Pruebas de Deteccion Del Vph

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PRUEBAS DE DETECCION DEL VPHPRESENTA: DR. RAFAEL MARAVILLA REYES DOCENTE: DRA. MARIA ESTELA DIAZ DE GARCIA

Papilomavirus Familia Papillomaviridae Virus desnudos

Cpside icosadrica ADN bicatenario

Latencia y recurrencia

Papilomavirus No cultivables in vitro Ms de 100 tipos distintos (16 grupos; A-P) Especial tropismo por distintas localizaciones anatmicas

Genoma de los PapilomavirusURR

Oncogenes

Mtodos para detectar el ADN del HPV Los tres mtodos ms utilizados para detectar el ADN de HPV en muestras son: 1. Solution hybridization methods. 2. Polymerase chain reaction based assays 3. In situ hybridization (ISH)

Deteccin molecular de VPH ADN es actualmente el estndar de oro para la identificacin de VPH. Todos se basan en la deteccin de ADN del VPH y son: (1) no amplificado ensayos de hibridacin (hibridacin de transferencia Southern, (STH), punto de hibridacin (DB) y la hibridacin in situ (ISH)), (2) la seal amplificada ensayos de hibridacin tales como los ensayos de captura de hbridos, (3) ensayos de amplificacin de destino, tales como PCR y PCR in situ.

Polymerase Chain Reaction (PCR) Proveen la oportunidad de amplificar la secuencia genmica del material. Es extremadamente sensible

Polymerase Chain Reaction (PCR) Detectan el ADN del HPV en biopsias o en muestras de citologa. La ventaja de este mtodo es que mantiene la morfologa del tejido.

Las tcnicas moleculares ms utilizadas para la deteccin de VPH son el test de captura de hbridos y la PCR. La PCR se ha utilizado en el campo del diagnstico desde sus inicios.

Esta tcnica es capaz de detectar el ADN diana mediante la utilizacin de oligonucletidos iniciadores que complementan de forma especfica con las regiones flanqueantes del ADN a amplificar

Como la PCR se puede realizar en cantidades muy pequeas de ADN (10-100 ng), es ideal para su uso en muestras con bajo contenido de ADN. Currently, the only available FDA approved HPV detection method is the Hybrid capture II assay. En la actualidad, el nico disponible aprobado por la FDA mtodo de deteccin del VPH es la Captura Hbrida II. In this assay HPV DNAs are hybridized to RNA probes, and RNA-DNA hybrids are captured and detected by a chemiluminescent system. En este ensayo ADN del VPH se hibridan con sondas de ARN y ARN-ADN hbridos son capturados y detectados por un sistema de quimioluminiscencia.

Solution Hybridization Methods STH requiere grandes cantidades de ADN, es laborioso, y no es reproducible, mientras que slo ha ISH moderada sensibilidad para detectar el VPH.

Solution Hybridization Methods