Tema 14 intro genet
-
Upload
jarconetti -
Category
Documents
-
view
2.262 -
download
0
Transcript of Tema 14 intro genet
![Page 1: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/1.jpg)
Tema 14. Principios de Genética Bacteriana. Variaciones Bacterianas. Mutaciones.
Tema 15. Recombinación.
Tema 16. Transferencia de material genético en bacterias: Transformación. Conjugación. Transducción.
Tema 17. Ingeniería genética. Técnicas y Aplicaciones.
BLOQUE III. MICROORGANISMOS PROCARIOTICOS
III.C. GENÉTICA BACTERIANA
![Page 2: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/2.jpg)
1. Bases moleculares de la genética.1.1. Conceptos. 1.2. Funciones del ADN.1.3. Variaciones bacterianas.
2. Mutaciones. 2.1. Concepto. 2.2. Efectos fenotípicos2.3. Tipos de mutaciones a nivel molecular. . 2.4. Mutaciones inducidas: agentes mutagénicos. 2.5. Reversibilidad de la mutación2.6. Sistemas de reparación de daños del ADN. 2.7.Métodos de detección de mutantes.
Tema 14. Principios de Genética Bacteriana.
![Page 3: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/3.jpg)
CONCEPTOS•Genética
Estudio de la herencia y variación entre los microorganismos
segmento de DNA RNAm(transcripción) (traducción)
Cadena polipeptídica
lugar del genoma donde reside o se localiza un gen
•Gen
•Locus
![Page 4: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/4.jpg)
• AleloCada una de las distintas versiones en que puede presentarse un gen
“forma” (secuencia) de un gen en las bacterias aisladas de su hábitat natural o estirpes silvestres.
• Alelo silvestre
distintas “formas” o secuencias que resultan de mutaciones del alelo silvestre.
• Alelo mutante
![Page 5: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/5.jpg)
• GenotipoInformación genética contenida en un organismo.
• Fenotipo Forma en que se expresa el genotipo o el conjunto de caracteres detectables.
![Page 6: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/6.jpg)
Material genético (nucleoide)
Nucleoide = cromosoma + elementos extracromosómicos
![Page 7: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/7.jpg)
Modelo clásico de Watson y Crick
ADNccc
Composición química, estructura y organización del nucleoide
![Page 8: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/8.jpg)
- 1 solo cromosoma(ADN c.c.c.)
a) Plásmidos (ADNccc)b) Elementos transponibles
Composición química, estructura y organización del nucleoide
Material cromosómico Material extracromosómico
Excepciones:Borrelia y Streptomyces: cromosoma linealAgrobacterium tumefaciens: 1 circular y 1 lineal
![Page 9: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/9.jpg)
1. Resistencia a antibióticos (plásmidos R). 2. Resistencia a metales pesados (Ej, mercurio). 3. Plásmidos de virulencia: producción de toxinas, factores de penetración en tejidos,
adherencia a tejidos del hospedador, etc., 4. Producción de bacteriocinas5. Producción de sideróforos (quelatos para secuestrar iones Fe3+). 6. Utilización de determinados azúcares.7. Utilización de hidrocarburos, incluyendo algunos cíclicos recalcitrantes (degradación de
tolueno, xileno, alcanfor, etc.) en Pseudomonas. 8. Inducción de tumores en plantas (plásmido Ti de Agrobacterium tumefaciens).9. Interacciones simbióticas y fijación de N2 en Rhizobium
Funciones de los plásmidos
Elementos genéticos extracromosómicoscon capacidad de replicación autónoma
a) Plásmidos
![Page 10: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/10.jpg)
b) Elementos genéticos transponiblesEntidades genéticas insertadas en el cromosoma o en plásmidos y que poseen la habilidad de transponerse (saltar) a nuevos sitios de ese cromosoma o plásmido.
Secuencia de inserción (IS)
Transposón (Tn)
![Page 11: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/11.jpg)
1. Bases moleculares de la genética.1.1. Conceptos. 1.2. Funciones del ADN.1.3. Variaciones bacterianas.
2. Mutaciones. 2.1. Concepto. 2.2. Efectos fenotípicos2.3. Tipos de mutaciones a nivel molecular. . 2.4. Mutaciones inducidas: agentes mutagénicos. 2.5. Reversibilidad de la mutación2.6. Sistemas de reparación de daños del ADN. 2.7.Métodos de detección de mutantes.
Tema 14. Principios de Genética Bacteriana.
