Presentación de PowerPoint - Fecoprod Ltda. · Ovino = 4.1%. Monos = 4.2%. Equinos = 4.0%. ......

Semen sexado: El futuro hecho realidad

La historia de la tecnologa

La nueva tecnologa es una realidad hoy

Resultados de campo

Protocolos de sincronizacin

Impacto en la produccin de embriones

Aplicaciones Comerciales del Semen Sexado

ESPECIES:

- Bovinos

- Porcinos

- Equinos

- Exticos

TECNOLOGIAS:

- Inseminacin Artificial

- Transferencia Embriones

- Fertilizacin In Vitro

- Semen Revertido

Contenido de ADN X y Y

Diferencias en contenido de ADN

Bovino = 3.8%

Ovino = 4.1%

Monos = 4.2%

Equinos = 4.0%

Humanos = 2.8%

29

Cromosomas

+

X

29

Cromosomas

+

Y

Hay una diferencia importante e identificableen el contenido de ADN de X versus Y

La diferencia en el contenido de ADN entre las razas bovinas

Evolucin de la tecnologa del semen sexado

1990-1995 1996-2002 2003-2012Velocidad de sexaje

% de Pureza 83% 85% 85%

70% 80% 80%

400 clulas por segundo

1.000 clulas por segundo


Rendimiento convencional/ semen sexado

semen convencional

1.000 dsis convencionales =

10 sexadas

1.000 dosis convencionales =

50 sexadas


400 sexadas
Hoja11990-19951996-20022003-2012Velocidad de sexaje 400 clulas por segundo1.000 clulas por segundo5.000 clulas por segundo% de Pureza83%85%85%Fertilidad vs semen convencional70%80%80%Rendimiento convencional/ semen sexado1.000 dsis convencionales = 10 sexadas1.000 dosis convencionales = 50 sexadas1.000 dosis convencionales = 400 sexadas
1990-1995Velocidad de sexaje de 200 to 400 clulas por segundo, 83% pureza y 70% de la fertilidad del semen convencional 1.000 dosis convencionales = 10 dosis sexadas

1996-2002Velocidad de sexaje de 1.000 clulas por segundo, 85% de pureza, 80% de la fertilidad del semen convencional1.000 dosis convencionales = 50 dosis sexadas


software eletronics

optics

laser hydraulics

MoFlo SX

Processo de Separacin

NarizProyeccion del fotodiodo de Florescencia del contenido de ADN

Rayo Laser

Tubo de coleccion

Tubo de destecho

Placascargads

de defleccion

Ultima Gotadentro del tubo

CargaEletricaAplicada

+

+

++

-

-

-

Retrazo de la gotaSide

Fluorescence Orientation

Objective

MUESTRAX YSEMEN SEXADO

FORMACION de GOTA

MoFlo SX

Metodologa de Seleccin de Esperma 2006

Anlisis de pureza

Control de Calidad

Volumen de 6 - 7 ml. Concentracin mnima de 1.1

billones de clulas por ml. Motilidad mnima de 70% < 15% defectos primarios < 15% defectos secundarios No mas de 25% juntos

El productor podr escoger si desea producir hembras o machos

Incrementa la especializacin de los productores al orientar la produccin a mercados especficos

Ventajas del mercado por diferenciacin de productos

Principales Beneficios

Mejoramiento genetico mas rapido Mas alta tasa de hembras producidas Mejor reemplazo del proprio hato Mejor direccionamiento con el teste genomico. Mayor produccin lechera Facilidad de parto con mas alto % de hembras Bioseguridad

Ingreso alternativo Mas hembras para venta Mas vacas gestantes para venta.

Semen Sexado Principales Beneficios

Programa sanitario y vacunas

Programa de manejo y nutricin adecuado

Rutina de IA clara y midiendo siempre los resultados.

Cuidado y disciplina en el manejo del semen y la inseminacin

Excluir vaquillas y vacas con problemas de reproduccin agudos

Priorizarlo en primero y segundo servicios

Recomendaciones generales para el uso de semen sexado

Examen fsico del semen :

Tcnicos experimentados

Motilidad a las 0 y 3 horas post descongelacin, vigor y morfologa.

