Subtipificación molecular deSubtipificación molecular de

SalmonellaSalmonella Typhimurium, Costa Rica 2003-2005 Typhimurium, Costa Rica 2003-2005

Dra. Elena CamposDra. Elena CamposCentro Nacional de Referencia en Bacteriología, INCIENSACentro Nacional de Referencia en Bacteriología, INCIENSA

COSTA RICACOSTA RICA

V Reunión Internacional Red PulseNet América LatinaV Reunión Internacional Red PulseNet América LatinaBuenos Aires, Argentina, 23 - 25 de octubre 2007

AntecedentesAntecedentes

• El INCIENSA envío al Instituto Malbrán 26 cepas de

Salmonella Typhimurium para subtipificación molecular,

seleccionadas entre cepas aisladas durante 2003–2005:

– Cepas clínicas multiresistentes con perfil ACSSuT y algunas a

NAL, de casos aislados de diarrea y otras de pacientes

relacionados epidemiológicamente a un brote ETA

– Cepas aisladas de alimentos con un perfil de resistencia a los

antibióticos similar al de las cepas clínicas

– Cepas clínicas y de alimentos sensibles a los antibióticos

antes mencionados

ObjetivoObjetivo

• Estudiar la variabilidad genética de aislamientos de S.

Typhimurium (resistentes y sensibles a los antibióticos) de Costa Rica,

del período 2003 – 2005

• Confirmar la sospecha epidemiológica de asociación de

algunas de las cepas multiresistentes a un brote ETA

• Comparar los perfiles de las cepas de S. Typhimurium clínicas

con cepas aisladas de alimentos

Estrategia de estudioEstrategia de estudio

• En INCIENSA se realizó la caracterización fenotípica de los

aislamientos:– pruebas bioquímicas

– serotipificación

– susceptibilidad a los antimicrobianos por difusión en discos (Kirby-Bauer)

• En el Instituto Malbrán se realizó el PFGE:– Con XbaI a todos los aislamientos referidos

– Con BlnI para los aislamientos que presentaron idéntico perfil con XbaI

• En el LCDC-Canadá se determinó el fagotipo de algunos aislamientos

con perfil de resistencia compatible con la variante DT104

ResultadosResultados

Qué sabemos actualmente de Qué sabemos actualmente de

S.S. Typhimurium DT104 en Costa Rica Typhimurium DT104 en Costa Rica

• S. Typhimurium compatible con DT104 se ha documentado en todas

las provincias del país a partir del 2003. Desde el 2004 se tienen

cepas caracterizadas por fagotipo.

• Estas cepas se han asociado a:

– Casos aislados de diarrea

– Un brote ETA

– Una defunción con antecedentes de diarrea

– Infecciones invasivas (septicemia)

• En el 2006, 61% de los aislamientos clínicos de S. Typhimurium

confirmados en INCIENSA presentaron un perfil de resistencia

compatible con la variante DT104

Qué sabemos actualmente de Qué sabemos actualmente de

S.S. Typhimurium DT104 en Costa Rica Typhimurium DT104 en Costa Rica

• Existe evidencia de una cepa de canal porcino (2004) con

resistencia ACSSuT que posee perfiles de PFGE (con XbaI y BlnI)

idénticos a los de cepas clínicas multiresistentes.

• Además, un alimento importado (hígado) presenta un perfil de PFGE

muy similar con XbaI al de las cepas clínicas multiresistentes. Sin

embargo, el análisis con BlnI muestra que dicha cepa tiene una

homología menor al 80 % con las cepas clínicas del país.

• Las cepas de S. Typhimuriun de Costa Rica compatibles con la

variante DT104 muestran un patrón de PFGE idéntico a un perfil

descrito en Argentina y presentan un 93% de similitud con

aislamientos de Colombia.

Plan de TrabajoPlan de Trabajo

2007-20082007-2008

Caracterización molecular (por PFGE) de aislamientos Caracterización molecular (por PFGE) de aislamientos

clínicos y de alimentos de clínicos y de alimentos de Listeria monocytogenesListeria monocytogenes

(a realizar en el 2007)(a realizar en el 2007)

Caracterización molecular (por PFGE) de aislamientos Caracterización molecular (por PFGE) de aislamientos

clínicos y de alimentos de clínicos y de alimentos de Listeria monocytogenesListeria monocytogenes

(a realizar en el 2007)(a realizar en el 2007)

• Siete aislamientos clínicos de Siete aislamientos clínicos de Listeria Listeria

monocytogenesmonocytogenes (1998-2006)

• 23 cepas aisladas de queso fresco, 23 cepas aisladas de queso fresco, como parte

de la investigación: “Calidad microbiológica del queso

fresco en expendios de la Región Central Norte, Costa

Rica”, realizada por Ministerio de Salud, INCIENSA e

INISA en el 2004

• Siete aislamientos clínicos de Siete aislamientos clínicos de Listeria Listeria

monocytogenesmonocytogenes (1998-2006)

• 23 cepas aisladas de queso fresco, 23 cepas aisladas de queso fresco, como parte

de la investigación: “Calidad microbiológica del queso

fresco en expendios de la Región Central Norte, Costa

Rica”, realizada por Ministerio de Salud, INCIENSA e

INISA en el 2004

• Brote ocurrido entre abril y mayo 2007, con más de 25 enfermos

• Asociado al consumo de alimentos en un restaurante de mariscos

• El INCIENSA cuenta con las cepas de Shigella sonnei de seis pacientes y de un manipulador de alimentos

• El estudio se podría complementar con el análisis por PFGE de cepas la misma localidad y de otras regiones del país, tanto del 2007 como de años anteriores.

Caracterización molecular de aislamientos clínicos de Caracterización molecular de aislamientos clínicos de

Shigella sonneiShigella sonnei relacionados a un brote ETA, 2007. relacionados a un brote ETA, 2007.

(a realizar en el 2008)(a realizar en el 2008)

Desde el 2005 en Costa Rica S. sonnei es la especie más comúnmente aislada por los laboratorios de la red (69% de los aislamientos referidos

al INCIENSA en el 2006).

Avances en la adquisición de Avances en la adquisición de

equipo para PFGEequipo para PFGE

Actualmente se realiza la licitación para la compra del equipo para PFGE