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1.1. ANLISIS BACTERIOLOGICO POR METODO DE LA MEMBRANA FILTRANTE 1.1.1. DETERMINACION DE ORGANISMOS MESOFILICOS 1.1.1.1. Equipos y materiales a usar 1.1.1.2. Procedimiento a) Preparación del medio de cultivo b) Esterilización de materiales y medio de cultivo c) Vertido del medio a placas petric d) Toma de muestras de agua en planta e) Filtración de muestra y siembra de la membrana f) Incubación de placas 1.1.1.3. Recuento de UFC en placas 1.1.2. DETERMINACION DE COLIFORMES TOTALES 1.1.2.1. Equipos y materiales a usar 1.1.2.2. Procedimiento a) Preparación del medio de cultivo b) Esterilización de materiales y medio de cultivo c) Vertido del medio a placas petric d) Toma de muestras de agua en planta e) Filtración de muestra y siembra de la membrana f) Incubación de placas 1.1.2.3. Recuento de UFC en placas 1.1.3. DETERMINACION DE COLIFORMES FECALES 1.1.3.1. Equipos y materiales a usar 1.1.3.2. Procedimiento a) Preparación del medio de cultivo

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1.1. ANLISIS BACTERIOLOGICO POR METODO DE LA MEMBRANA FILTRANTE

1.1.1. DETERMINACION DE ORGANISMOS MESOFILICOS

1.1.1.1. Equipos y materiales a usar1.1.1.2. Procedimiento

a) Preparación del medio de cultivob) Esterilización de materiales y medio de cultivoc) Vertido del medio a placas petricd) Toma de muestras de agua en plantae) Filtración de muestra y siembra de la membrana f) Incubación de placas

1.1.1.3. Recuento de UFC en placas

1.1.2. DETERMINACION DE COLIFORMES TOTALES

1.1.2.1. Equipos y materiales a usar1.1.2.2. Procedimiento

a) Preparación del medio de cultivob) Esterilización de materiales y medio de cultivoc) Vertido del medio a placas petricd) Toma de muestras de agua en plantae) Filtración de muestra y siembra de la membrana f) Incubación de placas

1.1.2.3. Recuento de UFC en placas

1.1.3. DETERMINACION DE COLIFORMES FECALES1.1.3.1. Equipos y materiales a usar1.1.3.2. Procedimiento

a) Preparación del medio de cultivob) Esterilización de materiales y medio de cultivoc) Vertido del medio a placas petricd) Toma de muestras de agua en plantae) Filtración de muestra y siembra de la membrana f) Incubación de placas

1.1.3.3. Recuento de UFC en placas

1.1.4. DETERMINACION DE STREPTOCOCOS1.1.4.1. Equipos y materiales a usar1.1.4.2. Procedimiento

a) Preparación del medio de cultivob) Esterilización de materiales y medio de cultivo

c) Vertido del medio a placas petricd) Toma de muestras de agua en plantae) Filtración de muestra y siembra de la membrana f) Incubación de placas

1.1.4.3. Recuento de UFC en placas

1.2. ANÁLISIS FÍSICOS

1.2.1. DETERMINACION DE SOLIDOS TOTALES1.2.1.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 1.2.1.2. Procedimiento

1.2.2. DETERMINACION DE DENSIDAD1.2.2.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 1.2.2.2. Procedimiento

1.2.3. DETERMINACION DE POTENCIAL DE IONES H+ (pH)1.2.3.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 1.2.3.2. Procedimiento

1.2.4. DETERMINACION DE CONDUCTIVDAD ELECTRICA 1.2.4.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 1.2.4.2. Procedimiento

1.3. ANALISIS QUIMICOS

1.3.1. DETERMINACION DE FOSFATOS1.3.1.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 1.3.1.2. Procedimiento

1.3.2. DETERMINACION DE DUREZA1.3.2.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 1.3.2.2. Procedimiento

1.3.3. DETERMINACION DE SULFATOS1.3.3.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 1.3.3.2. Procedimiento

1.3.4. DETERMINACION DE ALCALINIDAD TOTAL1.3.4.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 1.3.4.2. Procedimiento

1.3.5. DETERMINACION DE ACIDEZ TOTAL1.3.5.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar

1.3.5.2. Procedimiento 7.1. ANLISIS BACTERIOLOGICO POR METODO DE LA

MEMBRANA FILTRANTE

Para garantizar la calidad microbiológica del agua, es necesario realizar el control de la misma, utilizando diferentes métodos, que nos permitan realizar la numeración o el recuento de bacterias aerobias mesófilas, mohos y levaduras, coliformes o la investigación de microorganismos patógenos.Este método se fundamenta en determinar el número y tipo de microorganismos presentes en una muestra de agua de proceso, por medio de la filtración de la misma a través de una membrana filtrante con poros de tamaño adecuado (0,45 μm de diámetro), la consiguiente retención de los microorganismos sobre dicha membrana y el cultivo de los mismos en diferentes agares de acuerdo al tipo de microorganismo.

