PROCEDIMENTO OPERACIONAL POP LAB HEM - Principal Fase III

PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO

POP LAB HEM - 018

I - CONTROLE HISTÓRICO

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ALTERAÇÃO ELABORAÇÃO VERIFICAÇÃO APROVAÇÃO

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Clébia Caires Giovanna Angeli

Ricardo Lacerda Ana Marina Campas

de Faria

ASSINATURA E CARIMBO 1

TÍTULO: PASSO A PASSO NO EQUIPAMENTO ABX PENTRA 120 – DF E DX SPS

1. Introdução

Os contadores hematológicos ABX Pentra 120 foram designados para realização do

hemograma automatizado, que realiza a contagem e diferencial de células hematológicas. As

anormalidades encontradas e sinalizadas pelo equipamento serão analisadas pelo observador,

mediante parâmetros estabelecidos pelo laboratório.

2. Objetivo

Este Procedimento Operacional Padrão (POP) foi elaborado pela Seção de Hematologia e

tem como produto final o passo a passo nos equipamentos ABX Pentra 120 DF/SPS e ABX

Pentra 120 DX/SPS.

3. Campos de aplicação

Setor de Hematologia.

4. Referências normativas

Resolução n° 302, de 13 de outubro de 2005: dispõe sobre regulamento técnico para

funcionamento de laboratórios clínicos.

5. Responsabilidade / competência

Médico patologista: análise citológica, avaliação e verificação do resultado do exame.

Biomédico: análise citológica, avaliação e verificação do resultado do exame.

Bioquímico: análise citológica, avaliação e verificação do resultado do exame.

Técnico de patologia clínica: realização do exame.

6. Definições

Não se aplica.


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TÍTULO: PASSO A PASSO NO EQUIPAMENTO ABX PENTRA 120 DF E DX-SPS

7. Conteúdo do padrão

7.1 Recursos necessários

Mão de obra especializada

Reagentes

Equipamento ABX PENTRA 120 DF/SPS e ABX PENTRA 120 DX/SPS

7.2 Principais passos

A. Mnemônico (s):

1. HCOS

2. RETS.

B. Sinonímia:

1. Para hemograma:

i. Hemograma Completo

ii. Hemograma com contagem de Plaquetas;

iii. Série Branca e Série Vermelha.

2. Para reticulócitos:

i. Índice Reticulocitário

ii. Índice de Produção de Reticulócitos

iii. Índice de Produção Eritrocitária

vi. Tempo de Maturação

C. Princípio:

1. O ABX Pentra 120 (DF e DX) é um analisador hematológico automático multi-

paramétrico que possui quatro metodologias básicas para a realização do hemograma:


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i. RBCs/PLTs (Câmara de RBC/PLT): As RBCs (glóbulos vermelhos) e PLT

(plaquetas) são medidas por um princípio eletrônico de variação de impedância. 0,5

µL de amostra é diluída e homogeneizada com 5 mL de diluente eletrolítico (ABX

Diluent) e depois aspirada e passada pela fotocélula analisadora. Dois eletrodos

ficam situados de cada lado da abertura, com uma corrente elétrica passando

continuamente entre eles; as voltagens eletrônicas variam em duração e pulso de

acordo com a passagem das células pela abertura e a partir disso as contagens e

histogramas (gráficos; figura 01) são produzidos e liberados em laudo dos

equipamentos;

VCM 76 96 Plaquetas Hemácias

Figura 01 – Histograma de plaquetas e hemácias

ii. HBG (Câmara de WBC/HBG): A hemoglobina (HBG) é liberada pela lise das células

da série vermelha pelo agente lisante (reagente Lysebio) e o ferro contido da

hemoglobina é oxidado e estabilizado. Mede-se então a absorbância por

espectrofotometria em um comprimento de onda de 550 nm a fim de produzir o valor

de hemoglobina;

WBC (Câmara de WBC/HBG): O princípio de medição é o mesmo que o da

contagem de RBC. A contagem de WBC (glóbulos brancos) é realizada na câmara


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de WBC/HGB, onde 10,7 µL da amostra são homogeneizados com 2 mL de diluente

e 0,5 mL de agente lisante e analisados no canal. O dispositivo de processamento

do sinal aplica um limiar eletrônico entre a WBC e a PLT (e a RBC lisada). Os

resultados da contagem são comparados com os resultados da contagem de BASO

e o canal de LMNE de forma a produzir a diferenciação completa em números

absolutos e porcentagens.

iii. BASO (Câmara de BASO): O princípio de detecção é o mesmo que o da RBC. A

contagem de BASO (basófilo) é feita na câmara BASO independente, com um

reagente lisante específico (ABX Basolyse). Depois da ação do reagente ABX

Basolyse, todos os leucócitos, com exceção dos basófilos, perdem suas membranas

e citoplasma. Com isto, torna-se fácil separar os basófilos dos núcleos dos demais

leucócitos. É formado também um histograma para a contagem de basófilos (figura

02).

LMNE BASÓFILOS

Figura 02 – Histograma de basófilos

iv. Após a contagem e diferenciação das células da série branca, o equipamento realiza

a plotagem da contagem diferencial dos leucócitos em gráfico pela metodologia de

MATRIX DUPLA (Câmara de LMNE [figura 03]). A matriz dupla baseia-se em três

princípios essenciais:

a. O sistema sequencial hidrodinâmico duplo "DHSS" (patente da Horiba ABX);

b. Medição de volume: alterações na impedância;


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c. Coloração citoquímica e medição da absorbância óptica.

OBS.: A amostra de sangue total é enviada à câmara de LMNE onde é

homogeneizada com um reagente específico, ABX Leucodiff. Este reagente

promove a lise das RBC, estabiliza as WBC em suas formas nativas e faz uma

coloração diferencial dos leucócitos.

Figura 03- Gráfico LMNE

2. Reticulócitos

O equipamento Pentra DX realiza a contagem dos reticulócitos (o equipamento Pentra

DF não possui essa metodologia), onde 0,8 µL de sangue total são colhidos pela

NEUTRÓFILOS

EOSINÓFILOS

G C I

MONÓCITOS

LIA

LINFÓCITOS


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válvula de amostragem e homogeneizados com 2,5mL de ABX Fluocyte (reagente) e

enviados à câmara LMNE/RET. Este reagente contém um corante fluorescente que é

específico para ácidos nucléicos: Thiazol Orange (produto patenteado da Becton

Dickinson San Jose, CA, USA).

A diluição é aquecida a 37°C durante 25 segundos, onde as moléculas do corante

aderem às moléculas de ácido ribonucleico, o que permite a célula de fluxo óptico do

laser medir a fluorescência das células.

Há a geração de uma matriz de reticulócitos, que é gerada a partir de 02 medições,

sendo volume e fluorescência das células de acordo com o eixos X e Y,

respectivamente (figura 04).

Figura 04 – Histograma reticulócitos


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D. Parâmetros:

Abreviação Parâmetro

Células da Série Branca WBC Células da Série Branca LIN% Contagem proporcional de linfócitos LIN # Contagem absoluta de linfócitos MON% Contagem proporcional de monócitos MON # Contagem absoluta de monócitos NEU% Contagem proporcional de neutrófilos NEU # Contagem absoluta de neutrófilos EOS% Contagem proporcional de eosinófilos EOS # Contagem absoluta de eosinófilos BAS% Contagem proporcional de basófilos BAS# Contagem absoluta de basófilos LIC%* Contagem proporcional de células imaturas

grandes LIC#* Contagem absoluta de células imaturas grandes ALY%* Contagem proporcional de linfócitos atípicos ALY#* Contagem absoluta de linfócitos atípicos IMG%* Contagem proporcional de granulócitos imaturos IMG#* Contagem absoluta de granulócitos imaturos IML%* Contagem proporcional de linfócitos imaturos IML#* Contagem absoluta de linfócitos imaturos IMM%* Contagem proporcional de monócitos imaturos IMM#* Contagem absoluta de monócitos imaturos

Células da Série Vermelha RBC Células da Série Vermelha HGB Concentração de hemoglobina HCT Hematócrito VCM Volume Corpuscular Médio HCM Hemoglobina Corpuscular Média CHCM Concentração da Hemoglobina Corpuscular Média RDW Largura de Distribuição da Série Vermelha PLT Plaquetas PDW* Largura de Distribuição Plaquetária VPM Volume Plaquetário Médio PCT* Plaquetócrito

Reticulócitos RET% Contagem Proporcional de Reticulócitos RET# Contagem Absoluta de Reticulócitos RETL% Reticulócitos imaturos


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E. Linearidade dos Equipamentos:

LIMITES DOS PARÂMETROS PARÂMETROS AFETADOS

WBC > 150 X 103 /mm3 WBC e ERB#

RBC > 8 X 106 /mm3 RBC e RET#

HGB > 24g/dl HGB

HCT > 67% HCT

PLT > 1900 X 103 /mm3 PLT

RET% > 100% RET%

ERB% > 999% ERB%, ERB#

Faz-se necessário uma diluição quando os parâmetros acima encontrarem-se acima

desses limites. O resultado vem associado a um sinalizador “D” e a diluição deve ser feita

com o reagente ABX Diluent (usualmente se faz uma diluição 1:2). Deve-se repassar a

alíquota diluída no equipamento novamente e analisar o parâmetro que saiu fora da

linearidade; atentar aos outros parâmetros, pois estes terão seus resultados pela metade

devido a diluição 1:2.

F. Limite de Quantificação do Equipamento É o menor valor expresso como uma concentração, fornecido com uma confiança aceitável.

PARÂMETROS LIMITE

WBC 0,2 X 103 /mm3

RBC 0,3 X 106 /mm3

HGB 0,75 g/dL

HCT 2%

PLT 20 X 103 /mm3

RET# 0,03 X 106 /mm3

G. Fase pré-analítica:

1. Material:

Sangue

2. Preparo do paciente:


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Jejum de 8 horas é desejável, embora casos urgentes ou hospitalizados não necessitem

deste preparo. Anotar medicamentos em uso nos últimos sete dias.

3. Obtenção da amostra:

Punção venosa (e, em certos casos, arterial) com amostra colhida em anticoagulante

EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético) padronizado em tubos para volume de 1 a 5

mL. O tubo deverá ser homogeneizado por inversão cuidadosamente por cerca de cinco

vezes sem agitação. Colher a amostra conforme orientações descritas no PRS LAB

COL - 001 “REALIZAR COLETA DE SANGUE VENOSO”.

