FACULTAD DE FARMACIA

UNIVERSIDAD COMPLUTENSE

TRABAJO FIN DE GRADO

ASPECTOS FARMACOLÓGICOS Y

TOXICOLOGÍA DE JUNIPERUS COMMUNIS

Autor: Andrea Vidigal Gómez

Tutor: Estefanía Hernández Benito

Convocatoria: Julio 2017

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Índice

Resumen …………………………………………………………………………………….. 1

Introducción y antecedentes ……………………………………………………………….. 2

Objetivos ………………………………………………………………………………….… 4

Metodología ………………………………………………………………………………… 4

Resultados …………………………………………………………………………............... 4

Aspectos farmacológicos…………………………………………………………… 4

o Actividad antioxidante…………………………………………….…….……5

o Actividad neuroprotectora………………………………………..…….……..9

o Actividad anticancaerígena………………………….…………..…….…….. 9

Toxicología…………………………….…………….….…….. ………..………….12

o Cuantificación de la toxicidad…………….…………….………………... 12

o Toxicología Reproductiva y del desarrollo…………….….………………13

o Genotoxicidad………………………………….…….……………….……..13

o Toxicidad cardiovascular y respiratoria…………….………….….…….. 13

o Irritación de la piel……………………...…………………..……….…….. 14

o Sobredosis………...………………………………………………….…….. 14

o Seguridad………...………………………………….……………….…….. 14

o Interacciones…….…………….…………………………………………… 14

Discusión y conclusiones …………………………………………………………….…….. 14

Bibliografía ……………………………………………………………………….…………16

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RESUMEN

Juniperus communis o enebro común es una conífera ampliamente distribuida, a la

cual se le atribuyen diversas propiedades farmacológicas, entre las que esta su capacidad

diurética y para el tratamiento de la dispepsia, ambas aprobadas por la EMA.

Se ha evaluado su competencia como antioxidante con varias pruebas como es la de la

DPPH o peroxicación lipídica en ensayos in vivo. También en ensayos in vitro se ha

considerado la capacidad de actuación del extracto en enzimas como son GPx, SOD y CAT.

En todos los casos ha demostrado su actividad.

Se ha investigado su capacidad de intervención en patologias tan destacas como son

Alzheimer y Parkinson, en estos casos estrechamente relacionada con su capacidad

antioxidante. La actividad antitumotal se ha valorado en distintas líneas celulares como son

HeLa, CaCo2 , en neuroblastoma de célula shumanas SH-SY5Y. También la podofilotoxina,

contenida en el enbro probó su actividad anticancerígena de igual manera que actua fente a

otras líneas celulares humanas (A549, MCF7, TK6 and U937).

La toxicología de la planta ha sido bien estudiada, destacando su capacidad abortiva y

antifertilizante. En algunas circunstancias puede producir daño en la piel.

Como conclusión Juniperus communis ha demostrado su capacidad de actuación en

los campos refenrenciados, aunque estudios más especificos se recomendarían para poder

indicar su uso en el tratamiento, siendo posible dado que el empleo de preparados

fitoterapeúticos está en auge.

Palabras clave: Juniperus communis, enebro, enebro común, antioxidante,

neuroprotector, anticancerígeno, toxicología.

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INTRODUCCIÓN Y ANTECEDENTES

Juniperus communis de nombre vulgar enebro común, es una conífera de crecimiento

lento, árbol o arbusto frondoso, de follaje perenne; mide 1 a 6m de altura. Las hojas son

verticiladas en tres, muy estrechas, lineales y aceradas, enteras, terminan en punta y están

marcadas en su parte inferior por una banda de color blanquecino. Se trata de una especie

dioica, los frutos son de color azulado, carnosos, oblongos y jugosos. Miden hasta 10 mm de

diámetro y frecuentemente están recubiertos por una pruina azulada. Dentro, en la pulpa

pegajosa, se observan las semillas, generalmente tres, muy duras, oblongas y con tres cantos

agudos. (del Villar Ruiz de la Torre J. A et al. 2010)

