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    UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOSE DE CALDAS

    BIOQUIMICA -DETERMINACION DE AZUCARES EN ORINA MEDIANTE

    PRUEBAS DE TUBO Y FORMAION DE CRISTALES.

    Grupo 1: O!o" L# Ro" D# O$"%or" L#.

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    PRUEBA BENEDICT

    Este ensayo es usado para determinar azucares reductores,todos los

    monomeros contienen funciones quimicas (aldehidos y cetonas)que pueden

    reducir otras sustancias,el fundamento de la tecnica es la reducion del

    complejo cuprico para dar paso a la formacion de acidos de azucares

    tornando la solucion de un azul a un color rojo ladrillo o en este caso amarillo

    turbio,los tubos de ensayio que tienen coloracion verde contienen rectivo enexceso pero por el cambio observado se toma como prueba positiva,segun la

    gura 1,las pruebas positivas fueron la

    fructosa,arabinosa,xilosa,ribosa,xilulosa,glucosa,lactosa,galactosa y la

    muestra problema

    !igura1Pruebas de tubo Benedict: Blanco,control,fructosa,

    (xilosa,ribosa),xilulosa,glucosa,lactosa,galactosa,muestra 24,muestra

    problema.

    !igura "Reaccion de la glucosa con reactivo benedict.

    PRUEBA MOLISC&

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    Este ensayo es usado para la identicacion de hidratos de carbono que al serpuesta en accion con el acido sulfurico se produce una accion deshidratantesobre los enlaces glucosidicos que precipitan por la accion de alfa naftol,lareaccion se considera positiva al evidenciarse formacion de un anillo rojoviolaceo o purpura#omo se muestra en la gura $ la prueba fue positivapara maltosa y debia ser positiva para lactosa y sacarosa,la muestra

    problema presenta prueba positiva

    !igura $ Prueba de tubo Molisc:

    Blanco,muestra de !2 ,muestra 24,"actosa,sacarosa,maltosa.

    !igura %Reaccion del monomero con #2$%4 concentrado & Reaccion delderivado furfural con el alfa naftol.

    PRUEBA SELIVANOFF

    &a prueba se usa para identicacion de aldosas y cetosas siendo las primerasmas ecientes en la reaccion con acido sulfurico para la formacion delfurfural y posteriormente con el resorcinal&a cetosas pueden sufrir procesosde deshidratacion dando un anillo de furfural o hidroximetilfurfural deacuerdoal monosacarido sea pentosa o hexosa estos furfurales se condensan dandocoloraciones rojas,a traves de esta prueba es posible diferenciar cetosas alser mas rapidas en reaccion,la fructosa debia dar prueba positiva sinembargo hubo interferencia y no se dio la reaccion,por su parte la sacarosa alcontener en su conguracion la fructosa da tambien prueba positiva lo que seconrma con los resultados que se muestran en la gura ' segun la cual laprueba resulto positiva para la sacarosa y la muestra de "% h

    !igura 'Pruebas de tubo $elivano'

    Blanco,muestra !2,muestra 24,muestraproblema,fructosa,xilulosa,sacarosa,glucosa

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    !igura Reaccion de las cetoexosas con el reactivo de selivano'

    PRUEBA BIAL

    El reactivo empleado en esta prueba contiene acido clorhidrico que permitela deshidratacion de las pentosas de esta manera se generan los furfuralesque reaccionan con orcinol y hierro ,la coloracion resultante debe ser azulverdoso,la prueba no se presento positiva como se esperaba enarabinosa,ribosa,xilulosa,xilosa por diferentes interferencias aunque si seevidencio un cambio signicativo de color , la muestra problema si fuepositivaver gura *

    !igura *Pruebas de tubo Bial:

    blanco,control,24 ,arabinosaxilosa,xilulosa,ribosa.

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    !igura +Reaccion de las pentosas con reactivo Bial

    PRUEBA FE&LING

    Esta prueba permite la identicacion de azucaresreductores,glucosa,ribosa,eritrosa etc,el fundamento del ensayo consiste enuna reaccion redox en la que el grupo aldehido es oxidado a su acidocorrespondiente por el cobre que pasa de estado " a 1

    &a prueba se considera positiva si existe un precipitado amarillo o si el color

    amarillo es levemente anaranjado,asi mismo un precipitado rojo tambien espositiva-l observar los resultados consignados en la gura . se concluye

    !igura .Pruebas de tubo eling:

    blanco,muestra de !2 ,muestra 24 ,muestra problema,xilosaarabinosa,glucosa,ribosa,galactosa.

    !igura 1/Reaccion de los carboidratos con el reactivo de eling.