4. Armazenamento e estabilidade da amostra:

i. Deve-se realizar o procedimento no menor intervalo de tempo possível;

ii. Após a recepção da amostra, a identificação deve ser observada;

iii. De uma maneira geral, o teste deve estar analisado dentro de 5 horas após a coleta,

mas caso haja problemas logísticos ou na aparelhagem, resultados aceitáveis

podem ser obtidos, para os parâmetros reticulócitos e série vermelha, pela

refrigeração das amostras com armazenamento na geladeira a 2-8 º C até por 48

horas, e para os parâmetros eritroblastos e contagem diferencial de leucócitos, por

até 24 horas em geladeira.

5. Critérios de rejeição da amostra:

i. Presença de coágulos;

ii. Uso de anticoagulante inadequado;

iii. Tempo inadequado ou armazenagem inadequada da amostra;

iv. Atenção especial deve ser dada a amostras onde pequenos volumes sejam

necessários, como no berçário e em Centro de Tratamento Intensivo infantis. Nestes

casos, volumes menores podem ser tolerados, mas coágulos devem ser

especialmente procurados e, se encontrados, as amostras devem ser rejeitadas.


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6. Substâncias com interferência conhecida:

i. Hemólise;

ii. Lipemia;

iii. Icterícia;

iv. Precipitação de imunoglobulinas;

v. Crioglobulinas;

vi. Aglutinação plaquetária;

vii. Hemácias aglutinadas.

H. Fase Analítica:

1. Reagentes:

i. ABX Diluent (20 litros);

ii. ABX Basolyse (5 litros, integrado);

iii. ABX Cleaner (1 litro, integrado);

iv. ABX Fluocyte (500 mL, integrado);

v. ABX Lysebio (1 litro, integrado);

vi. ABX Leucodiff (1 litro, integrado)

vii. Controle DIFFTROL PX (Hemograma)

viii. Controle MINOTROL RETIC (Reticulócitos)

ix. Minoclair (Solução de limpeza)

x. Minocal (Calibrador)

2. Preparação dos equipamentos Pentra:

ATENÇÃO: Antes de ligar o aparelho, esvaziar sempre o esgoto com o equipamento em

stand by. Neste recipiente é coletado todo material de descarte do sistema até que uma


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boia dentro do mesmo é acionada gerando um alarme de sistema e parando o

equipamento;

i. Ligar o aparelho:

a. Ligar o No Break, aguardar 5 minutos (não há necessidades de desligá-lo

diariamente);

b. Ligar o equipamento acionando o interruptor localizado na parte traseira à esquerda

para a posição ON;

c. Ligar a impressora;

d. Após a inicialização da tela, informar o código do operador (três letras inicias do

nome do operador) e pressionar Enter, em seguida acionar Start Up. Confirmar

novamente o código do operador. Caso exista dados no Worklist, o equipamento

apresentará uma mensagem que devemos confirmar com “S”, para que uma nova

Worklist seja criada;

e. O ciclo de inicialização estará bem concluído se os resultados de ciclo em branco

forem os seguintes (Verificação de contagem de fundo):

Parâmetros:

1) WBC < 0,2x103/mm3;

2) RBC < 0,01x106/mm3;

3) Hb < 2 g/dL;

4) Hct < 0,7%;

5) Plt < 5, 103/mm3;

6) Contagens brutas: LMNE < 100; BASO < 1000; RET < 300.

Caso não haja aceitação dos valores de fundo, proceder:

1) Other cycles - Enter;

2) Ciclo branco - Enter;

3) Selecionar DIFF - Enter;


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4) Apertar a tecla ESC após este procedimento para que a tela fique em branco

esperando o resultado do ciclo.

5) Realizar o ciclo de branco até que as contagens estejam dentro dos

parâmetros acima. Se as contagens não zerarem, entrar em contato com a

assistência técnica para devidas providências.

ii. Encerramento do equipamento (final da rotina)

O tempo mínimo de paralisação exigido para o equipamento é de 20 minutos a cada

24 horas.

a. Acionar Shutdown no painel central;

b. Após aparecer mensagem de término desligue a impressora, equipamento, SPS

(para Pentra DX) e CPU.

iii. Inicialização dos Reagentes:

Sempre que o equipamento detectar nível de reagente baixo em um frasco ou

recipiente, um sinalizador vai alertar o operador, indicando o reagente a ser trocado. O

ciclo hidráulico do momento será concluído e o equipamento não poderá prosseguir

enquanto a troca não for feita.

Os Registros de reagentes permitem que o operador controle o consumo do

equipamento. Eles também avisam quando a validade de um reagente se esgota.

Para trocar um reagente, o processo é o seguinte:

a. Em Menu\Assistência, pressione 4 depois 2 para abrir a janela “Atualizar

autonomia”.

b. A tabela apresenta os seguintes campos:

Dia e hora da reposição do reagente, nome do reagente, nº do lote, data de

vencimento, número de análises restantes de acordo com cada tipo, volume

restante de cada reagente. Este valor (volume) pode ser modificado pelo


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operador no caso de um frasco de reagente já ter sido usado. O número de

análises restantes é atualizado automaticamente depois de cada modificação.

c. Selecionar o reagente a ser reposto ou atualizado;

d. Pressione F1 para abrir a janela Captura de dados do nº do lote.

e. Use o leitor de código de barras para ler o número do lote (ou digite-o você

mesmo). O código de barras contém a data de vencimento, o nome do

reagente e o número de análises restantes.

f. Ajustar os volumes restantes no frasco (atualização de volume de reagente)

ou inserir o volume de acordo com os volumes máximos (reagente novo):

g. Pressionar Enter para confirmar;

h. Trocar o reagente colocando-o no devido local;

i. Realizar o Priming (ciclo de carga inicial) do reagente: Pressionar Other

Cycles e clicar Enter na função desejada (ir ao reagente que foi trocado, por

exemplo, “Imprimação Leucodiff”).

OBS.: Esta tela também permite consultar os registros/estado dos reagentes no

sistema. Todas as trocas de reagente ficam anotadas no respectivo registro com

sua data, número do lote e data de vencimento.

3. Processamento de amostras

Análise de Amostras - Aparelho em função DIFF:

i. Módulo Manual (módulo aberto):

a. Acessar Worklist;

b. Passar o código de barras do tubo na leitora, clicar em F7 e depois na opção 0

“Atualizando arquivo pesquisa”.


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c. No caso de tubos sem códigos de barra, identificar o paciente clicando em F1,

após F2 digitar os dados do mesmo e clicar em F2 novamente para voltar à lista

de trabalho;

d. Homogeneizar bem a amostra e verificar a presença de coágulos.

e. Levantar a tampa protetora da agulha manual e posicionar o tubo;

f. Acionar a Barra de Aspiração;

g. Se houver necessidade de realizar reticulócitos na amostra, modificar o módulo

de operação do equipamento para DIR ou RET, conforme descrito no item

“Processar reticulócitos” abaixo;

h. Se o compressor estiver em Stand by, ele se religa e depois aspira à amostra;

i. Para tubos de microcoletas (sangue de RN) processar sempre em módulo

manual (tubo aberto);

j. No caso de repassar a amostra que não foi realizada corretamente, apagar a lista

de pacientes no Worklist clicando em F7 e logo em seguida selecionar

“Apagando todos os arquivos” e pressionar Enter.

ii. Módulo Automático (módulo fechado)

Criando uma rack (amostras sem etiqueta com código de barras):

a. Acessar Worklist;

b. Teclar F7;

c. Criar uma série;

d. Ler código de barra da Rack – Enter;

e. Identificar os pacientes nas respectivas posições;

f. Enter para confirmar;

g. Carregar a rack no aparelho e pressionar “Start Rack”

Amostras com códigos de barra:


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a. Posicionar os tubos em cada posição da rack, com o código de barras voltado

para cima;

b. Carregar a rack no aparelho

c. Pressionar “Start Rack”

iii. Processar Reticulócitos:

É necessário modificar o módulo de operação do equipamento para DIR (para

processar hemograma e reticulócitos) ou RET (para processar apenas

reticulócitos). Sempre que o operador mudar para um novo tipo de análise, é

necessário realizar o ciclo, que faz a carga inicial dos circuitos hidráulicos

fundamentais para esta análise. Sendo assim, proceder conforme descrito

abaixo:

a. Acessar Other Cycles;

b. Clicar em “Inicialização RET ou DIR”;

c. Após a inicialização, realizar background para reticulócitos, clicando em “Ciclo

Branco” e selecionar DIR ou RET;

d. O ciclo de inicialização estará bem concluído se os resultados do ciclo em

branco forem como os descritos anteriormente (vide item 7.2 H. 2. i. e)

e. Processar as amostras de forma manual ou automático (se for do modo

automático, inserir as amostras na rack DIR [rack com etiqueta cinza] ou RET

[rack com etiqueta rosa]).

iv. Buscar resultados na memória:

a. Acessar Memory;

b. Tecle F2 para opções de datas e selecione a data desejada;

c. Para busca direta do paciente aperte a tecla F5 e escolha o tipo de identificação

desejada, digite a informação do paciente e Enter;

d. Pressione Enter para visualizar resultado na tela.


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e. Para tirar uma cópia impressa pressionar a tecla F10 e selecionar a opção 1-

“Imprimir toda a página”;

f. Para imprimir resultados de vários pacientes, selecione os pacientes pretendidos

apertando a barra de espaço do teclado, onde aparecerá o símbolo na frente

do nome do paciente indicando que o mesmo foi selecionado;

g. Pressionar a tecla F10 e selecionar a opção 1- “Imprimir toda a página”

v. Enviar as amostras para a interface:

a. Buscar o resultado pretendido na memória como descrito anteriormente;

b. Pressionar a tecla F10 e selecionar a opção 2- “Enviando”

c. Para enviar todas as amostras do worklist, pressionar CLTR+B no 1º e último

nome da lista e pressionar a tecla F10 e selecionar a opção 2- “Enviando”

4. Ciclos Diversos

i. Autocontrol:

Sempre que ocorrer algum problema com o Pentra, convém efetuar um ciclo de

controle automático. Esse ciclo acontece automaticamente durante o ciclo de

Inicialização, e é necessário após uma parada de emergência. Pressionar a tecla

Other Cycles e selecionar a opção Autocontrol.

ii. Ejeção da rack:

Uma rack pode acabar entupida no módulo homogeneizador. O propósito deste

ciclo é desobstruir a rack retida no sistema giratório. Pressionar a tecla Other

Cycles e selecionar a opção Ejeção do cassete.

iii. Alarmes:

Em cada análise, o equipamento verifica se há algum mau funcionamento do

sistema e se o mesmo for detectado, será emitido um bipe e uma mensagem de

alerta, tendo a possibilidade de ser necessário habilitar/desabilitar algum alarme.

