PRLBM 352001-77 Norbely Meneses-2

8/14/2019 PRLBM 352001-77 Norbely Meneses-2

1/10

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNADEscuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA

Programa: ingeniera agroforestalPREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM

Nombre y Apellido: Ofelia Norbely Meneses Cdigo: 1123328265 Fecha: octubre 2013

T TULO DE LA PR CTICA :

ACTIVIDAD UREASICA EN MUESTRAS DE ORIGENBIOLGICO.

INTRODUCCIN

a ureasa cataliza la hidrolisis de la urea a dixido dearbono y amoniaco. Se encuentra principalmente enemillas, microorganismos e invertebrados. En las plantas,ureasa es un hexmero consiste en seis cadenasnticas y se encuentra en el citoplasma. En bacteria,onsiste en dos o tres subunidades diferentes. Para suctivacin, la ureasa necesita unir dos iones de nquel porubunidad.

entefacto o diagrama conceptual

MATERIALES Y MTODOS1. Materiales y equipos requeridos

Material / Equipo Caractersticas

Tubos de ensayo

Gradilla

Becker

bureta

2 Reactivos a utilizarReactivo Frmula Concentracin

Urea al 0,1%Urea 0,25m

DIAGRAMA DE FLUJO

2. TABLA DE DATOS


2/10




HgCl2 al 1%HCL 0,1NIndicador Tashiro

3.2 En Laboratorio

n tres (3) tubos de ensayos, colocar a cada uno de ellosn gramo de harina, un gramo de forraje y un gramo deuelo.osteriormente adicionar a cada tubo 10 ml de NaCl al 1%,gitar y centrifugar a 3.500 RPM durante 10 minutosuego sacar los tubos de la centrifugadora y medir elobrenadante de cada tubo.HAU 5,1 ml de sobrenadante

FAU 6,0 ml de sobrenadanteSAU 8,3 ml de sobrenadanteeactivos x tubos B, St 1 2 3 4 5 6rea= 0, 25 m 5mluffer fosfato Ph=7 5mlgCl2 4gotasSt 1 2 3 4reasa 0, 5 % _ 0,5mlHAU - - 0,5ml - - -SAU - - - 0,5ml - 1mlFAU - - - - 0,5ml -olocar los tubos en el bao de mara a 37o durante 20inutos.

umplido este tiempo (20 minutos) se sacan los tubos delao de mara y se le adicionan 4 gotas HgCl2 a cadabo.St 1 2 3 4Cl 2 - 4 gotasuego adicionamos 2 gotas del indicador Tashiro a cadabo y agitamos durante 15 segundos.St 1 2 3 4 5 6dicador Tashiro - 2 gotascolor verdoso indicara que la prueba es positiva para

ctividad ureasica en las muestras de cada tubo.osteriormente se sacan las muestras de los tubos y seolocan en un Erlen Meyer para ser titulados con HCl 0,1N

ubos Muestra ml HCl 0,1N gastadosBlanco 7,1mlt Estndar 8,9ml9,0mlHarina 7,7 mlSuelo 8,8 mlForraje 8,3ml

GLOSARIO:

GLOSARIO: Constituido por seis elementos o por un numeromltiplo de seis.

HEXMERO: UREA: La ureasa es un compuesto qumico cristae incoloro, de formula CO (NH2)2. Se encuentra abundantemenla orina y en la materia fecal.SUBUNIDAD: La subunidad de una protena es una nica molcproteica que se une permanentemente o de manera temporal cootras molculas proteicas para formar un complejo proteico

BIBLIOGRAFIA

Granados, J (2010), Modulo Bioqumica Metablica, Unidad 2, c2; ECAPMA; UNAD

http://es.wikipedia.org/wiki/Subunidad_proteica


3/10




T TULO DE LA PR CTICA:

eterminacin de carbohidratos no estructurales

ne), por el Mtodo de fenol-cido sulfrico

INTRODUCCINos carbohidratos se presentan en forma de azcares,midones y fibras, y son uno de los tres principalesacronutrientes que aportan energa al cuerpo humano

os otros son los lpidos y las protenas). Actualmentest comprobado que al menos el 55% de las calorasarias que ingerimos deberan provenir de losarbohidratos. Los carbohidratos o hidratos de carbono ocidos constituyen compuestos qumicos formadosincipalmente por carbono, hidrgeno y oxgeno,ementos que se conjugan para formar diversos tipos,

n una proporcin generalmente de 1:2:1,spectivamente. Estas biomolculas ejercen funcionesndamentales en los seres vivos, como: soporteelulosa), reserva de alimento (almidn), reserva

nergtica (glucgeno), energa inmediata (glucosa).

