TALLER HEPATOBILIAR Docente Carmen Marciales Toloza

Practicas Intramurales Inmunoquimica

¿QUE ESTUDIA LA ENZIMOLOGIA CLINICA?

HYMAN J ZIMMERMAN Y JHON BERNARD HENRY Coinciden en afirmar que las enzimas en el organismo , se encuentran en todos los tejidos, algunas se han identificado en plasma o en el suero y pueden llegar al suero desde las células dañadas ó quizás incluso de células intactas.Las enfermedades óseas y Hepatobiliares fueron unas de las patologías que suscito el interés y el estudio de la Fosfatas alcalina. En la actualidad se han identificado en el suero mas de 50 enzimas sin embargo el estudio de las enzimas se vio sumido en un letargo el cual fue reavivado con el resurgimiento y frecuencia de nuevas patologías.

¿QUE SON LAS ENZIMAS?Son catalizadores biológicos definiendo un catalizador como una sustancia que aumenta la rapidez o velocidad de una reacción química, sin que esta se altere dentro de estos procesos por ejem:

2H2O2------- 2H2O + O2Después de catalizar la descomposición de una molécula de H2O2 la catalasa aumenta la velocidad de descomposición 1000 millones de veces. Un verdadero catalizador vuelve a encontrarse exactamente en el mismo estado que antes y preparado como la catalasa para un nuevo ciclo, además los catalizadores modifican la velocidad de los procesos, pero no afectan la posición de equilibrio de una reacción.

¿QUE HACE UN CATALIZADOR?Un catalizador reduce la barrera de energía para una reacción, con lo que aumenta la fracción de moléculas que tienen energía suficiente para alcanzar el estado de transición y hacer que la reacción vaya mas rápida en ambas direcciones.

¿A QUE SE REFIEREN LAS VELOCIDADES DE REACCION Y ORDEN DE REACCION ?Se refieren a las diferentes velocidades en que pueden ocurrir una reacción Enzimática. En las Reacciones de Orden cero : la velocidad del reacción es lineal según el tiempo con independencia de la concentración de la enzima.

En la reacciones de Primer Orden: la velocidad es directamente proporcional a la primera potencia de la concentración del reactivo. ( K1 y K2),es decir la velocidad de la reacción depende tanto de la concentración del sustrato como de enzima modificándose constantemente según el tiempo a medida que se consume el estrato dificultándose la determinación Enzimática.

ACTIVIDADES Elabore un cuadro de definiciones con la terminología encontrada

en el presente tema: Cinética, NADH+, NAD, FADH+, FAD, sitio activo, cofactores, coenzimas, sustrato, especificidad, entre otras.

Breve Reseña histórica de las enzimas Clasifique las enzimas de acuerdo a su utilidad clínica, a través de

un esquema. Elabore un cuadro con los nombres completos y sus respectivas

siglas de cada una de las enzimas que hacen parte del los diferentes perfiles(Hepático, cardiaco, Pancreático, Prostático, Óseo) entre otros.

Describa con ejems la importancia de los factores que afectan las determinaciones enzimaticas y su justificación.

Identifique y mencione que tipo de sustancias afectan la actividad Enzimática

Encuentre la diferencias entre una reacción decreciente y creciente

Dibuje y explique la ecuación de Michaelis-Menten Mencione la clasificación de la enzimas de acuerdo al tipo de

reacción que catalizan. Ubicándolas en un grafico. Investigue la vida media en el suero de la principales enzimas

diagnosticas Consulte e interprete un caso clínico de algunas de las patologías

que afectan la actividad de la enzimas

BILIRRUBINAS

¿COMO OCURRE LA SINTESIS DEL HEM?