Este controle pode ser feito acessando Menu/Equipamento/Alarmes/Opções,


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onde a presença do ícone sinaliza a habilitação do alarme em questão. Para

habilitar/desabilitar, pressionar Enter, escolher o item pretendido, acionar a barra

de espaço e apertar Enter novamente.

iv. Mensagens de erro

A janela Informação, situada em Menu/Assistência/Janela Informação contém as

últimas mensagens de erro exibidas durante as operações do equipamento. Use

a tecla PgUp ou PgDn para chegar ao início ou fim na lista.

5. Calibração:

i. Princípios básicos:

A calibração é um procedimento sofisticado que só pode ser executado por

pessoal qualificado pela Assistência Técnica do fabricante, e/ou por pessoas

habilitadas. A calibração é feita com sangue calibrador comercial (Minocal)

(sistema aberto) e o procedimento segue o protocolo descrito no “Manual do

Usuário”:

ii. Periodicidade:

1) Após manutenções corretivas extensas (por exemplo - com troca de

componentes principais) e após manutenção preventiva;

2) Quando indicada pelo Controle Interno da Qualidade.

NOTA: A calibração deve ser considerada o último passo em uma sequência de

correção de um “troubleshooting”, pois a realização de calibrações desnecessárias

pode mascarar um problema subjacente.

6. Controles de Qualidade:

O controle de qualidade no setor de hematologia é realizado de duas maneiras, as

quais:


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Passagem de sangue controle comercial em três níveis: alto, baixo e normal para os

exames de hemograma e reticulócitos, sendo o controle Difftrol designado para a

avaliação do hemograma (Série Branca, Vermelha e Plaquetas) e o controle Minotrol

Retic designado para a avaliação dos reticulócitos;

Passagem de sangue de paciente em triplicata (mix) para a análise de precisão

(repetibilidade) nos módulos aberto e fechado.

i. Passar Controle Interno de Qualidade (CIQ) – controles comerciais

a. Cadastrar os dados dos lotes dos controles automaticamente:

A inserção dos dados de novos lotes dos controles de hemograma e reticulócitos

(Difftrol e Minotrol Retic, respectivamente) nos aparelhos Pentra DF e Pentra DX da

empresa Horiba é feito através de um pen drive, o qual deverá conter os

multiparâmetros dos controles. Os dados dos controles estão armazenados no

database online da Horiba, sendo necessário o download dos arquivos e

consequente transferência destes para o pen drive, para que os mesmos sejam

inseridos nos aparelhos.

Inicialmente, deve-se acessar o site www.horiba.com/br/medical/ e clicar no ícone

“Suporte ao Cliente”, como indicado na figura abaixo (figura 05):


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Figura 05 – Página inicial do site horiba.com/br/medical.

Após a abertura da nova página, clicar em “Banco de Documentos” (figura 06);


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Figura 06 – Imagem do site da empresa mostrando a aba “Suporte ao Cliente”.

Depois, clicar em “go to Horiba-abx documentation database” (figura 07):


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Figura 07 – Demonstrativo do link do banco de documentos da empresa Horiba.

Esse link abrirá uma nova página, onde deveremos selecionar qual disciplina queremos

acessar; no caso, deve-se selecionar Hematology. Uma vez selecionado, deve-se

refinar a busca especificando os itens Instruments com ABX Pentra DX 120 ou ABX

Pentra DF 120, Documents com Quality Control Target e Language com Portuguese,

conforme exemplificado abaixo (figura 08). Assim feito, clicar em search.


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Figura 08 – Banco de Documentos da empresa Horiba

Após clicar em search, a base de dados trará vários documentos da empresa Horiba.

Para inserção de controles do hemograma - DIFFTROL, deve-se clicar em hematology>

quality control target> difftrol > abx pentra df 120 & abx pentra dx 120> lysebio (figura

09).

OBS.: Atente-se para selecionar o ícone correto!

Figura 09 – Demonstrativo do arquivo digital da bula dos controles.


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Depois de clicar no ícone desejado, será aberta uma nova página que conterá os

arquivos com as informações dos controles. Deve-se escolher os arquivos dos controles

em questão (ou seja, os arquivos com a mesma numeração dos novos lotes), e salvá-

los no pen drive. Para isso, clicar em Donwload Target Values e salvar no mesmo.

Para inserção de controles de reticulócitos - MINOTROL, deve-se clicar em

hematology> quality control target> minotrol retic > abx pentra df 120 & abx pentra dx

120> lysebio and lyse.

OBS.: Atente-se para selecionar o arquivo correto! Este arquivo fica na segunda página

do database da Horiba.

Com os arquivos salvos no pen drive, proceder com a inserção de dados no

equipamento:

1) Pressionar o botão: “Quality Assurance”;

2) Selecionar “Controle De Qualidade” e clicar em Enter;

3) Colocar o código do operador (iniciais do nome do operador) e clicar Enter;

4) Selecionar “Inicialização do alvo pelo disquete” e apertar Enter

5) Introduzir o pen drive no equipamento

6) Abrirá uma janela com os dados inseridos no pen drive. Selecionar um dos níveis

(Low, Normal, High) usando a seta para cima ou para baixo.

7) Escolher uma posição para cadastrar os dados do novo lote (se não houver mais

posições em branco disponíveis, sempre escolher uma posição que tenha os dados

mais antigos da lista)

8) Informar o número de lote e data de validade;

9) Repetir esta operação para cada nível de controle.

10) Após inserir os três níveis, apagar os resultados antigos (se for inserido em uma

posição que já havia valores anteriores) clicando na tecla F7 e selecionando

“Apagamento total”.


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b. Cadastrar os dados dos lotes dos controles manualmente:

1) Ter os dados brutos (bula) do lote do controle em questão;



4) Colocar o código do operador (iniciais do nome do operador) e clicar Enter

5) Selecionar a opção “Valores Normais” (dá acesso à modificação dos valores alvo) e

escolher uma posição para cadastrar os dados do novo lote (se não houver mais

posições em branco disponíveis, sempre escolher uma posição que tenha os dados

mais antigos da lista)

6) Informar o número de lote e data de validade;

7) Pressionar F1, onde aparecerá uma nova janela para a inserção dos valores;

8) Pressionar F2, que permitirá a inserção dos valores assinalados para controles

(média e desvio padrão da bula);

9) Após terminar clicar F2, F1 e por final Enter para registrar o novo lote;

10) Repetir esta operação para cada nível de controle.

c. Processar os controles:

OBS.: Ao retirar os controles da geladeira deixá-lo 5 minutos a temperatura ambiente




4) Entrar na aba “Valores Normais” e escolher o nível do controle que irá ser

processado clicando Enter;

5) Entrar na aba “Análises e Cálculos”; acionando esta opção aparecerão na tela

os resultados anteriores do controle e estatísticas do lote atual;

6) Posicionar o tubo na agulha manual e acionar a barra de aspiração;


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7) Após aspiração, remover com uma gaze o sangue excedente na rosca do tubo

e da tampa; evitando a formação de “cascas de sangue” que reduzem a vida útil

do controle.

d. Checar os resultados:

1) Para checar os resultados, apertar o botão “Quality Assurance”;



4) Entrar na aba “Valores Normais” e escolher o nível do controle que irá ser

processado clicando Enter;

5) Entrar na aba “Análises e Cálculos”; acionando esta opção aparecerão na tela

os resultados anteriores do controle;

6) Se os 3 níveis passarem corretamente sem as tarjas de H ou L, o equipamento

pode ser liberado para rotina;

7) Opção “Gráfico L.J” na tela “Controle De Qualidade”: opção onde observamos

os resultados do controle numa maneira gráfica.

e. Imprimir os resultados dos Controles

1) Acessar os resultados dos controles como descrito anteriormente;

2) Selecionar o nível de controle pretendido;

3) Para imprimir os resultados, é necessário selecionar as passagens. Para

selecionar todos os resultados simultaneamente, apertar CTRL+ALT+R ou

selecionar um a um apertando a barra de espaço;

4) Pressionar a tecla F10 e selecionar a opção 1- “Imprimir toda a página”

ii. Passar o “MIX” (Teste de repetibilidade - Controles Internos):

A repetibilidade com amostras de pacientes é uma forma complementar comum de

controle de qualidade onde se é analisado dentro de um intervalo de tempo definido a


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amostra de um paciente com valores dentro da normalidade para se verificar a

variabilidade do sistema analítico, estabelecendo uma média e coeficiente de

variação. No setor de Hematologia a amostra é analisada repetidamente três vezes

em módulo aberto e três vezes em módulo fechado nos dois equipamentos e

repassadas após 24 horas novamente nas mesmas condições.

Para executar o procedimento, seguir:

a. Pressionar o botão: “Quality Assurance”;

b. Selecionar “Repetibilidade” e clicar em Enter;

c. Colocar o código do operador (iniciais do nome do operador) e clicar Enter;

d. Entrar na aba “Análises e Cálculos”;

e. Passar a mostra 03 vezes em módulo aberto conforme descrito em 7.2 H. 3. i

f. Colocar a amostra em uma rack para que seja processada no módulo

“Repetibilidade”. A quantidade de passagens (três) já está configurada para esse

módulo.

g. Repetir o procedimento no outro equipamento.

h. Guardar as amostras na geladeira devidamente identificadas;

i. Após 24 horas, repassar as amostras novamente como descrito; haverá no total

12 passagens, concluindo o teste de repetibilidade;

j. Imprimir os resultados clicando em F10 e selecionar a opção 1- “Imprimir toda a

página”

k. A repetibilidade é avaliada comparando o coeficiente de variação gerado após as

12 passagens com valores preestabelecidos. Os dados de comparação são:

Coeficiente de Variação do “MIX”:

1. Hemácias até 2,8%

2. Hemoglobina até 2,8%;

3. Hematócrito até 2,8%;

4. VCM até 1,3%;

5. HCM até 1,6%;

6. CHCM até 1,7%;

7. RDW até 3,5%;

8. Plaquetas até 9,1;


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9. Global de leucócitos até 10,4%;

10. Linfócitos absoluto até 10,4%;

11. Monócitos absoluto até 17,8%;

12. Neutrófilos absoluto até 16,1%;

13. Eosinófilos absoluto até 21%.

l. Havendo discrepâncias, analisar a possível causa (limpeza das câmaras, troca

de amostras, etc.) ou entrar em contato com a assistência técnica para devidas

providências.

7. Problemas frequentes:

Os erros mais comuns e possíveis resoluções:

i. Não zera BASO no ciclo de branco ou Basofilia constante durante rotina:

a. Solução 1: Verificar se há ABX Basolyse e / ou ABX Diluent;

b. Solução 2: Limpeza concentrada da Câmara de Baso (Descrito no item H).