![Page 12: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/12.jpg)
Replicación del cromosoma bacteriano
Semiconservativo y bidireccional
1.- MANTENIMIENTO DE LA INFORMACIÓN GENÉTICAFUNCIONES DEL ADN
Modelo de replicación en theta (θ)
Origen de la replicación Bidireccional
![Page 13: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/13.jpg)
2.- EXPRESIÓN GÉNICA
GEN RNAm(transcripción) (traducción)
Cadena polipeptídica
a) Transcripción
b) Traducción
c) Regulación génica
Etapas:
FUNCIONES DEL ADN
![Page 14: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/14.jpg)
c) Regulación génica
Genes estructuralesGenes reguladores
Operón de expresión constitutivaOperón de expresión regulada
-inducible-reprimible-ADN polimerasas, ARN polimerasas
-proteínas cadena transporte electrones-proteínas ribosómicas
Condiciones ambientales
- Operón = unidad completa de expresión génica
![Page 15: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/15.jpg)
Operón de expresión inducible Producción de β-galactosidasa
![Page 16: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/16.jpg)
Operón de expresión reprimible
![Page 17: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/17.jpg)
1. Bases moleculares de la genética.1.1. Conceptos. 1.2. Funciones del ADN.1.3. Variaciones bacterianas.
2. Mutaciones. 2.1. Concepto. 2.2. Efectos fenotípicos2.3. Tipos de mutaciones a nivel molecular. . 2.4. Mutaciones inducidas: agentes mutagénicos. 2.5. Reversibilidad de la mutación2.6. Sistemas de reparación de daños del ADN. 2.7.Métodos de detección de mutantes.
Tema 14. Principios de Genética Bacteriana.
![Page 18: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/18.jpg)
CONCEPTO:
cambios en el fenotipo, o genotipo de una población bacteriana
hereditarias No hereditarias
Variaciones bacterianas
![Page 19: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/19.jpg)
1. Por adaptación al medio: regulación de la expresión génica
2. Asociadas a cambios en el genotipo:
Tipos de variaciones bacterianas
![Page 20: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/20.jpg)
1. Por adaptación al medio: regulación de la expresión génica
2. Asociadas a cambios en el genotipo:
- sin transferencia de material genético: mutaciones
- asociadas al intercambio de material genético:
Transformación
Transducción
Conjugación
Tipos de variaciones bacterianas
![Page 21: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/21.jpg)
1. Bases moleculares de la genética.1.1. Conceptos. 1.2. Funciones del ADN.1.3. Variaciones bacterianas.
2. Mutaciones. 2.1. Concepto. 2.2. Efectos fenotípicos2.3. Tipos de mutaciones a nivel molecular. . 2.4. Mutaciones inducidas: agentes mutagénicos. 2.5. Reversibilidad de la mutación2.6. Sistemas de reparación de daños del ADN. 2.7.Métodos de detección de mutantes.
Tema 14. Principios de Genética Bacteriana.
![Page 22: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/22.jpg)
Mutación
Alteración de la secuencia de bases de un segmento de ADN correspondiente a un gen.
Cambio en el genotipo estable y heredable
(del latín mutare, cambiar)
![Page 23: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/23.jpg)
1. Bases moleculares de la genética.1.1. Conceptos. 1.2. Funciones del ADN.1.3. Variaciones bacterianas.
2. Mutaciones. 2.1. Concepto. 2.2. Efectos fenotípicos2.3. Tipos de mutaciones a nivel molecular. . 2.4. Mutaciones inducidas: agentes mutagénicos. 2.5. Reversibilidad de la mutación2.6. Sistemas de reparación de daños del ADN. 2.7.Métodos de detección de mutantes.
Tema 14. Principios de Genética Bacteriana.
![Page 24: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/24.jpg)
TIPOS DE MUTACIONES SEGÚN SU EFECTO FENOTÍPICO
no hay efecto fenotípico
SilenciosasLetales
alteración del fenotipo silvestre
No letalesCondicionalmente letales
Cambios morfológicosRequerimientos nutritivosResistencia a antibióticos y bacteriófagos
![Page 25: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/25.jpg)
1. Bases moleculares de la genética.1.1. Conceptos. 1.2. Funciones del ADN.1.3. Variaciones bacterianas.
2. Mutaciones. 2.1. Concepto. 2.2. Efectos fenotípicos2.3. Tipos de mutaciones a nivel molecular. . 2.4. Mutaciones inducidas: agentes mutagénicos. 2.5. Reversibilidad de la mutación2.6. Sistemas de reparación de daños del ADN. 2.7.Métodos de detección de mutantes.
Tema 14. Principios de Genética Bacteriana.
