidad, entre otros factores ,al pH y alta temperatura .De
acuerdo al valor de pH, se presenta una variación de color que adquieren las
antocianinas cuando están en solución ,por consiguiente ,es posible observar un
color rojo a anaranjado a pH acido aproximadamente 2 ó menor, un color azuloso
a pH entre 2 y 4 ,predominado la base quinoidal, con un pH de 5 la antocianina es
incolora y presenta la pseudo base carbinol; si el pH es de 6 se tiene pseudo base
chalcona , que es también incolora .y cuando el pH se incrementa por arriba de
7,la antocianina se degrada de forma irreversible (SALINAS,2000)
Los principales factores que gobiernan la degradación de antocianinas son el pH,
la temperatura y la concentración del oxigeno .Los pigmentos antocianinas son
relativamente inestables y la estabilidad ocurre en condiciones ácidas .En el caso
de las betalainas presentes en el jugo de beterraga no se ve afectado por el pH,
contrariamente de las antocianinas presentes en el maíz morado.
Los tratamientos térmicos también influyen mucho en la destrucción de la
antocianina; se ha visto la pérdida del color puede degradar calentando a
diferentes condiciones y almacenando .Los sistemas de alta temperatura y corto
tiempo son mas adecuados para conservar el color de los alimentos. (BADUI,
1995).
I. OBJETIVOS
Determinar el contenido de antocianinas en mg/Lt en coronta y grano de
maíz morado.
Evaluar el efecto del pH y temperatura en pigmentos de antocianinas y
betalainas.
II. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
Betalaínas: colorantes naturales con actividad antioxidante.
A raíz de la creciente preocupación por posibles efectos tóxicos de los colorantes
sintéticos, se postulan como posibles reemplazantes a los pigmentos de origen
natural. En este artículo se resumen los aspectos más importantes de las
ventajas y características de las betalaínas, pigmentos hidrosolubles extraídos
de la remolacha en primer lugar, proponiendo como fuente alternativa muy
interesante a frutos de algunas especies de cactus. La información proviene
mayormente de una revisión que se publicó en el Journal of Agriculture and Food
Chemistry y algunas otras publicaciones citadas que han aparecido en
revistas científicas en las últimassemanas. Son muy pocos los alimentos
industrializados que no tienen colorantes. El color es Considerado un
importante atributo de un alimento, aumentandosu atractivo o más aún,
vinculándolo con su calidad
¿Por dónde empezar a buscar colorantes naturales? Lógicamente se buscan entre
los diversos
“pigmentos” conocidos. Entre los hidrosolubles encontramos las antocianinas, las
betalaínas y
el ácido carmínico, mientras que los carotenoides y las clorofilas son liposolubles.
Hay abundante literatura sobre los carotenoides y las antocianinas, y
de hecho, los carotenoides ya se emplean como colorantes. En cuanto a
las antocianinas, también se utilizan en los alimentos debido a que están
presentes en todo tipo de bayas (arándanos,frambuesas, frutillas, etc)
caracterizadas por sus colores rojizos, azulados, pasando por toda la
gama de violetas. Tanto en un caso como otro, se a probado su actividad
antioxidante y en el caso de antocianinas muchas otras bioactividades derivadas
o no de dicha característica.
Las betalaínas en cambio, son menos conocidas, probablemente por su
relativa escasez natural. Sin embargo, constituyen indudablemente una opción
interesante dado su gama de colores, desde el anaranjado amarillento al rojo
violáceo. Por otra parte hay evidencia
creciente de interesantes actividades biológicas, entre ellas su actividad
antioxidante.
III. MATERIALES Y MÉTODOS
III.1 MATERIALES
a) Muestra en estudio
Maíz morado y beterraga (100gr por cada material vegetal)
b) Materiales vidrio y otros
10 Unid de tubos de ensayo
04 Fiolas de 50ml
04 Unid de pipetas de 10ml
14vasos de 100ml
02vasos de 500ml
04atraces de 250ml
04embudos
02vagetas
02 hornillas eléctricas
02 mallas de asbesto
c) Equipos
Balanza analítica
espectrofotómetro
d) Reactivos
Buffer de pH 1.0
Buffer de pH 4.5
HCl concentrado
III.2 MÉTODOS
El experimento consistira en 3 partes:
a) Obtención de extracto de antocianinas en el maiz morado
El extracto se obtendrá de forma independiente de granos y corontas. En el
caso de los granos fueron sumergidos en una proporción de 50gr de maíz
en grano más 600ml de agua ajustada a un pH de 2.1 con HCl. Ambas
muestras se llevaron a cabo a ebullición por espacio de 30min
aproximadamente. Luego se filtrara. Obteniendo el extracto.
b) Determinación cuantitativa de antocianinas
c) Se medirá la absorvancia del grano de maíz, extractó de coronta y granos
en soluciones buffer(pH 1y 4,5) de la siguiente forma:
Preparar 04fiolas de 50ml, adicionar a cada una de ellas 500 µL DE
extractó .seguidamente adicionar el buffer de pH 1 a dos A dos
fiolas hasta enrrazar y las otras dos buffer de pH 4.5 de igual forma .
Se dejara reposar por 15 minutos en oscuridad .Las lecturas se
harán seguidamente a 510nm y a 700nm para corregir por
turbidez .se utilizara como blanco agua destilada .si las
absorvancias en las longitudes de onda son mayores a 0.8 re diluir
la muestra a ensayar de nuevo.