Almacenamiento :

Niveles de N2 chequeo semanal mnimo 30%

Inventario de semen:

Inventario de semen actualizado con ubicacin de la canastilla para evitar la exposicin excesiva del semen al medio ambiente.

Recomendaciones para el Manejo del Semen Sexado (1)

Recomendaciones (1)Evaluacin Fisica del semen

Recomendaciones (2)Almacenamiento e Inventario

Equipamiento ideal

Equipo de descongelado ajustado a la temperatura adecuada 36 C. cambiar agua limpia diariamente

Aplicador de semen tamao correcto y limpiarlos diariamente

Fundas de Inseminacin mantener cerrada con envoltorio y en ambiente limpio y seco

Camisas Sanitarias recomendado

Guantes limpios en bolsa cerrada, papel nova y cortador de parrillas

Bolsa trmica para los aplicadores con semen descongelado.

Recomendaciones (2) En el manejo del semen

Recomendaciones (3)Equipos adecuados

Recomendaciones (4)Procedimientos adecuados

Por que hay una gran diferencia de tasa de concepcin entre establos? Mas de 30 establos

evaluados en California USA.

0

2

4

6

8

10

12

14

65%

65%

El manejo y la disciplina hacen la diferencia

Resultados de Campo IATF Tasa de Concepcin %

48.455.1

37.446.4

0

10

20

30

40

50

60

54H 60H 54H 60HCONVENTIONAL SEXED

CONCEPTION RATE

46P+

95AI

54P+

98AI

37P+

99AI

45P+

97AI

Rev Bras Reprod Anim, Belo Horizonte, v.31, n.3 p.374-381, jul./set. 2007Baruselli et al. Smen sexado: inseminao artificial e transferncia de embries.2.1 millions sexed semen straws
Grf354HCONVENTIONAL60H54HSEXED60HCONCEPTION RATE48.455.137.446.4Plan1CONVENTIONALSEXED54H60H54H60H# COWS95989997# PREGNANCIES46543745CONCEPTION RATE48.455.137.446.4CONV.SEXED# COWS193196# PREGNANCIES10082CONCEPTION RATE51.841.8Plan1CONCEPTION RATEPlan2Plan3
51.8

41.8

0

10

20

30

40

50

60

CONCEPTION RATE

CONV.

SEXED
MBD000EDBD5.xlsGrf1CONCEPTION RATECONCEPTION RATECONV.SEXED51.841.8Plan1CONVENTIONALSEXED54H60H54H60H# COWS95989997# PREGNANCIES46543745CONCEPTION RATE48.455.137.446.4CONV.SEXED# COWS193196# PREGNANCIES10082CONCEPTION RATE51.841.8Plan10000CONCEPTION RATEPlan200CONV.SEXEDPlan3

Resultados de Campo IATF Tasa de Concepcin %

51.841.8

0

10

20

30

40

50

60

CONCEPTION RATE

CONV.SEXED

100 P+193 AI 82 P+

196 AI

Rev Bras Reprod Anim, Belo Horizonte, v.31, n.3 p.374-381, jul./set. 2007Baruselli et al. Smen sexado: inseminao artificial e transferncia de embries.Pajillas de semen sexado de 2.1 millones.
Grf1CONCEPTION RATECONCEPTION RATECONV.SEXED51.841.8Plan1CONVENTIONALSEXED54H60H54H60H# COWS95989997# PREGNANCIES46543745CONCEPTION RATE48.455.137.446.4CONV.SEXED# COWS193196# PREGNANCIES10082CONCEPTION RATE51.841.8Plan1CONCEPTION RATEPlan2CONV.SEXEDPlan3

Raza Convencional Sexado

IA TP % IA TP %

Holstein 181 62 554 49

Jersey 165 54 504 47

Razas Rojas 153 65 530 60

Tasa de

Hembras

51% 91%

Tasa de Concepcin con Semen Sexado- Dinamarca 2006/2007 Novillas -

86%

Hasta ahora la mayor limitante del uso continuo del semen sexado se ha debido a que la fertilidad de este es menor a la del

semen convencional (2009)

En promedio se estima un resultado entre el 75-80% del semen convencional

Schenk et 2009; Seidel et al 2009, DeJarnette et al 2010, Seidel, 2012, 2013.




Resultados de campo



Cul es el desafo?