ENTEFACTO O DIAGRAMA CONCEPTUAL

MATERIALES Y MTODOS1. Materiales y equipos requeridos

Material / Equipo Caractersticas

Balanza analticaBeckerVarilla de vidrioPapel de filtroTubos de ensayo

4. TABLA DE DATOS

GLOSARIO:

Carbohidrato: Compuesto qumico formado por carbono, hidrgenoxgeno, est presente en los alimentos en diferentes formas yporcentajes.

Hidrlisis: Es una reaccin qumica entre una molcula de agua y

molcula, en la cual la molcula de agua se divide y sus tomos paa formar parte de otra especie qumica.

BIBLIOGRAFIA

Granados, J (2010), Modulo Bioqumica Metablica, Unidad 2, capECAPMA; UNADhttp://galeon.hispavista.com/melaniocoronado/AMORTIGUADORE


4/10





Glucosa

Agua destilada

Fenol

C6H12O6

H2O

C6H5OH

3.2 En Laboratorio

xtraccin

epositar en el vaso de precipitados y agregar 50ml deolucin de HCl, agitar por 3 minutos y llevar al Beckeron la solucin al bao termosttico a 90C por 20 min.ejar enfriar por 5 min y filtrar, medir el volumen filtradolevar 5ml de este a un tubo de ensayo en el cual se

dicionara 5 ml de NaOH y agitar por 15 seg. Tapar ytular as FCNE (filtrado para carbohidratos NE).

uantificacin:

otular 3 tubos de ensayo as B (blanco), St (estndar),(muestra y adicionar los reactivos en el orden que sedica en la tabla 1, agitar por 20 seg. Y llevar al baoara por 3 min. Sacar y agitar 10 seg. Dejar enfriar

ompletamente.

ectura espectrofotomtricae alista el espectrofotmetro a una =485nm y calibraraparato con el tubo blanco, ajustando a 100% de

ransmitancia (%T) y 0,000 de Absorbancia (A). Leer elde Transmitancia (T),de los tubos St y m, luego de

ste proceso, se convierte estos valores a AbsorbanciaA), mediante la ecuacin : A =2- Log %T


5/10





APACIDAD AMORTIGUADORA (]) Y POTENCIALMORTIGUADOR (P (])) DE MUESTRASIOLOGICAS

INTRODUCCINoluciones amortiguadoras son aquellas soluciones

uya concentracin de hidrogeniones vara muy poco

aadirles cidos o bases fuertes. El objeto de su

mpleo, tanto en tcnicas de laboratorio como en la

nalidad funcional del plasma, es precisamente

mpedir o amortiguar las variaciones de pH y, por eso,

uele decirse que sirven para mantener constante el

H.

MATERIALES Y MTODOS1. Materiales y equipos requeridosMaterial / Equipo Caractersticas

GradillaBeckerburetaErlenmeyerPipeta graduadaProbetaagitador


Hidrxido de sodiocido clorhdricoHCL 0,1 NFenolftalenaRojo de metiloAgua destiladaSolucin buffer

Fosfato

3.2 En LaboratorioErlenmeyer pequeos rotulados, Adicionar: 10 ml agua destilada, 2 20 ml solucin buffer, 320l leche, dos gotas fenolftalena, agitar 10

egundos titular 1, 2,3 hasta color rosaermanente, registrar NaOH gastado montaje deulacin con NaOH 0,1N

SOLUCION BUFFERSolucin Regulador de PH cido dbil Base conjugada, Rango prode PH, Mantiene PH en disolucin de tipo biolgico o sintticoCapacidad amortiguadora encimas

RESULTADOS ESPERADOS

Cuantificar la capacidad amortiguadora de muestras biolgicasmediante tcnicas potenciometricas y de titulacin volumtrica, enpresencia de los indicadores adecuados.Realizar un anlisis comparativo del potencial buffer ante de muesde origen biolgico, como: leche, sangre, orina, concentrado y forra

6. TABLA DE DATOS

GLOSARIO:

Biocatalizador: referente a un enzima natural.Permanganometrico: mtodo de cuantificacin reactiva.Estroma: armazn de un tejido que sirve para retener entsus mallas elementos celulares.Desaminacion: degradacin de una aminocido.