OBS.: Após esta ação executar 3 ciclos de enxágue em Others

Cycles/Enxágue, e 1 ciclo de limpeza em Others Cycles/Limpeza.

ii. Não zera PLT no ciclo de branco ou asterisco no Canal de Plaquetas

a. Solução 1: Verificar se há ABX Diluent;

b. Solução 2: Limpeza concentrada na Câmara de RBC/PLT (Descrito no item

H).

OBS.: Após esta ação executar 3 ciclos de enxágue em Others

Cycles/Enxágue, e 1 ciclo de limpeza em Others Cycles/Limpeza.

iii. Várias rejeições consecutivas no canal de HB, PLT, HT e GB:

a. Solução 1: Verificar se há ABX Diluent, se não, providenciar sua reposição e

prime: Others Cycles/Diluente Inicial;

b. Solução 2: Efetuar 2 limpezas em Others Cycles/Limpeza. Após uma destas

ações, efetuar um novo ciclo de rack teclando “Start rack”.

iv. ERRO Ciclo Rack / DIF:


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Acontece quando há dois tubos com a mesma identificação (mesma etiqueta).

Solução: Efetuar Autocontrol no equipamento em Others Cycles/Autocontrol.

Identificar o erro, acionando o setor de coleta. Após o término do Autocontrol,

efetuar um ciclo de ejeção de cassete em Others Cycles/Ejeção de Cassete, e

recolocá-lo de volta no equipamento.

v. ERRO tubo preso na garra:

a. Solução 1: Abrir a tampa do equipamento e verificar se há mesmo um tubo

preso em sua garra. Em caso positivo, retirá-lo com a mão e efetuar um ciclo

de Autocontrol em Others Cycles/Autocontrol;

b. Solução 2: Caso não haja um tubo preso, girar o homogeneizador até ter

acesso ao seu código de barras e limpá-lo com gaze umedecida com água e

após efetuar um ciclo de Autocontrol.

vi. ERRO no Código de barras tubo constantemente e/ou Formato de código de

barras do cassete desconhecido:

a. Solução: Teclar o botão STOP RACK. Quando o equipamento parar sua

operação e liberar o módulo manual, abrir a tampa e limpar a lente do leitor

de código de barras, que fica em baixo do carro da agulha do módulo manual

à direita, com um detergente. Após isto continuar a rotina normalmente.

8. Módulo SPS - Corador de Lâminas

A confecção de lâminas depende de parâmetros estabelecidos pelo usuário, baseados

nos valores estabelecidos nos Critérios para Confecções de Lâminas (vide Anexo A), e

levando-se em consideração os alarmes alfanuméricos liberados pelo equipamento.

A técnica da coloração é feita pela combinação de dois corantes: uma solução de May

Grünwald e uma solução de Giemsa. Esses dois corantes são utilizados em um método

de coloração em que após fixação e coloração pelo May Grunwald, se processa uma

segunda coloração com solução de Giemsa, obtendo-se um resultado final melhor.


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00 25/01/2018 29 de 72 Emissão

inicial



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O equipamento realiza automaticamente a aspiração de 50 µL de amostra, a qual será

pipetada na parte superior da lâmina. O preparo do esfregaço é feito através de uma

cunha com uma fita de esfregaço, usando a tensão superficial do sangue para criá-lo. A

cunha é colocada sobre a lâmina antes de entrar em contato com a gota e dá tempo

para o sangue migrar ao longo da sua extensão. Após a confecção do esfregaço, os

dados do paciente, data e hora são impressos na parte fosca da lâmina e depois da

impressão, a lâmina é transferida para um verticalizador e dali segue para o depósito

de coloração (figura 10).

Figura 10 – Esquematização do módulo SPS.

i. Inicialização do módulo SPS

a. Ligue a chave situada embaixo e à direita na traseira do analisador SPS

b. Após, ligue a chave situada embaixo e à esquerda na traseira do Analisador

Pentra e espere o software entrar em operação. Digite o código do operador

"XXX" (somente 3 dígitos) e depois aperte enter.

c. Durante a inicialização do equipamento, as lâminas terão de ser detectadas em

seu dispensador e os racks no carregador. Coloque uma pilha de slides conforme


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indicado (a pilha tem de alcançar os detectores de nível mostrados pelas setas

da figura 11).

Figura 11- Carregamento de lâminas

d. É preciso haver no mínimo dois racks no carregador para que o equipamento

possa prosseguir. Carregue-os conforme indicado na figura 12 (com os sulcos

para lâminas virados para cima).

Figura 12 – Carregamento de racks de lâminas

ii. Registro dos reagentes


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a. No início de cada dia, antes da inicialização, verificar se o reservatório de

resíduos precisa ser esvaziado. Descartar diretamente na pia.

b. Recomenda-se verificar o nível dos reagentes na tela e nos frascos, assim como

a data de validade dos mesmos. Sempre que um nível de reagente em um frasco

estiver baixo, um sinalizador avisará o operador, indicando qual deve ser reposto.

Abra o menu Menu/SPS/Registro de reagentes/Atualização da autonomia. A

tabela apresenta os seguintes campos:

Dia e hora da reposição do reagente

Nome do reagente, Nº do lote

Volume residual em ml de cada reagente: Este volume vai baixando

automaticamente conforme os ciclos realizados (figura 13).

Figura 13 – Tela de registro de reagentes

Leve o cursor até o reagente a trocar.

Pressione F1 e digite o nº do lote do reagente (ou leia a etiqueta de código de

barras)

Digite o volume do reagente. Pressione enter para confirmar.

Troque o frasco (ou recipiente) por outro novo.

Faça o respectivo ciclo de carga primária (priming do reagente).

c. O priming do reagente é realizado acessando Menu/SPS/Inicializar Reagente.

Escolhe-se o reagente a ser iniciado e aperta-se enter.

iii. Ciclos Diversos


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inicial



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a. Autocontrol:

Sempre que ocorrer algum problema com o SPS (problema mecânico, parada de

emergência, bloqueio de lâmina...), convém efetuar um ciclo de controle

automático depois de se corrigi-lo. Acessar: Menu/SPS/Autocontrol para isso.

b. Ejeção da rack:

Se for necessário retirar ou introduzir nova rack vazia na posição de recebimento

de lâminas executar o ciclo Menu/SPS/Ciclos Gerais/Ejeção da grade. Essa

opção empurra a rack anterior na direção do ejetor.

c. Enxágue da linha de amostra:

Constatando falha no esfregaço ou não realização do mesmo, efetuar uma

limpeza na agulha de gotejamento; o equipamento transfere ABX Diluent para a

linha hidráulica de amostras. Acessar: Menu/SPS/Ciclos Gerais/Enxágue da linha

de amostra.

d. Status dos depósitos de coloração:

Essa opção demonstra informações referentes ao estado do ciclo de coloração.

Para obter essa informação, entrar em: Menu/SPS/Estado poços tingimento

iv. Módulo Automático de Confecção de Lâminas:

a. Adicionar as amostras pretendidas na rack de lâminas, que é identificada com

uma tarja na cor verde.

b. O esfregaço e a coloração é realizado conforme descrito anteriormente

v. Módulo Manual para Confecções de Lâminas:

a. Fazer o esfregaço manualmente conforme descrito no POP LAB HEM 003 -

“FAZER COLORAÇÃO DE LÂMINAS MANUAL”, identificando-o.

b. Acessar Menu/SPS/Entrada Manual: o compartimento de entrada manual será

aberto permitindo a colocação manual das lâminas com esfregaço.


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c. Colocar a lâmina na porta do suporte (com o esfregaço para o lado direito,

conforme mostrado na figura 14).

Figura 14 – Entrada módulo manual de lâminas

d. Fechar a porta da entrada manual. Tem início o ciclo manual. A lâmina é

transferida para o conjunto de coloração e a operação começa. No final do ciclo,

a lâmina é levada para um rack.

vi. Controle de Qualidade da Coloração

A qualidade da coloração deverá ser verificada macroscopicamente e

microscopicamente, sendo registrada diariamente em planilha e validada por um

profissional de nível superior, conforme anexo G.

vii. Problemas, erros soluções no SPS:

a. ERRO em SPS - o módulo de esfregaço não está pronto

Solução: mesmo com o SPS funcionando, ir em Menu/SPS/Ciclos Gerais/

Autocontrol.

b. ERRO: SPS não fará lâminas.


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Solução: Esperar o equipamento Pentra DX parar se estiver executando alguma

tarefa. Parar também o SPS se o mesmo estiver em processo ir em

Menu/SPS/Ciclos Gerais/Manutençao/Iniciar. Aguardar que o SPS se inicie

(aprox. 7 minutos). Caso o SPS travar, dar um Autocontrol no Pentra clicando na

tecla Others Cycles e acessando Autocontrol. Se não resolver, desligar e ligar o

Pentra DX e o SPS. Após estas manobras o SPS estará liberado para fazer

lâminas.

H. Manutenção:

1. Manutenção dos equipamentos PENTRA

Antes de realizar a manutenção, desativar os alarmes e ao terminar ativá-los

novamente.

Para desativar os alarmes:

Menu: Enter / Equipamento / Enter;

Alarmes / Enter;

Opções /Enter;

Enter, novamente, e pressionando a barra de espaço desabilitar todas as opções

marcadas e ENTER para aceitar.

i. DIÁRIA (ou a cada número de amostras estipuladas pelo serviço):

a. Start Up no início da rotina;

b. Shut Down no final da rotina;

c. Limpeza automática: a cada X amostras (pré-determinado) o equipamento

automaticamente realiza uma limpeza adicional no sistema;

ii. SEMANAL:


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a. Limpeza concentrada das câmaras de contagens (RBC / PLT, WBC / HBG,

BASO):

1) Material necessário: Seringa de 2 mL, solução de hipoclorito de sódio a

9% (ABX Minoclair);

2) Desabilitar os sinalizadores “Drenar câmaras de BASO, WBC e RBC” em

Menu/Equipamento/Alarmes/Opções, pressionar Enter, escolher os itens

pretendidos, acionar a barra de espaço e apertar Enter novamente.

3) Pressionar Other Cycles/ Drenar Câmaras;

4) Abrir a tampa do equipamento;

5) Remover as tampas das câmeras RBC/PLT, WBC/HBG e BASO e colocar

de 2 a 5 mL de Hipoclorito de Sódio a 9% (ABX Minoclair), tampar

novamente.