Mejorar la tcnica del proceso de sexaje Nuevo equipo y software

Mejorar el proceso bioqumico que se usa en la tcnica de sexaje

Identificar las principales causas de reduccin en la fertilidad

La causa de la menor capacidad funcional del semen sexado es multifactorial

Alta diluicin (hasta 5000 x) Coloracin nuclear e incubacin Fuerzas mecanicas (Presin) Exposicin a la luz UV y cargas

electricas

Proyecccion de la muestra dentrodel tubo de coleccion (50Km)

Centrifugacin post seleccin Congelacin y descongelacin post

seleccin.

30

La menor capacidad funcional del semen sexado es multifactorial

El mayor estres esta en la separacion espermaticaEl proceso de separacion acelera la fragmentacion del ADN

Bull studat

Location

Ejaculate HOLD

17-20C

Stain SortCool and

Concentrate FreezePost-

Thaw QC

EstandarizacinTemperatura

ConcentracinpH

Oxidacin

EstabilizacinTemperatura

ConcentracinpH

Oxidacin

Algunos cambios recientes en el proceso de sexaje del semen

- Un Sistema que mantenga la temperatura consistente por todo el proceso.- Un Sistema que mantenga constante el pH y la temperatura del eyaculado tan pronto sea colectado.- Un Sistema que reduzca el dao oxidativo en cada paso del proceso- Un Sistema tampon que estabilice y mantenga el pH por todo el proceso de seleccin

El conjunto de cambios se denomina SexedUltra

Nuevo sistema de procesamientoEquipos mas modernos

Mayor control de temperaturaOptimizacin del coloranteDiluyentes ms avanzados

Mayor control del pHDisminucin de oxidacin

Separacin de clulas muertas

La nueva tecnologa es una realidad

1990-1995 2003-2012 2012-2014Velocidad de sexaje

% de Pureza 83% 85% 93%

70% 80% 90-95%

200 a 400 clulas por segundo


10.000-20.000 clulas por segundo

Rendimiento convencional/ semen sexado

semen convencional


10 sexadas


400 sexadas


1.100 sexadas
Hoja11990-19952003-20122012-2014Velocidad de sexaje200 a 400 clulas por segundo5.000 clulas por segundo10.000-20.000 clulas por segundo% de Pureza83%85%93%Fertilidad vs semen convencional70%80%90-95%Rendimiento convencional/ semen sexado1.000 dosis convencionales = 10 sexadas1.000 dosis convencionales = 400 sexadas1.000 dosis convencionales = 1.100 sexadas
1990-1995Velocidad de sexaje de 200 to 400 clulas por segundo, 83% pureza y 70% de la fertilidad del semen convencional 1.000 dosis convencionales = 10 dosis sexadas



Metodologia de Seleccin de Esperma 2014

Velocidad de Seleccin 15-20,000 cel/segundoManteniendo 90% de presicion

Gated Data

Y X

X

Y

R1 Gate = 58% Live Sperm

R2 Gate = Dead sperm

La GENESIS II y Gen III

La nueva tecnologa es una realidadLos procedimentos SexedULTRA mejoran las

caracteristicas fisicas del semen.

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

0hr 3hr 0hr 3hr 3hr

Motility Prog Motility PIA

% o

f spe

rm**

**

**

**

Barra Rosa metodo XY, Barra Negra metodo SexedULTRA** diferencia significativa del metodo XY n = 12, P < 0.01




Resultados de campo



Investigaciones Preliminares con SexedULTRA

Metodo XY Metodo SexedULTRAInseminaciones Tasa de

Prees (%)Inseminaciones Tassa de prees

(%)

Jersey 803 50.7 603 57.2

Holstein 363 39.7 354 50.6

Overall 1166 47.3 957 54.7**

**Significant differences in overall pregnancy rateXY compared with SexedUltra P < 0.01

Pruebas de SexedULTRA con semen sexado congelado 2014

Mtodo # de Inseminaciones

Tasa de preez confirmada

Anterior 3.384 41.6%SexedULTRA 3.546 46.1%*

* Process method differs P < 0.01

Investigaciones con semen SexedUltraSelect Sires -2015

Tecnology # AI Conceptio Rate %

New SexedULTRA 3.189 52.9*

SexedULTRA 2.833 50.4

* Significantl treatment effect P < 0.05Significant bull effect P < 0.01Significant farm effect P< 0.01

