Evaluación de los eritrocitos por

laboratorio

Conteo de glóbulos rojos

• Es un examen de sangre que determina el número de glóbulos rojos (GR) que usted tiene.

• Los glóbulos rojos contienen hemoglobina, que transporta oxígeno. La cantidad de oxígeno que los tejidos corporales reciben depende de cuántos glóbulos rojos tenga usted y de qué tan bien funcionen.

Procedimiento PASO 1• Aspire con la pipeta de

Thoma para glóbulos rojos, la sangre contenida en el tubo de ensaye. Procure aspirar suavemente hasta la marca de 0.5, asegurándose de que la columna de sangre no tenga burbujas. Una vez obtenido el volumen requerido, limpie la punta de la pipeta con papel

 

Paso 2

Llénese con líquido de GOWERS hasta la marca superior de 101. En caso de pasarse puede eliminar líquido con una servilleta para tener con exactitud el volumen requerido. 

Paso 3Retire la boquilla y tape la pipeta con los dedos anular y pulgar colocándolos en los extremos, agite suavemente durante dos minutos aproximadamente.Soplando, se eliminan las 3 a 5 primeras gotas de la pipeta

Paso 4 Ponga la pipeta en posición vertical y enseguida deposite dos gotas sobre las regiones biseladas de la cámara de Neubauer, a las que previamente les habrá colocado un cubreobjetos, deposite una pequeña gota procurando que se difunda hasta las zonas correspondientes del rayado hasta llenar la cámara contadora.

Paso 5.Inmediatamente coloque la cámara de Neubauer sobre la platina del microscopio y déjela reposar durante 3 minutos. Una vez transcurrido este tiempo, proceda a hacer la observación. Primero con el objetivo de 10X (seco débil) se procede a enfocar la preparación y localizar el rayado correspondiente para la cuenta de los eritrocitos; Una vez hecho esto se enfoca con el objetivo de 40X (seco fuerte) Y se cuenta el número de eritrocitos colocados dentro de los cuadros del 1 al 5, tal como se indica en el siguiente esquema:

Cálculos:

• Anote los eritrocitos contados en los 5 cuadros• Multiplique la cantidad por 10,000 para obtener el

número de eritrocitos por microlitro de sangre.

Valores de referencia:• Hombres:5,000,000 a 6,000,000 por mililitro• Mujeres: 4,500,000 a 5,500,000 por mililitro• Niños (4 años): 4 200 000-5 200 000• Lactantes (1-6 meses): 3 800 000-5 200 000• Recién nacidos: 5 000 000-6 000 000

Razones por las que se realiza el examen

• El conteo de glóbulos rojos casi siempre forma parte de un CSC (conteo sanguíneo completo).

• Este examen puede ayudar a diagnosticar anemia y otros problemas de salud que afectan los glóbulos rojos.

Afecciones adicionales bajo las cuales se puede realizar el examen:

• Síndrome de Alport• Anemia hemolítica inmunitaria inducida por

medicamentos• Anemia hemolítica debido a la deficiencia de G6PD• Anemias hereditarias, como la talasemia• Anemia hemolítica autoinmunitaria idiopática• Anemia hemolítica inmunitaria• Macroglobulinemia de Waldenstrom• Hemoglobinuria paroxística nocturna (HPN)• Mielofibrosis primaria

Determinación de hemoglobina (hb)• La hemoglobina es una proteína contenida dentro

del eritrocito, • El cálculo de esta cantidad se lleva a cabo por medio

de la formación del complejo cianometahemoglobina por medio del reactivo de Drabkin

• La densidad del color producido es directamente proporcional a la cantidad de hemoglobina presente.

• Se hace de la siguiente manera:

Procedimiento

Paso 1

• Marcar 2 tubos de ensaye de 13 X 100 uno con la letra “B” (blanco) y otro con la letra “P” (problema) y depositar en cada uno 5 ml de reactivo de Drabkin

Paso 2

Coloque La Boquilla en una Pipeta de Shali y aspire la sangre contenida en el tubo de Ensayo, hasta la marca de 20 Cm.