Es capaz de crecer en distintos hábitats, se trata de la conífera más extendida del

mundo, a altitudes de hasta 2400m; incluso algunas subespecies son capaces de crecer a

altitudes superiores. Es capaz de cultivarse en multitud de suelos y en rocas, en praderas

abiertas o en las parcelas mezcladas con árboles frondosos y coníferas. Se trata de una especie

bastante resistente, tolerante a los suelos pobres, la sequía y las bajas temperaturas, pero

necesita luz abundante. (EUFORGEN)

El enebro común constituye una de esas plantas que llevan usándose incluso desde la

prehistoria. Ya en la antigüedad se le atribuyeron propiedades “místicas”, asociadas a una alta

propiedad desinfectante. En algunos países europeos, Juniperus communis ha sido utilizado

para la bendición en el Domingo de Ramos, ya que se cree que protege las casas contra los

truenos y el mal, incluso quemaban sus ramas para protegerse de los espíritus malignos. No

solo en este caso, sino que también se quemaban las ramas para protegerse de distintas plagas

Figura 1: Dibujo donde se observa la morfología de las hojas, los conos y la baya de

Juniperus communis © C.Giordano/EUFORGEN

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en antiguas epidemias como fue el cólera, disentería y el tifus exantemático epidémico.

Diferentes partes de la planta contienen aceites esenciales empleados para varias aplicaciones

terapéuticas, mientras que las bayas se han empleado tradicionalmente para condimentar la

ginebra.

Los conos se han empleado como diuréticos, abortivos, para el tratamiento de la

diabetes, problemas en los pies, mientras que la decocción de la ramas y conos se empleó para

el tratamiento de infecciones de riñón, para prevenir o curar helmintiasis. Juniperus communis

también se ha utilizado en la medicina veterinaria popular como alimento para prevenir

gusanos en rumiantes (Ložienė1 K. et al. 2016).

Dioscórides ya le atribuyó propiedades farmacológicas al enebro, lo cual nos indica el

largo tiempo que se lleva utilizando por sus propiedades características. Se obtiene un alcohol

por fermentación de maíz, centeno, malta y otros granos, destilado con los conos del enebro y

algunas otras plantas aromáticas, el cual será la base de la bien conocida ginebra.

Entre las principales propiedades atribuidas al enebro, y obtenidas a partir de las

arcéstidas (conos) de enebro, que también conserva la ginebra, son la diurética y carminativa.

Son excelentes para facilitar las digestiones, además de que gracias a sus principios amargos

constituyen un excelente tónico y aperitivo. La esencia de enebro se ha empleado como

antiséptico, quemándose las arcéstidas en tiempo de peste para purificar el aire y en uso

externo es rubefaciente antifúngica y antirreumática. Las bayas maceradas en vinagre servían

para limpiar las ropas y objetos de las personas contaminadas. Las mismas se usan como

especia en culinaria para aderezar carnes y salsas sustituyendo a veces la pimienta. Tostadas

pueden servir como sucedáneo del café (López Gonzalez G. 2006).

Hoy en día los conos de la planta J. communis y sus aceites esenciales son reconocidos

por las Farmacopeas Oficiales de Austria y Suiza, así como en la Farmacopea Europea. Las

fuertes propiedades antibacterianas, antifúngicas, antivirales, antioxidantes y antiinflamatorias

son características del aceite esencial de Juniperus communis. Se emplea a su vez en la

medicina contemporánea para curar resfriado y con propiedades antisépticas (Ložienė1 K. et

al. 2016).

Tanto el fruto como el aceite han sido aprobados por la European Medicines Agency

(EMA), en ambos casos se recoge en la evaluación final que su uso tradicional se ha orientado

en el tratamiento de la dispepsia y como diurético. En el caso del fruto también se le atribuyen

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otros usos como el tratamiento de infecciones, arteriosclerosis, procesos inflamatorios y dolor.

En cuanto al aceite cabe mencionar que un uso externo (tópico) no se le han atribuido

indicaciones terapéuticas.

OBJETIVOS

El objetivo del presente trabajo constituye en la realización de una revisión actualizada

sobre los aspectos farmacológicos de Juniperus communis. También se desarrollará una

revisión sobre la toxicología del enebro común en la actualidad.

METODOLOGÍA

Para llevar a cabo el trabajo, las búsquedas bibliográficas se realizaron utilizando

palabras clave como: “enebro común”, “juniper”, “juniper berry”, “juniper oil”, “Juniperus

communis”. Estas se introdujeron en diversos motores de búsqueda, en distintas bases de

datos como son: PubMed, Google Scholar, Scielo, EMA, ToxNet, Europe PMC,

Sciencedirect, entre otras.

