EVALUACIÓN DE SEGURIDAD DE PRODUCTOS COSMÉTICOS

1. Ética y alternativas en la experimentación animal (3Rs)

2. Test de irritación ocular y dérmica3. Test de sensibilización dérmica4. Desarrollo e implementación de

pruebas alternativas.

Unión EuropeaDefinición:

“toda sustancia o preparación destinada a ser puesta en contacto con las diversas partes externas del cuerpo humano (epidermis, sistema piloso y capilar, uñas, labios y órganos genitales externos) o con los dientes o membranas mucosas de la cavidad oral, exclusiva o principalmente de limpiarlos, perfumarlos, modificar su aspecto y/o corregir olores corporales y/o protegerlos y mantenerlos en buena condición”.

EU Cosmetics Directive (76/768/EEC)

IRRITACIÓN OCULARANTECEDENTES:1.El ojo puede resultar dañado accidentalmente por el uso

de muchos productos de uso rutinario (ej. Cosméticos).2. La seguridad de los consumidores está respaldado en la

estimación potencial de irritación ocular de estos productos.

3. Este tipo de irritación se estima in vivo mediante el test de Draize ocular (cuestionamientos éticos y científicos).

4.La evaluación del riesgo ocular también puede hacerse mediante pruebas toxicológicas in vitro (3Rs).

5.Los métodos alternativos requieren procesos rigurosos de estandarización / validación / implementación.

Evolución normativa UE

1976: Directiva de Cosméticos 76/768/CEE (julio 27 /1976)1986: Directiva 86/609/CEE (protección animales)1991: Creación ECVAM1999: Creación de REMA2003: Directiva 2003/15/EC Prohibición uso de animales.2005: Real Decreto 1201/2005 Adaptación a la legislación

europea

EFECTOS INDESEABLES DE UN COSMÉTICO

1. Local: Irritación (inflamación), corrosión2. Sensibilizante: Fotoirritación y reacción alérgica3. Sistémico: Paso de compuestos al organismo en general.

“Eye irritation is the production of changes in the eye following the application of a test substance to the anterior surface of the eye, which are fully reversible within 21 days of application.

Eye corrosion is the production of tissue damage in the eye, or serious physical decay of vision, following application of a test substance to the anterior surface of the eye, which is not fully reversible within 21 days of application”.

OECD-TG: 405/2002

TEST DE DRAIZE DE IRRITACIÓN EN OJO Y PIELDE CONEJO

John Henry Draize, farmacólogo (USA,1900-1992).

Draize JH, Woodard G, Calvery HO. (1944). Method for the study of irritation and toxicity of substance applied topically to the skin and mucous membranes. J. Pharm. Exp. Ther. 82: 377-390.

TEST DE DRAIZE DE IRRITACIÓN EN OJO DE CONEJO

Evidenciar potencial daño de químicos a los ojosUna sola dosis en un ojo (el otro es el control) Líquido 0.1 mL /ojo - sólidos 100 mg /ojoConejos albinos jóvenesAplicación en el saco conjuntival, se cierran los párpados durante un segundo.Se evalúa lesiones en conjuntiva, córnea e irisObservación durante 21 días: 1, 24, 48 y 72 horas. Días 3, 7, 14 y 21

…CRÍTICAS

Crueldad con los animales (test agresivo: severo dolor y diestrés)Diferencia entre la estructura ocular del conejo vs humanoPobre lacrimación de los conejosDosis excepcionalmente altasDiferencia en la respuesta entre conejosSubjetividad en la evaluación

OPACIDAD

OPACIDAD

1 2

3 4

HIPEREMIA

HIPEREMIA

1

2 3

0

IRITIS

IRITIS

1 2

1 2

QUEMOSIS

QUEMOSIS

1 2

3 4

MÉTODOS ALTERNATIVOS

OpacidadHinchamiento córneaHistopatología

OpacidadHinchamiento córneaHistopatología

OpacidadPermeabilidadHistopatología

OpacidadPermeabilidadHistopatología

CitotoxicidadCitotoxicidad

ATLA, 30 Suppl 2: 69-74 (2002)

PuntofinalPuntofinal

MÉTODOS ALTERNATIVOS

…MÉTODOS ALTERNATIVOS

OPACIDAD CORNEAL

Test de Draize en piel de conejo

Dermal irritation is the production of reversible damage of the skin following the application of a test substance for up to 4 hours.

Dermal corrosion is the production of irreversible damage of the skin; namely, visible necrosis through the epidermis and into the dermis, following the application of a test substance for up to four hours. Corrosive reactions are typified by ulcers, bleeding, bloody scabs, and, by the end of observation at 14 days, by discolouration due to blanching of the skin, complete areas of alopecia, and scars.

TEST DE DRAIZE DE IRRITACIÓN EN PIEL DE CONEJO

Una sola dosis, vía tópicaConejos albinos, dorso rasurado 24 h antesAplicación en el área rasurada (6cm²), se cubre con gasa por 4 h. Líquidos 0.5 mL, sólidos 0.5 gSe observa eritema y edemaObservación: 1, 24, 48 y 72 horas, hasta día 14

FORMACIÓN DE ERITEMA Y ESCARA

No eritema 0Eritema ligero (apenas perceptible) 1Eritema bien definido 2Eritema severo a moderado 3Eritema severo (rojo remolacha) a formación de escara que hace

imposible la graduación del eritema 4

FORMACIÓN DE EDEMA

No edema 0Edema muy ligero (apenas perceptible) 1Edema ligero (bordes del área bien definidos por un pápula perceptible) 2Edema moderado (pápula de 1 mm aprox) 3Edema severo (pápula más de 1 mm rebasando el área de exposición) 4

ÍNDICE DE IRRITACIÓN PRIMARIO

Categoría de la reacción

Puntuación promedio

Insignificante De 0 a 0,4

Leve De 0,5 a 1,9

Moderada De 2 a 4,9

Grave De 5 a 8

ISO 10993-10 1995

MÉTODOS ALTERNATIVOS IRRITACIÓN DÉRMICA

Test de sensibilización

Test de BuehlerTest de Maximización (Magnusson y Kligman)

Definiciones…

Skin sensitisation (allergic contact dermatitis) is an immunologically mediated cutaneous reaction to a substance. In the human, the responses may be characterised by pruritis, erythema, oedema, papules, vesicles, bullae or a combination of these. In other species the reactions may differ and only erythema and oedema may be seen.

Test de Buehler

Rasurado de la pielDía 0, 6 y 13: aplicación tópica del producto, vendaje oclusivo.Día 21: nueva aplicación, retirar apósito valorar edema/ eritema.