Paso 3Se limpia el exceso de sangre, y se deposita en el tubo marcado con la letra “P”, aspirar y soplar varias veces el reactivo hasta homogeneizar la mezcla

Paso 4Deje reposar por espacio de 30 Minutos, obteniéndose así la Cianometahe-moglobina.

Paso 5La Densidad Óptica de este pigmento es medida posteriormente en el Espectronic a 540 Nanómetros (ajustar el aparato con el tubo BLANCO). Multiplique el valor obtenido por el factor (36.8) y se reporta en gramos/100 ml.Parámetros normales en adultos para la ciudad de México: En el hombre es de 15.5 a 20 g/100 ml. En la mujer 13.5 A 17 g/100 ml. 

Valores normales• Mujeres 12.3 a 15.3 g/dL• Hombres 14.0 a 17.5 g/dL• Los rangos de los valores normales pueden variar

ligeramente entre diferentes laboratorios. Hable con el médico acerca del significado de los resultados específicos de su examen.

• Los ejemplos anteriores muestran las mediciones comunes para los resultados de estas pruebas. Algunos laboratorios usan diferentes medidas o pueden analizar diferentes muestras.

• Nota: g/dL = gramos por decilitro.

Hematocrito (HCT)

• Es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda la sangre que está compuesta de glóbulos rojos. Esta medición depende del número de glóbulos rojos y de su tamaño.

• El hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo sanguíneo completo (hemograma).

Determinación De Microhematócrito (Hto)

Paso 1• Recoja sangre por

medio de un capilar, y llénelo

aproximadamente hasta 3/4 partes de su longitud total, inclinándolo para acelerar su llenado.

Paso 2Se tapa uno de los extremos del tubo capilar con una pequeña porción de plastilina

Paso 3Se coloca adecuadamente en la microcentrífuga con la parte cerrada sobre la empaquetadura de caucho. Se coloca la tapa, se atornilla y se centrifuga a 16000 rpm durante 5 minutos.

Paso 4• Se valora el microhematócrito como el porcentaje de toda la sangre venosa ocupada por los eritrocitos y se calcula de la forma siguiente:•Con una escala o regla se mide desde la superficie de la separación de plastilina hasta el menisco del plasma (100%), después se mide el paquete globular y se determina el porcentaje que le corresponde.

•Valores de referencia:•Hombres: 45-57%.•Mujeres: 42-48%

Determinación De Los Indices Globulares Medios

• Cálculo Del Volumen Globular Medio (V.G.M)

Es el promedio del volumen del eritrocito y se obtiene Multiplicando el valor del microhematócrito por 10 Y dividiendo entre la cantidad resultante de la cuenta de los eritrocitos, expresada en millones.

VGM= Hematócrito X 10 = µ3 Eritrocitos expresados en millones/mm3

Cálculo de la hemoblobina globular media

Consiste en el promedio del peso de la hemoglobina en el eritrocito y se obtiene:

HgGM = hemoglobina X10 µgnúmero de eritrocitos

Valores de referencia:Hombres:28 a 35µg Mujeres:28-35µg

Concentración de hemoglobina corpuscular media

Es la concentración de Hg que contiene cada eritrocito y se obtiene:

CHbGM=hemoglobina X100 hematócrito

Valores de referencia:Hombres: 30-33% Mujeres:30-33%

Ancho de distribución de los eritrocitos (RDW)

• Es una medida de la variación del tamaño de glóbulos rojos (RDW) que se reporta como parte de un de recuento estándar sanguíneo . Por lo general, las células rojas de la sangre son de un tamaño estándar de aproximadamente 6-8 micras. Ciertos trastornos producen una variación significativa en el tamaño celular. Los valores más altos de RDW indican una mayor variación de tamaño.

Cálculo de RDW

• El RDW se calcula dividiendo la desviación estándar (SD) por el volumen corpuscular medio (VCM) y multiplicando el resultado por 100. La desviación estándar representa el volumen de los eritrocitos o glóbulos rojos que están en el frotis de sangre. Según Beckman Coulter, la ecuación de RDW para su cálculo es

RDW = SD MCV x 100.

Rango normal de referencia para el análisis de sangre RDW

• Los valores normales son de RDW entre 11 y 14%, con un rango de RDW valor óptimo de 13 %.