BIBLIOGRAFIA

Granados, J (2010), Modulo Bioqumica Metablica, Unidad 2, capECAPMA; UNADGranados, J (2010), Protocolo Prcticas de laboratorio, Pg. 9-12Bioqumica Metablica, Unidad 2, cap. 2; ECAPMA; UNADhttp://laboratoriosdeanaliticaqm.bligoo.es/practica-de-un-desconoc
http://laboratoriosdeanaliticaqm.bligoo.es/practica-de-un-desconocido-0http://laboratoriosdeanaliticaqm.bligoo.es/practica-de-un-desconocido-0


6/10





7/10





ACTIVIDAD DE LA CATALASA (ACAT) EN MUESTRAS DE ORIGENBIOLGICO

INTRODUCCINos catalizadores pueden ser inorgnicos u orgnicos. Losatalizadores inorgnicos suele ser metales de transicin,omo el platino y el nquel, o compuestos de metales deansicin, como el dixido de manganeso. Estasustancias pueden combinarse con los reactivos yodificar la densidad electrnica en la unin qumica que

e rompe durante la reaccin. De esta manera se reduce lanerga de activacin y se facilita la reaccin. En el casoe la descomposicin del agua oxigenada el catalizadorebilita la unin entre los dos tomos de oxigeno (H-O-O-), que se separan durante el proceso

1. Materiales y equipos requeridosMaterial / Equipo Caractersticas

Soporte universalPipetas graduadasBeckerErlenmeyerProbetaBuretaTubos de ensayo


Perxido de hidrogenocido sulfricoExtracto de catalasa

H2O2H2SO4

Permanganato depotasio

KMnO4

rocedimiento 1.3.1Extraccin

esar 2g de muestra picada o pulverizada y colocarla enn tubo de centrifuga ,luego adicionar 10mL de solucina de buffer fosfato 0,05M, pH=6,8-7,0, agitar, con

gitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm ,durantemin Sacar el sobrenadante, pasarlo a una probeta, mediru volumen, registrarlo como : Vs y tomar 5 mL de steara depositarlo en un tubo de ensayo ,taparlo, rotularloomo :EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oFCAT(extracto de fruta para catalasa), o ECCAT (extractoe concentrado para catalasa), colocarlos inmediatamenten bao de hielo.

TTULO DE LA PRCTICA:

RESULTADOS ESPERADOS

cuantificar la actividad catalasa en distintas muestras, de forma

indirecta usando la enzima de muestras biolgicas

GLOSARIO:

Catalasa: enzima antioxidante que cataliza la descomposicin dagua oxigenada. La catalasa puede aislarse del hgado de losmamferos y de diversos vegetales, como la papa y la manzana

Mtodo Permanganometrico: el cual se titula el perxido residues decir, el que no particip en la RBE, con una solucin de

permanganato de potasio (KMnO4) de concentracin conocida.

BIBLIOGRAFIA

Granados, J (2010), Modulo Bioqumica Metablica, Unidad 2, c2; ECAPMA; UNADGranados, J (2010), Protocolo Prcticas de laboratorio, Pg. 9-1Bioqumica Metablica, Unidad 2, cap. 2; ECAPMA; UNADhttp://es.wikipedia.org/wiki/Catalasahttp://www.wikiteka.com/apuntes/uiucontrol-1/
http://es.wikipedia.org/wiki/Catalasahttp://www.wikiteka.com/apuntes/uiucontrol-1/http://www.wikiteka.com/apuntes/uiucontrol-1/http://www.wikiteka.com/apuntes/uiucontrol-1/http://es.wikipedia.org/wiki/Catalasa


8/10




DETERMINACI N DE NITR GENO NO PROTE CO (NNP)

INTRODUCCINe denomina Nitrgeno no proteico a los compuestos detrgeno que pueden ser convertidos en protenas por

gunos organismos vivos.uchos organismos superiores no puedes obtener

minocidos de otras formas, ms que absorbindolos dedieta. Los cuales pueden serconvertir algunos

minocidos en otros diferentes.