7.1.1. DETERMINACION DE ORGANISMOS MESOFILICOS

7.1.1.1. Equipos y materiales a usar

Muestra de agua de proceso Alcohol Algodón Placas petri Caldo nutritivo y agar bacteriológico Embudo de filtración Matraz quitasato Membranas filtrantes Bomba de vacío Pinzas estériles Estufa Probeta 100ml. Agua destilada Micropipeta 1ml. Mechero de busen Matraz de 500 ml Matraz de 250ml. Balanza analítica

7.1.1.2. Procedimiento a) Preparación del medio de cultivo

Tarar peso de matraz de 250ml. Y matraz de 250ml.

Pesar 5g. de agar bacteriológico y 4g. de caldo nutritivo y agregar a matraz de 500ml.Pesar 1.76g de caldo nutritivo y agregar a matraz de 250ml.Con la probeta medir y agregar 500ml. de agua destilada al matraz de 500ml. y 200 ml. para el matraz de 250 ml.Homogenizar la mezcla.Tapar con algodón o papel blancoLlevar a autoclave para su proceso de esterilización.

b) Esterilización de materiales y medio de cultivo

La autoclave estará prendida previamente, introduce tu matraz en el interior de la autoclave. Junto con los materiales a usar (probeta, frascos para muestras, embudo de filtración) Ciérrala con cuidado.Una vez que empiece a salir vapor, coloca la válvula en la autoclave, para que la presión comience a subir. Tiene que llegar hasta 15 lb/in2. A partir de este momento, deberás tomar el tiempo de 20 minutos. Deberás tener cuidado de que la presión de la autoclave, nunca rebase los 20 lb/in2, ni está por debajo de los 15 lb/in2. Esto se puede controlar conectando y desconectando la autoclave, según se te indique.Transcurridos los 20 minutos, desconecta la autoclave. Comienza a abrir la válvula para liberar el vapor y que la presión comience a bajar. La autoclave puede abrirse únicamente cuando el manómetro marque cero. ¡Antes no ya que podría explotar!La autoclave se abre desde atrás, procurando que nadie quede de frente hacia donde se abre la tapa, ya que saldrá mucho vapor caliente que causa quemaduras. Una vez que se abrió con cuidado, con ayuda del trapo, sacar el matraz y los demás materiales.Dejar enfriar un poco para luego vertir en las placas

Vaciar el agua de la autoclave con cuidado de no quemarse.

c) Vertido del medio a placas petric

En la cabina microbiológica y con mechero encendido, realizar el vertido correspondiente, tratando de no llenar en exceso las placas petri.

d) Filtración de muestra y siembra de la membrana

- Colocar una membrana filtrante estéril, bajo condiciones asépticas, sobre el centro del portafitro, usando pinzas estériles, con la superficie cuadriculada hacia arriba.

- Ensamblar el equipo, colocando el dispositivo de filtración y asegurando con una pinza.

- Verter 100 mL de la muestra de agua, en el portafiltro y proceder a filtrar.

- Lavar el embudo con aproximadamente 100 ml. de agua peptonada al 0,1% o en caso no hubiera, limpiar con algodón y alcohol.

- Remover la parte superior del portafiltro, y con una pinza estéril transferir la membrana a la placa de Petri que contiene el medio de cultivo correspondiente al microorganismo que se va a identificar: Coliformes en agar endo, bacterias aerobias mesófilas en agar para recuento en placas, mohos y levaduras en agar Sabouraud y Pseudomonas aeruginosa en agar cetrimide.

- Al colocar la membrana, evitar la formación de burbujas entre ésta y el medio de cultivo.

- Esperar aproximadamente 20 minutos, para permitir la adhesión de la membrana al medio.

e) Incubación de placas

Incubar las placas en forma invertida, a las diferentes temperaturas y tiempos, de acuerdo al microorganismo investigado:

7.1.1.3. Recuento de UFC en placas

Contar las colonias en las membranas. Expresar los resultados como unidades formadoras de colonias (U.F.C.) por ml. o por 100 ml. de agua, considerando el volumen filtrado y el factor de dilución.