CUENTA DE RETICULOCITOS

Los reticulocitos se consideran glóbulos rojos inmaduros, tienen una duración de 24-48 horas después de que ha salido de la médula ósea para así convertirse en un eritrocito maduro en sangre periférica, los reticulocitos son prácticamente indiferenciables de los glóbulos rojos maduros, a menos que se les tiña con tinción supravital.

El colorante azul de cresil o azul de metileno tiñe los

restos de ácido ribonucleico en forma de red muy fina,

los cuales permanecen en el citoplasma del eritrocito algunos días después de haber perdido su núcleo.

Materiales y reactivos

Tubos de ensayo Portaobjetos Pipetas de Thoma Sangre con EDTA Azul de metileno

TÉCNICA1. Colocar en un tubo dos gotas de sangre (aproximadamente 50µl por cada gota) y dos gotas de colorante.2. Agitar la mezcla sangre-colorante e incubar 15 minutos a temperatura ambiente.3. Hacer una extensión en un portaobjetos con una gota de la mezcla.4. Dejar secar y observar en objetivo de inmersión 100x.5. Contar 500 eritrocitos, anotando el número de reticulocitos observados dentro de ese conteo.

CÁLCULOS% de reticulocitos = Núm. De reticulocitos contados en 500 Eritrocitos

5

Reticulocitos corregidos (R) = % R Hto. Del pacienteHto. Ideal (45%)

Valores de ReferenciaAdultos: 0.5 – 1.5 %Niños: 2 – 5 %

FROTIS DE SANGRE

PERIFÉRICA

Obtenido de punción capilar y coloreado con Wrigth o Giemsa.Se utiliza a menudo como una prueba de seguimiento de resultados anormales en un conteo sanguíneo completo (CBC) . Se puede usar para ayudar a diagnosticar y / o controlar las condiciones que afectan a numerosas poblaciones de células sanguíneas. Si los resultados de un recuento automático de células y / o diferencial indica la presencia anormal de glóbulos blancos (WBC), glóbulos rojos (RBC), y / o plaquetas o si hay razón para sospechar que hay células anormales presentes en la sangre, es razón suficiente para realizar un frotis sanguíneo.

ALTERACIONES MORFOLÓGICAS DE ERITROCITOS

MICROCITOS Células con tamaño menor que lo normal, se encuentran en anemia por déficit de hierro (probablemente la causa más común en nuestro medio), talasemias, anemias sideroblásticas, intoxicación con plomo y en la anemia de las enfermedades crónicas.

MACROCITOSCélulas con tamaño mayor que lo normal, a menudo indican deficiencia de ácido fólico o vitamina B12, condiciones en las cuales con frecuencia se acompaña de ovalocitosis. Puede encontrarse macrocitosis sin ovalocitosis en pacientes con hipotiroidismo, enfermedades hepáticas. La presencia de ligera macrocitosis en el recién nacido es un hallazgo normal.

HIPOCROMIAIndica disminución del contenido de hemoglobina de los eritrocitos. La causa más frecuente es anemia por deficiencia de hierro; sin embargo puede ser debida a envenenamiento con plomo o a talasemias.

POIQUILOCITOSISIndica variación de la forma de los eritrocitos. A veces son variaciones inespecíficas sin mayor significado y acompañan a distintas formas de anemia. Otras veces son cambios muy significativos que incluso sugieren un mecanismo responsable de la anemia.

ANISOCITOSIS Indica variación del tamaño de los eritrocitos. También puede ser un cambio mínimo o una alteración muy evidente con presencia de células características de una determinada entidad.

ESFEROCITOSISEritrocitos de forma esférica cuyo diámetro es menor que lo normal y que aparecen hipercrómicos por su forma. Característicamente se encuentran en la esferocitosis hereditaria pero pueden verse en recién nacidos con enfermedad hemolítica por incompatibilidad ABO y en adultos con anemias hemolíticas autoinmunes e isoinmunes.

ELIPTOCITOS U OVALOCITOS En pocas cantidades puede ser un hallazgo normal. Estas células de forma ovalada, cuando se encuentran en grandes números sugiere el diagnóstico de eliptocitosis hereditaria. En pacientes con deficiencia severa de hierro se pueden encontrar células alargadas que semejan eliptocitos.