Tras una primera vuelta se descubrieron multitud de artículos en relación a los

distintos aspectos farmacológicos de la planta y sus posibles aplicaciones, además de su

toxicología. Así pues, se excluyeron algunos de los artículos, quedando aquellos en el que se

demostraban las aplicaciones más referenciadas (antioxidante) y/o las más innovadoras

(antineoplásicos, neuroprotectores). En este momento se realizó una segunda búsqueda, de

una manera más específica, centrándose en las propiedades seleccionadas, para desarrollarlas

ampliamente.

Tras la recopilación se procedió a la completa lectura de todos los artículos y se

procedió a la correcta organización de los datos proporcionados y redactarlos de forma clara.

RESULTADOS:

ASPECTOS FARMACOLÓGICOS

Existen un número importante de artículos que muestran las diferentes actividades

atribuidas al enebro común, como analgésico, antimicrobiano, antidiabético o hepatoprotector

(Bais S. et al. 2014). En el presente trabajo, se describen aquellas que resultan más

interesantes como son la actividad antioxidante, anticancerígena y neuroprotectora.

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1. Actividad antioxidante

Las especies reactivas de oxigeno (ROS) como son Н2О2, •O2

– and ОН• se producen en

el organismo mediante el metabolismo celular normal. En bajas concentraciones participan en

reacciones fisiológicas (Schopfer, P. et al. 2001) sin embargo con un aumento de las mismas

puede suponer un problema, pudiendo ser una condición para la supervivencia celular. El

propio organismo dispone de sistemas enzimáticos y no enzimáticos para proteger la célula

frente a estas agresiones (Kim, Y.I. et al. 2014). Los antioxidantes que contiene el aceite

esencial extraído de de Juniperus communis, pueden ser empleados para la prevención del

daño oxidativo producido por ROS (Martorell, P. et al. 2011).

El parámetro empleado en la mayoría de las pruebas para cuantificar la capacidad

antioxidante es IC50, el cual es la concentración del compuesto que causa el 50% de la

inhibición de la formación de radicales. Cuanto menor sea este valor, mayor será la capacidad

antioxidante del compuesto analizado.

Son multitud las pruebas que se pueden realizar para valorar la capacidad antioxidante

in vitro, entre ellos cabe destacar la prueba de 2,2-Difenil-1-picrilhidrazilo (DPPH), 2,2-

azino-bis-3-etilbenzotiazolina-6 ácido sulfónico (ABTS), la prueba de barrido del radical

hidroxilo (ОН•) y capacidad quelante, barrido del radical superóxido (•O2−) y efectos

inhibitorios de la xantina oxidasa, y por último barrido del peróxido de hidrógeno.

Una de las pruebas más empleadas para valorar la capacidad antioxidante es la de

DPPH. En esta se comprueba la capacidad de los compuestos de donar átomos de hidrogeno o

electrones, esta capacidad de mida por espectrofotometría, dado de DPPH al reducirse da un

producto coloreado que muestra una disminución de absorbancia a 517nm. Varias

concentraciones del aceite esencial de Juniperus communis subsp. haemipherica se añadieron

a 2,5mL de una solución al 0.004% de DPPH en metanol (Emami et al. 2007). Mostró un

poder antioxidante del 24% a concentraciones de 4µg/mL. No solo se comprobó la actividad

de este extracto, sino que se concluyó que esta capacidad antioxidante podía deberse a γ-

terpineno, ya que se encuentra en gran cantidad en la composición de las hojas de esta planta,

y además por sí solo, se ha realizado el mismo ensayo que con el extracto, y demuestra un

poder antioxidante del 7,2%.

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Como ya se ha mencionado el ensayo DPPH es bastante empleado, lo encontramos en

varios de los artículos analizados. Por ejemplo, en el estudio realizado por Ved A. et al.

(2017), diversos extractos obtenidos a partir de la hoja de Juniperus communis L. han sido

evaluados describiendo una importante capacidad antioxidante en los extractos en etilacetato

y hexano (IC50 = 177μg/mL), aunque poseen una capacidad antioxidante menor comparada

con el standard empleado, tratándose de BHT(butilhidroxitolueno) en este caso.

