ELEVEN: TADALAFIL

1.1. Fase Móvil: Buffer Fosfato Potasio monobásico 20mM pH 6.0 : Acetonitrilo. (650:350).

1.2. Preparación de la Solución de la muestra de valoración.

1.2.1. Pesar no menos de 10 tabletas revestidas y calcular el peso promedio.

1.2.2. Pulverizar finamente y transferir a un matraz volumétrico de 100 mL una porción de polvo pesada con exactitud, que equivalga a 20 mg Tadalafil, adicionar 35 mL de Dimetilformamida agitar mecánicamente por 15 minutos y someter a ultrasónido durante 30 minutos, luego adicionar 35 ml de dimetilformamida, agitar mecánicamente por 15 minutos y someter a ultrasónido durante 30 minutos, llevar a aforo con dimetilformamida, agitar mecánicamente y dejar en reposo por 20 minutos.

1.2.3. Filtrar la solución con filtros de papel Whatman No. 40, descartando los primeros 10 mL.

1.2.4. Transferir 5 mL de la solución filtrada a un matraz volumétrico de 50 mL y diluir a volumen con fase móvil.

Filtrar con filtros de membranas de Nylon, Tamaño de poro 0,20 µm y diámetro de 25 mm e inyectar.

1.1. Preparación de las Soluciones Estándar para la Cuantificación

1.1.1. Pesar por separado y con exactitud aproximadamente la cantidad equivalente de tadalafil dado en la siguiente tabla con su respectivo nivel de concentración y transferirlo a un matraz volumétrico de 100 mL.

1.1.2. Adicionar 35mL de Dimetilformamida y someter a ultrasónido por 60 minutos, luego adicionar 35 mL de Dimetilformamida agitar mecánicamente y someter a ultrasonido por 30 minutos, llevar a volumen con Dimetilformamida.

Nivel Con. Estándar Cantidad a pesar Volumen a diluir

Alícuota a tomar

Volumen a diluir

Conc.(µg/mL) Teórica

1 (60%) Tadalafil 12 mg 100 mL 5 mL 50 mL 12.0

2 (100%) Tadalafil 20 mg 100 mL 5 mL 50 mL 20.0

3 (140%) Tadalafil 28 mg 100 mL 5 mL 50 mL 28.0

1.1.3. Conforme a la tabla transferir alícuotas de 5 mL de las soluciones de Tadalafil del mismo nivel de concentración a un matraz volumétrico de 50 mL y diluir con fase móvil. filtrar con filtros de membranas de Nylon,

tamaño de poro 0.45 µm y diámetro de 25 mm e inyectar. La tabla establece las concentraciones teóricas a usar.

1.2. Sistema Cromatográfico

Columna: Eurospher II – C18 P 150 mm x 4.6 mm, 5 µm) (Knauer) Precolumna: Eurospher II 100-5 C18P, 5 X 4 mm, 5 µm. (Knauer)

Fase móvil: Buffer Fosfato Potasio monobásico 20mM pH 6.0Acetonitrilo. (650:350). Temperatura de la columna: Ambiente Longitud de onda analítica: 274 nm Flujo: 1 mL / min. Volumen de inyección: 20 µL

2. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA.

2.1. Xu Quanyun A. and Trissel Lawrence A. Stability- Indicating HPLC Methods for Drug Analysis. American Pharmacists Association. USA 2008.

2.2. Protocolo de la validación del método analítico del método analítico para la identificación y cuantificación de tadalafil en Eleven tabletas revestidas 20 mg por HPLC-DAD. Protocolo Nº 059P.

min1 2 3 4 5 6 7

mAU

-20

-10

0

10

20

DAD1 A, Sig=290,16 Ref=360,40 (TADALAFIL\PRUEBA2000010.D)

Muestra Eleven

6.3

10

VARDENAFIL EN FIABLE

3. PROCEDIMIENTO.

3.1. Preparación de la solución de la muestra de valoración.

3.1.1. Pesar no menos de 10 tabletas y calcular el peso promedio.

3.1.2. Pulverizar finamente y transferir a un matraz volumétrico clase A de 50 mL una porción de polvo pesada con exactitud, que equivalga aproximadamente a 50,0 mg de Vardenafil, adicionar 20,0 mL de fase móvil y someter a ultrasonido durante 5 minutos, luego llevar a volumen con fase móvil, agitar y mezclar.

3.1.3. De la solución anterior, transferir 4,0 mL a un matraz volumétrico clase A de 50 mL y llevar a volumen con fase móvil agitar y mezclar.

3.1.4. Filtrar con filtros de membranas de nylon, tamaño de poro 0,45 µm y diámetro de 25 mm.

3.2. Preparación de la solución estándar

3.2.1. Pesar con exactitud aproximadamente 59,2 mg del estándar de Vardenafil transferir a un matraz volumétrico clase A de 50 mL, adicionar 20 mL de fase móvil y someter a ultrasonido con agitación intermitente por 5 minutos. Llevar a volumen con fase móvil y mezclar.

3.2.2. De la solución anterior a transferir 4 mL a un matraz volumétrico clase A de 50 mL y llevar a volumen con fase móvil. Agitar y mezclar. Filtre con filtros de membrana de nylon para jeringas, tamaño de poro 0,45 µm y diámetro de 25 mm.

3.2.3. Calcular la concentración del estándar de Vadernafil en µg/mL por medio de la siguiente fórmula.

C st=

WmgV 1

∗488,604

579,1∗V 2

V 3

∗%P

100∗1000 μg

1mg

1.1. Sistema Cromatográfico

Columna: Eurospher II 100-5 C18P, 150 X 4,6 mm, 5 µm. (Marca Knauer). Precolumna: Eurospher II 100-5 C18P, 5 X 4 mm, 5 µm. (Marca Knauer).

Fase Móvil: Fosfato de Potasio monobásico 0,01 M pH 3,00 ± 0,05: Acetonitrilo (70:30).

Longitud de onda analítica: 292 nm

Flujo: 1 mL / min.

Volumen de inyección 20 µL.

Temperatura de la columna: 35ºC. ANEXOS

min1 2 3 4 5 6 7 8 9

mAU

0

10

20

30

40

50

60

70

80

DAD1 A, Sig=292,10 Ref=360,10 (VADERNAFIL\LINSISVADERNAFIL2 2013-12-16 13-05-49\IDON160000003.D)

Estándar de Vardenafil 3.

612 -

Vard

enafi

l

Anexo 1. Cromatograma de la solución del estándar de referencia.

min1 2 3 4 5 6 7 8 9

mAU

0

10

20

30

40

50

60

70

80

DAD1 A, Sig=292,10 Ref=360,10 (VADERNAFIL\EXACFIABLE 10 -20 MG 2013-12-17 12-07-55\EXAC10000018.D)

Muestra de Fiable 20 mg tableta

3.60

6 - V

arden

afil

Anexo 2. Cromatograma de la solución de la muestra de valoración.

min1 2 3 4 5 6 7 8 9

mAU

0

10

20

30

40

50

60

70

80

DAD1 A, Sig=292,10 Ref=360,10 (VADERNAFIL\EXACFIABLE 10 -20 MG 2013-12-17 12-07-55\EXAC10000018.D)

Muestra de Fiable 20 mg tableta.Uniformidad de contenido

3.60

6 - V

arden

afil