Es difícil evaluar morfológicamente los cambios de tamaño y forma de las plaquetas y desde el punto de vista clínico tiene más importancia evaluar el número de plaquetas en el frotis,  si el número es aparentemente adecuado probablemente el recuento de plaquetas será normal pues existe una buena correlación entre la apreciación visual y el recuento si el observador es una persona experimentada.

ALTERACIONES MORFOLÓGICAS DE PLAQUETAS

ALTERACIONES MORFOLÓGICAS DE LEUCOCITOS

NEUTROPENIAIndica una disminución del número de neutrófilos circulantes. Se observa en enfermedades virales, en la fiebre tifoidea, en la brucelosis, en la malaria y en algunos estados sépticos severos. Ocurre por incapacidad de la médula para liberar neutrófilos o por utilización periférica excesiva y acelerada.Puede ser acompañante de otros trastornos hematológicos como hiperesplenismo, anemia aplásica, agranulocitosis, infiltración de la médula (mieloptisis) o resultante de toxicidad medular, irradiación, uso de drogas.

EOSINOFILIAUsualmente indica la presencia de un proceso inmunopatológico activo, particularmente algún tipo de hipersensibilidad sobre todo con deposición de antígenos y anticuerpos en forma de complejos en los tejidos o bien reacciones alérgicos de tipo inmediato. Se encuentra en pacientes con asma bronquial, rinitis alérgica reacciones alérgicas a drogas, infecciones por helmintos que tienen una fase tisular en su ciclo de migración en el humano, enfermedades neoplásicas como linfomas (Hodgkin) y leucemias.

EOSINOPENIARaras veces se puede establecer su presencia, puede ocurrir cuando hay un exceso de hormonas corticosuprarrenales de origen exogeno o endógeno.

Materiales Lancetas  Placas de vidrio (portaobjetos) Colorante de Wright Pipetas Aceite de inmersión  Microscopio.

Técnica1. La gota de sangre se coloca en el extremo de un portaobjetos limpio.2. Otro portaobjetos de borde liso se coloca en ángulo de 45º sobre la gota dejando que la sangre se extienda sobre el bordo más angosto e inclinado de ésta.3. Luego se procede a deslizarla suavemente hacia el extremo opuesto tratando de arrastrar la gota en forma constante y uniforme dejando una película fina de sangre homogéneamente distribuida.

4. Una vez se logra adecuadamente este procedimiento se dejará secar.5. Luego se coloca la preparación en un soporte y se cubre con el colorante de Wright, dejándolo por espacio de 5 minutos.6. Posteriormente se añade agua en partes iguales hasta obtener un brillo metálico, dejando 6 minutos adicionales.7. Finalmente se lava con agua corriente y se deja secar.Ahora que se ha finalizado la preparación de la lámina, se coloca en el microscopio y con pequeño aumento se revisa la calidad de la coloración, la cantidad aproximada de glóbulos blancos y se escoge el sitio para iniciar el recuento.Se coloca una gota de aceite, de inmersión y se pasa a mayor aumento (100x) enfocando simultáneamente.

ERITROSEDIMENTACIÓN

La velocidad de eritrosedimentación (ESR, por sus siglas en inglés) es un análisis de sangre que mide la velocidad a la que los eritrocitos o glóbulos rojos se separan de una muestra de sangre que ha sido tratada para que la sangre no se coagule.

Técnica

Paso 1

Tome sangre con anticoagulante del tubo con una pipeta Pasteur, transfiérala a un tubo de Wintrobe y llénelo hasta la marca de "0". Debe procurar que al vaciar la pipeta la punta de ésta quede al fondo del tubo e ir vaciando la sangre suavemente, al mismo tiempo que se va retirando la pipeta del fondo evitando formar burbujas o aire

PASO 2

Lleve el tubo de Wintrobe a la gradilla e inicie el conteo de tiempo, dejando reposar la muestra durante una hora.

• Transcurrida una hora, mida el espacio que ocupa el sobrenadante, desde la superficie hasta el borde superior de los eritrocitos sedimentados, haga la lectura en mm.