Actividad quelante del Fe2+ IC50

(mg/mL)

TBA test IC50 (µg/Ml)

Especie de Juniperus Extracto

metanólico

Extracto acuoso Extracto

metanólico

Extracto

acuoso

Juniperus communis L. var.

communis

33.109 ± 0.401 3.530 ± 0.254 3.476 ± 1.188 12.181 ±

3.118

Juniperus communis L. var

saxatilis

30.548 ± 0.480 3.0467 ± 0.003 3.201 ± 0.156 12.060 ±

2.131

Juniperus drupacea Labill. 4.075 ± 1.322 1.004 ± 0.001 4.356 ± 2.159 38.886 ±

1.871

Juniperus oxydedrus L. subsp.

oxycedrus

6.829 ± 1.159 0.537 ± 0.006 0.349 ± 1.210 6.759 ±

1.238

Juniperus oxydedrus L. subsp.

macrocarpa (Sibth & Sm.)

Ball.

1.408 ± 0.240 0.715 ± 0.007 0.287 ± 0.166 6.302 ± 0.586

Estándar EDTA (0.009 ± 0.001) Propil galato (0.179 ± 0.402)

Los valores están expresados como media ± SD (n=3)

Entre los metales de transición, sabemos que el hierro es capaz de favorecer la

oxidación lipídica por su alta reactividad (Gülçin, 2006). La reducción de los iones ferrosos

puede verse como una protección del daño oxidativo, ya que permite la inhibición de ROS y

la peroxidación lipídica. La capacidad quelante puede verse como una propiedad antioxidante

ya que impide este daño oxidativo. Para analizar esta actividad, a concentraciones creciente

del extracto de Juniperus spp., se le añaden 2mM de FeCl2 (proporciona el hierro al medio). A

continuación, se le añadirá 5mM de ferrozina, la cual reaccionará con el hierro libre, dando

una coloración característica que se medirá a 562nm en un espectrofotómetro. El porcentaje

Tabla 1: Actividad quelante de los iones de hierro (Fe2+) y evitar la peroxidación lipídica (ensayo TBA) de

extractos de ramas de Juniperus spp. (Taviano M.F. et al. 2011).

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de inhibición del complejo se mide con la fórmula [(Ao− Ac)/Ao] × 100, donde Ao es la

absorbancia del control y Ac es la de la muestra. Los datos se expresan como IC50 ± SD

(Litchfield & Wilcoxon 1949). Como se muestra en la tabla 1, tenemos dos variedades de

Juniperus communis, muestran unos valores bastante bajos sobre todo el extracto acuoso,

aunque en comparación con las demás especies tienen valores antioxidantes menores, y

mucho menores que el estándar como es EDTA

Para demostrar la eficacia de Juniperus communis para la protección de liposomas

frente a la peroxidación lipídica se realizó el test del ácido tiobarbitúrico (TBA). Se mide la

absorción máxima a 532nm donde se muestra una coloración rosa debida a la presencia de

malonaldehido, consecuencia de la oxidación. Se vio que, en este caso, a diferencia que en el

anterior, el extracto más efectivo es el metanólico. En la tabla 1 se recogen los resultados

obtenidos, se ve que las variedades de Juniperus communis en general tienen una capacidad

antioxidante más débil (en comparación con otras especies) aunque bastante significativa. En

todos los casos esta capacidad es menor que el estándar, que en este caso es el propil galato

(Taviano M.F. et al. 2011).

El aceite esencial del enebro in vitro es capaz de inhibir la acción de la xantina

oxidasa (IC50=176,38 mg/mL) disminuyendo la producción de iones superoxido (•O2−),

también es capaz de actuar de una manera similar frente a la SOD (IC50=0,822µg/mL), pero

con un mecanismo diferente. Sumandose a todos los ensayos anteriores, también podemos

valorar la capacidad antioxidante de un determinado agente mediante la inhibición de la

oxidación del ácido linoleico. Durante la oxidación este último, la absorbancia a 233nm va

aumentando, así es como se mide la capacidad antioxidante. En el caso del aceite esencial de

Juniperus communis se ve una pequeña inhibición en una primera parte sin embargo

comparando con el control no se observan cambios significativos (M. Hoferl et al. 2014).

