TCNICA DE BENEDICTYBRADFORDMARIA TERESA PADILLAYAHIRA GALLARDOSOFIA VILLANUEVAMARIA DE LOS ANGELES GARDUO

AZUCAR REDUCTORSon aquellos azcares que poseen sugrupo carbonilo(grupo funcional) intacto, y que a travs del mismo pueden reaccionar con otras molculas.

TECNICA DE BENEDICTidentifica azcaresreductores como lalactosa , laglucosa, lamaltosa.En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solucin alcalina comoCu2Ode color rojo-naranja.

CUANTIFICACIN DE PROTENAS POR EL MTODO DE BRADFORD

PROTENAS Son macromolculas formadas por residuos de aminocidos.Pueden tener distintas funciones:DefensaTrasporteReservaEnzimasMovimientoEstructuralesRegulacin

MTODO DE BRADFORD

Fue diseado por Bradford en 1976.

Barato, solo se utiliza un reactivo el colorante Comassie Blue G-250.

Sensible (1-100 g).

Rpido, la reaccin finaliza a los 5 min. y es estable hasta una 1 hr.

Sencillo

La Absorbancia se lee a 595 nm

TCNICA DE BRADFORDUn mtodo rpido y sensible para la cuantificacin de las cantidades de microgramo de protena que utiliza el principio de tinte de protena. Cuantifica la unin de un colorante a una protena desconocida y la compara contra diferentes cantidades de una protena estndar, usualmente albumina de suero bovino (BSA). El complejo colorante-protena presenta un mximo de absorcin a 595 nm.

MTODOSMtodos de Absorcin:

Mtodos Derivados Fluorimtricos:

Mtodos Colorimtricos La capacidad que tienen las protenas de unir ciertos colorantes.

MTODOS COLORIMTRICOS Se emplea un colorante hidrofbico color pardo y que, al encontrarse en el entorno hidrofbico del interior de una protena, origina un color azul intenso que se puede medir fcilmente.Este mtodo depende, de la interaccin entre un colorante hidrofbico y las protenas, por lo que es relativamente sensible a la presencia de contaminantes tales como restos de detergente y lquidos orgnicos como el metanol. Su principal ventaja es que resulta ms rpido y fcil de emplear que otros mtodos alternativos, y ms sensible.