7.1.2. DETERMINACION DE COLIFORMES TOTALES

7.1.2.1. Equipos y materiales a usar7.1.2.2. Procedimiento

g) Preparación del medio de cultivoh) Esterilización de materiales y medio de cultivoi) Vertido del medio a placas petricj) Toma de muestras de agua en plantak) Filtración de muestra y siembra de la membrana l) Incubación de placas

7.1.2.3. Recuento de UFC en placas

7.1.3. DETERMINACION DE COLIFORMES FECALES7.1.3.1. Equipos y materiales a usar7.1.3.2. Procedimiento

g) Preparación del medio de cultivoh) Esterilización de materiales y medio de cultivoi) Vertido del medio a placas petricj) Toma de muestras de agua en plantak) Filtración de muestra y siembra de la membrana l) Incubación de placas

7.1.3.3. Recuento de UFC en placas

7.1.4. DETERMINACION DE STREPTOCOCOS7.1.4.1. Equipos y materiales a usar7.1.4.2. Procedimiento

g) Preparación del medio de cultivoh) Esterilización de materiales y medio de cultivoi) Vertido del medio a placas petricj) Toma de muestras de agua en plantak) Filtración de muestra y siembra de la membrana l) Incubación de placas

7.1.4.3. Recuento de UFC en placas

7.2. ANÁLISIS FÍSICOS

7.2.1. DETERMINACION DE SOLIDOS TOTALES7.2.1.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.2.1.2. Procedimiento

7.2.2. DETERMINACION DE DENSIDAD7.2.2.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.2.2.2. Procedimiento

7.2.3. DETERMINACION DE POTENCIAL DE IONES H+ (pH)7.2.3.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.2.3.2. Procedimiento

7.2.4. DETERMINACION DE CONDUCTIVDAD ELECTRICA 7.2.4.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.2.4.2. Procedimiento

7.3. ANALISIS QUIMICOS

7.3.1. DETERMINACION DE FOSFATOS

7.3.1.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.3.1.2. Procedimiento

7.3.2. DETERMINACION DE DUREZA7.3.2.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.3.2.2. Procedimiento

7.3.3. DETERMINACION DE SULFATOS7.3.3.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.3.3.2. Procedimiento

7.3.4. DETERMINACION DE ALCALINIDAD TOTAL7.3.4.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.3.4.2. Procedimiento

7.3.5. DETERMINACION DE ACIDEZ TOTAL7.3.5.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.3.5.2. Procedimiento

7.4. ANLISIS BACTERIOLOGICO POR METODO DE LA MEMBRANA FILTRANTE

7.4.1. DETERMINACION DE ORGANISMOS MESOFILICOS

7.4.1.1. Equipos y materiales a usar7.4.1.2. Procedimiento

f) Preparación del medio de cultivog) Esterilización de materiales y medio de cultivoh) Vertido del medio a placas petrici) Toma de muestras de agua en plantaj) Filtración de muestra y siembra de la membrana k) Incubación de placas

7.4.1.3. Recuento de UFC en placas

7.4.2. DETERMINACION DE COLIFORMES TOTALES

7.4.2.1. Equipos y materiales a usar7.4.2.2. Procedimiento

m) Preparación del medio de cultivon) Esterilización de materiales y medio de cultivoo) Vertido del medio a placas petricp) Toma de muestras de agua en plantaq) Filtración de muestra y siembra de la membrana r) Incubación de placas

7.4.2.3. Recuento de UFC en placas

7.4.3. DETERMINACION DE COLIFORMES FECALES7.4.3.1. Equipos y materiales a usar7.4.3.2. Procedimiento

m) Preparación del medio de cultivon) Esterilización de materiales y medio de cultivoo) Vertido del medio a placas petricp) Toma de muestras de agua en plantaq) Filtración de muestra y siembra de la membrana r) Incubación de placas

7.4.3.3. Recuento de UFC en placas

7.4.4. DETERMINACION DE STREPTOCOCOS7.4.4.1. Equipos y materiales a usar7.4.4.2. Procedimiento

m) Preparación del medio de cultivon) Esterilización de materiales y medio de cultivoo) Vertido del medio a placas petricp) Toma de muestras de agua en plantaq) Filtración de muestra y siembra de la membrana r) Incubación de placas

7.4.4.3. Recuento de UFC en placas

7.5. ANÁLISIS FÍSICOS

7.5.1. DETERMINACION DE SOLIDOS TOTALES7.5.1.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.5.1.2. Procedimiento

7.5.2. DETERMINACION DE DENSIDAD7.5.2.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.5.2.2. Procedimiento

7.5.3. DETERMINACION DE POTENCIAL DE IONES H+ (pH)7.5.3.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.5.3.2. Procedimiento

7.5.4. DETERMINACION DE CONDUCTIVDAD ELECTRICA 7.5.4.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.5.4.2. Procedimiento

7.6. ANALISIS QUIMICOS

7.6.1. DETERMINACION DE FOSFATOS

7.6.1.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.6.1.2. Procedimiento

7.6.2. DETERMINACION DE DUREZA7.6.2.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.6.2.2. Procedimiento

7.6.3. DETERMINACION DE SULFATOS7.6.3.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.6.3.2. Procedimiento

7.6.4. DETERMINACION DE ALCALINIDAD TOTAL7.6.4.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.6.4.2. Procedimiento

7.6.5. DETERMINACION DE ACIDEZ TOTAL7.6.5.1. Equipos, Materiales y Reactivos a usar 7.6.5.2. Procedimiento

CONTROL DE CALIDAD DE AGUA DE MESA.

