Tema No. 4Medios de Cultivo y Método de Siembra

Presentado por: Elsa Santiago100159054

Son un método utilizado para la multiplicación de microorganismos, tales como bacteria, hongos y parásitos; utilizando distintos nutrientes que van, desde azucares simple hasta sustancias complejas como la sangre o extracto de caldo de carne.

¿Que son los Medio de Cultivo?

SEMISÓLIDO

S

LÍQUIDOS

SÓLIDOS

Clasificación de los medios de cultivo según consistencia

Selectivo y

diferencial

Nutritivo

Enriquecimiento

Clasificación de los medios de cultivo según utilización

Contienen nutrientes que favorecen el desarrollo de la mayoría de los

microorganismos sin requerimientos especiales de cultivo.

No promueven el crecimiento de ningún agente en particular

Medio Nutritivo

Contienen nutrientes específicos requeridos para el crecimiento de

patógenos que pueden estar presentes solo o con otras especies de bacterias en

la muestra de un paciente

Se utilizan para favorecer el desarrollo de un patógeno determinado a partir de

una mezcla de microorganismos mediante el uso de especificidad de

nutrientes

En general, son medios líquidos

Medios de Enriquecimiento

Contienen uno o más

agentes que inhiben el

crecimiento de los

microorganismos que no se quieren estudiar

Agentes inhibidores: colorantes,

sales biliares, alcoholes, ácidos y

antibióticos

Medio Selectivo

Contienen un factor o factores que permite que las colonias de una especie o un tipo bacteriano exhiban ciertas características metabólicas o de cultivo que puedan utilizarse para diferenciarlas de otras bacterias que crecen en el mismo agar

Medio Diferencial

Disponibilidad de nutrientes esenciales Consistencia adecuada del medio Condiciones adecuadas de humedad Temperatura Presencia o ausencia oxígeno y CO2 Presión Luz ambiental PH adecuado Temperatura Esterilidad

Es importante destacar que la transición exitosa de un microorganismo in vivo a un

ambiente in vitro va ha depender de:

El Control de Calidad en la preparación y evaluación de los medios de cultivo es considerado como una esencial y buena práctica de laboratorio, necesaria para mantener el nivel y la ejecución de cualquier técnica microbiológica.

Proceso continuo que se extiende desde las materias primas ; a través del productor hasta el producto final utilizado en los diferentes departamentos de análisis y diagnóstico microbiológico.

Control de Calidad

Se evalúa utilizando criterios objetivos del medio respecto a: La recuperación o supervivencia de los microorganismos de interés La inhibición de los microorganismos no deseados tiene que ser cuantitativa Los atributos ( por ejemplo: Propiedades físicas y bioquímicas) Variaciones en el volumen del medio Hemólisis Cristales en el medio Presencia de coágulos Cambio de color normal Contaminación Falla en la inhibición de microorganismos saprofitos Esterilidad

Criterios de Evaluación de la Calidad de los Medios de Cultivo Preparados

Para evaluar cada lote de medio de cultivo que sea recibido en el laboratorio, se emplean cepas patrones (ATCC) de varios géneros y especies de acuerdo al medio de cultivo a analizar.

El control del funcionamiento consistirá en comprobar: capacidad del medio de recuperar un bajo número

de los microorganismos más sensibles para los que ha sido preparado.

capacidad de inhibir un alto número de los microorganismos que deben ser inhibidos en caso de los medios selectivos y

diferenciar los microorganismos para los que ha sido diseñado en caso de los medios diferenciales.

Pruebas de Funcionamiento

Método de Siembra

Los métodos de siembra se utilizan para inocular por distintos métodos sobre un medio de cultivo apropiado una muestra que contenga bacterias con el fin de reproducirlas, para aumentar el número de individuos de la población y formar colonias en el caso de medios sólidos.

- Siembra con asa de cultivo - Diseminación en superficie- Agotamiento en superficie- Tubos en superficie- Tubos en profundidad o picada

Tipos de Siembra

Siembra en estría o zig-zag

Siembra por estría múltiple

Siembra de los cuatro cuadrantes

Siembra de los tres giros.

Técnica de Siembra

ESTRÍA

AGOTAMIENTO

PARA RECUENTO DE

COLONIAS

MEDIO LÍQUIDO

En Medio Sólido

EN PLACA• EN UNA SOLA

DIRECCIÓN, O POR AGOTAMIENTO.

• EN 3 o 4 DIRECCIONES• POR DILUCIÓN

EN TUBO - POR PUNCIÓN

- ESTRIADO EN BISEL

En Medio Liquido

A PARTIR DE UNA COLONIA

DESDE UNA SUSPENSIÓN BACTERIANA

DESDE UNA MUESTRA BIOLÓGICA

CON HISOPO , CON PIPETA O JERINGA , CON ANSA O POR

VERTIDO