UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYOFACULTAD DE MEDICINA HUMANA

MÉTODOS DE LA GENÉTICA HUMANA

MAG. MARCO ANTONIO GUZMÁN TELLO

. .

4 2

I

II

1 2

1 2 3

HOMBRE

MUJER

NÚMERO DE HIJOS

AFECTADOS

HETEROCIGOTAS

CHEQUEADOSCLINICAMENTE

PROBANDOS

FALLECIDO

ADOPTADO

ABORTO

MATRIMONIO

CONSANGUINIDAD

G. MONOZIGOTAS

G. DIZIGOTICOS

AUSENCIA DEPROGENIE

SECUENCIA DE HOMBRES Y MUJERES

PORTADOR DECARACTER LIGADO AL X

2

METODOLOGÍA EN GENÉTICA CLÍNICAESTUDIO E INTERPRETACIÓN DE HEREDOGRAMAS

Citogenética: Convencional y Molecular. Bandeo de Alta Resolución: HRB Hibridación in situ por Fluorescencia: FISH Reacción en Cadena de la Polimerasa: PCR Hibridación Comparada del Genoma: HCG Screening Bioquímico: Pre natal y Post natal:

Alfafetoproteína, Beta Gonadotrofina Coriónica, y otros para detectar errores innatos del metabolismo (EIM).

METODOLOGÍA EN GENÉTICA HUMANADIAGNÓSTICO CITOGENÉTICO Y MOLECULAR

2

2.3

2.2

2.1

2.332.322.31

2.232.222.21

2.132.122.11

500 1200

3200

NIVEL DE BANDAS POR LOTE HAPLOIDE

Q Q-BANDS QF Q-BANDS BY FLUORESCENCE QFQ Q-BANDS BY FLUORESCENCE USING QUINACRINE GT G-BANDS BY TRYPSIN GTG G-BANDS BY TRYPSIN USING GIEMSA GAG G-BANDS BY ACETIC SALINE USING GIEMSA CB C-BANDS BY BARIUM HYDROXIDE CBG C-BANDS BY BARIUM HYDROXIDE USING GIEMSA RF R-BANDS BY FLUORESCENCE RFA R-BANDS BY FLUORESCENCE USING ACRIDINE ORANGE RH R-BANDS BY HEATING RB R-BANDS BY BRDU

NOMENCLATURA UTILIZADA PARA LA DESIGNACION DE METODOS DE BANDEO

METODOLOGÍA EN GENÉTICA HUMANA MÉTODOS CITOLÓGICOS

Estudio de la cromatina sexual: Presencia del corpúsculo de Barr o cromatina sexual X y presencia del palillo de tambor (neutófilos polinucleolares).

Procedimientos para el estudios de cromosomas humanos: Uso de medios de cultivo sintéticos, soluciones hipotónicas, colchicina, fitohemaglutinina, métodos de bandeo.

DNA RECOMBINANTE

Implica crear a voluntad moléculas de DNA constituídas a su vez por fragmentos de DNA provenientes de diversas fuentes.

Utilización de endonucleasas de restricción (Eco RI reconoce CTTAAG y rompe la unión fosfodiestérica entre las bases A y G).

Utilización de ligasas (ligan o unen dos hebras) y polimerasas (copia con exactitud una secuencia específica de DNA).

ILUSTRACIÓN SOBRE EL USO DE LAS ENDONUCLEASAS DE RESTRICCIÓN EN EL MAPEO DEL DNA

0 100 200 300 400

Endo aEndo b

Digestión con Endo a Digestión con Endo a + b Digestión con Endo b

100 pb125 pb175 pb

25 pb2 x 50 pb100 pb175 pb

50 pb150 pb200 pb

HIBRIDACIÓN COMPARADA DEL GENOMA (CGH)

• Método que permite producir un mapa detallado de las diferencias entre cromosomas entre células diferentes, sin conocimiento previo de regiones que son amplificadas.

• El método detecta ganancia (amplificación) o pérdidas (deleción) de segmentos de DNA

PROPORCIÓNVERDE/ROJO

2.0 1.0

AMPLIFICACIÓN DELECIÓN

DETECCIÓN DE BLOQUES MAYOR A 5 MB

DNA DE TUMOR DNA NORMAL

MARCACIÓN: BIOTINADETECCIÓN: FLUORESCEÍNA

MARCACIÓN: DIGOXIGENINADETECCIÓN: RODAMINA

ESQUEMA DE LA CGH

GRACIAS