Para efectos de los cálculos se utilizara la siguiente ecuación:
IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Antocianinas monoméricas por el método pH diferencial
El principio de este método se basa en el cambio reversible del color con el pH, de
los pigmentos monoméricos .
A pH 1 la antocianina está en su forma oxonio o catión flavilio
En soluciones acuosas a valores de pH inferiores a 2, básicamente la totalidad del
pigmento se encuentra en su forma más estable de ion oxonio o catión flavilio de
color rojo intenso.
A pH 4,5 la antocianina esta en su forma hemiacetal (incolora).
A valores de pH más altos ocurre una pérdida del protón y adición de agua en la
posición 2, dando lugar a un equilibrio entre la pseudobase carbinol o hemicetal y
la forma chalcona, o de cadena abierta. Tanto el hemicetal como la chalcona, son
formas incoloras y bastante inestables. A valores de pH superiores a 7 se
presentan las formas quinoidales de color púrpura que se degradan rápidamente
por oxidación con el aire.
ABSORBANCIA = (A 510 - A 700) pH1 – (A 510 - A 700) pH4, 5
1) CUADRO Nº1 : CHICHA MORADA COMERCIAL
pH = 1.0 pH = 4.5A 510 A 700 A 510 A 700
R1 0,233 0,005 0,053 0,008
1muestra R2 0,245 0,008 0,05 0,006
X 0,239 0,0065 0,0515 0,007Absorvancia
1 0,188
R1 0,403 0,004 0,061 0,005
2muestra R2 0,399 0,004 0,056 0,005
X 0,401 0,004 0,0585 0,005Absorvancia
2 0,3435
V. CONCLUSIÓN
pH. Uno de los problemas mayores que tienen los colorantes naturales de
pigmentos hidrosolubles
Las antocianinas han demostrado ser muy lábiles en medio
ácido, hidrolizándose rápidamente. En el caso de las betalaínas, al ser
ionizables en medio ácido, sufren cambios de color tanto a un pH por debajo de
4.5 pero no se hidrolizan por lo cual se pueden utilizar para alimentos ácidos.
La antocianina es mas establea un ph1 en su forma de oxonio
Temperatura. Indudablemente es el factor que mas afecta la estabilidad de
las betalaínas y antocianinas acelerando las reacciones de hidrólisis que dan
como productos el ácido betalámico incoloro y otros productos de color marrón
VI. CUESTIONARIO
1) Explicar el efecto de pH al color de las antocianinas
Las antocianinas actúan como indicadores de acido base puesto que el color
resultante esta en función de la estructura que se encuentre en mayor proporción
a determinado pH ,a pH muy bajos se forma oxnium es de color rojo ,a medida
que aumenta el pH se forma la base quinoidal de color azul, en un medio alcalino ,
aparece el carbinol incoloro ,en condiciones básicas fuertes (pH 7) se produce
daño irreversible en el pigmento con la aparición de un chalcona de color amarillo
pálido.
2) ¿Qué alimentos son fuentes de antocianinas y betalainas?
Están presentes en todo tipo de bayas (arándanos, frambuesas, maíz morado,
fresas, uvas, frutillas, etc.) caracterizadas por sus colores rojizos, azulados,
pasando por toda la gama de violetas.
Las betalaínas se encuentran en raíces, frutos y flores. Pocas fuentes conocidas
comestibles de betalaínas son las remolachas (también conocida como betarraga)
rojas y amarillas: (Beta vulgaris L. ssp. Vulgaris), la acelga suiza (Beta
vulgaris L. ssp. Cicla), el amaranto de hoja o cerealero (Amaranthus sp) y
frutos de cactus tales como los del género de la Opuntia y del Hylocereus. Se han
empezado a explorar fuentes alternativas entre géneros de la familia
Cactáceas, y los frutos de dos de ellos, la pera de cactus, o tuna de diversas
especies del género Opuntia y las pitayas de los géneros Cereus, Hylocereus y
Selenicereus, se cultivan por su valor alimenticio.
http://profitocoop.com.ar/articulos/Betala%EDnas.pdf
http://catarina.udlap.mx/u_dl_a/tales/documentos/lia/acevedo_c_ar/capitulo4.pdf
3) ¿Qué métodos podría recomendar para cuantificar betalainas?
VII. BIBLIOGRAFÍA
1. BRAVERMAN, J. 1980.introduccion a la bioquímica de los alimentos
editorial el manual moderno, S.A.de C.V. México.
2. CHEFTEL, J: Y LORIENT, D. S.A. “Proteínas alimentarías. Bioquímica -
Propiedades Funcionales – Valor nutricional – Modificaciones Químicas”. Editorial
Acribia SA Zaragoza .España.
3. FENNEMA, O.2000..Química de los alimentos. – ED .Acribia, España-1095pp.
4. FERNANDEZF. 1995. estudio de la extracción y purificación de
antocianinas del maíz morado .tesis para optar el grado de ingeniero en
industrias alimentarias. UNALM.
5. SALINAS, Y.2009 extracción y uso de pigmentos del grano de maíz (ZEA
MAYS .L) como colorantes en yogurt”. laboratorio de mayz. INIFAP .Depto. de
ingeniería Agroindustrial .universidad autónoma de chapingo. chapingo, méx.