Parámetros Normales Para La Ciudad De México:

Hombres 0 - 7 Mm/ Hora 

Mujeres 0 - 15 Mm/Hora 

Transfusiones

Introducción en la corriente sanguínea de sangre completa o componentes de la misma (plasma, plaquetas, eritrocitos). La sangre completa puede transfundirse al receptor directamente desde el donante, una vez comprobados el grupo ABO y subgrupos antigénicos de ambos, pero lo más frecuente es recoger la sangre del donante y almacenarla en un banco de sangre hasta su utilización

Equipo

Producto sanguíneo indicado. Equipo de administración de sangre con filtro o sin filtro en caso

de plaquetas. Equipo para punción venosa (catéter, ligadura, torundas con

solución antiséptica, etc.). Guantes, para en caso de ser necesario, instalar el acceso venoso. Tripié.

Procedimiento

1.- Verificar la indicación del médico de la transfusión en el expediente y llenar la solicitud al banco de sangre, especificando la cantidad, el tipo de producto sanguíneo, el factor Rh, la hemoglobina, hematocrito, reacciones transfusionales previas, fecha de la última transfusión, etc.

2.- Enviar la solicitud al banco de sangre acompañada de una muestra sanguínea en un tubo rojo para tipificación y compatibilidad, etiquetándose muy bien los tubos.

3.- Solicitar la autorización al paciente o sus familiares.

4.- Obtener sangre y/o componentes por el Banco de Sangre

5.- Verificar registro y etiqueta de sangre segura, los datos del paciente, número de cama, tipo de componente sanguíneo, grupo sanguíneo y factor Rh del paciente y del donante, número de unidad, fecha de expiración y cualquier alteración que pudiera presentar el paquete. Se debe solicitar la ayuda de la enfermera (o) para corroborar la información antes mencionada.

6.- Lavarse las manos.

7.- Colocarse guantes.

8.- Preparar el equipo de administración. Para transfundir plasma o paquete globular se debe utilizar equipo con filtro y para transfundir plaquetas se debe utilizar equipo sin filtro.

9.- Purgue el sistema con solución salina.

10.- Realizar la punción venosa, si es precisa

11.- Conectar el equipo al catéter previamente colocado.

12.- Infundir 10-15 gotas por minuto durante los primeros 15 minutos de iniciada la infusión.

13.- Monitorear los signos vitales del paciente cada minutos durante la primera hora y luego cada media hora hasta finalizar la transfusión.

14.- Regular la velocidad de infusión de acuerdo a indicación. La transfusión debe culminar en menos de 4 horas como máximo de iniciada la transfusión.

15.- Lavar el catéter del paciente con solución fisiológica, en caso de tener indicada solución parenteral reiniciarla.

PRUEBAsCRUZADAS

Es un método para clasificar el tipo de sangre tiene una persona. Éste depende de si hay o no ciertas proteínas, llamadas antígenos, en los glóbulos rojos o si hay anticuerpos para estas sustancias. La sangre generalmente se clasifica de acuerdo con el sistema ABO. Este método separa los tipos de sangre en cuatro categorías: A B AB O El grupo sanguíneo de una persona también depende de lo que ha heredado de sus padres.

El proceso comenzará extrayendo sangre de una vena. El sitio de punción se limpia con un antiséptico y luego se coloca una banda elástica alrededor del antebrazo con el fin de ejercer presión y hacer que las venas se llenen de sangre. A continuación se introduce una aguja en la vena y se recoge la sangre en un frasco hermético o en una jeringa. Durante el procedimiento, se retira la banda para restablecer la circulación y, una vez que se ha recogido la sangre, se retira la aguja y se cubre el sitio de punción para detener cualquier sangrado.

El examen que nos permite determinar el grupo sanguíneo se denomina sistema o tipificación ABO. La sangre del paciente se mezcla con anticuerpos contra sangre tipo A y tipo B, y la muestra se revisa para ver si los glóbulos sanguíneos se pegan o aglutinan. Si dichos glóbulos se aglutinan, eso significa que la sangre reaccionó con uno de los anticuerpos.

Posteriormente se procede a la tipificación o prueba inversa. La parte líquida de la sangre sin células se mezcla con sangre que se sabe que pertenece al tipo A o al tipo B.

* Las personas con sangre tipo A tienen anticuerpos anti-B y las que tienen sangre tipo B tienen anticuerpos anti-A. El tipo de sangre O contiene ambos tipos de anticuerpos.