El hem, un compuesto químico que transporta el oxígeno y da color rojo a la sangre, es un componente clave de las hemoproteínas, un tipo de proteína que se encuentra en todos los tejidos. Las mayores cantidades de hem se sintetizan en la médula ósea para producir la hemoglobina. El hígado produce también grandes cantidades de hem y la mayor parte se

utiliza como un componente de los citocromos. Algunos citocromos en el hígado oxidan las sustancias químicas extrañas, incluyendo los fármacos, de modo que se puedan eliminar más fácilmente del cuerpo. Ocho enzimas diferentes intervienen en las etapas de la síntesis del hem. Cuando una enzima de la producción del hem es deficiente, los precursores químicos de éste se pueden acumular en los tejidos (especialmente en la médula ósea o el hígado). Estos precursores, que incluyen el ácido deltaaminolevulínico, el porfobilinógeno y las porfirinas, aparecen luego en la sangre y se excretan en la orina o en las deposiciones. Un exceso de porfirinas causa fotosensibilidad, por la que una persona es demasiado sensible a la luz solar. Esto se produce porque cuando se exponen a la luz y al oxígeno, las porfirinas generan una forma de oxígeno cargada e inestable que puede perjudicar la piel. En algunas porfirias se producen lesiones nerviosas que provocan dolor e inclusive parálisis, especialmente cuando se acumulan el ácido deltaaminolevulínico y el porfobilinógeno. Las tres porfirias más frecuentes son la porfiria cutánea tardía, la porfiria aguda intermitente y la protoporfiria eritropoyética. Estos trastornos son muy distintos. Sus síntomas difieren considerablemente, se requieren exámenes diversos para el diagnóstico y también son diferentes los tratamientos. Algunas características son comunes con las porfirias menos frecuentes, que incluyen la deficiencia de la deshidrasa del ácido deltaaminolevulínico, la porfiria eritropoyética congénita, la porfiria hepatoeritropoyética, la coproporfiria hereditaria y la porfiria variegata. Todas las porfirias con excepción de la porfiria cutánea tardía son hereditarias. Todas las personas con una determinada porfiria hereditaria tienen una deficiencia de la misma enzima. Sin embargo, a no ser que provengan de la misma familia, es probable que tengan mutaciones diferentes en el gen para dicha enzima. Las porfirias pueden ser clasificadas de varias maneras. Se prefiere la clasificación según la deficiencia enzimática específica. Otro sistema de clasificación distingue las porfirias agudas, que causan síntomas neurológicos, de las porfirias cutáneas, que causan fotosensibilidad de la piel. Un tercer sistema de clasificación se basa en el origen de los precursores en exceso: si se originan primariamente en el hígado, la porfiria es hepática, y si se originan primariamente en la médula ósea, es eritropoyética.

2. ¿COMO OCURRE EL PROCESO DE FORMACION Y METABOLISMO DE LA BILIRRUBINA?

La bilirrubina es un producto de degradación de las proteínas que contienen el grupo hemo, como es la hemoglobina. El proceso de

formación y metabolismo se explica a continuación: Los hematíes viejos, defectuosos o dañados, son retirados por unas células fagocíticas, llamadas macrófagos, que están situados, por ejemplo, en el bazo. Dentro de estos macrófagos la hemoglobina se metaboliza y el hemo se transforma en la bilirrubina, que es liberada a la sangre. Esta bilirrubina es muy poco soluble en agua y para su transporte en sangre va unida a la albúmina. Una vez que llega al hígado esta bilirrubina es captada por el hígado. Allí el hígado la une al ácido glucurónico, de forma que la bilirrubina se hace más soluble. Este glucurónido de bilirrubina se secreta activamente en la bilis y se dirige hacia el intestino. Las bacterias intestinales metabolizan esta bilirrubina y la transforman en una serie de pigmentos denominados urobilinógenos. Estos pigmentos son los que le dan a las heces el típico color amarillo marrón. Una parte de estos urobilinógenos, dado que son más solubles en agua, se reabsorben hacia la sangre y son eliminados por los riñones a la orina.

3. ¿EN QUE CONSISTE LA ICTERICIA Y COMO SE CLASIFICA?