40

45

50

55

60

65

70

XY method SU 2.1 mill SU 3 mill SU 4mill Conventional

Tasa de Concepcin (%)

Resultados de Concepcin con dosis de diferentes concentraciones de SexedULTRA

Treatment Number of inseminations Tasa de Concepcin(%)

XY method 1292 56.3A

SU 2.1 mill 1245 59.2A

SU 3 mill 1328 60.7AB

SU 4 mill 1182 65.0B

Conv (15 mill) 50,143 64.5B

Investigacion con novillas

TC con diferentesconcentracionesson significativamientedifferentes P < 0.01

50525456586062646668

XY method SU 2.1 mill SU 3 mill SU 4 mill Conv (15mill)

TC 56 dias (%)

Resultados de Concepcin con dosis de diferentes concentraciones de GGI - Germany




Resultados de campo

Conclusiones



Otros resultados de investigaciones de campo conSexedUltra en 2013 - 14

13,500 IA en Irlanda (en vacas con semen sexado fue 90% de la concepcin del semen convencional).

Investigaciones en Francia y Alemania mostraron que SexedUltra fue arriba del 93% del semen convencional comparacin de diferentes dosis de sexado con convencional.

La diversidad de la poblacin de clulas espermticas es alterada durante el proceso de sexaje

El espermatozoide sexado es frtil por un tiempo ms corto y requiere que el tiempo de inseminacin sea ajustado.

Qu hemos aprendido?

Capacitacin del Semen Convencional in vivo despues de la AI

10%

20%30%

40% 50%

4 horas

6 horas

8 horas

Capacitacin Esperematica despues de la IA

10 horas

12 horas

0%0%

30% 50%2 horas

4 horas

6 horas

SPERM CAPACITACION AFTER AI

8horas

10 horas

Capacitacin del Semen Sexado in vivo despues de la AI

106 164 234 134

a

ab

b37,7

51,855,6

45,5

0

10

20

30

40

50

60

12 to 16 16 to 20 20 to 24 24 to 30

Tasa

Con

cepc

ion

(%)

Intervalo entre inicio del celo e inseminacin

234

b106 164 134

Tasa de Concepcin en diferentes intervalos de IA despus del inicio del celo n = 638 novillas

aa

ab

P = 0.03

-Tasa de concepcin por hora de IA - Argentina

Hora de IA # IA # Preg %

10 500 152 30.40

12 1470 480 32.65

14 650 222 34.15

16 225 90 40.00

18 1230 612 49.76

20 1080 550 50.93

22 835 432 51.74

24 435 220 50.57

26 89 31 34.83

6514 2789 42.82

Tasas de Concepcin de vacas pre-selecionadas endiferentes horarios de IA despues del inicio del calor

Tasa de Concepcin en campo- ArgentinaHacienda Fortezza BoccioVaquillas a celo observado

Semen No. Servicios No. Prenadas % No. Vacias % Aborto % %

Sexado 1 621 313 50.40 307 49.44 42 13.68 86.58

Sexado 2 367 134 36.51 221 60.22 10 4.52 92.54

Total Sexado 988 447 45.24 528 53.44 52 9.85 88.37

Convencional 675 340 50.37 335 49.63 40 11.94 88.24

Tottal Servicos Vaq. 1663 787 47.32 863 51.89 92 10.66 88.31

Tasa de Concepcin en campo- ArgentinaJesus Vanzetti Vacas y Vaquillas

IATF a las 60 horas despues de retirar el dispositivo

Semen No. Servicios No. Hembras No. Prenadas % Servicios/PrenaSexado 1 3 3 1 33.33 3.00 Sexado 2 12 10 4 33.33 3.00 Sexado 3 20 20 5 25.00 4.00 Sexado 4 51 47 29 56.86 1.76 Sexado 5 50 45 12 24.00 4.17 Sexado 6 94 72 34 36.17 2.76 Sexado 7 24 24 2 8.33 12.00 Sexado 8 52 50 27 51.92 1.93 Sexado 9 14 14 4 28.57 3.50 Total Sexado 320 285 118 36.88 2.71 Convencional 533 452 163 30.58 3.27 Tottal Servicos Vaq. 853 737 281 32.94 3.04

Tasa de Concepcin en campo- ArgentinaCRESUD Vacas y Vaquillas Celo detectado - 2015

Semen No. ServiciosNo.