Estos dos pasos pueden determinar con precisión el tipo de sangre de una persona.

PLASMASANGUINEO

El plasma es una sustancia compleja; su componente principal es el agua. También contiene proteínas plasmáticas, sustancias inorgánicas (como sodio, potasio, cloruro de calcio, carbonato y bicarbonato), azúcares, hormonas, enzimas, lípidos, aminoácidos y productos de degradación como urea y creatinina

¿Qué función tiene el plasma?

• Permite que la sangre fluya a través del cuerpo.

• Suministra importantes proteínas necesarias para la coagulación de la sangre.

• El plasma transporta azúcares, sales y hormonas, y también ayuda a mantener la presión de la sangre de la persona.

• El plasma se puede donar mediante un proceso denominado plasmaféresis:

• extracción de plasma de la sangre del donante y la devolución de los glóbulos blancos, los glóbulos rojos y las plaquetas.

•  utilizar como inmunoglobulina para tratar enfermedades inmunológicas

• coagulación en casos de hemorragia como la hemofilia

Indicaciones de las transfusiones

• La indicación de la transfusión es de exclusiva responsabilidad del médico,  debe ser hecha después de una evaluación clínica del paciente.

TRANSFUSION DE SANGRE TOTAL

•  Objetivo  :  Reponer la pérdida aguda de capacidad transportadora de óxigeno y de volemia

•  Indicaciones• En casos de hemorragia activa aguda con 

pérdida mayor de 50% de la volemia• En máquinas de circulación extracorpórea• Exsanguíneo transfusión en neonatos

Rendimiento:• Una unidad de sangre 

total aumenta los niveles de hemoglobina en 1 gr./dl.  y  3% de hematocrito en una persona de 70 kgs. de peso una vez estabilizado el cuadro hemorrágico.

TRANSFUSION DE GLOBULOS ROJOS

Objetivo• El objetivo es proveer al organismo de una 

suficiente capacidad transportadora de oxígeno que restituya una función perturbada

• Indicacciones:Anemia sintomática o con signos de hipoxia tisular.

 

TRANSFUSION DE CONCENTRADOS PLAQUETARIOS

•  Objetivo: Corregir o prevenir la hemorragia asociado a alteraciones cuantitativas o funcionales de las plaquetas.

• Indicaciones: Se dividen en dos grupos; transfusiones terapéuticas que se indican tras la presentación de la hemorragia  

• transfusiones profilácticas que se indican en función del recuento de plaquetas y,  por lo general durante los tratamientos aplasiantes.

Terapéuticas• Pacientes con una coagulación intravascular 

diseminada documentada y sangramiento,  y  recuento de plaquetas inferior a 50.000 por mm3.

• Pacientes con sangramiento activo, y con un recuento plaquetario inferior a 50.000 por mm3

• Pacientes  portadores de trastornos de la función plaquetaria, con sangramiento,  aunque tengan recuento de plaquetas normal.

• Pacientes con sangramiento difuso después de una cirugía cardíaca con un recuento plaquetario inferior a 100.000 por mm3 o con recuento no disponble.

Profilácticas• Pacientes con recuento plaquetario inferior a 

10.000 x mm3 sin sangramiento.• Pacientes con recuentos inferiores a 50.000 

por mm3 que serán sometidos a una intervención quirúrgica o a un  procedimiento invasivo.

• Pacientes urémicos que van a ser sometidos a procedimiento invasivo o cirugía.

TRANSFUSION DE CRIOPRECIPITADOS

• Objetivo :  Se administra para la prevención o tratamiento de los sangramientos secundarios

• Indicaciones :   enfermedad de Von Willebrand  en algunos casos déficit de Factor VIII ( hemofilia A ) 

• Recomendaciones de uso : Sangramiento microvascular difuso y fibrinógeno menor de 100 mg/dl.

TRANSFUSION DE PLASMA FRESCO CONGELADO

•  Objetivo  : Se administra para corregir los sangramientos debidos a deficiencias únicas o múltiples de factores de coagulación.

•  Indicaciones: Manejo de hemorragia secundaria a terapia anticoagulante tales como warfarinas