Protocolo sobre eutanasia para animales utilizados en experimentación y otros fines científicos

Dra. Teresa Rodrigo Presidenta de SECAL

MARCO LEGISLATIVO DE LA EXPERIMENTACIÓN ANIMAL

EUROPEO AUTONÓMICO

• Real Decreto 223/1988 sobre la protección de los animales de experimentación utilizados para experimentación y otros fines científicos.

• Real Decreto 1201/2005 de 10 de octubre sobre la protección de los animales utilizados para la investigación y otros fines científicos.

---------------------------------------------------------------------------------------------------------- • Real Decreto 53/2013, de 1 de febrero, por el que se establecen las normes

básicas aplicables para la protección de los animales utilizados en experimentación y otros fines científicos, incluyendo la docencia.

• Orden ECC/566/2015, de 20 de marzo, por la que se establecen los requisitos

de capacitación que debe cumplir el personal que maneje animales utilizados, criados o suministrados con fines de experimentación y otros fines científicos, incluyendo la docencia.

ESPAÑOL

• Directiva 86/609/CEE relativa a la aproximación de las disposiciones legales, reglamentarias y administrativas de los Estados Miembros respecto a la protección de los animales utilizados para experimentación y otros fines científicos.

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• Directiva 2010/63/UE relativa a la protección de los animales utilizados para fines científicos.

INSTALACIONES

PERSONAL PROCEDIMIENT0S

ÁMBITO DE APLICACIÓN

MARCO LEGISLATIVO

3 Rs de Russell y Burch (1959): The Principles of Humane Experimental Technique

REEMPLAZAR

Los procedimientos in vivo deben ser reemplazados siempre que sea posible por métodos alternativos que no utilicen animales vivos, como modelos matemáticos, simulaciones por ordenador o cultivos celulares. Siempre que sea posible, se deben utilizar los animales con el sistema nervioso menos desarrollado.

Centro Europeo para la validación de métodos alternativos (ECVAM, 1991, Italia). http://ecvam.jrc.ec.europa.eu/ Grupo de trabajo especializado en métodos alternativos de la Asociación Española de Toxicología (GTEMA, España) http://www.uv.es/aetoxweb/grupos/gtema/gtema.html Plataforma europea para los métodos alternativos. http://www.ecopa.eu/ Red Española de Métodos Alternativos (REMA) http://www.remanet.net/

REDUCIR

Los proyectos de investigación que requieren el uso de animales de laboratorio deben ser realizados con el número mínimo necesario de animales que permitan obtener resultados científicamente válidos.

• Diseño experimental y análisis de datos. • Disminuir la variabilidad de los resultados. 1. Condiciones ambientales 2. Condiciones de los animales 3. Control de calidad de alimento y nido • Armonización y estandarización de los procedimientos experimentales (BPL's; ISO)

REFINAR

Hace referencia a todo lo que permite disminuir la severidad de los procedimientos: • Condiciones y calidad del ambiente en el que son criados y mantenidos los animales antes y durante la experimentación. • Procedimientos para minimizar y eliminar el dolor y asegurar al máximo el bienestar animal :

Reconocimiento de signos de dolor, estrés y malestar. Utilización de anestésicos y analgésicos.

• Refinamiento en las técnicas experimentales (administraciones y extracciones de muestras, métodos de asepsia en procedimientos quirúrgicos, etc.)

Métodos de eutanasia RD 53/2013 Eutanasia: La interrupción de la vida de un animal con el menor sufrimiento posible, de acuerdo con su especie y estado.

Al final de un experimento o cuando pudieran proseguir con

efectos adversos.

Para obtener sangre y otros tejidos con un fin científico.

Cuando los niveles de dolor, angustia y sufrimiento es

probable que sobrepasen el nivel previsto.

Cuando el campo de estudio sea la salud o el bienestar de

los animales.

Cuando ya no sean aptos para la cría.

Animales no utilizados.

Los principales motivos por los que se sacrifican animales en los laboratorios o establecimientos de cría son:

Artículo 7 del RD 53/2013. Métodos de eutanasia 1. La eutanasia de los animales se realizará: a) Con el menor dolor, sufrimiento y angustia posibles. b) Por una persona capacitada.

c) En un establecimiento de un criador, suministrador o usuario, salvo que se trate de un estudio de campo o que sea aplicable lo previsto en el apartado 1.b) del anexo III.

4. Los letras b) y c) del apartado 1 y el apartado 2 no se aplicarán cuando sea necesario dar muerte a un animal en situaciones de emergencia por motivos de bienestar animal, sanidad animal, salud pública, orden público, o medioambientales.

