Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén

ESPECTROFOTOMETRÍA UV-VISIBLE

Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén

1. Propiedades de la luz

2. Absorción de luz

4. Instrumentación

4.1. Fuente de radiación

4.2. Selector de longitud de onda

4.3. Recipientes para muestra

4.4. Detector

2.1. Fenómeno de la absorción

2.2. Espectros de absorción molecular

2.3. Tipos de transiciones electrónicas

3. Ley de Lambert-Beer

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longitud de onda (λ)

1. Propiedades de la luz

λ ν = c

Longitud de onda x Frecuencia = velocidad de la luzOnda

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Longitud de ondaEnergía

1. Propiedades de la luz

ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO

Longitud de onda (nm)

Luz visible

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Estadofundamental

Estadosexcitados

ABSORCIÓNDE RADIACIÓN (hν)

EMISIÓNDE RADIACIÓN (hν)

2. Absorción de luz

- Cuando una molécula absorbe luz aumenta su energía

- Cuando una molécula emite luz disminuye su energía

Ener

gía

2.1. Fenómeno de absorción de radiación

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Energía

2. Absorción de luz

Longitud de onda (nm)

e-

Rotura de enlacee ionización

excitaciónelectrónica

vibración

Luz visible

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S0

S1

Niveles rotacionales

Niveles vibracionales

V0

V1

V1

Vo

V2

Ener

gía

2. Absorción de luz

Transicioneselectrónicas

2.2. Espectros de absorción molecular

h ν (UV-Vis)

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2. Absorción de luz

Transiciones electrónicas y espectros UV-Visibleen moléculas

Transiciones electrónicas y espectros de los átomos

S1

S2

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Longitud de onda (nm)200 250 300 350

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

A

Ác. acetilsalicílico

Paracetamol

Cafeína

Propifenazona

2. Absorción de luz

ESPECTRO DE ABSORCIÓN

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2. Absorción de luz

AZUL DE BROMOFENOL (λmax = 614 nm)

Luz blanca Luz azul

*

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2. Absorción de luz

*

*

Espectro de absorción de la clorofilaen la región visible. Obsérvese queabsorbe en las regiones del rojo y delazul.

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1. Propiedades de la luz

2. Absorción de luz

4. Instrumentación

4.1. Fuente de radiación

4.2. Selector de longitud de onda

4.3. Recipientes para muestra

4.4. Detector

2.1. Fenómeno de la absorción

2.2. Espectros de absorción molecular

2.3. Tipos de transiciones electrónicas

3. Ley de Lambert-Beer

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Fuentede luz

Selector de longitudde onda

Detectorde luz

b

Io I

Instrumentación para medir absorción de luz

Muestra I ≤ Io

I0 (intensidad radiante) I (intensidad transmitida)

3. Ley de Lambert-Beer

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Io I

b

c

Ley de Lambert-Beer → A = ε b cε : coeficiente de absortividad molar (l mol-1 cm-1)b : espesor de la célula (cm)c : concentración (moles/l)

3. Ley de Lambert-Beer

- Transmitancia → T = I / Io

→(fracción de la luz incidente que sale de la muestra)→ varía entre 0 y 1

- Absorbancia → A = - log T = log (Io / I)

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1. Propiedades de la luz

2. Absorción de luz

4. Instrumentación

4.1. Fuente de radiación

4.2. Selector de longitud de onda

4.3. Recipientes para muestra

4.4. Detector

2.1. Fenómeno de la absorción

2.2. Espectros de absorción molecular

2.3. Tipos de transiciones electrónicas

3. Ley de Lambert-Beer

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4. Instrumentación

Fuentede luz

Selector de longitudde onda

Detectorde luz

b

Io I

Instrumento para medir intensidad de radiación

Muestra

Espectrofotómetro

Fuente de radiación

Sistema de selección de longitud de onda

Recipiente para la muestra

Detector

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MONOCROMADOR

rendija entrada

rendija salida

red o prisma

fuenteespejos

detector

4. Instrumentación

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MONOCROMADOR DE RED 4. Instrumentación

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4.3. Recipientes de muestra

UV : cuarzo

Visible: cuarzo o vidrioMaterial

4. Instrumentación

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Macro-células

UV Vis

Células semi-micro

UV Vis

4. Instrumentación

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4. Instrumentación

Esquema de un espectrofotómetro de haz simple

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ESPECTROFOTÓMETROS, FOTÓMETROS, COLORÍMETROS

Espectrofotómetros portátiles

Espectrofotómetro de doble haz

4. Instrumentación