PRUEBAS ORGANOLEPTICASASPECTO

OLO

COLOR

SABO

ANALISIS FISICOS AGUA DE MESA ANALISIS BACTERIOLOGICO

Organismos Mesofilicos

Coliformes Fosfatos

ANALISIS QUIMICOSólidos totales

Densidad

Potencial de Iones H+ (pH)

Fosforo Total

Cloruro Coliformes

StreptococoTemperatur

Conductividad Eléctrica

Nitrógeno Total

Grasas y

Dureza

Sulfato

Alcalinidad TotalAcidez

Oxigeno

CONTROL DE CALIDAD DE AGUA DE MESA

PRUEBAS ORGANOLEPTICAS

ASPECTO

OLOR

COLOR

SABOR

ANALISIS FISICOS

AGUA DE MESA

ANALISIS BACTERIOLOGICO

Organismos Mesofilicos

Coliformes Totales

Fosfatos

ANALISIS QUIMICO

Sólidos totales

Densidad

Potencial de Iones H+ (pH)

Fosforo Total

Cloruros

Coliformes Fecales

StreptococosTemperatura

Conductividad Eléctrica Nitrógeno Total

Grasas y Aceites

Dureza

Sulfatos Oxigeno Disuelto Acidez Alcalinidad

ANXOS

Características químicas:

pH (a excepción de las aguas carbonatadas): 6,0 - 9,0.

Substancias inorgánicas: Amoníaco (NH 4 + ) máx.: 0,20 mg/l; Aluminio residual (Al) máx.: 0,20 mg/l; Arsénico (As) máx.: 0,01 mg/l; Boro (B) máx.: 0,5 mg/l; Bromato máx.: 0,01 mg/l; Cadmio (Cd) máx. 0,01 mg/l; Cianuro (CN-) máx: 0,10 mg/l; Cinc (Zn) máx.: 5,00 mg/l; Cloro residual (Cl) máx. 0,5 mg/l; Cloruro (CI-) máx.: 350 mg/l; Cobre (Cu) máx.: 2,00 mg/l; Cromo (Cr) máx.: 0,05 mg/l; Fluoruro (F-), máx.: 2,0 mg/l; Hierro (Fe) máx.: 2,0 mg/l; Manganeso (Mn) máx.: 0,10 mg/l; Mercurio (Hg máx.: 0,001 mg/l; Niquel (Ni) máx.: 0,02 mg/l; Nitrato (NO 3 -) máx.: 45 mg/l; Nitrito (NO 2 -) máx.: 0,10 mg/l;

Plata (Ag) máx.: 0,05 mg/l; Plomo (Pb) máx.: 0,05 mg/l; Selenio (Se) máx.: 0,01 mg/l; Sólidos disueltos totales, máx. 1500 mg/l;

La autoridad sanitaria competente podrá admitir valores distintos si la composición normal del agua de la zona y la imposibilidad de aplicar tecnologías de corrección lo hicieran necesario.El agua envasada en esas condiciones deberá consignar en el rotulado la localidad de elaboración y no podrá expenderse fuera de ella.Para aquellas regiones del país con sueldos de alto contenido de arsénico, se establece un plazo de hasta 5 años para adecuarse al valor de 0,01 mg/l.La autoridad sanitaria competente deberá informar la nómina de los productos así autorizados a las restantes jurisdicciones y a la Autoridad Sanitaria Nacional.

Características Microbiológicas:

Bacterias coliformes: NMP a 37 °C - 48 hs (Caldo de Mc Conkey o Lauril sulfato), en 100 ml: igual o menor de 3. Escherichia coli: ausencia en 100 ml. Pseudomonas aeruginosa: ausencia en 100 ml. Bacterias mesófilas (APC - 37 °C 24 hs.) máx.: 500 UFC/ml. En el caso de que el recuento supere las 500 UFC/ml, y se

cumplan con el resto de los parámetros indicados, sólo se deberá exigir la higienización de la planta y realizar un nuevo recuento.