Obligatoriedad de confirmación de la muerte del animal:

ANEXO III del RD53/2013 La eutanasia de los animales debe completarse por uno de los siguientes métodos:

a) Confirmación del cese permanente de la circulación. b) Destrucción del cerebro. c) Luxación cervical. d) Desangramiento. e) Confirmación del comienzo de rigor mortis.

Artículo 7 del RD 53/2013 2. En relación con los animales a que se refiere el anexo III se utilizará el método de eutanasia adecuado tal como figura en dicho anexo.

Animales, Observaciones/métodos Peces Anfibios Reptiles Aves Roedores Conejos Perros,gatos,

hurones y zorros

Grandes mamíferos Primates

Sobredosis de anestésico (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1)

Pistola de clavija perforada (2)

Dióxido de carbono (3)

(1) Debe utilizarse, en su caso, previa sedación del animal. (2) Únicamente en reptiles grandes. (3) Únicamente con liberación paulatina del gas. No utilizar en fetos de roedores y en roedores neonatos.

ANEXO III del RD53/2013- Métodos de eutanasia de los animales

Animales, Observaciones/métodos Peces Anfibios Reptiles Aves Roedores Conejos Perros,gatos,

hurones y zorros

Grandes mamíferos Primates

Dislocación cervical (4) (5) (6)

Conmoción cerebral/Golpe contundente en la cabeza (7) (8) (9) (10)

Decapitación (11) (12)

(4) Únicamente para aves de menos de 1 Kg. Las aves de más de 250 g deben sedarse.

(5) Únicamente para roedores de menos de 1 Kg. Los roedores de más de 150 g deben sedarse.

(6) Únicamente para conejos de menos de 1 Kg. Los conejos de más de 150 g deben sedarse.

(7) Únicamente para aves de menos de 5 Kg.

(8) Únicamente roedores de menos de 1 Kg.

(9) Únicamente para conejos de menos de 5 Kg.

(10) Únicamente en neonatos.

(11) Únicamente para aves de menos de 250 g.

(12) Únicamente si no se pueden utilizar otros métodos.

ANEXO III del RD53/2013- Métodos de eutanasia de los animales

Animales, Observaciones/métodos Peces Anfibios Reptiles Aves Roedores Conejos Perros,gatos,

hurones y zorros

Grandes mamíferos Primates

Aturdimiento eléctrico (13) (13) (13) (13) (13) (13)

Gases inertes (Ar,N2) (14)

Disparo con rifles, pistolas y municiones adecuados (15) (16) (15)

(13) Requiere material especial. (14) Únicamente en cerdos. (15) Únicamente en condiciones de campo por tiradores expertos. (16) Únicamente en condiciones de campo por tiradores expertos, si no se pueden utilizar otros métodos.

¿Se pueden utilizar otros métodos diferentes a los enumerados anteriormente?

ANEXO III del RD53/2013 a) Si los animales están inconscientes, a condición de que no recobren el conocimiento antes de morir.

b) Si los animales se utilizan en el marco de una investigación de índole agropecuaria, cuando el objetivo del proyecto disponga que

los animales se mantengan en condiciones similares a las de los animales de las explotaciones comerciales, en cuyo caso, podrán ser sacrificados de conformidad con los requisitos establecidos en el anexo I del Reglamento (CE) n.º 1099/2009, del Consejo, de 24 de septiembre de 2009, relativo a la protección de los animales en el momento de la matanza.

Artículo 7 del RD 53/2013 3. El órgano competente podrá conceder excepciones al requisito establecido en el apartado 2: a) Para permitir el uso de otro método siempre que a partir de pruebas científicas se considere que el método posee al menos, la

misma ausencia de crueldad; o bien b) Si se justifica científicamente que la finalidad del procedimiento no puede conseguirse utilizando ninguno de los métodos de

eutanasia contemplados en el anexo III.

¿Cómo elegir el método de eutanasia?

Criterios de bienestar animal + Requerimientos experimentales

CEEA (OEBA) + Órgano evaluador de proyectos

¿Cómo elegir el método de eutanasia?

Que el método sea indoloro, consiga una rápida inconsciencia y muerte.

Que sea apropiado para la edad, especie y salud del animal.

Que requiera una mínima movilización y evite la excitación.

Que minimice el miedo y el estrés en el animal.

Que sea fiable, reproducible, irreversible, sencillo de administrar (en dosis pequeñas si es posible) y seguro para

el operador.

Y que en la medida de lo posible, sea estéticamente aceptable para el operador.