![Page 26: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/26.jpg)
TIPOS DE MUTACIONES A NIVEL MOLECULAR
a) Mutaciones espontáneas
resultado de la actividad normal de la célula, o de sus interacciones con su medio natural.
b) Mutaciones inducidas
aquellas provocadas por previa alteración experimental del ADN, bien sea directamente, o indirectamente, por agentes físicos o químicos denominados mutágenos
Frecuencia: 10-10 y 10-5
Errores en replicación, reparación o recombinación del ADN
![Page 27: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/27.jpg)
Demostración de la espontaneidad de las mutaciones bacterianas
Las mutaciones son espontáneas, surgen al azar e independientemente de las condiciones ambientales
¿Se produce mutación como consecuencia de la exposición al antibiótico?
¿Mutaciones espontáneas, al azar?las células son resistentes antes de la exposiciónAdaptación ambiental
¿?
Antiguamente:Las adaptaciones ambientales se podían transmitir a la descendencia
Ej. resistencia en medio con antibióticos
![Page 28: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/28.jpg)
PRUEBA DE FLUCTUACIÓN (LURIA Y DELBRÜCK, 1943)
Fago T1 infecta y mata a la mayoría de las células
Cultivo bacterias+
fagos
¿Mutación al azar?TonS TonR
¿Adaptación fisiológica en presencia del fago?
![Page 29: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/29.jpg)
PRUEBA DE FLUCTUACIÓN (LURIA Y DELBRÜCK, 1943)
¿Mutación al azar?TonS TonR
¿Adaptación fisiológica en presencia del fago?
- Suceso poco frecuente
- Si se producía: -al principio del crecimiento ↑ TonR
-al final del crecimiento ↓ TonR
Muchos cultivos pequeños darían VARIABILIDAD en el número bacterias resistentes
Muchos cultivos pequeños darían POCA VARIABILIDADen el número bacterias resistentes
Constante
![Page 30: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/30.jpg)
PRUEBA DE FLUCTUACIÓN (LURIA Y DELBRÜCK, 1943)
0,2 mlcultivo bacterias
103
0,2 mlcultivo bacterias
109
g x 20
X 20
capa de fagosNúmero de bacterias resistentes
103
g x 20 10 alícuotas de 0,2 mlcultivo bacterias
capa de fagos+
Número de bacterias resistentes
Control
Mutación al azar = gran variabilidadAdaptación = Nº resistentes igual
![Page 31: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/31.jpg)
PRUEBA DE FLUCTUACIÓN (LURIA Y DELBRÜCK, 1943)
Max Delbrück
Salvadore E. Luria
![Page 32: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/32.jpg)
PRUEBA DE FLUCTUACIÓN (LURIA Y DELBRÜCK, 1943)
Max Delbrück
Salvadore E. Luria
Carácter preadaptativo de la mutación
El fago T1 selecciona a las bacterias resistentesNO INDUCE SU APARICIÓN
![Page 33: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/33.jpg)
¿ Es posible demostrar la existencia previa de los mutantes resistentes antes de introducir el agente selectivo?
![Page 34: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/34.jpg)
Experimento de la Placa Replicada(Lederberg y Lederberg 1952)
El fago T1 selecciona a las bacterias resistentesNO INDUCE SU APARICIÓN
![Page 35: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/35.jpg)
TIPOS DE MUTACIONES A NIVEL MOLECULAR
a) Mutaciones espontáneas
resultado de la actividad normal de la célula, o de sus interacciones con su medio natural.