6) Entrar em Menu/Equipamento/Alarmes/Ajustes/Vácuo Pressão;

7) Pressionar a válvula 22, 23, e 24 por 15 segundos cada uma, deixar em

repouso por 15 minutos;

8) Depois de 15 minutos apertar as válvulas 42 e 22 simultaneamente até

borbulhar;

9) Após, apertar as válvulas 42 e 23 simultaneamente até borbulhar;

10) Por fim, apertar as válvulas 42 e 24 simultaneamente até borbulhar;

11) Abra a janela Menu/Equipamento/Alarmes/Opções e valide os

sinalizadores anteriormente desabilitados.

OBS.: A câmara de RBC/PLT demora mais a borbulhar.

b. Limpeza de Flowcell (célula de fluxo) e Câmara de LMNE:

1) Desabilitar os alarmes dos reagentes ABX Leucodiff e ABX Cleaner em

Menu/Equipamento/Alarmes/Opções, pressionar Enter, escolher o item

pretendido, acionar a barra de espaço e apertar Enter novamente.


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2) Retirar o frasco de Leucodiff;

3) Acessar Other Cycles/Leucodiff Priming pressionar 2 vezes para esvaziar

a tubulação;

4) Substituir o frasco de ABX Leucodiff pelo frasco de ABX Cleaner;

5) Acessar Other Cycles/Leucodiff Priming pressionar 2 vezes para encher a

tubulação com a solução de limpeza;

6) Após, pressionar Other Cycles/Limpeza da célula de fluxo óptica e fazer a

operação 3 vezes de modo a cumprir um ciclo de limpeza completo;

7) Retirar o frasco de ABX Cleaner;

8) Acessar Other Cycles/Leucodiff Priming pressionar 2 vezes para esvaziar

a tubulação;

9) Substituir o frasco de ABX Cleaner pelo frasco de ABX Leucodiff;

10) Acessar novamente Other Cycles/Leucodiff Priming pressionar 2 vezes

para encher a tubulação com a solução lisante (ABX Leucodiff);

11) Ajustar o volume do reagente ABX Leucodiff (Vide item troca de regente

em 7.2 H. 2. iii);

12) Fazer um Ciclo Branco no módulo DIF acessando Other Cycles/Ciclo de

Branco/DIF (vide item 7.2 H. 2. i. e).

c. Limpeza da Agulha Manual:

1) Desabilitar o sensor de sangue em Menu/Equipamento/Alarmes/Opções,

pressionar Enter, escolher o item pretendido, acionar a barra de espaço e

apertar Enter novamente.

2) Abrir a tampa do equipamento;

3) Levantar a tampa protetora da agulha externa de aspiração;

4) Posicionar ABX Minoclair embaixo da agulha;

5) Dar o comando de aspiração 3 vezes em seguida;

6) Ir a Other Cycles e executar enxágue.


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7) Após essa etapa, executar a função Menu/ Equipamento/ Alarmes/

Ajustes/ Vácuo Pressão

8) Pressionar a válvula 03, que irá empurrar para baixo o bloco de enxágue

da agulha; segurando essa válvula, limpar a superfície inferior do bloco de

enxágue da sonda com gaze embebida em hipoclorito a fim de remover

todas as manchas de sangue, conforme exibido na figura 15:

Figura 15 – Limpeza do bloco de enxágue

d. Limpeza da célula de fluxo de Reticulócitos (apenas para o equipamento

PENTRA DX):

1) Acessar Menu/Equipamento/Alarmes/Ajustes/Vácuo Pressão

2) Pressionar ao mesmo tempo as válvulas 46,72 e 74 por 30 segundos, três

vezes seguidas.

3) Após, realizar uma limpeza em Other Cycles/ Limpeza.

e. Limpeza do Espelho Acrílico do Código de Barras e Bandeja Rotativa:

1) Abrir a tampa do equipamento


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2) Pressionar a tecla Stop Emergency e empurrar o carreador para trás,

como se vê na figura 16;

Figura 16 – Demonstração do carro de amostragem

3) Limpar o espelho e código de barras, com gaze umedecida em água

destilada para limpar a superfície de cima da janela do leitor de código de

barras;

4) Limpar também as duas superfícies espelhadas da bandeja rotativa

(homogeneização das racks), conforme figura 17:


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00 25/01/2018 39 de 72 Emissão

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Figura 17 – Limpeza da bandeja rotativa

5) Para voltar: Other Cycles/Autocontrol- Enter.

iii. MENSAL (ou após número de amostras estipuladas):

a. Inspecionar as seringas de êmbolos. Limpar se necessário;

b. Limpar os filtros de circulação de ar.

iv. APÓS 3 MESES (técnicos da LAB SHOPPING - HORIBA)

v. As manutenções são registradas em planilha própria (anexo H) e arquivadas no setor.

2. Manutenção dos equipamentos SPS

i. Manutenção semanal do SPS:

a. Separar 04 frascos vazios;

b. Coloque Metanol em 2 deles

c. Execute o ciclo Menu/SPS/Ciclos diversos/Manutenção/Encerramento semanal, e

siga as instruções da tela;

d. Retire ambos os canudos dos frascos de coloração e coloque-os em um frasco

vazio. Feche os frascos de coloração.

e. Retire o canudo do Tampão e coloque-o no outro frasco vazio. Feche o frasco do

Tampão (figura 18).


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Figura 18 – Esquematização de manutenção

f. Pressione o botão enter para purgar as linhas (siga as instruções da tela).

g. Depois, coloque ambos os canudos de coloração em um frasco preparado

contendo Metanol e o canudo do Tampão em outro frasco preparado.

OBS: Deixar o equipamento com Metanol durante 3 horas, não manuseá-lo durante

este período.

h. Após as 3 horas: Ir em Menu/SPS/Ciclos diversos/Manutenção/Inicialização

semanal, e mergulhar novamente os canudos dos corantes e tampão, em

frascos vazios (inicia o esvaziamento do metanol, figura 19);

Figura 19– Esquematização de manutenção

i. Aperte a tecla enter. O equipamento efetua um ciclo normal de Inicialização com

ar a fim de evitar a contaminação dos reagentes de coloração. Siga as

instruções da tela.


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00 25/01/2018 41 de 72 Emissão

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j. Depois, coloque os dois canudos de coloração em seus respectivos frascos

(corantes 1 e 2) e o canudo do Tampão no frasco que lhe corresponde (o

aparelho enchera os frascos novamente com os corantes e tampão);

k. Pressione enter para confirmar. Tem lugar um ciclo primário dos corantes e do

Tampão;

l. No final deste procedimento: INICIAR SPS – ENTER.

ii. Manutenção Mensal - Limpeza dos poços do colorizador

a. Abrir a tampa do colorizador (figura 20)

Figura 20– Localização da tampa do colorizador

b. Retire os poços, puxando-os para cima (figura 21).


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00 25/01/2018 42 de 72 Emissão

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Figura 21 – Poços do colorizador

c. Mergulhe-os em um recipiente cheio de etanol, deixe-os ficar por uns 15

minutos e depois lave-os com água corrente.

d. Findada a limpeza, recoloque-os em seus devidos locais e feche a tampa.

iii. As manutenções são registradas em planilha própria (anexo H) e arquivadas no setor.

iv. Troca da fita de esfregaço

a. Abrir a tampa do SPS (figura 22)


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00 25/01/2018 43 de 72 Emissão

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Figura 22– Módulo SPS

b. Abrir a placa de suporte da fita de esfregaço (figura 23)

Figura 23– Placa de suporte da fita de esfregaço

c. Retire as bobinas

d. Coloque a fita nova com atenção para a orientação da bobina (alimentação

como se vê no diagrama, figura 25).


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00 25/01/2018 44 de 72 Emissão

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Figura 25– Esquema de orientação para a fita de esfregaço

e. Feche a placa de suporte da fita

f. Execute a sequência da fita de esfregaço de modo inicializar a fita

acessando Menu/SPS/Ciclos Gerais/Fita de esfregaço.

v. Troca da fita da impressora

a. Abrir a tampa do SPS

b. Desencaixe a fita velha do seu respectivo suporte (figura 26).

Figura 26 – Fita da impressora

c. Instale uma fita nova

I. Fase Pós-Analítica


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i. Análise e liberação final de resultados

Essa fase se inicia após a obtenção dos resultados das amostras processadas, onde

é realizado uma análise crítica dos resultados, levando-se em consideração idade,

procedência da amostra, dados clínicos, alarmes liberados nos laudos dos exames

(Anexo D) realizados nos contadores eletrônicos e limites de contagem celular

mínimo e máximo.

É de extrema importância que os critérios de interfaceamento adotados pelo Setor

de Hematologia sejam avaliados, garantindo o correto aproveitamento da tecnologia

dos contadores celulares automáticos, a autenticidade dos resultados e o correto

apoio ao diagnóstico do paciente. Além disso, existem limitações que interferem nas

análises dos parâmetros pelo aparelho, como exemplificado a seguir:

1. WBC

i. Os resultados de WBC que excedem os limites de linearidade do sistema

exigem diluição da amostra de sangue (ex: amostra de leucemia seguida por

leucopenia). A repetição da análise da amostra diluída permite a obtenção do

valor de análise correto;

ii. Hemácias não lisadas - Em algumas raras ocasiões, os eritrócitos da amostra de

sangue podem não estar completamente lisados. Essas células não lisadas

podem ser detectadas no histograma de WBC com um alarme EL. Eritrócitos

não lisados causam uma contagem de WBC falsamente elevada;

iii. Mieloma múltiplo - A precipitação de proteínas em pacientes com mieloma

múltiplo pode causar contagens elevadas de WBC;

iv. Hemólise - Espécimes hemolisados contêm estroma de células vermelhas, que

pode aumentar as contagens dos leucócitos;

v. Leucemia - Essa doença pode provocar uma contagem muito baixa de WBC

devido ao possível aumento da fragilidade dos leucócitos, que leva à destruição

de algumas dessas células durante a contagem. Esses fragmentos também

interferem com os parâmetros diferenciais parciais dos leucócitos: LIN% + #,


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MON% + #, GRAN% + #. Uma baixa contagem suspeita de WBC pode ser

observada em pacientes com leucemias linfocíticas devido à presença de

linfócitos anormalmente pequenos que o equipamento não consegue contar;

vi. Quimioterapia - As drogas citotóxicas e imunossupressivas podem aumentar a

fragilidade dos leucócitos, o que pode causar contagens baixas de WBC;

vii. Crioglobulinas - O aumento nos níveis de crioglobulina decorrente de mieloma,

carcinoma, leucemia, macroglobulinemia, distúrbios linfoproliferativos, tumores

metastáticos, doenças auto - imunes, infecções, doenças idiopáticas, aneurisma,

gravidez, fenômenos tromboembólicos, diabetes, etc., pode elevar as contagens

de WBC, RBC ou PLT e o valor de HGB. O espécime pode ser aquecido até

37ºC e re-analisado imediatamente ou através de uma contagem manual WBC,

RBC ou PLT;

viii. Aumento de turbidez - também pode ser observado nos casos em que as células

sanguineas vermelhas são resistentes à lise. Isso causa um resultado

falsamente elevado de HBG, que pode ser detectado através da observação dos

valores anormais de HCM e CHCM. Resultados errados da hemoglobina

provocam erro também nos resultados de HCM e CHCM;

ix. Sangues fetais - A mistura entre o sangue fetal e o maternal pode produzir um

valor falsamente alto de HBG.