Hembras No. Prenadas % Servicios/PrenaSexado 1 51 51 14 27.45 3.00 Sexado 2 16 16 5 31.25 3.20 Sexado 3 - STGen 90 43 43 47.78 2.09 Sexado 4 - STGen 77 77 36 46.75 2.14

Sexado 5- STGen Ultra 69 69 34 49.28 2.03

Sexado 6 - STGen Ultra 105 105 53 50.48 1.98 Total Sexado 408 361 185 45.34 2.21 Convencional 329 329 181 55.02 1.82 Tottal Servicos Vaq. 737 690 366 49.66 2.01

Total Sexado Ultra 174 87 50.00

Field Conception Rate - Chile

7 INVERCIONES Heifers on TAI with Heat observation

Semen # AI # PREG % # OPEN %

Conventional 6 bulls 790 455 57.6 335 49.4

Sexed 2.1 105 37 35.2 68 64.7

SexedULTRA 4.0 122 70 57.3 52 42.6

Total Services . 1017 562 55.3 455 44.7




Resultados de campo



FIXED TIME AI PROTOCOLODividir grupos de Inseminacin por presentacin de calor

Vaquillas comerciales Angus - ArgentinaDia 0 Dia 6 AM

CIDR 6 dias

2mgB.E.

PGF 2500 ug

60 hours

300UI ecG

IA SEXADO

72 hours

Pintarla cola

Revisarpintura

CeloMarcado

Celo NO Marcado

100 ugGnRH

84 hours

Revisarpintura

Las hembras a con celo marcado a las 60 horas y las 72 horas post Retiro del dispositivo son inseminadas a las 72 horas.Las hembras no marcadas a las 72horas post retiro recibenuna dosis de 100 ug de GnRH y son inseminadas a las 84 horas

IA SEXADO

Resultados de Tempo Fijo Dividir grupos de Inseminacin por presentacin de calor

Vaquillas comerciales Angus - Argentina

Gabriel Bo y col., 2017

PROTOCOLO DE IA A TEMPO FIJODividir grupos de Inseminacin por presentacin de calor

VacasDia 0 Dia 8AM

CIDR 8 dias

2mgB.E.

PGF 2500 ug

300UI ecG

IA SEXADO

60 hours

Pintarla cola

Revisarpintura

CeloMarcado

Celo NO Marcado

100 ugGnRH

72 hours

Las hembras a con celo marcado a las 60 horas del retiro del dispositivo son inseminadas.Las hembras no marcadas a las 60 horas post retiro recibenuna dosis de 100 ug de GnRH y son inseminadas a las 72 horas

IA SEXADO

ESTRUS CYCLE MANAGEMENT -Estrotec

ESTRUS CYCLE MANAGEMENT Pintura - Chocke




Resultados de campo



75,7

82,5

2014.0 2015-2016

%VIABLES

ULTRA

CENTRO DE CRIA DE NOVILLAS DE ST/OHIO PRODUCCION DE EMBRYON / ANO SEMEN SEXADO

XY

Producin de Embriones In Vitro comparada de Sexed Semen XY (Legacy) y SexedULTRA

25,5

34,8

18,9

49

36,833,4

Conv. 2014 - Jan - Jul Convencional 2014Ag -Dec

Sexed XY 1 Sem. 2014

SexedULTRA 2 sem 2014

Convencional 2015 SexedULTRA 2015

% BLAST.