Un aumento de la concentración en sangre de bilirrubina total conduce a una situación denominada ictericia. La ictericia se puede definir como una decoloración amarillo verdosa de la piel y membranas mucosas por una acumulación de bilirrubina. La ictericia se puede clasificar en 3 grupos fundamentalmente:

1. Ictericia prehepática. Por ejemplo la producida por una hemólisis (figura 2). El incremento de la rotura de hematíes produce una hiperbilirrubinemia no conjugada que será superior a la capacidad de depuración del hígado. Habrá un aumento de bilirrubina indirecta en sangre y la bilirrubina directa será prácticamente normal. En orina habrá generalmente una elevación de urobilinógeno y no se detectará la bilirrubina, ya que la bilirrubina no conjugada, al ir fuertemente unida a la albúmina, no filtra por el riñón a la orina.

2. Ictericia posthepática. Por una obstrucción extrahepática como es una coledocolitiasis (figura 3). La obstrucción hace que la bilirrubina conjugada vuelva a la sangre y no pase al intestino. La hiperbilirrubinemia será fundamentalmente directa, con lo que habrá un aumento también de bilirrubina en orina. Al eliminarse poca bilirrubina hacia el intestino se forma muy poco urobilinógeno, con lo que las heces serán pálidas. Una vez retirada la obstrucción, las heces han de recuperar el color y la orina ha de ser positiva para urobilinógeno.

3. Ictericia hepática. Es un estado intermedio entre las dos anteriores. Puede ser debido a toxinas o infecciones como, por

ejemplo, la hepatitis vírica. Habrá un aumento de bilirrubina directa e indirecta en sangre. En orina habrá una elevación de bilirrubina y el urobilinógeno estará poco aumentado o incluso puede estar disminuido.

¿COMO SE DETERMINAN LAS BILIRRUBINAS EN EL LABORATORIO?

La bilirrubina se determina en suero por métodos químicos y, según la forma de reaccionar, se diferencia clásicamente a la bilirrubina en directa e indirecta. El término bilirrubina directa comprende fundamentalmente a la bilirrubina conjugada con el ácido glucurónico y el término bilirrubina indirecta comprende fundamentalmente a la que va unida a la albúmina. En el suero se determina químicamente la bilirrubina total y directa y se calcula la indirecta por diferencia. Lo normal es una concentración de bilirrubina total menor de 1,2 mg/dl y la mayor parte es bilirrubina indirecta. En los individuos normales no debe de aparecer bilirrubina en orina.

Cuando hay una elevación de bilirrubina directa en sangre, entonces se puede filtrar por el riñón y aparece en orina, con lo que ésta puede coger un color anaranjado. La presencia en orina de bilirrubina y urobilinógeno se puede detectar de forma fácil cualitativamente empleando tiras reactivas.

ACTIVIDADES

*Elabore un glosario de los términos más importantes encontrados en el estudio de las bilirrubinas* Elaborar un Cuadro diferencias y semejanzas si las hay entre los tipos de Bilirrubinas.*Elabore un resumen que evidencie su conocimiento acerca del tema en general.*Describa a través de un diagrama de flujo como se realiza el procedimiento para la determinación en el laboratorio de la Bilirrubina directa y total.*Construya un mapa Conceptual que explique claramente el metabolismo de las bilirrubinas*Elabore un grafico que explique la patogenia de las Ictericias.*Elabore 3 preguntas con su respuesta teniendo en cuenta los diferentes síndromes que pueden presentarse en el estudio de las Ictericias. *Investigue que innovaciones y avances se han presentado en el estudio de las ictericias*Indique la relación que tiene las diferentes proteínas sericas con la

función hepática.

*Elabore un patrón de proteínas de acuerdo a las siguientes patologías: Inflamación crónica Inflamación aguda Agammaglobulinemia Gamapatia monoclonal del Mieloma Gamapatia monoclonal alteración en la síntesis de Ig. Hepatitis severa Cirrosis Síndrome nefrótico

*Clasificación de las siguientes proteínas L1 globulina L2 globulina B globulina Gamma globulina