2. HCT

i. Aglutinação de hemácias - Pode produzir valores inexatos de HCT e VCM. A

aglutinação de hemácias pode ser detectada através da observação de valores

anormais de HCM e CHCM, como também através do exame da lâmina de

sangue tratado com corante. Nesses casos, os métodos manuais talvez sejam

necessários para obter um valor de HCT exato.


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3. RBC - A diluição de células da série vermelha contém todos os elementos formados

no sangue: eritrócitos, leucócitos e plaquetas. Durante a contagem de eritrócitos

(células vermelhas), as plaquetas não são contadas, já que o seu tamanho é inferior

ao limiar mínimo.

i. Leucócitos (células da série branca), por outro lado, são incluídos na contagem

de RBC. Entretanto, considerando que a razão normal entre hemácias e

leucócitos é tão extrema, a influência do WBC no RBC é insignificante;

ii. WBC Altas - Em raros casos, onde a WBC é extremamente alta, a contagem

de RBC pode ser diferente, especialmente se a contagem de RBC for

extremamente baixa;

iii. Hemácias aglutinadas - Pode causar uma contagem de RBC erroneamente

baixa. A presença de valores elevados de HCM e CHCM pode identificar

amostras de sangue que contenham hemácias aglutinadas. Isso é visto através

do exame da lâmina de sangue tratado com corante;

iv. Aglutininas frias - As imunoglobulinas IgM, cujo nível é alto nas doenças de

aglutinação fria, podem causar contagens baixas de RBC e PLT e aumentar o

VCM.

4. HGB

i. Turbidez da amostra de sangue - Diversos fatores fisiológicos e/ou terapêuticos

podem produzir resultados errôneos de HGB alto. Para obter resultados de

hemoglobina exatos quando ocorre aumento de turbidez da amostra de

sangue, determine a causa da turbidez e siga um dos métodos abaixo;

ii. WBC Elevado - Uma contagem extremamente elevada de WBC causa

dispersão excessiva de luz. Nesse caso, use métodos de referência (manuais).

A amostra diluída deve ser centrifugada e o fluido sobrenadante deve ser

medido com um espectrofotômetro;


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iii. Níveis elevados de lipídios - A alta concentração de lipídios na amostra de

sangue dá aparência ”leitosa” ao plasma. Isso pode ocorrer em caso de

hiperlipidemia, hiperproteínemia (como nas gamopatias) e hiperbilirrubinemia.

A determinação exata da hemoglobina pode ser obtida através de métodos de

referência (manuais) e de uma amostra de controle de qualidade de plasma.

5. VCM

i. Aglutinação de células sangüíneas vermelhas - Pode produzir um valor

incorreto de VCM. A aglutinação de hemácias pode ser detectada através da

observação de valores anormais de HCM e CHCM, como também através do

exame da lâmina de sangue tratado com corante. Nesses casos, os métodos

manuais talvez sejam necessários para obter um valor de VCM exato;

ii. O número excessivo de plaquetas grandes e/ou a presença de uma contagem

de WBC excessivamente alta pode interferir com a determinação exata do valor

de VCM. Nesses casos o exame cuidadoso da lâmina de sangue tratado com

corante pode revelar o erro.

6. HCM

A HCM é determinada de acordo com o valor da HGB e a contagem de RBC. As

limitações apontadas para HGB e RBC exercem efeito sobre a HCM e podem causar

valores errôneos.

7. CHCM

A CHCM é determinada de acordo com os valores de HGB e HCT. As limitações

apontadas para HGB e RBC exercem efeito sobre a CHCM e podem causar

valores errôneos.

8. RDW


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i. A largura de distribuição de células sanguíneas vermelhas é determinada de

acordo com a contagem de RBC. A diluição de células da série vermelha

contém todos os elementos formados no sangue: eritrócitos, leucócitos e

plaquetas. Durante a contagem de eritrócitos (células vermelhas), as plaquetas

não entram na contagem de RBC, já que o seu tamanho é inferior ao limiar

mínimo. Porém, os leucócitos (células da série branca) são contados e

incluídos na contagem do RBC. Considerando que a proporção normal entre o

RBC e o WBC é tão extrema, a influência do WBC é extremamente baixa e a

contagem de RBC pode precisar de correção, especialmente se a contagem de

RBC for extremamente baixa;

ii. RBC aglutinado - Pode causar uma contagem de RBC incorretamente baixa e

RDW’s errôneos. A aglutinação de hemácias pode ser detectada através da

observação de valores anormais de HCM e CHCM, como também através do

exame da lâmina de sangue tratado com corante;

iii. Deficiência nutricional ou transfusão de sangue - Podem causar resultados

elevados de RDW devido à deficiência de ferro, vitamina B12 ou folato. Os

resultados de RDW’s elevados também podem estar presentes pela

distribuição de RBC bimodal na transfusão sanguínea.

9. PLT

i. Eritrócitos muito pequenos (micrócitos), fragmentos de eritrócitos

(esquizócitos) e fragmentos de WBC podem interferir na contagem adequada

de plaquetas, provocando resultados elevados.

ii. Eritrócitos aglutinados - Podem capturar plaquetas, causando uma contagem

baixa e errônea de plaquetas. A presença de eritrócitos aglutinados pode ser

detectada através da observação de valores anormais de HCM e CHCM e do

exame cuidadoso da lâmina de sangue tratado com corante;


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iii. Plaquetas gigantes em números excessivos - Podem causar uma contagem

de plaquetas erroneamente baixa, já que, se excederem o limiar máximo do

parâmetro correspondente, essas plaquetas grandes talvez não sejam

contadas;

iv. Quimioterapia - As drogas citotóxicas e imunossupressivas podem aumentar

a fragilidade dessas células, o que pode causar contagens baixas de PLT.

Talvez sejam necessários métodos de referência (manuais) para obter uma

contagem de plaquetas exata;

v. Hemólise - Espécimes hemolisados contêm estroma de células vermelhas,

que pode aumentar as contagens de plaquetas;

vi. Sangue com citrato - O sangue anticoagulado com citrato pode conter

plaquetas aglomeradas, causando redução na sua contagem;

vii. Inclusões de RBC - Inclusões de eritrócitos tais como: corpúsculos de Howell-

Jolly, corpúsculos de Heinz, grânulos sideróticos, basofílicos e etc., podem

produzir um aumento significante na contagem de plaquetas;

viii. Aglutinação de plaquetas - Plaquetas acumuladas devido às técnicas de

coleta inadequadas ou satelitoses de plaquetas causadas pela ativação EDTA

das imunoglobulinas podem causar uma contagem reduzida de plaquetas

e/ou contagem elevada de WBC. O espécime deve ser recoletado em

anticoagulante a base de citrato de sódio e re-analisado somente para

plaquetas.

10. VPM

i. As plaquetas gigantes que excederem o limiar máximo do parâmetro

correspondente podem não ser contadas como plaquetas. Consequentemente,

não serão incluídas no cálculo do Volume Plaquetário Médio do equipamento;

ii. Os eritrócitos muito pequenos (micrócitos), fragmentos de eritrócitos

(esquizócitos) e fragmentos de células sangüíneas brancas podem interferir na

contagem e no dimensionamento adequado das plaquetas;


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iii. Eritrócitos aglutinados - Podem capturar plaquetas, causando um resultado de

VPM incorreto. A presença de eritrócitos aglutinados pode ser detectada

através da observação de valores anormais de HCM e CHCM e do exame

cuidadoso da lâmina de sangue tratado com corante;

iv. Quimioterapia - Também pode afetar o dimensionamento das PLT’s.

Na rotina do setor de Hematologia do Laboratório de Análises Clínicas do Hospital

Governador Israel Pinheiro, os resultados considerados aprovados ou normais pelos

contadores Pentra são liberados de modo direto do equipamento para o sistema

laboratorial, por meio de um software de interfaceamento sem a revisão

microscópica do profissional do setor, que dará finalização à análise e assinará o

laudo. Para os hemogramas reprovados, a distensão de lâmina e exame

microscópico são exigidos. Os critérios para a confecção e avaliação das distensões

de sangue periférico são muitos e estão especificados no Anexo A e D deste POP.

No caso de presença de eritroblastos, essas células nucleadas resistem à ação da

solução diluidora para a contagem de leucócitos, sendo, portanto, contadas como

leucócitos. Isso acarreta um erro, elevando a contagem. Torna-se necessária a

correção do valor obtido a fim de eliminar os eritroblastos, quando constituem

número significativo (acima de 10 eritroblastos em 100 células contadas em lâmina).

A contagem global expressa os valores de leucócitos mais eritroblastos. Na

contagem diferencial são enumerados 100 leucócitos e os eritroblastos que

aparecem durante essa contagem. A fórmula para o cálculo dos eritroblastos em

sangue periférico se encontra no Anexo E.

Resultados considerados críticos, ou seja, aqueles que refletem um estado

patológico que pode pôr em risco a vida do paciente a menos que se tomem

medidas apropriadas, são oficializados via telefone ao médico atendente ou ao


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responsável pelo paciente. Os valores estabelecidos par tal estão descritos no

Anexo B.

