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“EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE PÉPTIDOS SOBRE BACTERIAS AISLADAS DE PIE DIABÉTICO” Yareli Morales guzmán 1 y Alexis J. Rodríguez Solís 21 Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma del Estado de Morelos. 2 Centro de Investigación en Biotecnología, Universidad Autónoma del Estado de Morelos. En el mundo se estima que alrededor de 382 millones de personas padecen Diabetes, La constante aparición de cepas bacterianas con resistencia a antibióticos ha motivado la búsqueda de agentes antimicrobianos con mecanismos de acción diferentes a los convencionales, entre los cuales podemos encontrar como candidatos a los péptidos antimicrobianos, su potencial radica en que se han registrado pocos eventos de resistencia a su acción, por lo que se les ha propuesto como alternativas para el tratamiento de infecciones ocasionadas por bacterias con multiresistencia al efecto de antibióticos comerciales. o Conclusión Staphylocuccos aureus presento un efecto bactericida en presencia del parental Pin2 y sus diferentes variantes, mientras que para Pseudomona aeruginosa UDP12 y UDP13 no presento un efecto bactericida como se esperaba. Agradecimientos Se agradece ampliamente al Dr. Gerardo A. Corzo Burguete del Instituto de Biotecnología-UNAM, por la donación de los péptidos antimicrobianos evaluados en este trabajo y a la Dra. Elba C. Villegas Villarreal, del Centro de Investigación en Biotecnología-UAEM por facilitar las cepas bacterianas multirresistentes utilizadas en este trabajo. Referencias Federación Internacional de Diabetes (2013). Atlas de la Diabetes de la FID. 6ta Edición. [Recuperado el 16 de julio de 2015]. http://www.idf.org/diabetesatlas . Secretaría de Salud (2013). Boletín del Sistema de Vigilancia Epidemiológica Hospitalaria de Diabetes Tipo 2. [Recuperado el 16 de julio de 2015]. http://www.epidemiologia.salud.gob.mx/doctos/infoepid/bol_diabetes/dm2_bol1_2013.pdf . Instituto Nacional de Estadística, Geografía e Informática (2013). Boletín de Estadísticas vitales 2011. [Recuperado el 16 de julio de 2015]. http://www3.inegi.org.mx/sistemas/biblioteca/ficha.aspx?upc=702825047429 . Instituto Nacional de Salud Pública (2013). Encuesta Nacional de Salud y Nutrición 2012. Resultados por entidad federativa, Morelos. [Recuperado el 16 de julio de 2015]. http://ensanut.insp.mx/informes/Morelos-OCT.pdf .Rodríguez, A., Villegas, E., Montoya-Rosales, A., Rivas-Santiago, B., & Corzo, G. (2014b). Characterization of Antibacterial and Hemolytic Activity of Synthetic Pandinin 2 Variants and Their Inhibition against Mycobacterium tuberculosis. Rodríguez, A., Villegas, E., Satake, H., Possani, L. D., & Corzo, G. (2011). Amino acid substitutions in an alpha-helical antimicrobial arachnid peptide affect its chemical properties and biological activity towards pathogenic bacteria but improves its therapeutic index. Amino Acids, 40(1), 61-68. MATERIAL Y METODOS RESULTADOS Y DISCUSION INTRODUCCIÓN OBJETIVO . JUSTIFICACIÒN HIPÓTESIS una de las complicaciones más importantes de esta enfermedad son las úlceras del pie diabético (UPD), debido a que causa una alta tasa de amputaciones o inclusive la muerte por complicaciones ocasionadas por la infecciones a los pacientes que la padecen. La infección presente en las UPD es polibacteriana, incluyendo tanto bacterias Gram positivas como Gram negativas. Entre las especies bacterias reportadas en UPD, Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa destacan como las más importantes. El tratamiento de UPD es complicado, debido a que requiere la combinación de diferentes antibióticos y su efectividad se ve disminuida cuando estas infecciones presentan bacterias multirresistentes a los antibióticos. Por esta razón es necesario el desarrollo de nuevas alternativas para su tratamiento, los péptidos antimicrobianos se plantean como una posible solución a este problema. En este trabajo las actividades antimicrobianas de siete péptidos sintéticos, derivados del péptido antimicrobiano Pandinina 2 (Pin2) caracterizado del veneno del escorpión africano Pandinus imperator, fueron evaluadas sobre cepas de S.aureus y P. aeruginosa aisladas de UPD. Figura 2: Escala de Wagner Figura 3. Mecanismo general de acción de los antibióticos sobre las membranas bacterianas (Rodríguez, et al., 2014b). Figura 3. Mecanismo general de acción de los péptidos antibióticos sobre las membranas bacterianas (Rodríguez, et al., 2014b). Figura 1. Incidencia de la diabetes a nivel mundial y su distribución por regiones (FID, 2013). 0 2 4 6 8 10 12 0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 Tiempo [h] D.O. [595 nm] 0.0 M 1.6 M 3.2 M 6.3 M 12.5 M 25.0 M 0 2 4 6 8 10 12 0.0 0.1 0.2 0.3 Tiempo [h] D.O. [595 nm] 0.0 M 1.6 M 3.2 M 6.3 M 12.5 M 25.0 M 0 2 4 6 8 10 12 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 Tiempo [h] D.O. [595 nm] 0.0 M 1.6 M 3.2 M 6.3 M 12.5 M 25.0 M 0 2 4 6 8 10 12 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 Tiempo [h] D.O. [595 nm] 0.0 M 1.6 M 3.2 M 6.3 M 12.5 M 25.0 M A B C D Cepa bacteriana Péptido E. coli ATCC 25923 E. Coli ATCC 25923 S. aureus UPD3 S.aureus ATCC 25923 P. aeruginosa UPD12 P. aeruginosa ATTC9027 P. aeruginosa UPD13 P. aeruginosa ATTC9027 Pin 2 6.3 Bc 18.8 Bc 1.6 Bc 37.5 Bc 37.5 Bc 25 Bt 12.5 Bt 25 Bt 12.5 Bt Pin 2 [G] 3.2 Bc 12.5 Bc 1.6 Bc 12.5 Bc 25 Bt 12.5 Bt 25 Bt 12.5 Bt Pin 2 [V] 25 Bc N.E 3.2 Bc N.E 25 Bt N.E 25 Bt N.E Pin 2 [GV] 12.5 Bc >300 Bc 6.3 Bc >300 25 Bt N.D N.E N.D Pin 2 [VG] 6.3 Bc >300 Bc 3.2 Bc >300 25 Bt N.D 25 Bt N.D Pin 2 [GVG] 3.2 Bc N.D 3.2 Bc 75 Bc 25 Bt N.D 25 Bt N.D Pin 2 [GPG] 6.3 Bc 37.5 Bc 1.6 Bc 25 Bc 25 Bt 100 B 25 Bt 100 Bt Bc: Bactericida/concentración mínima inhibitoria [μM] Bt: Efecto bacteriostático [μM] NE: No presentó efecto ND:No determinado Tabla 1: Concentración inhibitoria mínima de los péptidos con mayor efecto sobre las diferentes cepas. Figura 6: A) pertenece a E.coli, B) S.aureus, C)P.aeruginosa UDP12 y D)P.aeruginosa UDP13. Las variantes del péptido antimicrobiano Pin2 tendrán un efecto inhibitorio del crecimiento de las bacterias multirresistentes aisladas de UPD. Evaluar el efecto de variantes del péptido antimicrobiano Pin2 sobre el crecimiento de cepas bacterianas multirresistentes aisladas de UPD.

