Prctica de laboratorio: Aislamiento de bacterias y hongos de agua de estanque artificial

Introduccin

Unestanquees una pequea cavidad de agua, natural o artificial, utilizado cotidianamente para proveer alriesgo, criar peces,nadar, etctera, o con fines meramente ornamentales.

El agua estancada crea un ambiente propicio para el crecimiento de bacterias y hongos peligrosos. Segn msn.com, el agua estancada proporciona un caldo de cultivo para las bacterias dainas como E. coli y el ttanos, as como los mosquitos y otros insectos portadores deenfermedades.

El agua estancada y los materiales hmedos son un criadero de moho (hongo) y bacterias que pueden desencadenar reacciones alrgicas e inducir infecciones respiratorias. El no eliminar los materiales contaminados y el no reducir la humedad podra presentar riesgos muy serios a su salud a largo plazo. La exposicin a altos niveles de moho podra ocasionar un ataque de asma en individuos que padecen de asma.

El presente trabajo tiene como objetivo principal: Demostrar la presencia de diversos tipos de microorganismos acuticosen un estanque artificial.

Materiales y reactivos

Frasco de vidrio hermtico con boca ancha Hisopo Placas de Petri Asa bacteriolgica Asa de Drigalsky Pipetas (1 ml) Mechero Porta y cubre objetos Microscopio ptico Azul de metileno Safranina Lugol Alcohol acetona Agar nutritivo Agar PDA

Procedimiento

Aislamiento de bacterias De la muestra obtenida por isopado de las paredes y disuelta en agua destilada estril, se realiz lo siguiente: Se homogeniz la muestra y con ayuda de una pipeta se tom 0,1 ml de esta. El inculo fue sembrado sobre placas con agar nutritivo, por siembra en superficie con el asa de Drigalsky. Se incub a 37C por 24horas luego de evidenciar las colonias bacterianas, se procedi a seleccionar las colonias y caracterizarlas morfolgicamente. Se realiz una tincin Gram para cada colonia diferente identificando sus caractersticas. Se procedi a aislar dichas colonias en otras placas Petri con agar nutritivo. Finalmente se realiz la bsqueda de bibliografa para una posible identificacin.

Aislamiento de hongos Al igual que para aislar bacterias, se realiz una siembra en superficie en APD. Se llev a incubar a temperatura ambiente, por 5 das. Se realiz una caracterizacin morfolgica de las colonias y una preseleccin. En seguida para poder caracterizarlos mejor se realiz un microcultivo. Para ello se gelific PDA en una placa, a partir de la cual se cort pequeos trozos cuadrados de agar que se pusieron sobre un portaobjeto. Con ayuda de un asa bacteriolgica previamente humedecido en agua destilada estril, se carg el asa tocando el micelio del moho a aislar. Realizando cuatro punturas en las esquinas de cada cuadrado de PDA. El portaobjeto se coloc sobre varillas triangulares de vidrio o plstico (sorbetes de jugo) dentro de una placa de Petri. Para mantener el ambiente hmedo, se coloc un algodn humedecido con agua destilada estril.