Com relação à liberação dos laudos, o setor de Hematologia tem definido uma lista

de mnemônicos (trinca de letras) que tem como objetivo a padronização da liberação

final dos resultados. O Anexo C traz as relações dos mesmos.

ii. Valores de Referência

Idade Hemoglobina Hematócrito Hemácias VCM HCM CHCM

Cordão 17,1 1,8 52,0 5 4,64 0,5 113 6 37 2 33 1

1 dia 19,4 2,1 58,0 7 5,30 0,5 110 6 37 2 33 1

2 – 6 dias 19,8 2,4 66,0 8 5,40 0,7 122 14 37 4 30 3

14 – 23 dias 15,7 1,5 52,0 5 4,92 0,6 106 11 32 3 30 2

24 – 37 dias 14,1 1,9 45,0 7 4,35 0,6 104 11 32 3 31 3

40 - 50 dias 12,8 1,9 42,0 6 4,10 0,5 103 11 31 3 30 2

2 – 25 meses 11,4 1,1 38,0 4 3,75 0,5 101 10 30 3 30 2

3 – 3,5 meses 11,2 0,8 37,0 3 3,88 0,4 95 9 29 3 30 2

5 – 7 meses 11,5 0,7 38,0 3 4,21 0,5 91 9 27 3 30 2

8 – 10 meses 11,7 0,6 39,0 2 4,35 0,4 90 8 27 3 30 1

11 – 13,5 m 11,9 0,6 39,0 2 4,44 0,4 88 7 27 2 30 1

1,5 – 3 anos 11,8 0,5 39,0 2 4,45 0,4 87 7 27 2 30 2

5 anos 12,7 1,0 37,0 3 4,65 0,5 80 4 27 2 34 1

10 anos 13,2 1,2 39,0 3 4,80 0,5 81 6 28 3 34 1

Homens 15,5 1,1 46,0 3,1 5,11 0,38 - - -

Mulheres 13,7 1,0 40,9 3 4,51 0,36 - - -

Homens e Mulheres - - - 90,1 4,8 30,2 1,8 33,7 1,1

JOHNSON, TR. “How growing up can alter lab values in pediatric laboratory medicine”. Diag Med

(special issue) 1982; 5: 13-18. (Média 1 DP)

Idade

Global de

Leucócitos

Neutrófilos

Eosinófilos

Basófilos

Linfócitos

Monócitos

Nascimento 18,1

(0,0-30,0)

11,0

(6,0-26,0)

0,40

(0,02-0,85)

0,10

(0-0,64)

5,5

(2,0-11,0)

1,05

(0,40-3,1)

6 meses 11,9

(6,0-17,5)

3,8

(1,0-8,5) 32%

0,30

(0,07-075) 2,5%

0,05

(0-0,20) 0,4%

7,3

(4,0-13,5) 61%

0,58

(0,10-1,3) 4,8%

12 meses 11,4

(6,0-17,5)

3,5

(1,5-8,5) 31%

0,30

(0,05-0,70) 2,6%

0,05

(0-0,20) 0,4%

7,0

(4,0-10,5) 61%

0,55

(0,05-1,1) 4,8%


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00 25/01/2018 53 de 72 Emissão

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2 anos 10,6

(6,0-17,0)

3,5

(1,5-8,5) 33%

0,28

(0,04-0,65) 2,6%

0,05

(0-0,20) 0,5%

6,3

(3,0-9,5) 59%

0,53

(0,05-1,0) 5,0%

6 anos 8,5

(5,0-14,5)

4,3

(1,5-8,0) 51%

0,23

(0-0,65) 2,7%

0,05

(0-0,20) 0,6%

3,5

(1,5-7,0) 42%

0,40

(0-0.8) 4,7%

12 anos 8,0

(4,5-13,5)

4,4

(1,8-8,0) 55%

0,20

(0-0,55) 2,5%

0,04

(0-0,20) 0,5%

3,0

(1,2-6,0) 38%

0,35

(0-0,8) 4,4%

16 anos 7,8

(4,5-13,0)

4,4

(1,8-8,0) 57%

0,20

(0-0,50) 2,6%

0,04

(0-0,20) 0,5%

2,8

(1,2-5,2) 35%

0,40

(0-0,8) 5,1%

21 anos 7,4

(4,5-11,0)

4,4

(1,8-7,7) 59%

0,20

(0-0,45) 2,7%

0,04

(0-0,20) 0,5%

2,5

(1,0-4,8) 34%

0,30

(0-0,8) 4,0%

Altman PL e Dittmer DS Blood and other body fluids. Federation of American Societies for Experimental Biology, 1961.

7.3 Cuidados especiais

Os cuidados habituais de segurança devem ser aplicados na manipulação da amostra e

dos reagentes conforme o pop de segurança do laboratório.

Os reagentes utilizados em condições técnicas adequadas e armazenados nas condições

especificadas são estáveis até a data da validade expressa na etiqueta.

8. Siglas

BASO: basófilo

CEQ: controle externo da qualidade

CIQ: controle interno de qualidade

EDTA: ácido etilenodiamino tetra-acético

HBG: hemoglobina

PLT: plaqueta

POP: procedimento operacional padrão

RBC: glóbulos vermelhos

SNA: solicitação de nova amostra


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WBC: glóbulos brancos

9. Indicadores

Desempenho no controle externo da qualidade (CEQ)

Recoleta (geral, por material impróprio, para confirmação, por acidente e diversas)

TAT (Turnaround Time) para testes imediatos e de emergência - HEMATOLOGIA

10. Gerenciamento de riscos

Categoria de risco

Falhas potenciais

geradoras de riscos

Evento Ações de

prevenção Ações frente ao

evento

Assistencial Utilização de

amostras

inadequadas

Resultados

incorretos

SNA SNA

Assistencial Reagente

inadequado: Troca

de reagente ou

reagente vencido

Resultados

incorretos

Conferir o

reagente antes de

iniciar sua

utilização

Utilizar o reagente

adequado e

refazer o exame

Assistencial Manutenção

vencida

Resultados

incorretos

Executar as

manutenções

preventivas nas

datas previstas.

Refazer o exame


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Assistencial Calibração vencida Resultados

incorretos

Manter a

calibração do

equipamento em

dia.

Refazer o exame

11. Referências

Manual PENTRA - DX 120 - Hematology System. HORIBA ABX.

JACOBS, D. S. Laboratory Test Handbook. 3ª ed., Cleveland, Lexi – Comp, 1994.

12. Anexos

Anexo 01: Critérios para confecção de lâminas de esfregaço / 1ª Visita ou mudança do

quadro laboratorial

A. Critérios para confecção de lâminas de esfregaço / 1ª Visita ou mudança do quadro laboratorial

Leucocitose > 15.000/mm3

Leucopenia < 2.000 /mm3

“ALARMES” LMNE (vide Anexo D – item 5)

GCI, LIA, RU, EL, EN, DN, DM, NL, MN, NE

“ALARMES” para Linfócitos Atípicos – LIA

> 3%

“ALARMES” para GCI (Grandes Células Imaturas)

> 3%

Monocitose > 20%

Linfopenia < 800 / mm3

Hemoglobina < 8 g%


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VCM > 100

VCM < 70

CHCM > 36

RDW > 20

Trombocitopenia (vide POP LAB HEM - 008)

< 100.000 / mm3

Trombocitose > 1.0000.000 / mm3

Eritrocitose > 6.000.0000/ mm3

Alarmes Técnicos (Vide Anexo D) LMNE (+/-), BASO (+/-)

B. Valores críticos Valores críticos são os que requerem avaliação hematológica, caso o histórico do doente não seja conhecido ou tenha se alterado bastante em relação aos exames anteriores. Devem ser aqueles de importância clínica e devem ser verificados pelas pessoas capacitadas do serviço (bioquímicos e/ou patologistas clínicos do setor).

Níveis críticos do hemograma

Hemoglobina (g%) < 7,0

Neutrófilos (/mm3) < 500

Plaquetas (/mm3) < 50.000

Novo diagnóstico de Leucemia

C. Notas interpretativas do hemograma (Padronização para liberação de laudos).

1. SÉRIE VERMELHA

Mnemônico Nota interpretativa

ACA Presença de acantócitos

ANI Anisocromia

CAA Hemácias com aspecto normal

CAC Anisopoiquilocitose intensa

CAI Anisocitose intensa

CAN Anisocitose

CEL Presença de eliptócitos

CEO Presença de eritroblastos ortocromáticos


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CHC Presença de hemácias crenadas

CHM Hipocromia e microcitose

CMT Hemoglobinopatia

COV Presença de ovalócitos

CPD Presença de ovalócitos

CPE Presença de esferócitos

CPH Presença de hemácias em alvo

CPI Polimocrasia

CPO Hemácias com ponteado basófilo

CPS Poiquilocitose

CPV Poiquilocitose intensa

DAC Presença de dacriócitos

DPH Dupla população hemática

EST Presença de estomatócitos

FRH Fenômeno de Roulaeux Hemático

HFA Presença de Hemácias Falciformes

HIP Hipocromia

HNO Hemácias normocíticas e normocrômicas

MAC Macrocitose

MEC Presença de Macroesferócitos

MOC Microcitose

PBC Presença de Baskett Cells

PFH Presença de fragmentação hemática

PMG Presença de manchas de Gumprecht

PMI Presença de microesferócitos

TER Presença de eritroblastos (*vide Nota)

2. PLAQUETAS


APL Aglutinação plaquetária

CSS Plaquetas aparentemente diminuídas

PLN Plaquetas aparentemente em número normal

PMA Presença de macroplaquetas

PSE Pseudotrombocitopenia

SCC Sugerimos nova amostra em citrato

TPM Trombocitopenia

TRO Trombocitose


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PGP Presença de grumos plaquetários

3. SÉRIE BRANCA


ALI Avaliar doença linfoproliferativa crônica

AMI Avaliar doença mieloproliferativa crônica

BAS Basofilia

CAS Aspecto sugestivo de LLC

CDH Corpúsculos de Dohle

CGT Granulações tóxicas nos neutrófilos

CIA Leucemia aguda, provavelmente linfoblástica

CIB Leucemia aguda, provavelmente mieloblástica

CLN Leucócitos de aspecto normal

CLR Presença de linfócitos reativos

CSC Aspecto sugestivo de LMC

DBA Desvio à esquerda até bastonetes

DBL Desvio à esquerda até blastos

DIM Presença de imunócitos

DME Desvio à esquerda até metamielócitos

DMI Desvio à esquerda até mielócitos

DPR Desvio à esquerda até promielócitos

EOS Eosinofilia

LCO Leucocitose

LEU Leucopenia

LFO Linfopenia

LIN Linfocitose

LMA Linfocitose à custa de linfócitos predominantemente maduros

MON Monocitose

NEN Neutropenia

NEU Neutrofilia

PAN Pancitopenia

PHU Pelger Huet

PLA Presença de plasmócitos

PNH Presença de neutrófilos hipersegmentados

PPL Presença de precursores linfáticos

PPR Presença de prolinfócitos

RLU Reação leucoeritroblástica


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00 25/01/2018 59 de 72 Emissão

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VCI Vacuolização citoplasmática

CSR Sugerimos repetir a critério clínico

CVC Resultado verificado e confirmado

MNE Solicitamos nova amostra por motivo técnico

SAH Sugerimos avaliação hematológica

LPA Lâmina para avaliação

4. QUANTIFICAÇÃO DE BASTONETES


BAZ BASTONETES 0%

BAU BASTONETES 1%

BAD BASTONETES 2%

BAT BASTONETES 3%

BAQ BASTONETES 4%

BAC BASTONETES 5%

B06 BASTONETES 6%

B07 BASTONETES 7%

BAO BASTONETES 8%

BAN BASTONETES 9%

BADE BASTONETES 10%

B11 BASTONETES 11%

B12 BASTONETES 12%

B13 BASTONETES 13%

B14 BASTONETES 14%

B15 BASTONETES 15%

B16 BASTONETES 16%

B17 BASTONETES 17%

B18 BASTONETES 18%

B19 BASTONETES 19%

B20 BASTONETES 20%

D. Interpretação de alarmes

1. Sinalizadores gerais:

i. * : As contagens em um parâmetro diferem mais do que os limites aceitáveis. O

resultado é inconcludente;

ii. ! : Sinalizador suspeito, o resultado deve ser mais investigado;


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iii. -.- : Nenhum resultado é exibido;

iv. Plaqueta concentrada: Indica a ativação do modo de linearidade estendida de PLT

para uma HGB < 2 g/dl;

v. h : Indica que o resultado está acima do limite normal definido pelo usuário;

vi. l : Indica que o resultado está abaixo do limite normal definido pelo usuário;

vii. H : Indica que o resultado está acima do limite de pânico definido pelo usuário;

viii. L : Indica que o resultado está abaixo do limite de pânico definido pelo usuário.