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Page 1: Presentación de PowerPointgaleria.uaem.mx/sites/default/files/obras/texto/B 2_Morales_científico.pdf · polibacteriana, incluyendo tanto bacterias Gram positivas como Gram negativas.

una de las complicaciones más

importantes de esta enfermedad

son las úlceras del pie diabético

(UPD), debido a que causa una alta

tasa de amputaciones o inclusive la

muerte por complicaciones

ocasionadas por la infecciones a

los pacientes que la padecen.

“EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE PÉPTIDOS SOBRE BACTERIAS AISLADAS DE PIE DIABÉTICO”

Yareli Morales guzmán1 y Alexis J. Rodríguez Solís21 Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma del Estado de Morelos.2

Centro de Investigación en Biotecnología, Universidad Autónoma del Estado de Morelos.

En el mundo se estima que alrededor de 382 millones de personas padecen Diabetes,

La constante aparición de cepas bacterianas con resistencia a antibióticos ha motivado labúsqueda de agentes antimicrobianos con mecanismos de acción diferentes a losconvencionales, entre los cuales podemos encontrar como candidatos a los péptidosantimicrobianos, su potencial radica en que se han registrado pocos eventos deresistencia a su acción, por lo que se les ha propuesto como alternativas para eltratamiento de infecciones ocasionadas por bacterias con multiresistencia al efecto deantibióticos comerciales.

• o

Conclusión

Staphylocuccos aureus presento un efecto bactericida en presencia del parental Pin2 ysus diferentes variantes, mientras que para Pseudomona aeruginosa UDP12 y UDP13 nopresento un efecto bactericida como se esperaba.

Agradecimientos

Se agradece ampliamente al Dr. Gerardo A. Corzo Burguete del Instituto de Biotecnología-UNAM, por la donación de los péptidos antimicrobianos evaluados en este trabajo y a la Dra. Elba C. Villegas Villarreal, del Centro de Investigación en Biotecnología-UAEM por facilitar las cepas bacterianas multirresistentes

utilizadas en este trabajo.

Referencias

• Federación Internacional de Diabetes (2013). Atlas de la Diabetes de la FID. 6ta Edición. [Recuperado el 16 de julio de 2015]. http://www.idf.org/diabetesatlas.

• Secretaría de Salud (2013). Boletín del Sistema de Vigilancia Epidemiológica Hospitalaria de Diabetes Tipo 2. [Recuperado el 16 de julio de 2015]. http://www.epidemiologia.salud.gob.mx/doctos/infoepid/bol_diabetes/dm2_bol1_2013.pdf.