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    PRUEBA TOLLENS

    El ensayo de reactivo de tollens consiste en una reaccion de oxidacion,conesta prueba se identica las aldosas pues en teoria las cetosas noreaccionanEn la reaccion el reactivo se oxida completamente y generaespejo de plata pues el ion de plata se reduce a plata elemental&os azucaresen presencia de un medio basico generan el ion carboxilato para formar el

    espejo,segun la gura 11 se evidencia prueba positiva paraxilosa,ribosa,glucosa,lactosa,galactosa,la prueba control y muestra de "%h

    !igura 11Pruebas de tubo *ollens:

    control,muestra 24,muestraproblema,xilosa,ribosa,glucosa,lactosa,galactosa.

    !igura 1"Reaccion de los carboidratos con el reactivo de *ollens

    PRUEBA BRADFOED

    Este analisis permite distinguir entre monosacaridos y disacaridos,la

    velocidad de reaccion para reducir el ion #u" por accion del monomero es

    mas rapida que la del disacarido,tambien es limitada por el tama0o de la

    molecula siendo consecuentemente con la naturaleza de la moleculae

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    considera una reaccion positiva cuando existe precipitado ladrillo debido a la

    formacion de oxido de cobreegun la gura 1$ se evidencia muestra positiva

    para lactosa,galactosa,maltosa,ramnosa,control,muestra "% h y muestra

    problema

    !igura 1$Pruebas de tubo Bradfoed:

    blanco ,control,muestra 24,muestra

    problema,"actosa,+alactosa,Maltosa,$acarosa.

    !igura 1%Reaccion de los carboidratos con el reactivo de Bradfoed.

    PRUEBAS DE OSAZONAS

    &as aldosas y cetosas reaccionan con la fenilhidrazina para formacion de

    fenilhidrazonas,si existe un exceso se forma la osazona que contendra

    consecuentemente dos residuos de fenilhidrazina y una tercera molecula del

    reactivo se convierte en anilina y amoniaco

    !igura 1' ormacion de osaonas

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    Cr'($"%)( p"$ro* pru)+"( o(",o*" pru)+"( u'o

    -rabinosa

    2alactosa

    !ructosa

    3anosa

    4ilosa

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    2lucosa

    &actosa

    5ibosa

    Pru)+"( u'o

    &actosa

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    2alactosa

    2lucosa

    2lu

    Pru)+"( /) o(",o*"

    u)($r" /) 10!

    existencia de fructosa (conrmado por prueba tollens,por ser hidroxicetona)

    glucosa (conrmado por prueba fehling,tollens,bradfoed)

    Pru)+" 0 o(",o*"

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    6rueba galactosa positiva,cristales en forma de rombo

    6rueba lactosa positiva

    5ibosa prueba positiva (prueba bial,tollens,bradfoed,selivanof)

    O(",o*" u)($r" pro+%)"

    6resencia de &actosa cristales en disposicion radial en forma de x,agujas oprismas largos

    6resencia de fructosa cristales en agujas

    Pru)+"( u'o

    Mu'o 10 !or"(

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    6resencia de galactosa

    6resencia de &actosa forma de arboles

    6resencia de glucosa (conrmado prueba fehling,tollens,bradfoed)

    Mu'o Mu)($r" pro+%)"

    6resencia de lactosa

    Mu'o 0 !or"(

    presencia de lactosa cristales en forma de arbolitos

    2alactosa (cristales rombicos o vistos a poco aumento esferas)

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    A*"%'('( /) r)(u%$"/o(

    &a presencia de galactosa en la orina nos puede detectar una enfermedadmuy conocida como la galactosemia que indica un desorden preocupante enla incapacidad que tienen las personas para metabolizar de moda adecuadala galactosa a glucosa Esto se debe a la deciencia de tres enzimas

    principalmente,las cuales son galactosa 1fosfato uridiltrasferasa (2-&7),galactocinasa y 896 galactosa% epimerasa #ausando enfermedades comola galactosemia, cataratas en adultos o producir s:ntomas levesver 5utametabolica de la galactosa;1n solo es detectada cuando se buscaazucares reductores en la orina

    &actosuria es la segunda az?car que es eliminada con mayor frecuencia enla orina no es peligrosa y se encurta en personas que est=n embarazadas,

    aunque no es el caso que pasa en nuestro informe se puede ser confundidacon la galactosuria creando un falso diagnostico que puede no prevenir ladiabetes 3ellitus gestacional

    2randes presencia de ribosa puede ser un indicador de alarma, ya que aldetectar 9 ribosa puede revelar una enfermedad llamada distroa muscularla cual evita una buena funci>n motriz 6ero esta presencia de estaspentosas puede ser por el consumo de cerezas, moras o ciruelas

    Ru$" )$"+o%'" /) %" 2"%"$o(" 314

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