Ruberto et al. (2000), demostró que α- and γ-terpineno y terpinolenos tienen el mayor poder

antioxidante en la peroxidación, la actividad de α- and γ-terpineno es comparable a la de α-

tocoferol.

Las pruebas in vitro que se han recogido muestran a nivel teórico la capacidad

antioxidante de Juniperus communis. Sin embargo, los estudios in vivo pueden suponer la

diferencia para el empleo del enebro en futuras aplicaciones.

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Entre los estudios in vivo destacamos el realizado en 2014 por M. Hoferl et al. Donde

se evaluó el efecto antioxidante del aceite esencial de Juniperus comunis en células de

Saccharomyces cerevisiae. Se evaluó la

actividad de las enzimas Superoxido

dismutasa (SOD), catalasa (CAT) y glutatión

peroxidasa (GPx). Se cuantificaron los niveles

enzimáticos antes y después (16h) del

tratamiento con distintas concentraciones de aceite esencial de las bayas de enebro, disueltas

en DMSO. Y se describió que tanto SOD y CAT, así como GPx de la levadura que habían

sido tratados con el aceite esencial de enebro demostraron una diferencia significativa

comparando con los controles (levaduras sin tratar).

El segundo estudio destacado es resultado del trabajo de Nurhan g. et al. 2015, donde

se administraron diferentes dosis del aceite esencial de Juniperus communis Linn. a ratas, en

las cuales examinaron los distintos niveles de SOD, GPx, CAT, y TBA en el tejido cardiaco

de las mismas. Esta capacidad se evalúo administrando grandes dosis del aceite de Juniperus

communis L. junto con una dieta rica en colesterol (2%), en este estudio se demostró la

disminución de TBA, mientras que aumentó la actividad de las enzimas antioxidantes

mencionadas. En condiciones normales esta dieta rica en colesterol y sin tratamiento con

Juniperus commnis, se traduciría en un aumento de TBA y una disminución de la capacidad

antioxidante de las enzimas. Este efecto antioxidante se le atribuyó en concreto, a tres

compuestos γ-terpineno, y a α y β-pineno, presentes en el aceite esencial. En el estudio de

Akdogan et al. (2012) las ratas tratadas con una dieta con 2% de colesterol sufrieron un

Figura 2: Efecto del aceite esencial obtenido de las bayas de

enebro en la actividad de CAT (A), SOD (B), GPx (C) en las

células de S. cerevisiae (M. Hoferl, I. Stoilova, E. Schmidt

et al 2014)

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aumento los niveles de ox-LDL, mientras que la adicción de una alta cantidad de aceite

esencial Juniperus communis en administración conjunta con dosis significativas de

colesterol, disminuyó los niveles de ox-LDL.

Aunque estos dos estudios se asemejan resulta importante diferencia las células en que

se están realizando los ensayos.

2. Actividad neuroprotectora

En la enfermedad de Alzheimer la acumulación del péptido β amieloide (Aβ)

producirá una neurotoxicidad y estrés oxidativo tanto in vitro como in vivo, el estrés oxidativo

supone un factor clave en esta enfermedad. Se supuso que la exposición al aceite volátil del

enebro podría disminuir el estrés oxidativo generado por Aβ(1-42) en el hipocampo (Cioanca

O. et al. 2015). La inhalación del aceite volátil del enebro (concentraciones de 1 y 3%) fue

efectivo en la disminución de la actividad de SOD y CAT, e incrementando la actividad

específica de GPx contra el estrés oxidativo producido por Aβ (1-42).

La enfermedad del Parkinson ocurre por una degeneración de las neuronas

dopaminérgicas en la sustancia nigra. Bais S.et al. 2015 buscó evaluar la capacidad de evitar

el Parkinson con el extracto de las hojas de Juniperus communis en ratas tratadas con

clorpromazina. Este es un fármaco antipsicótico, asociado a efectos antidopaminérgicos en los

síndromes extrapiramidales, induce el parkinsonismo. Para estudiar los efectos de Juniperus

communis y valorar su posible utilidad en el tratamiento de esta enfermedad se observaron

varios parámetros como son la catalepsia, rigidez muscular y la actividad locomotora y su

efecto en parámetro neuroquímicos (TBA, GPx, nitrito y proteínas totales). La clorpromazina

se encargará de inducir disfunciones motoras en un periodo de 21 días. El extracto metanólico

de Juniperus communis probó una reducción de la catalepsia y de la rigidez muscular, y

aumento significativamente la actividad locomotora en las ratas. También mostró un aumento

de los niveles de GPx y proteínas totales, y disminuyó los valores de TBA y nitritos.