Producin de Embriones In Vitro comparada de Sexed Semen XY y SexedULTRA

Conv. 2014 - Jan -Jul

Convencional2014 Ag -Dec

Sexed XY 1 Sem. 2014

SexedULTRA 2 sem 2014

Convencional2015

SexedULTRA 2015

42

43,4

36,3

41,4

36,5

40,2

% PRENHES

NUEVO proceso de SexedUltra aumenta significativamente la fertilidad del semen sexado congelado

La prdida de fertilidad del semen sexado principalmente se explica por la intervencin en las tcnicas de sexaje y proceso de criopreservacin

Por primera vez en la historia usted puede tener una tasa de concepcin equivalente a semen convencional

La nueva evolucin en la tecnologa de semen sexadoAumento significativamente de la calidad del semen y

la fertilidad

Fertilidad del semen sexado comparable al semen convencional (90-95%)

ConventionalSemen

# vacas Pajillas por vaca Total de Pajillas Precio Inversin

100 conventional 4 400 20 -8,000

# males 50% 42 120 4,200# females 50% 42 1500 63,000

Total revenue 67,200Balance 59,200

Sexed Semem

#vacas Pajillas por vaca Total de pajillas Precio Invercin

100 Sexed 2 200 45 9,000Conventional 3 300 20 6,000

- 15,000# males 24% 20 120 2,400

# females 76% 64 1,500 96,000

Total Revenue 98,400Balance 83,400

Utilidad generada por el semen sexado $24,200

THANKS

Alfredo CastroST [email protected]
Nmero de diapositiva 1Nmero de diapositiva 2Nmero de diapositiva 3Nmero de diapositiva 4Nmero de diapositiva 5Nmero de diapositiva 6Evolucin de la tecnologa del semen sexadoNmero de diapositiva 8Nmero de diapositiva 9Nmero de diapositiva 10Metodologa de Seleccin de Esperma 2006Anlisis de pureza Nmero de diapositiva 13Principales BeneficiosSemen Sexado Principales BeneficiosNmero de diapositiva 16Nmero de diapositiva 17Recomendaciones (1)Evaluacin Fisica del semen Recomendaciones (2)Almacenamiento e InventarioNmero de diapositiva 20Nmero de diapositiva 21Nmero de diapositiva 22Nmero de diapositiva 23Nmero de diapositiva 24Nmero de diapositiva 25 - Dinamarca 2006/2007 Novillas -Hasta ahora la mayor limitante del uso continuo del semen sexado se ha debido a que la fertilidad de este es menor a la del semen convencional (2009)Nmero de diapositiva 28Cul es el desafo?La causa de la menor capacidad funcional del semen sexado es multifactorialLa menor capacidad funcional del semen sexado es multifactorialAlgunos cambios recientes en el proceso de sexaje del semenNmero de diapositiva 33La nueva tecnologa es una realidadNmero de diapositiva 35Nmero de diapositiva 36La nueva tecnologa es una realidadLos procedimentos SexedULTRA mejoran las caracteristicas fisicas del semen. Nmero de diapositiva 38Nmero de diapositiva 39Investigaciones Preliminares con SexedULTRAPruebas de SexedULTRA con semen sexado congelado 2014Investigaciones con semen SexedUltra Select Sires -2015Resultados de Concepcin con dosis de diferentes concentraciones de SexedULTRANmero de diapositiva 44Nmero de diapositiva 45Otros resultados de investigaciones de campo conSexedUltra en 2013 - 14La diversidad de la poblacin de clulas espermticas es alterada durante el proceso de sexaje El espermatozoide sexado es frtil por un tiempo ms corto y requiere que el tiempo de inseminacin sea ajustado. Capacitacin del Semen Convencional in vivo despues de la AI Nmero de diapositiva 50Nmero de diapositiva 51Nmero de diapositiva 52Nmero de diapositiva 53Nmero de diapositiva 54Nmero de diapositiva 55Nmero de diapositiva 56Nmero de diapositiva 57FIXED TIME AI PROTOCOLO Dividir grupos de Inseminacin por presentacin de calorVaquillas comerciales Angus - ArgentinaResultados de Tempo Fijo Dividir grupos de Inseminacin por presentacin de calorVaquillas comerciales Angus - ArgentinaPROTOCOLO DE IA A TEMPO FIJO Dividir grupos de Inseminacin por presentacin de calorVacas ESTRUS CYCLE MANAGEMENT - Estrotec ESTRUS CYCLE MANAGEMENT Pintura - Chocke Nmero de diapositiva 63Nmero de diapositiva 64Nmero de diapositiva 65Nmero de diapositiva 66Nmero de diapositiva 67Nmero de diapositiva 68Nmero de diapositiva 69Nmero de diapositiva 70Nmero de diapositiva 71

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