PRUEBAS CONFIRMATORIASPOR :

LIC. RICARDO SALDAÑA

PRUEBAS DE ELISA: Primera Generación: Los

antígenos utilizados provienen del lisado viral de un cultivo

Segunda Generación: Los antígenos corresponden a proteínas recombinantes o Péptidos sintéticos.

Tercera Generación: Péptidos recombinantes sintéticos de VIH-1, 2, 0.

Cuarta Generación: Se adicionó el p24.

Por: Lic. Ricardo Saldaña 2

CONTINUACIÓN…

Pruebas de confirmación: Tienen alta especificidad Western Blot Inmunofluorescencia Indirecta. Radioinmunoprecipitación

PUEDEN SER UTILIZADAS PARA DISMINUIR LA POSIBILIDAD DE OBTENER RESULTADOS FALSO POSITIVO.

3Por: Lic. Ricardo Saldaña

WESTERN BLOT• Prueba de confirmación• Principio: Ensayo

inmunoenzimático• Detecta anticuerpos

contra proteínas específicas del VIH 1

• Interpretación: visual• Muestras: suero y

plasma• Volumen: 20 µl• Tiempo: 3.5 hrs • Sensibilidad: 100%• Especificidad: 100%

Por: Lic. Ricardo Saldaña 4

Po

r: Lic. R

icard

o S

ald

añ

a

5

Gen Proteína Denominación CDC OMS env Precursora de la

envoltura gp160 gp160

Glucoproteína externa gp120 gp120 Glucoproteíina

transmembrana gp41

Al menos 2 bandas

gag Precursora del core p55 Precursora del core p40 Proteína principal p24 p24 Proteína de la matriz p17 pol Transcriptasa inversa p66 Transcriptasa inversa p51 Endonucleasa p32

Nomenclatura de las bandas en Western Blot

DIAGNOSTICO DE CASOS DE VIH POSITIVOS

2 pruebas de tamizaje: diferente principio inmunológico con resultados iguales.Prueba Rápida + ELISAELISA + Prueba RápidaELISA + ELISAPrueba Rápida + Prueba Rápida

Recomendación en: Protocolo Nacional para el Tratamiento Antirretroviral del VIH-SIDA.

Recomendación: OMS6

Po

r: Lic. R

icard

o S

ald

añ

a

ELISA 1: R ELISA 1: NRELISA 2: R ELISA 2: NR

ELISA 1: R ELISA 1: R ELISA 1: NR ELISA 1: NRELISA 2: R ELISA 2: NR ELISA 2: R ELISA 2: NR

REPETICIÓN DE LOS TESTS EN DUPLICATA

DESCARTAR LA BOLSA

LLAMAR AL DONANTE

LIBERAR LABOLSA

ELISA 1: R ELISA 2: NRELISA 2: NR ELISA 1: R

TAMIZAJE SEROLÓGICO POR ANTI-HIVELISA 1 + ELISA 2

TAMIZAJE SEROLÓGICO PARA HIV UTILIZANDO DOS TESTS

WB

POSITIVO IND NEGATIVO

Anti-HIV

REACTIVO

REACTIVO

NEGATIVO

NEGATIVOIND

IND

Repetir en duplicata

COLECTARNUEVAMUESTRA1ª

2ª PCR

ALGORITMO PARA DIAGNÓSTICO DE INFECCIÓN POR HIV

1ª MUESTRA2ª MUESTRA

HIV – VENTANA INMUNOLÓGICA

11 16 22 Dias

HIV RNA plasma

Ag p24

Anti-HIV

0

INFECCIÓNTEÓRICA

VENTANA INMUNOLÓGICA

Anti-HIV: 22 dias

HIV p24: 16 dias

HIV RNA: 11 dias

11 16 22 Dias

HIV RNA plasma

Ag p24

Anti-HIV

0

INFECCIÓNTEÓRICA

VENTANA INMUNOLÓGICA

Anti-HIV: 22 dias

HIV p24: 16 dias

HIV RNA: 11 dias

MUCHAS GRACIAS