3. Actividad anticancerígena.

Para valorar la capacidad anticáncerígena, es importante observar en que líneas

celulares es capaz de actuar el extracto de Juniperus communis, o si no es capaz de hacerlo en

más de un tipo de cáncer.

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El estudio de extractos metanólicos y acuosos de la baya en células CaCo2 (cáncer

colonrectal), demostró una potente actividad inhibitoria. En este caso se ha visto que la

proliferación se redujo hasta un 6,3 ± 2,6% respecto a la línea celular sin tratar, siendo esta

inhibición dosis-dependiente. Incluso dichos extractos mostraron una efectividad mayor que

cisplatino, fármaco empleado para el tratamiento del cáncer. La línea celular HeLa (células de

cáncer cervical), tratada con extractos metanólicos y acuosos, tuvo una inhibición de la

proliferación celular, pero no con la misma efectividad que en el ejemplo anterior. Así pues,

el extracto metanólico fue capaz de reducir en un 23% la proliferación en relación al

crecimiento de las células sin tratar mientras que el extracto acuoso inhibió la proliferación un

18%. En el mismo ensayo se compararon extractos en etilacetato, cloroformo, y en hexanos,

pero ninguno demostró una inhibición demasiado significativa, aunque sí en pequeña medida.

(Fernández Alejandra et al. 2016).

Las medidas de señalización celular, en relación a la apoptosis y el ciclo celular tienen

un importante papel en el desarrollo de enfermedades tan complicadas como es el cáncer. Uno

de los orquestantes de estas funciones celulares es la proteína tumoral p53, una disfunción de

la misma indica un papel muy importante en el desarrollo de supresión tumoral. El estrés

celular, incluyendo el daño al DNA, ribosomal y retículo endoplasmatico; activará p53

mientras que en condiciones normales se mantendría bajo.

Los resultados presentados (Lantto T.A. 2016) sugieren que el extracto de enebro

somete a estrés al retículo endoplásmico en SH-SY5Y de neuroblastoma humano,

acompañado por un aumento de la translocación de p53 del citosol a núcleo. La expresión de

determinados ciclos celulares y supervivencia celular regulan genes de la fragmentación de

DNA y de la muerte celular por apoptosis. Además, se concluye que el extracto de baya del

enebro es capaz de reactivar los p53 desparejados encontrados típicamente en las células de

neuroblastoma. Para nuestro mejor conocimiento, este constituyó el primer artículo que

muestra la actividad del extracto fenólico, utilizándose normalmente para la actividad

extractos acuosos.

Las podofilotoxinas y sus derivados están ampliamente distribuidos en el reino

vegetal. A la podofilotoxina se le reconoce su capacidad anticancerígena, antifúngica y

antimicrobiana, mientras que la desoxipodofilotoxina a su vez demuestra actividad frente a

distintas lineas celulares cancerígenas. La podofilotoxina constituye un agente citotóxico, que

actúa ligandose a la tubulina, y evitando la división celular.

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La cantidad de las mismas se han calculado para distintas subespecies de Juniperus

communis. La cantidad de podofilotoxinas y desoxipodofilotoxinas presentes son menor que

otros ejemplos de la especie Juniperus spp. La actividad citotoxica en distintas lineas

celulares de leucemia de la mima manera una de las subespecies de Juniperus communis ha

desmostrado su actividad aunque menor que el ejemplo con el que se compara como vemos

en la Tabla 2 (Och M., Och A. et al. 2015).

