Bioenergética y el estallido oxidativo: Los protocolos para el aislamiento y la evaluación de leucocitos y plaquetas humanos.

Se detalla los métodos para el aislamiento y recubrimiento de las células sanguíneas humanas como monocitos, linfocitos, neutrófilos y plaquetas y el análisis de la función bioenergética mitocondrial en estas células. El protocolo incluye el aislamiento celular, seguido del blindaje de las células, y finalmente de un ensayo de flujo (XF24) con la preparación de una placa de 24 pocillos extracelular. El estallido oxidativo en monocitos y neutrófilos se puede medir directamente en las muestras. Los métodos presentados en el video solo utilizan de 8-20 ml de sangre humana y esto tiene potencial para el seguimiento de generación de especies reactivas de oxígeno. La tasa de consumo de oxígeno basal (OCR) fue establecida por los primeros 3 mediciones.