METODO EXPERIMENTALTamizaje fitoqumico Reactivos Metanol 20ml Para la prueba Shinoda : HCl concentrado y limaduras de magnesio Para prueba de alcaloides reactivos : Dragendorff , Mayer , Wagner. Agua destilada Gelatina Cloruro de sodio Solucin de NaOH 5% Solucin de cloruro frrico 1% Solucin de acetato de magnesio 0.5% en metanol Tolueno

Materiales 01 matraz Erlenmeyer 100ml 02 probetas 50 ml 03 goteros 10 tubos de ensayo Gradilla para tubos Pinzas para tubos Pizeta Procedimiento Se coloca el extracto seco (percolado) en un matraz Erlenmeyer y adicionar 20 ml de metanol.

El metanol rompe las membranas celulares, extrayendo todos los metabolitos secundarios presentes en la droga.

Se calienta en bao mara por 7 minutos en ebullicin.

Las extracciones a temperatura de ebullicin aumentan la extraccin de compuestos significativamente

Se filtra el extracto y se concentra a 15ml

Se divide el extracto obtenido en 5 alcuotas.

I.

Prueba de Shinoda Los flavonoides con el ncleo benzopirona (p. ej. flavonas, flavonoles, flavanonas, etc.) producen coloraciones rojizas cuando a sus disoluciones acuosas o alcohlicas se les adiciona magnesio seguido de HCl concentrado.

II. Prueba Dragendorff , Mayer , Wagner Para comprobar presencia de alcaloides , al filtrado se adiciona gotas de HCl 1% y se separa en 3 alicuotas , por separado se adiciona 0.1ml de reactivos Dragendorff , Mayer , Wagner . Las pruebas son positivas por la formacin de precipitados.

Wagner

Mayer

Dragendorff

III. Prueba para Saponinas Diluir en un volumen dos veces mayor y sacudir por 30 minutos. La espuma se mantiene despus de 10 minutos.

IV. Prueba de Taninos A 0.5ml de extracto inicial se le agrega solucin de cloruro frrico . Los taninos hidrolizables y condensados se diferencian segn el color o precipitado con las sales frricas ; los hidrolizables dan coloracin azul-negruzcos y los taninos condensados dan pardo verdoso.

Tanino hidrolizable azul negruzco

*Con el resto (2.5 ml) se prepara un extracto acuoso a partir del extracto alcohlico, se divide el extracto en 3 porciones. 1 porcin se agrega 1ml de solucin de cloruro de sodio. 2 porcin se adiciona solucin de gelatina al 1% 3 porcin se le agrega gelatina en sal.

(1)

(2)

(3)

Los taninos que son sustancias amorfas solubles en agua que forman soluciones coloidales , precipitan con gelatina que es una protena compleja. De esta forma precipitan todos los taninos e incluso los pseudotaninos a altas concentraciones.

V.

Prueba para Antraquinonas y naftoquinonas Se dividi la muestra en dos tubos de ensayo , se concentro a sequedad . Al 1 tubo se aadi 1ml de Tolueno , se agito y 1 ml de NaOH al 5% . Las antraquinonas liberadas se extraen con tolueno y dan un color rosa-rojo cuando la solucin se agita

La Rx de Bontragger da positivo: Las antraquinonas que estaban en la fase superior de benceno , forman estructuras resinantes por el agregado de NaOH y pasan a esta fase acousa dndole un color rojizo. Al 2 Tubo se adiciono 1ml de solucin de acetato de magnesio al 0.5% en Metanol.

9,10 - dioxoantraceno

Al tratar las soluciones que contienen antraquinonas puras con una solucin de Acetato de magnesio en alcohol, se producen coloraciones caractersticas dependiendo del patrn de

hidroxilacin de la sustancia. Las sustancias m-hidroxiladas producen color amarillo naranja, las p-hidroxiladas color prpura, y las o-hidroxiladas producen coloraciones violeta.

Cuadro Resumen : Marcha Fotoqumica

Prueba Extracto/MeOH

Shinoda Dragendorff Mayer Wagner Agua Cloruro (flavonoide) (alc.) (alc.) (alc.) (Saponinas) frrico(Taninos) + + (+) + + +

Prueba

Sol. NaCl (+)

Extracto/MeOH

Sol. gelatina 1% +

Gelatina sal(TAN) +

Tolueno/NaOH 5% (naftoquinonas) +

Ac. Mg. (antraquinonas) (+)

POSITIVO + NEGATIVO DUDOSO (+)

ConclusionesLa marcha fitoqumica realizada sobre la muestra proporcionada de extracto seco - Uncaria tomentosa, se detecta la presencia de flavonoides ,alcaloides , taninos, saponinas , antraquinonas.

ObservacionesAlgunas pruebas no fueron muy eficientes, el extracto coloreado no permita apreciar con claridad las reacciones de coloracin.

Bibliografa http://profe-farmacognosia.blogspot.com/2011/04/tp-cascara-sagradacaracterizacion.html http://farmacia.udea.edu.co/~ff/manual2008.pdf http://www.hierbitas.com/principiosactivos/Taninos.htm