Los extractos metanólicos de la parte aérea de 4 plantas, Equisetum hyemale L. y

Phyllitis scolopendrium (L.) Newman, y dos Spermatophyta, Juniperus communis L. y

Cotinus coggygria Scop., fueron enfrentadas a 4 líneas celulares humanas (A549, MCF7, TK6

and U937). Solo los extractos de J. communis y C. coggygria demostrados marcados efectos

citotóxicos. La incubación de todas las líneas celulares antes mencionadas que contenían

extracto de J. communis determinaron una destacable acumulación de células en las fases

G2/M del ciclo celular. La novedad de estos hallazgos se basa en la observación de que los

dos extractos, consistentemente, provocaron efectos coherentes en el ciclo celular en cuatro

líneas celulares, independientemente de su fenotipo, ya que dos de ellos tienen origen epitelial

Figura 3: Estructura química de

Podofilotoxina, y de la desoxipodofilotoxina.

Tabla 2: valores IC50 obtenidos de

dos extractos etanólicos de la hoja

de enebro y de podofilotoxina en

un set de líneas celulares de

leucemia (lo valores representan la

media ± SD por triplicado. (Och

M., Och A. et al. 2015)

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y crecen adherentes y dos son linfoblastoides y crecen en suspensión. Incluso los perfiles de

expresión de varias proteínas que regulan la progresión del ciclo celular y la muerte celular

fueron afectados por ambos extractos (Pollio A. et al. 2016).

En cuando al cáncer de mama, en líneas celulares como es MCF-7/AZ, extracto

acuosos de Juniperus communis ha demostrado una inhibición del crecimiento de las mismas,

en comparación con células del mismo tipo sin exposición (Van Slambrouck et al. 2007). Se

especula que la inhibición del crecimiento y de la invasión puede deberse a una modulación

de la actividad de ERK. A concentraciones menores de 50 μg/ml no demostró tener efecto.

TOXICOLOGÍA

En gran parte de los estudios analizados para completar el apartado de aspectos

farmacológicos de la planta, incluían un ensayo de la toxicidad aguda de los extractos

empleados de Juniperus communis. Por ejemplo Ved A. et al. 2017, se calcula la toxicidad

aguda a partir de la mortalidad tras 14 días en ratas Wistar albinas, administradas con 2g/kg

corporal de extracto de etilacetato de la planta. En este caso no demuestra toxicidad aguda

dado que la mortalidad resultó ser 0.

Cuantificación de la toxicidad

Todos los extractos fueron inicialmente 2000 μg/mL en el ensayo. A nivel

comparativo también se trató con toxina de potasio dicromato (1000 μg/mL), para tener una

referencia donde tras 3h después de la aplicación la mortalidad de Artemia franciscana nauplii

fue del 100%. Únicamente el extracto de Juniperus communis metanólico y en agua dio un

resultado de una mortalidad mayor del 50% tras 24h de la aplicación aguda. El resto de

extracto (así como con etilacetato, cloroformo, y hexano) no mostraron este tipo de toxicidad.

La LC50 de los extractos en relación a A. franciscana. No se mostraron valores de

LC50 de etilacetato, cloroformo y hexano en las concentraciones probadas. Mientras que un

estudio sobre la toxicidad inicial probó que los extracto acuosos y metanólicos de las plantas,

los cuales tienen valores por encima de 1000 μg/mL. Por lo tanto, todos los extractos de

Juniperus communis se han determinado como no tóxicos.

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Toxicología Reproductiva y del desarrollo

Dosis de 300 y 500mg (v.o.) de Juniperus communis pseudo-fructus, se administró a

10 ratas albinas en los días de 1-7 de embarazo. En el día 10 la implantación se controla por

laparotomía. De las ratas tratadas con 300mg/kg 5 de las 10 no hubo implantación

(embarazadas) y de las tratadas con 800mg/kg 8 de las 10 no tuvieron implantación. Otra serie

de dosis fueron administradas en los días 14, 15 y 16 a las ratas que mostraron la

implantación. En el Día 18 las ratas fueron laparotomizados para controlar la capacidad

abortiva. El número de embriones en desarrollo fueron menor en el grupo intervenido que en

comparación con las solo recibieron el vehículo.

En otro experimento, 3 de las ratas sin implantación en el día 10 fueron emparejadas

con machos después de 2 meses de descanso. Cuando el emparejamiento fue exitoso, no se

informaron de nuevas implantaciones (embarazo).

Basándose en los estudios aportados, las investigaciones concluyeron en la

demostración de la capacidad antifertilizante y abortiva que presenta Juniperus communis

pseudo-fructus, aunque no suponen datos suficientes para concluir en una posible

teratogenicidad, dado que los estudios no están aplicados a este concepto.

