Protocolo Open Field

3
Protocolo Open Field Consideraciones: Preparar etanol 5% para limpiar la superficie del test entre cada prueba. Ajustar iluminación de la habitación para obtener entre 200 – 300 lux en toda la superficie del aparato. Tener suficiente toalla nova. Ajustar cámara de video para realizar las grabaciones de video correspondientes, la cámara debe estar situada 1,5 metros de altura sobre el test. Ajustar temperatura ambiente a +/- 20 °C Colocar un ruido de fondo ajustándolo a no más de 60 db (ejemplo, radio no sintonizada) Realización del test: Sacar la primera rata del bioterio en una caja y dejar que se acostumbre al ambiente durante 10 minutos. Comenzar la grabación del video y colocar a la rata en el centro del Test Open Fiel. Debe retirarse inmediatamente del lugar de medición del test (mínimo 4 metros) sin causar ruido alguno. Grabar por 5 minutos en absoluto silencio. Sacar la segunda rata del bioterio para ambientación de 10 minutos (de preferencia después de comenzado el test anterior). Luego de terminada la primera medición, limpiar con etanol al 5 % para eliminar el rastro de olores utilizando papel absorbente (toalla nova). Comenzar nuevamente la grabación de video y colocar al segundo animal a evaluar en el test Open Field realizando el mismo procedimiento anterior (debe

Transcript of Protocolo Open Field

Protocolo Open FieldConsideraciones: Preparar etanol 5% para limpiar la superficie del test entre cada prueba. Ajustar iluminacin de la habitacin para obtener entre 200 300 lux en toda la superficie del aparato. Tener suficiente toalla nova. Ajustar cmara de video para realizar las grabaciones de video correspondientes, la cmara debe estar situada 1,5 metros de altura sobre el test. Ajustar temperatura ambiente a +/- 20 C Colocar un ruido de fondo ajustndolo a no ms de 60 db (ejemplo, radio no sintonizada)

Realizacin del test: Sacar la primera rata del bioterio en una caja y dejar que se acostumbre al ambiente durante 10 minutos. Comenzar la grabacin del video y colocar a la rata en el centro del Test Open Fiel. Debe retirarse inmediatamente del lugar de medicin del test (mnimo 4 metros) sin causar ruido alguno. Grabar por 5 minutos en absoluto silencio. Sacar la segunda rata del bioterio para ambientacin de 10 minutos (de preferencia despus de comenzado el test anterior). Luego de terminada la primera medicin, limpiar con etanol al 5 % para eliminar el rastro de olores utilizando papel absorbente (toalla nova). Comenzar nuevamente la grabacin de video y colocar al segundo animal a evaluar en el test Open Field realizando el mismo procedimiento anterior (debe realizar la misma operacin para todos los animales que desee evaluar). Dejar limpio el test despus de utilizar.

Nota: para cada test recordar anotar el cdigo del animal utilizado, la hora del test y el nombre del video correspondiente en su cuaderno de apuntes respectivo.

Cuantificacin del test Open Field:Se utiliza el software Any Maze para la cuantificacin del test open field donde se registraran parmetros de Velocidad mxima, velocidad promedio, distancia total recorrida, tiempo de permanencia en zona perifrica y central, y nmero de entradas en cada zona.

Abrir el programa ANY MAze Ajustar el programa para el test open field

Teniendo ya configurado el programa se procede a realizar la cuantificacin. Ir a Protocol y seleccionar el video a medir en VIDEO SOURCES Ir a EXPERIMENT y colocar el nombre del test en el apartado EXPERIMENT DETAILS. En el apartado TRATAMENT introducir el nmero 1 en NAME y en No. ANIMALs del TRATAMENT 1. Ir a TEST y en el apartado APPARATUS dar play al video con los botones en azul, hacer click sobre el icono de cmara fotogrfica para capturar el background del fondo del video sin el animal. Hacer play en la flecha verde una vez que el animal es colocado en el test Open Field. Una vez que se de play, el programa solo medir por los siguientes 5 minutos, que corresponden al tiempo de duracin total del test. Ir a DATA y cerciorarse que estn los datos del primer animal. Ir a PROTOCOL y seleccionar el video n2 a medir en VIDEO SOURCES Realizar las etapas 2 y 3 para cada video que se desee medir.