2. Alarmes para eritrócitos:

i. MICROCITOSE: Quando o VCM está abaixo dos limites especificados pelo

usuário;

ii. MACROCITOSE: Quando o VCM está acima dos limites especificados pelo

usuário;

iii. MIC+, MIC++, MIC+++: Representam os três níveis de gravidade em relação à

porcentagem de hemácias microcíticas quantificadas abaixo do limiar representado

à esquerda da curva de RBC (os níveis podem ser configurados pelo usuário);

iv. MAC+, MAC++, MAC+++: Representam os três níveis de gravidade em relação à

porcentagem de hemácias macrocíticas quantificadas acima do limiar representado

à direita da curva de RBC (os níveis podem ser configurados pelo usuário);

v. HIPOCROMIA+, ++, +++: Representam três níveis de gravidade em relação a um

valor baixo de CHCM (os níveis podem ser configurados pelo usuário);

vi. ANISOCITOSE+, ++, +++: Representam três níveis de gravidade em relação a um

valor alto de RDW (os níveis podem ser configurados pelo usuário).


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OBS.: Os limiares RBC1 e RBC2 definem as áreas microcíticas e macrocíticas 3. Alarmes para plaquetas

Os sinalizadores PLT são gerados sob as seguintes condições:

4. Alarmes para DIF (Matriz Dupla):

O histograma PLT muda de acordo com as RBCs microcíticas presentes na área da análise de plaquetas.

Uma presença excessiva de partículas no lado direito gera o sinalizador MIC (micrócitos), que é mostrado na área de alarme de plaquetas. Ele indica a presença de micrócitos na área de contagem das plaquetas. Se associado com uma rejeição PLT (*), os resultados de PLT não são confiáveis.

Se o limiar móvel não puder ser identificado (nenhuma depressão entre histogramas PLT e RBC), o sinalizador ESQ (Esquizócitos) aparecerá.

Anormalidades suspeitas Presença de Esquizócitos Presença de agregados plaquetários. Verifique esta anormalidade, observando o esfregaço de sangue periférico para confirmar seus resultados


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OBS.: As iniciais a seguir, nos alarmes de DIF (Matriz Dupla), deverão ser lidas como se segue:

LIC GCI

ALY LIA

NO RU

LL EL

LN EN

RN DN

RM DM

NL NL

MN MN

NE NE

5. Alarmes da Matriz LMNE

i. Alarmes Prioritários

ii. Alarmes de região


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iii. Alarme de Separação:


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iv. Alarmes Patológicos: Os valores de h (alto), H (extremamente alto), l (baixo) e L

(extremamente baixo) podem ser configurados pelo usuário. Alarmes patológicos

podem ser disparados como valores normais ou extremos (depende da instalação

do software).

a. Alarmes de WBC Leucocitose Leucopenia Linfocitose Linfopenia Neutrofilia

Neutropenia Eosinofilia Mielemia

Células grandes imaturas Linfócitos atípicos Desvio à esquerda


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Eritroblastos Monocitose

Basofilia Pancitopenia

Blastos

b. Alarmes de RBC Eritrocitose

Aglutininas frias Anemia

Macrocitose Microcitose Anisocitose Hipocromia

Poiquilocitose

c. Alarmes de PLT

Trombocitose Trombocitopenia

Cistócitos Células Pequenas

Agregados Plaquetários Macroplaquetas

v. Alarmes Técnicos de CBC

a. Rejeição na WBC "(*)": Uma rejeição na WBC ocorre quando existe diferença

significativa entre as diferentes contagens de WBC1 e WBC2 (Diferença superior

ao limite máximo (10%) e nenhuma das 2 contagens (WBC1 ou WBC2) é

equivalente à contagem de BASO. Uma rejeição na WBC também gera

rejeições em todos os parâmetros da matriz (porcentagem e valor absoluto); e

nos parâmetros LIC e ALY;

b. Rejeição na RBC «(*)»: Uma rejeição de RBC produz rejeição em VCM, HCM,

CHCM, RDW e RBC;

c. Rejeição em PLT «(*)»: Uma rejeição de RBC produz rejeição em PDW, VCM,

PCT e PLT;


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d. Rejeição no HCT "(*)": Uma rejeição no HCT indica que as contagens de HCT

duplicadas (HCT1 e HCT2) apresentam diferença significativa e esta excede o

limite máximo (5%). Isto influencia o resultado da CHCM, que também é

rejeitado;

e. Rejeição na HGB "(*)": Uma rejeição na HGB indica que o valor da referência

"branca" está acima de um limite aceitável. A rejeição também se faz presente

nos parâmetros associados de HCM e CHCM.

vi. Alarmes técnicos da matriz dupla

a. Rejeição na MATRIZ DUPLA "(*)"

Uma rejeição no LMNE indica uma fraca correlação entre as medições

resistiva e óptica na célula de fluxo. Esta rejeição (*) está presente para todos

os parâmetros de LMNE (porcentagem e valor absoluto).

b. Alarme em MONO/BASO

Um alarme em MONO / BASO (alarme MB) indica que a porcentagem de

basófilos no canal de basófilos é maior do que a porcentagem de Linf /

Neut / Mono em dados brutos encontrados no canal da matriz.

OBS.: Possíveis causadores:

Pequenos basófilos na caixa ALY;

Blastos;

Contaminação no canal de basófilos;

Causadores (!) em todos os parâmetros % e # da matriz. O MONO e

BASO em # são substituídos por: «--. --»


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6. Amostragem incorreta: Este alarme aparece em todos os parâmetros (sem resultado "--.

--") em caso de amostragem incorreta ou entupimento da válvula de amostragem.

Durante operação em modo automático, a análise será interrompida depois que um

número de amostras definido pelo usuário acusar erros de amostragem. Alarmes de

amostragem incorreta são mostrados na tela e na impressão dos resultados.

i. Equilíbrio WBC - LMNE – BASO

ii. Alarme WBC BASO: Este alarme associado a L1, Ll e Ll1 indica uma diferença

entre o resultado de WBC e o do canal BASO. Isto faz disparar um alarme (!) no

resultado de WBC (Resultado do canal BASO).

iii. Alarme LMNE (Insuficiência de células representadas na matriz): Este alarme

indica correlação deficiente entre o canal WBC e o LMNE em termos de contagens

totais. O resultado de WBC apresentado é aquele gerado pelo canal WBC. Este

alarme pode significar um erro de detecção na célula de fluxo do LMNE.

iv. Alarme BASO (Insuficiência de células representadas no canal BASO): Este alarme

indica correlação deficiente entre o canal WBC e o BASO em termos de contagens

totais. O resultado de WBC apresentado é aquele gerado pelo canal WBC. Este

alarme pode significar um erro de detecção no canal BASO.

v. Alarme LMNE+ (Excesso de células representadas na matriz): Este alarme indica

um desequilíbrio positivo (excesso de células) entre os canais WBC e LMNE.O

resultado de WBC apresentado é aquele gerado pelo canal WBC.

vi. Alarme BASO+ (Excesso de c lulas representadas na matriz): Este alarme indica

um desequilíbrio positivo (excesso de células) entre os canais WBC e BASO. O

resultado de WBC apresentado é aquele gerado pelo canal WBC.

E. Cálculo de eritroblastos em sangue periférico

Contagem corrigida = Contagem não corrigida x 100 100 + Eritroblastos encontrados


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Ex: Global do Equipamento = 74.000 Nº Eritroblastos = 350

74.000 x 100 Cels. / 350 + 100 7.400.000 / 450 = 16.444 = Global corrigida

F. Modelo de resultado liberado pelo Pentra:


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G. Modelo de planilha de controle de coloração das lâminas hematológicas confeccionadas no corador SPS

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Registro de Lote em Uso e Qualidade de Coloração

Mês:__________________ Ano:_________ Kit do Equipamento 2 – SPS 105 SPSE 1027

Reagentes Marca Lote Validade Início de uso Responsável

May Grunwald Hemogram ___/___/___ ___/___/___

Giemsa Hemogram ___/___/___ ___/___/___

Metanol Vetec ___/___/___ ___/___/___

Tampão Água de Torneira -------- Troca diária Troca diária

Dia Número da

Amostra

Responsável pela

coloração

Qualidade da coloração

Observação Conduta Visto do

responsável

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

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LEGENDA: TR – troca de reagente/ AG – Aguardando Manutenção / NA – não se aplica


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H. Planilha de registro de Manutenção

HGIP - SERVIÇO DE PATOLOGIA CLÍNICA E MEDICINA LABORATORIAL (SPCML) - HEMATOLOGIA

MANUTENÇÃO PENTRA 120 DF

MÊS: _________________________________________ ANO: ___________________

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31

DIÁRIA

Checar reagentes

Checar esgoto

Star Up-rotina

Shut down-rotina

Início da rotina-Star Up/Plantão

SEMANAL

Limpeza de célula de fluxo de LMNE


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Limpeza da célula de fluxo de Retic.

Limpeza de leitor de cód. de barras

Limpeza da Shear valve

Limpeza da agulha automática

Limpeza dos espelhos

Limpeza Semanal do SPS

MENSAL

Limpeza Mensal do SPS

Observações:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Responsável: ____________________________________________________________________

PROCEDIMENTO OPERACIONAL POP LAB HEM - Principal Fase III

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