Frecuencia: 10-10 y 10-5
Errores en replicación, reparación o recombinación del ADN
![Page 36: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/36.jpg)
TransicionesPu:Py x Pu:Py (A:T por G:C)
TransversionesPu:Py x Py:Pu
(A:T por T:A ó G:C por C:G)SilvestreSilenciosaSin sentidoSentido
erróneo
1.- Mutaciones puntuales
Sustituciones de pares de bases
a) Mutaciones espontáneas
![Page 37: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/37.jpg)
2.- Mutaciones por desplazamiento de la pauta de lectura
Por pérdida o ganancia de un pequeño número de nucleótidos
![Page 38: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/38.jpg)
Deslizamieno en la cadena nueva
Deslizamiento que conduce a una adición Deslizamiento que conduce a una deleción
Deslizamiento en la cadena parental
![Page 39: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/39.jpg)
3.- Grandes delecciones o borraduras- Eliminación de gran número de nucleótidos
bucles intracatenarios
delección
Mutación irreversible e inactivadora de uno o varios genes
Mutación pleiotrópica
![Page 40: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/40.jpg)
4.- Mutaciones insercionalesOcasionadas por elementos genéticos transponibles
Secuencias de inserción (IS) Transposones (Tn)
![Page 41: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/41.jpg)
NO HAY TRANSCRIPCION
Tienen regiones terminales idénticas y repetidas: promotor y terminador
NO HAY TRANSCRIPCIÓN
SI HAY TRANSCRIPCIÓN
Resultado: inactivación del gen debida a desplazamientos de la pauta de lectura
![Page 42: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/42.jpg)
Mutantes resistentes a kanamicina
![Page 43: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/43.jpg)
Duplicaciones en Tandem
5.- Otras mutaciones espontáneas
Reordenamientos causados por errores en la recombinación
Inversiones Translocaciones
a b
Giros de 180º Movimiento a zona diferente a
a
a b
Copia a continuación
a b a b
b ab
b
b
![Page 44: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/44.jpg)
1. Bases moleculares de la genética.1.1. Conceptos. 1.2. Funciones del ADN.1.3. Variaciones bacterianas.
2. Mutaciones. 2.1. Concepto. 2.2. Efectos fenotípicos2.3. Tipos de mutaciones a nivel molecular. . 2.4. Mutaciones inducidas: agentes mutagénicos. 2.5. Reversibilidad de la mutación2.6. Sistemas de reparación de daños del ADN. 2.7.Métodos de detección de mutantes.
Tema 14. Principios de Genética Bacteriana.
![Page 45: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/45.jpg)
-AGENTES FÍSICOS *CALOR*RADIACIONES
-AGENTES QUÍMICOS
*Análogos de bases
*Agentes desaminantes o hidroxilantes
*Agentes alquilantes
*Agentes intercalantes
Agentes mutagénicos
Mutaciones inducidas
![Page 46: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/46.jpg)
Efecto de las radiaciones
Mayor energía
Altamente mutagénicas
a) Radiaciones no ionizantes
a) Radiaciones ionizantes
![Page 47: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/47.jpg)
a) Radiaciones no ionizantes
Luz ultravioleta Letal o mutagénica según dosis
• ADN formación de dímeros de pirimidinas T=T, C-C, T-C impiden la correcta replicación y transcripción del ADN
![Page 48: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/48.jpg)
rayos X y rayos gamma
b) Radiaciones ionizantes
Letales
-Efecto directo: roturas y entrecruzamiento sobre el ADN no reparables
-Efecto indirecto debido a la ionización del agua
H20 H+ + OH-
ADN roturas muerte
Reacciones de autooxidación
02
·H+ O2 ·HO22 ·HO2 H2O2 + O2
Epóxidosperóxidos Efectos letales
corta longitud de onda y elevada energía
![Page 49: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/49.jpg)
-AGENTES FÍSICOS *CALOR*RADIACIONES
-AGENTES QUÍMICOS
*Análogos de bases
*Agentes desaminantes o hidroxilantes
*Agentes alquilantes
*Agentes intercalantes
Agentes mutagénicos
Mutaciones inducidas
![Page 50: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/50.jpg)
1. Análogos de bases
2-aminopurina
5-bromouracilo
Se incorporan durante la replicación del ADN
T:A G:Ctransición
![Page 51: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/51.jpg)
2. Agentes desaminantes o hidroxilantes
- Ácido nitroso
Desaminación oxidativa de adenina y citosina
Adenina hipoxantinaA:T hipoxantina: C (transición)
- HidroxilaminaAñade un grupo hidroxilo al grupo amino de citosina
![Page 52: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/52.jpg)
3. Agentes alquilantes
•Etil etano sulfonato (EES)
•Etil metano sulfonato (EMS)
•Nitrosoguanidina (NTG)
Introducen radicales alquílicos en las cadenas de ADN
C-G
G-(metilada)T-A
![Page 53: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/53.jpg)
4. Agentes intercalantesSe introducen entre las pares de bases del ADN
pérdida o ganancia de nucleótidos
5. Agentes que bloquean totalmente el emparejamiento de bases
Benzo-α-pireno
Modifican purinas grandes lesiones ADN inducen sistema SOS
- Naranja de Acridina- Bromuro de etidio- Derivados de la flavina
![Page 54: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/54.jpg)
1. Bases moleculares de la genética.1.1. Conceptos. 1.2. Funciones del ADN.1.3. Variaciones bacterianas.
2. Mutaciones. 2.1. Concepto. 2.2. Efectos fenotípicos2.3. Tipos de mutaciones a nivel molecular. . 2.4. Mutaciones inducidas: agentes mutagénicos. 2.5. Reversibilidad de la mutación2.6. Sistemas de reparación de daños del ADN. 2.7.Métodos de detección de mutantes.