os compuestos que forman el NNP son los queontienenamonaco,nitritos ynitratos y otros comourea,elbiuret o elcido rico.Los organismos que

uede utilizar el NNP son loshongos,splantas yalgas,bacterias y organismos que viven enmbiosis con ellos.entefacto o diagrama conceptual

ateriales y equipos requeridos

Material / Equipo CaractersticasPapel filtroTubos de ensayoVaso precipitadoProbeta graduadaCapsulas deporcelana

2 Reactivos a utilizar

Reactivo Frmula Concentracincidoricloroacetico

Agua destilada

Albuminandicador de

Tashiro

3.2 EN LABORATORIO
http://es.wikipedia.org/wiki/Amino%C3%A1cido_esencialhttp://es.wikipedia.org/wiki/Amino%C3%A1cido_esencialhttp://es.wikipedia.org/wiki/Amon%C3%ADacohttp://es.wikipedia.org/wiki/Nitritohttp://es.wikipedia.org/wiki/Nitratohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ureahttp://es.wikipedia.org/wiki/Biurethttp://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_%C3%BAricohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hongohttp://es.wikipedia.org/wiki/Plantahttp://es.wikipedia.org/wiki/Algahttp://es.wikipedia.org/wiki/Bacteriahttp://es.wikipedia.org/wiki/Bacteriahttp://es.wikipedia.org/wiki/Algahttp://es.wikipedia.org/wiki/Plantahttp://es.wikipedia.org/wiki/Hongohttp://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_%C3%BAricohttp://es.wikipedia.org/wiki/Biurethttp://es.wikipedia.org/wiki/Ureahttp://es.wikipedia.org/wiki/Nitratohttp://es.wikipedia.org/wiki/Nitritohttp://es.wikipedia.org/wiki/Amon%C3%ADacohttp://es.wikipedia.org/wiki/Amino%C3%A1cido_esencialhttp://es.wikipedia.org/wiki/Amino%C3%A1cido_esencial


9/10




orraje: se toman muestras de 250 gr cada una, Seuarda preferiblemente en una bolsa de papel o plstico enn lugar con baja temperatura y titular con todos los datosoncernientes al lugar de la toma de la muestra.

uelo: se toman aproximadamente 10 de suelo aofundidad de 20 cm, retirando la capa vegetal de la

uperficie y retirando de la muestra los residuos guardandon una bolsa plstica.esar +/-1.0 gr. De muestra pulverizada y registrar como

Wm), adicionar en vaso de precipitado y agregar 30 mL degua destilada fra, agitar por 1 min., luego deje reposar 15in y adicione 20 mL de solucin de ATA y agite por 1in., deje reposar a temperatura ambiente por 15 min.ltre sobre probeta y mida el volumen del filtrado, coloquemL del filtrado en un tubo de ensayo y rotule as FNNPltrado para nitrgeno no proteico, el papel filtro con el

siduo ponerlo en una capsula de porcelana y secar a05c por 30 min.

ESULTADOS ESPERADOS

e espera cuantificar el nitrgeno no proteico (NNP)ediante el reactivo: cido Tricloroacetico.

e espera determinar con el resultado del anlisis unaproximacin al contenido de protena, ya que el nitrgenombin proviene de componentes no proteicos.

LOSARIO

moniaco: es un compuesto qumico cuya molculaonsiste en un tomo de nitrgeno (N) y tres tomos dedrgeno (H) de acuerdo con la frmula NH3.

ptidos: Son un tipo de molculas formadas por la unine varios aminocidos mediante enlaces peptdicos.

BIBLIOGRAFAranados, J (2010), Modulo Bioqumica Metablica,nidad 2, cap. 2; ECAPMA; UNADranados, J (2010), Protocolo Prcticas de laboratorio,g. 9-12; Bioqumica Metablica, Unidad 2, cap. 2;CAPMA; UNADtp://es.wikipedia.org/wiki/Amon%C3%ADacotp://www.ehu.es/biomoleculas/peptidos/pep1.htm
http://es.wikipedia.org/wiki/Amon%C3%ADacohttp://www.ehu.es/biomoleculas/peptidos/pep1.htmhttp://www.ehu.es/biomoleculas/peptidos/pep1.htmhttp://es.wikipedia.org/wiki/Amon%C3%ADaco


10/10




PRLBM 352001-77 Norbely Meneses-2

Documents

Transcript of PRLBM 352001-77 Norbely Meneses-2