Criterios de bienestar animal

AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals: 2013 Edition; https://www.avma.org/KB/Policies/Documents/euthanasia.pdf

CCAC guidelines on: euthanasia of animals used in science; https://www.ccac.ca/Documents/Standards/Guidelines/Euthanasia.pdf

Recommendations for euthanasia of experimental animals: Part 1. Close B.(Chair), Banister K., Baumans V., et al. , 1996. Laboratory Animals, 30, 193-316; http://journals.sagepub.com/doi/pdf/10.1258/002367796780739871

Recommendations for euthanasia of experimental animals: Part 2. Close B.(Chair), Banister K., Baumans V., et al. , 1997. Laboratory Animals, 31, 1-32; http://journals.sagepub.com/doi/pdf/10.1258/002367797780600297

Métodos de eutanasia recomendados en función de la especie

Métodos/ Sistemas afectados Barbitúricos y derivados Ar/N2

Anestésicos inhalatorios

MS222, Tricaína CO2

Dislocación cervical Concusión Decapitación

Sistema Circulatorio

Sistema Digestivo

Sistema Excretor

Sistema Muscular

Sistema Nervioso

Sistema Respiratorio

Sistema Metabólico

CCAC guidelines on: euthanasia of animals used in science; Addendum

En ratas, el llenado rápido incrementa los leucocitos, linfocitos y la glucosa, y disminuye elaspartato aminotransferasa (AST), la creatina quinasa (CK) y el calcio.

En ratones y ratas, reduce el PH sanguíneo. En ratones da lugar a niveles de potasio inexactos en suero. De manera general, la hemorragia pulmonar puede afectar los estudios histológicos. En ratones y ratas (en comparación con el isoflurano y la dislocación cervical), incrementa las concentraciones de

fármaco en plasma durante las pruebas farmacocinéticas.

Influencia potencial sobre los datos científicos

Métodos/ Sistemas afectados Barbitúricos y derivados Ar/N2

Anestésicos inhalatorios

MS222, Tricaína CO2

Dislocación cervical Concusión Decapitación

Sistema Circulatorio

Sistema Digestivo

Sistema Excretor

Sistema Muscular

Sistema Nervioso

Sistema Respiratorio

Sistema Metabólico

CCAC guidelines on: euthanasia of animals used in science; Addendum

De manera general, los niveles de neuropéptidos y la histología cerebral pueden verse afectados debido al daño tisular en el sistema nervioso central o la descarga neuronal inducida.

De manera general, produce una disminución del flujo coronario; disminución de la función contráctil en preparaciones aisladas de corazón perfundido.

En ratones, da lugar a altos niveles de serotonina en el pulmón. En ratones, da lugar a un incremento en los recuentos de células formadoras de colonias de granulocitos y macrófagos

en cultivos de médula ósea.

Influencia potencial sobre los datos científicos

Consideración de la Directiva 2010/63/UE “La utilización de métodos inadecuados para matar a un animal puede provocarle dolor, angustia y sufrimiento considerables. También es importante el grado de competencia de la persona que realiza esa operación. Por consiguiente, los animales deben ser sacrificados solo por una persona competente y utilizando un método adecuado para la especie”.

Capacitación del personal

Artículo 7 del RD 53/2013. Métodos de eutanasia 1. La eutanasia de los animales se realizará: a) Con el menor dolor, sufrimiento y angustia posibles. b) Por una persona capacitada.

c) En un establecimiento de un criador, suministrador o usuario, salvo que se trate de un estudio de campo o que sea aplicable lo previsto en el apartado 1.b) del anexo III.

La formación para la capacitación de la eutanasia debe incluir: • el reconocimiento del dolor y la angustia de los animales, • los métodos apropiados de manejo y restricción del animal, • la aplicación correcta del método de eutanasia y la utilización correcta de los equipos, • el reconocimiento y la valoración de la inconsciencia, y • el reconocimiento y la confirmación de la muerte.

Capacitación para la función b) Curso de formación + Trabajo bajo supervisión (mín. 15-20 h)

Mantenimiento de la capacitación Función b): 25 horas en 8 años

Funciones del personal: a) Cuidado de los animales. b) Eutanasia de los animales. c) Realización de los procedimientos. d)Diseño de proyectos y procedimientos. e) Asunción de la responsabilidad de la supervisión “in situ” del bienestar y cuidado de los animales f)Asunción de las funciones de veterinario designado.

IMPORTANTE: La capacitación es por especies o grupos de especies

GRACIAS POR VUESTRA ATENCIÓN