Tema 14. Principios de Genética Bacteriana.
![Page 55: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/55.jpg)
2.5. Reversibilidad de las mutaciones bacterianas(excepto las grandes delecciones o borraduras)
Segunda mutaciónRestauración del fenotipo original
Restauración del Genotipo original
REVERSIÓN SUPRESIÓN
Restauración del Genotipo original
Bacteria con 2 mutaciones
![Page 56: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/56.jpg)
1. Bases moleculares de la genética.1.1. Conceptos. 1.2. Funciones del ADN.1.3. Variaciones bacterianas.
2. Mutaciones. 2.1. Concepto. 2.2. Efectos fenotípicos2.3. Tipos de mutaciones a nivel molecular. . 2.4. Mutaciones inducidas: agentes mutagénicos. 2.5. Reversibilidad de la mutación2.6. Sistemas de reparación de daños del ADN. 2.7.Métodos de detección de mutantes.
Tema 14. Principios de Genética Bacteriana.
![Page 57: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/57.jpg)
Errores en la replicaciónAcción de mutágenos
Mutaciones
Reparación
1.Mecanismos prerreplicativos:-Reparación fotoenzimática o fotorreactivación-Reparación por escisión y resíntesis
2.Mecanismos posreplicativos:-Reparación por recombinación-Reparación inducible de emergencia (SOS)
Enzimas que comprueban la lectura
Reparación de fotoproductos (luz uv)
2.6. Sistemas de reparación de daños
![Page 58: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/58.jpg)
1. Mecanismos prerreplicativos:
a) Reparación fotoenzimática o fotorreactivación
Fotoliasa: separa dímeros de timinaLuz UV
Dímero de Timina
Fotoliasa
Luz Visible
![Page 59: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/59.jpg)
1. Mecanismos prerreplicativos:
Endonucleasa uvrABC: elimina bases dañadas
ADN polimerasa I: rellena el hueco
Ligasa
+
+
b) Reparación por escisión y resíntesis
Daño UV
Formación deldímero T-T
![Page 60: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/60.jpg)
2. Mecanismos posreplicativos:
a) Reparación por recombinación
4
5
- Repara ADN que no tiene cadena molde
- Proteína recA: intercambia un fragmento del ADN molde similar
![Page 61: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/61.jpg)
2. Mecanismos posreplicativos:
Daño intenso Parada en la síntesis ADN
SOSProteína recA
- Intercambio de cadenas- Destruye a la proteína represora lexA
b) Reparación inducible de emergencia (SOS)
![Page 62: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/62.jpg)
1. Bases moleculares de la genética.1.1. Conceptos. 1.2. Funciones del ADN.1.3. Variaciones bacterianas.
2. Mutaciones. 2.1. Concepto. 2.2. Efectos fenotípicos2.3. Tipos de mutaciones a nivel molecular. . 2.4. Mutaciones inducidas: agentes mutagénicos. 2.5. Reversibilidad de la mutación2.6. Sistemas de reparación de daños del ADN. 2.7.Métodos de detección de mutantes.
Tema 14. Principios de Genética Bacteriana.
![Page 63: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/63.jpg)
2.7. Métodos de detección de mutantes
Método en placa
Mutantes resistentes a antimicrobianos, metales pesados, etc
Cultivo microorganismo Medio con agente mutagénico
Técnica de gradiente en placa
![Page 64: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/64.jpg)
Método réplica en placaMutantes auxotrofos
![Page 65: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/65.jpg)
Mutantes auxotrofos
![Page 66: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/66.jpg)
Las bacterias como indicadores de sustancias mutagénicas y potencialmente carcinogénicas.
Bruce Ames, 1970
Establece el número de mutantes revertidos de una bacteria auxotrofa en presencia y
ausencia del agente mutagénico
Bacterias indicadoras: poseen mutaciones puntuales
2.8. Test de Ames
![Page 67: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/67.jpg)
Test de AmesSalmonella typhimurium his(-)
Medios sin histidina
Agente mutagénico
Agente mutagénico = Nº mutantes revertidos en presencia del agente debe ser doble al del que existiría en ausencia del mismo
![Page 68: Tema 14 intro genet](https://reader038.fdocuments.es/reader038/viewer/2022102614/55b2f5b0bb61ebe5268b46fe/html5/thumbnails/68.jpg)