• Instituto Nacional de Estadística, Geografía e Informática (2013). Boletín de Estadísticas vitales 2011. [Recuperado el 16 de julio de 2015].

• http://www3.inegi.org.mx/sistemas/biblioteca/ficha.aspx?upc=702825047429.

• Instituto Nacional de Salud Pública (2013). Encuesta Nacional de Salud y Nutrición 2012. Resultados por entidad federativa, Morelos. [Recuperado el 16 de julio de 2015]. http://ensanut.insp.mx/informes/Morelos-OCT.pdf

•.Rodríguez, A., Villegas, E., Montoya-Rosales, A., Rivas-Santiago, B., & Corzo, G. (2014b). Characterization of Antibacterial and Hemolytic Activity of Synthetic Pandinin 2 Variants and Their Inhibition against Mycobacterium tuberculosis.

• Rodríguez, A., Villegas, E., Satake, H., Possani, L. D., & Corzo, G. (2011). Amino acid substitutions in an alpha-helical antimicrobial arachnid peptide affect its chemical properties and biological activity towards pathogenic bacteria but improves its therapeutic index. Amino Acids, 40(1), 61-68.

MATERIAL Y METODOS

RESULTADOS Y DISCUSION

INTRODUCCIÓN

OBJETIVO.

JUSTIFICACIÒN

HIPÓTESIS

una de las complicaciones más

importantes de esta enfermedad son

las úlceras del pie diabético (UPD),

debido a que causa una alta tasa de

amputaciones o inclusive la muerte

por complicaciones ocasionadas por

la infecciones a los pacientes que la

padecen.

La infección presente en las UPD es

polibacteriana, incluyendo tanto bacterias

Gram positivas como Gram negativas. Entre

las especies bacterias reportadas en UPD,

Staphylococcus aureus y Pseudomonas

aeruginosa destacan como las más

importantes. El tratamiento de UPD es

complicado, debido a que requiere la

combinación de diferentes antibióticos y su

efectividad se ve disminuida cuando estas

infecciones presentan bacterias

multirresistentes a los antibióticos.

Por esta razón es necesario el desarrollo de

nuevas alternativas para su tratamiento, los

péptidos antimicrobianos se plantean como

una posible solución a este problema. En

este trabajo las actividades antimicrobianas

de siete péptidos sintéticos, derivados del

péptido antimicrobiano Pandinina 2 (Pin2)

caracterizado del veneno del escorpión

africano Pandinus imperator, fueron

evaluadas sobre cepas de S.aureus y P.

aeruginosa aisladas de UPD.

Figura 2: Escala de Wagner

Figura 3. Mecanismo general de acción de los antibióticos sobre las membranas bacterianas (Rodríguez, et

al., 2014b).

Figura 3. Mecanismo general de acción de los péptidos antibióticos sobre las membranas bacterianas (Rodríguez, et al., 2014b).

Figura 1. Incidencia de la diabetes a nivel mundial y su distribución por regiones (FID, 2013).

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A B

C D

Cepa bacteriana

Péptido E. coli

ATCC 25923

E. Coli

ATCC 25923

S. aureus

UPD3

S.aureus

ATCC 25923

P. aeruginosa

UPD12

P. aeruginosa

ATTC9027

P. aeruginosa

UPD13

P. aeruginosa

ATTC9027

Pin 2 6.3Bc 18.8Bc 1.6 Bc

37.5Bc

37.5Bc 25Bt 12.5Bt 25 Bt 12.5Bt

Pin 2 [G] 3.2 Bc 12.5Bc 1.6 Bc 12.5Bc 25 Bt 12.5Bt 25 Bt 12.5Bt

Pin 2 [V] 25 Bc N.E 3.2 Bc N.E 25 Bt N.E 25 Bt N.E

Pin 2 [GV] 12.5 Bc >300Bc 6.3 Bc >300 25 Bt N.D N.E N.D

Pin 2 [VG] 6.3 Bc >300Bc 3.2 Bc >300 25 Bt N.D 25 Bt N.D

Pin 2 [GVG] 3.2 Bc N.D 3.2 Bc 75Bc 25 Bt N.D 25 Bt N.D

Pin 2 [GPG] 6.3 Bc 37.5Bc 1.6 Bc 25Bc 25 Bt 100B 25 Bt 100Bt

Bc: Bactericida/concentración mínima inhibitoria [µM]

Bt: Efecto bacteriostático [µM]

NE: No presentó efecto

ND:No determinado

Tabla 1: Concentración inhibitoria mínima de los péptidos con mayor efecto sobre las diferentes cepas.

Figura 6: A) pertenece a E.coli, B) S.aureus, C)P.aeruginosa UDP12 y D)P.aeruginosa UDP13.

Las variantes del péptido antimicrobiano Pin2 tendrán un efecto inhibitorio del

crecimiento de las bacterias multirresistentes aisladas de UPD.

Evaluar el efecto de variantes del péptido antimicrobiano Pin2 sobre el crecimiento

de cepas bacterianas multirresistentes aisladas de UPD.