Esta actividad abortiva se le atribuye al ácido isocuprésico, contenido en el enebro

(Gardner et al. 1998).

Genotoxicidad

No existen datos que demuestren la genotoxicidad de Juniperus communis o de

preparaciones con la misma.

Toxicidad cardiovascular y respiratoria

El efecto del aceite de enebro en los sistemas cardiovascular y respiratorio fue

evaluado en 20 conejos, anestesiados con uretano. Cuando el aceite de enebro fue

administrado de manera intramuscular, así como oral (a concentraciones de 0,5%, 2,5% y 5%

en aceite de maíz: dosis 1mg/Kg) se produce una prolongada y lenta hipotonía.

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Irritación de la piel

Aceite esencial de bayas de enebro no induce irritación de la piel sin diluir, se aplicó

en la espalda de ratones y cerdos sin pelo. Se observó una irritación moderada en casos en que

el aceite se aplicó sobre pieles intactas o desgastadas en conejos tras 24h bajo parches

oclusivos. No se detectan efectos fototóxicos.

Sobredosis

En caso de un uso prolongado o sobredosis la orina puede oler a violetas. Habrás

irritación renal y dolor cerca del riñón, alta diuresis, molestias gastrointestinales, y ritmo

cardiaco acelerado y alta presión arterial. Son raros los síntomas centrales, así como

convulsiones, como metorragia y aborto.

Seguridad

No se recomienda su aplicación en niños o adolescentes menores de 18 años dado que

no existen datos de seguridad en dicha población. De igual manera no se recomienda el

consumo durante el embarazo y lactancia, dado que no existen datos suficientes para

confirmar su seguridad en estas condiciones.

Interacciones

El enebro puede presentar interacciones con los fármacos antidiabéticos (pues tiene

efecto hipoglucemiantes) y también con los diuréticos.

Se ha reportado el caso de una paciente de 26 años tratada con 900 mg de litio dos

veces al día que presento un cuadro de toxicidad por litio después de tomar un preparado Fito

terapéutico diurético que contenía enebro, entre otras especies de plantas. Aunque no se sabe

si el causante fue el enebro, no se puede descartarla posible interacción (del Villar Ruiz de la

Torre J. A et al. 2010).

DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES

Las propiedades farmacológicas de Juniperus communis son bien conocidas desde la

antigüedad, basadas en su uso tradicional. En el presente estudio se ha buscado confirmar o

desmentir algunas de las propiedades atribuidas, e investigar algunas de las futuras

aplicaciones.

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Actualmente la fitoterapia está en un momento donde cada vez adquiere más

importancia y prestigio. Los compuestos fitoterapéuticos pueden suponer una terapia

alternativa, en algunos casos donde el tratamiento con otros fármacos no ha resultado todo lo

satisfactorio que podría ser. Además, uno de sus mayores beneficios se basa en una baja tasa

de producción de efectos adversos en este tipo de tratamientos.

No resultó ser un compuesto especialmente tóxico, pero es muy destacable su acción

abortiva y antifertilizante, lo que limitaría su uso en pacientes embarazadas o que busquen

estarlo.

Queda ampliamente demostrada la capacidad antioxidante efectiva en multitud de las

distintas pruebas mostradas en esta revisión, y muchas que se han quedado fuera. Aunque en

algunos casos donde se compara su actividad con otras especies de Juniperus spp. resultó ser

menor, aunque no por ello menos importante. También se han visto distintas dianas de

actuación frente a varios tipos de cáncer, dando resultados positivos. La actividad

neuroprotectora ha sido efectiva en dos de las enfermedades neurodegenerativas más

importantes como son Alzheimer y Parkinson.

En definitiva, sabemos que los extractos obtenidos de Juniperus communis pueden

suponer un nuevo camino de tratamiento en varios marcos terapéuticos, como queda

demostrado. Sin embargo, para poder confirmar su uso en determinadas patologías habrá que

realizar estudios más específicos a la diana a la que se buscar cubrir un tratamiento. De la

misma manera que habrá que especificar cuál es el principio activo (como hemos visto que el

principal causante del efecto antioxidante es γ-terpineno), y que parte de la planta, se emplea

para el tratamiento.

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